JPH0610184B2 - 非天然アミノ酸 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 （発明の背景） 黄体形成ホルモン(LH)及び卵胞刺激ホルモン(FSH)は、
視床下部において生産される放出ホルモン(LHRH)の制御
の下で、下垂体前葉から遊離される。ＬＨ及びFSHは生
殖腺に作用してステロイドホルモンの合成を刺激し、そ
して配偶子の熟成を刺激する。LHRHの間欠的放出、並び
にそれによるＬＨ及びFSHの放出により、家畜及びヒト
における生殖循環が制御される。

LHRHは又、間接的に胎盤及び生殖腺に作用し、絨毛性ゴ
ナドトロピン(hCG)の放出を惹起する。

LHRHの拮抗物質は受精率の制御に有用である。このよう
な拮抗物質は雌における排卵を遮断し、そして雄におけ
る精子形成を抑制する。生殖腺由来性ステロイドの正常
な循環レベルの低下及び雌及び雄における補助器官重量
の低下はこれらの作用と関連する。家畜においては、前
記の作用により飼料の供与量に対する体重増加が促進さ
れ、妊娠動物における流産が助長され、そして一般に前
記の拮抗物質は不妊薬として機能する。

天然の放出ホルモンLHRHは天然アミノ酸（非対掌性ミノ
酸であるグリシン以外はＬ型である）から成るデカペク
チドである。この配列は次の通りである。

(pyro)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH₂ １ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８ ９ 10 この天然物質の多くの類似体が研究され、そしてそれら
の大部分のものは、臨床的に使用するには生物学的活性
が不十分であることが明らかにされた。ある種の選択的
に変形された物質は生物活性に対して作用性効果（agon
ist effect）を有することが明らかにされた。６位の残
基をグリシンからＤ−アミノ酸に変えることにより非常
に有意な強化が達成される。

作用性物質の他に、LHRHに対する競争的拮抗物質である
類似体が調製されている。これらのすべては、２位のヒ
スチジン残基の除去又は置換を必要とする〔バーレ（Va
le）Ｗ．等、Sciense、１７６：９３３（１９７２
年）〕。一般に、配列中の前記の位置にD-アミノ酸を配
置することにより最良の活性が得られる〔リース（Ree
s）R・W.A等、J.Med.Chem.１７：１０１６（１９７４
年）〕。

６位に変更を加えることにより、（この場合２位に変更
を加えない場合には前記の作用性が生ずるが、）２位を
変形した類似体の拮抗活性が強化されることが示されて
いる〔ビーティー(Beattie)C.W.等、J.Med.Chem、１
８：１２４７（１９７５年）；リビエール（Rivier）
等、Peptides １９７６、４２７頁、ブリュッセル大学
編、ベルギー（１９７６年）〕。

LHRL拮抗物質の主要な系列をなす前記の２種類の変更の
背景に対して、すでに２位と６位が変形されているペプ
チドの1,3及び／又は１０位を変形することにより拮抗
活性がさらに増大する〔コイ（Coy）D.H.等、Peptidss
１９７６、４６２頁、ブリュッセル大学編、ベルギー
（１９７６年）；リビエール（Rivier）J.E.等、Life S
ci.２３：８６９（１９７８年）；ドウッタ(Dutta)A.S.
等Biochem.Biophys.Res.Commun.８１：３８２（１９７
８年）；ハンフリース(Humphries)J.等、Biochem.Boiph
ys.Res.Commun.、85：７０９（１９７８年）〕。さら
に、１位のアミノ酸のN-アシル化が有効であることが示
された〔キャナバサバイア（Channabasavaia）K.等Bioc
hem.Biophys.Res.Commun.８１：３８２（１９７８
年）；コイ（Coy）D.H.等Peptides.-Structure and Bio
logical Function ７７５頁、ピース・ケミカル（Pier
ce Chemical）社（１９７９年）〕。さらに、(N-Ac-D-p
-Cl-Phe¹、D-p-cl-phe²、D-Trp³、D-Arg⁶、D-Al_a ¹⁰）LH
RHが公表されている〔D.H.コイ（Coy）、Endocrinolog
y、１１０、１４４５（１９８２年）〕。他方、LHRHのD
-Ala⁴変形において拮抗活性が保持される旨報告されて
いる〔E.ペドロザ（Pedroza）、J.A.マルチネツ（Marti
nez）、D.H.コイ（Coy）、A.アリムラ及びA.V.シャーリ
ー（Schally）、Int.J.Fert.、２３、２９４（１９７８
年）〕。

拮抗物質は、関連する受容器に関してLHRHと競争するこ
とにより機能するので、天然ペプチドを遮断するために
は拮抗物質の大量投与が必要である。この観点から、非
常に高い活性を有し、且つ長時間持続する拮抗物質を得
ることが特に望まれる。薬剤から徐々に遊離することも
又重要である。現在知られている類似体のセットにおい
ては比較的多量の化合物が必要であり、このために毒性
及び他の副作用が増加する可能性があるという問題が伴
う。

（発明の概要） この発明は、LHRHの類似体である新規で高い活性を有す
るノナペプチド及びデカペプチドを構成するアミノ酸に
関し、これらのペプチドにおいては、２位における置換
（これによりペプチドが拮抗型に変えられる）が、６位
のグリシン残基の、新規なグアニド置換アミジン、又は
第三もしくは第四アミン水溶性非天然アミノ酸による置
換により、さらに効果的にされている。1,2,3,4,7及び
／又は１０位の置換により活性がさらに強化される。こ
の発明はさらに、これらの化合物を使用する種々の方
法、及びそのための医薬組成物に関する。この発明はさ
らに、上記の新規化合物の製造方法に関する。

（発明の具体的な記載） 類似体の記載 この発明は、次の式(I)、 A-B-C-D-E-F-G-Arg-Pro-H (I) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 ｛式中、 Ａは、L-ピログルタミル基；D-ピログルタミル基；N-ア
シル-D,L-トリプトファニル基；N-アシル−グリシル
基；N-Ac-D.L-Δ^3,4−プロリル基；N-Ac-D,L-プロリル
基；N-Ac-L-アルキルプロリル基；N-Ac-D,L-フェニルア
ラニル基；N-Ac-D,L-p-クロロフェニルアラニル基；N-A
c-D,L-セリル基；N-Ac-D,L-スレオニル基；N-Ac-D,L-ア
ラニル基；3-(1-ナフチル）-D,L-アラニル基；3-(2-ナ
フチル）-D,L-アラニル基；3-(2,4,6-トリメチルフェニ
ル）-D,L-アラニル基；3-(4-トリフルオロメチルフェニ
ル）-D,L-アラニル基；3-(9-アンスリル）-D,L-アラニ
ル基；3-(2-フルオレニル）-D,L-アラニル基；並びに3-
(Het)-D,L-アラニル基〔ここで、Hetは、次の式、 （式中、Ａ″及びＡ′は独立して、水素、低級アルキル
基、塩素及び臭素から成る群から選ばれ、そしてＧは、
酸素、窒素及び硫黄から成る群から選ばれる、）から選
ばれた基を含有する複素環アリール基である、〕から成
る群から選ばれたアミノアシル残基であり、 Ｂは、D-フェニルアラニル基、D-p-Cl-フェニルアラニ
ル基、D-p-F-フェニルアラニル基、D-p-ニトロフェニル
アラニル基、3-(3,4,5-トリメトキシフェニル）-D-アラ
ニル基、2,2-ジフェニルグリシン、D-α−メチル-p-Cl-
フェニルアラニン及び3-(2,4,6-トリメチルフェニル）-
D-アラニル基から成る群から選ばれたアミノアシル残基
であり、 Ｃは、L-トリプトファニル基、D-トリプトファニル基、
D-フェニルアラニル基、D-Me₅フェニルアラニル基、3-
(2-ピリジル）-D-アラニル基、3-(3-ピリジル）-D-アラ
ニル基、3-(4-ピリジル）-D-アラニル基、3-(1-ナフチ
ル）-D-アラニル基及び3-(2-ナフチル）-D-アラニル基
から成る群から選ばれたアミノアシル基であり、 Ｄは、L-セリル基及びD-アラニル基から成る群から選ば
れたアミノアシル基であり、 Ｅは、L-フェニルアラニル基及びL-チロシル基から成る
群から選ばれたアミノアシル基であり、 Ｆは、次の構造式、 (a) 〔式中、 ｎは１〜５であり； Ｒ_１はＮＨＲ_３であり、ここでＲ_３は炭素原子数１〜６
個のアルキル基、炭素原子数３〜６個のシクロアルキ
ル、又は−（ＣＨ_２）_ｍＮ（Ｒ_４）_２であって、ｍは１
〜５であり、そしてＲ_４は炭素原子数１〜４個のアルキ
ル基であり、但しｎが３の時はＲ_３は炭素原子数２〜６
個のアルキル基又は炭素原子数３〜６個のシクロアルキ
ル基であり； そして、 Ｒ_２は水素、炭素原子数１〜６個のアルキル基又は炭素
原子数３〜６個のシクロアルキル基であり；あるいはＲ
_１とＲ_２は一緒になって次の構造式： で表わされる環を構成する〕 により表わされる非天然アミノ酸であり、 Ｇは、L-ロイシル基、L-ノルロイシル基及びL-ノルバリ
ル基から成る群から選ばれたアミノアシル基であり、 Ｈは、D-アラニンアミド基、D-ロイシンアミド基、グリ
シンアミド基又は-NHR₅〔ここで、Ｒ_５は低級アルキル
基、シクロアルキル基、フルオロ低級アルキル基又はNH
CONH-R₁₀（ここで、Ｒ₁₀は水素又は低級アルキル基であ
る、）である｝ で表わされる化合物、並びにその医薬として許容される
塩に関する。

この発明は、次の式(I)、 A-B-C-D-E-F-G-Arg-Pro-H (I) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 ｛式中、 Ａは、N-Ac-D.L-Δ^3,4-プロリル基、N-Ac-D,L-プロリル
基、N-Ac-L-アルキルプロリル基；N-Ac-D,L-フェニルア
ラニル基、N-Ac-D,L-p-クロロフェニルアラニル基、N-A
c-D,L-セリル基、N-Ac-D,L-スレオニル基、N-Ac-D,L-ア
ラニル基、3-(1-ナフチル）-D,L-アラニル基、3-(2-ナ
フチル）-D,L-アラニル基、3-(2,4,6-トリメチルフェニ
ル）-D,L-アラニル基、及び3-(4-トリフルオロメチルフ
ェニル）-D,L-アラニル基からなる群から選ばれたアミ
ノアシル残基であり、 Ｂは、D-フェニルアラニル基、D-P-Cl-フェニルアラニ
ル基、D-p-F-フェニルアラニル基、D-p-ニトロフェニル
アラニル基、3-(3,4,5-トリメトキシフェニル）-D-アラ
ニル基、2,2-ジフェニルグリシル基、D-α−メチル-p-C
l-フェニルアラニル基、及び3-(2,4,6-トリメチルフェ
ニル）-D-アラニル基から成る群から選ばれたアミノア
シル残基であり、 Ｃは、D-トリプトファニル基、D-ファニルアラニル基、
D-Me₅フェニルアラニル基、3-(3-ピリジル）-D-アラニ
ル基、3-(1-ナフチル）-D-アラニル基、及び3-(2-ナフ
チル）-D-アラニル基から成る群から選ばれたアミノ酸
残基であり、 Ｄは、L-セリル基、及びD-アラニル基から成る群から選
ばれたアミノアシル残基であり、 Ｅは、L-フェニルアラニル基、及びL-チロシル基から成
る群から選ばれたアミノアシル基であり、 Ｆは、次の構造式、 (a) 〔式中、 ｎは１〜５であり； Ｒ_１はＮＨＲ_３であり、ここでＲ_３は炭素原子数１〜６
個のアルキル基、炭素原子数３〜６個のシクロアルキ
ル、又は−（ＣＨ_２）_ｍＮ（Ｒ_４）_２であって、ｍは１
〜５であり、そしてＲ_４は炭素原子数１〜４個のアルキ
ル基であり、但しｎが３の時はＲ_３は炭素原子数２〜６
個のアルキル基又は炭素原子数３〜６個のシクロアルキ
ル基であり； そして、 Ｒ_２は水素、炭素原子数１〜６個のアルキル基又は炭素
原子数３〜６個のシクロアルキル基であり；あるいはＲ
_１とＲ_２は一緒になって次の構造式： で表わされる環を構成する〕 により表わされる非天然アミノ酸であり、 Ｇは、L-ロイシル基、L-ノルロイシル基、及びL-ノルバ
リル基から成る群から選ばれたアミノアシル残基であ
り、そして、 Ｈは、D-アラニンアミド基、D-ロイシンアミド基、グリ
シンアミド基、又は-NHR₅（ここで、Ｒ_５は低級アルキ
ル基又はNHCONH-R₂である、）である、｝ で表わされる新規なノナペプチド及びデカペプチドであ
るLHRH類似体、並びにその医薬として許容される塩を構
成する、非天然アミノ酸Ｆに関する。

LHRH中の２位のL-ヒスチジル残基を、この明細書におい
て定義した残基の１つにより置換することは、ペプチド
をLHRH拮抗物質に転化するために必須である。LHRH中の
６位のグリシル残基をこの明細書においてＦとして定義
した残基の１つにより置換することにより、拮抗作用が
劇的に増強される。この明細書に記載した１、２、３、
４、７及び１０位の置換は、拮抗作用を増強するために
さらに有効である。

略号及び定義 この発明を記載する便宜上、IVPAC-IVB Commission on
Biochemical Nomenclature、Biochemistry 11、１７２
６（１９７２年）により推奨されており、ペプチドの技
術分野において一般的に容認されているところに従い、
種々のアミノ酸のために常用の略号を用いる。これらは
L-アミノ酸である。但し、非対掌性アミノ酸であるグリ
シン、及び非対掌性の又は特にD-と印された非天然又は
天然アミノ酸、及びLHRH中に通常存在するアミノ酸に代
えて1、2、3、4、6、7及び10位に置換されたアミノ酸は例外
である。この明細書に記載するすべてのペプチド配列
は、一般に容認されている方法に従って、N-末端アミノ
酸を左側に、そしてC-末端アミノ酸を右側に記載する。

