JPH0630765A - Ｖａ菌根菌の増殖方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 ＶＡ菌根菌を感染させた植物を、平均粒径５
００μｍ未満の粉状骨粉を混合した基材を用いて栽培す
ることを特徴とするＶＡ菌根菌の増殖方法。 【効果】 本発明の方法では、平均粒径５００μｍ未満
の粉状骨粉を混合した基材を用いている為、ＶＡ菌根菌
が盛んに増殖し、ＶＡ菌根菌の菌糸が基材を満たした容
器全体に効率よく伸長する。従って、本発明の方法によ
れば、大量のＶＡ菌根菌を簡単に、かつ効率的に、しか
も経済的に製造することができる。また、生長したＶＡ
菌根菌の胞子により、胞子密度が高く、活性を安定に保
持するＶＡ菌根菌製剤を安価に得ることができる。それ
故、本発明は農業，園芸業等の分野において極めて有用
である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、農業や園芸等の分野で
有用なＶＡ菌根菌の増殖方法に関し、詳しくは小粒径の
粉状骨粉を混合した基材を用いて植物を栽培し、ＶＡ菌
根菌を効率的に増殖させる方法に関する。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】ＶＡ菌
根菌（Vesicular Arbuscular Mycorrhizae) は、植物の
根に共生することにより、植物の生長を促進したり、植
物の耐病性等を向上させる働きがあり、その有用性は古
くから知られている（小川 眞著：ＶＡ菌根とその働
き，森林立地，第３０（２）巻，第５７〜６５頁，１９
８８年、小林紀彦著：ＶＡ菌根菌と土壌病害への利用，
植物防疫，第４２巻，第２５９〜２６６頁，１９８８年
など）。しかしながら、ＶＡ菌根菌を人工的に増殖さ
せ、ＶＡ菌根菌接種物として商業的に使えるようなもの
は、これまで製造されていない。

【０００３】これは、ＶＡ菌根菌、特にスカテロスポラ
（ Scutellospora）属、グロムス（Glomus ) 属、或い
はギガスポラ ( Gigaspora )属に属するＶＡ菌根菌の大
量培養が非常に難しく、また培養操作が煩雑であり、コ
ストがかかることが主な原因とされている。そこでＶＡ
菌根菌を商業的に使えるようにするために、培養操作が
簡単で、かつ、安価に大量生産できる方法が望まれてい
る。

【０００４】このため、ＶＡ菌根菌を増やす方法とし
て、幾つかの提案がされている。例えば、土壌や、各種
植物栽培用基材を用いてＶＡ菌根菌感染植物を栽培し、
ＶＡ菌根菌を増殖する方法が研究されている。この際、
植物の生育を進める肥料としては液肥，化成肥料が用い
られている。従来、このような技術として、培土に化成
肥料を入れて植物を育て、その植物根にＶＡ菌根菌を感
染させる方法（特開平２−２２７６６８号公報，同３−
７６５７２号公報）や、産業廃棄物の焼却灰に肥料を加
える方法（特開平３−５８７１５号公報）などが知られ
ている。しかしながら、これらの方法では、いずれも速
効性肥料が用いられており、ＶＡ菌根菌の生育が阻害さ
れるという問題がある。また、「VA Mycorrhiza 」,p19
0-191,CRC Press,Inc.1984．や「農業および園芸」, 第
62卷７号,p27-28,1987. などには、過剰な水溶性リン酸
を施用するとＶＡ菌根菌の増殖を阻害することが記載さ
れている。

【０００５】一方、高濃度の化成肥料とＶＡ菌根菌との
接触を避けるために、低濃度の液肥を用いる方法（特開
昭５５−１１８３９０号公報，同６０−２３７９８７号
公報同６２−１９０２８号公報）や、有機質肥料を吸収
体に吸着させて用いる方法（特開昭６３−８７９７３号
公報）などが提案されているが、肥料成分の調製が煩雑
で、植物の生育のためには施用回数が多く、手間がかか
ったり、高価なイオン交換体を用いるという欠点があっ
た。

【０００６】本発明者は、このような従来の問題点を解
消すべく鋭意研究を重ねた結果、平均粒径５００μｍ未
満の粉状骨粉を混合した基材を用いてＶＡ菌根菌を感染
させた植物を栽培することにより、ＶＡ菌根菌を著しく
増殖させることができることを見出し、この知見に基づ
いて本発明を完成するに到った。

