JPH06228004A - 免疫抑制剤およびその製造方法 - Google Patents
免疫抑制剤およびその製造方法Info
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- JPH06228004A JPH06228004A JP5042226A JP4222693A JPH06228004A JP H06228004 A JPH06228004 A JP H06228004A JP 5042226 A JP5042226 A JP 5042226A JP 4222693 A JP4222693 A JP 4222693A JP H06228004 A JPH06228004 A JP H06228004A
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- JP
- Japan
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- glycero
- phosphocholine
- phosphoethanolamine
- chloroform
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【構成】
［Ｒ１は炭素数１３から１９の直鎖もしくは分岐アルキ
ル基もしくはＲ４を示し、Ｒ２は炭素数１３から１９の
直鎖もしくは分岐アルキル基もしくはＲ５を示し、 Ｒ３はメチル基もしくは、水素原子を示す。］で表され
る化合物を有効成分とする免疫抑制剤。 【効果】 優れた免疫抑制効果を有し、臓器移植、免疫
異常疾患の治療薬として有効に用いることができる。
ル基もしくはＲ４を示し、Ｒ２は炭素数１３から１９の
直鎖もしくは分岐アルキル基もしくはＲ５を示し、 Ｒ３はメチル基もしくは、水素原子を示す。］で表され
る化合物を有効成分とする免疫抑制剤。 【効果】 優れた免疫抑制効果を有し、臓器移植、免疫
異常疾患の治療薬として有効に用いることができる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、免疫抑制剤およびその
製造方法に関するものであり、詳しくは、臓器移植、免
疫異常疾患の治療などに優れた効果を示す免疫抑制剤お
よびその製造方法に関するものである。
製造方法に関するものであり、詳しくは、臓器移植、免
疫異常疾患の治療などに優れた効果を示す免疫抑制剤お
よびその製造方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】従来、免疫抑制剤として、微生物の代謝
産物であるシクロスポリンや、ＦＫ５０６などが用いら
れており、また、中等度好熱菌バチルス・ステアロサー
モフィルス（Bacillus stearothermophilus ）からは、
免疫抑制活性物質ＫＭ−７３が得られている（特願平４
−７３５１１号）。
産物であるシクロスポリンや、ＦＫ５０６などが用いら
れており、また、中等度好熱菌バチルス・ステアロサー
モフィルス（Bacillus stearothermophilus ）からは、
免疫抑制活性物質ＫＭ−７３が得られている（特願平４
−７３５１１号）。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】従来、使用されている
上記の薬剤は、その免疫抑制効果が十分とは言えず、副
作用などの点で必ずしも満足できるものではなかった。
そこで、本発明は、優れた免疫抑制効果を有する免疫抑
制剤およびその製造方法を提供することを目的とする。
上記の薬剤は、その免疫抑制効果が十分とは言えず、副
作用などの点で必ずしも満足できるものではなかった。
そこで、本発明は、優れた免疫抑制効果を有する免疫抑
制剤およびその製造方法を提供することを目的とする。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、さらに、
微生物の生産する物質の中から免疫抑制効果が高い薬剤
を見いだすべく鋭意検討を行ったところ、バチルス・ス
テアロサーモフィルス（Bacillus stearothermophilus
）およびサーマス（Thermus ）属の菌体抽出物中に、
上述の免疫抑制活性物質ＫＭ−７３とは異なる目的の活
性物質を見いだし、さらにその有効成分を追求し、その
構造を明らかにすることにより本発明を完成するにいた
った。
微生物の生産する物質の中から免疫抑制効果が高い薬剤
を見いだすべく鋭意検討を行ったところ、バチルス・ス
テアロサーモフィルス（Bacillus stearothermophilus
）およびサーマス（Thermus ）属の菌体抽出物中に、
上述の免疫抑制活性物質ＫＭ−７３とは異なる目的の活
性物質を見いだし、さらにその有効成分を追求し、その
構造を明らかにすることにより本発明を完成するにいた
った。
【０００５】すなわち、本発明は、下記の一般式
【０００６】
【化２】
【０００７】で表される化合物を有効成分とする免疫抑
制剤、およびサーマス（Thermus ）属の菌体を培養する
ことを特徴とする上記免疫抑制剤の製造方法、さらにバ
チルス・ステアロサーモフィルス（Bacillus stearothe
rmophilus ）を培養することを特徴とする上記免疫抑制
剤の製造方法を要旨とするものである。
制剤、およびサーマス（Thermus ）属の菌体を培養する
ことを特徴とする上記免疫抑制剤の製造方法、さらにバ
チルス・ステアロサーモフィルス（Bacillus stearothe
rmophilus ）を培養することを特徴とする上記免疫抑制
剤の製造方法を要旨とするものである。
【０００８】以下、本発明を詳細に説明する。本発明の
免疫抑制剤の有効成分は一般式化２で表される化合物で
あり、Ｒ1 、Ｒ2 で示される直鎖もしくは分岐アルキル
基として、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、
ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、ノナデシ
ル、イソトリデシル、イソテトラデシル、イソペンタデ
シル、イソヘキサデシル、イソヘプタデシル、イソオク
タデシル、イソノナデシル、アンテイソトリデシル、ア
ンテイソテトラデシル、アンテイソペンタデシル、アン
テイソヘキサデシル、アンテイソヘプタデシル、アンテ
イソオクタデシル、アンテイソノナデシル基などがあげ
られる。
免疫抑制剤の有効成分は一般式化２で表される化合物で
あり、Ｒ1 、Ｒ2 で示される直鎖もしくは分岐アルキル
基として、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、
ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、ノナデシ
ル、イソトリデシル、イソテトラデシル、イソペンタデ
シル、イソヘキサデシル、イソヘプタデシル、イソオク
タデシル、イソノナデシル、アンテイソトリデシル、ア
ンテイソテトラデシル、アンテイソペンタデシル、アン
テイソヘキサデシル、アンテイソヘプタデシル、アンテ
イソオクタデシル、アンテイソノナデシル基などがあげ
られる。
【０００９】化２で示される一般式において、Ｒ1 、Ｒ
2 、Ｒ3 の組み合わせは数多いが、具体的な化合物とし
て１，２−ジテトラデカノイル−グリセロ−３−ホスホ
エタノールアミン、１，２−ジペンタデカノイル−グリ
セロ−３−ホスホエタノールアミン、１−ペンタデカノ
イル−２−ヘキサデカノイル−グリセロ−３−ホスホエ
タノールアミン、１，２−ジヘキサデカノイル−グリセ
ロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジヘプタデ
カノイル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、
１，２−ジエイコサノイル−グリセロ−３−ホスホエタ
ノールアミン、１，２−ジイソテトラデカノイル−グリ
セロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジイソペ
ンタデカノイル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミ
ン、１−イソペンタデカノイル−２−イソヘキサデカノ
イル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２
−ジイソヘキサデカノイル−グリセロ−３−ホスホエタ
ノールアミン １，２−ジイソヘプタデカノイル−グリ
セロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジイソエ
イコサノイル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミ
ン、１，２−ジアンテイソテトラデカノイル−グリセロ
−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジアンテイソ
ペンタデカノイル−グリセロ−３−ホスホエタノールア
ミン、１−アンテイソペンタデカノイル−２−アンテイ
ソヘキサデカノイル−グリセロ−３−ホスホエタノール
アミン、１，２−ジアンテイソヘキサデカノイル−グリ
セロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジアンテ
イソヘプタデカノイル−グリセロ−３−ホスホエタノー
ルアミン、１，２−ジアンテイソエイコサノイル−グリ
セロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジテトラ
デカノイル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジ
ペンタデカノイル−グリセロ−３−ホスホコリン、１−
ペンタデカノイル−２−ヘキサデカノイル−グリセロ−
３−ホスホコリン、１，２−ジヘキサデカノイル−グリ
セロ−３−ホスホコリン、１，２−ジヘプタデカノイル
−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジエイコサノ
イル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジイソテ
トラデカノイル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２
−ジイソペンタデカノイル−グリセロ−３−ホスホコリ
ン、１−イソペンタデカノイル−２−イソヘキサデカノ
イル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジイソヘ
キサデカノイル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２
−ジイソヘプタデカノイル−グリセロ−３−ホスホコリ
ン、１，２−ジイソエイコサノイル−グリセロ−３−ホ
スホコリン、１，２−ジアンテイソテトラデカノイル−
グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジアンテイソペ
ンタデカノイル−グリセロ−３−ホスホコリン、１−ア
ンテイソペンタデカノイル−２−アンテイソヘキサデカ
ノイル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジアン
テイソヘキサデカノイル−グリセロ−３−ホスホコリ
ン、１，２−ジアンテイソヘプタデカノイル−グリセロ
−３−ホスホコリン、１，２−ジアンテイソエイコサノ
イル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−Ｏ−ジト
リデシル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、
１，２−Ｏ−ジテトラデシル−グリセロ−３−ホスホエ
タノールアミン、１−Ｏ−テトラデシル−２−Ｏ−ペン
タデシル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、
１，２−Ｏ−ジペンタデシル−グリセロ−３−ホスホエ
タノールアミン、１，２−Ｏ−ジヘキサデシル−グリセ
ロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−Ｏ−ジノナ
デシル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、１，
２−Ｏ−ジイソトリデシル−グリセロ−３−ホスホエタ
ノールアミン、１，２−Ｏ−ジイソテトラデシル−グリ
セロ−３−ホスホエタノールアミン、１−Ｏ−イソテト
ラデシル−２−Ｏ−イソペンタデシル−グリセロ−３−
ホスホエタノールアミン、１，２−Ｏ−ジイソペンタデ
シル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２
−Ｏ−ジイソヘキサデシル−グリセロ−３−ホスホエタ
ノールアミン、１，２−Ｏ−ジイソノナデシル−グリセ
ロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−Ｏ−ジアン
テイソトリデシル−グリセロ−３−ホスホエタノールア
ミン、１，２−Ｏ−ジアンテイソテトラデシル−グリセ
ロ−３−ホスホエタノールアミン、１−Ｏ−アンテイソ
テトラデシル−２−Ｏ−アンテイソペンタデシル−グリ
セロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−Ｏ−ジア
ンテイソペンタデシル−グリセロ−３−ホスホエタノー
ルアミン、１，２−Ｏ−ジアンテイソヘキサデシル−グ
リセロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−Ｏ−ジ
アンテイソノナデシル−グリセロ−３−ホスホエタノー
ルアミン、１，２−Ｏ−ジトリデシル−グリセロ−３−
ホスホコリン、１，２−Ｏ−ジテトラデシル−グリセロ
−３−ホスホコリン、１−Ｏ−テトラデシル−２−Ｏ−
ペンタデシル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−
Ｏ−ジペンタデシル−グリセロ−３−ホスホコリン、
１，２−Ｏ−ジヘキサデシル−グリセロ−３−ホスホコ
リン、１，２−Ｏ−ジノナデシル−グリセロ−３−ホス
ホコリン、１，２−Ｏ−ジイソトリデシル−グリセロ−
３−ホスホコリン、１，２−Ｏ−ジイソテトラデシル−
グリセロ−３−ホスホコリン、１−Ｏ−イソテトラデシ
ル−２−Ｏ−イソペンタデシル−グリセロ−３−ホスホ
コリン、１，２−Ｏ−ジイソペンタデシル−グリセロ−
３−ホスホコリン、１，２−Ｏ−ジイソヘキサデシル−
グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−Ｏ−ジイソノナ
デシル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−Ｏ−ジ
アンテイソトリデシル−グリセロ−３−ホスホコリン、
１，２−Ｏ−ジアンテイソテトラデシル−グリセロ−３
−ホスホコリン、１−Ｏ−アンテイソテトラデシル−２
−Ｏ−アンテイソペンタデシル−グリセロ−３−ホスホ
コリン、１，２−Ｏ−ジアンテイソペンタデシル−グリ
セロ−３−ホスホコリン、１，２−Ｏ−ジアンテイソヘ
キサデシル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−Ｏ
−ジアンテイソノナデシル−グリセロ−３−ホスホコリ
ンなどがあげられる。
2 、Ｒ3 の組み合わせは数多いが、具体的な化合物とし
て１，２−ジテトラデカノイル−グリセロ−３−ホスホ
エタノールアミン、１，２−ジペンタデカノイル−グリ
セロ−３−ホスホエタノールアミン、１−ペンタデカノ
イル−２−ヘキサデカノイル−グリセロ−３−ホスホエ
タノールアミン、１，２−ジヘキサデカノイル−グリセ
ロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジヘプタデ
カノイル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、
１，２−ジエイコサノイル−グリセロ−３−ホスホエタ
ノールアミン、１，２−ジイソテトラデカノイル−グリ
セロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジイソペ
ンタデカノイル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミ
ン、１−イソペンタデカノイル−２−イソヘキサデカノ
イル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２
−ジイソヘキサデカノイル−グリセロ−３−ホスホエタ
ノールアミン １，２−ジイソヘプタデカノイル−グリ
セロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジイソエ
イコサノイル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミ
ン、１，２−ジアンテイソテトラデカノイル−グリセロ
−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジアンテイソ
ペンタデカノイル−グリセロ−３−ホスホエタノールア
ミン、１−アンテイソペンタデカノイル−２−アンテイ
ソヘキサデカノイル−グリセロ−３−ホスホエタノール
アミン、１，２−ジアンテイソヘキサデカノイル−グリ
セロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジアンテ
イソヘプタデカノイル−グリセロ−３−ホスホエタノー
ルアミン、１，２−ジアンテイソエイコサノイル−グリ
セロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジテトラ
デカノイル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジ
ペンタデカノイル−グリセロ−３−ホスホコリン、１−
ペンタデカノイル−２−ヘキサデカノイル−グリセロ−
３−ホスホコリン、１，２−ジヘキサデカノイル−グリ
セロ−３−ホスホコリン、１，２−ジヘプタデカノイル
−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジエイコサノ
イル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジイソテ
トラデカノイル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２
−ジイソペンタデカノイル−グリセロ−３−ホスホコリ
ン、１−イソペンタデカノイル−２−イソヘキサデカノ
イル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジイソヘ
キサデカノイル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２