この発明を記載するのに他の略号も有用である。この発
明は天然に存在しないアミノ酸の置換基を用いる。これ
らの内、特に共通に使用されるものは次の通りである。

さらに、便宜上次のような省略記載を行う。LHRHのアミ
ノ酸配列は次の式 により表わされるので、この配列の特定の部位のアミノ
酸残基が他のアミノ酸残基又は他の成分により置換され
ている場合には、LHRHをもとにして置換基の種類とその
位置（肩数字による）を示すことによって省略記載す
る。

すなわち、例えば、LHRHの６位のGlYがD-Dihにより置換
され、２位のHisがD-p-F-Pheにより置換されている次の
配列、 は〔D-p-F-Phe²、D-Dih⁶〕LHRHとして表わし、そして、 は〔NAc-Pro¹、D-p-F-Phe²、D-Dih⁶、Pro⁹-NHEt〕LHRH
と表わす。

この明細書において「医薬として許容される塩」なる語
は、もとの化合物の所望の生物学的活性を保持してお
り、しかもいかなる不所望の毒性も供さない塩を意味す
る。このような塩の例として、(a)無機酸、例えば塩
酸、臭酸、硫酸、燐酸、硝酸及びこれらに類するものの
ごとき酸との酸付加塩；並びに、例えば酢酸、蓚酸、酒
石酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、グルコン酸、
クエン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、安息香酸、パモ
酸、アルギニン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンスル
ホン酸、ナフタレンジスルホン酸、ポリガラクチュロン
酸のごとき有機酸との塩；(b)亜鉛、カルシウム、ビス
マス、バリウム、マグネシウム、アルミニウム、銅、コ
バルト、ニッケル、カドミウム及びこれらに類するもの
のごとき多価金属陽イオンとの塩；又はN,N′-ジベンジ
ルエチレン−ジアミンもしくはエチレンジアミンから形
成される有機陽イオンとの塩；又は、(c)亜鉛タンニン
酸塩及びこれに類するもののごとき(a)と(b)の組合わせ
から成る塩；を挙げることができる。

「低級アルキル基」なる語は、例えばメチル基、エチル
基、n-プロピル基、イソプロピル基、n-ブチル基、イソ
ブチル基、sec-ブチル基及びtert-ブチル基のごとき直
鎖又は分枝鎖の炭素原子数１〜４個の飽和炭化水素基を
意味する。「炭素原子数１〜６個のアルキル基」には低
級アルキル基と同じ置換基が含まれるが、このほかに炭
素原子数５又は６個の種々の基、例えばn-ペンチル基、
n-ヘキシル基、又は他の炭素原子数５〜６個の分枝基が
含まれる。「炭素原子数１〜１２個のアルキル基」は１
〜１２個の炭素原子と水素のみから成る基であって炭素
原子数が１〜１２個である点を除き上記の意味を有す
る。「シクロアルキル」なる語は炭素原子数３〜６個の
環状飽和炭化水素基、例えば、シクロプロピル基、シク
ロブチル基、シクロペンチル基及びシクロヘキシル基を
意味する。

この発明において、略号「アルキルPro」はcis-5-アル
キル-L-プロリル残基（ここで、アルキルは、前記の
「低級アルキル」と同じである、）を意味する。さらに
具体的に「MePro」はcis-5-メチル-L-プロリルを、「Et
Pro」はcis-5-エチル-L-プロリルを、そして「ButPro」
はcis-5-n-ブチル-L-プロリルを意味する。「N-Ac」な
る略号はN-アセチルアミノ酸残基を意味し、これは一般
に認められている表示である。

化合物の好ましい具体例 この発明の好ましい具体例たる化合物は、ＡがN-Ac-L-P
ro、N-Ac-D-Ser、N-Ac-D-p-Cl-Phe、又はN-Ac-D-Nal(2)で
あり；ＢがD-p-F-Phe又はD-p-Cl-Pheであり；ＣがD-Tr
p、D-Nal(2)、D-3Pal又はD-Pheであり；ＤがSerであり；
ＥがTyrであり；Ｆが式(II)の化合物（式中、ｎは３又
は４であり、Ｒ_１は炭素原子数１〜８個のアルキル基、
又はシクロヘキシル基であり、そしてＲ_２は水素であ
る）、式(II)の化合物〔式中、Ｒ_１は-NHR₃（ここで、
Ｒ_３はメチル基、エチル基、n-プロピル基、イソプロピ
ル基、n-ヘキシル基、又はシクロヘキシル基である）で
あり、そしてＲ_２はＲ_３又は水素である〕、又は式(II)
の化合物（式中、Ｒ_１及びＲ_２はジヒドロイミダゾリニ
ル基である）、又は式(IV)もしくは(V)の化合物（式中
Ｒ_９は水素、メチル基、ペンチル基又はベンジル基であ
る）であり；そして、ＨがD-AlaNH₂、GlyNH₂又はNHEtで
ある式(I)の化合物である。

一般的に言って、ＦがN,N′-グアニド−二置換-D-アル
ギニニル基又はD-ホモアルギニニル基である化合物が含
ましい。

さらに好ましい具体例として次の化合物を挙げることが
できる。

ＡがN-Ac-L-Pro、N-Ac-D-Nal(2)又はN-Ac-D-p-Cl-Pheで
あり；ＢがD-p-F-Phe又はD-p-Cl-Pheであり；ＣがD-Nal
(2)、D-Trp、D-3Pal又はD-pheであり；ＤがSerであり；
ＥがTyrであり；ＦがD-Dmh、D-Deh、D-Dph、D-Dhh又はD-D
hiであり；そして、ＨがD-AlaNH₂、ClyNH₂又はNHEtであ
る化合物； N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Nal(2)-Ser-Tyr-F-Leu-Arg-Pr
o-GlyNH₂（式中、ＦはD-Dmh、D-Deh、D-Dph、D-Dhh、D-Dhi、
D-Prh又はD-Hhaである、）； N-Ac-L-Pro-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-F-Leu-Arg-Pro-
NHEt（式中、ＦはD-Dmh、D-Deh、D-Dph、D-Dhh、D-Dhi、D-Pr
h又はD-Hhaである）； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-F-Leu-Arg
-Pro-D-AlaNH₂（式中、ＦはD-Dmh、D-Deh、D-Dph、D-Dhh、D
-Dhi、Dprh又はD-Hhaである）； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-F-Leu-Arg
-Pro-GlyNH₂（式中、ＦはD-Dmh、D-Deh、D-Dph、D-Dhh、D-D
hi、D-Prh又はD-Hhaである）；及び、 N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-F-Leu-Arg-Pr
o-GlyNH₂（式中、ＦはD-Dmh、D-Deh、D-Dph、D-Dhh、D-Dhi、
D-Prh、F-Hha又はpropyl amidineである）。

N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-F-Leu-Arg-P
ro-GlyNH₂（式中、ＦはD-Dmh、D-Deh、D-Dph、D-Dhh又はD-
Dhiである）； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-F-Leu-Arg-P
ro-D-AlaNH₂（式中、ＦはD-Dmh、D-Deh、D-Dph、D-Dhh又は
D-Dhiである）； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-3Pal-Ser-Tyr-F-Leu-Arg-
Pro-GlyNH₂（式中ＦはD-Dmh、D-Deh、D-Dph、D-Dhh又はD-D
hiである）； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-3Pal-Ser-Tyr-F-Leu-Arg-
Pro-D-AlaNH₂（式中、ＦはD-Dmh、D-Deh、D-Dph、D-Dhh又
はD-Dhiである）。

最も好ましい具体例として次の化合物を挙げることがで
きる。

N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Deh-Leu-Arg-P
ro-NHEt； N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dph-Leu-Arg-P
ro-NHEt； N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dhh-Leu-Arg-P
ro-NHEt； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Deh-Leu-Ar
g-Pro-NHEt； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dmh-Leu-Ar
g-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Deh-Leu-Ar
g-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dph-Leu-Ar
g-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dhh-Leu-Ar
g-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dhi-Leu-Ar
g-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dmh-Leu-A
rg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Deh-Leu-A
rg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dph-Leu-A
rg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dhh-Leu-A
rg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dhi-Leu-A
rg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-3Pal-Ser-Tyr-D-Deh-Leu-A
rg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-3Pal-Ser-Tyr-D-Deh-Leu-A
rg-Pro-D-GlyNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-3Pal-Ser-Tyr-D-Deh-Le
u-Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-3Pal-Ser-Tyr-D-Deh-Le
u-Arg-Pro-D-GlyNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dmh-Leu
-Arg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Deh-Leu
-Arg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dph-Leu
-Arg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dhh-Leu
-Arg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dhi-Leu
-Arg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Deh-Leu
-Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dph-Leu
-Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dhh-Leu
-Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-pCl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Deh-Leu-Ar
g-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Deh-Leu-Ar
g-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dmh-Leu-A
rg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dph-Leu-A
rg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dhh-Leu-A
rg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dhi-Leu-A
rg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-3Pal-Ser-Tyr-D-Dmh-Leu-
Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-3Pal-Ser-Tyr-D-Deh-Leu-
Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-3Pal-Ser-Tyr-D-Dph-Leu-
Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-3Pal-Ser-Tyr-D-Dhh-Leu-
Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-3Pal-Ser-Tyr-D-Dhi-Leu-
Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-3Pal-Ser-Tyr-D-Dmh-Leu-
Arg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-3Pal-Ser-Tyr-D-Deh-Leu-
Arg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-3Pal-Ser-Tyr-D-Dph-Leu-
Arg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-3Pal-Ser-Tyr-D-Dhh-Leu-
Arg-Pro-GlyNH₂；及び N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-3Pal-Ser-Tyr-D-Dhi-Leu-
Arg-Pro-GlyNH₂。

上記の具体例のすべてにおいて、化合物は、対応する医
薬として許容される塩として製造することもできる。測
定方法 この発明の化合物、そして特にその塩は、非常に強力で
しかも長時間持続するLHRH拮抗活性を有する。

主要な力価測定法は、ラットにおける排卵阻害能を測定
する方法〔コルビン（Corbin)A.及びベティー（Beatti
e)C.W.、Endocrine Res.Commun.、２：１（１９７５
年）〕、及び家兎におけるＬＨ放出及び排卵阻害能を測
定する方法〔ヘルプス（Phelps)C.P.等、Endocrinology
100：１５２６（１９７７年）〕である。

LHRH拮抗物質及びこの発明の物質のために使用する他の
生物的測定法には、 (a)ラットを用いる生体内試験における、LHRHにより誘
導されるFSH及びLHの放出に対する阻害を測定する方法
〔ビルケツ−マルチネツ（Vilchez-Martinez)J.A.等、E
ndocrinology,９６：１１３０（１９７５年）、及び、 (b)分散した下垂体前葉培養細胞によるLH及びFSHの放出
に対する阻害を放射免疫測定法で測定する方法〔バーレ
（Vale)W.等、Endocrinology９１：５６２（１９７２
年）〕、がある。

拮抗作用及び有用性 この発明の化合物の拮抗作用から次のような有用性が生
ずる。

・雌（女性）の避妊 ・排卵の抑制又は遅延 ・分娩の誘導 ・排卵の同期化 ・発情の抑制 ・雌動物の発育促進 ・黄体分解、月経誘導 ・早期第一３箇月期堕胎 ・子宮内膜症の治療 ・哺乳動物の腫瘍及び嚢腫の治療 ・多嚢胞性卵巣症候群（スタイン・レーベンタール症候
群）の治療 ・子宮ガンの治療 ・良性前立腺肥大及び前立腺ガンの治療 ・雄（男性）の避妊 ・男性又は女性における、生殖腺ホルモンの過剰生産に
より生ずる病気の治療 ・食料生産用雄動物の機能的去勢 ・犬における発情前期出血の抑制 ・閉経期症状の抑制 前記の化合物の特定の用途に関するこの発明の観点は前
記の有用性と関連し、特に雌（女）における排卵の抑制
及び子宮内膜症の治療、並びに雄（男）における精子形
成及び前立腺腫瘍の治療と関連する。

この発明の方法の実施においては、この発明の化合物、
又はそれを含有する医薬組成物の有効量を、治療を必要
とする、又は治療することが好ましい対象に授与する。
これらの化合物又は組成物は、特定の最終用途に従っ
て、経口投与、非経口投与（皮下投与、筋肉内投与、及
び静脈内投与を含む）、膣投与（特に避妊のために）、
肛門投与、口内投与（舌下投与を含む）、経皮投与、又
は鼻内投与を含む種々の系路のいずれかにより投与する
ことができる。ある特定の場合において最も適当な経路
は、使用する特定の活性成分、投与される対象、及び医
師の判断に依存する。化合物又は組成物はさらに、後に
詳述するごとく、徐々に放出されるデポット又は挿入剤
として投与することもできる。

一般に、上記の用途においては、活性成分を、１日当り
約0.０１〜１０mg／kgの体重の範囲、好ましくは約0.１
〜5.０mg／kg体重の範囲で投与するのが好ましい。この
投与は、１日１回の投与により、複数回の適用に分散し
て、又は最も効果的な結果を得るために徐々に放出せし
めることにより投与することができる。

これらの化合物および組成物の正確な投与量及び投与方
法は、必然的に、治療を受ける特定の対象の必要度、治
療方法、重症度又は必要性、及びむろんのこと医師の判
断に依存する。一般に、非経口投与においては、吸収に
依存する程度が高い他の投与方法に比べて投与量を少な
くする必要がある。

