JPH05501865A

JPH05501865A - チオアシル化試薬および中間体，チオペプチド，およびこれらの調製および使用法

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Publication number: JPH05501865A
Application number: JP2510785A
Authority: JP
Inventors: ブリヨン，デニス; ソーブ，ジレ; ブーロ，ザカリー; ブロー，ベルナール
Original assignee: バイオケム　ファーマ　インコーポレイテッド
Priority date: 1989-08-04
Filing date: 1990-08-03
Publication date: 1993-04-08
Anticipated expiration: 2016-05-14
Also published as: US5138061A; OA09561A; EP0485458B1; AU651557B2; CA2059647A1; HUT63395A; DE69031623D1; DE69031623T2; HU220756B1; AU6064290A; DK0485458T3; HU9200338D0; ES2109236T3; ATE159521T1; WO1991001976A1; EP0485458A1; CA2059647C; JP3165698B2; US5371185A

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】チオアシル化試薬および中間体、チオペプチド、およびこれらの調製および使用法１１ユ１左圀■ 本発明は、チオア／ル化試薬として用いられる新規なα−アミノ酸誘導体、これらの誘導体の前駆体として調製される中間体、グローイングベブチドにチオアミド結合を導入するこれらのチオアシル化試薬を用いて調製される、生物学的および医学的に重要なチオペプチド、およびそれらの製造方法に関する。本明細書で開示されるチオペプチドは、生体反応修飾剤、神経作用剤、免疫調節剤などとしてインビボで優れた活性を提供すること、およびペプチド骨格へのチオアミド結合の導入による、酵素的分解に対する耐性の向上によって特徴づけられる。ここでチオペプチドとは、隣接するアミノ酸残基間に千オアミド結合を含むペプチドを表す。ペプチド構造の骨格の７ミド結合において、少なくとも一つのそのような、イオウ原子による酸素原子の置換が望ましい。以下の開示によって認められるように、チオア／ル化試薬は、ペプチドの光学純度を保持しつつ、比較的容易にかつ従来の方法で得られたよりもかなり高収率で、グローイングペプチドにチオアミド結合を導入するために用い得る。グローイングベブチドという言葉は、ペプチド配列に新たな残基を取り込むことによりペプチドの大きさを増すような、アミノ酸鎖の延長が起こりつつあることを意味する。

ｌ豆旦互呈生物活性ペプチドの数は、かなり多い。しかし、それらの反応修飾剤、神経作用剤または免疫調節剤としての潜在的な有用性は、インビボでの半減期が極めて短いこと、および経口では効果がないことから、著しく制限されている。後者の現象は主として、消化管に通常存在するペプチダーゼおよびプロテアーゼの存在下で、生物活性ポリペプチドが極めて分解されやすいことによる。

これらのペプチドの薬物動態特性を改善するためには、これらの生物活性ペプチドの骨格となるアミド結合を、そのようなタンパク分解酵素に対して安定化させることが望ましい。

酵素的分解に対する安定性の向上により、これらのペプチドはより有用な治療薬となるだろう。

ペプチド結合の化学的置換または修飾における最近の進歩は、そのような結合の安定化が可能であることを示している。

ペプチド骨格の、ペプチダーゼおよびプロテアーゼによって生体反応を制限する切断が起こる位置での、チオアミド結合によるペプチド結合の置換により、多くのチオペプチドアナログの酵素的分解に対する安定性が向上する。Ｒａ１ｄおよびｙｏｎ　ｄｅｒ　ＥＩｌｄｅｎ　［Ｗ、　Ｒｅ１ｄおよびＷ、　ｖａｎ　ｄｅｒ　Ｅｔｘｄｅｎ、　ｒアミノ酸チオンエステルおよびエンドチオペプチド、ＩＩＪ、ハ吐ム／ル化試薬によるラセミ体のチオアミドの調製を論じており、ここでチオンエステルのチオアシル化試薬は以下の通りであここで、ＲおよびＲ′　は低級アルキル基および了り−ル基から選択される。さらに、これらのアナログの多くで、薬理活性の向上が示されている。Ｌａｊｏｉｅら（Ｇ、　Ｌａｊｏｉｅ、　Ｆ、　Ｌｅｐｉｎｅ、　Ｓ、　ＬｅＭａｉｒｅ、　Ｆ、　Ｊｏｌｉｅｏｅｕｒ、　Ｃ，Ａｕｂｅ、　Ａ、　ＴｕｒｃｏｔｔｅおよびＢ、　Ｂｅ１ｌｅａｕ）　、　ｒロイノン−エンケファリンのモノチオン酸化アナログの合成および生物活性」、Ｉｎｔ、　Ｊ、　Ｐｅ　ｔ、　ＰｒｏｔｅｊｎＲｅｓ、、旦、　３１６　（１９８４）。チオペプチド誘導体は、生体反応修飾剤、神経作用剤、および免疫調節剤として、それらの酸素置換されたアナログに比べて、インビボでの活性が向上するごとが示されている。例えば、Ｃ１ａｕｓｅｎら［Ｋ、　Ｃ１ａｕｓｅｎ、　Ａ、　５ｐａｔｏｌａ、　Ｃ，Ｌｅｍｉｅｕｘ、　Ｐ、　５ｃｈｉｌｌｅｒ、およびＳ、　Ｌａｗｅｓｓｏｎ。

「ロインンエンケファリンチオアミドアナログにおける、選択的なレセプター認識に対するペプチド骨格の寄与の証拠」、Ｂｉｏｃｈｅｍ、ｌ■ｏ　ｈ　ｓ、Ｒｅｓ、Ｃｏｍｍｕ　、、１２０．　３０５　＜１９８４）］　Ｉｔ、そのようなチオペプチドアナログの一つで、対応する酸素置換体よりも薬理活性が向上することを示している。

カルボキン基のカルボニル酸素原子のイオウ原子による置換の方法は既知である。Ｃ１ａｕｓｅｎら［Ｋ、　Ｃ１ａｕｓｅｎ、　Ｍ、　Ｔｈｏｒｓｅｎ、およびＳ、Ｌａｗｅｓｓｏｎ、　ｒアミノ酸およびペプチドの研究。バート６゜ペプチド骨格へのチオアミド結合の導入法：ロイシンユンケファソンの４種のモノチオアナログの合成」、Ｊ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、　Ｐｅｒｋｉｎ　Ｔｒａｎｓ、　Ｉ、　７８５　（１９８４）］は、チオアシル化を述べており、用いたジチオエステルの式は：ここで、Ｚはカルボベンゾキシ基、モしてＲは水素、低級アルキル基、およびアリール基から選択される。しかし、ラセミ化に関する情報は何も示されていない。調製されたチオペプチドが、さらなるチオペプチド合成のために有用な試薬および中間体であることもまた、知られている。Ｐ、　Ｃａｍｐｂｅｌｌ。

およびＮ、　Ｗａｓｈｅｄ、　「カルボ牛ンベプチダーゼＡの触媒作用による、チオペプチドおよびチオンエステルアナログの特定の基質の加水分解。エステルを除くペプチド基質におけるＫｅａｔへの影響」、Ｊ、　Ａｍ、　Ｃｈｅｉ、　Ｓｏｃ、、　１０４．５２２１−２６　（１９８２）；Ｐ、　Ｂａｒｔｌｅｔｔ、　Ｋ、　５ｐｅｅｒ、およびＮ、　Ｊａｃｏｂｓｅｎ、　ｒカルボキシペプチダーゼＡのチオアミド基質」、Ｂ’ｏｃｈｅｍｉｓｔｒ　、　２１．１６０８− １１．　（１９８２）；　およびり、　Ｍａｚｉａｋ、Ｇ、　Ｌａｊｏｉｅ、およびＢ、　Ｂｅｌｌｅａｕ、　ｒアンジオテンンン変換酵素の基質であるチオペプチドアナログの、結合状態および加水分解の挙動における生成的構造（Ｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ　Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ）　Ｊ、Ｊ、　Ａｍ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ。

、１０８．１８２−８３　（１９８６）を参照のこと。このようなチオペプチド誘導体はまた、酵素的加水分解に対して耐性を示している。

例えば、Ｗ、Ｒｅ１ｄおよびＥ、Ｓｃｈｍｉｄｔ、　ｒＮ−アンル化α−アミノイミド酸エステル、イミノジペプチドおよびエンドジペプチド」、Ｌｉｅｂｉ　ｓ　Ａｎｎ、　Ｃｈｅｍ、、　６９５．２１７　（１９６６）は、チオペプチドの調製中間体としての、保護されたアミノ酸チオンエステルの、中程度の収率での合成を開示している。

ペプチド結合のカルボニル官能基での、ペプチドのイオウ化、または酸素原子のイオウ原子による置換は従来、反応位置特異性に欠けていた。副反応と、副反応により生成した副成物とが生成物の純度および反応の効率を損なうために、全収率が低下していた。さらに、最終生成物の光学純度は、従来用いられたチオアシル化試薬の反応機構のために、保持されないことが多い。これらのチオアシル化試薬の有効性の低さが、チオペプチドの治療薬としての可能性を著しく制限した。純粋で光学活性なチオペプチドの効率的な製造方法がないことが、そのような化合物の薬理活性、酵素およびｐＨによる分解、および毒性の評価を非常に困難にしていた。なぜなら、これらの物質が従来は十分な量で得られなかったからである。

ある化合物の光学純度は、それが光を旋回させる能力に関係する。この能力は、ゼロ点参照を利用する、旋光度針として知られる機器で測定される。化学的に純粋な物質が光をどの程度旋回させるかが、その相対的光学純度を示す。すなわち、ある物質は化学的に純粋でありながら、光学的に不活性またはラセミ体であり得る。ある物質で認められる活性の量は、その光学純度に依存することが多い。

二つの鏡像体は、同一の化学式を持ちながら、全く異なる生物活性を持ち得る。

医薬への適用において、ある化合物の一方の光学配置のものは活性および有用性を示すが、その光学異性体または相捕的な鏡像体は異なる活性を示すかまたは全く不活性であることは一般的である。従って、光学配置が重要である場合には、化学純度だけでなく光学純度も重要な関心事である。

チオペプチドは、薬理研究に適切であるためには、数種の基準を満たすことが望ましい。第一に、チオペプチドは酵素分解に対する耐性が向上していなければならない。第二に、チオペプチドは対応する酸素置換体よりも強い生体反応を誘導しなければならない。第三に、人体が摂取して安全でなければならない。第四に、チオペプチドは臨床研究を行うのに十分なほど多量に製造し得なければならない。

最初の三つに関しては、上述の特性はチオペプチドの固有の性質として備わり、隣接するアミノ酸残基の間にチオアミド結合を含まない他のペプチドよりもチオペプチドを優越させるはずである。最後の基準に関しては、多量の物質を製造し得ることは利点である。これを考慮する際は、数種の要因が重要である。チオペプチドの製造方法は、好ましくは単純で、効率的でかつ経済的なものである。すなわち、その方法の反応スキームは、わずかな工程しか含まず、全収率が高く、モして副成物の生成が最小であるべきである。さらに、そのスキームは、好ましくは安価な試薬および原料を利用するべきである。さらにまた、その方法は、化合物をラセミ化するような反応を避けることにより、ブローイングペプチドの光学純度を確保するべきである。これは、ラセミ体は所望の薬理反応をおそらく十分には示さないためである。

従来のチオアシル化法は、煩雑かつ複雑なことが欠点であった。さらに、従来の方法は、光学純度の高い生成物を与えることがなく、またチオペプチドの全収率も不十分であった。

従って、ブローイングペプチドの特定の残基の結合にチオアミド結合を選択的に導入し、同時に効率的な反応条件を利用することを可能とする、チオアシル化試薬が必要とされている。また、生成するペプチドの光学純度を保持し、そしてそのようなペプチドを高収率で生成するチオアシル化法も必要とされている。これに加えて、チオペプチドを生成するための、アミノ酸とペプチドとの単純かつ経済的な反応が可能な、チオアシル化試薬の調製法が必要とされている。さらにその他に、酸素置換されたアナログよりも、酵素に対する安定性が向上し、また生物活性が増強されたチオペプチド、およびその調製法が必要とされている。

及朋ヱ目１枚本発明の目的は、チオアシル化試薬を提供することである。

また本発明の目的は、チオアミド結合をブローイングペプチドに高収率で導入するチオアシル化試薬を提供することでもある。本発明のさらなる目的は、調製されるペプチドの光学純度を保持するチオアシル化試薬を提供することである。本発明の他の目的は、チオアシル化試薬を調製するための新規な中間体を提供することである。本発明のさらに他の目的は、酸素置換されたアナログに比べて、活性および分解に対する耐性の点でより高い薬理学的有効性を示すチオペプチドを提供することである。本発明のさらに他の目的は、これらのチオアシル化試薬、新規な中間体、およびチオペプチドの合成法を提供することである。

これらおよび他の目的は本明細書で、次式により表されるチオアシル化試薬によって達成される：ここでＲ１は水素、以下のものにより置換されるかまたは未置換である分枝または未分枝のＣ１からＣ４のアルキル基であり、ここで、Ａは一〇−または−ＮＨ−１Ｄはベンジル基またはキサンチル基、ｎは１または２；ここで、Ｅは−Ｈまたは−ＣＨ３、Ｇは−ＣＨ２−１−〇−または−８−１Ｊは−Ｓ−または−ＣＨ２−１Ｌは−ＣＨ３またはフェニル基；ここでＭおよびＴは同じでも違っていてもよく、そして水素、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素から選択され、またＱは水素、ヒドロキシ基、またはジクロロベンゾキシ基（２ＣＩＺ）；（ｄ）ここて■はカルボベンゾキン基またはトンル基；または、Ｒ２はｔ−ブトキン基、カルボベンゾキン基、クロロベンジルオキ７基、９−フルオレニルメチルオキ７カルボニル基、トンル基、トリチル基またはキサンテニル基からｉ［され：Ｒ３は水素、メチル基またはエチル基から選択され；またはＲ１とＲ３は、それらが結合する炭素原子と共に、３から５の炭素原子を含む飽和炭化水素環を形成し；Ｒ４は水素；またはＲ１とＲ４は、それらが結合する炭素および窒素原子と共に、２から６の環内炭素原子を含む飽和複素環（すなわち、アジリジン、アゼチジン、ビクリジン、またはピペリジン環）を形成し；そしてＲ５は水素、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、アミド基、アミ７基、カルボキシル基、カルボキシメチル基、シアン基、グアニド基、ヒドロキフル基、ヒドロキシメチル基、メルカプト基、またはニトロ基から選択される。

