JPH05509227A - 色素 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 色素 本発明は、天然源から抽出可能なカロチノイド色素に関する。

独特なピンク又は赤の色を天然サケの肉に与えるアスタキサンチンの、費用に対 し最も効率のよい天然源に対する需要がある。今日、サケ科の魚は広範囲に養殖 されており、天然と同じ肉色を有するそのような魚の商業的需要がある。

アスタキサンチンは、甲殻類のような種々の海洋動物に生ずるが、そのような起 源からの抽出は、経済的ではない。アスタキサンチンを合成することも可能であ るが、その合成は費用がかかり、さらにそのような合成の色素の使用は、多くの 消費者が望ましいと考える「天然」の意味合いを伝えない。

アスタキサンチンは特定の植物、特にアトニス属（ｇｅｎｕｓ　Ａｄｏｎｉｓ） に属する特定の種に生じる。１つのそのような種は、アトニス・エステイパリス （Ａｄｏｎｉｓａｅｓｔｉｖａｌｉｓ　）であり、鮮紅色の花弁にもっばらアス タキサンチンを生じる。しかし、アトニス・エステイパリスの報告された野生株 は非常に少ししか花弁を有さない頭状花序を有し、その植物の全量に比してアス タキサンチン色素の割合が余りに小さすぎてその色素のために実際的な商業的規 模で栽培し抽出することができない。

本発明により、実質的に、より重い頭状花序を有する、実質的に、より多数の花 弁を有するアトニス・ニスティパリスの新規な純種を見出だした。前記植物にお けるアスタキサンチン色素の割合は、商業的に魅力のある色素を抽出する目的の ためにその植物を栽培するのに十分に高い。

本発明は、頭状花序当りの平均花弁数が１０以上、より特定すると１６以上であ る、アスタキサンチンを含有する花弁を有するアトニス属の植物を提供する。

本発明は、又、頭状花序当りのアスタキサンチン量が１５０μｇ以上、より特定 すると２００μｇ以上である、アスタキサンチンを含有する花弁を有するアトニ ス属の植物を提供する。

本発明は、アスタキサンチンを得るためのそのような植物の栽培、そのような植 物からのアスタキサンチンの抽出及びそうして得られたアスタキサンチンを包含 する。

アスタキサンチンの抽出は、有機溶媒を用いて行うのが好ましく、水混和性溶媒 （エタノールのような）と水不混和性溶媒（ヘキサンのような）から成る混合溶 媒を用いることがより好ましい。

収穫した植物物質を最初に水又は水性媒体で抽出し、配糖体のような水溶性化合 物を除去する。

本発明は特に、１６以上の平均頭状花序花弁数を有するアトニス・エステイパリ スを栽培し、収穫し、収穫した頭状花序又はその花弁からアスタキサンチンを抽 出する、アスタキサンチンを得る方法を提供する。

本発明の重要な実施態様は、その種子のサンプルを１９９０年７月１８日にアバ ディーンのナショナル・コレクション・オブ・インダストリアル・アンド・マリ ーン・バクテリア・リミテッド（Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ　ｏ ｆＩｎｄｕｓｔｒｉａｌ　ａｎｄ　Ｉ（ａｒｉｎｅ　Ｖａｃｔｅｒｉａ　Ｌｉｍ １ｔｅｄ　）に受託番号ＮＣＩＭＢ　４０３０９でブダペスト条約の規定に基づ いて寄託した、アトニス・エステイパリスの新しく見出だされた株である。本発 明は、寄託した株の本質的特徴を有するアトニス・エステイパリス種の植物も包 含する。この寄託された株の植物は一般的に頭状花序当り１８乃至２２の平均花 弁数を有し、頭状花序当りのアスタキサンチンの平均量は２００乃至３５０μｇ である。

本発明は又、寄託された株の本質的特徴を有する植物の花弁からアスタキサンチ ンを抽出するアスタキサンチンを得る方法も提供する。

本発明は特に、前記の抽出されたアスタキサンチンを含む、魚への投与用の経口 組成物及び、前記組成物の魚への経口投与を包含する、魚、特にサケ属の魚の肉 を着色する方法を提供する。