この発明はさらに、この発明の化合物を活性成分とし
て、医薬として許容される非毒性担体と共に含んで成る
医薬組成物に関する。前記のごとく、これらの組成物
は、非経口的（皮下、筋肉内又は静脈内）投与に使用す
るために特に溶液又は懸濁液として；膣内又は肛門内投
与に使用するために特にクリーム又は坐薬のごとき半固
形剤として；経口又は口内投与のために特に錠剤又はカ
プセル剤として；あるいは又、鼻内投与のために特に粉
剤、鼻内滴剤又はエーロゾルとして製造することができ
る。

組成物は単位投与量剤として投与するのが便利であり、
そして▲Remington^′ _S▼ Phavmaceutical Sciences、マ
ックパブリッシング（Mack Publishing）社、イースト
ン、ペンシルバニア（１９７０年）に記載されているよ
うに、医薬の分野においてよく知られている方法のいず
れかによって製造することができる。非経口投与剤に
は、常用の賦形剤として無菌水又は塩水、ポリエチレン
グリコールのごときポリアルキレングリコール、植物
油、水素化ナフタレン類、及びこれらに類するものを含
有せしめることができる。膣内又は肛門投与用剤、例え
ば坐薬には、賦形剤として例えばポリアルキレングリコ
ール、ワセリン、ココアバター及びこれらに類するもの
を含有せしめることができる。吸入投与剤は、賦形剤と
して例えばラクトースを含有する個体であってもよく、
又は鼻滴の形で投与するための水性又は油性溶液であっ
てもよい。口腔内投与のための典型的な賦形剤には、
糖、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウ
ム、あらかじめ糊化した澱粉、及びこれらに類するもの
が含まれる。

この発明の化合物は、１回の投与により長期間にわたっ
て、例えば１週間〜１年間にわたって対象に供与するこ
とが特に望ましい。種々の、徐々に放出されるデポット
又は挿入投与形のものが使用される。例えば、この形の
ものは、体液中での溶解度が低い、医薬として許容され
る非毒性塩を含み、例えば、(a)燐酸，硫酸，クエン
酸，酒石酸，タンニン酸、パモ酸，アルギ酸，ポリグル
タミ酸，ナフタレンモノ−又はジ−スルホン酸，ポリガ
ラクシュロン酸及びこれらに類するもののごとき多価酸
との酸付加塩；(b)亜鉛，カルシウム，ビスマス，バリ
ウム，マグネシウム，アルミニウム，銅，コバルト，ニ
ッケル，カドミウム及びこれらに類するもののごとき多
価金属陽イオンとの塩、又は例えばＮ，Ｎ′−ジベンジ
ルエチレンジアミン又はエチレンジアミンから形成され
る有機陽イオンとの塩；あるいは又、(c)例えば亜鉛タ
ンニン酸塩のごとき(a)及び(b)の組合わせの塩を含む。
さらに、この発明の化合物、又は詳しくは前記のような
比較的溶解しにくい塩を、注射に適するゲル、例えばゴ
マ油と共にモノステアリン酸アルミニウムゲルの形に製
剤化することができる。特に好ましい塩は亜鉛塩、亜鉛
タンニン酸塩、パモ酸塩、及びこれらに類する塩であ
る。注射用の他のタイプの緩慢放出デボット剤には、例
えば米国特許第3,７７3,９１９号に記載されているポリ
乳酸／ポリグリコール酸重合体のごとき徐々に分解する
非毒性非拮抗性重合体中に分散せしめ又は封入した化合
物又は塩を含有せしめることができる。又、化合物又は
前記の比較的溶解しにくい塩は、特に動物用としてコレ
ステロール基材ペレットとして製剤化することもでき
る。前記以外の緩慢放出デポット又は挿入剤、例えばリ
ポゾームが文献中によく知られている。例えば、Sustai
ned and Controlled Release Drug Delivery Systems,
J.R.ロビンソン（Robinson）編，マーセル・デッカー
（Marcel Dekker）社，ニューヨーク，１９７８年を参
照のこと。LHRH型化合物に関する特別の文献は、例えば
米国特許第4,０１0,１２５号に見出される。

ペプチドの合成 この発明のポリペプチドは、ペプチドの分野において当
業者に知られている任意の技法により合成することがで
きる。使用し得る多くの技法についての卓越した要約
は、固相ペプチド合成に関してJ.M.ステワート（Stewar
t）及びJ.D.ヤング（Young），Solid Phase Peptide Sy
nthesis,W.H.フリーマン（Freeman）社，サンフランシ
スコ，１９６９年；及びJ.マイエンホフェアー（Meienh
ofer），Hormonal Proteins and Peptides，第２巻，４
６頁，アカデミックプレス（ニューヨーク）１９７３
年；そして古典的な溶液合成に関してK.ルブケ（Lubk
e），The Peptides，第１巻，アカデミックプレス（ニ
ューヨーク），１９６５年；に見出される。

一般に、これらの方法は、合成中のペプチド鎖に、１個
もしくは複数個のアミノ酸、又は好ましくは保護された
アミノ酸を逐次的に加えていくことから成る。通常、第
１アミノ酸のアミノ基又はカルボキシル基を適当な保護
基により保護する。保護され又は誘導体にされたアミノ
酸は不活性な固体支持体に結合せしめ又は溶液とし、こ
れに、アミド結合を形成するのに適する条件下で、補完
的な基（アミノ基又はカルボキシル基）が適切に保護さ
れた配列中の次に位置するアミノ酸を加える。次にこの
新しく加えたアミノ酸残基から保護基を除去し、そして
（適切に保護された）次のアミノ酸を加え、これを繰り
返す。こうして所望のアミノ酸を所望の配列に連結し、
そして残留している保護基（及び場合によっては固体支
持体）を逐次に又は同時に除去することにより最終ポリ
ペプチドを得る。この一般的な方法の簡単な変法によ
り、合成中の鎖に１個より多くのアミノ酸を１時に加え
ることができ、例えば、保護されたトリペプチドを（対
掌中心がラセミ化しない条件下で）適当に保護されたジ
ペプチドと連結することにより、保護基を除去した後に
ペンタペプチドが得られる。

合成の好ましい態様 この発明の化合物を合成するために特に好ましい方法は
固相ペプチド合成法である。

この特に好ましい方法においては、アミノ酸のα−アミ
ノ基を酸感受性基又は塩基感受性基により保護する。こ
れらの保護基は、ペプチド鎖形成条件に対しては安定で
あり、他方伸長中の鎖の分解及び鎖に含まれるいかなる
対掌中心のラセミ化も伴うことなく容易に除去されるも
のでなければならない。適当な保護基として、ｔ−ブチ
ルオキシカルボニル基（Boc）、ベンジルオキシカルボ
ニル基（Cbz）、ビフェニルイソプロピルオキシカルボ
ニル基、ｔ−アミルオキシカルボニル基、イソボルニル
オキシカルボニル基、１，１−ジメチル−３，５−ジメ
トキシベンジルオキシカルボニル基、ｏ−ニトロフェニ
ルスルフェニル基、２−シアノ−ｔ−ブチルオキシカル
ボニル基、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル基
及びこれらに類するもの、特にｔ−ブチルオキシカルボ
ニル基（Boc）を挙げることができる。

特に好ましい側鎖保護基として、アルギニンについては
ニトロ基、ｐ−トルエンスルホニル基、４−メトキシベ
ンゼンスルホニル基、Cbz、Boc及びアダマンチルオキシ
カルボニル基を；チロシンについてはベンジル基、ｏ−
ブロモベンジルオキシカルボニル基、２，６−ジクロロ
ベンジル基、イソプロピル基、シクロヘキシル基、シク
ロペンチル基及びアセチル基を；セリンについてはベン
ジル基及びテトラヒドロピラニル基を；そして、ヒスチ
ジンについてはベンジル基、ｐ−トルエンスルホニル基
及び２，４−ジニトロフェニル基を挙げることができ
る。

Ｃ−末端アミノ酸を適当な固体支持体に結合せしめる。
上記の合成に有用な適当な固体支持体は、段階的な縮合
−脱保護基反応の試薬及び反応条件に対して不活性であ
り、且つ使用する媒体に溶解しない材料である。適当な
固体支持体として、クロロメチルポリスチレン−ジビニ
ルベンゼン重合体、ヒドロキシメチル−ポリスチレン−
ジビニルベンゼン重合体及びこれらに類するもの、特に
クロロメチルポリスチレン−１％ジビニルベンゼン重合
体を挙げることができる。化合物のＣ−末端がグリシン
アミドである特別な場合には、特に有用な支持体は、P.
リバイレ（Rivaille）等，Helv.Chim.Acta,５４，２７
７２（１９７１年）に記載されているベンズヒドリルア
ミノ−ポリスチレン−ジビニルベンゼン重合体である。
クロロメチルポリスチレン−ジビニルベンゼン型樹脂へ
の結合は、高温例えば約４０〜６０℃、好ましくは約５
０℃において、約１２〜４８時間、好ましくは約２４時
間にわたり、エタノール、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジ
メチルホルムアミド（DMF）又はこれらに類するものの
中で、Ｎ^α−保護アミノ酸、特にBoc−アミノ酸を、そ
のセシウム塩、テトラメチルアンモニウム塩、トリエチ
ルアンモニウム塩、１，５−ジアザビシクロ〔５．４．
０〕ウンデカ−５−エン塩、又はこれに類する塩とし
て、特にDMF中セシウム塩として、クロロメチル樹脂と
反応せしめることにより行う。Ｎ^α−Bocアミノ酸は、
ジクロロメタン又はDMF、好ましくはジクロロメタンの
ごとき溶剤中、約１０〜５０℃、好ましくは２５℃にお
いて、約２〜２４時間、好ましくは約１２時間にわた
り、Ｎ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミド（DC
C）／１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（HBT）介在カ
ップリングにより、ベンズヒドリルアミン樹脂に結合せ
しめる。保護されたアミノ酸の逐次カップリングは、当
業界においてよく知られているように、ポリペプチド自
動合成機中で行うことができる。Ｎ^α−保護基の除去
は、例えば、塩化メチレン中トリフルオロ酢酸溶液、ジ
オキサン中塩酸溶液、酢酸中塩酸溶液、又は他の強酸溶
液、好ましくはジクロロメタン中５０％トリフルオロ酢
酸溶液の存在下、およそ周囲温度において行うことがで
きる。各アミノ酸は、好ましくは約2.５モルの過剰量で
導入し、そしてジクロロメタン、ジクロロメタン／DMF
混合液、DMF又はこれらに類するものの中で、およそ周
囲温度においてカップリングを行う。カップリング剤
は、通常はジクロロメタン中DCCであるが、Ｎ，Ｎ′−
ジ−iso−プロピルカルボジイミド（DIC）又は他のカル
ボジイミドを、単独で又はHBT、Ｎ−ヒドロキシサクシ
ンイミド、他のＮ−ヒドロキシイミド又はオキシムの存
在下で使用することもできる。上記の方法に変えて、保
護されたアミノ酸活性エステル（例えばニトロフェニル
エステル、ペンタフルオロフェニルエステル及びこれら
に類するもの）、又は対称無水物を使用することもでき
る。

固相合成の終りにおいて、十分に保護されたポリペプチ
ドを樹脂から切断する。樹脂支持体との結合がベンジル
エステル型である場合には、プロ−リンＣ末端を有する
ペプチドについては、アルキルアミン又はフルオロアル
キルアミンによるアミノ分解により、又、グリシンＣ末
端を有するペプチドについては、例えばアンモニア／メ
タノール又はアンモニア／エタノールによるアミノ分解
により、約１０〜５０℃、好ましくは約２５℃におい
て、約１２〜２４時間、好ましくは約１８時間にわたっ
て切断を行う。前記の方法に代えて、例えばメタノール
によりエステル交換を行い、次にアミノ分解を行うこと
によって樹脂からペプチドを切り離すことができる。保
護されているペプチドは、この時点でシリカゲルクロマ
トグラフィーにより純化することができる。側鎖保護基
のポリペプチドからの切断は、アミノ分解生成物を、例
えば、アニソール又は他のスキャベンジャーの存在下無
水液体弗化水素で処理し、弗化水素／ピリジンコンプレ
ックスで処理し、又はトリス（トリフルオロアセチル）
ボロン及びトリフルオロ酢酸で処理することにより；水
素及び炭素上パラジウム又はポリビニルピロリドンで還
元することにより；あるいは又、液体アンモニア中ナト
リウムにより、好ましくは液体弗化水素及びアニソール
で還元することにより行うことができ、これらの反応
は、約−１０〜１０℃、好ましくは約０℃において、約
１５分〜１時間、好ましくは３０分間にわたって行う。
ベンズヒドリルアミン樹脂上グリシン末端ペプチドの場
合には、ポリペプチドの樹脂からの切断及び保護基の除
去は、上記のように、液体弗化水素及びアニソールを使
用する１つの段階により一緒に行う。完全に保護基が除
去されたポリペプチドは、アセテート型弱塩基性樹脂に
よるイオン交換；非誘導形ポリスチレン−ジビニルベン
ゼン（例えば、アンバーライトXAD）による疎水吸着ク
ロマトグラフィー；シリカゲル吸着クロマトグラフィ
ー；カルボキシメチルセルロースによるイオン交換クロ
マトグラフィー；例えば、セファデックスＧ−２５によ
る分配クロマトグラフィー、又は向流分配；高性能液体
クロマトグラフィー（HPLC）、特にオクチル−又はオク
タデシルシリル−シリカ結合相カラムによる逆相HPLC；
のすべて又は任意の方法を使用する一連のクロマトグラ
フ法により純化する。

１，２，３又は６位にラセミアミノ酸が使用される場合
には、ジアステレオマ−ノナペプチド又はデカペプチド
最終生成物を分離し、そして適切な位置にＤ−アミノ酸
を含有する所望のペプチドを分離し、そして好ましくは
上記のクロマトグラフ法により純化する。

Ｃ−末端アザグリシンアミドを有するペプチドの合成
は、公知のペプチド中間体を使用して古典的なペプチド
溶液重合法により行うのが好ましい。この方法は、例３
にさらに詳細に使用する。

