JPH06306035A

JPH06306035A - アフィディコラン誘導体

Info

Publication number: JPH06306035A
Application number: JP5119147A
Authority: JP
Inventors: Tokiyuki Hiramitsu; 時幸平光; Isanori Suzuki; 功徳鈴木; Atsushi Mori; 敦史毛利
Original assignee: Nippon Mektron KK
Current assignee: Nippon Mektron KK
Priority date: 1993-04-22
Filing date: 1993-04-22
Publication date: 1994-11-01

Abstract

(57)【要約】（修正有）【構成】 3α,18-ジヒドロキシ-16β,17-エポキシアフ
ィディコランに2-クロロエタノールを反応させて、16β
-(2-クロロエトキシ)誘導体とし、これに2,2-ジメトキ
シプロパンを反応させた後、フタルイミドカリウムおよ
びヒドラジン・１水和物を順次反応させて16β-(2-アミ
ノエトキシ)基とし、安息香酸、2-メルカプト安息香
酸、ニコチン酸、トランス-けい皮酸などを反応させた
後保護基を脱離させ、一般式（ここで、Ｒはアリール基、ピリジル基またはアリール
置換アルケニル基である）で表わされる16β-[2-(アシ
ルアミノ)エトキシ]-3α,17,18-トリヒドロキシアフィ
ディコランを得る。【効果】抗腫瘍作用を有しており、その作用は化学構
造にも依存するが、一般には濃度0.78〜3.13μg/mlの範
囲内で、試験管内でのマウス腫瘍細胞ＹＡＣ−１の増殖
を完全に抑制する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、アフィディコラン誘導
体に関する。更に詳しくは、抗腫瘍作用を有する新規な
アフィディコラン誘導体に関する。

【０００２】

【従来の技術】代表的なアフィディコラン誘導体である
アフィディコリンは、かびの一種である Verticillium
lecanii より得られる抗ウィルス剤として発見され、テ
トラサイクリックジテルペンテトラオールの構造を有す
る水難溶性物質であり、真核細胞由来DNAポリメラーゼ
αおよびδ型に高い特異的阻害作用を示すことから、こ
の酵素の型の判別に用いられており、特殊なウィルスを
除き、原核細胞由来のDNAポリメラーゼには無効であ
り、主としてDNAの複製、修復機序の解析などに利用さ
れている。また、抗腫瘍作用、抗ウィルス作用、植物種
子生長抑制作用を有することも知られており、こうした
用途への利用も図られている。

【０００３】また、近年では、アフィディコリンの抗腫
瘍活性に注目し、種々の誘導体も合成されている(特開
昭59-88438号公報、同61-83138号公報、同62-155232号
公報、同62-155239号公報、Nucleic Acid Research 第1
7巻第6339〜6348頁、1989年、J．Chem．Soc.，Perkin T
rans．Ｉ第41〜46頁、1992年など)。特に、プロドラッ
グとして合成された水溶性のエステル誘導体であるアフ
ィディコリン-17-グリシネートについては、臨床試験が
進められており、血中でアフィディコリンを生成して、
抗腫瘍活性を示すことが期待され、最近では最適な臨床
試験方法についても提案されている(J．of Pharm．Sc
i．第78巻第5号第399〜401頁、1989年およびJ．of the
National Cancer Institute 第83巻、第16号、1991年8
月21日)。

【０００４】ところで、アフィディコリンのDNAポリメ
ラーゼα阻害作用に関する構造活性を論じた報告があ
り、アフィディコリンに含まれる４個の水酸基の必要性
ならびに立体配置的意義についても種々論ぜられてお
り、16β-位の水酸基はDNAポリメラーゼα阻害作用発現
に対する寄与は小さいと推測されている(Chem．Pharm．
Bull．第35巻第4号第1641〜1644頁、1987年)。

【０００５】しかるに、16β-位水酸基のみを他の官能
基で置換したアフィディコラン誘導体は殆んど報告され
ておらず、水酸基の保護を目的として導入された16β-
メトキシメトキシ誘導体が知られているだけであり、16
β-位置換基の役割については明確ではない。このよう
に、16β-位に水酸基以外の官能基を有するアフィディ
コラン誘導体ならびにその生物活性に関しては、未開発
の分野ということができる。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、16β
-位にアミド結合を有するアフィディコラン誘導体を提
供することにある。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明により、次の一般
式で表わされる16β-[2-(アシルアミノ)エトキシ]-3α,
17,18-トリヒドロキシアフィディコランが提供される。