前記組成物は食用飼料物質と混合されたアスタキサンチンを含むことが好ましい 。その代わりとしてアスタキサンチンは包封された形態でもよい。

他の方法としては、前記植物のアスタキサンチン含有部分を魚に飼料として与え ることにより魚の肉の着色を達成する。その部分は花弁を含むのが好ましく、す べて花弁から成るのがより好ましい。所望なら、所望のアスタキサンチンの多く の量を除去せずに魚又は他の動物にとって有毒になり得る配糖体のような水溶性 化合物を除去するために水又は水性媒体で抽出し得る。

養殖魚の着色において、本発明により得られたアスタキサンチンを従来の起源か ら誘導されたアスタキサンチン用にすでに用いられている技術と同様な方法で魚 に経口的に投与できる。通常は、前記色素は、養殖される魚の常用飼料の全部又 は一部を形成するペレット化された化合物飼料のような組成物中に含有される。

当該色素は油溶性であり、遊離の油として又は包封された油としてのどちらかと してこの形態で常用飼料に混合され得る。

その代わりとして、花弁又は、アスタキサンチンを含有する他の植物物質を従来 の魚の飼料成分と一緒に混合される（例えば、乾燥され、粉砕された形態で）。

所望なら、飼料に添加する前に当該植物物質を、水性媒体で部分的に抽出する（ 配糖体のような水溶性成分を除去するために）。その他の代わりとして、もし、 魚が完成飼料を経由して摂取する量において、用いられる有機溶媒が魚にとって 有毒でないなら当該色素を、例えば植物物質からのアスタキサンチンの抽出の間 に得られる溶液のような有機溶液の形態で飼料に添加し得る。

飼料を経由して魚にアスタキサンチンが投与される場合、飼料の組成は特別なも のである必要はない。飼料配合物には、魚粉及び／又は他の蛋白質、魚油のよう な油、穀類、ビタミン類、ミネラル類、保存剤及び薬剤のような、通常の魚の飼 料成分なら何でも、通常用いられる種々の割合で含有できる。

抽出されたアスタキサンチン又は、植物のアスタキサンチン含有部分を人間用の 食料品における着色料として用いることもでき、又、卵黄の色を強めるための家 禽の飼料においても用いることができる。

本発明の特定の実施態様を例示のために詳細に述べる。

アトニス−エステイパリスの新規な株 新規に見出だされた株の本質的特徴は、染色体数２ｎ＝３２であり、 直立した、−年性の、互生葉の（ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｌｅａｖｅｓ）　、別 状に、葉緑の線状又は糸状部分への切れ込みが特に深い（ｐｉｎｎａｔｅｌｙ　 ｄｉｓｓｅｃｔｅｄ　１ｎｔｏ　１ｉｎｅａｒ　ｏｒｆｉｌｏｆｏｒｍ　ｓｅｇ ｍｅｎｔ　）。

花は鮮紅色、放射相称、下生、両性孔、半生で、茎及び枝の末端につく。

１５ｍｍ未満の長さで背片の２倍以下の長さの花弁。背丈は５乃至８本。花弁は １８乃至２２枚。

これらの特質の評価及び、頭状花序当りのアスタキサンチン量の評価は、１．０ ００の植物からの最初に完全に開花した頭状花序の分析からなされる。

熟した痩果は３乃至５ｍｍの、くちばし状部から離れた、集軸とは反対側の表面 上に歯状突起。痩果は中央付近を通る横断隆起を有する。痩果は、くちばし状部 から少し離れて集軸とは反対側のこぶも有する。

栽培 当該植物は広範囲の温度条件下で成育できる。発芽は１０乃至２０℃の変温を必 要とする。成熟した、開花した植物が、種々の土の条件において１５０植物／ｒ ＩＫ以下の畑密度で種蒔きした後４か月で得られた。夏（温帯気候）に開花。当 該植物は、乾燥し、よく廃水された条件を好む。

