JPH06239734A - リポソームの調製法及びリポソーム製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 脂質をエタノールあるいはエタノール水溶液
に溶解し、該溶液を水性溶液に添加するか、あるいは該
溶液に水性溶液を添加してリポソームを調製することを
特徴とする調製方法および該方法によって調製してなる
リポソーム製剤。 【効果】 粒子径の小さい均一なリポソームを簡易かつ
大量に調製できることを可能にする。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、医薬品、医薬部外品、
化粧品等に適用されるリポソームの製造方法及びリポソ
ーム製剤に関する。さらに詳しくは、脂質をエタノール
に溶解し、該溶液を水性溶液に添加するか、あるいは該
溶液に水性溶液を添加してリポソームを調製することに
より簡易かつ大量に調製することを可能ならしめる調製
方法及び該方法により調製したリポソーム製剤に関す
る。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】リポソ
ームは脂質２分子膜からなる閉鎖小胞体である。天然の
生体膜は、脂質の２分子膜構造をとっているといわれて
おり、このリポソームは生体膜類似の構造をとっている
ことから細胞膜との高い親和性を有し、ドラッグキャリ
ヤーとしての高いポテンシャルが期待されている。近
年、ＤＤＳを目指したリポソーム製剤の開発は医薬品分
野だけでなく化粧品分野においてもますます盛んであ
る。

【０００３】しかしながら、商品としての大量生産を考
えた場合に従来のリポソームの調製方法は非常に困難な
ものばかりであり、実用的ではない。例えば、以下の方
法が代表的なものとしてあげられる。

【０００４】（１）脂質を適当な有機溶媒（たとえば、
クロロホルム、エーテル等）に溶解させ、減圧下にこれ
らの溶媒を留去し、一旦脂質薄膜を形成させた後、該脂
質薄膜を機械的撹拌手段により水に水和（あるいは膨
潤）させる方法。

【０００５】（２）脂質をエーテルあるいはエタノール
等の有機溶媒に溶解させ、この溶液を高温に暖めた水中
にシリンジあるいはノズル等より、加圧下、一定速度で
注入し、注入とともに有機溶媒が留去あるいは希釈され
ることにより脂質が二重層を形成し、リポソームが調製
される方法。

【０００６】（３）脂質をコール酸あるいはデオキシコ
ール酸などの界面活性剤とともに水溶液中で混合ミセル
を形成させ、該ミセル溶液を透析あるいはゲル濾過等の
操作によりコール酸あるいはデオキシコール酸などの界
面活性剤を除去し、リポソームを調製する方法。

【０００７】（４）脂質を溶解した有機溶媒を水相に加
え、超音波処理し、一旦Ｗ／Ｏ型エマルションを形成
し、ついで有機溶媒を除去することによりゲル化させ、
このゲルを機械的撹拌により転相させリポソームを調製
する方法。

【０００８】上記調製法のうち（１）の調製法ではクロ
ロホルム、エーテル等の揮発性の有機溶媒を用いてお
り、工業的にはこれらの溶媒を用いることは好ましくな
い。また減圧下にこれらの溶媒を留去することも簡便性
を考慮すれば好ましくない。（２）の調製法ではシリン
ジ、ノズル等によって注入するため製造速度が非常に遅
くなる。（３）の調製法では透析、ゲル濾過等の操作が
あるため簡便ではない。（４）の調製法でも有機溶媒の
除去という操作があり簡便ではない。

【０００９】

【課題を解決するための手段】そこで本発明者は、これ
らの問題点を解決すべく鋭意検討を加え、その結果、脂
質をエタノールに溶解し、該溶液を水に添加するか、あ
るいは該溶液に水を添加するという極めて簡便な方法で
リポソームが調製し得ることを新規に見いだし、本発明
を完成させたのである。

【００１０】上記の本発明にあっては、特に超音波照射
器、高圧乳化機あるいは特殊なノズル等の設備上、操作
技術上の何等の工夫も必要とせず、単に撹拌するだけで
粒子径の小さい均一なリポソームが調製し得る点に特徴
を有するものである。

【００１１】以下、本発明の構成の詳細について説明す
る。本発明で用いられる脂質は、例えばホスファチジル
コリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチ
ジルセリン、ホスファチジルイノシトール、リゾホスフ
ァチジルコリン、スフィンゴミエリン、卵黄レシチン、
大豆レシチン、水添卵黄レシチン、水添大豆レシチン等
に代表されるリン脂質の他、糖脂質、ジアルキル、トリ
アルキル型合成界面活性剤等の一種又は二種以上の混合
物が主体となる。なお、これらに膜安定化剤としてコレ
ステロール、コレスタノール等のステロール類を荷電物
質としてジセチルホスフェート、ホスファチジン酸、ガ
ングリオシド、ステアリルアミン等を、さらに酸化防止
剤としてα−トコフェロール等を加えても良い。

