JPH0553144B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

〔技術分野〕 本発明は、絹タンパク質を外表面に有すること
により、細胞が付着しやすいことを特徴とする皮
膚貫通管に関するものである。 皮膚貫通管とは、血液、輸液、透析液、電気な
どを体外へ導出あるいは体内へ導入するために用
いられる管状物で、長期間にわたり皮膚を貫通し
て使用するものである。例えば、血液透析におけ
る外シヤント、カテーテル、腹膜透析用チユー
ブ、人工中耳のための電気コードなどを包含する
ものである。 〔従来技術〕 従来、皮膚貫通管はシリコーンゴム、ポリウレ
タン、ポリ塩化ビニル等の合成高分子材料を用い
て作成されているが、これらの材料を用いた皮膚
貫通管では、その材料表面に細胞が付着しにく
く、管の外表面と皮膚の上皮組織とが密着せず、
この部分で菌感染が起こる。したがつて、皮膚貫
通管においては細胞が付着・増殖する材料が求め
られている。 〔目的〕 本発明は、上記の問題を、絹タンパク質を用い
ることにより、細胞付着性の多い皮膚貫通管を提
供することを目的とする。 〔構成〕 本発明は、絹タンパク質により外表面が形成さ
れており、かつ該タンパク質は結晶質を含み、水
不溶性であることを特徴とする皮膚貫通管であ
る。 本発明者は、細胞の付着・増殖しやすい性質を
有する材料の開発について種々研究を重ねた結
果、絹タンパク質を見出し、その結晶化度を増
し、不溶化させることにより、細胞に対して付
着・増殖性を有する皮膚貫通管を作成できること
を見出し、本発明を完成するに至つた。 本発明の皮膚貫通管は、絹タンパク質水溶液か
ら目的とする管状に成形するか、又はあらかじめ
他の高分子材料で管状に成形した後、その表面に
絹タンパク質をコーテイングすることによつて製
造することができる。ただし、このままでは非晶
質で水溶性を示す。本発明では、この絹タンパク
質を結晶化し、絹タンパク質成形体あるいは絹タ
ンパク質のコーテイング層中に結晶質を含有さ
せ、水不溶性のものとする。 絹タンパク質を結晶化させるにはエタノールや
メタノール等の絹タンパク質に対する貧溶媒を用
いて行うことができる。絹タンパク質を表面にコ
ーテイングするために用いる高分子材料にはシリ
コーンゴム、ポリテトラフルオロエチレン、ポリ
ウレタン、ポリ塩化ビニルなどがあり、無孔質あ
るいは多孔質の管壁をもつ管状物である。 原料として用いる絹タンパク質はフイブロイ
ン、セリシン、及びそれらの混合物であり、家蚕
あるいは野蚕由来のものでもよい。また絹タンパ
ク質溶液は、熟蚕体内の絹糸腺より取り出した液
状絹タンパク質を用いることができるし、吐糸繊
維から再生した絹タンパク質を溶液化したもので
もよい。 絹タンパク質の結晶化処理は、溶媒と水からな
る混合液中で、絹タンパク質成形体あるいは絹タ
ンパク質コーテイング層を浸漬処理した後、乾燥
することによつて実施することができる。この場
合、混合溶液の組成、温度、処理時間によつて、
その結晶化度は異なるが、少なくとも10％、好ま
しくは15−80％の範囲に規定するのがよい。乾燥
温度は５−80℃である。 〔実施例〕 次に本発明を実施例によりさらに詳細に説明す
る。 実施例 １ 桑葉で飼育した家蚕（日137号×支137号）の熟
蚕体内より、液状絹タンパク質が多量に蓄積され
ている中部絹糸腺を取り出し、蒸留水で十分水洗
いした後、絹糸腺細胞を除去した。そして絹糸内
液状絹タンパク質を所定の時間、25℃で蒸留水に
分散させた。すなわち、30分、1.5時間、2.5時
間、ならびに４時間の分散時間に対応して得られ
た絹タンパク質水溶液をそれぞれＡ，Ｂ，Ｃ，及
びＤとした。これらの絹タンパク質水溶液の濃度
を0.2−0.3％になるように蒸留水で希釈あるいは
濃縮させて調製した。 実施例 ２ 実施例１で得た新鮮な絹タンパク質水溶液
（Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ）中に、エタノールで洗浄し乾
燥したポリスチレンフイルム（９×９×0.02mm）
を浸漬した。25℃で１時間経過後そのポリスチレ
ンフイルムをその溶液から引き上げ、過剰の液滴
を除去して25℃で乾燥した。このようにして絹タ
ンパク質を表面に被覆させたポリスチレンフイル
ムを25℃の50体積％メタノール水溶液中に１時間
浸漬して結晶化処理し、その後温度25℃で乾燥し
た。 次に、この絹タンパク質を表面に被覆させたフ
イルム上に、マウス由来の繊維芽細胞L929を含
む培養液（約10万個／ml）を接触させたまま、炭
酸ガス濃度５％、湿度100％、37℃のインキユベ
ータ内に静置した。培養液は10％の牛胎児血清含
むEagle MEMを用いた。17時間後及び50時間
後、そのフイルム上に付着している細胞の量をク
リスタルバイオレツトを用いた核染色法により定
量した。 比較のため、ポリスチレンフイルム及びシリコ
ーンゴムを用いて、同様の細胞の付着試験を行つ
た。これらのフイルムに付着した細胞の量を標準
試料（和光純薬工業株式会社製組織培養用プラス
チツクシート）に付着した細胞の量で割ることに
より、細胞付着率を求めた。その結果を第１表に
示す。 実施例 ３ 実施例１の４種類の絹タンパク質水溶液中にポ
リ塩化ビニル製チユーブ（直径約５mm）を浸漬
し、１時間後そのチユーブを取り出し乾燥した。
このチユーブを25℃の50体積％メタノール水溶液
中に１時間浸漬して結晶化処理し、その後25℃で
乾燥して、絹タンパク質を外表面に有する管状物
を得た。 実施例 ４ 実施例１の４種類の絹タンパク質水溶液をセル
ロース製多孔質フイルター（孔径0.1μ）で、減圧
下濾過を行い、そのフイルターを25℃で乾燥し
た。 このフイルターを25℃の50体積％メタノール水
溶液中に浸漬して結晶化処理し、その後、25℃で
乾燥して、絹タンパク質を多孔質フイルター表面
に保持できた。 実施例 ５ 実施例２において得られた細胞の付着したフイ
ルムをエタノール系列で脱水し、乾燥した。その
フイルム表面上に付着した細胞の形態を、走査型
電子顕微鏡で観察した。この結果、絹タンパク質
を被覆させた試料に付着した細胞は、十分に伸展
しており、試料表面にしつかりと付着していた。
一方、ポリスチレンフイルム及びシリコーンゴム
表面に付着した細胞はほとんど伸展していないこ
とが観察された。 〔効果〕 以上説明したように、本発明の皮膚貫通管は、
極めて多量の細胞を付着し、増殖させることがで
き、かつ、この皮膚貫通管を任意の形状で得るこ
とができる。

【表】

【表】

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ 絹タンパク質により外表面が形成されてお
   り、かつ該タンパク質は結晶質を含み、水不溶性
   であることを特徴とする皮膚貫通管。