この発明はさらに、この発明の化合物及びその医薬とし
て許容される塩の製造方法に関し、この方法は、保護さ
れたポリペプチドから保護基、及び場合によっては共有
結合している固体支持体を除去することにより式(I)の
所望の化合物を得；あるいは又、式(I)の所望の化合物
の２つの断片を所望の配列に連結し；あるいは又、 (a)式(I)の化合物を医薬として許容される塩に変換し、
又は、 (b)式(I)の化合物の塩を医薬として許容される塩に変換
し、又は、 (c)式(I)の化合物の塩を式(I)の遊離のポリペプチドに
分解する、 ことから成る。

LHRHの６位のグリシン残基に置き替えるためにこの発明
において使用されるグアニド置換された、アミジン、並
びに第三及び第四アミン水溶性アミン酸は有用な中間体
であり、そしてそれ故にこの発明の重要な部分を構成す
る。

この発明の特に有用な中間体には、ｎが１又は２であ
り、そして他の可変部分が前記の通りである式(II)の化
合物；ｎが３であり、Ｒ_３が炭素原子数２〜１２個のア
ルキル基であり、そして他の可変部分が前記の通りであ
る式(II)の化合物；及びｎが４又は５であり、そして他
の可変部分が前記の通りである式(II)の化合物が含まれ
る。

好ましい中間体には、ｎが４であり、Ｒ_１が−NRR₃（こ
こで、Ｒは水素であり、そしてＲ_３は炭素原子数１〜１
２個のアルキル基である）であり、そしてＲ_２が炭素原
子数１〜１２個のアルキル基である式(II)の化合物が含
まれる。

式(II)で示されるような中間体は、任意の常法により製
造することができ、その例として、対応するアミンをグ
アニル化又はアミジン化する方法を挙げることができ
る。

次に、例によりこの発明をさらに詳細に説明する。但
し、これによりこの発明の範囲を限定するものではな
い。

製造A. Ｎ−アセチル３−（２−ナフチル）−Ｄ，Ｌ−アラニネ
ート ３−（２−ナフチル）Ｄ，Ｌ−アラニンの製造を、米国
特許第4,３４1,７６７号に記載されている方法に従って
行う。

Ｎ−アセチル−３−（２−ナフチル）−Ｄ，Ｌ−アリニ
ンの製造、これのメチル−Ｎ−アセチル−３−（２−ア
フチル）−Ｄ，Ｌ−アリニンへの変換、及びＤ−異性体
の分離を米国特許第4,３４1,７６７号の方法によって行
う。

製造B. ６０ｍのジオキサン中5.２４ｇのベンジルＮ_α−ベン
ジルオキシカルボニル−Ｄ−リジネートトルエンスルホ
ネート〔B.ベズス（Bezus）及びL.ゼラブス（Zerva
s），J.Am.Chem.Soc.８３，７１９（１９６１年）〕及
び1.７２ｍのジイソプロピルエチルアミンの混合物
を、1.８９ｇのＮ，Ｎ′−ジイソプロピルカルボジイミ
ドで処理する。反応混合物を１００℃にて６時間攪拌
し、室温に冷却し、そして固体になるまで濃縮する。こ
の固形物を２０ｍの温DMFに懸濁し、Ｎ，Ｎ′−ジイ
ソプロピル尿素を去し、そして液を濃縮固化する。
メタノール／酢酸エチルから結晶化することにより、ベ
ンジルＮ_α−ベンジルオキシカルボニル−Ｎ，Ｎ′−グ
アニド−ジイソプロピル−Ｄ−ホモアルギニネートトル
エンスルホネートを白色固形物として得る。〔α〕_Ｄ＝
−7.２６°（Ｃ＝0.３，MeOH）。

同様に上記の方法を使用し、但し次の物質すなわち、 Ｎ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミド； Ｎ，Ｎ′−ジ−ｎ−ヘキシルカルボジイミド； Ｎ，Ｎ′−ジエチルカルボジイミド； Ｎ，Ｎ′−ジ−ｎ−プロピルカルボジイミド； Ｎ−ｉ−プロピルカルボジイミド； Ｎ−プロピルカルボジイミド； Ｎ，Ｎ′−ジ−ｎ−ブチルカルボジイミド； Ｎ，Ｎ′−ジメチルカルボジイミド； Ｎ，Ｎ′−ジ−ｉ−ブチルカルボジイミド； Ｎ，Ｎ′−ジ−ｎ−ペンチルカルボジイミド； Ｎ，Ｎ′−ジ−ｉ−ペンチルカルボジイミド； Ｎ，Ｎ′−ジフェニルカルボジイミド； Ｎ，Ｎ′−ジトリルカルボジミイド；又は、 １−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカル
ボジイミド−HCl、及びこれらに類するものを使用し
て、 ベンジルＮ^α−ベンジルオキシカルボニル−Ｎ，Ｎ′−
グアニド−ジシクロヘキシル−Ｄ−ホモアルギニネー
ト、〔α〕_Ｄ＝8.０７°（Ｃ＝0.９、MeOH）； ベンジルＮ^α−ベンジルオキシカルボニル−Ｎ，Ｎ′−
グアニド−ジエチル−Ｄ−ホモアルギニネート； ベンジルＮ^α−ベンジルオキシカルボニル−Ｎ，Ｎ′−
グアニド−ジ−ｎ−プロピル−Ｄ−ホモアルギニネー
ト、〔α〕_Ｄ＝8.０７°（Ｃ＝0.９、MeOH）； ベンジルＮ^α−ベンジルオキシカルボニル−Ｎ，Ｎ′−
グアニド、ｎ−プロピル−Ｄ−ホモアルギニネート； ベンジルＮ^α−ベンジルオキシカルボニル−Ｎ，Ｎ′−
グアニド−ジ−ｎ−ブチル−Ｄ−ホモアルギニネート； ベンジルＮ^α−ベンジルオキシカルボニル−Ｎ，Ｎ′−
グアニド−ジ−ｉ−ブチル−Ｄ−ホモアルギニネート； ベンジルＮ^α−ベンジルオキシカルボニル−Ｎ，Ｎ′−
グアニド−ジ−ｎ−ペンチル−Ｄ−ホモアルギニネー
ト； ベンジルＮ^α−ベンジルオキシカルボニル−Ｎ，Ｎ′−
グアニド−ジ−フェニル−Ｄ−ホモアルギニネート； ベンジルＮ^α−ベンジルオキシカルボニル−Ｎ，Ｎ′−
グアニド−ジメチル−Ｄ−ホモアルギニネート； ベンジルＮ^α−ベンジルオキシカルボニル−Ｎ，Ｎ′−
グアニド−ジ−ｎ−ヘキシル−Ｄ−ホモアルギニネー
ト； ベンジルＮ^α−ベンジルオキシカルボニル−Ｎ，Ｎ′−
グアニド−ジ−イソプロピル−Ｄ−アルギニネート、
〔α〕_Ｄ＝−１0.５℃（Ｃ＝0.５、MeOH）； ベンジルＮ^α−ベンジルオキシカルボニル−Ｎ−グアニ
ド−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ′−グアニド
−エチル−Ｄ−ホモアルギニネート；をこれらのベンゼ
ンスルホン酸塩として得る。同様にして、Ｄ−リジネー
トの代りにベンジルＮ^α−ベンジルオキシカルボニル−
Ｄ−オルニチネートを使用することにより対応するアル
ギニン類似体を、そのトルエンスルホン酸塩として得
る。

製造C. （ｉ）ベンジルＮ^α−ベンジルオキシカルボニル−
Ｎ^Ｇ，Ｎ^Ｇ′−エタノ−Ｄ−ホモアルギニネート １５ｍのトルエンと１５ｍのｔ−BOHとの混合物
に、2.７１ｇのベンジルＮ^α−ベンジルオキシカルボニ
ル−Ｄ−リジネート及び1.４６ｇの２−メチルチオイミ
ダゾリン・ＨＩ〔アルドリッチ（Aldrich）製〕を加え
た。ジイソプロピルエチルアミンを加えることにより混
合物のpHを８にし、この溶液を２４時間還流加熱した。

溶液を真空濃縮し、残渣をシリカゲルカラム（２５０
ｇ）に負荷した。カラムを、CH₂Cl₂/MeOH（１９：１）
からCH₂Cl₂/MeOH(19：１）からCH₂Cl₂/MeOH（７：３）
までの勾配により溶出した。生成物を含有する分画を薄
層クロマトグラフィー（TLC）で検出し、これを集め、
そして濃縮固化し、2.９ｇの白色泡状物を得た。

上記の生成物の内の２ｇを、0.８ｇの１０％Ｐｄ／Ｃを
含有するエタノール５０ｍに溶解した。溶液を水素
（Ｈ_２）の存在下で８時間攪拌した。混合物をセライト
を用いて過し、そして液を濃縮固化し、Ｎ^Ｇ，
Ｎ^Ｇ′−エタノ−Ｄ−ホモアルギニンを1.２ｇの白色泡
状物として得た。

（ｉｉ）Ｎ^α−Boc−Ｎ^Ｇ，Ｎ^Ｇ′−エタノ−Ｄ−ホモ
アルギニン １6.５ｍの２ＮＮａＯＨ中2.７４ｇのＤ−リジン二塩
酸塩及び4.０３ｇの２−メチルチオ−２−イミダゾリン
塩酸塩の溶液を室温にて６日間攪拌した。アミノ酸アナ
ライザーによる反応混合物の分析において、７０％の所
望のε−ジアルキルグアニド化合物が生成していた。さ
らに、0.２５ｇの２−メチルチオ−２−イミダゾリン塩
酸塩及び１ｍの2NNaOHを加え、さらに３日間室温にて
反応を継続した。

反応混合物を、２０ｍのジオキサン中0.８ｇのMgO及
び4.３６ｇのジ−tert−ブチルジカルボネートで処理し
た。1NNaOHによりpHを9.５に調整した。一夜反応せしめ
た後若干の出発物質が存在していたため、１ｇのジ−te
rt−ブチルジカルボネートを加えた。

混合物を過し、そして液を濃縮乾固した。残渣を水
に溶解し、エチルエーテルで洗浄し、酢酸により水相の
pHを４に調整した。酸性溶液を酢酸エチルで洗浄した。
生成物を含有する水相を陰イオン交換樹脂〔AG−３、ア
セテート型、バイオラド（BioRad）製〕で処理し、そし
て濃縮乾固した。

粗生成物を疎水性クロマトグラフィーカラム〔アンバー
ライトXAD−２、ロームアンドハース（Rohm＆Haas）〕
を通過せしめ、水から２５％エタノールまでの勾配溶出
を行った。生成物を含有する分画を集め、2.７ｇのＮ^α
−Boc−Ｎ^Ｇ，Ｎ^Ｇ′−エタノ−Ｄ−ホモアルギニンを
得た。〔α〕_Ｄ＝−１9.７°（Ｃ＝0.１、MeOH）。

同様にして、２−メチルチオ−２−イミダゾリン−HIの
代りに Ｓ−メチル−ジエチル−イソ−チオ尿素−HI； Ｓ−メチル−ジプロピル−イソ−チオ尿素−HI； Ｓ−メチル−ジブチル−イソ−チオ尿素−HI； Ｓ−メチル−ジペンチル−イソ−チオ尿素−HI； Ｓ−メチル−ジヘキシル−イソ−チオ尿素−HI； Ｓ−メチル−ジヘプチル−イソ−チオ尿素−HI； 及び Ｓ−メチル−ジノニル−イソ−チオ尿素−HI、 を用いて Ｎ^α−Boc−Ｎ，Ｎ′−グアニド−ジエチル−Ｄ−ホモ
アルギニン； Ｎ^α−Boc−Ｎ，Ｎ′−グアニド−ジプロピル−Ｄ−ホ
モアルギニン； Ｎ^α−Boc−Ｎ，Ｎ′−グアニド−ジブチル−Ｄ−ホモ
アルギニン； Ｎ^α−Boc−Ｎ，Ｎ′−グアニド−ジペンチル−Ｄ−ホ
モアルギニン； Ｎ^α−Boc−Ｎ，Ｎ′−グアニド−ジヘキシル−Ｄ−ホ
モアルギニン； Ｎ^α−Boc−Ｎ，Ｎ′−グアニド−ジヘプチル−Ｄ−ホ
モアルギニン；及び Ｎ^α−Boc−Ｎ，Ｎ′−グアニド−ジノニル−Ｄ−ホモ
アルギニンを得る。

製造D. この製造方法は、Ｎ，Ｎ′−グアニド−二置換−Ｄ−ホ
モアルギニンのＮ^α−ｔ−ブチルオキシカルボニル誘導
体を、そのトルエンスルホン酸前駆体から製造する方法
を示す。

５０ｍの氷酢酸中3.２５ｇのＮ，Ｎ′−グアニド−ジ
イソプロピル−Ｄ−ホモアルギニネートトルエンスルホ
ネート及び１００mgの１０％Pd／Ｃの混合物を、大気圧
下で、４時間、水素ガス処理する。触媒をセライトで
去し、そして液を濃縮固化し、Ｎ，Ｎ′−グアニド−
ジイソプロピル−Ｄ−ホモアルギニントルエンスルホネ
ートを得る。６０ｍの５０％ジオキサン／水中この化
合物（2.１３ｇ）の溶液を、１０ｍの１Ｎ水酸化ナト
リウム及び0.４ｇの酸化マグネシウムで処理する。次
に、この混合物を1.１ｇのジ−ｔ−ブチルジカルボネー
トで処理し、そして室温にて２時間攪拌する。マグネシ
ウム塩を去し、そして液を真空濃縮する。塩基性溶
液をエタノールで洗浄し、そして硫酸ナトリウムにより
pHを2.５にする。酸性水溶液を酢酸エチルで抽出し、硫
酸マグネシウムで乾燥する。乾燥剤を去し、そして
液を濃縮する。酢酸エチルからの結晶化によりＮ^α−ｔ
−ブチルオキシカルボニル−Ｎ，Ｎ′−グアニド−ジイ
ソプロピル−Ｄ−ホモアルギニントルエンスルホネート
を得る。