【００１２】本発明で用いられるエタノールは一般に医
薬品、化粧品原料として用いられるもので、エタノール
水溶液のエタノール濃度は５０〜１００重量％が好まし
い。エタノール濃度が５０重量％以下になると脂質が溶
解しなくなるので好ましくない。また、エタノールある
いはエタノール水溶液の使用量は脂質に対し、約１〜１
００重量倍が好ましい。使用量が１重量倍以下になると
脂質が溶解しなくなるので好ましくなく、１００重量倍
を超えてもその増加分に見合った溶解性の向上は望めな
いものである。油溶性成分あるいは油溶性薬剤を添加す
る場合には脂質とともにこのエタノールあるいはエタノ
ール水溶液に溶解すればよい。

【００１３】該溶液に添加あるいは該溶液を添加する水
性溶液としては水、生理食塩水、緩衝溶液、糖液、その
他水溶性成分あるいは水溶性薬剤の水溶液が使用され
る。

【００１４】調製方法としては、例えば次のように行
う。まずエタノールあるいはエタノール水溶液に脂質、
膜安定化剤、油溶性成分等を加え、加温、撹拌して均一
に溶解させる。このときの温度は５０〜８０℃が好まし
い。これは脂質の相転移温度以上の温度であり、脂質が
溶解しやすい。これとは別に水溶性成分等を溶解した水
性溶液を５０〜８０℃に加温しておき、先のエタノール
溶液に添加するかあるいはエタノール溶液を水性溶液に
添加し、撹拌する。このようにして粒子径の小さい均一
なリポソームが調製され得る。

【００１５】本発明のリポソームには、例えば一般的に
汎用される製剤構成成分として水溶性高分子、多価アル
コール、防腐剤、キレート剤等が添加され得る。

【００１６】

【実施例】以下、実施例について説明する。尚、実施例
に示すｗｔ％は、重量％を意味する。

【００１７】実施例１ エタノール１０ｇを５０℃に加温し、水添精製大豆レシ
チン１．０ｇ、コレステロール０．５ｇ、α−トコフェ
ロール０．１ｇを加えて撹拌し、均一に混合溶解した。
これとは別に、水８８．４ｇを６０℃に加熱しておき、
これを先のエタノール溶液に添加、撹拌した。乳白色の
リポソーム溶液が得られ、平均粒子径は１２０ｎｍであ
った。また電子顕微鏡観察（ＴＥＭ）ではリポソームに
特徴的なラメラ構造が確認でき、また均一な粒子を形成
していることが確認できた。

【００１８】実施例２ 実施例１において、水の代わりにカルボキシフルオレセ
イン（ＣＦ）１００ｍＭ水溶液を用い、調製した。この
リポソーム溶液をゲル濾過し、外相のＣＦを取り除いた
後、ＴｒｉｔｏｎＸ−１００水溶液を添加前後の蛍光強
度を測定することにより、内相にＣＦがトラップされて
いることが確認できた。尚、保持効率は８．５％であっ
た。

【００１９】以上、実施例１、２より本発明の調製法に
よってリポソームが調製可能であることは明かである。

【００２０】実施例３ ３０％エタノール水溶液２０ｇを６５℃に加温し、水添
精製卵黄レシチン２．５ｇ、コレステロール１．０ｇ、
ジセチルホスフェート０．５ｇを加えて撹拌し、均一に
混合溶解した。これとは別に、アスコルビン酸リン酸マ
グネシウム３．０ｇ、水７３ｇを６０℃に加熱、均一溶
解した。この水溶液に先のエタノール溶液を添加、撹拌
し、乳白色のリポソーム溶液を得た。平均粒径１００ｎ
ｍ、保持効率１９．５％であった。ＴＥＭにて均一なリ
ポソームを確認した。

【００２１】実施例４ ２０％エタノール水溶液２０ｋｇを６０℃に加温し、水
添精製大豆レシチン１．５ｋｇ、コレステロール０．５
ｋｇ、α−トコフェロール０．１ｋｇを加えて撹拌し、
均一に混合溶解した。これとは別に、水７７．９ｋｇを
６０℃に加熱しておき、これを先のエタノール溶液に添
加、撹拌した。乳白色のリポソーム溶液が得られ、平均
粒径１２０ｎｍ、ＴＥＭにて均一なリポソームを確認し
た。

【００２２】実施例５ 実施例４における水にグルコース０．１ｋｇを溶解し、
調製した。ゲル濾過し、保持効率を求めたところ、１
２．６％であった。

【００２３】

【発明の効果】以上述べた通り、本発明によれば、これ
までの方法と異なり非常に簡便な方法で、また非常に大
量にリポソームを調製し得るとともに、粒子径の小さい
均一なリポソームを調製し得ることが明かである。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 脂質をエタノールあるいはエタノール水
   溶液に溶解し、該溶液を水性溶液に添加するか、あるい
   は該溶液に水性溶液を添加してリポソームを調製するこ
   とを特徴とするリポソームの調製方法。
2. 【請求項２】 請求項１記載の方法によって調製してな
   るリポソーム製剤。