−ジイソヘプタデカノイル−グリセロ−３−ホスホコリ
ン、１，２−ジイソエイコサノイル−グリセロ−３−ホ
スホコリン、１，２−ジアンテイソテトラデカノイル−
グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジアンテイソペ
ンタデカノイル−グリセロ−３−ホスホコリン、１−ア
ンテイソペンタデカノイル−２−アンテイソヘキサデカ
ノイル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジアン
テイソヘキサデカノイル−グリセロ−３−ホスホコリ
ン、１，２−ジアンテイソヘプタデカノイル−グリセロ
−３−ホスホコリン、１，２−ジアンテイソエイコサノ
イル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−Ｏ−ジト
リデシル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、
１，２−Ｏ−ジテトラデシル−グリセロ−３−ホスホエ
タノールアミン、１−Ｏ−テトラデシル−２−Ｏ−ペン
タデシル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、
１，２−Ｏ−ジペンタデシル−グリセロ−３−ホスホエ
タノールアミン、１，２−Ｏ−ジヘキサデシル−グリセ
ロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−Ｏ−ジノナ
デシル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、１，
２−Ｏ−ジイソトリデシル−グリセロ−３−ホスホエタ
ノールアミン、１，２−Ｏ−ジイソテトラデシル−グリ
セロ−３−ホスホエタノールアミン、１−Ｏ−イソテト
ラデシル−２−Ｏ−イソペンタデシル−グリセロ−３−
ホスホエタノールアミン、１，２−Ｏ−ジイソペンタデ
シル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２
−Ｏ−ジイソヘキサデシル−グリセロ−３−ホスホエタ
ノールアミン、１，２−Ｏ−ジイソノナデシル−グリセ
ロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−Ｏ−ジアン
テイソトリデシル−グリセロ−３−ホスホエタノールア
ミン、１，２−Ｏ−ジアンテイソテトラデシル−グリセ
ロ−３−ホスホエタノールアミン、１−Ｏ−アンテイソ
テトラデシル−２−Ｏ−アンテイソペンタデシル−グリ
セロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−Ｏ−ジア
ンテイソペンタデシル−グリセロ−３−ホスホエタノー
ルアミン、１，２−Ｏ−ジアンテイソヘキサデシル−グ
リセロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−Ｏ−ジ
アンテイソノナデシル−グリセロ−３−ホスホエタノー
ルアミン、１，２−Ｏ−ジトリデシル−グリセロ−３−
ホスホコリン、１，２−Ｏ−ジテトラデシル−グリセロ
−３−ホスホコリン、１−Ｏ−テトラデシル−２−Ｏ−
ペンタデシル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−
Ｏ−ジペンタデシル−グリセロ−３−ホスホコリン、
１，２−Ｏ−ジヘキサデシル−グリセロ−３−ホスホコ
リン、１，２−Ｏ−ジノナデシル−グリセロ−３−ホス
ホコリン、１，２−Ｏ−ジイソトリデシル−グリセロ−
３−ホスホコリン、１，２−Ｏ−ジイソテトラデシル−
グリセロ−３−ホスホコリン、１−Ｏ−イソテトラデシ
ル−２−Ｏ−イソペンタデシル−グリセロ−３−ホスホ
コリン、１，２−Ｏ−ジイソペンタデシル−グリセロ−
３−ホスホコリン、１，２−Ｏ−ジイソヘキサデシル−
グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−Ｏ−ジイソノナ
デシル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−Ｏ−ジ
アンテイソトリデシル−グリセロ−３−ホスホコリン、
１，２−Ｏ−ジアンテイソテトラデシル−グリセロ−３
−ホスホコリン、１−Ｏ−アンテイソテトラデシル−２
−Ｏ−アンテイソペンタデシル−グリセロ−３−ホスホ
コリン、１，２−Ｏ−ジアンテイソペンタデシル−グリ
セロ−３−ホスホコリン、１，２−Ｏ−ジアンテイソヘ
キサデシル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−Ｏ
−ジアンテイソノナデシル−グリセロ−３−ホスホコリ
ンなどがあげられる。
【００１０】本発明における有効成分である化合物を得
るための方法としては、バチルス・ステアロサーモフィ
ルス（Bacillus stearothermophilus ）およびサーマス
（Thermus ）属の菌体から得る方法と共に公知の有機合
成法での製造も可能であり、例えば、文献(Chemistry a
nd Physics of Lipids, Vol.22,1(1978)) 、(Chemistry
and Physics of Lipids, Vol.26,239(1980))などの方
法によって製造できる。
るための方法としては、バチルス・ステアロサーモフィ
ルス（Bacillus stearothermophilus ）およびサーマス
（Thermus ）属の菌体から得る方法と共に公知の有機合
成法での製造も可能であり、例えば、文献(Chemistry a
nd Physics of Lipids, Vol.22,1(1978)) 、(Chemistry
and Physics of Lipids, Vol.26,239(1980))などの方
法によって製造できる。
【００１１】まず、バチルス・ステアロサーモフイルス
(Bacillus stearothermophilus) および、サーマス（Th
ermus ）属の菌体から抽出精製する方法について詳細に
述べる。本発明に用いられるサーマス（Thermus ）属と
しては、特定の菌株に限定されるものではなく、具体例
として例えば、サーマス・アクアティクス（Thermusaqu
aticus ）ＡＴＣＣ ２５１０４、２５１０５、２７６
３４、サーマス・フラバス（Thermus flavus）ＡＴＣＣ
３３９２３などがあげられる。これらの中で、サーマ
ス・アクアティクス（Thermus aquaticus ）ＡＴＣＣ
２５１０４が菌体中の免疫抑制活性が高く目的を達成す
るために最も好都合である。
(Bacillus stearothermophilus) および、サーマス（Th
ermus ）属の菌体から抽出精製する方法について詳細に
述べる。本発明に用いられるサーマス（Thermus ）属と
しては、特定の菌株に限定されるものではなく、具体例
として例えば、サーマス・アクアティクス（Thermusaqu
aticus ）ＡＴＣＣ ２５１０４、２５１０５、２７６
３４、サーマス・フラバス（Thermus flavus）ＡＴＣＣ
３３９２３などがあげられる。これらの中で、サーマ
ス・アクアティクス（Thermus aquaticus ）ＡＴＣＣ
２５１０４が菌体中の免疫抑制活性が高く目的を達成す
るために最も好都合である。
【００１２】また、本発明で用いられるバチルス・ステ
アロサーモフイルス(Bacillus stearothermophilus) と
しては、菌株に限定されるものではなく、具体例として
は例えば、ＮＣＡ１５０３（微工研菌寄第４７７８
号）、ＵＫ７８８（微工研菌寄第２３７３号）、ＵＫ５
６３（微工研菌寄第７２７５号）、ＩＦＯ−１２５５
０、ＩＦＯ−１２９８３、ＩＦＯ−１３７３７、ＡＴＣ
Ｃ−７９５３（微工研菌寄第４７７５号）、ＡＴＣＣ−
８００５（微工研菌寄第４７７６号）、ＡＴＣＣ−１０
１４９（微工研菌寄第４７７７号）、ＡＴＣＣ−１２０
１６、ＡＴＣＣ−１２９７６、ＡＴＣＣ−１２９７７、
ＡＴＣＣ−１２９７８、ＡＴＣＣ−１２９７９、ＡＴＣ
Ｃ−１２９８０、ＡＴＣＣ−１５９５１、ＡＴＣＣ−１
２９５２、ＡＴＣＣ−２１３６５などがあげられる。こ
れらの中で、ＮＣＡ−１５０３（微工研菌寄第４７７８
号）が菌体中の免疫抑制活性が高く目的を達成するため
に最も好都合である。
アロサーモフイルス(Bacillus stearothermophilus) と
しては、菌株に限定されるものではなく、具体例として
は例えば、ＮＣＡ１５０３（微工研菌寄第４７７８
号）、ＵＫ７８８（微工研菌寄第２３７３号）、ＵＫ５
６３（微工研菌寄第７２７５号）、ＩＦＯ−１２５５
０、ＩＦＯ−１２９８３、ＩＦＯ−１３７３７、ＡＴＣ
Ｃ−７９５３（微工研菌寄第４７７５号）、ＡＴＣＣ−
８００５（微工研菌寄第４７７６号）、ＡＴＣＣ−１０
１４９（微工研菌寄第４７７７号）、ＡＴＣＣ−１２０
１６、ＡＴＣＣ−１２９７６、ＡＴＣＣ−１２９７７、
ＡＴＣＣ−１２９７８、ＡＴＣＣ−１２９７９、ＡＴＣ
Ｃ−１２９８０、ＡＴＣＣ−１５９５１、ＡＴＣＣ−１
２９５２、ＡＴＣＣ−２１３６５などがあげられる。こ
れらの中で、ＮＣＡ−１５０３（微工研菌寄第４７７８
号）が菌体中の免疫抑制活性が高く目的を達成するため
に最も好都合である。
【００１３】これらの菌株の培養には一般によく用いら
れる培地を使用することができる。具体的には、炭素源
としてはブドウ糖、乳糖、でんぷん、糖蜜などの糖類が
使用できる。また窒素源としてはペプトン、肉エキス、
酵母エキスなどの有機の窒素源と共に塩化アンモニウ
