JPH0592995A - 〔Ｎｌｅ８ ，Ｎｌｅ１８， Ｔｙｒ３４〕−ｈ−ＰＴＨ（１−３４）ＮＨ２ の１２５ Ｉ標識放射活性体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】この化合物は副甲状腺機能検査のための標識化
合物として有用である。 【構成】 式 Ｈ−配列番号：１−ＮＨ₂ で表されるペプチドの３４番目のＴｙｒが１〜２個の
¹²⁵ Ｉで標識された放射活性体である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、新規なヒト副甲状腺ホ
ルモン（ｈ−ＰＴＨ）誘導体に関する。さらに詳しく
は、本発明は、副甲状腺機能検査のための標識化合物と
して有用な〔Ｎｌｅ⁸ ，Ｎｌｅ¹⁸，Ｔｙｒ³⁴〕−ｈ−Ｐ
ＴＨ（１−３４）ＮＨ₂ 、即ち式 Ｈ−配列番号：１−ＮＨ₂ 〔Ｉ〕 （式中、ＳｅｒはＬ−セリン、ＶａｌはＬ−バリン、Ｇ
ｌｕはＬ−グルタミン酸、ＩｌｅはＬ−イソロイシン、
ＧｌｎはＬ−グルタミン、ＬｅｕはＬ−ロイシン、ＮＩ
ｅはＬ−ノルロイシン、ＨｉｓはＬ−ヒスチジン、Ａｓ
ｎはＬ−アスパラギン、Ｇｌｙはグリシン、ＬｙｓはＬ
−リジン、ＡｒｇはＬ−アルギニン、ＴｒｐはＬ−トリ
プトフアン、ＡｓｐはＬ−アスパラギン酸、ＴｙｒはＬ
−チロシンを示す〕で表されるペプチドの３４番目のＴ
ｙｒが１〜２個の¹²⁵ Ｉで標識された放射活性体（以
下、単に¹²⁵ Ｉ標識放射活性体と称することがある）で
ある。

【０００２】

【従来の技術】ｈ−ＰＴＨは８４個のアミノ酸よりなる
ペプチドホルモンで、その生物学的活性はアミノ酸順位
１−３４のＮ末端フラグメント、即ちｈ−ＰＴＨ（１−
３４）に有ると報告されている〔Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａ
ｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，６８，６３〜６７）
（１９７１）〕。しかしながら、ｈ−ＰＴＨはＬ−メチ
オニン（Ｍｅｔ）が存在するため不安定であり、¹²⁵ Ｉ
で標識するとホルモン活性が失われる〔Ｒｅｃｅｎｔ
Ｐｒｏｇ．Ｈｏｒｍｏｎｅ Ｒｅｓ．，１８，２６９〜
２９５（１９６２）〕。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】従来のｈ−ＰＴＨの定
量法では、ｈ−ＰＴＨ活性を有する部分のみを定量する
ために、ｈ−ＰＴＨ（１−３４）を抗原とした特異抗体
が調製されるようになった。しかしながら、ｈ−ＰＴＨ
（１−３４）は、Ｌ−メチオニン（Ｍｅｔ）が存在する
ため不安定であり、¹²⁵ Ｉで標識化する際、８位および
１８位に存在するＭｅｔが酸化されてホルモン活性が失
活するという欠点があった。

【０００４】そこで、ＰＴＨ活性を有し、ＰＴＨの抗体
に対して免疫活性を有するのみならず、¹²⁵ Ｉで標識化
してもホルモン活性が安定であり、且つ安定な放射活性
を有するｈ−ＰＴＨ誘導体として、８位および１８位の
ＭｅｔをＬ−ノルロイシンに換え、３４位のＬ−フエニ
ルアラニンをＬ−チロシンに換えた〔Ｎｌｅ⁸ ，Ｎｌｅ
¹⁸，Ｔｙｒ³⁴〕−ｈ−ＰＴＨ（１−３４）が見出された
〔特開昭５５−１１３７５３号〕。

【０００５】しかしながら、この〔Ｎ１ｅ⁸ ，Ｎｌ
ｅ¹⁸，Ｔｙｒ³⁴〕−ｈ−ＰＴＨ（１−３４）は、その分
子内にＭｅｔが存在しないため、¹²⁵ Ｉで標識しても失
活しないが、そのホルモン活性は高々天然型ｈ−ＰＴＨ
（１−３４）と同程度の活性を有するに過ぎなかった。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本目的化合物〔Ｉ〕はＰ
ＴＨのレセプターに対し公知のｈ−ＰＴＨ（１−３４）
および〔Ｎｌｅ⁸ ，Ｎｌｅ¹⁸，Ｔｙｒ³⁴〕−ｈ−ＰＴＨ
（１−３４）よりも強い親和力を有し、約１．５〜２倍
のｈ−ＰＴＨ活性を有するのみならず、ＰＴＨの抗体に
対しても免疫活性を有し、¹²⁵ Ｉで標識してもホルモン
活性は低下せず、〔Ｎｌｅ⁸ ，Ｎｌｅ¹⁸，Ｔｙｒ³⁴〕−
ｈ−ＰＴＨ（１−３４）より約２倍の放射活性を有して
おり、長期の保存においても生物活性が低下しないた
め、公知のｈ−ＰＴＨ（１−３４）、〔Ｎｌｅ⁸ ，Ｎｌ
ｅ¹⁸，Ｔｙｒ³⁴〕−ｈ−ＰＴＨ（１−３４）より極めて
優れた効果を発揮する。このため、本目的化合物〔Ｉ〕
は副甲状腺機能検査のための標識化合物として極めて有
用なペプチドである。

【０００７】本発明のペプチド〔Ｉ〕は、Ｃ末端チロシ
ル基のカルボキシル基をアミド基に転化し、式〔Ｉ〕で
示されるアミノ酸順序に個々の保護されたアミノ酸およ
び（または）保護された低級ペプチドを液相合成法によ
り縮合し、縮合反応の最終段階でＮ末端のアミノ基の保
護基および側鎖の官能基の保護基を酸分解により脱離す
ることにより得られる。縮合反応自体はペプチド合成の
ための常法手段に従って、保護基の着脱、縮合反応を繰
り返すことにより行われる。即ち、本ペプチド〔Ｉ〕の
原料ならびにすべての中間体の製造において使用される
各種保護基はペプチド合成で既知なもの、従って加水分
解、酸水解、還元、アミノリシスまたはヒドラジノリシ
スの既知手段によって容易に脱離することのできる保護
基が用いられる。このような保護基はペプチド合成化学
の分野の文献ならびに参考書に記載されている。

【０００８】例えば、アミノ基に使用する保護基として
は、ホルミル基、トリフルオロアセチル基、フタロイル
基、ｐ−トルエンスルホニル基、ｏ−ニトロフエニルス
ルフェニル基などのアシル基、ベンジルオキシカルボニ
ル基、ｏ（またはｐ）−ブロモベンジルオキシカルボニ
ル基、ｏ（またはｐ）−クロロベンジルオキシカルボニ
ル基、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル基、ｐ−メ
トキシベンジルオキシカルボニル基などのベンジルオキ
シカルボニル基、トリクロロエチルオキシカルボニル
基、ｔ−ブチルオキシカルボニル基、ｔ−アミルオキシ
カルボニル基、ジイソプロピルメチルオキシカルボニル
基などの脂肪族オキシカルボニル基、２−フエニル−イ
ソプロポキシカルボニル基、２−トリル−イソプロポキ
シカルボニル基、２−ｐ−ジフエニル−イソプロポキシ
カルボニル基などのアラルキルオキシカルボニル基など
がある。また、これらアミノ基をベンゾイルアセトン、
アセチルアセトンなどの１，３−ジケトンと反応させる
ことによって得られるエナミンの形成により保護するこ
とができる。

【０００９】カルボキシル基は、アミド形成、ヒドラチ
ド形成またはエステル化によって保護される。即ちアミ
ド基は、３，４−ジメトキシベンジル基、ビス−（ｐ−
メトキシフエニル）メチル基などによって置換される。
ヒドラチド基はベンジルオキシカルボニル基、トリクロ
ロエチルオキシカルボニル基、トリフルオロアセチル
基、ｔ−ブチルオキシカルボニル基、トリチル基、２−
ｐ−ジフエニル−イソプロポキシカルボニル基などによ
って置換される。エステル基はメタノール、エタノー
ル、ｔ−ブタノール、シアノメチルアルコールなどのア
ルカノール、ベンジルアルコール、ｐ−ブロモベンジル
アルコール、ｐ−クロロベンジルアルコール、２，６−
ジクロロベンジルアルコール、ｐ−メトキシベンジルア
ルコール、ｐ−ニトロベンジルアルコール、ベンズヒド
リルアルコール、ベンゾイルメチルアルコール、ｐ−ブ
ロモベンゾイルメチルアルコール、ｐ−クロロベンゾイ
ルメチルアルコールなどのアラルカノール、２，４，６
−トリクロロフエノール、２，４，５−トリクロロフエ
ノール、ペンタクロロフエノール、ｐ−ニトロフエノー
ル、２，４−ジニトロフエノールなどのフエノール、チ
オフエノール、ｐ−ニトロチオフエノールなどのチオフ
エノールなどによって置換される。

【００１０】前記セリンおよびチロシンの水酸基は、例
えばエステル化またはエーテル化によって保護すること
ができる。このエステル化に適する基としては、例えば
アセチル基、ベンゾイル基、ベンジルオキシカルボニル
基、エチルオキシカルボニル基などである。またエーテ
ル化に適する基としては、例えばベンジル基、２，６−
ジクロロベンジル基、テトラヒドロピラニル基、ｔ−ブ
チル基である。これらの水酸基の保護には２，２，２−
トリフルオロ−１−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ
エチル基、２，２，２−トリフルオロ−１−ベンジルオ
キシカルボニルアミノ基も適する。しかしながら、これ
らの水酸基を必ずしも保護する必要はない。

【００１１】前記アルギニンのグアニジン基中のアミノ
基を保護するのに使用する基としては、例えばニトロ
基、トシル基、ベンジルオキシカルボニル基、メシチレ
ン−２−スルホニル基などであるが、このグアニジノ基
を必ずしも保護する必要はない。前記ヒスチジンのイミ
ノ基を保護するのに使用する基としては、例えばベンジ
ル基、トリチル基、ベンジルオキシカルボニル基、トシ
ル基、２，２，２−トリフルオロ−１−ｔ−ブチルオキ
シカルボニルアミノエチル基、２，２，２−トリフルオ
ロ−１−ベンジルオキシカルボニルアミノエチル基など
であるが、このイミノ基を必ずしも保護する必要はな
い。

【００１２】本発明においては、α−アミノ基の保護に
ｔ−ブチルオキシカルボニル基、ｔ−アミルオキシカル
ボニル基を用い、側鎖のアミノ基、即ちリジンのε−ア
ミノ基の保護にｏ−クロロベンジルオキシカルボニル基
を用い、α−カルボキシル基の保護にベンジルエステル
基、エチルエステル基、フエナシルエステル基を用い、
側鎖のカルボキシル基、即ちグルタミン酸、アスパラギ
ン酸の側鎖カルボキシシル基の保護にベンジルエステル
基を用い、セリンの水酸基の保護にベンジル基を用い、
チロシンの水酸基の保護に２，６−ジクロロベンジル基
を用い、アルギニンのグアニジン基中のアミノ基の保護
にトシル基またはメシチレン−２−スルホニル基を用い
るのが好ましい。

【００１３】本目的化合物〔Ｉ〕の合成においては、個
々のアミノ酸および（または）低級ペプチドの縮合は、
例えば保護されたα−アミノ基および活性化末端カルボ
キシル基をもつアミノ酸またはペプチドと遊離のα−ア
ミノ基および保護された末端カルボキシル基をもつアミ
ノ酸またはペプチドとを反応させるか、あるいは活性化
α−アミノ基および保護された末端カルボキシル基をも
つアミノ酸またはペプチドと遊離の末端カルボキシル基
および保護されたα−アミノ基をもつアミノ酸またはペ
プチドを反応させることにより、実施することができ
る。

【００１４】この場合、カルボキシル基は、例えば酸ア
ジド、酸無水物、酸イミダゾリドまたは活性エステル、
例えばシアノメチルエステル、チオフエニルエステル、
ｐ−ニトロチオフエニルエステル、ｐ−ニトロフエニル
エステル、２，４−ジニトロフエニルエステル、２，
４，５−トリクロロフエニルエステル、２，４，６−ト
リクロロフエニルエステル、ペンタクロロフエニルエス
テル、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル、Ｎ−ヒ
ドロキシフタル酸イミドエステルなどに変換することに
よって活性化することができる。またカルボジイミド、
例えばＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシル−カルボジイミド、
Ｎ−エチル−Ｎ’−３−ジメチルアミノプロピル−カル
ボジイミド、Ｎ，Ｎ’−カルボニル−ジイミダゾールま
たはイソオキゾリウム塩、例えばウッドワード反応剤な
どの縮合剤を使用して反応させることによって活性化す
ることができる。