【化２】 (ここで、Rはアリール基、ピリジル基またはアリール置
換アルケニル基である)

【０００８】かかる新規化合物は、3α,18-ジヒドロキ
シ-16β,17-エポキシアフィディコランを出発原料とし
て、次のような一連の工程を経て製造される。

【０００９】(1)3α,18-ジヒドロキシ-16β,17-エポキ
シアフィディコランに2-ハロゲノエタノールを反応させ
て、16β-(2-ハロゲノエトキシ)-3α,17,18-トリヒドロ
キシアフィディコラン

【化３】 (X：ハロゲン原子)を得るこれら両者間の反応は、溶媒を兼ねて2-クロロエタノー
ル、2-ブロモエタノールなどを大過剰に用い、触媒量の
酸性物質の存在下で約0〜100℃、好ましくは約10〜30℃
の反応温度で行われる。この際、テトラヒドロフラン、
ジオキサンなどの反応条件下では前者のエポキシ基と反
応しない溶媒で希釈させて反応させることもできる。触
媒として用いられる酸性物質としては、例えばp-トルエ
ンスルホン酸、トリフルオロ酢酸などの有機酸、塩酸、
硫酸などの無機酸、テトラシアノエチレンなどのπ酸な
どが挙げられる。

【００１０】(2)16β-(2-ハロゲノエトキシ)-3α,17,18
-トリヒドロキシアフィディコランに2,2-ジメトキシプ
ロパンを反応させ、16β-(2-ハロゲノエトキシ)-17-ヒ
ドロキシ-3α,18-イソプロピリデンジオキシアフィディ
コラン

【化４】 (ここで、R¹＝H，R²＝ハロゲン)を得るこれら両者間の反応は、原料アフィディコラン化合物を
アセトンなどの反応を妨害しない溶媒中にけん濁または
溶解させ、そこに原料化合物に対して約2〜100倍モル量
の2,2-ジメトキシプロパンおよび触媒量の前記(1)で用
いられたような酸性物質触媒を添加し、約-5〜40℃、好
ましくは約0〜20℃で反応させることにより行われる。

【００１１】(3)16β-(2-ハロゲノエトキシ)-17-ヒドロ
キシ-3α,18-イソプロピリデンジオキシアフィディコラ
ンに、3,4-ジヒドロ-2H-ピラン、フタルイミドカリウム
を順次反応させて、3α,18-イソプロピリデンジオキシ-
16β-[2-(フタルイミド)エトキシ]-17-(テトラヒドロピ
ラン-2-イルオキシ)アフィディコラン

【化５】 (ここで、R¹＝テトラヒドロピラン-2-イル基，R²＝フタ
ルイミド基)を得た後、ヒドラジン・１水和物と反応さ
せて、16β-(2-アミノエトキシ)-3α,18-イソプロピリ
デンジオキシ-17-(テトラヒドロピラン-2-イルオキシ)
アフィディコラン

【化６】 (ここで、R¹＝テトラヒドロピラン-2-イル基，R²＝NH₂)
を得る

【００１２】3,4-ジヒドロ-2H-ピランとの反応は、原料
アフィディコラン化合物をジクロロメタン、クロロホル
ムなどの反応に不活性な溶媒中に溶解し、そこに原料化
合物に対して約2〜10倍モル量の3,4-ジヒドロ-2H-ピラ
ンおよび触媒量の前記(1)で用いられたような酸性物質
触媒を添加し、約-5〜40℃、好ましくは約0〜20℃で反
応させることにより行われる。この反応生成物とフタル
イミドカリウムとの反応は、N,N-ジメチルホルムアミ
ド、ジメチルスルホキシドなどの非プロトン性極性溶媒
中で、約1〜10倍モル量のフタルイミドカリウムと約20
〜140℃、好ましくは約70〜100℃で反応させることによ
り行われる。この後のヒドラジン・１水和物との反応
は、メタノール、エタノールなどの有機溶媒中に得られ
たアフィディコラン化合物を溶解またはけん濁させ、そ
こに約1〜10倍モル量のヒドラジン・１水和物を添加
し、約20〜100℃、好ましくは約30〜50℃で反応させる
ことにより行われる。