ム、硫酸アンモニウムなどの無機の窒素源も使用するこ
とができる。また必要に応じてビタミン、ミネラルを添
加してもよい。
れる培地を使用することができる。具体的には、炭素源
としてはブドウ糖、乳糖、でんぷん、糖蜜などの糖類が
使用できる。また窒素源としてはペプトン、肉エキス、
酵母エキスなどの有機の窒素源と共に塩化アンモニウ
ム、硫酸アンモニウムなどの無機の窒素源も使用するこ
とができる。また必要に応じてビタミン、ミネラルを添
加してもよい。
【００１４】培養条件としては、好気培養が採用され、
例えば６０℃から７０℃、１時間から１２時間培養する
ことにより菌体を得ることができる。さらに、新鮮な培
地を一定速度で供給しながら培養する連続培養法も適用
できる。培地及び培養条件は上記の条件に応じて適宜選
定することが可能であることは言うまでもない。
例えば６０℃から７０℃、１時間から１２時間培養する
ことにより菌体を得ることができる。さらに、新鮮な培
地を一定速度で供給しながら培養する連続培養法も適用
できる。培地及び培養条件は上記の条件に応じて適宜選
定することが可能であることは言うまでもない。
【００１５】このように培養して得られる培養液から、
ろ過あるいは遠心などの常法によって、菌体を得る。こ
のようにして得られる菌体からエタノール、メタノー
ル、アセトン、塩化メチレン、クロロホルム、酢酸エチ
ル、トルエン、ヘキサン、ベンゼンなどの有機溶媒を用
いて抽出操作を行い有効成分を得ることができる。さら
にシリカゲルカラムクロマトグラフィー、ゲルろ過クロ
マトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、疎水
クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィーなど
の適当な分離精製方法により有効成分を含む画分、もし
くは有効成分そのものを得、免疫抑制剤として使用する
ことができる。
ろ過あるいは遠心などの常法によって、菌体を得る。こ
のようにして得られる菌体からエタノール、メタノー
ル、アセトン、塩化メチレン、クロロホルム、酢酸エチ
ル、トルエン、ヘキサン、ベンゼンなどの有機溶媒を用
いて抽出操作を行い有効成分を得ることができる。さら
にシリカゲルカラムクロマトグラフィー、ゲルろ過クロ
マトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、疎水
クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィーなど
の適当な分離精製方法により有効成分を含む画分、もし
くは有効成分そのものを得、免疫抑制剤として使用する
ことができる。
【００１６】本発明の免疫抑制剤はホ乳動物に対して優
れた免疫抑制作用を有するものであり、免疫抑制剤とし
て優れたものである。
れた免疫抑制作用を有するものであり、免疫抑制剤とし
て優れたものである。
【００１７】本発明の免疫抑制剤は、種々の形態で患者
に投与できる。例えば、錠剤、ペレット剤、カプセル
剤、座剤、液剤、乳剤、けんだく剤などの形態が使用で
きる。これらの形態を用いる場合、安定剤、賦形剤、着
色剤、芳香剤及び甘味剤のような補助剤を用いることが
できる。安定剤としては二酸化炭素、窒素、亜硫酸水素
ナトリウム、ピロ亜硫酸ナトリウム、アスコルビン酸、
ブチルヒドロキシアニソール、トコフェロール、ＥＤＴ
Ａなどを用いることができる。賦形剤としては乳糖、デ
ンプン、結晶セルロース、白糖、ブドウ糖、マンニトー
ル、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウ
ム、塩化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、カンゾウ
末、カンゾウ粗エキス、乾燥酵母、酵母エキス、精製ラ
ノリン、ゲンチアナ末、ゲンチアナエキス、マルツエキ
ス、グリセリンなどを用いることができる。また、静脈
注射、筋肉注射、皮下注射などによっても患者に投与可
能である。
に投与できる。例えば、錠剤、ペレット剤、カプセル
剤、座剤、液剤、乳剤、けんだく剤などの形態が使用で
きる。これらの形態を用いる場合、安定剤、賦形剤、着
色剤、芳香剤及び甘味剤のような補助剤を用いることが
できる。安定剤としては二酸化炭素、窒素、亜硫酸水素
ナトリウム、ピロ亜硫酸ナトリウム、アスコルビン酸、
ブチルヒドロキシアニソール、トコフェロール、ＥＤＴ
Ａなどを用いることができる。賦形剤としては乳糖、デ
ンプン、結晶セルロース、白糖、ブドウ糖、マンニトー
ル、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウ
ム、塩化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、カンゾウ
末、カンゾウ粗エキス、乾燥酵母、酵母エキス、精製ラ
ノリン、ゲンチアナ末、ゲンチアナエキス、マルツエキ
ス、グリセリンなどを用いることができる。また、静脈
注射、筋肉注射、皮下注射などによっても患者に投与可
能である。
【００１８】投与量としては体重１ｋｇあたり０．０１
ｍg 〜１００ｍｇ、好ましくは０．０５ｍｇ〜５０ｍ
ｇ、さらに好ましくは０．１ｍｇ〜１０ｍｇが適当であ
るが、患者の症状、病状の進行程度などにより適宜最適
投与量を選ぶことは言うまでもない。
ｍg 〜１００ｍｇ、好ましくは０．０５ｍｇ〜５０ｍ
ｇ、さらに好ましくは０．１ｍｇ〜１０ｍｇが適当であ
るが、患者の症状、病状の進行程度などにより適宜最適
投与量を選ぶことは言うまでもない。
【００１９】
【実施例】以下、実施例によりさらに具体的に説明す
る。なお、実施例中、％はＷ／Ｖ％を表す。 実施例１ バチルス・ステアロサーモフィルス(Bacillus stearoth
ermophilus) ＮＣＡ−１５０３（微工研菌寄第４７７８
号）をグルコース０．３５％、酵母エキス０．３％、ペ
プトン０．２％、リン酸カリウム０．０４％、リン酸２
ナトリウム０．０４％、硫酸マグネシウム０．１％を含
む液体培地に接種し、５８℃、４時間前培養した培養液
２．２Ｌを１８Ｌの同培地を仕込んだ３０Ｌジヤーフア
ーメンターに移し５８℃、３．５時間培養した。
る。なお、実施例中、％はＷ／Ｖ％を表す。 実施例１ バチルス・ステアロサーモフィルス(Bacillus stearoth
ermophilus) ＮＣＡ−１５０３（微工研菌寄第４７７８
号）をグルコース０．３５％、酵母エキス０．３％、ペ
プトン０．２％、リン酸カリウム０．０４％、リン酸２
ナトリウム０．０４％、硫酸マグネシウム０．１％を含
む液体培地に接種し、５８℃、４時間前培養した培養液
２．２Ｌを１８Ｌの同培地を仕込んだ３０Ｌジヤーフア
ーメンターに移し５８℃、３．５時間培養した。
【００２０】培養液を遠心分離し、得られた菌体を５０
０ｇを６ｌのエタノールに、室温で２４時間浸漬し、抽
出液を得た。この抽出液を減圧濃縮し、乾固物に５００
ｍｌのクロロホルムを加え、クロロホルム可溶物を抽出
した。これをＤＥＡＥ−セファデックスカラムクロマト
グラフィーにかけクロロホルム／メタノール（１０／
１）で溶出し、活性画分を得た。
０ｇを６ｌのエタノールに、室温で２４時間浸漬し、抽
出液を得た。この抽出液を減圧濃縮し、乾固物に５００
ｍｌのクロロホルムを加え、クロロホルム可溶物を抽出
した。これをＤＥＡＥ−セファデックスカラムクロマト
グラフィーにかけクロロホルム／メタノール（１０／
１）で溶出し、活性画分を得た。
【００２１】このようにして得られた活性画分をさらに
シリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけクロロホル
ム／メタノール（７／３）で溶出し活性画分を得た。さ
らに、この活性画分を高速液体クロマトグラフィーにか
け、２０ｍＭ塩化コリンを含むメタノール／水／アセト
ニトリル（９０. ５／７０／２５）の混合溶媒を移動相
として、ＰＴ−３を得た。
シリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけクロロホル
ム／メタノール（７／３）で溶出し活性画分を得た。さ
らに、この活性画分を高速液体クロマトグラフィーにか
け、２０ｍＭ塩化コリンを含むメタノール／水／アセト
ニトリル（９０. ５／７０／２５）の混合溶媒を移動相
として、ＰＴ−３を得た。
【００２２】このようにして得た活性画分（ＰＴ−３）
は適当な方法により結晶化することができるが、上記の
操作により高純度の精製標品を得ることができる。この
活性画分の溥層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）によるＲ
ｆ値の結果は、既にバチルス・ステアロサーモフィルス
(Bacillus stearothermophilus) から得られている免疫
抑制活性物質ＫＭ−７３（特願平４−７３５１１号）の
Ｒｆ値と全く異なるものであった。また、ＫＭ−７３は
アミノ基の検出反応であるニンヒドリン反応に陰性であ
るが、ＰＴ−３はニンヒドリン反応により青紫色に呈色
したことから、ＰＴ−３はＫＭ−７３に存在しないアミ
ノ基を有することが判った。また、ＫＭ−７３はリン検
出試薬であるDittmer-Lester試薬に対して陰性であった
が、ＰＴ−３は青色に呈色したことから、ＰＴ−３はＫ
Ｍ−７３に存在しないリン原子を有することが判った。
は適当な方法により結晶化することができるが、上記の
操作により高純度の精製標品を得ることができる。この
活性画分の溥層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）によるＲ