【００１５】本発明において好ましい縮合方法は、アジ
ド法、活性エステル法およびカルボジイミド法である。
縮合の各段階ではラセミ化が起こらない方法またはラセ
ミ化が最少になる方法を用いるのが望ましく、好ましく
はアジド法、活性エステル法、ビュンシュ法〔Ｚ．Ｎａ
ｔｕｒｆｏｒｓｃｈ．，２１ｂ，４２６（１９６６）〕
またはガイガー法〔Ｃｈｅｍ Ｂｅｒ．，１０３，７８
８（１９７０）〕とりわけ縮合剤としてＮ−エチル−
Ｎ’−３−ジメチルアミノプロピル−カルボジイミド
（ＷＳＣ）を用いる変法などを用いるのが適する。

【００１６】縮合順序は式〔Ｉ〕で示されるアミノ酸順
序であれば、如何なる順序からも合成し得るが、Ｃ−末
端側から順次アミノ酸および（または）ペプチドを連結
せるのが好ましい。

【００１７】例えば、２９〜３４番目のアミノ酸順序か
らなるＣ末端フラグメントと２３〜２８番目のアミノ酸
からなるペプチドフラグメントを縮合させるのがよい。
このＣ−末端フラグメントとヘキサペプチド２３−２８
を縮合させるにはＷＳＣを用いるガイガー変法によって
行うのが適する。得られたＣ−末端フラグメント２３−
３４の前に１８〜２２番のアミノ酸順序からならなるペ
プチドフラグメントを連結させるのであるが、ＷＳＣを
用いるガイガー変法により行うのが適する。得られたＣ
−末端フラグメント１８−３４の前に順次１３〜１７番
のアミノ酸順序からならなるペプチドフラグメント、８
〜１２番のアミノ酸順序からならなるペプチドフラグメ
ント、１〜７番のアミノ酸順序からならなるペプチドフ
ラグメントを連結させるのが好ましい。

【００１８】上記の縮合反応におけるα−アミノ基の保
護基、例えばｔ−ブチルオキシカルボニル基、ｔ−アミ
ルオキシカルボニル基はトリフルオロ酢酸で脱離され
る。α−カルボキシル基の保護基、例えばエチルエスエ
ルはこれを希薄な水酸化ナトリウム溶液で分解し、また
はヒドラチドあるいはトリクロロエトキシカルボニルヒ
ドラチドのような保護ヒドラチドに変え、フエナシルエ
ステル基は酢酸中Ｚｎ粉末で分解し、またベンジルエス
テル基は無水弗化水素分解、水素添加分解によって分解
し、またはヒドラチドに変えることができる。

【００１９】こうして保護されたＮ末端α−アミノ基、
ε−アミノ基、側鎖カルボキシル基、グアニジノ基およ
び（または）水酸基を有するテトラトリアコンタペプチ
ドが得られる。これらの保護基は、好ましくは酸分解、
例えば無水弗化水素またはトリフルオロメタンスルホン
酸による方法によって一段階で脱離され、式〔Ｉ〕の目
的化合物が得られる。

【００２０】このようにして得られたペプチド〔Ｉ〕
は、ペプチドまたは蛋白質を精製する公知の手段によっ
て分離精製することできる。例えば、セファデックスＧ
−２５、セファデックスＧ−５０、セファデックスＬＨ
−２０などのゲル濾過剤を用いるゲル濾過、カルボキシ
メチルセルロース、イオン交換樹脂などを用いるカラム
クロマトグラフイー、高速液体クロマトグラフイー等に
より行うことができる。

【００２１】本発明のペプチド〔Ｉ〕は、その方法の条
件により塩基またはその塩の形で得られる。塩として
は、無機酸塩、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール
酸、コハク酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸などの有機
酸との塩である。

【００２２】さらに本発明のペプチド〔Ｉ〕の¹²⁵ Ｉ標
識放射活性体は、例えば、一定量の放射活性を有する
¹²⁵ Ｉ含有リン酸緩衝液（ｐＨ７．１）に前記ペプチド
〔Ｉ〕およびクロラミンＴを加えて攪拌し、次いで重亜
硫酸ナトリウムを加え、さらに少量のヨウ化カリウムお
よび血清アルブミンを加えてクロマトグラフイーを行
い、¹²⁵ Ｉで標識された分画を集めることにより、¹²⁵
Ｉで標識された放射活性体が得られる。

【００２３】上記¹²⁵ Ｉ標識放射活性体は、高速液体ク
ロマトグラフイー（ＨＰＬＣ）などの精製手段により精
製できる。得られた精製体は、３４番目のＴｙｒの側鎖
のベンゼン環の水素が¹²⁵ Ｉでモノまたはジ置換された
標識放射活性体である。本発明の¹²⁵ 標識放射活性体を
副甲状腺機能検査のための標識化合物として使用する場
合には、上記の¹²⁵ Ｉモノ置換体およびジ置換体は個々
に分離して使用してもよく、また分離せずに使用しても
よい。

【００２４】次に、本発明のペプチド〔Ｉ〕の¹²⁵ Ｉ標
識放射活性体の副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）活性につい
て述べる。 ＜¹²⁵ Ｉ標識体の調製＞２ｍＣｉの放射活性を有する
¹²⁵ Ｉ−ＮａＩを含有する０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ
７．１）５０μｌに各々ｈ−ＰＴＨ（１−３４）、ｈ−
ＰＴＨ（１−３４）ＮＨ₂ 、〔Ｎｌｅ⁸ ，Ｎｌｅ¹⁸，Ｔ
ｙｒ³⁴〕−ｈ−ＰＴＨ（１−３４）および〔Ｎｌｅ⁸ ，
Ｎｌｅ¹⁸，Ｔｙｒ³⁴〕−ｈ−ＰＴＨ（１−３４）ＮＨ₂
の２μｇ含有液１０μｌおよびクロラミンＴ（３．５mg
／ml）含有液２０μｌを加えて３０秒間攪拌した後、こ
れに重亜硫酸ナトリウム（４．５mg／ml）含有液５０μ
ｌを加えて反応を停止した。これに５％ヒト血清アルブ
ミン含有０．１Ｎ酢酸溶液０．５mlを加えた後、セファ
デックスＧ−１０のカラム（１×５０cm）にチャージ
し、上記酢酸溶液で溶出して¹²⁵ Ｉで標識した各被検品
の含有分画を得た。

【００２５】＜ＰＴＨ活性測定法＞ ＰＴＨレセプターの調製 ＳＤ系雄ラット（体重２００〜２５０ｇ）を断頭、放血
し、開腹の後、腎を摘出し、その表面皮膜を取り除き、
腎皮質部分を切り取り、氷冷する。以下の操作はできる
だけ低温（０〜４℃）下で行う。上記の腎皮質部分を
０．２５Ｍシュクロースおよび１ｍＭＥＤＴＡ含有１０
ｍＭトリス塩酸塩緩衝液（ｐＨ７．５）（以下Ａ液と称
す）中に浸し、テフロンペツスルを用いたガラス外套管
で腎皮質をその湿重量（ｇ）の３倍容量（ml）のＡ液を
加えてホモゲナイズする。このホモジネートを１５０Ｘ
ｇ、１０分間遠心分離し、その上清をさらに２２００Ｘ
ｇ、１５分間遠心分離する。上清を捨て、沈澱物の上層
の浮濁色の部分をＡ液に懸濁し、この懸濁液を２２００
Ｘｇ、１５分間遠心分離により洗浄し、再び懸濁して容
器に分注し、−７０℃で凍結して−２０℃で保存する。

【００２６】ＰＴＨとＰＴＨレセプターの反応 被検品を２μｇ／mlと１０μｇ／mlの濃度になるように
ＡＴＰＭｇ２ｍＭ、ＭｇＣｌ₂ １０ｍＭ、ＫＣｌ６０ｍ
Ｍ、ＧＴＰ２０μＭ、イソブチルメチルキサンチン１ｍ
Ｍ、クレアチンホスフエート８ｍＭおよび牛血清アルブ
ミン（ＢＳＡ）０．２％含有１００ｍＭトリス塩酸塩緩
衝液（ｐＨ７．５）（以下Ｂ液と称す）に溶かし、これ
を標準品牛ＰＴＨ（１−８４）について行う。

【００２７】これら４つの溶液を５０μｌづつガラス試
験管に分注し、各々８本づつ用意する。試料は氷水中に
保ち、ＡＴＰなど他の物質の分解を抑える。−２０℃に
保存したＰＴＨレセプター調製品を室温で解凍し、Ａ液
に予め溶かしておいたクレアチンキナーゼを加え、さら
にＡ液でクレアチンキナーゼ０．１mg／ml、ＰＴＨレセ
プター調製品蛋白量１．４mg／mlになるように調製し、
氷冷中で保つ。上記の分注された試料溶液を３７℃の恒
温槽に数分間つけた後に、上記のＰＴＨレセプター−ク
レアチンキナーゼ液を５０μｌづつ加え、３７℃で１０
分間インキュベートする。次いで、０．１Ｍ酢酸緩衝液
（ｐＨ４．０）１００μｌを加え、直ちに氷水中につけ
た後、速やかに試験管を沸騰水で１分間熱し、反応を停
止する。

【００２８】生成Ｃ−ＡＭＰの測定 上記の反応停止試料を蒸留水で１０〜３０倍に希釈し、
２０００ＸＧ、１５分間の遠心分離により除蛋白を行
う。その上清のｃ−ＡＭＰ量をＲＩＡキット（ヤマサ醤
油社製）で測定する。

【００２９】ＰＴＨ力価の測定 Ｃ−ＡＭＰの測定値をＰＭ／mgＰＴＨレセプター蛋白／
分の単位に換算し、これを反応の値とし、標準品によっ
て得られた値に対して被検品を平行線検定２×２点法を
用いて検定する。

【００３０】ＰＴＨ活性結果（Ｕ／mg）は表１の通り
である。

【表１】

【００３１】本明細書中に記載の略記号は次の意味を有
する。 Ｓｅｒ；Ｌ−セリン Ｖａｌ；Ｌ−バリン Ｇｌｕ；Ｌ−グルタミン酸 Ｉｌｅ；Ｌ−イソロイシン Ｇｌｎ；Ｌ−グルタミン Ｌｅｕ；Ｌ−ロイシン Ｎｌｅ；Ｌ−ノルロイシン Ｈｉｓ；Ｌ−ヒスチジン Ａｓｎ；Ｌ−アスパラギン Ｇｌｙ；グリシン Ｌｙｓ；Ｌ−リジン Ａｒｇ；Ｌ−アルギニン Ｔｒｐ；Ｌ−トリプトフアン Ａｓｐ；Ｌ−アスパラギン酸 Ｔｙｒ；Ｌ−チロシン Ｂｏｃ；ｔ−ブチルオキシカルボニル Ａｏｃ；ｔ−アミルオキシカルボニル Ｚ−Ｃｌ；ｏ−クロロベンジルオキシカルボニル Ｂｚｌ；ベンジル Ｂｚｌ−Ｃｌ₂ ；２，６−ジクロロベンジル Ｔｏｓ；トシル ＯＥｔ；エチルエステル ＯＢｚｌ；ベンジルエステル ＯＮＰ；ｐ−ニトロフエニルエステル ＯＰＡＣ；フエナシルエステル ＴＦＡ；トリフルオロ酢酸 ＴｏｓＯＨ；ｐ−トルエンスルホン酸 Ｅｔ₃ Ｎ；トリエチルアミン ＮＭＭ；Ｎ−メチルモルホリン ＴＢＡ；ｔ−ブチルアミン ＤＣＨＡ；ジシクロヘキシルアミン ＮａＯＨ；水酸化ナトリウム ＴＨＦ；テトラヒドロフラン ＤＭＦ；ジメチルホルムアミド ＤＭＳＯ；ジメチルスルホキシド エーテル；ジエチルエーテル ＤＣＣ；Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド ＷＳＣ；Ｎ−エチル，Ｎ’−３−ジメチルアミノプロピ
ル−カルボジイミド ＨＯＢｔ；１−ヒドロキシベンゾトリアゾール ＰＦ（ ）；ＰＦは保護されたアミノ酸またはペプチド
フラグメントを意味し、（ ）内の数字は式〔Ｉ〕のア
ミノ酸の順序を示す。

【００３２】

【参考例】次に参考例および実施例を挙げて本発明の製
造例を具体的に説明する。尚、実施例で使用した薄層ク
ロマトグラフイー（ＴＬＣ）の担体および展開溶媒系な
らびにアミノ酸の分析の条件は次の通りである。 ＜ＴＬＣ＞ 担体；シリカゲルＧ 展開溶媒系； １．クロロホルム−メタノール−酢酸（９５：５：
３）、 ２．クロロホルム−メタノール−酢酸（８５：１５：
５）、 ３．クロロホルム−メタノール−酢酸（８０：２５：
２）、 ４．クロロホルム−エタノール−酢酸エチル（５：２：
５）、 ５．ヘキサン−酢酸エチル（１：１） 担体；セルロース（メルク社製，ＤＣ−Ａｌｕｆｏｌｉ
ｅｎ） 展開溶媒系； ６．ブタノール−ピリジン−酢酸−水（５：３：０．
１：１１）の上層 ＜アミノ酸分析＞特記しない限り、試料は６Ｎ塩酸で１
１０℃、２４〜４８時間封管中で加水分解した。