【０００７】

【課題を解決するための手段】すなわち本発明は、ＶＡ
菌根菌を感染させた植物を、平均粒径５００μｍ未満の
粉状骨粉を混合した基材を用いて栽培することを特徴と
するＶＡ菌根菌の増殖方法を提供するものである。

【０００８】ＶＡ菌根菌は、土壌中に存在する接合菌の
一種であり、その菌糸が様々な植物の根について菌根を
形成し、両者が共生することが知られている。本発明に
おいて用いるＶＡ菌根菌としては、種々のものがあり、
例えばスカテロスポラ（ Scutellospora )属, グロムス
（ Glomus ) 属，ギガスポラ ( Gigaspora )属, アカウ
ロスポラ（ Acaulospora )属, エントロフォスポラ（ E
ntrophospora )属, スクレロシスティス（ Sclerocysti
s ) 属などに属する微生物が挙げられる。これらのＶＡ
菌根菌のなかでも、従来、高密度で増殖させることが困
難であったスカテロスポラ（ Scutellospora）属、グロ
ムス（ Glomus)属、或いはギガスポラ ( Gigaspora )属
などに属するＶＡ菌根菌が好適である。

【０００９】より具体的には、例えばスカテロスポラ・
グレガリア（ Scutellospora gregaria ），ギガスポラ
・マルガリタ（ Gigaspora margarita），グロムス・イ
ントララデイセス（ Glomus intraradicies ) ，グロム
ス・モセアエ（ Glomus mosseae ），グロムス・エツニ
カタム（ Glomus etunicatum），グロムス・ファシキュ
レータム（ Glomus fasciculatum）が挙げられ、その他
に、アカウロスポラ・ラエビス（ Acaulospora laevis
) ，エントロフォスポラ・インフレケンス（ Entropho
spora infrequens ) , スクレロシスティス・ダッシ（
Sclerocystis dussi ）などを挙げることができる。

【００１０】これらＶＡ菌根菌は、自然界から篩等を用
いて集めたり（鈴木達彦著，ＶＡ菌根に関する諸問題
５，農業および園芸，第６２巻，第３号，ｐ２８〜３
３，１９８７年）、遠心分離により集めた（特開昭６３
−３０９１７８号公報）ものを用いることができる。さ
らに、栄養薄膜培養法（特開昭５５−１１８３９０号公
報）や器官培養した根を使用する方法（特公昭６２−４
９０３７号公報）等により増殖させたものを用いること
ができる。なお、グロムス・イントララデイセス（Glom
us intraradicies ) は、米国ＮＰＩ社より、Ｎｕｔｒ
ｉ−Ｌｉｎｋ（商品名）として販売されている。また、
無機質や有機質の担体に付着させたＶＡ菌根菌も使用す
ることができる。

【００１１】本発明でＶＡ菌根菌を感染させる植物、す
なわちＶＡ菌根菌培養のための宿主植物としては、ＶＡ
菌根菌が感染する植物であれば特に制限はないが、生長
が速く、根がよく張る植物であって、かつ、ＶＡ菌根菌
が感染しやすい植物が好適である。具体的には例えば、
トウモロコシ，メヒシバ，ソルゴー（別名ソルガム又は
モロコシ），ムギ，芝草，スーダングラス，バヒアグラ
ス，ギニアグラス等のイネ科植物、ナス，トマト，ピー
マン，シシトウ等のナス科植物、赤クローバー，ダイ
ズ，カラスノエンドウ，マングビーン，ピーナッツ，ア
ルファルファ等のマメ科植物、ネギ，玉ネギ等のユリ科
植物などが挙げられる。これらの植物は、種や実生苗を
用いる他、播種して育苗後、移植して栽培したり、栄養
繁殖したり、挿し芽，挿し木，接木，球根等により増
殖，栽培したりして用いられる。

【００１２】本発明はＶＡ菌根菌を感染させた植物を、
平均粒径５００μｍ未満の粉状骨粉を混合した基材を用
いて栽培し、ＶＡ菌根菌を増殖させることを特徴とす
る。本発明では、平均粒径５００μｍ未満の粉状骨粉を
混合した基材を用いる。ここで基材（培地）としては、
植物が成育する基材ならば特に制限はなく、様々なもの
を挙げることができ、有機物であると、無機物であると
を問わない。無機物としては例えば、ゼオライト，発泡
粘土（ブレー粘土），タルク，パーライト，バーミキュ
ライト，（焼成）赤玉土，軽石，石灰岩，土，砂，コー
クス等を挙げることができる。また、有機物としては例
えば、ピートモスなどを挙げることができ、これらを複
数併用した混合基材を用いてもよい。但し、土着の雑菌
の混入防止という観点からは、滅菌処理（焼成処理も含
む）した基材が好ましく、例えば滅菌土壌，焼成赤玉土
等を好適に用いることができる。