ｆ値の結果は、既にバチルス・ステアロサーモフィルス
(Bacillus stearothermophilus) から得られている免疫
抑制活性物質ＫＭ−７３（特願平４−７３５１１号）の
Ｒｆ値と全く異なるものであった。また、ＫＭ−７３は
アミノ基の検出反応であるニンヒドリン反応に陰性であ
るが、ＰＴ−３はニンヒドリン反応により青紫色に呈色
したことから、ＰＴ−３はＫＭ−７３に存在しないアミ
ノ基を有することが判った。また、ＫＭ−７３はリン検
出試薬であるDittmer-Lester試薬に対して陰性であった
が、ＰＴ−３は青色に呈色したことから、ＰＴ−３はＫ
Ｍ−７３に存在しないリン原子を有することが判った。
【００２３】さらに、本品の構造を確定するために13Ｃ
−ＮＭＲ、 1Ｈ−ＮＭＲおよび赤外吸収スペクトルを測
定し、ＰＴ−３の 1Ｈ−ＮＭＲスペクトルと１，３−ジ
イソグリセライドであるＫＭ−７３の 1Ｈ−ＮＭＲスペ
クトルを比較すると、ＰＴ−３には新たに５．２１ｐｐ
ｍにグリセロール骨格の２位のメチンプロトン、３．９
２ｐｐｍにグリセロール骨格の３位のメチレンプロト
ン、３．１２ｐｐｍにエタノールアミン部分の２個のメ
チレンプロトンが観察された。これらの結果より、本品
は一般式化２においてＲ1 、Ｒ2 がイソペンタデカノイ
ル基、Ｒ3 が水素原子である１，２−ジイソペンタデカ
ノイル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミンである
ことが明らかとなった。以上、ＴＬＣのＲｆ値、呈色反
応および各種分光学的性質の違いから、ＰＴ−３はＫＭ
−７３と異なることが明らかとなった。
−ＮＭＲ、 1Ｈ−ＮＭＲおよび赤外吸収スペクトルを測
定し、ＰＴ−３の 1Ｈ−ＮＭＲスペクトルと１，３−ジ
イソグリセライドであるＫＭ−７３の 1Ｈ−ＮＭＲスペ
クトルを比較すると、ＰＴ−３には新たに５．２１ｐｐ
ｍにグリセロール骨格の２位のメチンプロトン、３．９
２ｐｐｍにグリセロール骨格の３位のメチレンプロト
ン、３．１２ｐｐｍにエタノールアミン部分の２個のメ
チレンプロトンが観察された。これらの結果より、本品
は一般式化２においてＲ1 、Ｒ2 がイソペンタデカノイ
ル基、Ｒ3 が水素原子である１，２−ジイソペンタデカ
ノイル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミンである
ことが明らかとなった。以上、ＴＬＣのＲｆ値、呈色反
応および各種分光学的性質の違いから、ＰＴ−３はＫＭ
−７３と異なることが明らかとなった。
【００２４】図１に 1Ｈ−ＮＭＲ分析結果、図２に赤外
吸収スペクトル分析結果を示した。
吸収スペクトル分析結果を示した。
【００２５】実施例２ サーマス・アクアティクス（Thermus aquaticus ）ＡＴ
ＣＣ ２５１０４をグルコース０．３５％、酵母エキス
０．３％、ペプトン０．２％、リン酸カリウム０．０４
％、リン酸２ナトリウム０．０４％、硫酸マグネシウム
０．１％を含む液体培地に接種し、７０℃、４時間前培
養した培養液２．２Ｌを１８Ｌの同培地を仕込んだ３０
Ｌジヤーフアーメンターに移し７０℃、３．５時間培養
した。
ＣＣ ２５１０４をグルコース０．３５％、酵母エキス
０．３％、ペプトン０．２％、リン酸カリウム０．０４
％、リン酸２ナトリウム０．０４％、硫酸マグネシウム
０．１％を含む液体培地に接種し、７０℃、４時間前培
養した培養液２．２Ｌを１８Ｌの同培地を仕込んだ３０
Ｌジヤーフアーメンターに移し７０℃、３．５時間培養
した。
【００２６】培養液を遠心分離し、得られた菌体を５０
０ｇを６ｌのエタノールに、室温で２４時間浸漬し、抽
出液を得た。この抽出液を減圧濃縮し、乾固物に５００
ｍｌのクロロホルムを加え、クロロホルム可溶物を抽出
した。これをＤＥＡＥ−セファデックスカラムクロマト
グラフィーにかけクロロホルム／メタノール（１０／
１）で溶出し、活性画分を得た。
０ｇを６ｌのエタノールに、室温で２４時間浸漬し、抽
出液を得た。この抽出液を減圧濃縮し、乾固物に５００
ｍｌのクロロホルムを加え、クロロホルム可溶物を抽出
した。これをＤＥＡＥ−セファデックスカラムクロマト
グラフィーにかけクロロホルム／メタノール（１０／
１）で溶出し、活性画分を得た。
【００２７】このようにして得られた活性画分をさらに
シリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけクロロホル
ム／メタノール（７／３）で溶出し活性画分を得た。さ
らに、この活性画分を高速液体クロマトグラフィーにか
け、２０ｍＭ塩化コリンを含むメタノール／水／アセト
ニトリル（９０. ５／７０／２５）の混合溶媒を移動相
として、活性画分（ＰＴ−４）を得た。
シリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけクロロホル
ム／メタノール（７／３）で溶出し活性画分を得た。さ
らに、この活性画分を高速液体クロマトグラフィーにか
け、２０ｍＭ塩化コリンを含むメタノール／水／アセト
ニトリル（９０. ５／７０／２５）の混合溶媒を移動相
として、活性画分（ＰＴ−４）を得た。
【００２８】このようにして得た活性画分（ＰＴ−４）
は適当な方法により結晶化することができるが、上記の
操作により高純度の精製標品を得ることができる。
は適当な方法により結晶化することができるが、上記の
操作により高純度の精製標品を得ることができる。
【００２９】本品ＰＴ−４の構造を確定するために13Ｃ
−ＮＭＲ、 1Ｈ−ＮＭＲおよび赤外吸収スペクトルを測
定したところ、ＰＴ−３と同様な物理化学的性質を示し
たことから、ＰＴ−４はＰＴ−３と同一であると同定さ
れ、化２で示される一般式においてＲ1 、Ｒ2 がイソペ
ンタデカノイル基で示され、Ｒ3 が水素原子で示される
構造をもつ１，２−ジイソペンタデカノイル−グリセロ
−３−ホスホエタノールアミンであることが明らかにな
った。
−ＮＭＲ、 1Ｈ−ＮＭＲおよび赤外吸収スペクトルを測
定したところ、ＰＴ−３と同様な物理化学的性質を示し
たことから、ＰＴ−４はＰＴ−３と同一であると同定さ
れ、化２で示される一般式においてＲ1 、Ｒ2 がイソペ
ンタデカノイル基で示され、Ｒ3 が水素原子で示される
構造をもつ１，２−ジイソペンタデカノイル−グリセロ
−３−ホスホエタノールアミンであることが明らかにな
った。
【００３０】実施例３ 以下に１，２−ジイソペンタデカノイル−グリセロ−３
−ホスホエタノールアミン、１，２−ジイソペンタデカ
ノイル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジイソ
ペンタデシル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミ
ン、１，２−ジイソペンタデシル−グリセロ−３−ホス
ホコリンの有機合成例を示す。
−ホスホエタノールアミン、１，２−ジイソペンタデカ
ノイル−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジイソ
ペンタデシル−グリセロ−３−ホスホエタノールアミ
ン、１，２−ジイソペンタデシル−グリセロ−３−ホス
ホコリンの有機合成例を示す。
【００３１】イソペンタデカン酸クロライドの合成。 イソペンタデカン酸（１２．１ｇ）と塩化チオニル
（５．９ｇ）の混合物を１１０℃で２時間還流した。過
剰の塩化チオニルを減圧して除き、引き続いて、蒸留を
行い、目的物（１１．８ｇ）を得た
（５．９ｇ）の混合物を１１０℃で２時間還流した。過
剰の塩化チオニルを減圧して除き、引き続いて、蒸留を
行い、目的物（１１．８ｇ）を得た
【００３２】１，２−ジイソペンタデカノイル−３−ベ
ンジルグリセロールの合成。 １−ベンジルグリセロール（７．８ｇ）と乾燥ピリジン
（３．４ｇ）を乾燥エーテル（１００ｍｌ）に溶かし、
かき混ぜながら、イソペンタデカン酸クロライド（１
１．８ｇ）を徐々に加えた。２時間還流し放冷した後、
反応液を水に注ぎ込み、塩酸で中和した。エーテルで抽
出し、脱水（Ｎａ2 ＳＯ4 ）後、減圧濃縮し、油状物を
得た。これをシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、
目的物（２０．４ｇ）を得た。
ンジルグリセロールの合成。 １−ベンジルグリセロール（７．８ｇ）と乾燥ピリジン
（３．４ｇ）を乾燥エーテル（１００ｍｌ）に溶かし、
かき混ぜながら、イソペンタデカン酸クロライド（１
１．８ｇ）を徐々に加えた。２時間還流し放冷した後、
反応液を水に注ぎ込み、塩酸で中和した。エーテルで抽
出し、脱水（Ｎａ2 ＳＯ4 ）後、減圧濃縮し、油状物を
得た。これをシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、
目的物（２０．４ｇ）を得た。
【００３３】１，２−ジイソペンタデカノイルグリセロ
ールの合成。 前記ベンジル体（１２．６ｇ）を８５％酢酸（１００ｍ
ｌ）に溶解し、パラジウム−カーボン（１．３ｇ）を触
媒として室温にて接触還元をおこなった。反応終了後、
冷所に放置し析出する結晶を集めた。結晶はクロロホル
ムに溶解し、ろ過を行うことで、触媒を除去した。ろ液
を減圧濃縮し、エタノールから再結晶することで目的物
（８．９ｇ）を得た。
ールの合成。 前記ベンジル体（１２．６ｇ）を８５％酢酸（１００ｍ
ｌ）に溶解し、パラジウム−カーボン（１．３ｇ）を触
媒として室温にて接触還元をおこなった。反応終了後、
冷所に放置し析出する結晶を集めた。結晶はクロロホル
ムに溶解し、ろ過を行うことで、触媒を除去した。ろ液