【００３３】参考例１ 〔Ｎｌｅ⁸ ，Ｎｌｅ¹⁸，Ｔｙｒ³⁴〕−ｈ−ＰＴＨ（１−
３４）ＮＨ₂ の製造 １）ＰＦ（３４）；Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ−Ｃｌ₂ ）
−ＮＨ₂〔１〕 Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ−Ｃｌ₂ ）−ＯＨ５２．８４ｇ
（０．１２Ｍ）とｐ−ニトロフエノール１６．６９ｇ
（０．１２Ｍ）を乾燥ＴＨＦに溶かし、これに−５℃で
冷却下ＤＣＣ２４．７６ｇ（０．１２Ｍ）の乾燥ＴＨＦ
溶液を滴下した後、一夜攪拌した。反応後、析出物を濾
去し、濾液にＮＨ₃ ガスを飽和し、５時間攪拌した。沈
澱物が生じるが、ＤＭＦを加えて溶解した後、減圧濃縮
した。残渣をエーテルから結晶化した後、濾取、乾燥し
て目的物〔１〕を得た。 収量；４４．７７ｇ（収率８４．９％）、融点；２１４
〜２１６℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₁ ＝０．６２ 〔α〕²⁵Ｄ−５．５４°（Ｃ＝１，ＤＭＦ）

【００３４】２）ＰＦ（３３−３４）；Ｂｏｃ−Ａｓｎ
−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ−Ｃｌ₂ ）−ＮＨ₂ 〔２〕 化合物〔１〕２６．３６ｇ（６０ｍＭ）を塩化メチレン
に溶かし、これに氷冷下ＴＦＡ１００mlを加えた後、室
温で３０分間攪拌した。反応後、塩化メチレンとＴＦＡ
を減圧留去し、残渣をエーテルで結晶化した後、濾取
し、乾燥した。得られた結晶、Ｂｏｃ−Ａｓｎ−ＯＨ１
３．９３ｇ（６０ｍＭ）およびＨＯＢｔ８．１ｇ（６０
ｍＭ）をＤＭＦに溶かし、これに−１５℃で冷却下ＷＳ
Ｃ１０．９８ml（６０ｍＭ）を加えた後、一夜攪拌し
た。反応後、沈澱物を濾取し、５％重曹水（１回）、水
（２回）、メタノール（１回）の順で洗浄し、乾燥して
目的物〔２〕の結晶を得た。母液は減圧下ＤＭＦを留去
し、得られた結晶を水、メタノールの順で洗浄し、乾燥
して化合物〔２〕を得、先の目的物〔２〕と合わせた。 収量；２８．６４ｇ（収率８６．２５％）、融点；２４
０〜２４２℃ 〔α〕²⁵Ｄ−２４．０６°（Ｃ＝１，ＤＭＦ）

【００３５】３）ＰＦ（３２−３４）；Ｂｏｃ−Ｈｉｓ
（Ｔｏｓ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ−Ｃｌ₂ ）−ＮＨ
₂ 〔３〕 化合物〔２〕２２．１４ｇ（４０ｍＭ）を少量の塩化メ
チレンに溶かし、これに氷冷下ＴＦＡ１００mlを加え、
室温で３０分間攪拌した。ＴＦＡを減圧下留去して脱Ｂ
ｏｃ化物を得た。一方、Ｂｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）−Ｏ
Ｈ・ＤＣＨＡ２８．３６ｇ（４８ｍＭ）を酢酸エチル５
００mlに懸濁し、１Ｎ硫酸で２回、水で２回の順に洗浄
し、無水芒硝で乾燥した後、減圧下酢酸エチルを留去し
た。残渣を乾燥ＤＭＦに溶かし、これに前記の脱Ｂｏｃ
化物の乾燥ＤＭＦ溶液およびＨＯＢｔ６．４８ｇ（４８
ｍＭ）を加え、次いで−１５℃で冷却下ＷＳＣ８．７８
ml（４８ｍＭ）を加えた後、室温で一夜攪拌した。反応
後、減圧下ＤＭＦを留去し、残渣を５％重曹水で１回、
水で２回の順に洗浄した後、乾燥して粗生成物を得た。
これをメタノール−エーテルから結晶化して目的物
〔３〕を得た。結晶母液を減圧濃縮し、残渣をメタノー
ル−ヘキサンから結晶化して化合物〔３〕を得、先の目
的物〔３〕と合わせた。 収量；２８．８１ｇ（収率８５．１％）、融点；１７０
〜１７５℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₃ ＝０．６８、０．４２ 一部Ｔｏｓが脱離したものが得られた。

【００３６】４）ＰＦ（３１−３４）；Ｂｏｃ−配列番
号：２−ＮＨ₂ 〔４〕 化合物〔３〕２８．８１ｇ（３４．０６ｍＭ）を少量の
塩化メチレンに溶かし、これに氷冷下ＴＦＡ１２０mlを
加え、室温で３０分間攪拌した後、ＴＦＡを減圧下留去
した。残渣にエーテルを加え、析出した結晶を濾取、乾
燥後、ＤＭＦ１４０mlに溶解した。この溶液をＮＭＭで
中和し、これにＢｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ８．１４ｇ（３
７．４７ｍＭ）およびＨＯＢｔ５．０６ｇ（３７．４７
ｍＭ）を、乾燥ＤＭＦ６０mlに溶解した溶液を加え、次
いで−１５℃で冷却下ＷＳＣ６．８６ml（３７．４７ｍ
Ｍ）を加え、室温で一夜攪拌した。反応後、減圧下ＤＭ
Ｆを留去し、残渣を５％重曹水で１回、水で３回洗浄
し、乾燥して目的物〔４〕を得た。 収量；２７．７６ｇ（収率１０３．２％）、融点；１６
４〜１６６℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₃ ＝０．６５ 〔α〕²⁵Ｄ−２８．３８°（Ｃ＝１，ＤＭＦ）

【００３７】５）ＰＦ（３０−３４）；Ｂｏｃ−配列番
号：３−ＮＨ₂ 〔５〕 化合物〔４〕２７．７６ｇ（３５．１５ｍＭ）を少量の
塩化メチレンに懸濁し、これに氷冷下ＴＦＡ１１０mlを
加え、室温で３０分間攪拌した後、ＴＦＡを減圧下留去
した。残渣にエーテルを加え、析出した結晶を濾取、乾
燥後、ＤＭＦ１２０mlに溶解した。この溶液にＮＭＭ１
０mlを加えて中和し、これにＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚ
ｌ）−ＯＨ１２．５ｇ（３８．６７ｍＭ）およびＨＯＢ
ｔ５．２２ｇ（３８．６７ｍＭ）を、乾燥ＤＭＦ８０ml
に溶解した溶液を加え、次いで−１５℃で冷却下ＷＳＣ
７．０８ml（３８．６７ｍＭ）を加えた後、室温で一夜
攪拌した。反応後、減圧下ＤＭＦを留去し、残渣を５％
重曹水で１回、水で２回洗浄した後、メタノールに懸濁
してエーテルを加えて再結晶化して目的物〔５〕を得
た。 収量；３１．４２ｇ（収率８９．８％）、融点；２１４
〜２１５℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₃ ＝０．６ 〔α〕²⁵Ｄ−２３．２８°（Ｃ＝１，ＤＭＦ）

【００３８】６）ＰＦ（２９−３４）；Ｂｏｃ−配列番
号：４−ＮＨ₂ 〔６〕 化合物〔５〕３１．１１ｇ（３１．２７ｍＭ）を塩化メ
チレンに懸濁し、これに氷冷下ＴＦＡ１２０mlを加え、
室温で３０分間攪拌した後、ＴＦＡ、塩化メチレンを減
圧下留去した。残渣にエーテルを加え、析出した結晶を
濾取、乾燥後、乾燥ＤＭＦ１００mlに溶解した。この溶
液をＮＭＭ８mlで中和し、これにＢｏｃ−Ｇｌｎ−ＯＮ
Ｐ１２．６４ｇ（３４．４ｍＭ）およびＨＯＢｔ０．４
２ｇ（３．１３ｍＭ）を、乾燥ＤＭＦ１００mlに溶解し
た溶液を加え、次いで氷冷下ＮＭＭ３．７８mlを加えた
後、一夜攪拌した。反応後、減圧下ＤＭＦを留去し、残
渣を５％重曹水で１回、水で２回洗浄した後、メタノー
ルに懸濁し、エーテルで再結晶化して目的物〔６〕を得
た。 収量；３３．１９ｇ（収率９４．５％）、融点；８１〜
８３℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₃ ＝０．４７ 〔α〕²⁴Ｄ−２３．９８°（Ｃ＝１，ＤＭＦ） アミノ酸分析；Ａｓｐ２．１９（２）、Ｇｌｕ１．０５
（１）、Ｖａｌ１（１）、Ｔｙｒ０．７３（１）、Ｈｉ
ｓ０．８５（１）

【００３９】７）ＰＦ（２７−２８）；Ｂｏｃ−Ｌｙｓ
（Ｚ−Ｃｌ）−Ｌｅｕ−ＯＥｔ〔７〕 Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｚ−Ｃｌ）−ＯＨ・ＴＢＡ９７．６ｇ
（０．２Ｍ）を酢酸エチル５００mlに懸濁し、これを１
Ｎ塩酸、水の順で洗浄し、無水芒硝で乾燥した後、減圧
濃縮して油状物を得た。これを乾燥ＴＨＦ５００mlに溶
かし、これにＨ−Ｌｅｕ−ＯＥｔ・ＨＣｌ３９．１４ｇ
（０．２Ｍ）およびＨＯＢｔ２７．０ｇ（０．２Ｍ）を
加え、次いで−１５℃に冷却下ＷＳＣ３６．６ml（０．
２Ｍ）を加えた後、室温で一夜攪拌した。反応後、減圧
下ＴＨＦを留去した。残渣を酢酸エチル６００mlに溶か
し、５％重曹水、水、１Ｎ塩酸、水の順で洗浄し、無水
芒硝で乾燥後、減圧濃縮した。残渣を冷所で放置して結
晶化させた。ヘキサンを加えて濾取して目的物〔７〕を
得た。 収量；１１０．６２ｇ（収率９９．５％）、融点；７７
〜８０℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₃ ＝０．４８ 〔α〕²⁴Ｄ−１９．０８°（Ｃ＝１，ＤＭＦ）

【００４０】８）ＰＦ（２６−２８）；Ｂｏｃ−Ｌｙｓ
（Ｚ−Ｃｌ）−Ｌｙｓ（Ｚ−Ｃｌ）−Ｌｅｕ−ＯＥｔ
〔８〕 化合物〔７〕１１０．６２ｇ（０．１９９Ｍ）を塩化メ
チレン５０mlに加え、これに氷冷下ＴＦＡ２５０mlを加
えた後、室温で１時間攪拌した。反応後、減圧下ＴＦ
Ａ、塩化メチレンを留去して油状の脱Ｂｏｃ化物を得
た。

【００４１】一方、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｚ−Ｃｌ）−ＯＨ
・ＴＢＡ９７．１ｇ（０．１９９Ｍ）を酢酸エチル５０
０mlに懸濁し、１Ｎ塩酸３００ml、水の順で洗浄し、無
水芒硝で乾燥後、減圧濃縮して油状物を得る。これを乾
燥ＴＨＦ１５０mlに溶かし、これに前記の脱Ｂｏｃ化物
およびＨＯＢｔ２６．９ｇ（０．１９９Ｍ）を乾燥ＴＨ
Ｆ２５０mlに溶解した溶液を加え、次いで−１５℃に冷
却下ＷＳＣ３６．４ml（０．１９９Ｍ）を滴下した後、
室温で一夜攪拌した。反応後、ＴＨＦを減圧留去すると
寒天状結晶が析出した。これを酢酸エチルに溶かし、５
％重曹水、水、１Ｎ塩酸、水の順に洗浄し、無水芒硝で
乾燥後、減圧濃縮した。生じた沈澱物をヘキサンで処理
した後、濾取した。これを酢酸エチル、エーテル、ヘキ
サンから再結晶して目的物〔８〕を得た。 収量；１５６．５２ｇ（収率９２．２％）、融点；１１
４〜１１６℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₂ ＝０．７８ 〔α〕²⁹Ｄ−２０．７２°（Ｃ＝１，ＤＭＦ）

【００４２】９）ＰＦ（２５−２８）；Ａｏｃ−配列番
号：５−ＯＥｔ

〔９〕 化合物〔８〕１５６．５ｇ（１８４ｍＭ）を塩化メチレ
ン５０mlに加え、これに氷冷下ＴＦＡ２５０mlを加えた
後、室温で１時間攪拌した。反応液を減圧濃縮し、残渣
を乾燥ＤＭＦ３００mlに溶かした後、ＮＭＭで中和し
た、これにＡｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ８６．０ｇ
（２０２ｍＭ）を乾燥ＤＭＦ１００mlに溶解した溶液お
よびＨＯＢｔ２７．３ｇ（２０２ｍＭ）を加え、次いで
−１５℃に冷却下ＷＳＣ３７．０ml（２０２ｍＭ）を滴
下した後、室温で一夜攪拌した。反応後、ＤＭＦを減圧
留去し、残渣を酢酸エチル１ｌに溶解した。この溶液を
５％重曹水で２回、飽和食塩水、１Ｎ塩酸で２回、飽和
食塩水の順で洗浄し、無水芒硝で乾燥後、減圧濃縮し
た。残渣にエーテルを加え、濾取して目的物