【００１３】(4)16β-(2-アミノエトキシ)-3α,18-イソ
プロピリデンジオキシ-17-(テトラヒドロピラン-2-イル
オキシ)アフィディコランに、一般式RCOY(R：アリール
基、ピリジル基またはアリール置換アルケニル基、Y：O
H基またはハロゲン基)で表わされるカルボン酸(ハライ
ド)を反応させて、16β-[2-(アシルアミノ)エトキシ]-3
α,18-イソプロピリデンジオキシ-17-(テトラヒドロピ
ラン-2-イルオキシ)アフィディコラン

【化７】 (ここで、R¹＝テトラヒドロピラン-2-イル基，R²＝NHCO
R)を得、これの保護基を脱離して、目的物

【化８】を得る

【００１４】カルボン酸(ハライド)としては、安息香
酸、2-メルカプト安息香酸、2-メチル安息香酸、3-メト
キシ安息香酸、3-クロロ安息香酸、3-シアノ安息香酸、
4-ニトロ安息香酸、4-フルオロ安息香酸、ニコチン酸、
イソニコチン酸、ピコリン酸、トランス-けい皮酸また
はこれらの酸ハライドなどが用いられる。従って、これ
らを反応させて置換される16β-位のR基は、非置換また
は置換基を有し得るアリール基、ピリジル基、アリール
置換アルケニル基である。

【００１５】カルボン酸が用いられた場合には、アミノ
基との間の脱水縮合反応の脱水剤として、N,N´-ジシク
ロヘキシルカルボジイミドがアフィディコラン化合物に
対して約1〜5倍モル量用いられ、ジメチルホルムアミド
などの溶媒中で、アフィディコラン化合物に対して約1
〜5倍モル量のカルボン酸との縮合反応が約10〜40℃の
反応温度で行われる。また、カルボン酸ハライドが用い
られた場合には、アミノ基との間の脱ハロゲン化水素縮
合反応は、ピリジンが溶媒を兼ねて用いられるなどの塩
基性条件下で行われ、アフィディコラン化合物に対して
約2〜10倍モル量のカルボン酸ハライドとの縮合反応が
約0〜80℃、好ましくは約20〜50℃の反応温度で行われ
る。

【００１６】その後、メタノール、エタノールなどの有
機溶媒またはこれらの含水有機溶媒中で、前記(1)で用
いられたような酸性物質触媒の存在下に、約0〜40℃で
撹拌することにより、保護基である3α,18-イソプロピ
リデン基および17-(テトラヒドロピラン-2-イル)基の脱
離が行われる。

【００１７】なお、17-(テトラヒドロピラン-2-イル)基
を有する上記４種類の中間体は、２種のジアステレオマ
ーの混合物であるが、薄層クロマトグラフィーでは１点
を示しており、いずれも各工程での分離は行われずに次
工程の原料アフィディコラン化合物として用いられた。

【００１８】

【発明の効果】本発明により、16β-位にアミド結合を
有する新規なアフィディコリン誘導体が提供される。ま
た、その合成中間体として有用な16β-(2-ハロゲノエト
キシ)-17-ヒドロキシ-3α,18-イソプロピリデンジオキ
シアフィディコランが提供される。

【００１９】本発明に係る16β-[2-(アシルアミノ)エト
キシ]アフィディコラン誘導体は、抗腫瘍作用を有して
おり、その作用は化学構造にも依存するが、一般には濃
度0.78〜3.13μg/mlの範囲内で、試験管内でのマウス腫
瘍細胞ＹＡＣ−１の増殖を完全に抑制する。