【００１３】また、本発明で用いる骨粉の種類として
は、特に限定はないが、通常、魚，牛，豚等の骨を粉砕
処理したものが用いられる。骨粉としては、平均粒径
（直径）が５００μｍ未満、好ましくは３００μｍ以下
の微粉状のものが用いられる。骨粉として平均粒径が５
００μｍ以上のものを用いた場合には、ＶＡ菌根菌の増
殖が不充分となる。また、基材全体に均一に分散させる
ことが難しく、ＶＡ菌根菌の菌糸を基材を満たした容器
全体に効率よく伸長させることが困難となる。骨粉の使
用量は、基材１リットル当り、リン酸濃度として０．０
０１〜１０ｇ、好ましくは０．０１〜５ｇ、より好まし
くは０．０５〜１．０ｇである。ここで骨粉の使用量が
多すぎると、ＶＡ菌根菌の菌糸の伸長を阻害することと
なり、一方、骨粉の使用量が少なすぎると、植物の生育
が悪くなり、結果的にＶＡ菌根菌の増殖も悪くなるた
め、いずれも好ましくない。なお、本発明で用いる骨粉
は、緩効性肥料としての効果を具有しており、ＶＡ菌根
菌の増殖及び胞子形成に好適なものである。

【００１４】なお、本発明では、平均粒径５００μｍ未
満の粉状骨粉を混合した基材を用いて前記宿主植物を栽
培するが、少なくともＶＡ菌根菌が感染した後の栽培を
このような基材を用いて行なえばよく、ＶＡ菌根菌の施
用時期にもよるが、ＶＡ菌根菌が感染する迄の栽培は、
粉状骨粉を混合した基材によらなくともよい。すなわ
ち、当初からこの基材中で感染・栽培してもよいし、或
いは通常の培地中で植物の根にＶＡ菌根菌を感染させた
後に、粉状骨粉を混合した基材を用いた培地に植え変え
て栽培してもよい。

【００１５】本発明においては、このような平均粒径５
００μｍ未満の粉状骨粉を混合した基材を用いて前記宿
主植物を栽培し、該植物の根に前記ＶＡ菌根菌を感染さ
せて増殖させる。ＶＡ菌根菌の宿主植物への接種・感染
方法について述べると、施用時期としては宿主植物の発
根前後のいずれであってもよいが、特に播種時や挿し芽
の前処理時、播種や挿し芽と同時、或いは苗の移植時な
どが好ましい。また、施用方法としては、ＶＡ菌根菌を
前記の基材と混合したり、根元に入れたり、種子や芽の
下層に層状に施用したり、或いは定植時の植え穴の中に
施用したりすることが好ましい。

【００１６】ＶＡ菌根菌を植物へ感染させる場合、通
常、１植物体に対し、１〜100,000 個、好ましくは５〜
10,000個のＶＡ菌根菌胞子を植物へ接種すればよい。Ｖ
Ａ菌根菌を接種した植物を、常法にて栽培することによ
り、例えば温度５〜６０℃、好ましくは１０〜４５℃に
て、基材のｐＨ３〜９．５、好ましくは４〜７．５の条
件で栽培することにより、ＶＡ菌根菌が植物の根に感染
し、盛んに感染が広がり、増殖する。必要に応じて、灌
水や液肥を施用すればよい。

【００１７】本発明の方法では、このように平均粒径５
００μｍ未満の粉状骨粉を混合した基材を用いているた
め、ＶＡ菌根菌が盛んに増殖し、ＶＡ菌根菌の菌糸が基
材を満たした容器全体に効率よく伸長する。このように
してＶＡ菌根菌感染植物の栄養生長を維持するが、適当
な時期に、ＶＡ菌根菌の胞子形成を誘導する。通常、栽
培し始めてから、２〜７ケ月程度経過して、植物が充分
に生育し、ＶＡ菌根菌も増殖したところで、水，栄養等
の供給を絶ち、暫く放置すると、ＶＡ菌根菌は胞子を形
成する。すなわち、胞子密度が充分に高くなったところ
で、基材を回収してＶＡ菌根菌製剤を得、必要に応じて
乾燥して製品化する。なお乾燥は、胞子や菌糸がダメー
ジを受けない程度の温度、例えば７０℃以下、好ましく
は２０〜５０℃の温度で行なえば良い。また、該胞子を
栽培基材から分離，回収することにより、ＶＡ菌根菌製
剤が得られる。