〔９〕を得
た。 収量；２１７．９１ｇ（収率１００．６％）、融点；７
５〜７８℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₁ ＝０．０９、Ｒｆ₂ ＝０．６７ 〔α〕²⁸Ｄ−１４．０２°（Ｃ＝１，ＤＭＦ）

【００４３】１０）ＰＦ（２４−２８）；Ｂｏｃ−配列
番号：６−ＯＥｔ〔１０〕 化合物

〔９〕２１７．９ｇ（０．１８５Ｍ）に塩化メチ
レン１００mlおよびＴＦＡ２５０mlを加え、室温で８０
分間攪拌した後、減圧下塩化メチレンおよびＴＦＡを留
去した。得られた油状物を乾燥ＤＭＦ３００mlに溶か
し、ＮＭＭを加えて中和した。この溶液にＢｏｃ−Ｌｅ
ｕ−ＯＨ・Ｈ₂ Ｏ５０．９ｇ（０．２０４Ｍ）およびＨ
ＯＢｔ２７．６ｇ（０．２０４Ｍ）を乾燥ＤＭＦ１００
mlに溶解した溶液を加え、次いで−１５℃で冷却下ＷＳ
Ｃ３７．３ml（０．２０４Ｍ）を滴下した後、室温で一
夜攪拌した。反応後、減圧下ＤＭＦを留去し、残渣を水
に加え、析出した生成物を濾取した。メタノール−エー
テル−ヘキサンから２回再結晶化して目的物〔１０〕を
得た。 収量；２１３．６３ｇ（収率９０．５％）、融点；１５
７〜１６０℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₁ ＝０．２８、Ｒｆ₂ ＝０．７７ 〔α〕²⁷Ｄ−１８．６８°（Ｃ＝１，ＤＭＦ）

【００４４】１１）ＰＦ（２３−２８）；Ｂｏｃ−配列
番号：７−ＯＥｔ〔１１〕 化合物〔１０〕１５３．１７ｇ（０．１２Ｍ）に塩化メ
チレン１００mlおよびＴＦＡ２５０mlを加え、室温で８
０分間攪拌した後、減圧下塩化メチレンおよびＴＦＡを
留去した。残渣を乾燥ＤＭＦ２５０mlに溶かし、ＮＭＭ
でｐＨに中和した。この溶液にＨＯＢｔ１７．８４ｇ
（０．１３２Ｍ）とＢｏｃ−Ｔｒｐ−ＯＨ４０．１７ｇ
（０．１３２Ｍ）を加え、次いで−１５℃で冷却下、Ｗ
ＳＣ２４．２ml（０．１３２Ｍ）を滴下した後、室温で
一夜攪拌した。反応後、減圧下ＤＭＦを留去し、残渣を
５％重曹水５ｌに注ぎ、析出した生成物を濾取した。こ
れを水に懸濁して濾取した後、メタノール−エーテルか
ら２回再結晶化して目的物〔１１〕を得た。 収量；１４２．５７ｇ（収率８１．２％）、融点；１６
８〜１７０℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₁ ＝０．３１、Ｒｆ₂ ＝０．８２ 〔α〕²⁸Ｄ−１８．６４°（Ｃ＝１，ＤＭＦ）

【００４５】１２）ＰＦ（２３−２８）；Ｂｏｃ−配列
番号：７−ＯＨ〔１２〕 化合物〔１１〕１４０．６４ｇ（９６．１６ｍＭ）を熱
エタノール１２００mlに溶解し、冷却後、少量の析出物
を濾別した後、１Ｎ−ＮａＯＨ水溶液２８８ml（３倍
Ｍ）を加え、室温で１時間攪拌した。反応液に１Ｎ−Ｔ
ｏｓＯＨ水溶液１９２ml（２倍Ｍ）を加えた後、濾別
し、エタノールを減圧留去した。濃縮液に１Ｎ−Ｔｏｓ
ＯＨ９６ml（等Ｍ）を加え、次いで水２ｌを加えた後、
生じた沈澱物を濾取した。水で２回洗浄した後、乾燥し
て目的物〔１２〕を得た。 収量；１４２．９８ｇ（収率１０１．１％） 融点；１２５〜１３０℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₂ ＝０．７１ 〔α〕²⁷Ｄ−３７．２４°（Ｃ＝１，ＤＭＦ） アミノ酸分析；Ｌｅｕ２（２）、Ｌｙｓ２．０８
（２）、Ａｒｇ１．１０（１）、Ｔｒｐ０．８３（１）

【００４６】１３）ＰＦ（２３−３４）；Ｂｏｃ−配列
番号：８−ＮＨ₂ 〔１３〕 化合物〔６〕１．６８ｇ（１．５ｍＭ）を少量の塩化メ
チレンに懸濁し、次いで氷冷下ＴＦＡ７mlを加えた後、
室温で３０分間攪拌した。反応後、減圧下ＴＦＡを留去
し、残渣にエーテルを加え、析出した結晶を濾取、乾燥
した。この結晶を乾燥ＤＭＦ３０mlに溶かし、少量のＮ
ＭＭで中和した。この溶液に化合物〔１２〕２．４３ｇ
（１．６５ｍＭ）、ＨＯＢｔ０．２２ｇ（１．６５ｍ
Ｍ）および乾燥ＤＭＦ２０mlを加え、次いで−１５℃で
冷却下ＷＳＣ０．３ml（１．１倍Ｍ）を加えた後、室温
で一夜攪拌した。反応後、減圧下ＤＭＦを留去し、残渣
を５％重曹水で１回、水で２回洗浄した後、メタノール
に懸濁し、エーテルを加え、濾取、乾燥して目的物〔１
３〕を得た。 収量；３．６２ｇ（収率９９．１％）、融点；２６０〜
２７０℃ 〔α〕²⁵Ｄ−４．６６°（Ｃ＝０．３，ＤＭＦ） アミノ酸分析；Ａｓｐ１．９４（２）、Ｇｌｕ０．９６
（１）、Ｖａｌ０．７１（１）、Ｌｅｕ２．００
（２）、Ｔｙｒ０．９８（１）、Ｌｙｓ２．０９
（２）、Ｈｉｓ０．５８（１）、Ａｒｇ０．９１
（１）、Ｔｒｐ０．７８（１）

【００４７】１４）ＰＦ（２２）；Ｂｏｃ−Ｇｌｕ（Ｏ
Ｂｚｌ）−ＯＰＡＣ〔１４〕 Ｂｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−ＯＨ１２８．２ｇ（０．
３８Ｍ）をＤＭＦ６００mlに溶かし、これに氷冷下フエ
ナシルブロマイド１１３．５ｇ（０．５７Ｍ）を加えた
後、Ｅｔ₃ Ｎ７９．３ml（０．５７Ｍ）を滴下した。滴
下後、３０℃で４時間攪拌し、次いで酢酸カリウム３０
ｇを加え、４５分間攪拌した後、減圧下ＤＭＦを留去し
た。残渣に酢酸エチル６００mlを加え、５％重曹水で２
回、水で２回洗浄し、酢酸エチル層を無水芒硝で乾燥
後、減圧下溶媒を留去すると、結晶が析出した。これに
ヘキサンを加え、濾取して目的物〔１４〕を得た。 収量；１５６．１９ｇ（収率９０．２％） ＴＬＣ；Ｒｆ₅ ＝０．７３

【００４８】１５）ＰＦ（２１−２２）；Ｂｏｃ−Ｖａ
ｌ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−ＯＰＡＣ〔１５〕 化合物〔１４〕１４７．８８ｇ（０．３２５Ｍ）に塩化
メチレン５０mlを加え、これに氷冷下ＴＦＡ３００mlを
加え、室温で１時間攪拌した後、減圧下で塩化メチレン
およびＴＦＡを留去した。残渣にエーテルを加え、析出
した結晶を濾取、乾燥した。この結晶を乾燥ＤＭＦ３０
０mlに溶解し、ＮＭＭでｐＨ７に中和した。この溶液に
ＨＯＢｔ３５．１４ｇ（０．２６Ｍ）およびＢｏｃ−Ｖ
ａｌ−ＯＨ５６．４９ｇ（０．２６Ｍ）を加え、−１５
℃で冷却下ＷＳＣ４７．６ml（０．２６Ｍ）を滴下した
後、室温で２日間攪拌した。反応後、減圧下でＤＭＦを
留去し、残渣をクロロホルム５００mlに溶かし、５％重
曹水、水、１Ｎ塩酸、水の順で洗浄した。クロロホルム
層を無水芒硝で乾燥し、減圧下溶媒を留去し、得られた
結晶にヘキサンを加えて濾取した後、酢酸エチル−エー
テルより再結晶化して目的物〔１５〕を得た。 収量；１０６．９７ｇ（収率７４．２％）、融点；１３
９〜１４１℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₃ ＝０．６３ 〔α〕²⁹Ｄ−１８．９２°（Ｃ＝１，ＤＭＦ）

【００４９】１６）ＰＦ（２０−２２）；Ａｏｃ−Ａｒ
ｇ（Ｔｏｓ）−Ｖａｌ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−ＯＰＡＣ
〔１６〕 化合物〔１５〕９９．８３ｇ（０．１８Ｍ）に塩化メチ
レン５０mlを加え、これに氷冷下ＴＦＡ２００mlを加
え、室温で１時間攪拌した後、減圧下で塩化メチレンお
よびＴＦＡを留去した。残渣にヘキサンを加えて処理
し、傾斜法によりヘキサンを除去した後、エーテルを加
えて処理した後、減圧下でエーテルを留去した。得られ
た油状物を乾燥ＤＭＦ２００mlに溶かし、ＮＭＭで中和
した。この溶液にＨＯＢｔ２４．３３ｇ（０．１８
Ｍ）、Ａｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ７６．６０ｇ
（０．１８Ｍ）および乾燥ＤＭＦ２００mlを加え、これ
に−１５℃で冷却下ＷＳＣ３２．９４ml（０．１８Ｍ）
を滴下した後、室温で一夜攪拌した。反応後、減圧下で
ＤＭＦを留去し、残渣を酢酸エチル１ｌに溶解した。こ
の溶液を５％重曹水、水、１Ｎ塩酸、水の順で洗浄し、
無水芒硝で乾燥後、減圧下酢酸エチルを留去した。得ら
れた油状物を酢酸エチル−エーテルにより結晶化し、得
られた結晶をエーテルに懸濁して濾取する工程を３回行
って目的物〔１６〕を得た。 収量；１４９．７５ｇ（収率９４．６％）、融点；１１
０〜１１４℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₁ ＝０．７４、Ｒｆ₄ ＝０．８１ 〔α〕²⁹Ｄ−１１．５°（Ｃ＝１，ＤＭＦ）

【００５０】１７）ＰＦ（１９−２２）；Ｂｏｃ−配列
番号：９−ＯＰＡＣ〔１７〕 化合物〔１６〕１４９．４０ｇ（０．１７Ｍ）に塩化メ
チレン５０mlを加え、これに氷冷下ＴＦＡ３００mlを加
え、室温で１時間攪拌した後、減圧下で塩化メチレンお
よびＴＦＡを留去した。残渣にエーテルを加えて処理
し、減圧下でエーテルを留去した後、得られた油状物を
乾燥ＤＭＦ２００mlに溶かした。これにＨＯＢｔ２５．
２７ｇ（０．１８７Ｍ）およびＢｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｚ
ｌ）−ＯＨ６３．０９ｇ（０．１８７Ｍ）を加え、乾燥
ＤＭＦ１００mlを追加し、−１５℃で冷却下ＷＳＣ３
４．２２ml（０．１８７Ｍ）を加え、室温で一夜攪拌し
た。反応後、溶媒を留去し、残渣を水６ｌに注ぎ込み、
析出した結晶を濾取した。この結晶にメタノール−エー
テルを加えて懸濁して濾取し、熱メタノールに溶かし
て、冷時に析出化して濾取し、さらにメタノールに懸濁
して濾取する工程を３回行って化合物〔１７〕を得た。
結晶母液から溶媒を留去し、メタノール−エーテルから
結晶化して目的物２５．０２ｇを得た。 収量；１４１．４４ｇ（収率７６．７％）、融点；１１
９〜１２１℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₁ ＝０．５６、Ｒｆ₄ ＝０．８２ 〔α〕²⁹Ｄ−１２．９°（Ｃ＝１，ＤＭＦ）