【００２０】

【実施例】次に、実施例について本発明を説明する。

【００２１】参考例 3α,18-ジヒドロキシ-16β,17-エポキシアフィディコラ
ン650mgを2-クロロエタノール5mlに溶解させた溶液中
に、p-トルエンスルホン酸１水和物3mgを加え、室温下
で１時間撹拌した。反応混合物を氷水100ml中に注入
し、析出物をロ取、減圧下で乾燥して730mgの粉末を得
た。この粉末を、フラッシュクロマトグラフィー(粒径1
5〜40μmのメルク社製シリカゲル60 40g、溶離液：メタ
ノール/クロロホルム＝1/49)で精製後、ジエチルエーテ
ル-シクロヘキサン混合溶媒で再結晶し、16β-(2-クロ
ロエトキシ)-3α,17,18-トリヒドロキシアフィディコラ
ン196mgを無色の針状晶として得た。融点：136〜140℃¹ H NMR(pyridine-d₅、TMS)(270MHz)δ：0.80(3H,s)，1.
03(3H,s)，2.49(1H,dd J=3.6,13.2Hz)，2.59(1H,t J=6.
9Hz)，2.85(1H,dd J=3.5,12.2Hz)，3.61〜3.85(6H,m)，
3.91(2H,t J=5.6Hz)，3.93(1H,b)¹³ C NMR(pyridine-d₅、TMS)(68MHz)δ：80.0，76.4，7
1.9，64.1，62.5，49.3，45.1，40.98，40.55，40.1，3
9.8，34.1，32.9，31.7，27.4，27.24，27.15，25.31，
25.26，23.5，18.1，15.4

【００２２】実施例１参考例で得られた16β-(2-クロロエトキシ)-3α,17,18-
トリヒドロキシアフィディコラン3.71gを、アセトン18m
l中にけん濁して氷冷した。このけん濁液に、2,2-ジメ
トキシプロパン4.5mlおよび触媒量のp-トルエンスルホ
ン酸・１水和物を加え、氷冷下に30分間撹拌した。反応
混合物を、2%炭酸水素ナトリウム水溶液200ml中に注入
した後、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層を水洗し
た後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮乾固した。残
渣を、カラムクロマトグラフィー(ワコーゲルC-300 500
g、溶離液：クロロホルム)で精製し、16β-(2-クロロエ
トキシ)-17-ヒドロキシ-3α,18-イソプロピリデンジオ
キシアフィディコラン2.37gを無色の粉末として得た。¹ H NMR(CDCl₃、TMS)(270MHz)δ：0.73(3H,s)，0.99(3H,
s)，1.41(6H,s)，1.62(2H,s)，3.21〜3.67(9H,m)¹³ C NMR(CDCl₃、TMS)(68MHz)δ：15.5，17.4，19.1，2
2.6，24.3，24.6，25.0，26.7，26.9，30.0，31.2，32.
7，33.4，35.2，39.4，39.6，40.4，44.4，48.8，61.
3，62.5，68.8，73.5，79.9，98.0

【００２３】実施例２実施例１で得られた16β-(2-クロロエトキシ)-17-ヒド
ロキシ-3α,18-イソプロピリデンジオキシアフィディコ
ラン2.37gを、クロロホルム12ml中に溶解した。この溶
液に、3,4-ジヒドロ-2H-ピラン1.5mlおよび触媒量のp-
トルエンスルホン酸・１水和物を加え、室温下で10分間
撹拌した。反応混合物を、氷冷した2%炭酸水素ナトリウ
ム水溶液150ml中に注入した後、クロロホルムで抽出し
た。クロロホルム層を水洗した後、無水硫酸ナトリウム
で乾燥し、濃縮乾固した。残渣を、カラムクロマトグラ
フィー(粒径40〜63μmのメルク社製シリカゲル60 400
g、溶離液：クロロホルム)に付し、薄層クロマトグラフ
ィー(メルク社製シリカゲル60 Art.5715、展開溶媒：ベ
ンゼン/酢酸エチル＝2/1)でRf値0.82を示す画分を集
め、16β-(2-クロロエトキシ)-3α,18-イソプロピリデ
ンジオキシ-17-(テトラヒドロピラン-2-イルオキシ)ア
フィディコラン1.49gを無色のアメ状物質として得た。

【００２４】この無色アメ状物質1.49gを、N,N-ジメチ
ルホルムアミド15ml中に溶解した後、フタルイミドカリ
ウム3.69gを加え、90〜100℃で10時間撹拌した。反応混
合物を、氷水150ml中に注入した後、酢酸エチルで抽出
した。酢酸エチル層を水洗した後、無水硫酸ナトリウム
で乾燥し、濃縮乾固した。残渣にクロロホルム30mlを加
え、不溶物をロ去し、ロ液を濃縮乾固して、3α,18-イ
ソプロピリデンジオキシ-16β-[2-(フタルイミド)エト
キシ]-17-(テトラヒドロピラン-2-イルオキシ)アフィデ
ィコラン3.24gを無色のアメ状残渣として得た。この物
質は、薄層クロマトグラフィー(メルク社製シリカゲル6
0 Art.5715、展開溶媒：ベンゼン/酢酸エチル＝2/1)でR
f値0.67を示す。