【００１８】なお、本発明によるＶＡ菌根菌の増殖方法
は、ＶＡ菌根菌製剤の製造に利用することができる。ま
た、植物の栽培にも利用することができる。例えば、野
菜・果樹苗の育苗時や鑑賞用植物の栽培時などにおい
て、これら植物にＶＡ菌根菌を接種することにより、植
物の良好な生育を図ることができる。

【００１９】

【実施例】次に本発明を実施例により、さらに詳しく説
明する。 実施例１，２及び比較例１ 臭化メチルで殺菌処理し、かつ、充分にガス抜きを行な
った赤玉土（粒径0.５〜４mm）を、１５０ml容ビニール
ポットに３分の２の容量まで充填した。その上にＶＡ菌
根菌〔スカテロスポラ・グレガリア（Scutellospora gr
egaria）〕（なお、本菌は工業技術院微生物工業技術研
究所において受託を拒否された。）の胞子を５０個接種
した後、さらに１cmの高さに赤玉土を充填し、アルファ
ルファの種子を３粒播いて覆土した。

【００２０】このようにセットしたポットを計９個用意
し、２５〜３５℃のガラス温室内で４週間栽培して、Ｖ
Ａ菌根菌を感染させた後、３鉢の５号プラスチック鉢
（1.５リットル容）に移植した。その際に、プラスチッ
ク鉢には予め基材として、上記赤玉土に、微粉状骨粉Ａ
（粒径３００μｍ以下，）（実施例１），５００μｍの
篩を通過した微粉状骨粉Ｂ（松崎商店製の粒径１０μｍ
から５ｍｍまでの混合物からなる骨粉より調製）（実施
例２）或いは５００μｍ篩の上に残った粒状骨粉（松崎
商店製の粒径１０μｍから５ｍｍまでの混合物からなる
骨粉より調製）（比較例１）をリン酸濃度として、基材
１リットル当たり０．５ｇの割合となるように添加して
得られた基材を、充填しておいた。移植後、２５〜３５
℃のガラス温室内で１０週間栽培した。この間、ピータ
ース液肥（２０−１０−２０）２０００倍液を週１回の
割合で散布した。その後、水の供給を中止し、２週間放
置した。得られた基材を回収し、湿式篩別法によりＶＡ
菌根菌〔スカテロスポラ・グレガリア（Scutellospora
gregaria）〕の胞子を分離し、胞子数を測定した。各区
３ポット毎の平均値を第１表に示した。

【００２１】

【表１】

【００２２】実施例３，４及び比較例２ 実施例１，２及び比較例１において使用したＶＡ菌根菌
〔スカテロスポラ・グレガリア（Scutellospora gregar
ia）〕の代わりに、ＶＡ菌根菌〔グロムス・イントララ
デイセス（ Glomus intraradicies ) 〕（なお、本菌は
工業技術院微生物工業技術研究所において受託を拒否さ
れた。）を用い、かつ、胞子数を５０個から１００個に
増やし、さらにアルファルファの種子の代わりにスダン
グラスの種子を用いたこと以外は、実施例１，２及び比
較例１と同様に行なった。その結果、得られた胞子数を
測定し、基材１ｇ当りの平均胞子数として第２表に示し
た。

【００２３】

【表２】

【００２４】

【発明の効果】本発明の方法では、平均粒径５００μｍ
未満の粉状骨粉を混合した基材を用いているため、粉状
骨粉が基材全体に均一に分散しており、この結果、ＶＡ
菌根菌が盛んに増殖し、ＶＡ菌根菌の菌糸が基材を満た
した容器全体に効率よく伸長する。したがって、本発明
の方法によれば、大量のＶＡ菌根菌を簡単に、かつ、効
率的に、しかも経済的に製造することができる。また、
生長したＶＡ菌根菌の胞子により、胞子密度が高く、活
性を安定に保持するＶＡ菌根菌製剤を安価に得ることが
できる。それ故、本発明は農業，園芸業等の分野におい
て極めて有用である。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ＶＡ菌根菌を感染させた植物を、平均粒
   径５００μｍ未満の粉状骨粉を混合した基材を用いて栽
   培することを特徴とするＶＡ菌根菌の増殖方法。