【００５１】１８）ＰＦ（１８−２２）；Ｂｏｃ−配列
番号：１０−ＯＰＡＣ〔１８〕 化合物〔１７〕６．５１ｇ（６ｍＭ）に氷冷下塩化メチ
レンおよびＴＦＡ２４mlを加え、室温で４０分間攪拌し
た後、減圧下塩化メチレンおよびＴＦＡを留去した。残
渣にエーテルを加えて結晶化し、乾燥した。この結晶を
乾燥ＤＭＦに溶かし、氷冷下ＮＭＭでｐＨ７に中和し
た。この溶液にＢｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ１．６７ｇ（７．
２ｍＭ）およびＨＯＢｔ０．９７ｇ（７．２ｍＭ）を乾
燥ＤＭＦ４０mlに溶解した溶液を加え、−１５℃に冷却
下ＷＳＣ１．３ml（７．２ｍＭ）を加えた後、一夜攪拌
した。反応後、減圧下ＤＭＦを留去し、残渣に水を加
え、生じた沈澱物を濾取し、５％重曹水、水（３回）、
１Ｎ塩酸水（３回）、メタノールの順で洗浄した。次い
で、メタノール−エーテルから再沈澱を行い、目的物
〔１８〕を得た。 収量；５．６１ｇ（収率７８％）、ＴＬＣ；Ｒｆ₁ ＝
０．５６

【００５２】１９）ＰＦ（１８−２２）；Ｂｏｃ−配列
番号：１０−ＯＨ〔１９〕 化合物〔１８〕５．０３ｇ（４．２ｍＭ）を酢酸３０ml
に溶かし、これに亜鉛末８ｇを加え、室温で５．５時間
攪拌した。反応後、亜鉛末を濾去し、減圧下酢酸を留去
した。析出した結晶にエーテルを加え濾取して目的物
〔１９〕を得た。 収量；４．４２ｇ、融点；２１０℃（分解） ＴＬＣ；Ｒｆ₁ ＝０．１８、Ｒｆ₂ ＝０．６７ 〔α〕²⁷Ｄ−４．６６°（Ｃ＝０．３，ＤＭＦ） アミノ酸分析；Ｎｌｅ１．０１（１）、Ｇｌｕ２．０５
（２）、Ａｒｇ０．９８（１）、Ｖａｌ１（１）

【００５３】２０）ＰＦ（１８−３４）；Ｂｏｃ−配列
番号：１１−ＮＨ₂〔２０〕 化合物〔１３〕８．９ｇ（３．５ｍＭ）にスカトール
０．５ｇ（３．５ｍＭ）、ジメチルスフイド２５ml、エ
タンジチオール２．５mlおよびＴＦＡ２５mlを加え、０
℃で１０分間、室温で４５分間攪拌した後、反応液を減
圧濃縮した。残渣にエーテルを加え、生じた沈澱物を濾
取、乾燥した後、乾燥ＤＭＦ１００mlに溶かし、ＮＭＭ
でｐＨ７に中和した。この溶液にＨＯＢｔ０．５４ｇ
（４ｍＭ）および化合物〔１９〕４．３ｇ（４ｍＭ）を
加え、−１５℃に冷却下ＷＳＣ０．７３mlを加えた後、
室温で２日間攪拌した。反応後、減圧下ＤＭＦを留去
し、残渣に５％重曹水を加え、生じた沈澱物を濾取した
後、水で充分に洗浄した。この生成物をエタノールに溶
かし、エーテルを加えて沈澱化させる工程を２回行って
目的物〔２０〕を得た。 収量；１１．１２ｇ（収率９４％）、融点；２５０℃
（分解） ＴＬＣ；Ｒｆ₃ ＝０．７２ 〔α〕²⁸Ｄ−４．７３°（Ｃ＝０．５３、ＤＭＦ） アミノ酸分析；Ａｓｐ１．９８（２）、Ｇｌｕ３．０４
（３）、Ｖａｌ１．６９（２）、Ｌｅｕ２（２）、Ｔｙ
ｒ１．０７（１）、Ｌｙｓ１．９３（２）、Ｈｉｓ０．
５９（１）、Ａｒｇ１．９７（２）、Ｔｒｐ０．３５
（１）、Ｎｌｅ１．０７（１）

【００５４】２１）ＰＦ（１７）；Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂ
ｚｌ）−ＯＰＡＣ〔２１〕 Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ８８．６ｇ（０．３
Ｍ）をＤＭＦ４００mlに溶かし、これにフエナシルブロ
マイド８９．６ｇ（０．４５Ｍ）を加え、これに氷冷下
Ｅｔ₃ Ｎ６２．６ml（０．４５Ｍ）を滴下した後、３０
℃で３．５時間攪拌した。次いでこの反応液に酢酸カリ
ウム２２．１ｇ（０．２２５Ｍ）を加え、室温で１時間
攪拌した。反応後、減圧下ＤＭＦを留去し、残渣を酢酸
エチル５００mlに溶かし、５％重量水、水の順で洗浄し
た。酢酸エチル層を無水芒硝で乾燥した後、減圧下溶媒
を留去した。残渣を冷蔵庫に放置して結晶化させ、ヘキ
サンを加え濾取して目的物〔２１〕を得た。 収量；１２２．９７ｇ（収率９９．１％）、融点；４５
〜４７℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₅ ＝０．８２ 〔α〕^29.5Ｄ−１１．８８°（Ｃ＝１．０，ＤＭＦ）

【００５５】２２）ＰＦ（１６−１７）；Ｂｏｃ−Ａｓ
ｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＰＡＣ〔２２〕 化合物〔２１〕１１９．９ｇ（０．２９Ｍ）に塩化メチ
レン５０mlを加え、これに氷冷下ＴＦＡ２５０mlを加え
た後、室温で１時間攪拌した。反応後、減圧濃縮し、残
渣にエーテルを加え、析出した結晶を濾取、乾燥した。
この結晶を乾燥ＤＭＦ４００mlに溶かし、ＮＭＭでｐＨ
７に中和した。この溶液にＨＯＢｔ３１．３５ｇ（０．
２３２Ｍ）およびＢｏｃ−Ａｓｎ−ＯＨ５３．８８ｇ
（０．２３２Ｍ）を加え、これに−１５℃に冷却下ＷＳ
Ｃ４２．４６ml（０．２３２Ｍ）を滴下した後、室温で
一夜攪拌した。反応後、減圧下ＤＭＦを留去し、残渣を
酢酸エチル５００mlに溶かし、５％重曹水で洗浄した。
分液の際、結晶が析出したので、その結晶を濾取して水
洗し、次いでエーテルで洗浄して目的物〔２２〕の結晶
Ｉ４１．７９ｇを得た。濾液の酢酸エチル層は、これを
減圧濃縮し、残渣の油状物を酢酸エチル−エーテルより
結晶化して目的物〔２２〕の結晶ＩＩ６．２２ｇを得
た。 収量；４８．０１ｇ（収率３９．２％）、融点；１７４
〜１７６℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₂ ＝０．６１、Ｒｆ₄ ＝０．６２ 〔α〕^29.5Ｄ−５．５４°（Ｃ＝１．０，ＤＭＦ） アミノ酸分析；Ａｓｐ１．２２（１）、Ｓｅｒ１．００
（１）

【００５６】２３）ＰＦ（１５−１７）；Ｂｏｃ−Ｌｅ
ｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＰＡＣ〔２３〕 化合物〔２２〕８０．９１ｇ（０．１５３Ｍ）に塩化メ
チレン５０mlを加え、次いで氷冷下ＴＦＡ１５０mlを加
えた後、室温で１時間攪拌した。反応液を減圧濃縮し、
残渣にエーテルを加え、生じた油状物を傾斜法により分
離した後、乾燥ＤＭＦ１５０mlに溶かし、ＮＭＭでｐＨ
７に中和した。この溶液にＨＯＢｔ２２．７ｇ（０．１
６８Ｍ）、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ・Ｈ₂ Ｏ４１．９ｇ
（０．１６８Ｍ）およびＤＭＦ１００mlを加え、−１５
℃に冷却下ＷＳＣ３０．７ml（０．１６８Ｍ）を滴下し
た後、室温で攪拌した反応液がゲル化したので、氷室に
３日間静置した後、水を加え、生じた沈澱物を濾取し、
５％重曹水、水の順で洗浄、乾燥して目的物〔２３〕を
得た。 収量；８８．５２ｇ（収率９０．３％）、融点；１９２
〜１９３℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₂ ＝０．８０、Ｒｆ₃ ＝０．８８

【００５７】２４）ＰＦ（１４−１７）；Ｂｏｃ−配列
番号：１２−ＯＰＡＣ〔２４〕 化合物〔２３〕８７．５５ｇ（０．１３７Ｍ）に塩化メ
チレン１５０mlを加え、次いで氷冷下ＴＦＡ２００mlを
加えた後、室温で７０分間攪拌した。反応液を減圧濃縮
し、残渣にエーテルを加え、生じた沈澱物を濾取、乾燥
した後、乾燥ＤＭＦ２００mlに溶かし、ＮＭＭでｐＨ７
に中和して脱Ｂｏｃ溶液を得た。

【００５８】一方、Ｂｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）−ＯＨ・
ＤＣＨＡ８９．２ｇ（０．１５１Ｍ）を酢酸エチル１ｌ
に懸濁し、１Ｎ硫酸５００mlで洗浄し、析出した結晶を
濾別した。酢酸エチル層を水洗し、無水芒硝で乾燥した
後、減圧下溶媒を留去した。得られた油状物を乾燥ＤＭ
Ｆ１５０mlに溶解した溶液とＨＯＢｔ２０．４ｇ（０．
１５１Ｍ）を前記の脱Ｂｏｃ溶液に加え、これに−１５
℃に冷却下ＷＳＣ２７．６ml（０．１５１Ｍ）を滴下し
た後、室温で３日間攪拌した。反応後、減圧下溶媒を留
去し、残渣を水に加え、生じた沈澱物を濾取した後、５
％重曹水、水の順で洗浄し、乾燥して目的物〔２４〕を
得た。 収量；１０８．６３ｇ（収率８５．１％）、融点；１５
４〜１５６℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₂ ＝０．２０、０．７９、Ｒｆ₃ ＝０．５
５、０．８７ 一部Ｔｏｓが脱離したものが得られた。 〔α〕^29.5Ｄ−１８．５８°（Ｃ＝１．０，ＤＭＦ）

【００５９】２５）ＰＦ（１３−１７）；Ｂｏｃ−配列
番号：１３−ＯＰＡＣ〔２５〕 化合物〔２４〕１０７．９６ｇ（０．１１６Ｍ）に塩化
メチレン１００mlを加え、次いで氷冷下ＴＦＡ２００ml
を加えた後、室温で７０分間攪拌した。反応液を減圧濃
縮し、残渣にエーテルを加え、生じた沈澱物を濾取、乾
燥した後、乾燥ＤＭＦ２００mlに溶かし、ＮＭＭでｐＨ
７に中和して脱Ｂｏｃ溶液を得た。

【００６０】一方、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｚ−Ｃｌ）−ＯＨ
・ＴＢＡ６２．４６ｇ（０．１２８Ｍ）を酢酸エチル６
００mlに懸濁し、１Ｎ塩酸、水の順に洗浄し、酢酸エチ
ル層を無水芒硝で乾燥後、減圧下溶媒を留去した。得ら
れた油状物とＨＯＢｔ１７．３０ｇ（０．１２８Ｍ）を
乾燥ＤＭＦ１００mlに溶かした溶液を前記の脱Ｂｏｃ溶
液に加え、これに−１５℃に冷却下ＷＳＣ２４．４２ml
（０．１２８Ｍ）を滴下した後、室温で一夜攪拌した。
反応後、減圧下溶媒を留去し、残渣を３％重曹水５ｌ中
に加え、析出した結晶を充分に水洗した後、乾燥した。
この結晶をメタノールに溶かし、エーテルを加えて沈澱
化させた。得られた沈澱物を酢酸エチルに懸濁し、濾取
する工程を３回行って目的物〔２５〕を得た。 収量；１１４．４２ｇ（収率９１．８％）、融点；２０
０〜２０２℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₂ ＝０．３４、Ｒｆ₃ ＝０．６８ 〔α〕²⁸Ｄ−２６．９４°（Ｃ＝１．０，ＤＭＦ）

【００６１】２６）ＰＦ（１３−１７）；Ｂｏｃ−配列
番号：１３−ＯＨ〔２５〕 化合物〔２５〕８６．０ｇ（８０ｍＭ）を酢酸５００ml
に溶かし、これに亜鉛末１５０ｇを加え、室温で５時間
攪拌した後、反応液を濾過して亜鉛末を除去した。反応
濾液を減圧濃縮し、残渣にエーテルを加え、析出した結
晶を濾取して目的物〔２６〕を得た。 収量；８４．７０ｇ（収率９５．２％）、融点；２４０
〜２５０℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₂ ＝０．４７ 〔α〕³⁰Ｄ−１９．１６°（Ｃ＝１．０，ＤＭＦ） 元素分析〔Ｃ₄₅Ｈ₅₂Ｏ₁₂Ｎ₉ Ｃｌ・２ＣＨ₃ ＣＯＯＨ・
２Ｈ₂ Ｏとして〕 アミノ酸分析；Ａｓｐ１．０１（１）、Ｓｅｒ０．８３
（１）、Ｌｅｕ１（１）、Ｌｙｓ０．９３（１）、Ｈｉ
ｓ０．９７（１）