同様にして、但し所望のトルエンスルホネート前駆体を
用いて、他のＮ^α−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎ，
Ｎ′−グアニド−二置換−Ｄ−ホモアルギニン又はＤ−
アルギニン化合物を得る。

製造E. Ｎ_α−ｔ−ブチルオキシカルボニル−３−〔４′−
（１′−プロピルピペリジル）〕−Ｄ−アラニン 4.６ｇの金属ナトリウムを４００ｍの無水エタノール
に加え、そして加熱した。こうして得たナトリウムエト
キシド溶液に、２1.７ｇのジエチルアセトアミドマロネ
ート及び１6.４ｇの４−ピコリルクロリドヒドロクロリ
ド（アルドリッヒ・ケミカル社）を加えた。この反応混
合物を１００℃にて４時間加熱し、冷却し、過し、そ
して真空濃縮した。混合物を、塩化メチレン／メタノー
ル（１９：１）中シリカゲルカラムに負荷し、そして同
じ混合液で溶出した。塩化メチレン／メタノール（１
９：１）を用いるシリカゲルTLCにおけるＵＶ陽生スポ
ットとして生成物を含有する分画を検出し、一緒にした
分画を濃縮して生成物を得た。

前項からの生成物を２００ｍのエタノールに溶解し、
そして、４０ｍの水中2.７２ｇの水酸化ナトリウム溶
液により５０℃にて６時間処理した。溶液を６ＮHCl１
２ｍにより酸性化し、濃縮乾固し、そして２００ｍ
のジオキサンに入れた。懸濁液を過し、そして液を
２時間にわたり還流加熱した。溶液を冷却し、濃縮乾固
し、エチルＮ^α−アセチル−３−（４−ピリジル）−
Ｄ，Ｌ−アラニンを白色固形物として得た。

このＮ−アセチルエステルの一部分を、３００ｍのジ
メチルスルホキシドと４００ｍの0.０１Ｍ塩化カリウ
ム（pH7.２）の混合溶液中２００ｍの酵素ズブチリシ
ン・カールスベルグ（subtilisin Carlsberg）（シグマ
・ケミカル社製、プロテアーゼVIII）で処理することに
より分解した。pHスタット上で１Ｎ水酸化ナトリウムを
加えることによりpHを保持した。６時間後、分解が完結
した。溶液を４００ｍの水で希釈し、そして７５０ｍ
ずつの酢酸エチルで４回抽出した。有機相を一緒に
し、そして濃縮して油状のエチルＮ^α−アセチル−３−
（４−ピリジル）−Ｄ−アラニネートを得た。

油状物を、５０ｍのエタノール中1.２２ｇのｎ−プロ
ピルブロミドと反応せしめ、この後溶液を濃縮乾固し
て、エチルＮ^α−アセチル−３−（１−プロピル−ピリ
ジニウム−４−イル）−Ｄ−アラニネートブロミドを白
色の吸湿性固形物として得た。

この白色固形物を２００ｍのエタノールに溶解し、そ
して、触媒として１０％Pd／Ｃ１００mgを使用して、常
圧の水素ガスにより還元した。１８時間還元した後、触
媒を去し、溶液を濃縮してエチルＮ^α−アセチル−３
−〔４′−（１′−プロピルピペリジル）〕−Ｄ−アラ
ニネートを黄褐色の固形物として得た。１００ｍの６
Ｎ塩酸中エチルエステルを還流することにより３−
〔４′−（１′−プロピルピペリジル）〕−Ｄ−アラニ
ンを白色固形物として得た。

この遊離酸を１００ｍのジオキサン／水（１：１）混
合液に溶解し、そして２ｇのジ−ｔ−ブチルジカルボネ
ートで処理した。pHスタット上で１Ｎ水酸化ナトリウム
を加えることによりpHを９に保持した。２時間後、反応
混合物を真空濃縮し、100ｍのエチルエーテルで洗浄
し、そして水相をアンバーライトXAD−２疎水性樹脂に
負荷した。ウカラムを２５０ｍの水で溶出し、次に２
５０ｍの５０％エタノール／水で溶出した。エタノー
ル溶出液を集め、そして濃縮乾固し、Ｎ^α−ｔ−ブチル
オキシカルボニル−３−〔４′−（１′−プロピルピペ
リジル）〕−Ｄ−アラニンを白色固形物として得た。

同様にして、但し４−ピコリルクロリドヒドロクロリド
の代りに３−ピコリルクロリドヒドロクロリドを用い
て、Ｎ^α−ｔ−ブチルオキシカルボニル−３−〔３′−
（１′−プロピルピペリジル）〕−Ｄ−アラニンを得
る。

製造F. 次の方法によりシス−５−アルキルプロリン化合物が得
られる。

２００ｍの丸底フラスコに、(S)−３−（ベンジルオ
キシカルボニル）５−オキソ−４−オキサゾリジンプロ
ピオン酸及び６３ｍの無水ベンゼンを加える。この溶
液に、０℃にて、１3.９ｇの五塩化燐を加える。反応混
合物を０℃にて１時間攪拌し、この間にすべての五塩化
燐を溶解せしめる。ベンゼン溶剤を真空除去し、そして
２５ｍずつの乾燥ベンゼンを用いて２回共蒸発を行
い、そして残渣を真空乾燥して淡色固形物を得る。この
淡色固形物を３０ｍのヘキサメチルホスホルアミドに
懸濁し、そして9.４ｍのテトラメチル錫及び４０mgの
PhCH₂Pd(PPh₃)₂Clを加える。反応混合物を６５℃にて４
時間加熱する。この終点においてさらに２ｍのテトラ
メチル錫を加え、そして反応混合物を室温にて一夜攪拌
する。水で希釈し、次に酢酸エチルで抽出した後、酢酸
エチル相を水、５％重炭酸ナトリウム、水、５％重炭酸
ナトリウム、水及び飽和塩化ナトリウムで洗浄し、そし
て無水硫酸マグネシウムで乾燥する。溶液を過し、そ
して濃縮して１６ｇの黄色油状物を得る。これを、酢酸
エチル／ヘキサン（４／６）を溶出液として使用するシ
リカゲルカラムで処理する。該当する分画を濃縮するこ
とにより１５ｇの淡黄色油状物を得、これを酢酸エチル
−ヘキサンから結晶化することにより１4.３ｇの(S)−
３−（ベンジルオキシカルボニル）−４−（３−オキソ
ブチル）−５−オキサゾリジノンを白色固形物として得
る。収率７４％。融点：６４〜６５℃、〔α〕²⁵ _D＝＋1
02°（Ｃ＝1.１、CH₂Cl₂）。

分析：Ｃ₁₈Ｈ₁₇ＮＯ_５ Ｃ Ｈ Ｎ 計算値 61.85 5.84 4.81 測定値 61.54 5.89 4.84 同様にして上記の方法を反復し、但し、テトラメチル錫
の代りに等当量の対応するテトラアルキル錫を使用する
ことにより次の化合物を得る。

(a)テトラエチル錫から(S)−３−（ベンジルオキシカル
ボニル）−４−（３−オキソペンチル）−５−オキサゾ
リジノンを得る。融点：45〜46℃、〔α〕²⁵ _D＝８2.５
°（Ｃ＝0.７、CH₃OH）。

分析：Ｃ₁₆Ｈ₁₉ＮＯ_５（３０５，３３６） Ｃ Ｈ Ｎ 計算値 62.94 6.37 4.59 分析値 63.02 6.15 4.48 (b)テトラブチル錫から(S)−３−（ベンジルオキシカル
ボニル）−４−（３−オキソヘプチル）−５−オキサゾ
リジノンを油状物として得る。

〔α〕²⁵ _D＝６7.９°（Ｃ＝0.１２、CH₃OH）。

分析：Ｃ₁₈Ｈ₂₃ＮＯ_５ ＥｔＯＡｃ（４２１，４９
４） Ｃ Ｈ Ｎ 計算値 62.69 7.41 3.32 測定値 62.50 7.29 3.39 例４からの(S)−３−（ベンジルオキシカルボニル）−
４−（３−オキソブチル）−５−オキサゾリジノン１０
ｇを４８０ｍの蒸留テトラヒドロフランに溶融し、次
に０℃にて１６０ｍのアンモニアを加えた。反応混合
物を０℃にて５時間攪拌し、そして周囲温度で一夜攪拌
した。真空中で蒸発乾固した後反応混合物から白色固形
物を得、これを熱酢酸エチルから結晶化して8.８ｇの
(S)−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５−
オキソ−ヘキサンアミドを白色固形物として得る（収率
８２％）。融点１４２〜１４４℃、〔α〕²⁵ _D＝−4.０
°（Ｃ＝0.４、CH₃OH）。

分析：Ｃ₇Ｈ₉ＮＯ_２ Ｃ Ｈ Ｎ 計算値 60.4 6.4 10.0 測定値 60.44 6.53 10.05 同様にして上記の方法を反復し、但し前記第２頁からの
対応する中間体を等当量使用して次の化合物を得る。

(S)−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−５−オキ
ソ−ペプタンアミド。融点１３３〜１３５℃、〔α〕²⁵
_D＝−4.１７°（Ｃ＝0.８、CH₃OH）。

分析：Ｃ₁₅Ｈ₂₉ＮＯ_２Ｏ_４（２９２，３４１） Ｃ Ｈ Ｎ 計算値 61.63 6.90 9.58 測定値 61.51 6.75 9.16 (S)−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−５−オキ
ソ−ノナミド。融点１６２〜１６３℃、〔α〕²⁵ _D＝−
4.３２°（Ｃ＝0.６、CH₃OH）。

分析：Ｃ₁₇Ｈ₂₄Ｎ_２Ｏ_４（３２０，３９５） Ｃ Ｈ Ｎ 計算値 63.73 7.55 8.74 測定値 63.62 7.56 8.82 ６０ｍのメタノールと7.５ｍの氷酢酸の混合物中2.
８ｇの前項からの(S)−２−ベンジルオキシカルボニル
アミノ−５−オキソヘキサミドの溶液に、窒素の存在
下、1.５ｇのパラジウムジアセテートを加える。この反
応混合物を、大気圧下で４時間水素化し、この時点で、
薄層クロマトグラフィーにより反応が完結していること
が示される。次に、反応混合物をセライトにより過
し、そしてメタノールで洗浄する。反応混合物及び洗浄
液を濃縮乾固し1.７ｇの黄色油状物を得る。これを、塩
酸と酢酸エチルとの混合物１ｍで処理して塩酸塩を得
る。この油状物をメタノール／エチルエーテルと共にす
りつぶし1.３ｇの黄色固形物を得る。融点１７４〜１７
６℃、〔α〕²⁵ _D＝−３３°（Ｃ＝0.９６、CH₃OH）。
(S)−シス−５−メチルプロリンアミド（塩酸塩とし
て）の黄色固形物を、バイオ−レックス（Bio-Rex）７
０カラム（弱酸性カルボン酸イオン交換樹脂）にかけ、
まず３００ｍの水、次に水酸化アンモニウム１％溶液
で溶出する。該当する分画の濃縮により0.９ｇの黄色固
形物を得、これを塩化メチレンから結晶化することによ
り0.６４ｇ（収率５０％）の(S)−シス−５−メチルプ
ロリンアミドを黄色固形物として得る。融点５５〜５６
℃。

同様にして前記の方法を反復し、但し、等当量の対応す
る中間体を使用することにより、還元後次の化合物を得
る。

(S)−シス−５−エチルプロリンアミド、融点６３〜６
５℃。

(S)−シス−５−ブチルプロリンアミド、融点７４〜７
５℃。

製造G. 4.９ｇのBoc−グリシンを５０ｍのエタノールと５０
ｍの蒸留水との混合液に溶解した。溶液のpHを重炭酸
セシウム水溶液により７にした。次に溶剤を真空除去し
た。

高真空下で１８時間乾燥した後、残渣を１５０ｍの乾
燥DMFに溶解した。２５ｇのクロロメチル化ポリスチレ
ン−１％ジビニルベンゼン（メリフィールド）樹脂（２
５ミリモルの塩素に相当する）を加えた。混合物を５０
℃にて２４時間振とうし、過し、そして樹脂を、DM
F、水及びエタノールで次々と洗浄した。樹脂を３日間
真空乾燥して２8.３４ｇのBoc−Gly−Ｏ−樹脂を得た。

例1. ベックマン９９０ペプチド合成装置の反応容器に、等モ
ルのBoc-GlyOHの乾燥セシウム塩とクロロメチルポリス
チレン／１％ジビニルベンゼンとの反応により調製した
Boc-Gly−Ｏ−樹脂7.２９ｇ（5.５ミリモル）を入れ
た。次の合成プログラムにより、上記の樹脂にアミノ酸
を次々に加えた。

段階１ CH₂Cl₂洗浄 １回 1.５分 ２ ５０％CF₃CO₂H/CH₂Cl₂ １回 1.５分 保護基脱離 ３ ５０％CF₃CO₂H/CH₂Cl₂ １回 ３０分 保護基脱離 ４ CH₂Cl₂洗浄 ３回 1.５分 ５ １０％トリエチルアミン/CH₂Cl₂ ２回 1.５分 ６ CH₂Cl₂洗浄 ３回 1.５分 ７ Ｎ^α−Boc−アミノ酸溶液 １回 加える ８ Ｎ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジ １回 加える イミド溶液 ９ CH₂Cl₂すすぎ、カップリング維持 １回 カッ
プリング反応２時間 10 CH₂Cl₂再すすぎ １回 1.５分 11 CH₂Cl₂洗浄 ３回 1.５分 12 エタノール洗浄 ３回 1.５分 13 CH₂Cl₂洗浄 ３回 1.５分 段階１〜１３により１個のアミノ酸のカップリングのた
めの１サイクルが構成される。反応の完結は、E.カイゼ
ル（Kaiser）等、Anal.Biochem,３４，５９５（１９７
０年）のニンヒドリン法により点検する。