また本発明は、本発明のチオアシル化試薬の調製に極めて良く適合した、新規な中間体化合物を提供する。

加えて本発明は、対応する酸素含有化合物よりも、酵素分解に対する耐性か向上し、そしてインビ十での生物活性が高い、チオペプチドを提供する。

さらに本発明は、これらのチオアシル化試薬およびこれらの試薬の調製に有用な新規中間体の合成法、および本明細書で示されるチオペプチドの製造法を提供する。

本発明において、本発明者は、チオアミド結合をペプチドまたは池の適切な化合物に、単純で、効率的で、経済的な方法でかつ高収率で導入し得る、チオアンル化のための試薬類を提供する。これらの試薬を用いて行われたチオアンル化はさらに、新たに生成した化合物の光学純度を保持する。

やはり本発明において、本発明者は、これらの試薬の製造法を提供し、そしてこのチオアシル化試薬の調製に有用な新規中間体を提供する。

本発明の他の局面において、本発明者は、隣接残基間にアミド結合のみを含む対応するペプチドに比べて、酵素分解に対する耐性が向上し、モして薬理活性が高い、一連のチオペプチドを提供する。これらのチオペプチドは生体反応修飾剤、神経作用剤、免疫調節剤などとして有用である。

本発明のこの局面において、チオペプチドは：次式：により表されるチオペプチドおよびこれらの塩で、ここでＲ１は水素、以下のものにより置換されるかまたは未置換である分枝または末分枝のＣ１からＣ４のアルキル基であり、ここで、Ａは一〇−または−ＮＨ−１Ｄはベンジル基または牛サンテニル基、ｎは１または２；ここで、Ｅは−Ｈまたは−ＣＨ３、Ｇは−ＣＨ２−１−〇−または−３−１Ｊは−８−または−ＣＨ２−１Ｌは−ＣＨ３またはフェニル基；ここでＭおよびＴは同じでも違っていてもよく、そして水素、フ／素、塩素、臭素およびヨウ素から選択され、またＱは水素、ヒドロキシ基、または２ＣＩＺ；ここで■はカルボベンゾキシ基またはトシル基；または、Ｒ３は水素、メチル基またはエチル基から選択され；Ｒ１とＲ３は、それらが結合する炭素原子と共に、３から５の炭素原子を含む飽和炭化水素環を形成し；Ｒ４は水素、またはＲ１とＲ４は、それらが結合する炭素および窒素原子と共に、２から６の環内炭素原子を含む飽和複素環（すなわち、アジリジン、アゼチジン、ピロリジン、またはピペリジン環）を形成し；そしてｎは１から４である、チオペプチドである。

凡囚」」」［へ疲更二二二二土囮星ゑ本発明において、チオアシル化試薬は次式により表されるここでＲ１は、水素、分枝または末分枝のＣ＋からｃ４の、置換されるかまたは未置換であるアルキル基からなる群の一つにより表され、アルキル基の置換基は以下のものからなる群より選択されたーっである：ここで、Ａは一〇−または−Ｎ’Ｈ−１Ｄはベンジル基または牛サンテニル基、ｎは１または２；ここで、Ｅは−Ｈまたは−ＣＨ３、Ｇは−ＣＨ２−１−〇−または−８−１Ｊは−８−または−ＣＨ２−１Ｌは−ＣＨ３またはフェニル基；ここでＭおよびＴは同じでも週っていてもよく、そして水素、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素から選択され、またＱは水素、ヒドロキシ基、または２ＣＩＺ；ここで■はカルボベンゾキシ基またはトシル基；または、Ｒ２は、以下のものからなるクラス：ｔ−ブトキシ基、カルボベンゾキシ基、クロロベンジルオキシ基、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル基、トシル基、トリチル基または牛サンテニル基：から選択された一つにより表され；Ｒ３は水素、メチル基またはエチル基から選択され；またはＲ１とＲ３は、それらが結合する炭素原子と共に、３から５の炭素原子を含む飽和炭化水素環を形成し；Ｒ４は水素；またはＲ１とＲ４は、それらが結合する炭素および窒素原子と共に、２から６の環内炭素原子を含む飽和複素環（すなわち、アジリジン、アゼチジン、ピロリジン、またはピペリジン環）を形成し；そしてＲ５は水素、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、アミと基、アミ７基、カルボ牛シル基、カルボキシメチル基、シアン基、グアニド基、ヒドロキシル基、ヒドロキシメチル基、メルカプト基、またはニトロ基から選択される。

Ｒ１は典型的には、天然のα−アミノ酸に一般的に存在する置換基である。特に好ましい群は、分枝または未分枝のアルキル基を包含し、このアルキル基は、アミン基、カルボキシ基、グアニド基、ヒドロキシ基、ヒドロキシメチル基またはヒドロキシフェニル基によって置換されていても未置換でもよい。

チオアシル化試薬という用語は、ヒドロキシ基およびアミ７基と反応して、その核置換基にチオアシル（ｔｈｉｏａｃｙｃｌ）基を導入し、そしてそこに共冑結合する化合物、を包含することを意図する。ペプチドのアミド結合にチオカルボニル基を取り入れると、その結果、同じ一般構造だがそのアミド結合には従来どおりのカルボニル部分を有するペプチドと比べて、加水分解および酵素分解に対する耐性が向上する。

本発明のアミノ酸オルトアミノチオアニリドは、以下のように表される。

ここで化合物中のＲ１，Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、上記の定義の通りである。これらのチオアニリド中間体における、好ましいＲ１は、天然のα−アミノ酸に一般的に存在する置換基である。特に好ましい群は、分枝または未分枝のアルキルを包含し、このアルキル基は、アミン基、カルボキシ基、グアニド基、ヒドロキシ基、ヒドロキシメチル基またはヒドロキノフェニル基によって置換されていても未置換でもよ０。

アミノ−酸ーオルトーアミノーチオアニリドという用語（マ、オルト２置換アミノベンゼン構造と、該オルト２置換アミノベンゼン構造と結合したアミノ酸とを有する化合物、を包含することを意図する。その結合は、該アミノ酸とのチオアミド結合によるものであり、ここでアミノ酸は、上記のＲ２で定義した適切な保護基で、アミノ末端が適切ζこ保護されてＬ％る。

本発明のアミノ−酸ーオルトーアミノーアニリド（よ、以下のように表される：われる、オルト−フェニレンジアミンとアミノ酸との出発反応ここで化合物中のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、上記の定義の通りである。好ましいＲ１は、天然のα−アミノ酸に一般的に存在する置換基である。特に好ましい群は、分枝または未分枝のアルキル基を包含し、このアルキル基は、アミ７基、カルボキシ基、グアニド基、ヒドロキシ基、ヒドロキシメチル基またはヒドロキシフェニル基によって置換されていても未置換でもよい。

アミノ−酸ーオルトーアミノーアニリドという用語は、オルト２置換アミンベンゼン構造、および該オルト２置換アミノベンゼン構造のアミノ置換基の一つと結合したアミノ酸を有する化合物、を包含することを意図する。その結合は、該アミノ酸とのアミド結合によるものであり、ここでアミノ酸は、上記のＲ２で定義した適切な保護基で、アミノ末端が適切に保護されている。

本発明のチオアンル化試薬は、以下のスキームに従って行薬による、適切な不活性溶媒中での、攪拌またはかき混ぜを伴った、その後の処理は、一般式ＩＩ＋の所望の化合物を生じる。

このチオアフル化試薬を調製する反応スキームは、上に例示している。

ペプチド合成法は、特定の官能基が他の置換基と反応して望ましい様式にアミノ酸残基を結び付け、望ましくかつ既知である配列を有するペプチドを生成することを必要とする。

アミノ酸は少なくとも二つの反応性の置換基（５ｕｂｓｔｉｔｕｔｅｎｔＳ）、すなわちアミンおよびカルボン酸部分を有するので、反応が所望の位置でのみ起こることを保証するためには、これらの官能基の適切な保護またはブロッキングが必要である。

これらの保護基は、その部分に効果的に導入されるべきであり、同時にそれらの除去が分子の他の部分に影響しない条件下で行われるべきである。このようにして、保護された官能基が目的の反応を妨害しないことを保証し、アミノ酸、ペプチドまたは他の化合物に、特定の反応および修飾を行い得る。さらに、特定の反応条件には感受性で脱離しやすい保護基を選ぶことによって、この特性を有効に利用して、合成が完了した後に保護基を効果的に除去するように、反応スキームの概略を作成し得る。

ペプチド合成の分野で公知であり、そしてその分野で慣用的な略語として認められている、多様な保護基が、Ｔ、　Ｇｒｅｅｎｅ、有機合成における保護基、　Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ　（１９８１）の中に見いだし得る。Ｒ１の反応性の核置換基の適切な保護のために利用し得る好ましい保護基には、ベンジル基、カルボベンゾキン基または牛サンテニル基があり、モしてＲ２に関しては、【 −ブトキシ基またはカルボベンゾキシ基がある。

一般式１の化合物を生じる、上記のオルト−フェニレンジアミンとアミノ酸とのカップリングは、ペプチド化学の分野で確立された手法を用いて行い得る。広範囲の適切な反応が、Ｅ、　ＧｒｏｓｓおよびＪ、　Ｍｅｉｎｈｏｆｅｒ、　４　ペプチド類：分析、合成、生物学；ペプチドおよびアミノ酸分析の新手法、　Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ＆　５ｏｎｓ、（１９８１）およびＭ、　Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ、ペプチド合成の原理。

Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ　（１９８４）に記載されている。アミノおよびカルホン酸部分の縮合を補助するために用い得るペプチドカップリング剤は、Ｎ、Ｎ−ジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、Ｎ、Ｎ−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、クロロギ酸エチルなどを包含する。好ましい手法は、カップリング剤としてＤＣＣを用いる。ＤＣＣ法は、反応を促進しかつ目的の化合物のラセミ化を抑制するための、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、塩化銅（１りまたはＨＯＢｔのような触媒的添加剤を伴ってまたは伴わずに、用い得る。

ＤＣＣ反応は、室温で行われることが多いが、反応物質に対して不活性な種々の溶媒中で、約−７８°Ｃから穏やかな煮沸還ｆ７Ｅ温度までで行い得る。溶媒は通常、極性で非プロトン性の有機溶媒である。好ましい溶媒は、ジクロロメタン、クロロホルム、ジエチルエーテル、テトラヒドロホルム（ＴＨＦ）、Ｎ、Ｎ− ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などを包含する。

特に好ましい溶媒は、ジクロロメタンおよびＤＭＦである。

一般的には、カップリング反応は、常圧で、−７８℃から煮沸還流までの温度で、約１から４８時間にわたって行い得る。

好ましくは、その反応は、−１０℃から２５℃までで、攪拌、振盪またはかき混ぜを伴って、４から６時間にわたって行われる。

一般式１１の化合物は、典型的には無水条件で、一般式■の化合物を、三硫化リン（ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ　ｐｅｎｔａｓｕｌｆｉｄｅ）と無水炭酸ナトリウムとの混合物と、不活性溶媒中で反応させることにより調製される。反応温度は好ましくは約０℃だが、−７８°Ｃから穏やかな煮沸還流温度まで変化し得る。

溶媒は好ましくは無水ＴＨＦであり、そして他の適切な溶媒は、ジクロロメタン、ジエチルエーテル、ＤＭＦなどを包含する。

一般式ＩＩ＋の化合物は、一般式１１の化合物を、カルボニルジトリアゾールまたはホスゲンと、不活性溶媒中で、−７８℃から穏やかな煮沸還流までの温度、好ましくは室温で接触させることにより調製し得る。溶媒は、ジクロロメタン、ジエチルエーテル、ＤＭＦおよびＴＨＦから選び得るが、これらに限定はされない。

上記の合成法のいずれにおいても、所望の生成物は、反応混合物から結晶化によって単離し得る。あるいは、順相、逆相、イオン交換、アフィニティー、またはゲルパーミエイションを包含するがこれらに限定はされないクロマトグラフィー、および電気泳動または抽出または他の方法が用い得る。

チオペプチド本発明で考慮される新規な種類のチオペプチドは、以下の式で表され得る：ここでＸはＳまたは０であり、少なくとも一つのＸはＳであって、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４は上記に定義された通りであり、モしてｎは１から４である。好ましい種類のチオペプチドは、以下の配列を包含するペプチドによって表される：（ムス千傘色２ココでＸ、Ｒ’、Ｒ３、およびＲ４は上記に定義された通りである。

式■の化合物では、ペプチドは４個、３個、または２個のチオカルボニル部分を有し得るが、１個のチオカルボニルがあって、Ｘで表される残りのものが酸素であることが最も好ましい。安定性の向上および薬理活性の増強の点で特に好ましい式■のチオペプチドは、式Ｖｌｌによって表される：（■冒）同様に、式Ｖｌのテトラペプチドでは、特に好ましい実施態様では、１個のＸだけがイオウ原子を表し、そして残りの２個のＸがそれぞれ酸素原子を表す。酵素分解に対する耐性が向上しかつ生物活性が増強された、最も好ましい式Ｖｌのチオペプチドは、式Ｖｌｌ＋によって表される：ペプチド骨格の分解されやすい位置へのチオアミド結合の導入は、そのペプチドの酵素消化に対する耐性を向上させる目的で行い得る。この安定性の向上は、存在時間が延長されたペプチドに、より高い生物活性を付与し得る。例えば、ポリペプチドであるサイモポイエチンの生物活性な断片にすぎないサイモペンチンを、この反応を誘起するために修飾し得る。そのようなサイモペンチ／誘導体の一つであり、式Ｖｌｌによって表される４−チオサイモベンチンは、約３倍の生物活性の増強を示した。無胸腺のヌードマウスの対照群に、検体当り２０マイクログラムのサイモベンチンを、公知のアッセイ法に従って投与した。例えば、Ｏ，Ａｒｃｈｅｒ、　Ｔ、　Ｐｉｅｒｃｅ、　Ｂ、　Ｐａｐｅｒｍａｎｔｅｒ、およびＲ，Ｇｏｏｄ、　ｒ胸腺切除ウサギにおける抗体反応の低下」、Ｎａｔｕｒｅ、　１９５．１９１　（１９６２）；　Ｄ’、　０ｓｏｂａおよびＪ、　Ｍｉｌｌｅｒ、　ｒ上腕骨胸腺因子が免疫能の成熟に関与することの証拠」、Ｎａｔｕｒｅ、　１９９．６５３　（１９６３）；　Ｇ、　Ｅ、　Ｒａｎｇｅｓら、「通常のヌードマウスおよびサイモベンチン処理したヌードマウスにおけるＴ−細胞の分化」、Ｊ、　Ｅｘ　、　Ｍｅｄ、、　１５６．１０５７　（１９８２〉を参照のこと。このアッセイの結果は、Ｔ細胞の成熟および関連する免疫反応に関して、平均４３％の増加を示した。