【００６２】２７）ＰＦ（１３−３４）；Ｂｏｃ−配列
番号：１４−ＮＨ₂〔２７〕 化合物〔２０〕１０．７７ｇ（３．２ｍＭ）にスカトー
ル０．４６ｇ（３．２ｍＭ）、ジメチルスルフイド２５
ml、エタンジチオール２．５mlおよびＴＦＡ２５mlを加
え、０℃で１０分間、室温で６０分間攪拌した後、反応
液を減圧濃縮した。残渣にエーテルを加え、生じた沈澱
物を濾取、乾燥した後、乾燥ＤＭＦ２００mlに溶かし、
ＮＭＭでｐＨ７に中和した。次いで、これにＨＯＢｔ
０．５１ｇ（３．８ｍＭ）および化合物〔２６〕４．２
３ｇ（３．８ｍＭ）を加え、−１５℃に冷却下ＷＳＣ
０．７０mlを加えた後、室温で一夜攪拌した。反応後、
減圧下ＤＭＦを留去し、残渣に水を加え、生じた沈澱物
を濾取し、水洗、乾燥して目的物〔２７〕を得た。 収量；１３．６０ｇ（収率１００％）、融点；１３８〜
１６０．５℃ 〔α〕²⁸Ｄ−１．９６°（Ｃ＝０．５６，ＤＭＦ） アミノ酸分析；Ａｓｐ２．９６（３）、Ｓｅｒ０．６２
（１）、Ｇｌｕ３．０２（３）、Ｖａｌ１．７２
（２）、Ｌｅｕ３（３）、Ｔｙｒ１．０６（１）、Ｌｙ
ｓ３．０１（３）、Ｈｉｓ１．４３（２）、Ａｒｇ１．
９８（２）、Ｔｒｐ０．６０（１）、ＮＩｅ１．０６
（１）

【００６３】２８）ＰＦ（１１−１２）；Ｂｏｃ−Ｌｅ
ｕ−Ｇｌｙ−ＯＢｚｌ〔２８〕 Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ・Ｈ₂ Ｏ４．９９ｇ（２０ｍＭ）
を乾燥ＴＨＦ３０mlに溶かし、これに乾燥ベンゼン５０
mlを加え、溶媒を共沸により留去した。得られた油状物
を乾燥ＴＨＦ７０mlに溶かし、これにＨ−Ｇｌｙ−ＯＢ
ｚｌ・ＴｏｓＯＨ（２０ｍＭ）およびＨＯＢｔ２．７ｇ
（２０ｍＭ）を加え、次いで−１５℃に冷却下ＷＳＣ５
mlを加えた後、室温で一夜攪拌した。反応後、減圧下溶
媒を留去し、残渣を酢酸エチル１００mlに溶かした後、
１Ｎ塩酸で２回、５％重曹水で２回、水で２回の順で洗
浄した。酢酸エチル層を無水芒硝で乾燥した後、減圧濃
縮して油状の目的物〔２８〕を得た。

【００６４】２９）ＰＦ（１０−１２）；Ｂｏｃ−Ａｓ
ｎ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＢｚｌ〔２９〕 前記で得た油状物〔２８〕に−１５℃に冷却下４．３９
Ｎ塩化水素／ジオキサン溶液４０mlを加え、９０分間攪
拌した後、減圧濃縮した。残渣にエーテルを加え、生じ
た沈澱物を濾取、乾燥した後、乾燥ＤＭＦ３０mlに溶か
した。これに−５℃に冷却下Ｅｔ₃ Ｎを加えてｐＨ７に
調節し、次いでＨＯＢｔ０．３ｇ（２．２ｍＭ）および
Ｂｏｃ−Ａｓｎ−ＯＮＰ７．７７ｇ（２．２ｍＭ）およ
びＢｏｃ−Ａｓｎ−ＯＮＰ７．７７ｇ（２２ｍＭ）を加
え、室温で３日間攪拌した。反応に水を加え、析出した
沈澱物をクロロホルム２００mlで抽出した。クロロホル
ム層を１Ｎ塩酸、５％重曹水、水の順で洗浄し、無水芒
硝で乾燥後、減圧下溶媒を留去した。残渣を酢酸エチル
−ヘキサンから結晶化して目的物〔２９〕を得た。 収量；８．０ｇ（収率７３．８％）、融点；１５２〜１
５６℃ 〔α〕²⁴Ｄ−３６．１°（Ｃ＝１．０，ＤＭＦ）

【００６５】３０）ＰＦ（９−１２）；Ｂｏｃ−配列番
号：１５−ＯＢｚｌ〔３０〕 化合物〔２９〕７．３６ｇ（１５．５ｍＭ〕に塩化メチ
レン５mlを加え、次いで氷冷下にＴＦＡ３２mlを加えた
後、室温で６０分間攪拌した。反応液を減圧濃縮し、残
渣にエーテルを加え、析出した沈澱物を濾取、乾燥した
後、乾燥ＤＭＦ４０mlに溶かし、ＮＭＭでｐＨ７に調節
して脱Ｂｏｃ溶液を得た。

【００６６】一方、Ｂｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）−ＯＨ・
ＤＣＨＡ１０．９９ｇ（１８．６ｍＭ）に酢酸エチル１
５０mlおよび０．５Ｎ硫酸９０mlを加えて振とうし、酢
酸エチル層を水で３回洗浄し、無水芒硝で乾燥後、酢酸
エチルを減圧下留去して油状物を得た。この油状物とＨ
ＯＢｔ２．５ｇ（１８．６ｍＭ）を乾燥ＤＭＦ６０mlに
溶かし、その溶液を前記の脱Ｂｏｃ溶液に加え、次いで
−１５℃に冷却下ＷＳＣ３．４ml（１８．６ｍＭ）を加
えた後、室温で一夜攪拌した。反応後、減圧下溶媒を留
去し、残渣を酢酸エチルに溶かし、５％重曹水で３回、
水で２回洗浄し、無水芒硝で乾燥後、減圧下溶媒を留去
した。残渣にエーテルを加え、析出した結晶を濾取し
た。この結晶はＨｉｓのＴｏｓが一部脱離されている
が、完全に脱離するために、この結晶をＤＭＦ１００ml
に溶解し、これにＨＯＢｔ７．０５ｇを加え、室温で３
日間攪拌した。反応後、減圧下ＤＭＦを留去し、残渣を
酢酸エチルに溶かし、５％重曹水で２回、水の順に洗浄
し、無水芒硝で乾燥後、減圧下溶媒を留去した。析出し
た結晶にエーテルを加えて濾取して目的物〔３０〕を得
た。 収量；７．３２ｇ（収率７４．８％）、ＴＬＣ；Ｒｆ₂
＝０．１

【００６７】３１）ＰＦ（８−１２）；Ｂｏｃ−配列番
号：１６−ＯＢｚｌ〔３１〕 化合物〔３０〕７．３２ｇ（１１．６ｍＭ〕に塩化メチ
レン５mlを加え、次いで氷冷下ＴＦＡ３０mlを加えた
後、室温で４０分間攪拌した。反応液を減圧濃縮し、残
渣にエーテルを加え、析出した沈澱物を濾取、乾燥した
後、乾燥ＤＭＦ４０mlに溶かし、ＮＭＭでｐＨ７に調節
した。これにＨＯＢｔ１．９ｇ（１３．９２ｍＭ）およ
びＢｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ３．２３ｇ（１３．９２ｍＭ）
を乾燥ＤＭＦに溶かした溶液を加え、−１５℃に冷却下
ＷＳＣ２．５ml（１３．９２ｍＭ）を加えた後、室温で
一夜攪拌した。反応後、減圧下溶媒を留去し、残渣に水
を加え、析出した沈澱物を濾取し、５％重曹水で２回、
１Ｎ塩酸で２回、水で３回の順で洗浄し、乾燥して目的
物〔３１〕を得た。 収量；３．７０ｇ（収率４２．９％）、ＴＬＣ；Ｒｆ₂
＝０．２０

【００６８】３２）ＰＦ（８−１２）；Ｂｏｃ−配列番
号：１６−ＯＨ〔３２〕 化合物〔３１〕２．８ｇ（３．８ｍＭ〕をエタノール１
００mlに溶かし、これに１０％Ｐｄ／Ｃ３００mgを加
え、室温で水素ガスを３時間通じた。反応液中に不純物
が析出したので、濾過し、ＤＭＦで洗浄した後、濾液を
減圧濃縮した。残渣にエタノール−エーテルを加えて沈
澱物を濾取、乾燥して目的物〔３２〕を得た。 収量；１．７６ｇ（収率７１．１％）、融点；１１２．
５℃ ＴＬＣ；Ｒｆ₂ ＝０．０５ アミノ酸分析；Ａｓｐ０．９６（１）、Ｇｌｙ０．９８
（１）、Ｌｅｕ１（１）、Ｈｉｓ０．９５（１）、Ｎｌ
ｅ０．９４（１）

【００６９】３３）ＰＦ（８−３４）；Ｂｏｃ−配列番
号：１７−ＮＨ₂ 〔３３〕 化合物〔２７〕１０．６０ｇ（２．５ｍＭ〕にスカトー
ル０．３３ｇ（２．５ｍＭ）、ジメチルスルフイド２５
ml、エタンジチオール２．５mlおよびＴＦＡ２５mlを加
え、０℃で１０分、室温で５０分間それぞれ攪拌した
後、反応液を減圧濃縮した。残渣にエーテルを加え、生
じた沈澱物を濾取、乾燥した後、乾燥ＤＭＦ１００mlに
溶かし、これに氷冷下ＮＭＭを加えてｐＨ７に調節し
た。この溶液にＨＯＢｔ０．３６ｇ（２．７ｍＭ）およ
び化合物〔３２〕１．７６ｇ（２．７ｍＭ）を加え、−
１５℃に冷却下ＷＳＣ０．５mlを加えた後、室温で一夜
攪拌した。析出した沈澱物を濾取し、水で洗浄、乾燥し
た後、エタノール−エーテルから再沈澱して目的物〔３
３〕を得た。 収量；１０．９４ｇ（収率９１．７％）、融点；１４
０．５〜１６２℃ 〔α〕²⁸Ｄ−１．９４°（Ｃ＝０．５２，ＤＭＦ） アミノ酸分析；Ａｓｐ３．８７（４）、Ｓｅｒ０．７６
（１）、Ｇｌｕ３．３４（３）、Ｇｌｙ０．７７
（１）、Ｖａｌ１．８４（２）、Ｌｅｕ４（４）、Ｔｙ
ｒ１．０４（１）、Ｌｙｓ３．２８（３）、Ｈｉｓ２．
３７（３）、Ａｒｇ２．１４（２）、Ｔｒｐ０．７３
（１）、Ｎｌｅ２．０７（２）

【００７０】３４）ＰＦ（７）；Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＰ
ＡＣ〔３４〕 Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ・Ｈ₂ Ｏ１５．０ｇ（６０ｍＭ）
とフエナシルブロマイド１７．９ｇ（９０ｍＭ）をＤＭ
Ｆ１００mlに溶かし、これに氷冷下Ｅｔ₃ Ｎ１２．５ml
（９０ｍＭ）を滴下した後、３０℃で２時間攪拌した。
次いで酢酸カリウム４．４２ｇ（４５ｍＭ）を加え、室
温で４５分間攪拌した後、減圧下ＤＭＦを留去した。残
渣を酢酸エチルに溶かし、５％重曹水で２回、水で２回
洗浄し、酢酸エチル層を無水芒硝で乾燥後、減圧下溶媒
を留去した。残渣を氷室に放置し、析出した結晶を乾燥
して目的物〔３４〕を得た。 収量；２１．２３ｇ（収率１００％）、ＴＬＣ；Ｒｆ₁
＝０．８９

【００７１】３５）ＰＦ（６−７）；Ｂｏｃ−Ｇｌｕ−
Ｌｅｕ−ＯＰＡＣ〔３５〕 化合物〔３４〕２０．９６ｇ（６０ｍＭ）に塩化メチレ
ン２０mlを加え、次いで氷冷下ＴＦＡ８０mlを加え、室
温で４０分間攪拌した後、反応液を減圧濃縮した。残渣
にエーテルを加え、生じた沈澱物を濾取、乾燥した後、
乾燥ＤＭＦ７０mlに溶かし、氷冷下ＮＭＭを加えてｐＨ
７に調節した。この溶液にＨＯＢｔ８．１ｇ（６０ｍ
Ｍ）およびＢｏｃ−Ｇｌｎ−ＯＨ１４．７８ｇ（６０ｍ
Ｍ）を乾燥ＤＭＦ９０mlに溶かした溶液を加え、−１５
℃に冷却下ＷＳＣ１０．９ml（６０ｍＭ）を滴下した
後、室温で一夜攪拌した。反応後、ＤＭＦを減圧留去
し、残渣を酢酸エチルに溶かした後、５％重曹水で２
回、１Ｎ塩酸で２回、水で３回の順で洗浄した。酢酸エ
チル層を無水芒硝で乾燥後、減圧下溶媒を留去した後、
析出した結晶にヘキサンを加えて濾取、乾燥して目的物
〔３５〕を得た。 収量；１７．２５ｇ（収率６０．２％）、ＴＬＣ；Ｒｆ
₁ ＝０．３８