2.０〜2.５モルの過剰の各保護アミノ酸及びＤＣＣによ
り、次々とカップリングを行った。すなわち、逐次カッ
プリングサイクルにおいて、樹脂を、 3.０１ｇのBoc-Pro-OH, 5.９９ｇのBoc-Arg(トシル)-OH, 3.４９ｇのBoc-Leu-OH・H₂O で処理した。

この段階で、得られたテトラペプチド樹脂を、さらに小
さいバッチに分割した。1.００ｇのバッチを、 0.４５６ｇのBoc-D-Dia-OHトルエンスルホネート 0.４４ｇのBoc-Tyr(2,6-ジクロロベンジル）-OH, 0.３７５ｇのBoc-Ser(ベンジル)-OH, 0.３１５ｇのBoc-D-Nal(2)-OH, 0.３５ｇ−Boc-D-p-F-Phe-OH, 0.２７５ｇのBoc-L-Proline,及び 2.５ｍの無水酢酸 により逐次処理することによりさらにカップリングを進
めた。

樹脂を反応容器から取り出し、CH₂CH₂で洗浄し、そして
真空乾燥して1.６６ｇの保護ポリペプチド樹脂を得た。
室温において２４時間、０℃でアンモニア飽和したメタ
ノール５０ｍで処理することにより、樹脂から保護ペ
プチドを切り離した。樹脂ビーズを過し、そしてメタ
ノール及びDMFで次々に洗浄した。液から溶剤を真空
除去し、0.９ｇの黄色油状物として保護ペプチドを得
た。

ケル（Kel）−Ｆ反応器中、０℃にて３０分間、１ｍ
のアニソール（スキャベンジャー）の存在下で１０ｍ
の無水ＨＦで処理することにより、保護基を除去した。
ＨＦを真空蒸発せしめ、そしてN-Ac-L-Pro-D-p-Cl-Phe-
D-Nal(2)-Ser-Tyr-D-Dih-Leu-Arg-Pro-GlyNH₂のＨＦ塩
から成る残渣をエーテルで洗浄した。次に、この残渣を
氷酢酸で抽出した。酢酸抽出物を凍結乾燥して0.５ｇの
粗生成物を得た。

この粗生成物を、アセテート型に変えたAG3X（弱塩基性
第三アミン樹脂）のカラムを水中通過せしめることによ
り酢酸塩に変換した。溶出液を凍結乾燥することによ
り、粗ペプチドの酢酸塩0.５ｇを白色固形物として得
た。

３５％CH₃CN／６５％水（0.０３Ｍ酢酸アンモニウム、p
H4.５）ランニング緩衝液で平衡化したリクロプレプ（L
icroprep）Rp−１８（２５〜４０ミクロン）の2.５×１
００cmカラムを用いる高性能液体クロマトグラフィーに
より粗ペプチドの純化を行った。およそ３カラム容量に
おいて溶出する大ＵＶ吸収ピーク（２８０nm）の分画を
集め、濃縮乾固し、蒸留水から３回凍結乾燥し、７５mg
の純N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Nal(2)-Ser-Tyr-D-Dia-Le
u-Arg-Pro-GlyNH₂を得た。

〔α〕²⁵ _D＝−１5.４°（Ｃ＝0.５、HOAc）。

同様にして、但し、前記のアミノ酸に代えて対応する
Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ又はＧアミノ酸を使用して、次
に示す対応するＧｌｙＮＨ_２デカペプチドを得た。

N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Nal(2)-Ser-Tyr-D-Dih-Leu-Ar
g-Pro-GlyNH₂； N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Nal(2)-Ser-Tyr-D-Iph-Leu-Ar
g-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Nal(2)-Ser-Tyr-D-Iph-Leu
-Arg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Phe-Ser-Tyr-D-Iph-Leu
-Arg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dih-Leu-Arg-P
ro-GlyNH₂； N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dmh-Leu-Arg-P
ro-GlyNH₂； N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Deh-Leu-Arg-P
ro-GlyNH₂； N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dph-Leu-Arg-P
ro-GlyNH₂； N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dhh-Leu-Arg-P
ro-GlyNH₂； N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Drh-Leu-Arg-P
ro-GlyNH₂； N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Hha-Leu-Arg-P
ro-GlyNH₂； N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dpa-Leu-Arg-P
ro-GlyNH₂； N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Mpa-Leu-Arg-P
ro-GlyNH₂； N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Pia-Leu-Arg-P
ro-GlyNH₂； N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Ppa-Leu-Arg-P
ro-GlyNH₂； N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Bpa-Leu-Arg-P
ro-GlyNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dmh-Leu
-Arg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Deh-Leu
-Arg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dph-Leu
-Arg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dih-Leu
-Arg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dhh-Leu
-Arg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Prh-Leu
-Arg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Hha-Leu
-Arg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dmh-Leu-Arg-
Pro-GlyNH₂； N-Ac-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Deh-Leu-Arg-
Pro-GlyNH₂； N-Ac-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dph-Leu-Arg-
Pro-GlyNH₂； N-Ac-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dih-Leu-Arg-
Pro-GlyNH₂； N-Ac-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dhh-Leu-Arg-
Pro-GlyNH₂； N-Ac-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Nal(2)-Ser-Tyr-D-Dph-Leu-A
rg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dhh-Leu-Arg-
Pro-GlyNH₂； N-Ac-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Prh-Leu-Arg-
Pro-GlyNH₂； N-Ac-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Hha-Leu-Arg-
Pro-GlyNH₂； N-Ac-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-Propylamidine-
Leu-Arg-Pro-GlyNH₂； N-Ac-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Mpa-Leu-Arg-
Pro-GlyNH₂； N-Ac-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Pia-Leu-Arg-
Pro-GlyNH₂； N-Ac-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Ppa-Leu-Arg-
Pro-GlyNH₂； N-Ac-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Bpa-Leu-Arg-
Pro-GlyNH₂； N-Ac-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dph-Leu-Arg
-Pro-GlyNH₂； N-Ac-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dmh-Leu-Arg
-Pro-GlyNH₂； N-Ac-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Deh-Leu-Arg
-Pro-GlyNH₂；及び N-Ac-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dhh-Leu-Arg
-Pro-GlyNH₂。

同様にして、但し、Boc-Gly-O-樹脂に代えて、ベンズヒ
ドリルアミノポリスチレン−１％ジビニルベンゼン樹脂
（ベックマン社）、Boc-D-Ala-OH、DIC及びHBTから調製
したBoc-D-Ala-ベンズヒドリルアミノポリスチレン−１
％ジビニルベンゼン樹脂を用いることにより、次に示す
LHRHの対応するD-Ala₁₀類似体を得た。

N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Nal(2)-Ser-Tyr-D-Iph-
Leu-Arg-D-AlaNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dih-Leu
-Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dmh-Leu
-Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Deh-Leu
-Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dhh-Leu
-Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Mpa-Leu
-Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Pia-Leu
-Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Ppa-Leu
-Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-p-Cl-Phe-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Bpa-Leu
-Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-pCl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Deh-Leu-Ar
g-Pro-D-AlaNH₂、〔α〕²⁵ _D-21.6゜、(C=0.4、HOAc)； N-Ac-D-Nal(2)-D-pCl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Deh-Leu-Ar
g-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-pCl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dmh-Leu-Ar
g-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-pCl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dhi^*-Leu-A
rg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-pCl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dph-Leu-Ar
g-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-pF-Phe-D-Trp-Dev-Tyr-D-Deh-Leu-Arg
-Pro-D-AlaNH₂；及び、 N-Ac-D-Nal(2)-D-pF-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dmh-Leu-Arg
-Pro-D-AlaNH₂。

例2. 例１で使用したのと同じ合成プログラムを使用してＣ末
端にPro-NHCH₂CH₃を有する類似体を合成した。ベックマ
ン９９０合成装置の反応容器に、等モル比のBoc-Pro-OH
の乾燥セシウム塩とクロロメチル−ポリスチレン／１％
ジビニルベンゼン〔ラブ・システムス（Lad Systems）
社〕との反応により調製したBoc-Pro-O-樹脂2.１３ｇを
入れた。このBoc-Pro-O-樹脂は1.４ミリモルのプローリ
ンを含有する。

2.０〜2.５モルの過剰量の各保護アミノ酸及びDCCを用
いて、逐次カップリングを行った。すなわち、樹脂を、
逐次カップリングサイクルにおいて、 1.６１ｇのBoc-Arg（トシル）-OH， 0.９３ｇのBoc-Leu-OH H₂O， 0.９４ｇのBoc-N,N′-グアニド-ジイソプロピルホモアルギニン， 0.４９ｇの１−ヒドロキシベンゾトリアゾール， 1.７５ｇのN-Boc-O-2-ブロモベンジルオキシカルボニル-L-チロシン，及び、 1.１１ｇのBoc-Ser(ベンジル)-OH. で処理した。

この合成段階で、保護ポリペプチド樹脂を半分ずつに分
割し、この一方を、逐次反応により、 0.５７ｇのBoc-D-Nal(2)-OH， 0.４８０ｇのBoc-D-p-F-Phe-OH，及び 0.２１ｇのN-Ac-L-proline, で処理することにより反応を終了した。

反応容器から樹脂を取り出し、塩化メチレンで洗浄し、
そして真空乾燥することにより2.２６ｇの保護ポリペプ
チド樹脂を得た。

２℃にて１８時間、２５ｍのエチルアミンを用いてア
ミノ分解することにより、保護ペプチドを樹脂から切り
離した。エチルアミンを蒸発せしめ、そして樹脂をメタ
ノールで抽出した。メタノールを蒸発せしめることによ
り1.３９ｇのN-Ac-L-Pro-D-p-Cl-Phe-Trp-Ser(ベンジル)-Tr
y(2,6-ジクロロベンジル)-D-Dih-Leu-Arg(トシル)-Pro-NHCH₂CH₃を
得た。この保護ペプチドを、ケル−Ｆ反応器中で、０℃
にて３０分間、３ｍのアニソール及び３０ｍの再蒸
留（CoF₃から）した無水液体ＨＦと混合した、ＨＦを真
空蒸発せしめ、そして残渣をエーテルで洗浄した。残渣
を２Ｍ酢酸に溶解し、そして凍結乾燥することにより0.
８２ｇの粗N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-Trp-Ser-Tyr-D-Dih-L
eu-Arg-Pro-NHCH₂CH₃の酢酸付加塩として得た。４０〜
５０ミクロンのオクタデシル化シリカ〔メルク社、リク
ロプレプ(Lichroprep)C₁₈〕の2.５×１００mmカラムを
用いる２０mgサンプル調製用高性能液体クロマトグラフ
ィーにより、ペプチドの最終精製を行った。

同様にして、但し対応する保護アミノ酸残基を使用する
ことにより次の化合物を得た。

N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dih-Leu-Ar
g-Pro-NHEt； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dph-Leu-Ar
g-Pro-NHEt； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dmh-Leu-Ar
g-Pro-NHEt； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Deh-Leu-Ar
g-Pro-NHEt； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dhh-Leu-Ar
g-Pro-NHEt； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Prh-Leu-Ar
g-Pro-NHEt； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Hha-Leu-Ar
g-Pro-NHEt；及び、 N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Dpa-Leu-Ar
g-Pro-NHEt。

エチルアミンに代えて等当量のメチルアミン又はプロピ
ルアミンを用いて上記の切断反応を行うことにより、蒸
気のノナペプチドの対応するメチルアミド又はプロピル
アミドが得られる。

例3. 古典的な溶液合成法により、Ｈが-NH-CONH-R¹⁰である式
(I)の化合物が得られる。

例えば、「AzaGlyNHR₁₀」が-NH-NH-CONH₂である次の方
法を用いて、ペプチドを遊離ペプチド又はその塩として
得ることができる。

個々のフラグメントのカップリングはアシルアジド法
〔Ｊ．ホンゼル（Honzel）等Coll.Czech.Chem.Comm.，
２６２３３３（１９７１年）〕により、DCC/HBTカップ
リングにより、又は他の非ラセミ化フラグメントカップ
リング法により行うことができる。化合物(2)は、A.S.
ドゥッタ（Dutta）等、J.Chem.Soc.Perkin I，１９７
９，３７９により公知であり、化合物(1)は例１と同様
の方法で製造することができる。化合物(3)は、化合物
(2)から、加水分解によりCbz及びニトロ基を除去し、そ
してDCC/HBT又は当業界において知られている他のカッ
プリング剤を用いて、N-Boc-N,N′−グアニド−ジエチ
ル−Ｄ−ホモアルギニンとのカップリングを行うことに
より得られる。同様なLHRH類似体合成についてはドゥッ
タ等（前記）を参照のこと。

しばしば、この方法によりカップリングするフラグメン
トはペプチド又はアミノ酸である。この方法に代えて、
Ｎ−末端ノナペプチド酸を固相法又は溶液法により調製
し、そしてジシクロヘキシルカルボジイミドヒドロキシ
ベンゾトリアゾール又は他のカップリング法によりセミ
カルバジド−HClにカップリングせしめることができ
る。

例4. A.N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phr-Trp-Ser-Tyr-D-Dia-Leu-Arg-P
ro-GlyNH₂の弗化水素塩（例１を参照のこと）0.１ｇの
溶液を５０ｍの水に溶解し、そしてこれを、あらかじ
め酢酸により平衡化したダウエックス３陰イオン交換樹
脂５０ｇのカラムを通過せしめ、そして脱イオン水で洗
浄する。カラムを脱イオン水で溶出し、そして溶出液を
凍結乾燥することにより、N-Ac-L-Pro-D-p-F-Phr-Trp-S
er-Tyr-D-Dia-Leu-Arg-Pro-Gly-NH₂の酢酸を得る。
〔α〕²⁵ _D＝−１5.４°（Ｃ＝１、HOAc）。

前記と同様の方法により、但し樹脂の平衡化に酢酸に代
えて他の酸を使用して、例えば塩酸、臭酸、硫酸、燐
酸、硝酸、安息香酸、及びこれらに類する酸との対応す
る塩が得られる。