しかし、試験群のマウスに同一のアッセイ条件で同量を投与したときには、Ｔ細胞の成熟に関して平均１２８％の増加が観察された。従って、アミド結合のカルボニル酸素原子を置換したイオウ原子の導入が、酵素分解の速度を減少するか、関連するレセプターへの親和性を高めるか、または両方の現象を補助するように作用し得ることが、薬効の増強により確認された。

本発明のチオアシル化法に従って、ペプチド骨格にチオアミド結合を導入すべく、修飾され得る他のペプチドは、）＜ソブレンン（アミノ酸残基９個）、ソマトスタチン（アミノ酸残１１４個）、α−メラノトロピン（アミノ酸残基１３個）、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ，アミノ酸残基１０個）、アドレノコルチコトロピン（ＡＣＴＨ，アミノ酸残基３９個）、β−二ノドルフィン（アミノ酸残基３１個）、および心房ナトリウム排泄増加因子（ＡＮＦ、アミノ酸残基３３個）を包含するか、これらに限定はされない。

グローイングペプチド鎖の骨格へのチオアミド結合の効率的な導入を補助する、位置特異的かつ穏やかな条件が、本発明に従ってチオアシル化試薬としてトチオフシル−２−ベンズイミダシロンを用いることによって、高収率で実現し得る。

結果として得られるチオペプチドは、安定性の向上および薬効の増強を示す一方、その構成アミノ酸残基の光学純度を保持している。

本発明のチオアシル化試薬は、従来報告されているチオアミド導入法に比べてかなり高収率で、グローイングベブチド中にチオアミド結合を形成させ得る。本発明の方法は、酵素分解に対する耐性に関して、従来は知られていなかった安定性を示すチオペプチドを生じる。さらに、本発明のチオペプチドは、残基間をアミド結合で連結されたペプチドアナログに比べて、薬理活性がかなり増強される。

本発明に従えば、本発明によるチオアシル化試薬をアミノ酸またはペプチドと反応させることによって、グローイングペプチド中のその配列の特定の位置に、チオアミド部分を導入し得る。ペプチドのアミ／末端は、末端のアミノ官能基が保護されていなければならない。その反応は、適切なペプチドカップリング剤の存在下で、反応物質に不活性である適切な溶媒中で行うのが好都合である。好ましい溶媒は、ジクロロメタン、クロロホルム、ジエチルエーテル、ＴＨＦ、ＤＭＦなどを包含する。特に好ましい溶媒は、ジクロロメタンおよびＤＭＦである。好ましい反応条件は、−７８℃から穏やかな煮沸還流温度までで、約１から４８時間である。特に好ましい条件は、−１０℃から２５℃で、４から６時間の攪拌である。

チオアミド結合の導入が必要になるまでは、ペプチドはいかなるペプチドカップソング条件でも合成し得る。あるいは、チオアミド結合の導入は最初に行い得る。そして、調製されたチオジペプチドは次に、一般的に知られているペプチド力チオアミド結合の導入が完了し、そしてチオペプチドが調製された後は、調製された化合物は、液体フッ化水素（ＨＦ）処理のような公知のプロトフールに従って、保護基を完全に除去し得る。しかし、調製されたペプチドまたはチオペプチドが保護基の、通常はアミノ末端からの、選択的な除去を必要とする場合は、適切な反応条件を用いねばならない。

ｔ−ブトキン（Ｂｏａ）で保護された、アミノ酸誘導体およびペプチドの末端アミンのアミノ基は、例えばｐＨを約８から９に調節して、適切な雰囲気下でＯ″ Ｃで、例えば冷トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）で処理することにより、除去し得る。アミノ酸誘導体または保護ペプチドのＴＦＡ塩は、適切な有機溶媒中に混合され得、そして穏やかな塩基注水溶液の条件におかれ得る。遊離のアミノ基を有する該アミノ酸誘導体または該保護ペプチドを含む有機溶液は、次に乾燥されそして濃縮されて、遊離のアミノ誘導体を与え得る。

９−フルオレニルメチルオキ７カルボニル（Ｆｍｏｃ）で保護されたアミノ酸、チオペプチドまたはメリフィールド（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ）樹脂誘導体が提示される場合には、対応する遊離のアミ７基は、適切な雰囲気および温度条件のもとで、ＤＭＦ中でピペリジンで処理することによって、選択的に生成させ得る。

チオアミド結合を導入するための代わりの方法は、メリフィールド固相法および既知のその変法によって行い得る。例えば、公知の固相ペプチド合成法によってメリフィールド樹脂が調製される。カルボキシル基で共有結合したα−アミノ酸残基、または、同様な、遊離の末端アミ７基を有するペプチドが、該樹脂によって担持される。標準的な固相ペプチド合成条件での、該樹脂の該チオアンル化試薬での処理が、目的の生成物を与える。

この方法がチオアミド結合を、チオペプチド調製の最終工程として導入する場合は、チオペプチドは該樹脂から、十分に確立された方法を用いて遊離され得る。

−７８℃から０℃の温度で、適切な条件下で、アニソールおよびチオアニソールと共にシアルキルスルフィドを含む液体ＨＦを用いることによって、構成アミノ酸残基の個々の保護基がすべて除去されたチオペプチドが入手し得る。

上記の反応で利用される反応物質の量は、広範囲に変化し得る。そして、反応を促進しかつ効率的に完了させるために必要な条件もまた、広範囲に変化し得る。

しかし一般的には、上記の方法において反応を誘起するために用いられる物實の量は、他に特定されない限り、実質的に化学量論的な量である。以下の実施例では、反応濃度は、特定の反応の進向に影響を与えるために濃縮あるいは希釈が特に有効でない限り、反応物質に関して全般的に０．１Ｍに保たれた。実際には、反応条件の変化および反応物質の性質に応じて、量は変化する。

以下の実施例は、本発明の種々の局面をさらに例示するために述べられるが、本発明の範囲をどのように限定することも意図はしない。

（以下余白）大ｉｆ町Ｌ１−α−Ｎ−Ｂｏａ−Ｌ−セリルー０−ベンジル−チオアンルー２−ベンズイミダシロンのＡａ）α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−セソルー０−ペンジルーオルトーアミノーアニリ上玉］１翌Ｎ−ＢｏＣ−Ｌ−セリン−０−ベンジルエーテル（８，０２ｍｍｏｌ）とオルトーフェニレンノアミン（１１，６ｍｍｏｌ）とを０℃でジクロロメタンによく溶解し、そしてＮ、　Ｎｏ−ジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）　（８，２７ｍｍｏｌ）を加えた。その混合物を、一定水冷温度で１時間攪拌し、次に濾過した。その濾過物を分液ロートに移して、飽和ブライン１５％クエン酸水溶液および飽和ブライン１５％炭酸水素ナトリウム水溶液で連続的に洗浄し、その後飽和ブラインのみで洗浄した。次に、有機層を乾燥し、濃縮し、そして、残渣を、へ牛サンー酢酸エチル３：１の溶媒を溶出液として用いて、シリカゲルのフラッシニクロマトグラフィーによって精製し、α−Ｎ−Ｂｏａ−Ｌ−セリルー０− ベンジル−オルト−アミノ−アニリドを固体として高収率（９７％）で得、次にジクロロメタン−ペンタン混合液で再結晶して分析純度にした。

この化合物は、下記の物理的性質を有していた：融点６（１−６３℃；　〔α］　ｏ　（ＣＨＣ１３）　−０，９；　ＵＶ　（ＣＨ３ＣＮ）λ５ａｘ２９３；元素組成（Ｃ２ｔＨ２７ＮｓＯａ）　：理論値：　Ｃ，６５，４３，１１，７，０６，Ｎ、　１０．８９゜測定値：　Ｃ，６５，８２：　［１，７，４２：　Ｎ、　１０．６０゜前述の調製方法および適切な出発物質を用いて、他のオルト−アミノアニリドを合成した：ａｌ、　ａ−Ｎ−Ｂｏａ−Ｌ−７ブニル−オＩＬ）−−アＥ／７二ＩＨ”ａ２．　ｃ−Ｎ−Ｂｏａ−Ｌ−アルギニｌ−−＝；”−Ｎ−Ｃｂｚ−オル）−−７９／アニリドａｌ　α−Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−７１Ｌ’ｌ”二ＩＬ−Ｎ−１−シＩＬ−オルトーア＝ノアニリドａ４．　α−Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−７２ハ”５ｑ”＝ｌｌ−−ト％ｑンｉ＝ｌレーオ／Ｌｌ−−７ミｌ　アニソどａ５．　（！−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−７スハーラテルーβ−へ’　：／委し　エステ／Ｌ−す１しμｍ　７三）　アニリドａ６．　α−Ｎ−’Ｆｍ０Ｃ−Ｌ−７２１．ａラデＩＬ、−β−ｔ−ブｆＩＬ− １ステ１１．．−才ル１−−７三ノ　アニソＦ。

ａ７．　α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−シ又チイニル　−Ｓ−べ°ンジＪＬ＋　ニスｈレーｔｔ＋Ｊ−７ミノ　アニソＫａ８．　Ｑ−Ｎ−Ｂｏａ−Ｌ−ゲルクミｌレー「ベシ；ＩＬ　エスデｌレーオｌしトーアミノ　アユυＦａ９．　α−トＢロｃ−Ｌ−Ｑうａミロし　−Ｎ−キサンテエレーナルＦ−アミノ　アユ１ノド゛ひ又丁未ｆ：ｊうａｇｏ、ａ−Ｎ−Ｂｏｃ−り−９＞ｕｙ−才Ｉし←−７ミノ　７ニリＦａ１１．ａ−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−ヒスナ”；’Ｊシレー−””／Ｅ；’７１／−オＪＬｈ− アミ／アニリｇａｌ２．α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−ヒ又テジフレーＮ−μシル−ｔノしトーアミノ７二Ｉノにａｌ３．α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−インロイシル−丁ＩＬ）−−アミノ　アユリド。

ａｌ４．（！−Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−０イシル−オ＋Ｌｌ−−７Ｅ／　アニソＨ゛ａ１５．ａ−Ｎ−Ｂｏｃ−ｅ−Ｎ−２ＣＩＺ−Ｌ−リシレーオｔＬｋ−アＥ／アユリトパａｌ６．ａ−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−ノテ才二ｌし　−オｔシｌ−−７ミ／　７ニリｐ ’ａ１．７．　ａ　−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−７ｚ＝ｌＬアラ＝ルーｔｔＬ）−−アミノアユ１ノにａｌＢ、ａ−Ｎ−ＢｏＣ−Ｌ−ブｂす／Ｌ−才／Ｌｌ−−アミノ　アニリドａ１９．　ａ−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−スしオニ−７Ｌ、　−０−Ｋ　＞　；−１し’ｆ− デ１１．−才ルドーアミノ　７ニリドａ２０．　α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−μリアドフィｌレーオルトーアミノ　アユリドａ２１．ａ−Ｎ−Ｂｏａ−Ｌ−テロｖ二ＩＬ／　−０−２、６−；°りｏ　ｏ　Ｋ　：／　Ｅ／’　ｌＬｙエーテルーオｌレトーアミノ　ア＝９）′ａ２２．ａ −Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−バリ１し一才／Ｌｌ−−アＥ／　７＝Ｉノド“′これらの化合物の物理的性質は表Ａに記載している。

ｂ）α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−セリルー０−ペンジルーオルトーアミノーチオアニ新たに蒸留したテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）　（６７ｍｌ）に、三硫化リン（６，２６ｍｍｏｌ）および無水炭酸ナトリウム（６，２６ｍｍｏｌ）を加えた。その混合物を２０℃で０．３時間攪拌した。次に、混合物をＯ′Ｃまで冷却し、その後（ステップａの）　Ｎ−Ｂｏａ−Ｌ−セリル−０−ベンジル−オルト−アミノ−アニリド（０，７１ｍｌｍｏｌ）を加えた。０℃で５−６時間放置後、１０％リン酸ナトリウム水溶液（三ナトリウム塩；　２２　ｍｌ）を徐々に加え、その後酢酸エチル（２０ｍｌ）およびヘキサン（１０ｍｌ）を加えた。有機層を分離し、ブラインで洗浄し、乾燥し、そして濃縮して油状とし、ヘキサン−酢酸エチル−塩化メチレン６：１：２の混合溶媒を溶出液として用いた、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーでＮ−Ｂｏａ−Ｌ−セリル−Ｏ−ベンジル−オルト−アミノチオアニリドを精製し、中程度の収量の結晶固体（５０％）として得た。この化合物は、下記の性質を有していた：融点４０−４３°Ｃ；　［α］Ｄ（ＣＨＣ１３）　−２６，５；　Ｕｖ（ＣＨ３ＣＮ）λａａｘ２７１；元素組成（Ｃ２１Ｈ２７Ｎ３０３Ｓ）　：理論値：　Ｃ，６２，８２，１１，６，８０；　Ｎ、　１０．４８；　Ｓ、　７．９８゜測定値：　Ｃ，６３，０６，１１，７，０６，Ｎ、　１０．４２．　Ｓ、　８．２３゜前記の調製方法および適当な出発物質を用いて、以下の他のオルトアミノチオアニリドを合成した：（以下余白）ｂＬ　α−Ｎ−Ｂｏａ−Ｌ−アラニル−オルμｍ７ミノ　チオ−ｂ２．　（！− Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−アＩＬキ゛二Ｉレージ゛−Ｎ−ＣｂＺ−ｉ／ＬＩ、−−アミノ　−ｂｌＯ，ａ−Ｎ−Ｂｏａ−ゲリＥ−ルｉ＋ＬＩ−−ア＝ノーテオアユＩ）μ ゛−（双手小帥ジｂ１２．ａ−Ｎ−Ｂｏａ−Ｌ−ヒ２チＥ；’／１ｚ−Ｎ−１−；＋ｂ−ｔルｌ− −ア三ノーアノ−アニリド、（！−Ｎ−ＢＯＣ−（−Ｎ−２ＣＩＺ−Ｌ−リ−／−ルーオフ１＝）− ７２／これらの化合物の物理的性質を表Ｂに示す。