【００２５】このようにして得られた3α,18-イソプロ
ピリデンジオキシ-16β-[2-(フタルイミド)エトキシ]-1
7-(テトラヒドロピラン-2-イルオキシ)アフィディコラ
ン3.24gを、エタノール35ml中に溶解した後、ヒドラジ
ン・１水和物3.7mlを加え、室温下で2時間撹拌した。反
応混合物をロ過した後、ロ液を濃縮乾固した。残渣に、
水50mlおよびクロロホルム50mlを加えて分液後、クロロ
ホルム層を水洗し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、濃
縮乾固した。残渣をエーテルで処理して、16β-(2-アミ
ノエトキシ)-3α,18-イソプロピリデンジオキシ-17-(テ
トラヒドロピラン-2-イルオキシ)アフィディコラン1.33
gを無色の粉末として得た。この物質は、薄層クロマト
グラフィー(メルク社製シリカゲル60 Art.5715、展開溶
媒：メタノール/クロロホルム＝1/9)でRf値0.14を示
す。

【００２６】実施例３ニコチン酸436mgを、N,N-ジメチルホルムアミド7ml中に
溶解した後、N,N´-ジシクロヘキシルカルボジイミド73
0mgを加え、室温下で3時間撹拌した。析出物をロ去し、
ロ液に実施例２で得られた16β-(2-アミノエトキシ)-3
α,18-イソプロピリデンジオキシ-17-(テトラヒドロピ
ラン-2-イルオキシ)アフィディコラン300mgを加え、室
温下で1時間撹拌した。反応混合物を氷水100ml中に注入
し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層を水洗し、無
水硫酸ナトリウムで乾燥した後、濃縮乾固した。残渣
に、メタノール5mlおよび触媒量のp-トルエンスルホン
酸・１水和物を加え、室温下で13時間撹拌した。反応混
合物を、炭酸水素ナトリウムで中和した後、濃縮乾固し
た。得られた残渣に水および酢酸エチルを加えて分液
後、酢酸エチル層を水洗し、無水硫酸ナトリウムで乾燥
して、濃縮乾固した。残渣をカラムクロマトグラフィー
(粒径40〜63μmのメルク社製シリカゲル60 10g、溶離
液：メタノール/クロロホルム＝7/100)で精製した後、
更にHPLC(イナートシルPREP-ODS、溶離液：メタノール/
水＝7/3)で精製して、3α,17,18-トリヒドロキシ-16β-
[2-(ニコチノイルアミノ)エトキシ]アフィディコラン3
2.4mgを無色の粉末として得た。¹ H NMR(pyridine-d₅、TMS)(270MHz)δ：0.77(3H,s)，0.
99(3H,s)，3.63〜3.93(11H,m)，7.27(1H,dd J=5.0Hz)，
8.50(1H,d J=7.6Hz)，8.63(1H,d J=4.9Hz)，9.66(1H,b)¹³ C NMR(pyridine-d₅、TMS)(68MHz)δ：15.4，18.1，2
3.5，25.3，26.0，27.2，27.4，33.1，34.0，34.3，39.
9，40.0，40.5，41.0，41.7，49.2，59.9，62.5，71.
9，76.3，79.5，131.3，135.4，152.1，166.0

