JPH05500205A - ヘミンの精製法、新規なヘミン誘導体及びその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ヘミンの精製法、新規なヘミン 誘導体及びその製造方法 本発明はヘミンの新規な精製法に関するものであり、また本精製法に用いること のできる新規なヘミン誘導体及びその製造方法に関するものである。

ヘミンは例えばＬ−アルギニンのような塩基性アミノ酸類との水可溶性錯化合物 の形で医薬組成物の製造用として特に種々の型の貧血症、特にポルフィリン症の 治療（フィンランド特許６８９７０）に利用可能な注射用組成物等の医薬品に用 いられる。

ヘミンは血液からヘモグロビンを種々の方法で分解することで製造される。従っ て出発物質として例えば全血又は赤血球濃縮物が用いられる。公開されているラ ッパら（Ｌａｂｂｅ　ｅｔａｌ）（Ｂｉ’ｏｅｈｅｍ、　Ｂｉｏｐｈｙｓ、　Ａ ｃｔａ　１９５７．２６，４３７）の方法の改良法に従い、ヘミンは人血（赤血 球濃縮物）からアセトンと酢酸との混合物を用いて分離される。この処理で、細 胞性物質や蛋白質類は固体物質として分離され、遠心により除去される。

遠心により得られる上清中にヘミンが含まれる。大部分の溶媒を蒸発させること で、ヘミンは室温にて結晶化する。

しかじヘミンの製造で問題となるのは医薬用途に使用するに充分な純度のものを 作る製造方法に関してである。文献（ハンスフイッシャーＦｉｓｃｈｅｒ、　Ｈ ａｎｓ：Ｏｒｇａｎｉｃ　５ｙｎｔｈｅｓｅｓ　Ｃ。

Ｉｌ、　Ｖｏｌ、３，４２２）によればヘミンはクロロホルム−ピリジン−氷酢 酸から結晶化させることができる。クロロホルム−ピリジン−氷酢酸からの結晶 化はヘミンを充分効果的には精製できない。西ドイツ特許公開３６０８０９１　 Ａｌにおいてヘミンの分離、精製を界面活性剤類（ｆｅｎｓ　１ｄｅｓ）の存在 下酸水溶液からのヘミンの結晶化により行う方法が開示されている。この精製法 の不充分なところは得られるヘミンの純度が約９８重量％と不充分な点である。

本発明により、ヘミンは医薬用途に充分な純度で製造されることが見いだされた 。従って本発明はヘミンを高収率でしかも典型的には９９から１００％の高純度 にて製造することが可能となるヘミンの新規な精製方法に関する。本発明はまた 本精製方法で形成される新規なヘミン誘導体及びその製造法にも関係する。

従って本発明の新規な方法によれば、上記のように製造された粗ヘミンを１．３ −ジメチル−２−イミダゾリジノン（ｌ、３−ｄ　ｉｍｅ＋ｂｙｌ−２−ｉｎ＋ １ｄａｘｏｌｉｄｉｎｏｎｅ；ＤＭＩ）中にて加熱しながら溶解させ、ついでこ の混合物を冷却し、ヘミンをヘミン対ＤＭＩＩ：３の付加物として結晶化させ、 その後得られた付加物を温水、低級アルコール又はその混合物中にて処理するこ とで解裂させるか、または真空中にて加熱することで解裂させ、それにより遊離 したヘミンを回収する。

本発明は次の式で示される新規な化合物としてのヘミンとＤＭＩとの付加物にも 関係する。

上式において、付加物が洗浄され、そして５０℃以下の温度にて真空中で乾燥さ れた場合ｎ＝３である。真空中にて、より高温で乾燥させるとＤＭＩは付加物か ら解裂により遊離され、従ってｎはＯから３の間で変化するようになる。付加物 の組成は高速液体クロマトグラフィーにて測定される。付加物は１０５℃にて完 全に解裂する結晶性物質である。

本発明に基づく方法はヘミンの重量に対してＤＭＩを約５から１０倍量、望まし くは約６から８倍量過剰に用いることにより効果的に実施される。ヘミンは加温 ＤＭＩに非常に良く溶解する。従ってヘミンの溶解は約６０から８０℃の温度で 行われるのが望ましい。加熱により溶解し生成した付加物は、溶液を室温以下た だし約８℃（ＤＭＩの融点は８℃）以上の温度、好ましくは約ｌＯ℃に冷却する と結晶として析出する。結晶化しないロス分は少なく、その析出したヘミン−Ｄ ＭＩ付加物の純度は非常に高い。付加物は後の使用のため回収し、貯蔵すること ができる。