ｅ）１−　α−Ｎ−Ｂｏａ−Ｌ−セリルー０−ベンジル−チオアシル−２−ペンズイミダザロン　ｂｅｎｚｆｍｉｄａｚａｌｏｎｅの４α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−セリル−０−ベンジル−オルト−アミノ−チオアニリド（ステップｂの）　（３，１１ｍｍｏｌ）およびカルボニルジトリアゾール（４，３６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ　（４５ｍｌ）に溶解し、そして２５℃で６．５時間攪拌した後、溶媒を減圧下に除去した。残った残渣をジクロロメタン（２ｍｌ）に溶解し、そしてフラッシュクロマトグラフィーで精製した。生成物をヘキサン−酢酸エチル４：１で溶出し、純粋な１−（Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−セリル−０−ベンジル−２−チオアシル）− ２〜ベンズイミダシロンを高収率（９１％）で得た。この化合物をプロトンＮＭＲで特徴づけ、さらに下記の物理的性質を有していた：融点１１９−１２２℃；［αコｏ　（ＣＨＣＩａ）　−２５，５；　ＵＶ　（Ｃ１１３ＣＮ）λ１．ｘ２６５；元素組成（Ｃ２２［＋２ｓｌＪ３０４Ｓ）　：理論値：　Ｃ，６１゜１１１：　ａ、　５．９０．　Ｎ、　９．１１２．　Ｓ、　？、５０゜測定値：　Ｃ，６２，００；　［１，６゜Ｏｆ：　Ｎ、　１０．１８．　Ｓ、　７．３０゜前記の調製方法および適当な出発物質を用いて、下記の１−（α−アミノ酸チオアシル）−２−ベンズイミダシロン誘導体を合成した：（以下余白）ｅｌ、　１−（α−ＢロＣ″″Ｌ−アラニｌレーチオ７シＩし）−２−ペン１′ イミグソあンｃ２．　１−（ａ−ＢｏＣ−Ｌ−アルＴ＝ルージーＮ−ＣｂＺ−テｆ７−／ｌし）−２−ベンズ゛イミダン゛ｂンＣコ、１−（ａ−Ｂｏｃ−Ｌ−アルｆ＝ルーＮ−）−シｔｖ−チオ７＞ＩＬ）− ２−ペンス゛Ｉミク゛ン゛ｂンＣ４，ｌ−（α−Ｂｏｃ−Ｌ−７７ハ＠う宇’＝ｊレ−Ｎ−’ｒ”ｆンテニｌレ −チオアシル）−２−べ°ンスｌミ４゛ンｂンｃ５．　１−（ａ−Ｂｏａ−Ｌ− アスハ０ラデルーβ−Ｋ＞；’ＪＬ−Ｚ２７／Ｌ、−チオアシル）−２−ベン又゛イミダン゛Ｃンｃ６．　ｌ−（ａ−Ｆｍｏｅ−Ｌ−７２７１−ラブル−β−ｔ −ブチル　１２デル−７ｔ７ジｌし）−２−ベシスーイミダンらンｃ７．　ニー（ａ−Ｂｏｃ−Ｌ−システに）レー５−べ°ンジンム　ｌ−フルーｙｔ？；ル） −２−ベン又゛イミク゛ンちンｃ８．　１−（ａ−ＢｏＣ−Ｌ−グしクミル１− ペンｙ／ｌ、ｒ２３７Ｌ−ｆｔ７；ｔし）−２−ペン７１ミψン゛ｂンｃ９．　１−（α−Ｂロｃ−Ｌ−グ預９ミニｊレーＮ−キフンテ＝Ｉレーａｌｌ　１−（ａ−ＢｏＣ−Ｌ−ヒスチジ′ルートへ＞；ＩＬ−−チオ７；ｒし）−２−べ゛ン又７ミｑ”ンｂン（ｙ又丁廓１０ｃｌ：１．　１−（ｃｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−イ’／　ｏ　Ａ　’／　１１／−チオ７ −／Ｉし）−２−Ｃ１５，１−（ｅ−Ｂｏｃ−Ｌ−リシル−１−Ｎ−Ｃｂｚ−チオアシル）−２−べ°ン又゛Ｉミク゛シｂンＣ１６，１−（ａ−Ｂｏｃ−Ｌ−メチオニＩレーチオ７Ｂ／Ｌ−）−２−べ°ンス゛Ｉミク゛ゾロンＣ１７，ニー（α−Ｂｏｃ−Ｌ−フェユ、レアラユル　−チオ７シｌし）−２− Ｃ１９，１−（ａ−Ｂｏｃ−Ｌ−２Ｌオニｌレ−ｏ−ペン”、−ルＺ−９ル−チすア″／＋Ｌ−）−２−ベンズｌミｆンｂンｃ２０．　ニー（ａ−Ｂｏｃ−Ｌ− μり７ｔＲｔ、−すｔ７；ｔし）−２−べ“ンス゛゛イミダンらンＣ２１，１−（ａ−ＢｏＣ−Ｌ−チロシニＩＬ、　−０−２，６−、；りＣ７（７、−これらの化合物の性質を表Ｃに示した。

大１玄４−チオチモペンチンのムａ）吹ｊ８１玄１〉α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−バリル−し一チロンルー０−ベンジルーベンジルエステル−チオアミドの−１ α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−チロシルー〇−ベンジルエーテル−ベンジルエステルを、０℃にて０５時間、窒素雰囲気下でトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）で処理した。ＴＦＡを減圧下で除去し、Ｌ−チロシル−〇−ベンジルーエーテルーベンジルエステルＴＦＡ塩を得た。このアミノ酸誘導体をジクロロメタンに混合し、５％炭酸ナトリウム水溶液で処理した。有機層を分離し、乾燥し、そして濃縮して遊離のアミノ酸誘導体を定量的収率で得た。

Ｌ−チロシル−０−２，６−ジクロロベンジルエーテルベンジルエステル（２ｍｍｏｌ）を無水Ｎ、　Ｎ゛−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）　（。

０．５　ｍｌ）に、窒素雰囲気下で０℃にて溶解し、そしてｌ−（α−Ｎ−Ｂｏａ−バ１ノルーチオア／ル）−２−ベンズイミダシロン（２，２ｍｍｏｌ）（実施例１からの）の一部を、０°Ｃで攪拌しながら０．３時間かけて加えた。その混合物を、０℃で２時間攪拌し続け、そして１５−１７時間２５°Ｃに温めた。

次に、反応物を濾過し、減圧下に濃縮して、残渣を酢酸エチル（１５ｍｌ）に溶解し、そしてその溶液を５％炭酸水素ナトリウム水溶液、水、５％クエン酸水溶液、および水で連続して洗浄した。次に、有機層を乾燥し、次いでエバボレー／：Ｉンし、残渣を精製のためにフラッシュ力ラムにかけた。保護ジチオペプチドを酢酸二チル−へ牛サン３．２の混合溶媒で溶出し、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−バリル−し一チロシルー０−ベンジルチオアミドを良好な収率（８０％）で得た。この化合物は下記の物理的性質を有していた：融点５６−５８℃；　ＩＲ（ＣＨＣＬ３）　２９７２、１７３５．１５００　ｃｍ−’；　ＵＶ　（ＣＨＣＬ３）λ 、、、２７２゜１１）α−Ｎ−Ｂｏａ−Ｌ−アスパルチル−−ベンジルエステル −Ｌ〜バリル−Ｌ−チロ／ルー〇−ベンジルエーテルーベンジルエステル−３− チオアミドの−１ α〜Ｎ−Ｂｏａ−Ｌ−バリルーし一チロンルー０−ベンジルチオアミド（（１）からの化合物）を、窒素雰囲気下、ｏ′ｃで０．５時間ＴＦＡ処理し、減圧下に濃縮してＬ−バリル−Ｌ−チロシル−〇−ベンジルチオアミドＴＦＡ塩を生成した。この化合物をジクロロメタンに混合し、５％炭酸水素す）　ＩＪウム水溶液で処理した。有機層を分離し、乾燥し、そして濃縮し、定量的収率で遊離のアミ／誘導体を得た。

Ｌ−バリル−Ｌ−チロシル−０−ベンジル−チオアミド（２ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ　（０，５０１１）に、Ｎ２下でＯ″Ｃにて溶解し、そして攪拌しながらα −Ｎ−Ｂｇｃ−Ｌ−アスパルチル−β−ベンジルエステル（２ｍｍｏｌ　）をその溶液に加えた。ＨＯＢｔ　（２ｍｌａｏｌ）およびＤＣＣ（２ａｍｏｌ）を０ ℃で徐々に加え、−夜攪拌し続けた。その混合物を８倍容量の酢酸エチルで希釈し、生成されたＮ、Ｎ’−ジシクロへキシルウレアを濾過して溶液から除いた。

濾過物を分液ロートに移し、そして５％炭酸水素ナトリウム水溶液、５％クエン酸水溶液、および飽和ブラインで連続的に洗浄した。有機層を集めてＭｇ５Ｏａで乾燥し、濾過し、そして減圧下に濃縮した。残渣を／リカゲルのフラノ／ユクロマトグラフィーによって、ヘキサン−酢酸エチル１１の混合溶媒を溶出液として用いて精製シ、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ〜アスパルチル−β−ベンジルエステル− Ｌ−バリル−Ｌ−＋　ｏ　／ルー０−ベンジルエーテルーベンジルエステル−３ −チオアミドを好収率（７４％）で得た。化合物は下記の物理的性質を有していた：融点１１２−１１４°ＣおよびＵＶ　（Ｃ）ｌ’ｃＩ３）λｔａｘ　２７１゜１ｉｊ）α−Ｎ−Ｂｏｃ−ｅ−１７−２ＣＩＺ−Ｌ−リシル−Ｌ−アスパルチル−−ベンジルエステル−Ｌ−バリル−Ｌ−チロシル−〇−ベンジルエーテルーベンジルエステル−Ｌ−３−チオアミドの−１α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−アスパルチル−β−ベンジルエステル−し−バリル〜Ｌ−チロシルー○−ベンジルエーテル −ベンジルエステル−２−チオアミド（（ｉｉ）からの化合物）を、ＴＦＡで処理して、（１１）のＢｏｃ基ヲ除キ、Ｌ−アスパルチル−β−ベンジルエステル −Ｌ−バリル−Ｌ−チロシル−〇−ベンジルエーテルーベンジルエステル−２− チオアミドを定量的収率で得た。

Ｌ−アスパルチル−β−ベンジルエステル−Ｌ−バリル−Ｌ−チロシル−〇−ベンジルエーテルーベンジルエステル−３−チオアミドを、Ｎ２下でＯ′Ｃで、乾燥ＤＭＦ　（０，５ｍｌ）に溶解し、ａ　−Ｎ−Ｂｏｃ−ｅ　−２Ｃ１ｚ−Ｌ− リシン（２ｍｍｏｌ）を、攪拌しながらその溶液に加えた。

１ＱＢｔ　（２ｒ＋１ｏｌ）およびＤＣＣ（２ｍ＋５ｏｌ）をＯ”Ｃにて徐々に加えて、−夜攪拌し続けた。その混合物を８倍容量の酢酸エチルで希釈し、生成されたＮ、Ｎ−ジシクロへキシルウレアを濾過して溶液から除いた。濾過物を分液ロートに移し、５％炭酸水素ナトリウム水溶液、５％クエン酸水溶液および飽和ブラインで連続的に洗浄した。有機層を集めて、Ｍｇ５ｏ４で乾燥し、濾過して、減圧下に濃縮した。残渣をンリカゲルのフラッシュクロマドグラフイーによって、へ牛サンー酢酸エチルＩ：ｌの混合溶媒を溶出液として用いて精製し、ご −Ｎ−３ｏｃ−ε−Ｎ−２ＣＩＺ−Ｌ−リシル−Ｌ−アスパルチル−β−ベンジルエステル−Ｌ−バリル−Ｌ−チロシル−〇−ベンジルエーテルーベンジルエステル−３−チオアミドラ好収率（７３％）で得た。化合物は下記の物理的性質を有していた：融点７１−７３°ＣおよびＵＶ　（ＣＨＣＬ３）λｍａｘ２７２゜ｉｖ）　ａ　−Ｎ−ＢＯＣ−Ｎ−１−ンルーＬ−アルギニル−ａ−Ｎ−２ＣＩＺ −Ｌ−リシル−し−アスパルチル−−ベンジルエステル−し−バリル−Ｌ−チロンルー〇−ベンジルエーテルーベンジルエステル−４−チオ二エヱ旦且梨ａ　−Ｎ−Ｂｏｃ−ε−Ｎ−２ＣＩＺ−Ｌ−リシル−し−アスパルチル−β−ベンジルエステル−Ｌ−バリル−Ｌ−チロノル−０−ベンジルエーテル−ベンジルエステル−３−チオアミド（（ｉｉｉ）からの化合物）を、ＴＦＡで処理して、（１１）のＢｏｃ基を除き、そして！−Ｎ−２ＣＩＺ−Ｌ−リシル−し一アスパルチルーβ−ベンジルエステル−Ｌ−バリル−Ｌ−チロシル−〇−ベンジルエーテルーベンジルエステル−３−チオアミドラ定ｊｌ的収率で得た。

ε−Ｎ−２ＣＩＺ−Ｌ−リシル−し−アスパルチル−β−ベンジルエステル−Ｌ −バリル−Ｌ−チロンルー〇−ベンジルエーテルーベンジルエステル−３−チオアミド（２ａｍｏｌ）を、Ｎ２下に０℃で、乾ｍＤＭＦ（０，５ｍ１）に溶解し、ａ−１１−Ｂｏｃ−Ｎ−トシル−Ｌ−アルギニン（２ｍｍｏｌ）を、攪拌しながらその溶液に加えた。ＨＯＢｔ　（２ａｍｏｌ）およびＤＣＣ（２ｍｍｏｌ）を０°Ｃにて徐々に加えて、−夜攪拌し続けた。