【００２７】実施例４実施例２で得られた16β-(2-アミノエトキシ)-3α,18-
イソプロピリデンジオキシ-17-(テトラヒドロピラン-2-
イルオキシ)アフィディコラン200mgを、ピリジン2ml中
に溶解した後、塩化ベンゾイル326μlを加え、室温下で
10分間撹拌した。反応混合物を氷水20ml中に注入した
後、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層を水洗した
後、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、濃縮乾固した。残
渣を、カラムクロマトグラフィー(粒径40〜63μmのメル
ク社製シリカゲル60 15g、溶離液：メタノール/クロロ
ホルム＝1/100)に付し、薄層クロマトグラフィー(メル
ク社製シリカゲル60 Art.5715、展開溶媒：メタノール/
クロロホルム＝1/9)でRf値0.87を示す画分を集めた後、
濃縮乾固した。得られた残渣に、メタノール4mlおよび
触媒量のp-トルエンスルホン酸・１水和物を加え、室温
下で3時間撹拌した。反応混合物を炭酸水素ナトリウム
で中和した後、濃縮乾固した。残渣に水および酢酸エチ
ルを加えて分液した後、酢酸エチル層を水洗し、無水硫
酸ナトリウムで乾燥して、濃縮乾固した。残渣を、カラ
ムクロマトグラフィー(粒径40〜63μmのメルク社製シリ
カゲル60 10g、溶離液：メタノール/クロロホルム＝1/2
5)で精製した後、メタノールで再結晶し、16β-[2-(ベ
ンゾイルアミノ)エトキシ]-3α,17,18-トリヒドロキシ
アフィディコラン36mgを無色の粉末として得た。¹ H NMR(pyridine-d₅、TMS)(270MHz)δ：0.79(3H,s)，0.
99(3H,s)，3.62〜3.93(10H,m)，7.43〜7.46(3H,m)，8.3
1〜8.34(2H,m)¹³ C NMR(pyridine-d₅、TMS)(68MHz)δ：15.5，18.2，2
3.6，25.6，25.9，27.29，27.34，27.5，31.7，33.3，3
4.2，40.0，40.2，40.7，41.1，41.7，49.3，60.2，62.
9，72.0，76.4，79.5，128.1，128.7，131.3，135.9，1
67.7

【００２８】実施例５チオサリチル酸432mgを、N,N-ジメチルホルムアミド4ml
中に溶解した後、N,N´-ジシクロヘキシルカルボジイミ
ド572mgを加え、室温下で2時間撹拌した。析出物をロ去
し、ロ液に実施例２で得られた16β-(2-アミノエトキ
シ)-3α,18-イソプロピリデンジオキシ-17-(テトラヒド
ロピラン-2-イルオキシ)アフィディコラン200mgを加
え、室温下で4時間撹拌した。反応混合物を氷水40ml中
に注入し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層を水洗
し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、濃縮乾固した。
残渣を、カラムクロマトグラフィー(粒径40〜63μmのメ
ルク社製シリカゲル60 15g、溶離液：メタノール/クロ
ロホルム＝1/100)に付し、薄層クロマトグラフィー(メ
ルク社製シリカゲル60 Art.5715、展開溶媒：メタノー
ル/クロロホルム＝1/9)でRf値0.81を示す画分を集めた
後、濃縮乾固した。得られた残渣に、メタノール4mlお
よび触媒量のp-トルエンスルホン酸・１水和物を加え、
室温下で5時間撹拌した。反応混合物を炭酸水素ナトリ
ウムで中和した後、濃縮乾固した。残渣に水および酢酸
エチルを加えて分液した後、酢酸エチル層を水洗し、無
水硫酸ナトリウムで乾燥して、濃縮乾固した。残渣を、
カラムクロマトグラフィー(粒径40〜63μmのメルク社製
シリカゲル60 10g、溶離液：メタノール/クロロホルム
＝1/20)で精製した後、更にプレパラティブ薄層クロマ
トグラフィー(メルク社製シリカゲル60 Art.13895、展
開溶媒：メタノール/クロロホルム＝1/9)で精製し、3
α,17,18-トリヒドロキシ-16β-[2-(2-メルカプトベン
ゾイルアミノ)エトキシ]アフィディコラン30mgを無色の
粉末として得た。¹ H NMR(pyridine-d₅、TMS)(270MHz)δ：0.79(3H,s)，1.
01(3H,s)，3.63〜3.94(10H,m)，7.09〜7.17(2H,m),8.02
〜8.05(2H,m)¹³ C NMR(pyridine-d₅、TMS)(68MHz)δ：15.4，18.1，1
9.2，23.5，25.5，25.9，27.2，27.5，31.6，33.2，34.
1，39.9，40.1，40.6，41.0，41.6，49.2，60.1，62.
8，71.9，76.3，79.5，125.9，126.7，128.4，131.2，1
34.9，138.8，168.3