種子はコンバインにより収穫し、花は手で収穫する。色素の抽出 色素を、例えばエタノール／ヘキサンのような混合溶媒への溶媒抽出により抽出 し、さらに水で混合溶媒を分割することによって、続いてカラムクロマトグラフ ィーによって精製した。このように精製した最終的な抽出物はカロチノイドに富 んでおり、大部分がアスタキサンチンであり、一般的にパルミチン酸のモノ及び ジエステルの形態でのラセミ混合物として主に存在する。

典型的な出発物質 頭状花序の凍結した塊を暗室で一２０℃で貯蔵するか又は乾燥し、微細に粉砕し た花弁／頭状花序を暗室で低温で貯蔵した。

一次抽出 １０容量のヘキサン／エタノール（５０・５０容量／容量）と混合し、分散させ 、暗い冷温条件下で剪断配合機を用いて１０分間均質化するか又は、剪断配合機 でエタノール中で粉砕し、その後に安全性のためにヘキサンを添加する。

暗い冷温条件下で１晩放置する。

振動篩上のフィルター（モスリン）を通して濾過し、５０　：　５０のエタノー ル／ヘキサンを用いてプラグを洗浄する。−次抽出物として、濾過した液体及び 洗液を保持する。この−次抽出物は、色素及び配糖体を含む、水溶性、エタノー ル溶性及びヘキサン溶性物質を含有する。

二次抽出 ２．５部の一次抽出物に１部の水を添加し、相分離機に移し、底部のエタノール 層を除去する。上部のヘキサン層を１＝１のエタノール／水混合物で洗浄し、分 離させ、低部層を捨てる。

蒸気ジャケット付き真空蒸発器（サイクロンを有する）に移し、スラッジが得ら れるまで、４５℃で１５乃至３０分間ヘキサンを除去する。エタノールで洗浄し 、蒸発させ、ヘキサンで洗浄し、蒸発させて（再び低温で真空下又は窒素下で） 乾燥させる。これにより、約５％の総色素（８０％アスタキサンチン）の第一濃 縮体が乾燥体として得られる。

ヘキサン中に入れ、シリカカラム（１：１又は２：１の抽出物対シリカ）にかけ る。暗い冷温条件下でカラムをヘキサンで洗浄し、洗浄液を捨てる。光種バンド が現れるまでヘキサン中２．５％のエタノールで溶出する。色が橙緑色に変化す るまで光種洗浄液を回収する。

前記のように乾燥溶離物質（ｅｌｕｅｎｔ）をヘキサン又は油（魚油、植物油） 中に入れる。これにより、約８０％のアスタキサンチンを含有する約２０％の総 色素の第二濃縮体が得られる。

魚粉　７５．０ 植物蛋白質　５．０ 穀類　７．８ 魚油　１１．０ ミネラル／ビタミン類　１．０ 抗酸化剤／保存剤　０．２ 色素混合 本発明のアトニス株からのアスタキサンチン色素を例えば１乃至１１００ｐｐの 量で種々の方法：ａ）任意に抗酸化剤を含有する魚油基礎材料中に担持された抽 出アスタキサンチンとして、 ｂ）小麦粉又はいずれかの微細に粉砕されたサケ用飼料中にサラサラした粉末と して担持された抽出アスタキサンチンとして、 ｃ）（ｂ）の方法でしかし、アルギン酸塩、ゼラチン又はキサンタンガム中に盤 層水砕（ｐａｎ　ｇｒａｎｕｌａｔｉｏｎ　）又は噴霧冷却により包封されたも のとして、ｄ）包封された脂質、例えばカゼイン保護脂質中薯こ担持された抽出 アスタキサンチンとして、 で常用飼料に添加することができる。