その混合物を８倍容量の酢酸エチルで希釈し、生成されたＮ。

Ｎ−ジシクロへ牛シルウレアを濾過して溶液から除いた。濾過物を分岐ロートに移し、５％炭酸水素ナトリウム水溶液、５％クエン酸水溶液および飽和ブラインで連続的に洗浄した。有機層を集めて、Ｍｇ５Ｏａで乾燥し、濾過して、そして減圧下に濃縮した。残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーによって、クロロホルム−メタノール９：１を溶出液として用いて、ａ−Ｎ−Ｂｏａ−Ｎ −トシル−Ｌ−アルギニル−ε−Ｎ−２ＣＩＺ−Ｌ−リシル−し−アスパルチル −β−ベンジルエステル−Ｌ−バリル−Ｌ−チロシル−〇−ベンジルエーテルーベンジルエステル−４−チオアミドを好収率（７８％）で得た。この化合物は下記の物理的性質を有していた：融点１０５−１０７℃：　ＩＲ（ＣＤＣｌ２）　１７５６．１４９０　Ｃｍ−’　；　ＵＶ　（ＣＨＣｌａ）１ｍ５ｄ７１゜元素組成（Ｃｔ＋ｈ４ＣｈＮｓＯ＋４Ｓ２）　：理論値：　Ｃ，５ｇ。

１３；　Ｈ，ｓ、ａｓ：　Ｎ、　８．３４．　Ｓ、４．７９゜測定値：　Ｃ，５８，５４，１’ｌ、　５゜８１；　Ｎ、　８．６５．　Ｓ、　４．４０゜ｖ）４ −チオチモベンチンの。

ａ　−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｎ−）ンルーＬ−アルギニルーＬ−リシル−ε−Ｎ−２ＣＩＺ−Ｌ−アスパルチル−β−ベンジルエステル−Ｌ−バリル−Ｌ−チロシル−〇 −ベンジルエーテルーベンジルエステル−４−チオアミドを、アニソール、エチルメチルスルフィドおよびチオアニソールを１０％容量含有した液体フッ化水素に溶解した。０°Ｃで１時間後、その溶液を減圧下にエバポレートし、脱保護されたチオペプチドを、１２％酢酸水溶液を溶出液として用いてＶｙｄａｃ　Ｃｐｓカラムの逆相クロマトグラフィーによって精製した。このチオペプチドはプロトンＮＭＲで特徴付けられ、さらに下記の性質も有していた：融点１４６−１４８℃；　ＵＶ　（ＣＤＣｌ２）λｓｓ、２６８；　Ｍ／ｅ　６９６゜アミノ酸縮合反応物の適切な配列を用いて、下記のモノーチオチモペンチンアナログを調製した：ｄ工、Ｌ−了ルＹニル　−Ｌ−リ′−／ＩレーＬ−７スハーラテルーＬ−ＶでリルーＬ−これらのチオペプチドの物理的性質を表りに示す。

ｂ）１批皇底Ｍｅｒｒｉｆｔｅｄ樹脂のベンジルオキシ基に結合されたα−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ− チロシルー〇−ベンジルエーテルを、室温で１時間、ＴＥＡノ５５％ジクロロメタン溶液で処理した。次に、樹脂を集めて、１０ｍ１のジクロロメタンで４回、１Ｏ１１１のインプロパツール（ＩＰＡ）で４回連続して洗浄し、次の使用のために乾燥した。

Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ樹脂のベンジルオキシ基に結合されたし一チロシルー０− ベンジルエーテル（０，６３２ｍｍｏｌ／ｇ樹脂）を、乾燥ＤＭＦ　（７１）中の１−（α−Ｎ−Ｂｏｃ−バリルーチオアシル）−２−ベンズイミダシロン（０，９４８ｍｍｏｌ）溶液に、２５℃で攪拌しながら加えた。

その反応物を１６時間攪拌した後、もう一度ペンズイミダゾロン（０，９４８ｍｍｏｌ）を加え、そして１８時間攪拌した。樹脂を集めて、１０ｍ１のＤＭＦで４回洗浄し、次に、１０ｍ１のＩＰＡで４回洗浄し、そして引き続いてつぎの反応の調製のために乾燥した。

ｉｉ）α−Ｎ−Ｌ−ＢｏＣ−Ｌ−アスパルチル−−ベンジルエステル−Ｌ−ノ寸すルーし一チロシルー〇−ベンジルー１−チオアミド−エステ正血且盃Ｍｅｒｒｉｆ　ｉｅｄ樹脂のベンジルオキシ基に結合されたα−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ −バリルーＬ−チロシル−０−ベンジルエーテル−チオアミドラ、室温で１時間、ＴＦＡの５５％ジクロロメタン溶液で処理した。次に、樹脂を集めて、１０＋ａｌのジクロロメタンで４回、ｌｈｌのＩＰＡで４回連続して洗浄し、そして次ぎの使用のために乾燥した。

Ｍｅｒｒｉｆ　１ｅｌｄ樹脂のベンジルオキシ基に結合されたし一ノイリルーＬ −チロシルー〇−ベンジルエーテル−チオアミド（０，６３２■ｍｏｌ／ｇ樹脂）を、ＤＭＦ　（７ｍｌ）中のα−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−アスノくルチル−β−ベンジルエステル（０，６３２ｍｍｏｌ）溶液に、２５℃で攪拌しながら加えた。ＨＯＢｔ’　（０，６３２ｍ１ｏｌ）およびＤＣＣ（０，６３２ｍｍｏｌ）を攪拌しながら徐々に加えた。反応を１−２時間続けた後、樹脂を集めて、１ｈ＋ｌのＤＭＦで４回、ｉｏ＋ｍｌのＩＰＡで４回洗浄し、そして引き続いての反応のために乾燥した。

１ｉｉ）　ａ　−Ｎ−Ｂｏｃ−ε−Ｎ−２ＣＩＺ−Ｌ−リシ／ｌ／　−１−７ス／”　）Ｌｔチル−−ヘンジルエステルーム−バリル−し一チロシルー０−ベンジルー３−Ｍｅｒｒｉｆ　１ｅｄｌ　脂のベンジルオキシ基に結合されたα−Ｎ −Ｂｏｃ−Ｌ−アスパルチル−β−ベンジルエステル−Ｌ−バリル−Ｌ−チロシル−〇−ベンジルエーテルー２−チオアミドを、室温で１時間、ＴＦＡの５５％ジクロロメタン溶液で処理した。次に、樹脂を集めて、１０ｍ１のジクロロメタンで４回、１０Ｉ１１１のＩＰＡで４回連続的に洗浄し、モして次ぎの使用のために乾燥した。

Ｍｅｒｒｉｆ　１ｅｌｄ樹脂のベンジルオキシ基に結合されたし一アスパルチルーβ−ベンジルエステル−Ｌ−バリル−Ｌ−チロシル−Ｏ−ベンジルエーテル− ２−チオアミド（０，６３２ｍｍｏｌ／ｇ樹脂）を、ＤＭＦ（７ｍｌ）中のａ　 −Ｎ−Ｂｏｃ−Ｎ−ｅ−２ＣＩＺ−Ｌ−リシン（０，６３２ｍｍｏｌ）溶液に、攪拌しながら加え、その反応を１−２時間続けた。次に、樹脂を集めて、１０ｍ１のＤＭＦで４回、ｌｈｌのＩＰＡで４回洗浄し、そして引き続いての反応のために乾燥した。

Ｍｅｒｒｉｆ　ｉｅｄ樹脂のベンジルオキシ基に結合されたα−Ｎ−Ｂｏｃ−ε −Ｎ−２ＣＩＺ−Ｌ−リシル−Ｌ−アスパルチル−β−ベンジルエステル−Ｌ− バリル−Ｌ−チロシル−０−ベンジルエーテル−３−チオアミドを、室温で１時間、ＴＦＡの５５％ジクロロメタン溶液で処理した。次に、樹脂を集めて、ｌｈｌのジクロロメタンで４回、ｌｈｌのＩＰＡで４回連続的に洗浄し、次ぎの使用のために乾燥した。

Ｍｅｒｒｉｆ　ｉｅｄ樹脂のベンジルオキシ基に結合されたε−Ｎ−２ＣＩＺ− Ｌ−リシル−し−アスパルチル−β−ベンジルエステル−Ｌ−バリル−Ｌ−チ０／ルー０−ベンジルエーテル−３−チオアミド（０，６３２ｍｍｏｌ／ｇの樹脂）を、ＤＭＦ　（７ａｌｌ）中のａ−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｎ−トンルービーアルギニン（０，６３２ｍｍｏｌ）溶液に、２５°Ｃで攪拌しながら加えた。ＨＯ旧（０，６３２ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（０，６３２ｍｍｏｌ）を攪拌しながら徐々に加えた。その反応を１−２時間続けた。引き続いて、樹脂を集めて、＋ＰＡ　１０ｍ１で４回洗浄し、そして最終的に保護基を除去するために乾燥した。

■）　からの　によるｌ−チオジペプチドの−Ｍｅｒｒｉｆｉｅｄ樹脂のベンジルオキシ基に結合されたα−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｎ−）シルーＬ−アルギニル−ε−２ＣＩＺ−Ｌ−リシル−し−アスパルチル−β−ベンジルエステル−し−バリル− Ｌ−チロシル−０−ベンジルエーテル−４−チオアミド（Ｑ、５　ｍｍｏｌ）を、アニソール、ジメチルスルフィド、およびチオアニソール（０，５ｍｌ　１：１：Ｉ　Ｖ／Ｖ）含有の液体フッ化水素（５＋ａｌ）によって、０℃で１時間処理した。

溶媒をエバポレーションした後、残渣を１０％酢酸水溶液に溶解した。その水溶液をジエチルエーテル（３０＋ｉｌ）で洗浄し、水で溶出して凍結乾燥した。粗チオペプチドを９２％酢酸水溶液（２５ｍｌ）に溶解して、同じ酢酸溶媒を溶出液とした、ＣＩ８充填カラムを用いた逆相クロマトグラフィーによって精製した。

支皿匠主３−チオタフトンンの−１ａ）欧ｍ＝玄ｉ）α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−プロリルーＮ−１−シル−し一アルギニルーベンジルエステルチオアミドのム α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｎ−トシル−し一アルギニルーベンジルエステルを、０°Ｃにて０５時間、窒素雰囲気下にＴＦＡで処理した。ＴＦＡを減圧下で除去シ、Ｎ− ト／ルーＬ−アルギニルーベンジルエステルＴＦＡ［を得た。このアミノ酸誘導体をジクロロメタンに混合し、そして５％炭酸水素ナトリウム水溶液で処理した。有機層を分離し、乾燥し、そして濃縮して遊離のアミン誘導体を定量的に得た。

Ｎ−トンルーム−アルギニル−ベンジルエステル（２＋ｉｍｏｌ）を無水ＤＭＦ　（０，５ｍｌ）に、Ｎ２下で０℃にて溶解し、そしてｌ−（α−Ｎ−Ｂｏｃ− Ｌ−チオプロリル）−２−ベンズイミダシロン（２，２ｍｍｏｌ）　（実施例１からの）を少しずつ、０℃で攪拌しながら０．３時間力）けて加えた。その混合物を、０°Ｃで２時間攪拌し続け、そして１５−１７時間２５°Ｃに温めた。次に、反応物を濾過し、減圧下（こ濃縮して、残渣を酢酸エチル（１５ｍｌ）に溶解し、そしてその溶液を５％炭酸水素す）　ＩＪウム水溶液、水、５％クエン酸水溶液、および水で連続的に洗浄した。次に、有機層を乾燥後、工１＜ポレーションし、モして残渣を精製のためにフラツシ二カラムにかけた。保護チオジペプチドを酢酸エチル−へ牛サン３：２の混合溶媒で溶出し、α−Ｎ−Ｂｏａ−Ｌ− チオプロリル−Ｎ−トシル−し−フルギニルーベンジルエステルを高収率で得り。

回収した化合物は、下記の物理的性質を有して０た：融点６４−６６°ＣおよびＵＶ　（Ｃ）ＩＣ１３）λｍａｘ２７０゜百）Ｌゴヨ！二り正≦息上１皿」ヨニ辷プ１」ニヒ上ユヱ」二り一アルギニルーベンジルエステル−２−チオアミドの合成α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−チオプロリル−Ｎ−トンルーム−アルギニル−ベンジルエステルを、０℃で０５時間、窒素雰囲気下にＴＦＡで処理した。

ＴＦＡを減圧下で除去し、Ｌ−チオプロリル−Ｎ−トンルーし一アルギニルーベンンルエステルＴＦＡ塩を得た。このチオジペプチドをジクロロメタンに混合し、そして炭酸水素ナトリウム水溶液で処理した。有機層を分離し、乾燥し、そして濃縮して遊離のアミノ誘導体を定量的に得た。

Ｌ−チオプロリル−Ｎ４ンルーＬ−アルギニル−ベンジルエステル（２ｍｍｏ１．）を無水ＤＭＦ　（０，５ｍｌ）に、窒素雰囲気下で０℃で溶解し、そしてａ　−Ｎ−Ｂｏｃ−ｅ−Ｎ−２ＣＩＺ−リジン（２ｔｍｏｌ）を加えた。

ＨｏＢｔ　（２ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（２ｍｍｏｌ）を、０℃で攪拌しながら徐々に加えて、反応を一夜続けた。その反応物を８倍容量の酢酸エチルで希釈し、そして生成されたＮ、　Ｎ’−ジシクロへキシルウレアを濾過して混合物から除いた。濾過物を分液ロートに移し、５％炭酸水素ナトＩＪウム水溶液、５％クエン酸水溶液および飽和ブラインで連続的に洗浄した。有機層を集めて、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過して、減圧下に濃縮した。残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフイーによって、ヘキサン−酢酸エチル１．１を溶出液として用いて精製し、α−Ｎ−Ｂｏｃ−ε−Ｎ−２ＣＩＺ−Ｌ−リンルーＬ−プロリルーＮ− １−シル−し−アルギニル−ベンジルエステル−２−チオアミドを高収率で得た。

この精製した化合物は下記の物理的性質を有していた：融点７７−８０℃：　ＩＲ（ＣＨＣＬ３）　１７５１１．１３８０　ｃｍ−’　；　ＵＶ　（ＣＨＣＬ３）λａｓｘ２７１：元素組成（Ｃ５ｓＨｔ＋ＣｌＮａ０＋＋Ｓ２）　：理論値：　Ｃ，６０，７５゜Ｈ，７，１０，Ｎ、　９．２９゜測定値：　Ｃ，６０，３４，Ｈ，７，０７，Ｎ、　９．６５゜ジルエステル−３−チオアミドのＡａ　−Ｎ−Ｂｏｃ−ε−Ｎ−２ＣＩ　Ｚ−リシル−Ｌ−プロリル−Ｎ−１−シル −し一アルギニルーベンジルエステルー２−チオアミドを、０℃で０．５時間、窒素雰囲気下でＴＦＡで処理した。ＴＦＡを減圧下で除去し、ε−Ｎ−２ＣＩＺ −Ｌ−リ／ルーＬ−プロリルーＮ−トンルーし一アルギニルーベンジルエステルー２−チオアミドＴＦＡ塩を得た。このアミノ酸誘導体をジクロロメタンに混合し、炭酸水素ナトリウム水溶液で処理した。有機層を分離し、乾燥し、そして濃縮して遊離のアミノ誘導体を定量的に得た。