【００２９】実施例６トランス-けい皮酸411mgを、N,N-ジメチルホルムアミド
4ml中に溶解した後、N,N´-ジシクロヘキシルカルボジ
イミド572mgを加え、室温下で2時間撹拌した。析出物を
ロ去し、ロ液に実施例２で得られた16β-(2-アミノエト
キシ)-3α,18-イソプロピリデンジオキシ-17-(テトラヒ
ドロピラン-2-イルオキシ)アフィディコラン200mgを加
えて、室温下で2時間撹拌した。反応混合物を氷水40ml
中に注入した後、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層
を水洗した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、濃縮乾
固した。残渣を、カラムクロマトグラフィー(粒径40〜6
3μmのメルク社製シリカゲル60 20g、溶離液：メタノー
ル/クロロホルム＝1/100)に付し、薄層クロマトグラフ
ィー(メルク社製シリカゲル60 Art.5715、展開溶媒：メ
タノール/クロロホルム＝1/9)でRf値0.73を示す画分を
集めた後、濃縮乾固した。得られた残渣に、メタノール
4mlおよび触媒量のp-トルエンスルホン酸・１水和物を
加え、室温下で15時間撹拌した。反応混合物を炭酸水素
ナトリウムで中和した後、濃縮乾固した。残渣に水およ
び酢酸エチルを加えて分液した後、酢酸エチル層を水洗
し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、濃縮乾固した。残
渣を、カラムクロマトグラフィー(粒径40〜63μmのメル
ク社製シリカゲル60 10g、溶離液：メタノール/クロロ
ホルム＝1/25)で精製した後、更にHPLC(イナートシルPR
EP-ODS、溶離液:メタノール/水＝4/1)で精製し、16β-
[2-(シンナモイルアミノ)エトキシ]-3α,17,18-トリヒ
ドロキシアフィディコラン75mgを無色の粉末として得
た。¹ H NMR(pyridine-d₅、TMS)(270MHz)δ：0.78(3H,s)，0.
99(3H,s)，3.62〜3.92(11H,m)，6.94(1H,d J=15.8Hz)，
7.26〜7.29(3H,m),7.47〜7.51(2H,m),8.03(1H,d J=15.5
Hz)¹³ C NMR(pyridine-d₅、TMS)(68MHz)δ：15.3，18.0，2
3.4，25.4，25.8，27.2，27.3，31.6，33.1，34.0，39.
7，40.0，40.5，40.9，41.1，49.2，60.2，63.0，71.
8，76.2，79.6，123.0，127.9，129.1，129.5，135.8，
139.6，166.2

【００３０】[腫瘍細胞増殖抑制試験]マウス腫瘍細胞YA
C-1 10⁶cells/mlを含むRPMI 1640培地(10%のFCS、100U/
mlのペニシリンおよび100μg/mlのストレプトマイシン
添加)100μlを、96穴マイクロプレート各ウェルに分注
し、更に各種濃度の前記各実施例で得られた16β-アシ
ルアミノエトキシ-3α,17,18-トリヒドロキシアフィデ
ィコラン(0.5%ジメチルスルホキシド溶液を前述のRPMI
1640培地で希釈し、各種濃度に調製したもの)100μlを
各ウェルに加えて、37℃、5% CO₂のインキュベータ内
で、72時間培養した。培地の色の変化をコントロールと
比較して、腫瘍細胞の増殖の有無を判定した結果、腫瘍
細胞の増殖を完全に抑制する濃度として、次のような結
果が得られた。 16β-アシルアミノエトキシ誘導体濃度(μg/ml) 実施例３ 3.13 〃４ 0.78 〃５ 1.56 〃６１．５６

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式【化１】 (ここで、Rはアリール基、ピリジル基またはアリール置
換アルケニル基である)で表わされる16β-[2-(アシルア
ミノ)エトキシ]-3α,17,18-トリヒドロキシアフィディ
コラン。
【請求項２】 16β-(2-ハロゲノエトキシ)-17-ヒドロ
キシ-3α,18-イソプロピリデンジオキシアフィディコラ
ン。
【請求項３】 16β-(2-ハロゲノエトキシ)-3α,17,18-
トリヒドロキシアフィディコランを2,2-ジメトキシプロ
パンと反応させることを特徴とする16β-(2-ハロゲノエ
トキシ)-17-ヒドロキシ-3α,18-イソプロピリデンジオ
キシアフィディコランの製造法。