を減圧濃縮し、エタノールから再結晶することで目的物
（８．９ｇ）を得た。
【００３４】ブロモエチルホスホロジクロリデートの合
成。 蒸留したホスホロウスオキシクロライド（２０ｇ）を５
ｍｌのトリクロロエチレンに溶かし、蒸留した２−ブロ
モエタノール（９．５ｇ）を徐々に滴下した。滴下中、
発生した塩化水素ガスを除去するために窒素ガスを反応
液中に通じさせた。２５℃で１２時間反応後、１０ｍｌ
のトルエンを加え、減圧濃縮し、目的物（１４．９ｇ）
を得た。
成。 蒸留したホスホロウスオキシクロライド（２０ｇ）を５
ｍｌのトリクロロエチレンに溶かし、蒸留した２−ブロ
モエタノール（９．５ｇ）を徐々に滴下した。滴下中、
発生した塩化水素ガスを除去するために窒素ガスを反応
液中に通じさせた。２５℃で１２時間反応後、１０ｍｌ
のトルエンを加え、減圧濃縮し、目的物（１４．９ｇ）
を得た。
【００３５】１，２−ジイソペンタデカノイル−グリセ
ロ−３−リン酸ブロモエチルエステルの合成。 ブロモエチルホスホロジクロライド（４．４ｇ）を２５
ｍｌのトリクロロエチレンに溶解し、アイスバスで氷冷
後、トリエチルアミン（３．６ｇ）を加えた。反応液を
２５℃に保ち、かくはんしながら、１，２−ジイソペン
タデカノイルグリセロール（５．４ｇ）をトリクロロエ
チレン（２５ｍｌ）に溶かした溶液を滴下した。１時間
反応をおこなった後、反応液をろ過し、ろ液を減圧乾固
した。乾固物をテトラヒドロフラン（３０ｍｌ）に溶か
し、０．５Ｍ酢酸ナトリウム（３０ｍｌ，ｐＨ８．５）
と０．５Ｍエチレンジアミンテトラアセテート（３０ｍ
ｌ，ｐＨ１０．５）を加えて、２時間かくはんした後、
反応液をジイソプロピルエーテル／メタノール（４０ｍ
ｌ，３／１）で抽出した。抽出液を減圧乾固し、クロロ
ホルム（１０ｍｌ）に溶かした。これに０℃でアセトン
（７０ｍｌ）を加え、沈澱した目的物（６．２ｇ）をろ
過で集めた。
ロ−３−リン酸ブロモエチルエステルの合成。 ブロモエチルホスホロジクロライド（４．４ｇ）を２５
ｍｌのトリクロロエチレンに溶解し、アイスバスで氷冷
後、トリエチルアミン（３．６ｇ）を加えた。反応液を
２５℃に保ち、かくはんしながら、１，２−ジイソペン
タデカノイルグリセロール（５．４ｇ）をトリクロロエ
チレン（２５ｍｌ）に溶かした溶液を滴下した。１時間
反応をおこなった後、反応液をろ過し、ろ液を減圧乾固
した。乾固物をテトラヒドロフラン（３０ｍｌ）に溶か
し、０．５Ｍ酢酸ナトリウム（３０ｍｌ，ｐＨ８．５）
と０．５Ｍエチレンジアミンテトラアセテート（３０ｍ
ｌ，ｐＨ１０．５）を加えて、２時間かくはんした後、
反応液をジイソプロピルエーテル／メタノール（４０ｍ
ｌ，３／１）で抽出した。抽出液を減圧乾固し、クロロ
ホルム（１０ｍｌ）に溶かした。これに０℃でアセトン
（７０ｍｌ）を加え、沈澱した目的物（６．２ｇ）をろ
過で集めた。
【００３６】１，２−ジイソペンタデカノイル−グリセ
ロ−３−ホスホエタノールアミンの合成。 １，２−ジイソペンタデカノイル−グリセロ−３−リン
酸ブロモエチルエステル（３．６３ｇ）をクロロホルム
（５０ｍｌ）に溶解し、４０℃に保って、２−プロパノ
ール（５０ｍｌ）とジメチルホルムアミド（２００ｍ
ｌ）を加えた。さらに、２５％アンモニア水溶液（１５
０ｍｌ）を加えて、６時間反応させた。反応後、減圧濃
縮し、乾固物を得た。これに水（７５ｍｌ）及びクロロ
ホルム（７５ｍｌ）及びメタノール（１００ｍｌ）を加
えてかくはんした後、クロロホルム層を取った。クロロ
ホルム層を減圧濃縮し、クロロホルムの７倍量の冷アセ
トンを加え、０℃で目的物を沈澱させた。沈澱物をクロ
ロホルムに溶解後、シリカゲルクロマトグラフィーで精
製し、目的物（２．８３ｇ）を無色粉末を得た。 ＩＲ（ＫＢｒ） ｃｍ-1：３４００、２９２０、２８５
１、１７４０、１４６８、１２２６、１０８１1 Ｈ−ＮＭＲ（９０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3 ） δ：０．８
８（１２Ｈ）、１．２６（３６Ｈ）、１．６０（６
Ｈ）、２．３１（４Ｈ）、３．１５（２Ｈ）、４．０５
（５Ｈ）、４．４２（１Ｈ）、５．２３（１Ｈ）
ロ−３−ホスホエタノールアミンの合成。 １，２−ジイソペンタデカノイル−グリセロ−３−リン
酸ブロモエチルエステル（３．６３ｇ）をクロロホルム
（５０ｍｌ）に溶解し、４０℃に保って、２−プロパノ
ール（５０ｍｌ）とジメチルホルムアミド（２００ｍ
ｌ）を加えた。さらに、２５％アンモニア水溶液（１５
０ｍｌ）を加えて、６時間反応させた。反応後、減圧濃
縮し、乾固物を得た。これに水（７５ｍｌ）及びクロロ
ホルム（７５ｍｌ）及びメタノール（１００ｍｌ）を加
えてかくはんした後、クロロホルム層を取った。クロロ
ホルム層を減圧濃縮し、クロロホルムの７倍量の冷アセ
トンを加え、０℃で目的物を沈澱させた。沈澱物をクロ
ロホルムに溶解後、シリカゲルクロマトグラフィーで精
製し、目的物（２．８３ｇ）を無色粉末を得た。 ＩＲ（ＫＢｒ） ｃｍ-1：３４００、２９２０、２８５
１、１７４０、１４６８、１２２６、１０８１1 Ｈ−ＮＭＲ（９０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3 ） δ：０．８
８（１２Ｈ）、１．２６（３６Ｈ）、１．６０（６
Ｈ）、２．３１（４Ｈ）、３．１５（２Ｈ）、４．０５
（５Ｈ）、４．４２（１Ｈ）、５．２３（１Ｈ）
【００３７】１，２−ジイソペンタデカノイル−グリセ
ロ−３−ホスホコリンの合成。 １，２−ジイソペンタデカノイル−グリセロ−３−リン
酸ブロモエチルエステル（３．６３ｇ）をクロロホルム
（１５ｍｌ）に溶解し、５０℃に保って、２−プロパノ
ール（２５ｍｌ）とアセトニトリル（２５ｍｌ）を加え
た。さらに、４０％トリメチルアミン水溶液（３５ｍ
ｌ）を加えて、１２時間反応させた。反応後、減圧濃縮
し、乾固物を得た。これに水（７５ｍｌ）及びクロロホ
ルム（７５ｍｌ）及びメタノール（１００ｍｌ）を加え
てかくはんした後、クロロホルム層を取った。クロロホ
ルム層を減圧濃縮し、クロロホルムの７倍量の冷アセト
ンを加え、０℃で目的物を沈澱させた。沈澱物をクロロ
ホルムに溶解後、シリカゲルクロマトグラフィーで精製
し、目的物（２．５２ｇ）を無色粉末を得た。 ＩＲ（ＫＢｒ） ｃｍ-1：２９２１、２８５１、１７４
０、１４６７、１２５１、１０８２、９６７、８３５1 Ｈ−ＮＭＲ（９０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3 ） δ：０．８
９（１２Ｈ）、１．２６（３６Ｈ）、１．５９（６
Ｈ）、２．３０（４Ｈ）、３．３６（９Ｈ）、４．０７
（７Ｈ）、４．４２（１Ｈ）、５．２３（１Ｈ）
ロ−３−ホスホコリンの合成。 １，２−ジイソペンタデカノイル−グリセロ−３−リン
酸ブロモエチルエステル（３．６３ｇ）をクロロホルム
（１５ｍｌ）に溶解し、５０℃に保って、２−プロパノ
ール（２５ｍｌ）とアセトニトリル（２５ｍｌ）を加え
た。さらに、４０％トリメチルアミン水溶液（３５ｍ
ｌ）を加えて、１２時間反応させた。反応後、減圧濃縮
し、乾固物を得た。これに水（７５ｍｌ）及びクロロホ
ルム（７５ｍｌ）及びメタノール（１００ｍｌ）を加え
てかくはんした後、クロロホルム層を取った。クロロホ
ルム層を減圧濃縮し、クロロホルムの７倍量の冷アセト
ンを加え、０℃で目的物を沈澱させた。沈澱物をクロロ
ホルムに溶解後、シリカゲルクロマトグラフィーで精製
し、目的物（２．５２ｇ）を無色粉末を得た。 ＩＲ（ＫＢｒ） ｃｍ-1：２９２１、２８５１、１７４
０、１４６７、１２５１、１０８２、９６７、８３５1 Ｈ−ＮＭＲ（９０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3 ） δ：０．８
９（１２Ｈ）、１．２６（３６Ｈ）、１．５９（６
Ｈ）、２．３０（４Ｈ）、３．３６（９Ｈ）、４．０７
（７Ｈ）、４．４２（１Ｈ）、５．２３（１Ｈ）
【００３８】１，２−０−ジイソペンタデシル−３−ベ
ンジルグリセロールの合成。 １−ベンジルグリセロール（３．１ｇ）とイソペンタデ
シルブロマイド（１４．８ｇ）をジメチルスルホキシド
（２５ｍｌ）に溶解し、粉末化した水酸化カリウム
（４．８ｇ）を加えて、かくはんしながら、室温で３時
間、８０度で２時間反応させた。反応液を冷却後、水に
注ぎ込み、塩酸で中和した。エーテルで抽出し、脱水
（Ｎａ2 ＳＯ4 ）後、減圧濃縮し、油状物を得た。これ
をシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、目的物
（８．２ｇ）を得た。
ンジルグリセロールの合成。 １−ベンジルグリセロール（３．１ｇ）とイソペンタデ
シルブロマイド（１４．８ｇ）をジメチルスルホキシド
（２５ｍｌ）に溶解し、粉末化した水酸化カリウム
（４．８ｇ）を加えて、かくはんしながら、室温で３時
間、８０度で２時間反応させた。反応液を冷却後、水に
注ぎ込み、塩酸で中和した。エーテルで抽出し、脱水
（Ｎａ2 ＳＯ4 ）後、減圧濃縮し、油状物を得た。これ
をシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、目的物
（８．２ｇ）を得た。
【００３９】１，２−Ｏ−ジイソペンタデカノイルグリ
セロールの合成。 前記ベンジル体（８．２ｇ）を８５％酢酸（１００ｍ
ｌ）に溶解し、パラジウム−カーボン（０．９ｇ）を触
媒として室温にて接触還元をおこなった。反応終了後、
冷所に放置し析出する結晶を集めた。結晶はクロロホル
ムに溶解し、ろ過を行うことで、触媒を除去した。ろ液
を減圧濃縮し、エタノールから再結晶することで目的物