ε−Ｎ−２ＣＩＺ−Ｌ−リシル−し−プロリル−Ｎ−トンルーム−アルギニル− ベンジルエステル−２−チオアミド（２ｍｌｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（０，５ｍ１）に、窒素雰囲気下で０℃にて溶解し、そしてα−Ｎ−Ｂｏａ−スレオニンー〇 −ベンジルエーテル（２ｍｍｏｌ）を加えた。ＨＯＢｔ（２１０１１０１）およびＤＣＣ（２ｍｍｏｌ）を０℃で攪拌しながら少しずつ加えて、そして反応を一夜続けた。その反応物を８倍容量の酢酸エチルで希釈し、そして生成されたＮ、Ｎ−ジシクロへキシルウレアを濾過して溶液から除いた。濾過物を分液ロートに移し、そして５％炭酸水素ナトリウム水溶液、５％クエン酸水溶液および飽和ブラインで連続的に洗浄した。有機層を集めて、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過して、減圧下に濃縮した。残渣をシリカゲルのフラッシコクロマトグラフイーによて、ヘキサン−酢酸エチル１：１混合溶媒を溶出液として用いて精製し、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−スレオニルー〇−ベンジルエーテル−ε−Ｎ−２ＣＩＺ−Ｌ−リシル −し−プロリル−Ｎ、トシル−し−アルギニル−ベンジルエステル−ミドを高収率で得た。

ｉｖ）３−チオ　フトシンの− ａ−Ｎ−Ｂｏａ−Ｌ−スＬ／オニ−　）Ｌｔ−Ｑ−ヘンシルｘ　−　７　ルー　ｔ　−Ｎ−２ＣＩＺ−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリル−Ｎ−トシル−し−アルギニル −ベンジルエステル−１−チオアミドを、アニソール、エチルメチルスルフィドおよびチオアニソールを容量１０％含有の液体フッ化水素に溶解した。０°Ｃで１時間後、その溶液を減圧下に除去し、そして脱保護されたチオペプチドを、１２％酢酸水溶液を溶出液として用いてＶｙｄａｅ　Ｃｐｓカラムの逆相液体カラムクロマトグラフィーによって精製した。

このチオベブチは下記の物理的性質を有していた：融点１６９ー１７１℃およびＩＪＶ（５０％エタノール水溶液）λ＋＋ａｘ２６ｇ。

下記のモノ−チオタフトシンアナログを、適切な出発物質を用い、そして正確な順番のアミノ酸カップリング反応によって調製した：ｅＬ　Ｌ−スしオニル−Ｌ−リシｌレーＬ−７ちりルーシーアル甲βンー２ーチオアミにｅ２．　Ｌ−ズしオニル−Ｌ−リシル−Ｌ−７５リルーＬ−アル牛゛ニンー１− すオアミＰ゛これらのチオペプチドの物理的性質を表Ｅに示す。

叉１１」土欠０ヌードマウスにおけるＴ　に・　るチモペンチンおよび４−チオチモペンチンの− このアッセイは、ＬａｕおよびＧｏｌｄｓｔｅｉｎにより確立されたプロトコールに従って行った。Ｃ．　ＬａｕおよびＧ．　Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ　、”Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ｔｈｙｍｏｐｏｉｅｔｉｎｓｚ−３ｓ（ＴＰ５）　ｏｎ　Ｃｙｔｏｔ。

ｘｊｃ　Ｌｙｒａｐｈｏｃｙｔｅ　Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ　Ｕｎｉｔｓ　（ＣＬＰ −Ｕ）”、　Ｊ．　Ｉｍｍｕｎ．、　１２４−、１８６１　（１９８０）：　Ｇ．　Ｅ．　Ｒａｎｇｅｓら、”Ｔ　Ｃｅｌｌ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｉｎＮｏｒｍａｌ　ａｎｄ　Ｔｈｙｍｏｐｅｎｔｉｎ−ｔｒｅａｔｅｄ　Ｎｕｄｅ　Ｍｉｃｅ”、　Ｊ．ユ■１肚仁．屈ｉ６，１０５７　（１９８２）を参照のこと。

チモペンチンおよび４−チオチモペンチンの未成熟Ｔ細胞の分化に対する免疫調節作用を、４週齢の胸腺欠損ヌードマウスに、２週間の間毎日皮下注射した後、１９２８球上に新たに発現する抗原によって測定した。最後の注射の後、牌細胞を調製し、そして放射標識されたマーカーを有する総細胞の割合を定量するために放射標識した。別個の２組の実験のセットで、このアッセイの同じ条件下、同じ濃度および割合でチモペンチンを投与したコントロール動物に比べて、４−チオチモベンチンではマーカーを有する細胞が１２８ｚ増加および２２７％増加したことが判明した。

これらの知見は、チオチモペンチンアナログが、１９７８球の細胞表面マーカーの増加に関与する強力な分化過程を誘導し得ることを示唆している。

前述の開示および実施例に照らして、多くの改変した実施態様および付加的な実施態様は、当業者には容易に明白である。例えば、本明細書に記載されているような改良された性質を有する、５アミノ酸残基より大きいチオペプチド（よ、本発明の方法に従って有利に調製され得る。このような全ての明白な変法およびさらなる実施態様は、特許請求の範囲内に一五一」と１　１２３−２５　−５４．５　２９４　６０．２３　７．７７　１４．７６（コ．７５）　６０．２０　７．５８　１５．０３ａ２　１１６−１８−Ｌ５２９３６２．４７　６．４５　１３．３Ｂ１０　（３．４８）　６２．６５　６．３７　Ｌ３．２Ｂａ４　２２２−２４−１０　２８９　６６、７７　６．０３　１１．コ５（ＴＨＦ）　（３．５８）　６６、９１　６．０２　ｍｌ．１４１５　ａ５　１００−０２　−１３．０　２９２　６４．ｉ６　７．０５　１０．５６（３．４９３　６３．９０　６．５８　１０．１６ａ６　ユ２トコ０　６．４　２６３　６９．３３　６．４８　１１．４１１（４．１３）　６９．４４　６．２３　Ｂ．３７ａ７　１２Ｂ−３０　−１４．２　２９３　６３．００　７．１）ｌ　１０．７７　７．５４２０　（３．９２）　６２．８２　６．７８　ｍｏ．４６　７．９ａａ８　７５−７８　−２０．８２９３　６４．４２　７．０６　９．５９（３．３９）　６４．６２　６．８４　９．８２ａ９　２１２−Ｄ　２９４　６７、５９　６．５４　１１．１４（３．４３）　６７、４３　６．２４　１０．８４２５　ａｇｏ　１４Ｂ−４９　０　２９コ　５８．５６　７．コｌ　Ｌ５．４４（コ．コ９）　５Ｂ．Ｂ６　７．２２　１５．８：１１（紘ξ ）Ｂ１２　Ｂ２−８４　７．８　２９２Ｂ１コ　１５０−５１　−３８．８　２９４　６３．５０　Ｂ、５４　１３．２８（コ、５５）　６３．５３　Ｂ、４７　１３．０８ａ１４　２２５−２７−２．５　２８０　６１４９　８．７９　１３．０２（ＴＨＦ）　（１，０７）　６３．５３　Ｂ、４７　１３．０８ａ１５　９４−９７　−２６．８　２９３　５９．９９　６．９４　１０．８０（３，６：ｌ）　５９．４６　６．５８　１１．０９ａ１６　１３７−３８　−２９．０　２９４　５６．４９　７．６９　Ｌ！、１１　９．：１４（３−１５）　５６．６１　７．４２　Ｌ！、コ９　９．４４ａ１７　１４１−４２　０　３０４　６７．３８　７．４２　１１８８（１６０）　６７．５８　７．０９　１１．８１ａ１８　１６４−６６−１０５　２９３　６３．３１　７．９０　１３．６１（：１．５２）　６２．９３　７．５９　１３．７５ａ工９　１４２−４４　７．２２９２　６５．９５　７．５２　１０．：１７（３，５４）　６６．１４　７４２　１０．５１ａ２０　１４９− ５２　−２．６　２８８　６７．２９　７．０５　１４．１７（ＣＨ，ＣＮ）（４，１７）　６６．９Ｂ　６．６４　１４．２０ａ２１　１ｉ−７５２０，９２９：ｌ　６０．７０　５．６７　７．６２（ＴＨＦ）　（１５６）　６１．１４　５．５１　７．９２ａ２２　１２５−２６　−：１９．８　２９２　６２．９４　Ｌ３２　１３．８１（コ、４９１　６２．５４　Ｂ、１９　１：１．６Ｅ） −り一」一４Ｌ」（￥；ｔ−さ）ｂ１２　１１６−１７　８１２　２６８−五一二Ｃ３琢駿さ扛７υ・７丘Ｃ５呈煉く咬ｈ″フ氏ｃ６　享酸ざへ７ヴ、ｋａｌｌ　羊緘で８ｆｊＩ７゛１Ｆ。