同様にしてLHRHに類似する他のペプチドの酸付加塩を調
製することができる。

B.低水溶性塩の場合には、所望の酸を使用し、水から沈
澱せしめることにより製造することができる。例えば、
亜鉛タンニン酸塩の場合、0.1ｍの水中１０mgのN-Ac-
L-Pro-D-p-Cl-Phe-D-Nal(2)-Ser-Tyr-D-Dih-Leu-Arg-Pr
o-GlyNH₂酢酸塩の溶液を0.０８ｍの0.２５MNaOH中８m
gのタンニン酸の溶液で処理した。この直後に、0.１ｍ
の水中５mgのZnSO₄・7H₂Oの溶液をLHRH類似体の溶液
に加えた。

こうして得た溶液を１ｍの水で稀釈し、そして沈澱を
遠心分離した。上澄液をデカントし、残渣を、１ｍの
水を用いて沈澱とデカントを繰返すことにより２回洗浄
した。沈澱を真空乾燥し、上記のLHRH類似体の亜鉛タン
ニン酸混合塩を１５mg得た。

パモ酸塩の場合には、1.６ｍのエタノールと0.１ｍ
の0.２５MNaOHとの混合液中５０mgのN-Ac-L-Pro-D-p-F-
Phe-D-Nal(2)-Ser-Tyr-D-Dih-Leu-Arg-Pro-Gly-NH₂酢酸
塩の溶液に、0.３ｍの0.２５MNaOH中１１mgのパモ酸
の溶液を加えた。溶剤を減圧除去し、そして残渣を２ｍ
の水に懸濁し、遠心分離し、そして上澄み液をデカン
トした。沈澱を真空乾燥し、上記LHRH類似体のパモ酸塩
５４mgを得た。

同様にして、低水溶性の他の塩を製造することができ
る。

C.遊離ペプチドからの酸付加塩の製造５０mgのN-Ac-L-P
ro-D-p-F-Phe-D-Nal(2)-Ser-Tyr-D-Dia-Leu-Arg-Pro-Gl
yNH₂遊離塩基の溶液にＮ酢酸溶液３０ｍを加える。こ
うして得た液を凍結乾燥することにより上記化合物の酢
酸塩５０mgを得る。〔α〕²⁵ _D＝−１5.４°（Ｃ＝0.5、
HOAc）。

同様にして、酢酸を他の酸に代える（ペプチドに対して
等当量の）ことによりペプチドの他の塩、例えば塩酸
塩、臭酸塩、硫酸塩、燐酸塩、硝酸塩が得られる。

D.金属陽イオンとの塩、例えば亜鉛塩の製造0.４ｍの
0.２５ＮａＯＨ、0.３ｍの水及び１ｍのエタノール
の混合液中５０mgのN-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Nal(2)-Se
r-Tyr-D-Dih-Leu-Arg-Pro-Gly-NH₂酢酸塩の溶液に、0.
２ｍの水中１５mgのZnSO₄・7H₂Oの溶液を加えた。沈
澱を遠心分離し、上澄液をデカントした。沈澱を、１ｍ
の水を用いて、遠心分離と上澄液のデカントとにより
洗浄した。沈澱を真空乾燥し蒸気LHRH類似体の亜鉛塩を
得た。

同様にして、他の多価陽イオン、例えばカルシウム、ビ
スマス、バリウム、マグネシウム、アルミニウム、銅、
コバルト、ニッケル、カドミウム等のイオンとの塩を製
造することができる。

例5. ２５ｍの水中５０mgのN-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Nal
(2)-Ser-Tyr-D-Dih-Leu-Arg-Pro-Gly-NH₂酢酸塩を、NaO
H溶液で平衡化してヒドロキシ型にしたダウエックス１
（強塩基性第四アンモニウムイオン交換樹脂５０ｇを通
過せしめた。カラムを１５０ｍの水で溶出し、溶出液
を凍結乾燥して対応するポリペプチド４５mgを遊離塩基
として得た。

同様にして、この明細書に記載したペプチド、例えば例
６に記載するものの他の酸付加塩を遊離塩基に変換する
ことができる。

例6. 次に記載するものは、活性成分としてこの発明のLHRH拮
抗物質、例えばN-Ac-L-Pro-D-p-F-Phe-D-Nal(2)-Ser-Ty
r-D-Dih-Leu-Arg-Pro-GlyNH₂をそれ自体として、又は医
薬として許容される塩、例えば酢酸付加塩、亜鉛塩、亜
鉛タンニン酸塩等として含有する典型的な医薬組成物で
ある。

A.口腔内（例えば舌下）投与用錠剤 1.LHRH拮抗物質 １0.０mg 圧縮性糖（USP） ８6.０mg ステアリン酸カルシウム 4.０mg 2.LHRH拮抗物質 １0.０mg 圧縮性糖（USP） ８8.５mg ステアリン酸マグネシウム 1.５mg 3.LHRH拮抗物質 5.０mg マンニトール（USP） ８3.５mg ステリアリン酸マグネシウム（USP）1.５mg 予備糊化澱粉（USP） １0.０mg 4.LHRL拮抗物質 １0.０mg ラクトース（USP） ７4.５mg 予備糊化澱粉（USP） １5.０mg ステアリン酸マグネシウム（USP） 1.５mg 調製方法 (a)LHRH拮抗物質を、賦形剤の糖成分と混合した場合に
湿潤顆粒を形成するのに十分な量の水に溶解する。十分
に混合した後、顆粒を、トレー中又は流動床乾燥機中で
乾燥する。大きな凝集塊を破壊するために乾燥顆粒を篩
別し、そして次に他の成分と混合する。次に標準的な錠
剤形成機上で顆粒を圧縮して特定の重量の錠剤にする。

(b)この製剤法においては、すべての製剤に0.０１％ゼ
ラチン（USP）を含有せしめる。ゼラチンをまず水性造
粒溶剤に溶解し、次にLHRH類似体を加える。その後の段
階は上記の(a)法と同様にする。

上記の製剤４は又は、経口投与用錠剤としても使用する
ことができる。

B.長期持続型筋肉注射剤 1.長期間活性持続型筋肉注射材−ゴマ油ゲル LHRH拮抗物質 １0.０mg モノステアリン酸アルミニウム（USP） ２0.０mg ゴマ油 原体を1.０ｍとする量 モノステアリン酸アルミニウムをゴマ油と混合し、そし
て澄明な黄色溶液が形成されるまで、攪拌しながら１２
５℃に加熱する。次にこの混合物をオートクレーブ殺菌
し、そして放冷する。次にLHRH類似体を、すりつぶしな
がら無菌的に加える。特に好ましいLHRH類似体は低溶解
性塩、例えば亜鉛塩、亜鉛タンニン酸塩、パモ酸塩、及
びこれらに類する塩である。これらのものは非常に長期
間活性を持続する。

2.長期間活性持続型筋肉注射−生物分解性重合体マイク
ロカプセル LHRH拮抗物質 １％ グリコリド／ラクチド（25/75） ９９％ 共重合体（極限粘度数0.５） 上記の配合のマイクロカプセル（０−１５０^＊）を、 グルコース 5.０％ CMC（ナトリウム） 0.５％ ベンジルアルコール 0.９％ トゥイーン８０ 0.１％ 純水 全体を１０0.０％とする量に懸濁す
る。１ｍの担体に２５ｍのマイクロカプセルを懸濁
する。

C.筋肉注射用水溶液 LHRH拮抗物質 ５００mg ゼラチン（非拮抗性） ５mg 注射用水 全体を１００ｍとする量 ゼラチン及びLHRH拮抗物質を注射用水に溶解し、そして
液を無菌化する。

D.直腸投与用坐薬 LHRH拮抗物質 5.０mg ウイテプソール（Witepsol)H15 ２0.０ｇ LHRH拮抗物質を溶融ウイテプソールＨ１５と配合し、十
分に混合し、そして２ｇの型に注入する。

例7. 標準抗排卵試験により得られたこの発明の化合物の有用
な活性を次に示す。

例8. 前記の例により得られた化合物を特徴ずけるデータは次
の通りである。

（式中DmaはＮ^Ｇ，Ｎ^Ｇ１−ジメチルアルギニンであ
り、WshはＮ^Ｇ−エチル，Ｎ^Ｇ１−ジメチルアミノプロ
ピルホモアルギニンである。） 物理的データ 1.融点１５７−１６０℃。注2.参照。アミノ酸分析（９
０９）：Ser,0.８２(1)；Pro,1.１２(1)；Ala,1.１４
(1)；Leu,1.１６(1)；Tyr,0.８３(1)；NH₃,2.５８；Ar
g,0.８８(1)；D-pCl-Phe+Trp,2.３４(3)；D-Dih,1.１５
(1)。

2.融点１４４−１５０℃。〔α〕²⁵ _D−２4.０°（ｃ0.
３，HOAc）。計算値C₇₃H₁₀₄N₁₇O₁₇F（１５１0.７５）：
Ｃ，５8.０４；Ｈ，6.９４；Ｎ，１5.７６。測定値（１
４３３１６）：Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（９２４）：
Ser,0.８７(1)；Pro,2.０８(2)；Gly,1.０１(1)；mono-
isopropyl Arg,0.８５(1)；Leu,1.０２(1)；Tyr,0.９０
(1)；NH₃,1.３３(1)；Arg,1.０６(1)；D-pF-Phe,0.９１
(1)；D-Nal(2),1.０９(1)。

3.融点１４４−１４８℃。〔α〕²⁵ _D−１5.４°（ｃ0.
３２，HOAc）。計算値C₇₆H₁₁₀N₁₇O₁₇F（１５５2.８
３）：Ｃ，５8.７８；Ｈ，7.１４；Ｎ，１5.３３。測定
値（１４４２５１）：Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（９２
３）；Ser,0.９４(1)；Pro,2.０５(2)；Gly,1.００
(1)；D-Dia,0.８５(1)；Leu,1.０３(1)；Tyr,0.９６
(1)；NH₃,1.２７；Arg,1.０１(1)；D-pF-Phe,0.９５
(1)；D-Nal(2),1.０６(1)。

4.融点１４５−１５０℃。〔α〕²⁵ _D−１8.１°（ｃ0.
８３，HOAc）。注２参照。アミノ酸分析（９２５）：Se
r,0.９１(1)；Pro,2.０９(2)；Leu,1.０５(1)；Tyr,0.
８４(1)；NH₃,0.４１；Arg,1.１１(1)；D-pF-Phe,0.９
１(1)；D-Nal(2),0.９５(1)mono-isopropyl Arg,0.７４
(1)。

5.融点１３７−１４２℃。〔α〕²⁵ _D−１6.５°（ｃ0.
２，HOAc）。計算値C₇₆H₁₁₁N₁₆O₁₆F（１５２3.８３）：
Ｃ，５9.９０；Ｈ，7.３４；Ｎ，１4.７１。測定値（１
４３３１５）：Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（９２６）：
Ser,0.９１(1)；Pro,2.２５(2)；Leu,1.０５(1)；Tyr,
0.９３(1)；NH₃,0.６７；Arg,1.０１(1)；D-pF-Phe,1.
００(1)；D-Nal(2),1.０５(1)；D-Dia,0.８６(1)。

6.融点１５２−１５５℃。〔α〕²⁵ _D−１5.２°（ｃ0.
２，HOAc）。計算値C₈₅H₁₁₆N₁₇O₁₇F（１６６７：Ｃ，６
1.２４；Ｈ，7.０１；Ｎ，１4.２８。測定値（１４３３
０４）：Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（９３９）：Ser,0.
９４(1)；Pro,1.１１(1)；Gly,1.０２(1)；Leu,1.０２
(1)；Tyr,0.９０(1)；NH₃,1.４５；Arg,1.０６(1)；D-p
F-Phe,0.９４(1)；D-Dph,1.０６(1)；D-Nal(2),2.３２
(2)。

7.融点１３５−１４２℃。〔α〕²⁵ _D−２6.５°（ｃ0.
２３，HOAc）。計算値C₇₇H₁₁₂N₁₇O₁₇F（１５６6.２６：
Ｃ，５9.０２；Ｈ，7.２０；Ｎ，１5.２０。測定値（１
４３３０３）：Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（９４０）；
Ser,0.８８(1)；Pro,2.０２(2)；Gly,1.０３(1)；Leu,
1.００(1)；Tyr,0.８８(1)；NH₃,1.６１；Arg,1.０８
(1)；D-pF-Phe,0.９２(1)；D-Dph,1.０８(1)；D-Nal
(2),0.９１(1)。

8.融点１７０−１７２℃。〔α〕²⁵ _D−１7.５°（ｃ0.
３７，HOAc）。計算値C₈₀H₁₁₄N₁₈O₁₇O₁₇Cl₂（１６７0.
８２：Ｃ，５7.５１；Ｈ，6.８８；Ｎ，１5.０９。測定
値（１４３２９４）；Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（９４
５）；Ser,0.８８(1)；Pro,1.０９(1)；Ala,0.８８
(1)；Leu,1.００(1)；Tyr,0.９２(1)；NH₃,1.７６；Tr
p,0.４１(1)；Arg,1.１９(1)；D-pCl-Phe,1.８４(2)；D
-Dph,0.９７(1)；（注・TrpはD-pCl-Pheから十分に分離
しない）。

9.融点１６５−１７０℃。〔α〕²⁵ _D−２５°（ｃ0.４
３，HOAc）。計算値C₇₉H₁₁₂N₁₈O₁₇Cl₂（１６５6.２）：
Ｃ，５7.２７；Ｈ，6.８１；Ｎ，１5.２２。測定値（１
４２６７５）：Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（９８１）；
Ser,0.８３(1)；Pro,0.９３(1)；Ala,1.０１(1)；Leu,
1.０２(1)；Tyr,0.９４(1)；NH₃,1.１８；Trp,0.９７
(1)¹；Arg,1.０３(1)；D-pCl-Phe,1.９４(2)¹；D-Dph,
1.１６(1)。