【００７２】３６）ＰＦ（５−７）；Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−
Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−ＯＰＡＣ〔３６〕 化合物〔３５〕１７．１９ｇ（３６ｍＭ）に塩化メチレ
ン１０mlを加え、次いで氷冷下ＴＦＡ７０mlを加え、室
温で６０分間攪拌した後、反応液を減圧濃縮した。残渣
を減圧乾燥後、乾燥ＤＭＦ１３０mlに溶かし、氷冷下Ｎ
ＭＭでｐＨ７に調節した。この溶液にＨＯＢｔ５．３ｇ
（３９．６ｍＭ）およびＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ・１／２
Ｈ₂ Ｏ９．５ｇ（３９．６ｍＭ）を乾燥ＤＭＦ７０mlに
溶かした溶液を加え、−１５℃に冷却下ＷＳＣ７．２ml
（３９．６ｍＭ）を滴下した後、室温で一夜攪拌した。
反応後、ＤＭＦを減圧留去し、残渣に５％重曹水を加
え、生じた沈澱物を濾取した後、５％重曹水、１Ｎ塩酸
で２回、水で３回の順で洗浄し、乾燥した。この沈澱物
をエタノール−エーテルから再沈澱して目的物〔３６〕
を得た。 収量；１６．３５ｇ（収率７６．９％） ＴＬＣ；Ｒｆ₁ ＝０．４１、Ｒｆ₂ ＝０．６８

【００７３】３７）ＰＦ（４−７）；Ｂｏｃ−配列番
号：１８−ＯＰＡＣ〔３７〕 化合物〔３７〕１６．２４ｇ（２７．５ｍＭ）に塩化メ
チレン１０mlを加え、次いで氷冷下ＴＦＡ７０mlを加
え、室温で６０分間攪拌した後、反応液を減圧濃縮し
た。残渣にエーテルを加え、生じた沈澱物を濾取、乾燥
した後、乾燥ＤＭＦ１００mlに溶かし、次いで氷冷下Ｎ
ＭＭを加えてｐＨ７に調節した。この溶液にＨＯＢｔ
４．０９ｇ（３０．２５ｍＭ）およびＢｏｃ−Ｇｌｕ
（ＯＢｚｌ）−ＯＨ１０．２ｇ（３０．２５ｍＭ）を乾
燥ＤＭＦ５０mlに溶かした溶液を加え、−１５℃に冷却
下ＷＳＣ５．５mlを滴下した後、室温で一夜攪拌した。
反応後、ＤＭＦを減圧留去し、残渣に５％重曹水を加
え、生じた沈澱物を濾取した後、５％重曹水、１Ｎ塩酸
で２回、水で４回の順で洗浄し、乾燥した。エタノール
−エーテルから再沈澱して目的物〔３７〕を得た。 収量；２１．６８ｇ（収率９７．１％） ＴＬＣ；Ｒｆ₁ ＝０．５２

【００７４】３８）ＰＦ（３−７）；Ｂｏｃ−配列番
号：１９−ＯＰＡＣ〔３８〕 化合物〔３７〕２１．４６ｇ（２６．５ｍＭ）に塩化メ
チレン１０mlを加え、次いで氷冷下ＴＦＡ９０mlを加
え、室温で１時間攪拌した後、反応液を減圧濃縮した。
残渣にエーテルを加え、生じた沈澱物を濾取、乾燥した
後、乾燥ＤＭＦ１５０mlに溶かし、次いで氷冷下ＮＭＭ
を加えてｐＨ７に調節した。この溶液にＨＯＢｔ３．９
ｇ（２９．１５ｍＭ）およびＢｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）
−ＯＨ８．６ｇ（２９．１５ｍＭ）を乾燥ＤＭＦ５０ml
に溶かした溶液を加え、−１５℃に冷却下ＷＳＣ５．３
ml（２９．１５ｍＭ）を加えた後、室温で一夜攪拌し
た。反応後、ＤＭＦを減圧留去し、残渣に５％重曹水を
加え、析出した沈澱物を濾取した。これを５％重曹水、
１Ｎ塩酸で２回、水で４回の順で洗浄した後、エーテル
に懸濁、濾取して目的物〔３８〕を得た。 収量；２４．８ｇ（収率９４．７％）、ＴＬＣ；Ｒｆ₁
＝０．５３

【００７５】３９）ＰＦ（２−７）；Ｂｏｃ−配列番
号：２０−ＯＰＡＣ〔３９〕 化合物〔３８〕２４．６８ｇ（２５ｍＭ）に塩化メチレ
ン２０mlを加え、次いで氷冷下ＴＦＡ１００mlを加えた
後、室温で５０分間攪拌した後、反応液を減圧濃縮し、
残渣にエーテルを加え、生じた沈澱物を濾取、乾燥した
後、乾燥ＤＭＦ１２０mlに溶かし、次いで氷冷下ＮＭＭ
を加えてｐＨ７に調節した。この溶液にＨＯＢｔ４．０
５ｇ（３０ｍＭ）およびＢｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ６．５ｇ
（３０ｍＭ）を乾燥ＤＭＦ８０mlに溶かした溶液を加
え、−１５℃に冷却下ＷＳＣ５．５ml（３０ｍＭ）を滴
下した後、室温で一夜攪拌した。反応液に沈澱物が析出
したので、水を加えて濾取し、５％重曹水で２回、１Ｎ
塩酸で２回、水で４回の順で洗浄した後、エーテルに懸
濁、濾取して目的物〔３９〕を得た。 収量；２６．３２ｇ（収率９６．８％）、ＴＬＣ；Ｒｆ
₁ ＝０．４９

【００７６】４０）ＰＦ（１−７）；Ｂｏｃ−配列番
号：２１−ＯＰＡＣ〔４０〕 化合物〔３９〕２６．０７ｇ（２４ｍＭ）に塩化メチレ
ン２０mlを加え、次いで氷冷下ＴＦＡ１００mlを加えた
後、室温で４０分間攪拌した後、反応液を減圧濃縮し、
残渣にエーテルを加え、生じた沈澱物を濾取、乾燥した
後、乾燥ＤＭＦ１００mlに溶かし、次いで氷冷下ＮＭＭ
を加えてｐＨ７に調節した。この溶液にＨＯＢｔ３．９
ｇ（２８．８ｍＭ）およびＢｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−
ＯＨ８．５ｇ（２８．８ｍＭ）を乾燥ＤＭＦ５０mlに溶
かした溶液を加え、−１５℃に冷却下ＷＳＣ５．３ml
（２８．８ｍＭ）を添加した後、室温で一夜攪拌した。
反応液に沈澱物が析出したので、水を加えて濾取し、５
％重曹水、１Ｎ塩酸、水の順で洗浄した後、エーテルに
懸濁、濾取する工程を２回行って目的物〔４０〕を得
た。 収量；２８．０ｇ（収率９２．３％）、ＴＬＣ；Ｒｆ₁
＝０．５３

【００７７】４１）ＰＦ（１−７）；Ｂｏｃ−配列番
号：２１−ＯＨ〔４１〕 化合物〔４０〕１２．６ｇ（１０ｍＭ）を酢酸３００ml
に溶かし、これに亜鉛末１５ｇを加え、５０℃で４時間
攪拌した後、亜鉛末を濾別した。酢酸を減圧留去し、残
渣にエーテルを加え、析出した結晶を濾取、洗浄して目
的物〔４１〕を得た。 収量；１１．１５ｇ（収率９７．４％）、融点；２６０
℃（分解） ＴＬＣ；Ｒｆ₁ ＝０．１４、Ｒｆ₂ ＝０．６４ アミノ酸分析；Ｓｅｒ１．８１（２）、Ｇｌｕ２．０２
（２）、Ｖａｌ０．９５（１）、Ｌｅｕ１（１）、Ｉｌ
ｅ０．９２（１）

【００７８】４２）保護−〔Ｎｌｅ⁸ ，Ｎｌｅ¹⁸，Ｔｒ
ｙ³⁴〕−ｈ−ＰＴＨ（１−３４）ＮＨ₂ ；Ｂｏｃ−配列
番号：２２−ＮＨ₂ 〔４２〕 化合物〔３３〕１０．８６ｇ（２．２８ｍＭ）に氷冷下
スカトール０．３０ｇ（２．２８ｍＭ）、ジメチルスル
フイド２５ml、エタンジチオール２．５mlおよびＴＦＡ
２５mlを加え、室温で６０分間攪拌した後、減圧濃縮し
た。残渣にエーテルを加え、生じた沈澱物を濾取、乾燥
した後、乾燥ＤＭＦ１００ml＋ＤＭＳＯ１０mlの混液に
溶かし、次いで氷冷下ＮＭＭを加えてｐＨ７に調節し
た。この溶液にＨＯＢｔ０．３７ｇ（２．７４ｍＭ）お
よび化合物〔４１〕３．１４ｇ（２．７４ｍＭ）を加
え、次いで−１５℃に冷却下ＷＳＣ０．５０ml（２．７
４ｍＭ）を加えた後、室温で一夜攪拌した。反応液に水
を加え、生じた沈澱物を濾取し、充分に水洗した後、エ
タノール−エーテルで洗浄して目的物〔４２〕を得た。 収量；１２．８７ｇ（収率９７．３％）、融点；１３
９．５〜１７５℃ 〔α〕²⁸Ｄ−１．９７°（Ｃ＝０．５１，ＤＭＦ） アミノ酸分析；Ａｓｐ３．７２（４）、Ｓｅｒ２．７６
（３）、Ｇｌｕ５．５８（５）、Ｇｌｙ０．６９
（１）、Ｖａｌ２．８６（３）、Ｉｌｅ１．１１
（１）、Ｌｅｕ５（５）、Ｔｙｒ０．９９（１）、Ｌｙ
ｓ２．８７（３）、Ｈｉｓ２．１９（３）、Ａｒｇ２．
０６（２）、Ｔｒｐ０．６５（１）、Ｎｌｅ１．９６
（２）

【００７９】４３）〔Ｎｌｅ⁸ ，Ｎｌｅ¹⁸，Ｔｒｙ³⁴〕
−ｈ−ＰＴＨ（１−３４）ＮＨ₂ 化合物〔４２〕２．９ｇ（０．５ｍＭ）に０℃に冷却下
アニソール３．５ml、エタンジチオール０．３５ml、ジ
メチルスルフイド３．５mlおよび無水ＨＦ３５mlを加
え、６０分間攪拌した。反応後、ＨＦを減圧下留去し、
残渣にエーテルを加え、生じた沈澱物を集めた後、０．
１Ｎ酢酸に溶解した、この溶液をダウエックス×１（ア
セテート型）のカラム（３．５×１２cm）に通し、ニン
ヒドリン陽性のフラクションのみを集め凍結乾燥して粗
生成物１．８７ｇを得た。これを０．１Ｎ酢酸５０mlに
溶かし、ＣＭ−セルロースのカラム（２×３３cm) にチ
ャージし、０．０５Ｍ酢酸アンモニウム（ｐＨ５．１）
１ｌ〜０．４Ｍ酢酸アンモニウム（ｐＨ６．０）１ｌの
直線型濃度勾配による溶出を行った。各フラクションは
９．０mlづつ分画し、ＴＬＣによりＲｆ₆ ＝０．３０付
近にスポットを有する７４〜８４本目のフラクションを
集め乾燥した。これを出来るだけ少量の０．１Ｎ塩酸に
溶かし、この溶液をセファデックスＧ−２５のカラム
（３×１１５cm)にチャージし、０．１Ｎ酢酸で溶出し
た。各フラクションはＵＶ２８０ｎｍにおける吸光度を
測定し、１つの大きなピークを有するフラクションのみ
を集めて凍結乾燥して〔Ｎｌｅ⁸ ，Ｎｌｅ¹⁸，Ｔｙ
ｒ³⁴〕−ｈ−ＰＴＨ（１−３４）ＮＨ₂ を得た。 収量；１４０mg、ＴＬＣ；Ｒｆ₆ ＝０．３０ アミノ酸分析（３％チオグリコール酸含有６Ｎ塩酸で加
水分解）；Ａｓｐ３．９８（４）、Ｓｅｒ２．１０
（３）、Ｇｌｕ４．９３（５）、Ｇｌｙ０．９７
（１）、Ｖａｌ２．６６（３）、Ｉｌｅ０．８７
（１）、Ｌｅｕ５．００（５）、Ｔｙｒ１．１１
（１）、Ｌｙｓ３．２６（３）、Ｈｉｓ２．３０
（３）、Ａｒｇ２．０３（２）、Ｔｒｐ０．６２
（１）、Ｎｌｅ２．２２（２） 高速液体クロマトグラフイー； カラム；ヌクレオシル（Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ）₅ Ｃ
₁₈（４mmＩ．Ｄ．×１５０mm）緩衝液；０．１Ｍリン酸
含有０．１％酢酸−アセトニトリル（アセトニトリルの
比率は最初の５分間は２０％、その後の２０分間は２０
％〜４０％の直線型濃度勾配による） 流速；１ml／分 検出；２２５ｎｍ 測定結果；１９．０７分にのみピーク検出。