ヘミンの製造について、付加物はその付加物を温水、低級アルコール、またはそ の混合物中に混合することで解裂される。低級アルコールとしては好ましくはＣ ｌ−Ｃ４のアルコールが使用される。防腐上の理由から７０％エタノール溶液が もっとも好ましい。アルコールはヘミンに対して過剰に使用され、好ましくは少 くとも重量でヘミンの４倍以上、更に好ましくは重量でヘミンの約６倍が使用さ れる。解裂中、混合物は好ましくは少くとも約５０℃に、たとえば６０℃〜７０ ℃に加熱される。

次の例により本発明を説明する。

実施例 上記のラッパら（Ｌａｂｂａ　ｅｔ　ｉｆ）の改良法に基づき、ヘミンは赤血球 濃縮物からアセトンと酢酸の混合物を用いて分離される。従って細胞性物質と蛋 白質類は沈殿化し、この混合物を遠心することで、ヘミンを含む上清を回収する 。アセトンと酢酸の大部分を蒸発により除去し、残渣を一晩室温にて冷却した。

ヘミンは結晶化し、その結晶ヘミンを濾過し、洗浄した。ヘミンは最終的に真空 中にて乾燥される。

このように得たヘミンを８倍量のＤＭＩに７０℃まで加熱しながら溶解させる。

混合物を熱時瀘別し、次いで１０℃まで冷却する。この温度で更に１時間撹拌す ると、ヘミンは溶液からＤＭＩとの純粋な付加物の形で析出する。この付加物を 濾別し、少量のエタノールで洗浄し、そして乾燥する。高速液体クロマトグラフ ィー分析によれば、この付加物の組成は、乾燥を約５０℃で行うと、ヘミン：Ｄ ＭＩの比は１：３である。より高温ではＤＭＩの割合は、ＤＭＩの遊離により小 さくなる。

黒色棒状の付加結晶から１０５℃にてＤＭＩは完全に解裂され、遊離される。

付加物をヘミンに対して重量で６倍量の７０％エタノール中に１時間、６０℃に て混合し付加物を解裂させる。混合後、産生物を濾別し少量の無水エタノールに て洗浄し、残存する少量の水を除去する。最後にヘミンを真空中にて乾燥すると 最終産物の純度はヘミンが９９〜１００％である。

国際調査報告 国際調査報告 ：ｍｍｅ′：、ｍ：＃’ａｌ’＋６ｎｌ＃ｌ；ｍｏ：：：ｅｍ、：、；；ｌ：： ：Ｑ：％：ｈＬ、：％；＋：、７：：＠ｎｈｅ＋ｍＩｎｍ５刀|゛−ｅ＠７３． ．；二１７°゛１°１ｍ＠＊ｎｈｒｅ＠ｍｌ。

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Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. １．粗ヘミンを加熱しながら１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノン（ＤＭＩ ）中に溶解し、得られる混合物を冷却してヘミンとＤＭＩとの１：３付加物の形 でヘミンを結晶化させ、その後、得られた付加物を温水、低級アルコール又はそ の混合物中にて処理するか或いは真空中にて加熱することによって解裂させ、そ して遊離したヘミンを回収することを特徴とするヘミンの精製方法。
2. ２．粗ヘミンを重量でヘミンの５から１０倍量のＤＭＩ、好ましくは６から８倍 量のＤＭＩに溶解させることを特徴とする請求項１に記載の方法。
3. ３．ヘミンとＤＭＩとの混合物をヘミン−ＤＭＩ付加物を結晶化させるために８ ℃から室温の間の温度に冷却することを特徴とする請求項１又は２に記載の方法 。
4. ４．ヘミンとＤＭＩとの付加物を約１０℃の温度で結晶化させることを特徴とす る請求項３に記載の方法。
5. ５．付加物の解裂のために、低級アルコール水溶液、特に約７０％のエタノール 水溶液を用いることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
6. ６．付加物を５０℃を超える温度、好ましくは６０〜７０℃の温度に加熱して解 製することを特徴とする請求項５に記載の方法。
7. ７．付加物を真空中にて１０５℃に加熱し解裂することを特徴とする請求項１〜 ４のいずれかに記載の方法。
8. ８．次式で表されることを特徴とするヘミンと１，３−ジメチル−２−イミダノ リジノンとの１：３付加物。 ▲数式、化学式、表等があります▼
9. ９．粗ヘミンを加熱しながらＤＭ１中に溶解し、その後得られる混合物を冷却し てヘミンとＤＭＩとの１：３付加物を結晶化させ、得られる付加物を回収し、次 いで５０℃以下の温度で乾燥させることを特徴とする請求項８に記載のヘミンと ＤＭＩとの１：３付加物の製造方法。