（５．６ｇ）を得た。
セロールの合成。 前記ベンジル体（８．２ｇ）を８５％酢酸（１００ｍ
ｌ）に溶解し、パラジウム−カーボン（０．９ｇ）を触
媒として室温にて接触還元をおこなった。反応終了後、
冷所に放置し析出する結晶を集めた。結晶はクロロホル
ムに溶解し、ろ過を行うことで、触媒を除去した。ろ液
を減圧濃縮し、エタノールから再結晶することで目的物
（５．６ｇ）を得た。
【００４０】１，２−０−ジイソペンタデシル−グリセ
ロ−３−リン酸ブロモエチルエステルの合成。 ブロモエチルホスホロジクロライド（４．４ｇ）を２５
ｍｌのトリクロロエチレンに溶解し、アイスバスで氷冷
後、トリエチルアミン（３．６ｇ）を加えた。反応液を
２５℃に保ち、かくはんしながら、１，２−Ｏ−ジイソ
ペンタデシルグリセロール（５．２ｇ）をトリクロロエ
チレン（２５ｍｌ）に溶かした溶液を滴下した。１時間
反応をおこなった後、反応液をろ過し、ろ液を減圧乾固
した。乾固物をテトラヒドロフラン（３０ｍｌ）に溶か
し、０．５Ｍ酢酸ナトリウム（３０ｍｌ，ｐＨ８．５）
と０．５Ｍエチレンジアミンテトラアセテート（３０ｍ
ｌ，ｐＨ１０．５）を加えて、２時間かくはんした後、
反応液をジイソプロピルエーテル／メタノール（４０ｍ
ｌ，３／１）で抽出した。抽出液を減圧乾固し、クロロ
ホルム（１０ｍｌ）に溶かした。これに０℃でアセトン
（７０ｍｌ）を加え、沈澱した目的物（６．２ｇ）をろ
過で集めた。
ロ−３−リン酸ブロモエチルエステルの合成。 ブロモエチルホスホロジクロライド（４．４ｇ）を２５
ｍｌのトリクロロエチレンに溶解し、アイスバスで氷冷
後、トリエチルアミン（３．６ｇ）を加えた。反応液を
２５℃に保ち、かくはんしながら、１，２−Ｏ−ジイソ
ペンタデシルグリセロール（５．２ｇ）をトリクロロエ
チレン（２５ｍｌ）に溶かした溶液を滴下した。１時間
反応をおこなった後、反応液をろ過し、ろ液を減圧乾固
した。乾固物をテトラヒドロフラン（３０ｍｌ）に溶か
し、０．５Ｍ酢酸ナトリウム（３０ｍｌ，ｐＨ８．５）
と０．５Ｍエチレンジアミンテトラアセテート（３０ｍ
ｌ，ｐＨ１０．５）を加えて、２時間かくはんした後、
反応液をジイソプロピルエーテル／メタノール（４０ｍ
ｌ，３／１）で抽出した。抽出液を減圧乾固し、クロロ
ホルム（１０ｍｌ）に溶かした。これに０℃でアセトン
（７０ｍｌ）を加え、沈澱した目的物（６．２ｇ）をろ
過で集めた。
【００４１】１，２−Ｏ−ジイソペンタデシル−グリセ
ロ−３−ホスホエタノールアミンの合成。 １，２−ジイソペンタデカノイル−グリセロ−３−リン
酸ブロモエチルエステル（３．５ｇ）をクロロホルム
（５０ｍｌ）に溶解し、４０℃に保って、２−プロパノ
ール（５０ｍｌ）とジメチルホルムアミド（２００ｍ
ｌ）を加えた。さらに、２５％アンモニア水溶液（１５
０ｍｌ）を加えて、６時間反応させた。反応後、減圧濃
縮し、乾固物を得た。これに水（７５ｍｌ）及びクロロ
ホルム（７５ｍｌ）及びメタノール（１００ｍｌ）を加
えてかくはんした後、クロロホルム層を取った。クロロ
ホルム層を減圧濃縮し、クロロホルムの７倍量の冷アセ
トンを加え、０℃で目的物を沈澱させた。沈澱物をクロ
ロホルムに溶解後、シリカゲルクロマトグラフィーで精
製し、目的物（２．８ｇ）を無色粉末を得た。 ＩＲ（ＫＢｒ） ｃｍ-1：３４００、２９２０、２８５
１、１４６５、１２３２、１０８２1 Ｈ−ＮＭＲ（９０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3 ） δ：０．８
９（１２Ｈ）、１．２４（４６Ｈ）、３．１６（２
Ｈ）、３．４０（４Ｈ）、３．８５（２Ｈ）、４．２０
（４Ｈ）、５．１９（１Ｈ）
ロ−３−ホスホエタノールアミンの合成。 １，２−ジイソペンタデカノイル−グリセロ−３−リン
酸ブロモエチルエステル（３．５ｇ）をクロロホルム
（５０ｍｌ）に溶解し、４０℃に保って、２−プロパノ
ール（５０ｍｌ）とジメチルホルムアミド（２００ｍ
ｌ）を加えた。さらに、２５％アンモニア水溶液（１５
０ｍｌ）を加えて、６時間反応させた。反応後、減圧濃
縮し、乾固物を得た。これに水（７５ｍｌ）及びクロロ
ホルム（７５ｍｌ）及びメタノール（１００ｍｌ）を加
えてかくはんした後、クロロホルム層を取った。クロロ
ホルム層を減圧濃縮し、クロロホルムの７倍量の冷アセ
トンを加え、０℃で目的物を沈澱させた。沈澱物をクロ
ロホルムに溶解後、シリカゲルクロマトグラフィーで精
製し、目的物（２．８ｇ）を無色粉末を得た。 ＩＲ（ＫＢｒ） ｃｍ-1：３４００、２９２０、２８５
１、１４６５、１２３２、１０８２1 Ｈ−ＮＭＲ（９０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3 ） δ：０．８
９（１２Ｈ）、１．２４（４６Ｈ）、３．１６（２
Ｈ）、３．４０（４Ｈ）、３．８５（２Ｈ）、４．２０
（４Ｈ）、５．１９（１Ｈ）
【００４２】１，２−Ｏ−ジイソペンタデシル−グリセ
ロ−３−ホスホコリンの合成。 １，２−ジイソペンタデカノイル−グリセロ−３−リン
酸ブロモエチルエステル（３．５ｇ）をクロロホルム
（１５ｍｌ）に溶解し、５０℃に保って、２−プロパノ
ール（２５ｍｌ）とアセトニトリル（２５ｍｌ）を加え
た。さらに、４０％トリメチルアミン水溶液（３５ｍ
ｌ）を加えて、１２時間反応させた。反応後、減圧濃縮
し、乾固物を得た。これに水（７５ｍｌ）及びクロロホ
ルム（７５ｍｌ）及びメタノール（１００ｍｌ）を加え
てかくはんした後、クロロホルム層を取った。クロロホ
ルム層を減圧濃縮し、クロロホルムの７倍量の冷アセト
ンを加え、０℃で目的物を沈澱させた。沈澱物をクロロ
ホルムに溶解後、シリカゲルクロマトグラフィーで精製
し、目的物（２．９ｇ）を無色粉末を得た。 ＩＲ（ＫＢｒ） ｃｍ-1：２９２０、２８４９、１４６
３、１２５０、１０８１、９６８、８２８1 Ｈ−ＮＭＲ（９０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3 ） δ：０．９
０（１２Ｈ）、１．２７（４６Ｈ）、３．３６（９
Ｈ）、３．４２（４Ｈ）、４．１５（８Ｈ）、５．２０
（１Ｈ）
ロ−３−ホスホコリンの合成。 １，２−ジイソペンタデカノイル−グリセロ−３−リン
酸ブロモエチルエステル（３．５ｇ）をクロロホルム
（１５ｍｌ）に溶解し、５０℃に保って、２−プロパノ
ール（２５ｍｌ）とアセトニトリル（２５ｍｌ）を加え
た。さらに、４０％トリメチルアミン水溶液（３５ｍ
ｌ）を加えて、１２時間反応させた。反応後、減圧濃縮
し、乾固物を得た。これに水（７５ｍｌ）及びクロロホ
ルム（７５ｍｌ）及びメタノール（１００ｍｌ）を加え
てかくはんした後、クロロホルム層を取った。クロロホ
ルム層を減圧濃縮し、クロロホルムの７倍量の冷アセト
ンを加え、０℃で目的物を沈澱させた。沈澱物をクロロ
ホルムに溶解後、シリカゲルクロマトグラフィーで精製
し、目的物（２．９ｇ）を無色粉末を得た。 ＩＲ（ＫＢｒ） ｃｍ-1：２９２０、２８４９、１４６
３、１２５０、１０８１、９６８、８２８1 Ｈ−ＮＭＲ（９０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3 ） δ：０．９
０（１２Ｈ）、１．２７（４６Ｈ）、３．３６（９
Ｈ）、３．４２（４Ｈ）、４．１５（８Ｈ）、５．２０
（１Ｈ）
【００４３】実施例４ 実施例１で得られた活性成分を用いてマウス混合リンパ
球反応（ＭＬＲ）を行い本発明の化合物の免疫抑制活性
を調べた。 脾細胞浮遊液の調製：C57BL/6 マウスおよびBALB/Cマウ
スから脾臓を摘出し、約５ｍｌのハンクス溶液（ＧＩＢ
ＣＯ、ＨＢＳＳ）に浸した後、脾臓よりスライドグラス
で脾細胞を押し出し、均一な細胞浮遊液を得た。この細
胞浮遊液をナイロンメッシュでろ過後、遠心分離し赤血
球を１７ｍＭトリス−１４４ｍＭ塩化アンモニウム緩衝
液（ｐＨ７．２）を用いて除去した。脾細胞をハンクス
溶液で洗浄した後、細胞数を調整し用いた。
球反応（ＭＬＲ）を行い本発明の化合物の免疫抑制活性
を調べた。 脾細胞浮遊液の調製：C57BL/6 マウスおよびBALB/Cマウ
スから脾臓を摘出し、約５ｍｌのハンクス溶液（ＧＩＢ
ＣＯ、ＨＢＳＳ）に浸した後、脾臓よりスライドグラス
で脾細胞を押し出し、均一な細胞浮遊液を得た。この細
胞浮遊液をナイロンメッシュでろ過後、遠心分離し赤血
球を１７ｍＭトリス−１４４ｍＭ塩化アンモニウム緩衝
液（ｐＨ７．２）を用いて除去した。脾細胞をハンクス
溶液で洗浄した後、細胞数を調整し用いた。
【００４４】刺激細胞の調製：BALB/Cの脾細胞を５ｘ１
０7 ／ｍｌになるように１０％ＦＣＳ添加ＲＰＭＩ１６
４０（ＧＩＢＣＯ）に浮遊させ、５００μｇ／ｍｌの濃
度のマイトマイシンＣ（和光純薬製）１００μｌを加え
た後３７℃、３０分間放置した。ハンクス溶液で３回遠
心分離による洗浄を行い、細胞数を６ｘ１０6 ／ｍｌの
濃度となるように１０％ＦＣＳ添加ＲＰＭＩ１６４０を
用いて調製し刺激細胞として用いた。
０7 ／ｍｌになるように１０％ＦＣＳ添加ＲＰＭＩ１６
４０（ＧＩＢＣＯ）に浮遊させ、５００μｇ／ｍｌの濃
度のマイトマイシンＣ（和光純薬製）１００μｌを加え
た後３７℃、３０分間放置した。ハンクス溶液で３回遠
心分離による洗浄を行い、細胞数を６ｘ１０6 ／ｍｌの
濃度となるように１０％ＦＣＳ添加ＲＰＭＩ１６４０を
用いて調製し刺激細胞として用いた。
【００４５】応答細胞の調製：C57BL/6 の脾細胞を６ｘ
１０6 ／ｍｌの濃度となるように１０％ＦＣＳ添加ＲＰ
ＭＩ１６４０を用いて調製し応答細胞として用いた。
１０6 ／ｍｌの濃度となるように１０％ＦＣＳ添加ＲＰ
ＭＩ１６４０を用いて調製し応答細胞として用いた。