【００８０】実施例１ 〔Ｎｌｅ⁸ ，Ｎｌｅ¹⁸，Ｔｙｒ³⁴〕−ｈ−ＰＴＨ（１−
３４）ＮＨ₂ の¹²⁵ Ｉ標識体の調製 ２ｍＣｉの放射活性を有する¹²⁵ Ｉ−ＮａＩを含有する
０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．１）５０μｌに〔Ｎｌ
ｅ⁸ ，Ｎｌｅ¹⁸，Ｔｙｒ³⁴〕−ｈ−ＰＴＨ（１−３４）
ＮＨ₂ の２μｇ含有液１０μｌおよびクロラミンＴ
（３．５mg／ml）含有液２０μｌを加えて３０秒間攪拌
した後、これに重亜硫酸ナトリウム（４．５mg／ml）含
有液５０μｌを加えて反応を停止した。これに５％ヒト
血清アルブミン含有０．１Ｎ酢酸溶液０．５mlを加えた
後、セファデックスＧ−１０のカラム（１×５０cm）に
チャージし、上記酢酸溶液で溶出して¹²⁵ Ｉで標識した
〔Ｎｌｅ⁸ ，Ｎｌｅ¹⁸，Ｔｙｒ³⁴〕−ｈ−ＰＴＨ（１−
３４）ＮＨ₂ を得た。

【００８１】＜非放射性ＮａＩによるペプチドの標識＞
¹²⁵ Ｉで標識したペプチドの物性については、上記方法
と同様に非放射性ＮａＩを用いてＩ化を行なったのち、
生成物の物性を明らかにし、それと¹²⁵ Ｉで標識したペ
プチドを比較検討することに決定した。すなわち、〔Ｎ
ｌｅ⁸ ，Ｎｌｅ¹⁸，Ｔｙｒ³⁴〕−ｈ−ＰＴＨ（１−３
４）ＮＨ₂ ５mgを水２．５mlに溶解し、０．１Ｍリン酸
緩衝液（ｐＨ７．１）２５０μｌ、ＮａＩ（２．２mg／
ml）含有液２００μｌおよびクロラミンＴ（１２５mg／
ml）含有液１００μｌを加えて３０秒間攪拌した後、こ
れに重亜硫酸ナトリウム（１００mg／ml）含有液６５μ
ｌを加えて反応を停止した。これをセファデックスＧ−
１０のカラム（１×５０cm）にチャージし、０．１Ｎ酢
酸溶液で溶出し、２８０ｎｍに吸収をもつ分画を集め凍
結乾燥して、〔Ｎｌｅ⁸ ，Ｎｌｅ¹⁸，Ｔｙｒ³⁴〕−ｈ−
ＰＴＨ（１−３４）ＮＨ₂ のＩ化体を得た。

【００８２】得られた生成物を下に示した条件でＨＰＬ
Ｃ分析を行ったところ、溶出時間約２５．８分（ピーク
−１）と約２７．２分（ピーク−２）に二つのピークを
示した。（原料の〔Ｎｌｅ⁸ ，Ｎｌｅ¹⁸，Ｔｙｒ³⁴〕−
ｈ−ＰＴＨ（１−３４）ＮＨ₂ は約２４．２分に溶出さ
れる。） 分析条件 機器；島津ＬＣ−６Ａ 高圧グラジエントシステム カラム；ＹＭＣ−ＰＡＣＫ Ｒ−ＯＤＳ−５（４．６mm
Ｉ．Ｄ．×２５０mm） 溶出液；０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ ＣＮ ７５／２５→６
０／４０（ｖ／ｖ，３０分） 流速；１ml／分 検出；２１０ｎｍ、２８０ｎｍ

【００８３】そこで、これらの二つのピークをＨＰＬＣ
により分離精製し、そしてピーク−１、ピーク−２のそ
れぞれをトリプシンを用いて酵素分解を行った後、ＨＰ
ＬＣにより分析した。そして分離したそれぞれのトリプ
シン分解ピークを６Ｎ−ＨＣｌ、１１０℃、２４時間の
加水分解後アミノ酸分析を行った。その結果、アミノ酸
分析においてＴｙｒを含まないトリプシン分解ピークは
アミノ酸組成、ＨＰＬＣによる溶出時間がピーク−１、
ピーク−２で同等であった。Ｔｙｒを含むトリプシン分
解ピークはＨＰＬＣでの溶出時間が異なっていたので、
さらにＦＡＢ−ＭＡＳＳによる分析を行った。ＦＡＢ−
ＭＡＳＳによりピーク−１から得られたＴｙｒを含むト
リプシン分解ピークのＭＨ⁺ は１０１３でアミノ酸順序
２８から３４のＨ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−
Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−ＮＨ₂ に１ケＩ化されたもの
である。さらにピーク−２から得られたもののＭＨ⁺ は
１１３９で２ケＩ化されたものである。以上のことによ
りピーク−１は〔ＮＩｅ⁸ ，Ｎｌｅ¹⁸，Ｔｙｒ³⁴〕−ｈ
−ＰＴＨ（１−３４）ＮＨ₂ のＴｙｒがモノヨウ素化さ
れたもの、ピーク−２はジヨウ素化されたものである。

【００８４】＜〔ＮＩｅ⁸ ，Ｎｌｅ¹⁸，Ｔｙｒ³⁴〕−ｈ
−ＰＴＨ（１−３４）ＮＨ₂ の¹²⁵ Ｉ標識体の分析＞分
析はＨＰＬＣにより行った。 分析条件 機器；島津ＬＣ−６Ａ 高圧グラジエントシステム カラム；ＹＭＣ ＡＭ−３０２ＯＤＳ（４．６mmＩ．
Ｄ．×１５０mm） ミニガードカラム；ヌクレオシル（Ｎｕｃｌｅｏｓｉ
ｌ）１００−５ Ｃ１８（４mmＩ．Ｄ．×１０mm） 溶出液；０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ ＣＮ ６９．３／３
０．７（ｖ／ｖ） 流速；１ml／分 検出器；島津ＳＰＤ−６Ａ（２１０ｎｍ）、ＲＩ検出器
ＲＬＣ−７０１（Ａｌｏｋａ）

【００８５】上記の分析条件により〔Ｎｌｅ⁸ ，Ｎｌｅ
¹⁸，Ｔｙｒ³⁴〕−ｈ−ＰＴＨ（１−３４）ＮＨ₂ のモノ
ヨウ素化体およびジヨウ素化体はそれぞれ約１３．５
分、約２３．３分に溶出される。そこで、調製された
〔Ｎｌｅ⁸ ，Ｎｌｅ¹⁸，Ｔｙｒ³⁴〕−ｈ−ＰＴＨ（１−
３４）ＮＨ₂ の¹²⁵ Ｉ標識体を同様の条件で分析すると
モノヨウ素化〔¹²⁵ Ｉ〕体、ジヨウ素化〔¹²⁵ Ｉ₂ 〕体
が約４：１（比放射活性）で得られた。¹²⁵ Ｉ−Ｎａ
Ｉ、クロラミンＴ、反応時間により、この比率は変化す
るが、ＨＰＬＣにより精製することにより単一なモノヨ
ウ素（¹²⁵ Ｉ）体、あるいはジヨウ素（¹²⁵ Ｉ₂ ）体が
得られた。

【配列表】

【００８６】配列番号：１ 配列の長さ：３４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴： 他の情報：Ｃ末端Ｔｙｒのカルボキシル基はアミド化さ
れている。 配列 Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Nle His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn Ser Nle 1 5 10 15 Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His Asn Tyr 20 25 30

【００８７】配列番号：２ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 他の情報：Ｃ末端Ｔｙｒのカルボキシル基はアミド化さ
れている。Ｎ末端おびＣ末端のアミノ酸は保護基により
保護されている。 配列 Val His Asn Tyr(Bzl-Cl₂)

【００８８】配列番号：３ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 他の情報：Ｃ末端Ｔｙｒのカルボキシル基はアミド化さ
れている。Ｎ末端おびＣ末端のアミノ酸は保護基により
保護されている。 配列 Asp(OBzl) Val His Asn Tyr(Bzl-Cl₂) 30

【００８９】配列番号：４ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 他の情報：Ｃ末端Ｔｙｒのカルボキシル基はアミド化さ
れている。Ｎ末端から２番目およびＣ末端のアミノ酸は
保護基により保護されている。

【００９０】配列番号：５ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列の特徴： 他の情報：各アミノ酸は保護基により保護されている。 配列 Arg(Tos) Lys(Z-Cl) Lys(Z-Cl) Leu 25

【００９１】配列番号：６ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列の特徴： 他の情報：各アミノ酸は保護基により保護されている。

【００９２】配列番号：７ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列の特徴： 他の情報：Ｎ末端から２番目を除き各アミノ酸は保護基
により保護されている。

【００９３】配列番号：８ 配列の長さ：１２ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 他の情報：Ｃ末端Ｔｙｒのカルボキシル基ハアミド化さ
れている。各アミノ酸は保護基により保護されている場
合がある。 配列 Trp Leu Arg(Tos) Lys(Z-Cl) Lys(Z-Cl) Leu Gln Asp(OBzl) Val His Asn 25 30 Tyr(Bzl-Cl₂)

【００９４】配列番号：９ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列の特徴： 他の情報：各アミノ酸は保護基により保護されている場
合がある。

【００９５】配列番号：１０ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列の特徴： 他の情報：各アミノ酸は保護基により保護されている場
合がある。

【００９６】配列番号：１１ 配列の長さ：１７ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 他の情報：Ｃ末端Ｔｙｒのカルボキシル基はアミド化さ
れている場合がある。 配列 Nle Glu(OBzl) Arg(Tos) Val Glu(OBzl) Trp Leu Arg(Tos) Lys(Z-Cl) Lys 20 25 (Z-Cl) Leu Glu Asp(OBzl) Val His Asn Tyr(Bzl-CL₂) 30

【００９７】配列番号：１２ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列の特徴： 他の情報：アミノ酸は保護基により保護されて場合があ
る。

【００９８】配列番号：１３ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列の特徴： 他の情報：アミノ酸は保護基により保護されて場合があ
る。

【００９９】配列番号：１４ 配列の長さ：２２ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 他の情報：Ｃ末端Ｔｙｒのカルボキシル基はアミド化さ
れている。アミノ酸は保護基により保護されている場合
がある。 配列 Lys(Z-Cl) His Leu Asn Ser(Bzl) Nle Glu(OBzl) Arg(Tos) Val Glu(OBzl) Trp 15 20 Leu Arg(Tos) Lys(Z-Cl) Lys(Z-Cl) Leu Gln Asp(OBzl) Val His Asn Tyr(Bzl-C 25 30 -Cl₂)

【０１００】配列番号：１５ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列の特徴： 他の情報：Ｎ末端およびＣ末端のアミノ酸は保護基によ
り保護されている。

【０１０１】配列番号：１６ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列の特徴： 他の情報：Ｎ末端およびＣ末端のアミノ酸は保護基によ
り保護されている場合がある。

【０１０２】配列番号：１７ 配列の長さ：２７ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 他の情報：Ｃ末端Ｔｙｒのカルボキシル基はアミド化さ
れている。アミノ酸は保護基により保護されている場合
がある。 配列 Nle His Asn Leu Gly Lys(Z-Cl) His Leu Asn Ser(Bzl) Nle Glu(OBzl) Arg(To 10 15 20 s) Val Glu(OBzl) Trp Leu Arg(Tos) Lys(Z-Cl) Lys(Z-Cl) Leu Gln Asp(OB 25 30 zl) Val His Asn Tyr(Bzl-Cl₂)

【０１０３】配列番号：１８ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列の特徴： 他の情報：Ｎ末端およびＣ末端のアミノ酸は保護基によ
り保護されている。

【０１０４】配列番号：１９ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列の特徴： 他の情報：アミノ酸は保護基により保護されている場合
がある。

【０１０５】配列番号：２０ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列の特徴： 他の情報：アミノ酸は保護基により保護されている場合
がある。

【０１０６】配列番号：２１ 配列の長さ：７ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｎ末端フラグメント 配列の特徴： 他の情報：アミノ酸は保護基により保護されている場合
がある。

【０１０７】配列番号：２２ 配列の長さ：３４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：最終フラグメント 配列の特徴： 他の情報：アミノ酸は保護基により保護されている場合
がある。 配列 Ser(Bzl) Val Ser(Bzl) Glu(OBzl) Ile Gln Leu Nle His Asn Leu Gly Lys(Z-C 1 5 10 1) His Leu Asn Ser(Bzl) Nle Glu(OBzl) Arg(Tos) Val Glu(OBzl) Trp Leu Arg 15 20 25 (Tos) Lys(Z-Cl) Lys(Z-Cl) Leu Gln Asp(OBzl) Val His Asn Tyr(Bzl-Cl₂) 30

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｇ０１Ｎ 33/53 Ｂ 8310−2Ｊ 33/534 8310−2Ｊ Ｃ０７Ｋ 99:00

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式 Ｈ−配列番号：１−ＮＨ₂ で表されるペプチドの３４番目のＴｙｒが１〜２個の
   ¹²⁵ Ｉで標識された放射活性体。