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Claims

【特許請求の範囲】

１．以下の式で表されるチオアシル化試薬：▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＲ１は水素、または分枝または未分枝のＣ１からＣ４のアルキル基であり、該アルキル基は以下のものからなる群より選択される置換基により置換され得る：▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、ここで、Ａは−Ｏ−または−ＮＨ−、Ｄはベンジル基またはキサンテニル基、ｎは１または２である； ▲数式、化学式、表等があります▼ Ｅは−Ｈまたは−ＣＨ３、Ｇは−ＣＨ２−、−Ｏ−または−Ｓ−、Ｊは−Ｓ−または−ＣＨ２− Ｌは−ＣＨ３またはフェニル基である；▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＭおよびＴは同一のまたは異なる置換基であり得、そして水素、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素からなる群から選択され、そしてＱは水素、ヒドロキシ基、またはジクロロベンゾキシ基である、 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＶはカルボベンジルオキシ基またはトシル基、または、 ▲数式、化学式、表等があります▼ である；Ｒ２はｔ−ブトキシ基、カルボベンジルオキシ基、クロロベンジルオキシ基、９ −フルオレニルメチルオキシカルボニル基、トシル基、トリチル基およびキサンテニル基からなる群から選択され；Ｒ３は水素、メチル基、またはエチル基であり；またはＲ１とＲ３とは、それらが結合する炭素原子と共に、３から５の炭素原子を含むシクロアルキル環を形成し；Ｒ４は水素；またはＲ１とＲ４とは、それらが結合する炭素および窒素原子と共に、２より少なくないが６より多くない環内炭素原子を含む飽和複素環を形成し；そしてＲ５は水素、メチル基、エチル基、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、アミノ基、アミド基、アジド基、ヒドロキシ基、ヒドロキシメチル基、カルボキシ基、カルボキシメチル基、シアノ基、グアニド基、メルカプト基、およびニトロ基からなる群から選択される。
２．前記Ｒ１が分枝または未分枝のＣ１からＣ４のアルキル基、前記Ｒ２がｔ− ブトキシ基であり、そして前記Ｒ３が水素である、請求項１に記載のチオアシル化試薬。
３．前記Ｒ１とＲ４とが、それらが結合する炭素および窒素原子と共に、４個の環内炭素原子を含む飽和複素環（ピロリジン環）を形成し、前記Ｒ２がｔ−ブトキシ基であり、そして前記Ｒ３およびＲ５が水素である、請求項２に記載のチオアシル化試薬。
４．前記Ｒ１が以下の式で表され： ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ａは−Ｏ−または−ＮＨ−、Ｄはベンジル基またはキサンテニル基、ｎは１または２であり；前記Ｒ２はｔ−ブトキシ基であり；そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項１に記載のチオアシル化試薬。
５．前記Ｒ１が以下の式で表され： ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｅは−Ｈまたは−ＣＨ３、Ｇは−ＣＨ２−、−Ｏ−または−Ｓ−、Ｊは−Ｓ−または−ＣＨ２−、Ｌは−ＣＨ３またはフェニル基であり；前記Ｒ２はｔ−ブトキシ基であり；そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項１に記載の化合物。
６．前記Ｒ１が以下の式で表され： ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＭおよびＴは同一のまたは異なる置換基であり得、そして水素、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素からなる群から選択される置換基であり、そしてＱは水素、ヒドロキシ基、または２ＣＩＺであり；前記Ｒ２はｔ−ブトキシ基であり；そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項１に記載のチオアシル化試薬。
７．前記Ｒ１が以下の式で表され： ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＶはカルボベンジルオキシ基またはトシル基であり；前記Ｒ２はｔ−ブトキシ基であり；そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項１に記載のチオアシル化試薬。
８．前記Ｒ１が以下のものであり： ▲数式、化学式、表等があります▼ 前記Ｒ２はｔ−ブトキシ基であり；そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項１に記載のチオアシル化試薬。
９．前記Ｒ１が以下の式で表され： −（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ−２ＣＩＺここでｎは１から４、そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項１に記載のチオアシル化試薬。
１０．前記Ｒ１が以下のものであり： ▲数式、化学式、表等があります▼ 前記Ｒ２は９−フルオレニルメチルオキシカルボニル基であり；そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項１に記載のチオアシル化試薬。
１１．前記チオアシル化試薬が以下のものからなる群から選択される、請求項１に記載のチオアシル化試薬；１−（α−Ｂｏｃ−Ｌ−アラニル−チオアシル）− ２−ベンズイミダゾロン、１−（α−Ｂｏｃ−Ｌ−アルギニル−ジ−Ｎ−Ｃｂｚ −チオアシル）−２−ベンズイミダゾロン、１−（α−Ｂｏｃ−Ｌ−アルギニル −Ｎ−トシル−チオアシル）−２−ベンズイミダゾロン、１−（α−Ｂｏｃ−Ｌ −アスパラギニル．Ｎ−キサンテニル−チオアシル）−２−べンズイミダゾロン、１−（α−Ｂｏｃ−Ｌ−アスバルチル−β−ベンジルエステル−チオアシル） −２−ベンズイミダゾロン、１−（α−Ｆｍｏｃ−Ｌ−アスバルチル−β−ｔ− ブチルエステル−チオアシル）−２−ベンズイミダゾロン、１−（α−Ｂｏｃ− Ｌ−システイニル−Ｓ−ベンジルエーテル−チオアシル）−２−ベンズイミダゾロン、１−（α−Ｂｏｃ−Ｌ−グルタミル−γ−ベンジルエステル−チオアシル）−２−ベンズイミダゾロン、１−（α−Ｂｏｃ−Ｌ−グルタミニル−Ｎ−キサンテニル−チオアシル）−２−ベンズイミダゾロン、１−（α−Ｂｏｃ−グリシル−チオアシル）−２−ベンズイミダゾロン、１−（α−Ｂｏｃ−Ｌ−ヒスチジル−Ｎ−ヒスチジル−Ｎ−トシル−チオアシル）−２−ベンズイミダゾロン、１ −（α−Ｂｏｃ−Ｌ−イソロイシル−チオアシル）−２−ベンズイミダゾロン、１−（α−Ｂｏｃ−Ｌ−ロイシル−チオアシル）−２−ベンズイミダゾロン、１ −（α−Ｂｏｃ−Ｌ−リシル−ε−Ｎ−Ｃｂｚ−チオアシル）−２−ベンズイミダゾロン、１−（α−Ｂｏｃ−Ｌ−メチオニル−チオアシル）−２−ベンズイミダゾロン、１−（α−Ｂｏｃ−Ｌ−フェニルアラニル−チオアシル）−２−ベンズイミダゾロン、１−（α−Ｂｏｃ−Ｌ−プロリル−チオアシル）−２−ベンズイミダゾロン、１−（α−Ｂｏｃ−Ｌ−スレオニル−Ｏ−ベンジルエーテル−チオアシル）−２−ベンズイミダゾロン、１−（α−Ｂｏｃ−Ｌ−トリフォフィル −チオアシル）−２−ベンズイミダゾロン、１−（α−Ｂｏｃ−Ｌ−チロシニル −０−２．６−ジクロロベンジルエーテルーチオアシル）−２−ベンズイミダゾロン、または１−（α−Ｂｏｃ−Ｌ−バリル−チオアシル）−２−ベンズイミダゾロン。
１２．以下の式により表される、アミノ酸オルトアミノチオアニリド化合物： ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＲ１は水素、または分枝または未分枝のＣ１からＣ４のアルキル基であり、該アルキル基は以下のものからなる群より選択される置換基により置換され得る：▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ａは−Ｏ−または−ＮＨ−、Ｄはベンジル基またはキサンテニル基、ｎは１または２である； ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｅは−Ｈまたは−ＣＨ３、Ｇは−ＣＨ２−、−Ｏ−または−Ｓ−、Ｊは−Ｓ−または−ＣＨ２−、Ｌは−ＣＨ３またはフェニル基である；▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＭおよびＴは同一であるかまたは異なってあり得、そして水素、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素からなる群から選択され、そしてＱは水素、ヒドロキシ基、または２ＣＩＺであり、 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＶはカルボベンジルオキシ基またはトシル基、または、 ▲数式、化学式、表等があります▼ であり；Ｒ２はｔ−ブトキシ基、カルボベンジルオキシ基、クロロベンジルオキシ基、９ −フルオレニルメチルオキシカルボニル基、トシル基、トリチル基およびキサンテニル基からなる群から選択（ｒｅｌａｔｅｄ）され；Ｒ３は水素、メチル基、またはエチル基であり；またはＲ１とＲ３とは、それらが結合する炭素原子と共に、３から５の炭素原子を含むシクロアルキル環を形成し；Ｒ４は水素；またはＲ１とＲ４とは、それらが結合する炭素および窒素原子と共に、２より少なくないが６より多くない環内炭素原子を含む飽和複素環を形成し；そしてＲ５は水素、メチル基、エチル基、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、アミノ基、アミド基、アジド基、ヒドロキシ基、ヒドロキシメチル基、カルボキシ基、カルボキシメチル基、シアノ基、グアニド基、メルカプト基、およびニトロ基からなるクラスから選択される。
１３．前記Ｒ１が分枝または未分枝のＣ１からＣ４のアルキル基であり、前記Ｒ２がｔ−ブトキシ基であり、そして前記Ｒ３およびＲ５が水素である、請求項１２に記載のアミノ酸オルトアミノーチオアニリド。
１４．前記Ｒ１とＲ４とが、それらが結合する炭素および窒素原子と共に、４個の環内炭素原子を含む飽和複素環を形成し、化合物中の前記Ｒ２がｔ−ブトキシ基であり、そして前記Ｒ３およびＲ５が水素である、請求項１２に記載のアミノ酸オルトアミノチオアニリド。
１５．前記Ｒ１が以下の式で表され： ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ａは−Ｏ−または−ＮＨ−、Ｄはベンジル基またはキサンテニル基、ｎは１または２であり；前記Ｒ２はｔ−ブトキシ基であり；そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項１２に記載のアミノ酸オルトアミノチオアニリド。
１６．前記Ｒ１が以下の式で表され： ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｅは−Ｈまたは−ＣＨ３、Ｇは−ＣＨ２−、−Ｏ−または−Ｓ−、Ｊは−Ｓ−または−ＣＨ２−、Ｌは−ＣＨ３またはフェニル基であり；前記Ｒ２はｔ−ブトキシ基であり；そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項１２に記載のアミノ酸オルト−アミノ−チオアニリド。
１７．前記Ｒ１が以下の式で表され： ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＭおよびＴは同一であるかまたは異なってあり得、そして水素、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素からなる群から選択され、そしてＱは水素、ヒドロキシ基、または２ＣｌＺであり；前記Ｒ２はｔ−ブトキシ基であり；そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項１２に記載のアミノ酸オルトアミノチオアニリド。
１８．前記Ｒ１が以下の式で表され： ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＶはカルボベンジルオキシ基またはトシル基であり前記Ｒ２はｔ−ブトキシ基であり；そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項１２に記載のアミノ酸オルトアミノチオアニリド。
１９．化合物中の前記Ｒ１が以下のものであり：▲数式、化学式、表等があります▼ 前記Ｒ２はｔ−ブトキシ基であり；そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項１２に記載のアミノ酸オルトアミノチオアニリド。
２０．前記Ｒ１が以下の式で表され： −（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ−２ＣＩＺここでｎは１から４であり、そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項１２に記載のアミノ酸オルトアミノチオアナリド（ｔｈｉｏａｎａｌｉｄｅ）。
２１．前記Ｒ１が以下のものであり： ▲数式、化学式、表等があります▼ 前記Ｒ２は９−フルオレニルメチルオキシカルボニル基であり；そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項１２に記載の化合物。
２２．前記アミノ酸オルトアミノチオアナリドが以下のものからなる群から選択される、請求項１２に記載のアミノ駿オルト−アミノ−チオアナリド： α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−アラニル−オルト−アミノ−チオアニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−アルギニル−ジ−Ｎ−Ｃｂｚ−オルト−アミノ−チオアニリド、α−Ｎ −Ｂｏｃ−Ｌ−アルギニル−Ｎ−トシル−オルト−アミノ−チオアニリド、α− Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−アスバラギニル−Ｎ−キサンテニル−オルト−アミノーチオアニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−アスパルチル−β−ベンジルエステル−オルト−アミノ−チオアニリド、α−Ｎ−Ｆｍｏｃ−アスバルチル−β−ｔ−ブチルエステル −オルト−アミノ−チオアニリド、α−Ｎ−Ｂｏｏ−Ｌ−システイニル−Ｓ−ベンジルエーテル−オルト−アミノ−チオアニリド、α−ルＢｏｃ−Ｌ−グルタミル−γ−ベンジルエステルーオルト−アミノ−チオアニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ− Ｌ−グルタミニル−Ｎ−キサンテニル−オルト−アミノ−チオアニリド、α−Ｎ −Ｂｏｃ−グリシル−オルト−アミノ−チオアニｌド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−ヒスチジル−Ｎ−ベンジル−オルト−アミノ−チオアニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ −ヒスチジル−Ｎ−トシル−オルト−アミノ−チオアニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ− Ｌ−イソロイシル−オルト−アミノ−チオアニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−ロイシル−オルト−アミノ−チオアニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−ε−Ｎ−２ＣＩＺ−Ｌ −リシル−オルト−アミノ−チオアニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−メチオニル− オルト−アミノ−チオアニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−フェニルアラニル−オルト−アミノ−チオアニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−プロリルーオルト−アミノ− チオアニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−スレオニル−Ｏ−べンジルエーテル−オルト−アミノ−チオアニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−トリプトフィル−オルト−アミノ−チオアニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−チロシニル−Ｏ−２．６−ジクロロベンジルエーテル−オルト−アミノーチオアニリド、またはα−Ｎ−Ｂｏｃ−レバリル−オルト−アミノ−チオアニリド。
２３．以下の式により表される、アミノ酸オルト−アミノ−アニリド化合物： ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＲ１は水素、または分枝または未分枝のＣ１からＣ４のアルキル基であり、該アルキル基は以下のものからなる群より選択される置換基により置換され得る；▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ａは−Ｏ−または−ＮＨ−、Ｄはベンジル基またはキサンテニル基、ｎは１または２である； ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｅは−Ｈまたは−ＣＨ３、Ｇは−ＣＨ２−、−Ｏ−または−Ｓ−、Ｊは−Ｓ−または−ＣＨ２−、Ｌは−ＣＨ３またはフェニル基である；▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＭおよびＴは同一であるかまたは異なってあり得、そして水素、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素からなる群から選択され、そしてＱは水素、ヒドロキシ基、または２ＣＩＺである、 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＶはカルボベンジルオキシ基またはトシル基である、または、 ▲数式、化学式、表等があります▼ である；Ｒ２はｔ−ブトキシ基、カルボベンジルオキシ基、クロロベンジルオキシ基、９ −フルオレニルメチルオキシカルボニル基、トシル基、トリチル基およびキサンテニル基からなる群から選択され；Ｒ３は水素、メチル基、またはエチル基であり；またはＲ１とＲ３とは、それらが結合する炭素原子と共に、３から５の炭素原子を含むシクロアルキル環を形成し；Ｒ４は水素；またはＲ１とＲ４とは、それらが結合する炭素および窒素原子と共に、２より少なくないが６より多くない環内炭素原子を含む飽和複素環を形成し；そしてＲ５は水素、メチル基、エチル基、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、アミノ基、アミド基、アジド基、ヒドロキシ基、ヒドロキシメチル基、カルボキシ基、カルボキシメチル基、シアノ基、グアニド基、メルカプト基、およびニトロ基からなる群から選択される。
２４．前記Ｒ１が分枝または未分枝のＣ１からＣ４のアルキル基であり、前記Ｒ２がｔ−ブトキシ基であり、そして前記Ｒ３およびＲ５が水素である、請求項２３に記載のアミノ酸オルトアミノアニリド。
２５．前記Ｒ１とＲ４とが、それらが結合する炭素および窒素原子と共に、４個の環内炭素原子を含む飽和複素環（ピロリジン環）を形成し、前記Ｒ２がｔ−ブトキシ基であり、そして前記Ｒ３およびＲ５が水素である、請求項２３に記載のアミノ酸オルト−アミノ−アニリド。
２６．前記Ｒ１が以下の式で表され： ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ａは−Ｏ−または−ＮＨ−、Ｄはベンジル基またはキサンテニル基、ｎは１または２であり；前記Ｒ２はｔ−ブトキシ基であり；そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項２３に記載のアミノ酸オルト−アミノ−アニリド。
２７．前記Ｒ１が以下の式で表され： ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｅは−Ｈまたは−ＣＨ３、Ｇは−ＣＨ２−、−Ｏ−または−Ｓ−、Ｊは−Ｓ−または−ＣＨ２−、Ｌは−ＣＨ３またはフェニル基であり；前記Ｒ２はｔ−ブトキシ基であり；そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項２３に記載のアミノ酸オルトアミノアニリド。