１隻 本発明の、寄託されたアトニス株から抽出されたアスタキサンチンを５０乃至１ １００ｐｐ含有し、上記の生成物形態の１つにおいて担持される典型的なサケ育 成飼料配合物をペレットとして３００ｇの生体重の魚に飼料として最少期間３ケ 月間与えた。市販の合成アスタキサンチンと比較した場合、着色有効性のための 典型的な値ｌよ合成物質の約８０％以上であった。

当業者は、前記の抽出操作、常用飼料配合物、給飼型及びその他の詳細を本発明 の精神から逸脱することなく多くの変更に付することができることを容易１こ認 識するであろう。

要約書 頭状花序当り平均１８乃至２２の花弁を有し、頭状花序当り　２００乃至３５０ ｇｇのアスタキサンチン色素を含有するアトニス・エステイパリスの新規な株を 栽培し、回収し、抽出して天然のアスタキサンチン源を供給する。抽出されたア スタキサンチン又は収穫されたアスタキサンチン含有植物物質を例えばサケ真黒 の常用飼料において用いられ、魚の肉の適した着色を増大する。

補正書の写しく翻訳文）提出書（特許法第１８４条の８）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １　頭状花序当り平均１０以上の花弁を有するアドニス（ａｄｏｎｉｓ）属植物 からアスタキサンチンを抽出する、アスタキサンチンを生産する方法。 ２　当該植物が頭状花序当り平均１６以上の花弁を有する、請求項１に記載の方 法。 ３　頭状花序当り平均１８乃至２２の花弁を有するアドニス・エステイパリス（ Ａｄｏｎｉｓａｅｓｔｉｖａｌｉｓ）種植物からアスタキサンチンを抽出する、 アスタキサンチンを生産する方法。 ４　ＮＣＩＭＰ４０３０９株植物からアスタキサンチンを抽出する、アスタキサ ンチンを生産する方法。 ５　前記植物を栽培し、頭状花序を収穫し、収穫した頭状花序又はその花弁から アスタキサンチンを抽出することを含む、請求項１乃至４のいずれか１請求項に 記載の方法。 ６　アスタキサンチンの抽出を有機溶媒を用いて行う、請求項１乃至５のいずれ か１請求項に記載の方法。 ７　前記抽出を、水混和性有機溶媒及び水不混和性有機溶媒を含む混合溶媒を用 いて行う、請求項６に記載の方法。 ８　前記の収穫された植物物質を最初に水又は水性媒体で抽出して配糖体のよう な水溶性化合物を除去する、請求項６又は請求項７に記載の方法。 ９　請求項１乃至８のいずれか１請求項に記載の方法により生産されたアスタキ サンチン。 １０　頭状花序当り平均１０以上の花弁を有し、頭状花序当り１００μｇ以上の アスタキサンチンを含有する、アドニス属植物。 １１　頭状花序当り平均１６以上の花弁を有し、頭状花序当り平均１００μｇ以 上のアスタキサンチンを含有する、アドニス属植物。 １２　頭状花序当り平均１８乃至２２の花弁を有し、頭状花序当り平均２００乃 至３５０μｇのアスタキサンチンを含有する、アドニス・エステイパリス種植物 。 １３　ＮＣＩＭＢ４０３０９株植物。 １４　食用飼料物質と混合された、請求項１乃至８のいずれか１請求項に記載の 方法により生産されたアスタキサンチンを含む、魚の着色用組成物。 １５　包封された形態での、請求項１乃至８のいずれか１請求項に記載の方法に より生産されたアスタキサンチンを含む、魚の着色用組成物。 １６　請求項１４又は請求項１５に記載の組成物の経口投与を包含する、魚を着 色する方法。 １７　請求項１０乃至１３のいずれか１請求項に記載の植物から収穫された物質 を混合する、魚用飼料。 １８　請求項１０乃至１３のいずれか１請求項に記載の植物の、天然のアスタキ サンチン源としての使用。 １９　アスタキサンチン生産用の、請求項１０乃至１３のいずれか１請求項に記 載の植物の栽培。 ２０　請求項１０乃至１３のいずれか１請求項に記載の植物の収穫された頭状花 序又は花弁。