10.融点１４２−１５０℃。〔α〕²⁵ _DHOAc中溶液不透
明。計算値C₈₂H₁₁₃N₁₈O₁₇F（１６４1.９３；Ｃ，５9.９
８；Ｈ，6.９４；Ｎ，１5.３５。測定値（１４３３０
２）：Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（９５３Ｂ）：Ser,0.
９５(1)；Pro,0.９３(1)；Ala,1.１０(1)；Leu,1.０９
(1)；Tyr,0.８７(1)；D-pF-Phe,0.２２３(1)；NH₃,2.８
７；Trp,0.４１３(1)；Arg,0.９４(1)；D-Dph,1.２５
(1)；D-Nal(2),1.０６(1)；（注．D-pF-Pheの値は低
い）。

11.融点１４２−１５１℃。注２参照。アミノ酸分析
（９５２）；Ser,0.８３(1)；Pro,0.９５(1)；Gly,0.９
７(1)；Leu,1.０６(1)；Tyr,0.９６(1)；NH₃,3.１７；T
rp,0.６６(1)；Arg,1.０１(1)；D-pF-Phe,0.７８(1)；D
-Dph,1.２２(1)；D-Nal(2),1.２７(1)。

12.融点１４０−１４２℃。〔α〕²⁵ _D−１4.３°（ｃ0.
１４，HOAc）。計算値 C₈₂H₁₁₈N₁₈O₁₃Cl₂・4CH₃COOH・3H₂O（１９２9.１４：
Ｃ，５6.０３；Ｈ，7.３１；Ｎ，１3.０７。測定値（１
４１５９２）：Ｃ，５5.７５；Ｈ，6.９３；Ｎ，１2.７
６。アミノ酸分析（９８７）；Ser,0.８７(1)；Pro,1.
０９(1)；Ala,1.０８(1)；Leu,1.０２(1)；Tyr,0.９４
(1)；NH₃,1.４３；Trp,0.８８(1)¹；Arg,0.９７(1)；D-
pCl-Phe,1.７６(2)¹；（D-Dhhは３４０分間経過しても
カラムから溶出しない）。

13.融点１４５−１４８℃。〔α〕²⁵ _D−4.１７°（ｃ0.
１１，HOAc）。計算値C₇₉H₁₂₁N₁₈O₁₈F（１６２9.９６；
Ｃ，５8.２１；Ｈ，7.４８；Ｎ，１5.４６。測定値（１
４２５０６）；Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（９６３
Ｂ）；Ser,1.７７(2)；Pro,1.１５(1)；Gly,1.０７
(1)；Leu,1.０１(1)；Tyr,0.９６(1)；NH₃,1.２６；Tr
p,0.７３(1)；Arg,1.０１；D-pF-Phe,0.８１(1)。

14.融点１４７−１５１℃。〔α〕²⁵ _D−２7.３°（ｃ0.
５１，HOAc）。計算値C₈₉H₁₂₇N₁₈O₁₇F（１７４0.１
２）：Ｃ，６1.４３；Ｈ，7.３６；Ｎ，１4.４９。測定
値（１４２５０５）；Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（９６
４Ｂ）；Ser,1.００(1)；Pro,1.１１(1)；Gly,1.０３
(1)；Leu,1.０３(1)；Tyr,0.９５(1)；NH₃,1.２４；Tr
p,0.８０(1)；Arg,0.９９(1)；D-pF-Phe,0.８７(1)；D-
Nal(2),0.８５(1)。

15.融点１５５−１５８℃。〔α〕²⁵ _D−２６°（ｃ0.４
４，HOAc）。計算値C₇₇H₁₀₈N₁₈O₁₇Cl₂（１６２8.７
４）：Ｃ，５6.７８；Ｈ，6.６８；Ｎ，１5.４８。測定
値（１４２４７９）：Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（９７
５）：Ser,0.８８(1)；Pro,0.９７(1)；Gly,1.０１
(1)；Leu,0.９９(1)；Tyr,0.９７(1)；NH₃,1.１９；Tr
p,0.９２６(1)¹；Arg,1.０３；D-pCl-Phe,1.８５(2)¹；
D-Deh,1.２８(1)。

16.融点１５２−１５５℃。〔α〕²⁵ _D−３2.６°（ｃ0.
２６，HOAc）。計算値C₈₁H₁₁₁N₁₈O₁₇F（1628）：Ｃ，５
9.７６；Ｈ，6.８７；Ｎ，１5.４９。測定値（１４２４
８１）：Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（９６６）；Ser,0.
９３(1)；Pro,0.９９(1)；Gly,1.１０(1)；Leu,0.９４
(1)；Tyr,0.９４(1)；NH₃,1.１９；Trp,0.７６(1)；Ar
g,1.０２(1)；D-pF-Phe,0.９２(1)；D-Deh,1.２３(1)；
D-Nal(2),0.９５(1)。

17.融点１５５−１５７℃。〔α〕²⁵ _D−１8.４°（ｃ0.
２７，HOAc）。計算値C₇₈H₁₁₀N₁₈O₁₇O₁₇Cl₂（１６４2.
７６）：Ｃ，５7.０３；Ｈ，6.７５；Ｎ，１5.３５。測
定値（１４３２９３）：Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（９
９７）：Ser,0.８９(1)；Pro,0.９７(1)；Ala,0.９８
(1)；Leu,1.０３(1)；Tyr,0.９９(1)；NH₃,1.３４；Tr
p,0.９３¹；Arg,1.００(1)；D-pCl-Phe,1.８６(2)¹；D-
Deh,1.１７(1)。

18.融点１５８−１６０℃。〔α〕²⁵ _D−２9.３°（ｃ0.
４１，HOAc）。計算値C₈₁H₁₁₁N₁₈O₁₇Cl（１６４4.３
６）：Ｃ，５9.１６；Ｈ，6.８０；Ｎ，１5.３３。測定
値（１４３８０９）：Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（１０
１４）：Ser,0.９２(1)；Pro,1.０２(1)；Gly,1.０２
(1)；Leu,1.０２(1)；Tyr,0.９９(1)；NH₃,1.２６；Tr
p,0.８３(1)；Arg,0.９８(1)；D-pCl-Phe,0.９８(1)；D
-Deh,1.１６(1)；D-Nal(2),0.９６(1)。

19.融点１５４−１５７℃。〔α〕²⁵ _D−２1.６°（ｃ0.
２５，HOAc）。計算値C₈₂H₁₁₃N₁₈O₁₇Cl（１６５8.３
８）；Ｃ，５8.３９；Ｈ，6.８７；Ｎ，１5.２０。測定
値（１４４２７２）；Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（１０
２２）；Ser,0.９５(1)；Pro,1.０８(1)；Gly,0.９９
(1)；Leu,1.０２(1)；Tyr,1.０１(1)；NH₃,1.３４；Tr
p,0.８５(1)；Arg,0.９７(1)；D-pCl-Phe,1.１８(1)；D
-Deh,1.１７(1)；D-Nal(2),1.００(1)。

20.融点１５０−１５５℃。〔α〕²⁵ _D−１7.９°（ｃ0.
２５，HOAc）。計算値C₈₀H₁₁₅N₁₉O₁₇Cl₂（１６８5.８
４）：Ｃ，５6.９９；Ｈ，6.８７；Ｎ，１5.７９。測定
値（１４３２９２）：Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（９９
５）：Ser,0.８６(1)；Pro,1.０８(1)；Gly,1.０４
(1)；Leu,0.９７(1)；Tyr,0.９１(1)；NH₃,1.３２；Tr
p,0.３１(1)；Arg,0.９９(1)；D-pCl-Phe,1.３４(2)；
(D-Wshは３４０分間経過してもカラムから溶出しな
い）。

21.融点１５０−１５４℃。〔α〕²⁵ _D−２8.３°（ｃ0.
５５，HOAc）。計算値C₈₄H₁₁₈N₁₉O₁₇F（１６８５）：
Ｃ，５9.８８；Ｈ，7.０６；Ｎ，１5.７９。測定値（１
４３２９５）：Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（９９６）：
Ser,0.８７(1)；Pro,0.９４(1)；Gly,1.０５(1)；Leu,
0.９９(1)；Tyr,0.９５(1)；D-pF-Phe,0.９０(1)；NH₃,
1.３４；Trp,0.６８(1)；Arg,1.００(1)；D-Nal(2),0.
８４６(1)；（D-Wshは３４０分間経過してもカラムから
溶出しない）。

22.融点１６４−１６６℃。〔α〕²⁵ _D−１2.７°（ｃ0.
３，HOAc）。計算値C₇₆H₁₀₆N₁₈O₁₇Cl₂（１６１4.７
２）：Ｃ，５6.５３；Ｈ，6.６２；Ｎ，１5.６１。測定
値（１４３６６０）；Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（１０
１１）：Ser,0.９３(1)；Pro,1.０７(1)；Gly,1.０３
(1)；Leu,1.００(1)；Tyr,0.９７(1)；NH₃,1.２７；Tr
p,0.９５(1)¹；Arg,1.１１(1)；D-pCl-Phe,1.９(2)¹；D
-Dmh,1.１１(1)。

23.融点１６０−１６４℃。〔α〕²⁵ _D−２6.５°（ｃ0.
２９，HOAc）。計算値C₇₉H₁₀₇N₁₈O₁₇F（１６００）：
Ｃ，５9.３１；Ｈ，6.７４；Ｈ，6.７４；Ｎ，１5.７
６。測定値（１４３６５８）：Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分
析（１０１２）：Ser,0.８７(1)；Pro,1.０６(1)；Gly,
1.００(1)；Leu,1.０２(1)；Tyr,0.９８(1)；NH₃,1.３
１；Trp,0.８７(1)；Arg,1.０８(1)¹；D-pF-Phe,1.２５
(1)；D-Dmh,1.０８¹；D-Nal(2),0.８９(1)。

24.融点１６０−１６５℃。〔α〕²⁵ _D−１2.２°（ｃ0.
２９，HOAc）。計算値C₇₆H₁₀₄N₁₈O₁₇Cl₂（１６１2.
７）：Ｃ，５6.６０；Ｈ，6.５０；Ｎ，１5.６０。測定
値（１４３６５９）：Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（１０
１０）；Ser,0.９４(1)；Pro,1.１４(1)；Ala,1.０１
(1)；Leu,0.９７(1)；Tyr,0.９６(1)；NH₃,1.２３；Tr
p,1.００^１；Arg,1.０６；D-pCl-Phe,2.００(2)^１；D-D
hi,0.９９(1)。

25.融点１７２−１７４℃。〔α〕²⁵ _D−２9.８°（ｃ0.
６２，HOAc）。計算値C₇₉H₁₀₅N₁₈O₁₇F（１５９８）：
Ｃ，５9.３８；Ｈ，6.６２；Ｎ，１5.７８。測定値（１
４３６５７）：Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（１０１
３）；Ser,0.８９(1)；Pro,1.０７(1)；Gly,1.００
(1)；Leu,0.９９(1)；Tyr,0.９７(1)；NH₃,1.２４；Tr
p,0._８５(1)；Arg,1.０４；D-pF-Phe,0.９８(2)；D-Nal
(2),0.９２(1)；D-Dhi,0.９８(1)。

26.融点１６２−１６４℃。〔α〕²⁵ _D−１8.７°（ｃ0.
５４，HOAc）。計算値C₇₅H₁₀₄N₁₈O₁₇Cl₂（１６０0.６
９）：Ｃ，５6.２８；Ｈ，6.５５；Ｎ，１5.７５。測定
値（１４３８０８）：Ｃ，Ｈ低い。アミノ酸分析（１０
１５）：Ser,0.８６(1)；Pro,1.１４(1)；Ala,1.０１
(1)；Leu,1.０１(1)；Tyr,0.９９(1)；NH₃,1.５４；Tr
p,1.０２(1)¹；Arg,0.９９(1)；D-pCl-Phe,2.０４
(2)¹；D-Dhi,1.０２(1)¹。

注1.ピークが十分に分離しない。記載した値は２つのピ
ークの平均である。

2.試料が十分でなかったため、旋光度測定及び元素分析
は行わなかった。

さらに次の化合物を製造した。

N-Ac-D-Nal(2)-D-p-Cl-Phe-D-Nal(2)-Ser-Tyr-D-Deh-Le
u-Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Nal(2)-D-p-F-Phe-D-Nal(2)-Ser-Tyr-D-Deh-Leu
-Arg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Trp-D-p-Cl-Phe-D-Nal(2)-Ser-Tyr-D-Deh-Leu-A
rg-Pro-D-AlaNH₂； N-Ac-D-Trp-D-p-Cl-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Deh-Leu-Arg-
Pro-D-AlaNH₂； 例９ 例８の化合物８，１６，１８，１９及び２４のそれぞれ
を６引きずつの雌マウスに0.３mg／動物（１２mg／kg体
重）の投与レベルで皮下投与した。２１日間の観察期間
の間いずれの処理群においても死亡は記録されなかっ
た。

上記の化合物をマウスに皮下投与した場合の急性毒性LD
₅₀は１２mg／kgより大であった。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】次の式（II）： 〔式中、 ｎは１〜５であり； Ｒ_１はＮＨＲ_３であり、ここでＲ_３は炭素原子数１〜６
   個のアルキル基、炭素原子数３〜６個のシクロアルキ
   ル、又は−（ＣＨ_２）_ｍＮ（Ｒ_４）_２であって、ｍは１
   〜５であり、そしてＲ_４は炭素原子数１〜４個のアルキ
   ル基であり、但しｎが３の時はＲ_３は炭素原子数２〜６
   個のアルキル基又は炭素原子数３〜６個のシクロアルキ
   ル基であり；そして、 Ｒ_２は水素、炭素原子数１〜６個のアルキル基又は炭素
   原子数３〜６個のシクロアルキル基であり；あるいはＲ
   _１とＲ_２は一緒になって次の構造式： で表わされる環を構成する〕 により表わされる化合物。