２８．前記Ｒ１が以下の式で表され： ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＭおよびＴは同一であるかまたは異なってあり得、そして水素、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素からなる群から選択され、そしてＱは水素、ヒドロキシ基、または２ＣＩＺであり；前記Ｒ２はｔ−ブトキシ基であり；そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項２３に記載のアミノ酸オルトアミノアニリド。
２９．前記Ｒ１が以下の式で表され： ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＶはカルボベンジルオキシ基またはトシル基であり；前記Ｒ２はｔ−ブトキシ基であり；そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項２３に記載のアミノ酸オルトアミノアニリド。
３０．前記Ｒ１が以下のものであり： ▲数式、化学式、表等があります▼ 前記Ｒ２はｔ−ブトキシ基であり；そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項２３に記載のアミノ酸オルト−アミノ−アニリド。
３１．前記Ｒ２が以下の式で表され： −（ＯＨ２）ｎ−ＮＨ−２ＣＩＺここでｎは１から４であり、そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項２３に記載のアミノ酸オルト−アミノ−アニリド。
３２．前記Ｒ１が以下のものであり： ▲数式、化学式、表等があります▼ 前記Ｒ２は９−フルオレニルメチルオキシカルボニル基であり；そして前記Ｒ３およびＲ５は水素である、請求項２３に記載のアミノ酸オルト−アミノ −アニリド。
３３．前記アミノ酸オルト−アミノ−アニリドが以下のものからなる群から選択される、請求項２３に記載のアミノ酸オルトーアミノ−アニリド： α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−アルギニル−ジ−Ｎ−Ｃｂｚ−オルト−アミノアニリド、 α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−アルギニル−Ｎ−トシル−オルト−アミノ−アニリド、α −Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−アスバラギニル−Ｎ−キサンテニル−オルト−アミノーアニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−アスバルチル−β−ベンジルエステル−オルトーアミノ −アニリド、α−Ｎ−Ｆｍｏｃ−アスバルチル−β−ｔ−プチルエステル−オルト−アミノ−アニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−システイニル−Ｓ−ベンジルエーテル−オルト−アミノ−アニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−グルタミル−γ−ベンジルエステル−オルト−アミノ−アニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−グルタミニル −Ｎ−キサンテニル−オルト−アミノーアニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−グリシル− オルト−アミノ−アニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−ヒスチジル−Ｎ−ベンジル− オルト−アミノ−アニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−ヒスチジル−Ｎ−トシル−オルト−アミノ−アニリド、α−トＢｏｃ−Ｌ−イソロイシル−オルト−アミノ− アニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−ロイシル−オルト−アミノ−アニリド、α−Ｈ −Ｂｏｃ−ε−Ｎ−２ＣＩＺ−レリシル−オルト−アミノ−アニリド、α−Ｎ− Ｂｏｃ−Ｌ−メチオニル−オルト−アミノ−アニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−フェニルアラニルーオルト−アミノ−アニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−プロリル− オルト−アミノーアニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−スレオニル−Ｏ−ベンジルエーテルーオルト−アミノ−アニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−トリブトフィル−オルトーアミノ−アニリド、α−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−チロシニル−Ｏ−２，５−ジクロロベンジルエーテル−オルト−アミノ−アニリド、またはα−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ −バリル−オルト−アミノ−アニリド。
３４．以下の式で表されるペプチド： ▲数式、化学式、表等があります▼ およびその塩であり、ここでＲ１、Ｒ３、およびＲ４は請求項１に記載したように定義され；それぞれのＸは、Ｘで表される少なくとも１個の原子がイオウであるという条件で、独立して、酸素またはイオウであり；そしてｎは１から４である、ペプチド。
３５．前記Ｘで表される１個の原子が、イオウであり、そして、前記Ｘで表される残りの原子が、それぞれ独立して、酸素である、請求項３４に記載のペプチド。
３６．前記ｎが３である、請求項３４に記載のペプチド。
３７．前記ｎが２である、請求項３４に記載のペプチド。
３８．以下の式を有する： ▲数式、化学式、表等があります▼ 請求項３４に記載のペプチド。
３９．以下の式を有する： ▲数式、化学式、表等があります▼ 請求項３４に記載のペプチド。
４０．以下の式を有する： ▲数式、化学式、表等があります▼ 請求項３４に記載のペプチド。
４１．以下の式を有する： ▲数式、化学式、表等があります▼ 請求項３４に記載のペプチド。
４２．以下の式を有する： ▲数式、化学式、表等があります▼ 請求項３４に記載のペプチド。
４３．以下の式を有する： ▲数式、化学式、表等があります▼ 請求項３４に記載のペプチド。
４４．以下の式を有する： ▲数式、化学式、表等があります▼ 請求項３４に記載のペプチド。
４５．−置換保護アミノ酸オルト−アミノ−アニリドを選択的に製造する方法であって、不活性な有機溶媒中で、ペプチドカップリング剤の存在下に、式Ｃ６Ｈ４（ＮＨ２）２のオルトーフェニレンジアミンを、保護アミノ酸または保護ポリペプチドと接触させること、を包含する方法。
４６．前記アミノ酸オルトアミノアニリドが、以下の式により表され： ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＲ１は水素、または分枝または未分枝のＣ１からＣ４のアルキル基であり、該アルキル基は以下のものからなる群より選択される置換基により置換され得る：▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ａは−Ｏ−または−ＮＨ−、Ｄはベンジル基またはキサンテニル基、ｎは１または２である； ▲数式、化学式、表等があります▼ Ｅは−Ｈまたは−ＣＨ３、Ｇは−ＣＨτ、−Ｏ−または−Ｓ−、Ｊは−Ｓ−または−ＣＨ２−、Ｌは−ＣＨ３またはフェニル基である；▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＭおよびＴは同一であるかまたは異なってあり得、そして水素、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素からなる群から選択され、そしてＱは水素、ヒドロキシ基、または２ＣＩＺである、 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＶはカルボベンジルオキシ基またはトシル基である、または、 ▲数式、化学式、表等があります▼ である；Ｒ２は、ｔ−ブトキシ基、カルボベンジルオキシ基、クロロベンジルオキシ基、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル基、トシル基、トリチル基およびキサンテニル基からなる群から選択され；Ｒ３は水素メチル基、またはエチル基であり；またはＲ１とＲ３とは、それらが結合する炭素原子と共に、３から５の炭素原子を含むシクロアルキル環を形成し；Ｒ４は水素；またはＲ１とＲ４とは、それらが結合する炭素および窒素原子と共に、２より少なくないが６より多くない環内炭素原子を含む飽和複素環を形成し；そしてＲ５は水素、メチル基、エチル基、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、アミノ基、アミド基、アジド基、ヒドロキシ基、ヒドロキシメチル基、カルボキシ基、カルボキシメチル基、シアノ基、グアニド基、メルカプト基、およびニトロ基からなる群から選択される、請求項４５に記載の方法。
４７．前記有機溶媒が、ジクロロメタン、クロロホルム、Ｎ，Ｎ′−ジメチルホルムアミドおよびテトラヒドロフランからなる群から選択される、請求項４５に記載の方法。
４８．前記保護アミノ酸が以下の式により表され：▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＲ１は水素、または分枝または未分枝のＣ１からＣ４のアルキル基であり、該アルキル基は以下のものからなる群より選択される置換基により置換され得る：▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ａは−Ｏ−または−ＮＨ−、Ｄはベンジル基またはキサンテニル基、ｎは１または２である； ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｅは−Ｈまたは−ＣＨ３、Ｇは−ＣＨ２−、−Ｏ−または−Ｓ−、Ｊは−Ｓ−または−ＣＨ２−、Ｌは−ＣＨ３またはフェニル基である；▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＭおよびＴは同一であるかまたは異なってあり得、そして水素、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素からなる群から選択され、そしてＱは水素、ヒドロキシ基、または２ＣｌＺである、 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＶはカルボベンジルオキシ基またはトシル基である、または、 ▲数式、化学式、表等があります▼ である；Ｒ２はｔ−ブトキシ基、カルボベンジルオキシ基、クロロベンジルオキシ基、９ −フルオレニルメチルオキシカルボニル基、トシル基、トリチル基およびキサンテニル基からなる群から選択され；Ｒ３は水素、メチル基、またはエチル基であり；またはＲ１とＲ３とは、それらが結合する炭素原子と共に、３から５の炭素原子を含むシクロアルキル環を形成し；そしてＲ４は水素；またはＲ１とＲ４とは、それらが結合する炭素および窒素原子と共に、２より少なくないが６より多くない環内炭素原子を含む飽和複素環を形成する、請求項４５に記載の方法。
４９．前記ペプチドカップリング剤が、Ｎ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ，Ｎ′−カルボニルジイミダゾール（ｃａｒｂｏｎｙｌ　ｄｉｉｍｉｄｉａｏｌｅ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール、クロロギ酸エチルおよびクロロギ酸ベンジルからなる群から選択される、請求項４５に記載の方法。
５０．アミノ酸オルト−アミノ−チオアニリドを選択的に製造する方法であって、不活性な有機溶媒中で、アミノ酸オルトーアミノ−アニリドを、五硫化リン（ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ　ｐｅｎｔａｓｕｌｆｉｄｅ）および炭酸ナトリウムの組成物を含有する試薬と接触させること、を包含する方法。
５１．前記保護アミノ酸オルト−アミノチオ−アニリドが以下の式により表され： ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＲ１は水素、または分枝または未分枝のＣ１からＣ４のアルキル基であり、該アルキル基は以下のものからなる群より選択される置換基により置換され得る：▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、ここで、Ａは−Ｏ−または−ＮＨ−、Ｄはベンジル基またはキサンテニル基、ｎは１または２である； ▲数式、化学式、表等があります▼ Ｅは−Ｈまたは−ＣＨ３、Ｇは−ＣＨ２−、−Ｏ−または−Ｓ−、Ｊは−Ｓ−または−ＣＨ２−、Ｌは−ＣＨ３またはフェニル基である；▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＭおよびＴは同一であるかまたは異なってあり得、そして水素、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素からなる群から選択され、そしてＱは水素、ヒドロキシ基、または２ＣＩＺである、 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＶはカルボベンジルオキシ基またはトシル基である、または、 ▲数式、化学式、表等があります▼ である；Ｒ２はｔ−ブトキシ基、カルボベンジルオキシ基、クロロベンジルオキシ基、９ −フルオレニルメチルオキシカルボニル基、トシル基、トリチル基およびキサンテニル基からなる群から選択され；Ｒ３は水素、メチル基、またはエチル基であり；またはＲ１とＲ３とは、それらが結合する炭素原子と共に、３から５の炭素原子を含むシクロアルキル環を形成し；Ｒ４は水素；またはＲ１とＲ４とは、それらが結合する炭素および窒素原子と共に、２より少なくないが６より多くない環内炭素原子を含む飽和複素環を形成し；そしてＲ５は水素、メチル基、エチル基、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、アミノ基、アミド基、アジド基、ヒドロキシ基、ヒドロキシメチル基、カルボキシ基、カルボキシメチル基、シアノ基、グアニド基、メルカプト基、およびニトロ基からなるクラスから選択される、請求項５０に記載の方法。
５２．前記溶媒が、ジエチルエーテルおよびテトラヒドロフランからなる群から選択される、請求項５０に記載の方法。
５３．以下の式の、保護１−アミノチオアシルベンズイミジゾイル−２−オンを選択的に製造する方法であり：▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＲ１は水素、または分枝または未分枝のＣ１からＣ４のアルキル基であり、該アルキル基は以下のものからなる群より選択される置換基により置換され得る：▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、ここで、Ａは−Ｏ−または−ＮＨ−、Ｄはベンジル基またはキサンテニル基、ｎは１または２である； ▲数式、化学式、表等があります▼ Ｅは−Ｈまたは−ＣＨ３、Ｇは−ＣＨ２−、−Ｏ−または−Ｓ−、Ｊは−Ｓ−または−ＣＨ２−、Ｌは−ＣＨ３またはフェニル基である；▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＭおよびＴは同一であるかまたは異なってあり得、そして水素、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素からなる群から選択され、そしてＱは水素、ヒドロキシ基、または２ＣＩＺである、 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＶはカルボベンジルオキシ基またはトシル基である、または、 ▲数式、化学式、表等があります▼ である；Ｒ２はｔ−ブトキシ基、カルボベンジルオキシ基、クロロペンジルオキシ基、９ −フルオレニルメチルオキシカルボニル基、トシル基、トリチル基およびキサンテニル基からなる群から選択され；Ｒ３は水素、メチル基、またはエチル基であり；またはＲ１とＲ３とは、それらが結合する炭素原子と共に、３から５の炭素原子を含むシクロアルキル環を形成し；Ｒ４は水素；またはＲ１とＲ４とは、それらが結合する炭素および窒素原子と共に、２より少なくないが６より多くない環内炭素原子を含む飽和複素環を形成し；そしてＲ５は水素、メチル基、エチル基、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、アミノ基、アミド基、アジド基、ヒドロキシ基、ヒドロキシメチル基、カルボキシ基、カルボキシメチル基、シアノ基、グアニド基、メルカプト基、およびニトロ基からなる群から選択され、請求項１２に記載されたように定義されたアミノ酸オルトアミノチオアニリドを、不活性なエーテル性（ｅｔｈｅｒａｌ）溶媒の存在下で、カルボニルジトリアゾールと接触させること、を包含する方法。
５４．以下の式の、保護１−アミノチオアシルベンズイミダゾイル−２−オンを選択的に製造する方法であり；▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＲ１は水素、または分枝または未分枝のＣ１からＣ４のアルキル基であり、該アルキル基は以下のものからなる群より選択される置換基により置換され得る；▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ａは−Ｏ−または−ＮＨ−、Ｄはベンジル基またはキサンテニル基、ｎは１または２である； ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｅは−Ｈまたは−ＣＨ３、Ｇは−ＣＨ２−、−Ｏ−または−Ｓ−、Ｊは−Ｓ−または−ＣＨ２−、Ｌは−ＣＨ３またはフェニル基である；▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＭおよびＴは同一であるかまたは異なってあり得、そして水素、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素からなる群から選択され、そしてＱは水素、ヒドロキシ基、または２ＣＩＺである、 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＶはカルボベンジルオキシ基またはトシル基である、または、 ▲数式、化学式、表等があります▼ である；Ｒ２は、ｔ−ブトキシ基、カルボベンジルオキシ基、クロロベンジルオキシ基、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル基、トシル基、トリチル基およびキサンテニル基からなる群から選択され；Ｒ３は水素、メチル基、またはエチル基であり；またはＲ１とＲ３とは、それらが結合する炭素原子と共に、３から５の炭素原子を含むシクロアルキル環を形成し；Ｒ４は水素；またはＲ１とＲ４とは、それらが結合する炭素および窒素原子と共に、２より少なくないが６より多くない環内炭素原子を含む飽和複素環を形成し；そしてＲ５は水素、メチル基、エチル基、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、アミノ基、アミド基、アジド基、ヒドロキシ基、ヒドロキシメチル基、カルボキシ基、カルボキシメチル基、シアノ基、グアニド基、メルカプト基、およびニトロ基からなるクラスから選択され、請求項１２に記載されたように定義されたアミノ酸オルトアミノチオアニリドを、不活性なエーテル性溶媒の存在下で、２，４，６−コリジンと接触させること、を包含する方法。
５５．チオアミド結合を選択的に製造する方法であって、不活性溶媒の存在下で、保護アミノ酸または保護ペプチドを、請求項１に記載されたように定義されたチオアシル化試薬と接触させること、を包含し、該保護アミノ酸または保護ペプチドは遊離のアミノ基を有している、方法。
５６．チオアミド結合を選択的に製造する方法であって、該方法は、不活性溶媒の存在下で、保護アミノ酸または保護ペプチドを、請求項１に記載されたように定義されたチオアシル化試薬と接触させること、を包含する固相ペプチド合成法を用い、該保護アミノ酸または保護ペプチドは遊離のアミノ末端を有し、またそのカルボキシ末端で不溶性かつ不活性の樹脂に適切に結合されている、方法。
５７．前記溶媒がアセトニトリル、ジクロロメタン、ジエチルエーテル、Ｎ，Ｎ ′−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドおよびテトラヒドロフランからなる群から選択される、請求項５５に記載の方法。
５８．前記溶媒がアセトニトリル、ジクロロメタン、ジエチルエーテル、Ｎ，Ｎ ′−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドおよびテトラヒドロフランからなる群から選択される、請求項５６に記載の方法。