【００４６】検体の調製：検体はｎ−プロパノールに溶
解し、ｎ−プロパノール濃度が最終０．３％となるよう
に調製した。
解し、ｎ−プロパノール濃度が最終０．３％となるよう
に調製した。
【００４７】混合リンパ球反応（ＭＬＲ）：平底９６穴
マイクロプレートに上述の２種類の細胞浮遊液各々７５
μｌずつを添加し、さらに検体５０μｌを各ウエルに入
れた。各検体につき３ウェルずつアッセイを行った。こ
のプレートを３７℃、５％炭酸ガス−９５％空気に調節
された炭酸ガスインキュベーター中で４日間培養を行っ
た。培養終了４時間前に［ 3Ｈ］−チミジン（RESEARCH
PRODUCTS ）添加ハンクス液（１２．５μＣｉ／ｍｌ）
４０μｌを各ウェルに加え、炭酸ガスインキュベーター
中で４時間培養した。培養終了後セルハーベスターで細
胞をガラスろ紙上に回収し、［ 3Ｈ］−チミジン取り込
み量を液体シンチレーションカウンターで測定した。検
体無添加群に対するチミジンの取り込み量の抑制率を求
めた。比較検体としてシクロスポリンを用いた。
マイクロプレートに上述の２種類の細胞浮遊液各々７５
μｌずつを添加し、さらに検体５０μｌを各ウエルに入
れた。各検体につき３ウェルずつアッセイを行った。こ
のプレートを３７℃、５％炭酸ガス−９５％空気に調節
された炭酸ガスインキュベーター中で４日間培養を行っ
た。培養終了４時間前に［ 3Ｈ］−チミジン（RESEARCH
PRODUCTS ）添加ハンクス液（１２．５μＣｉ／ｍｌ）
４０μｌを各ウェルに加え、炭酸ガスインキュベーター
中で４時間培養した。培養終了後セルハーベスターで細
胞をガラスろ紙上に回収し、［ 3Ｈ］−チミジン取り込
み量を液体シンチレーションカウンターで測定した。検
体無添加群に対するチミジンの取り込み量の抑制率を求
めた。比較検体としてシクロスポリンを用いた。
【００４８】図３に１，２−ジイソペンタデカノイル−
グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジイ
ソペンタデカノイル−グリセロ−３−ホスホコリン、
１，２−ジイソペンタデシル−グリセロ−３−ホスホエ
タノールアミン、１，２−ジイソペンタデシル−グリセ
ロ−３−ホスホコリンおよびシクロスポリンをマウス混
合リンパ球反応開始と同時に添加した場合のリンパ球の
［ 3Ｈ］−チミジンの取り込み抑制率を示した。以後、
１，２−ジイソペンタデカノイル−グリセロ−３−ホス
ホエタノールアミンをＰＴ−３と、１，２−ジイソペン
タデカノイル−グリセロ−３−ホスホコリンをＤＮＣ
と、１，２−ジイソペンタデシル−グリセロ−３−ホス
ホエタノールアミンをＤＣＥと、１，２−ジイソペンタ
デシル−グリセロ−３−ホスホコリンをＤＣＣとする。
ＰＴ−３、ＤＮＣ、ＤＣＥおよびＤＣＣはＭＬＲ開始
と同時にアッセイ系に添加した場合、ほとんど反応リン
パ球の［ 3Ｈ］−チミジンの取り込みを抑制しなかっ
た。一方、シクロスポリンは１０ｎＭで明らかに反応リ
ンパ球の［ 3Ｈ］−チミジンの取り込みを抑制した。
グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジイ
ソペンタデカノイル−グリセロ−３−ホスホコリン、
１，２−ジイソペンタデシル−グリセロ−３−ホスホエ
タノールアミン、１，２−ジイソペンタデシル−グリセ
ロ−３−ホスホコリンおよびシクロスポリンをマウス混
合リンパ球反応開始と同時に添加した場合のリンパ球の
［ 3Ｈ］−チミジンの取り込み抑制率を示した。以後、
１，２−ジイソペンタデカノイル−グリセロ−３−ホス
ホエタノールアミンをＰＴ−３と、１，２−ジイソペン
タデカノイル−グリセロ−３−ホスホコリンをＤＮＣ
と、１，２−ジイソペンタデシル−グリセロ−３−ホス
ホエタノールアミンをＤＣＥと、１，２−ジイソペンタ
デシル−グリセロ−３−ホスホコリンをＤＣＣとする。
ＰＴ−３、ＤＮＣ、ＤＣＥおよびＤＣＣはＭＬＲ開始
と同時にアッセイ系に添加した場合、ほとんど反応リン
パ球の［ 3Ｈ］−チミジンの取り込みを抑制しなかっ
た。一方、シクロスポリンは１０ｎＭで明らかに反応リ
ンパ球の［ 3Ｈ］−チミジンの取り込みを抑制した。
【００４９】実施例５ 検体の添加を混合リンパ球反応開始後４８時間目に行う
以外、実施例４と同様にして行った。
以外、実施例４と同様にして行った。
【００５０】図４に混合リンパ球反応の結果を示した。
ＰＴ−３、ＤＮＣ、ＤＣＥおよびＤＣＣはＭＬＲを開始
してから４８時間後に添加した場合、顕著な反応リンパ
球の［ 3Ｈ］−チミジンの取り込み抑制効果がみられ
た。これらのうち、ＰＴ−３が最も抑制活性が強く、シ
クロスポリンに比べて１０〜１００倍の活性を示した。
ＤＮＣ、ＤＣＥおよびＤＣＣはシクロスポリンの約２−
１０倍の活性を示した。
ＰＴ−３、ＤＮＣ、ＤＣＥおよびＤＣＣはＭＬＲを開始
してから４８時間後に添加した場合、顕著な反応リンパ
球の［ 3Ｈ］−チミジンの取り込み抑制効果がみられ
た。これらのうち、ＰＴ−３が最も抑制活性が強く、シ
クロスポリンに比べて１０〜１００倍の活性を示した。
ＤＮＣ、ＤＣＥおよびＤＣＣはシクロスポリンの約２−
１０倍の活性を示した。
【００５１】実施例６ ＰＴ−３ ５ｍｇ ブドウ糖 １００ｍｇ 生理食塩水 １０ｍｌ 上記の混合液をメンブレンフィルターでろ過後再び除菌
ろ過を行い、そのろ過液を無菌的にバイアルに分注し、
窒素ガスを充填した後、密封して静脈内注射薬とした。
ろ過を行い、そのろ過液を無菌的にバイアルに分注し、
窒素ガスを充填した後、密封して静脈内注射薬とした。
【００５２】実施例７ ＰＴ−３ ５０ｇ 乳糖 ９３５ｇ ステアリン酸マグネシウム １５ｇ 上記成分をそれぞれ秤量した後、均一に混合し、混合粉
末をハードゼラチンカプセルに２００ｍｇずつ充填しカ
プセル剤を調製した。
末をハードゼラチンカプセルに２００ｍｇずつ充填しカ
プセル剤を調製した。
【００５３】
【発明の効果】本発明の免疫抑制剤は優れた免疫抑制効
果を有し、臓器移植、免疫異常疾患の治療薬として有効
に用いることができる。また、本発明の製造方法による
と、上記の免疫抑制剤を容易に製造することができる。
果を有し、臓器移植、免疫異常疾患の治療薬として有効
に用いることができる。また、本発明の製造方法による
と、上記の免疫抑制剤を容易に製造することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の有効成分の精製標品の 1Ｈ−ＮＭＲ分
析結果である。
析結果である。
【図２】本発明の有効成分の精製標品の赤外吸収スペク
トル分析結果である。
トル分析結果である。
【図３】本発明の有効成分を混合リンパ球反応開始と同
時に添加したときの効果を示す説明図である。
時に添加したときの効果を示す説明図である。
【図４】本発明の有効成分を混合リンパ球反応開始４８
後に添加したときの効果を示す説明図である。
後に添加したときの効果を示す説明図である。
Claims (3)
- 【請求項１】 下記の一般式 【化１】 で表される化合物を有効成分とする免疫抑制剤。
- 【請求項２】 サーマス（Thermus ）属の菌体を培養す
ることを特徴とする請求項１記載の免疫抑制剤の製造方
法。 - 【請求項３】 バチルス・ステアロサーモフィルス（Ba
cillus stearothermophilus ）を培養することを特徴と
する請求項１記載の免疫抑制剤の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5042226A JPH06228004A (ja) | 1993-02-05 | 1993-02-05 | 免疫抑制剤およびその製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5042226A JPH06228004A (ja) | 1993-02-05 | 1993-02-05 | 免疫抑制剤およびその製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06228004A true JPH06228004A (ja) | 1994-08-16 |
Family
ID=12630124
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5042226A Pending JPH06228004A (ja) | 1993-02-05 | 1993-02-05 | 免疫抑制剤およびその製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06228004A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002523513A (ja) * | 1998-09-01 | 2002-07-30 | アンスティテュ ナシオナル ド ラ サンテ エ ド ラ ルシェルシュ メディカル | ホスホハロヒドリン、これらの製造方法、及び使用 |
-
1993
- 1993-02-05 JP JP5042226A patent/JPH06228004A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002523513A (ja) * | 1998-09-01 | 2002-07-30 | アンスティテュ ナシオナル ド ラ サンテ エ ド ラ ルシェルシュ メディカル | ホスホハロヒドリン、これらの製造方法、及び使用 |
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