JPH064539B2 - 魚ワクチンの効力を増強する組成物および方法 - Google Patents
魚ワクチンの効力を増強する組成物および方法Info
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- JPH064539B2 JPH064539B2 JP2034925A JP3492590A JPH064539B2 JP H064539 B2 JPH064539 B2 JP H064539B2 JP 2034925 A JP2034925 A JP 2034925A JP 3492590 A JP3492590 A JP 3492590A JP H064539 B2 JPH064539 B2 JP H064539B2
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Description
【発明の詳細な説明】 発明の分野 本発明は魚ワクチンの効力を増強する方法およびその方
法に有用な組成物に関する。
法に有用な組成物に関する。
従来技術の説明 養魚場における魚養殖がますます盛んである。野生水産
資源の漁労法に比べた水産養殖の利点は野生動物の狩猟
に比べた家畜の飼育と同様に明らかである。しかし、問
題がある。魚は非常に高い密度に保たれねばならず、こ
れは魚が病気にかかり、殊に養魚場中に病気が速やかに
蔓延しやすいことを意味する。水産養殖技術は常に改善
され、通常餌中で投与される抗生物質の使用は病気の低
減における大きな利点であった。しかしこの方法におけ
る抗生物質の使用は魚病原体の耐性株の発生を生じさせ
ることができる。また人間により消費される家畜類およ
び魚における抗生物質、成長ホルモンなどの使用に反対
する普及した意見が依存する。
資源の漁労法に比べた水産養殖の利点は野生動物の狩猟
に比べた家畜の飼育と同様に明らかである。しかし、問
題がある。魚は非常に高い密度に保たれねばならず、こ
れは魚が病気にかかり、殊に養魚場中に病気が速やかに
蔓延しやすいことを意味する。水産養殖技術は常に改善
され、通常餌中で投与される抗生物質の使用は病気の低
減における大きな利点であった。しかしこの方法におけ
る抗生物質の使用は魚病原体の耐性株の発生を生じさせ
ることができる。また人間により消費される家畜類およ
び魚における抗生物質、成長ホルモンなどの使用に反対
する普及した意見が依存する。
とりわけビブリオ病およびレッドマウス病のような病気
に対するワクチンの使用において若干の成功があった。
しかしなおワクチンが有効でなく、または効力が不十分
な病気が存在する。
に対するワクチンの使用において若干の成功があった。
しかしなおワクチンが有効でなく、または効力が不十分
な病気が存在する。
一定のワクチンの効力を、ワクチンに加えて化合物を投
与することにより改善できることが医学において知られ
ている。
与することにより改善できることが医学において知られ
ている。
一定のグルカンが、明らかな免疫修飾効果によりヒト癌
の治療に有用であることができることが知られている。
グルカンはグルコース誘導体の無水物、例えばセルロー
ス、デンプン、デキストリンおよびグルコーゲンであ
る。
の治療に有用であることができることが知られている。
グルカンはグルコース誘導体の無水物、例えばセルロー
ス、デンプン、デキストリンおよびグルコーゲンであ
る。
出願人に知られたグルカンに関する関連特許には１９８
７年７月４日に発行された米国特許第4,098,661号、１
９６３年１０月２３日付の英国特許第1,061,043号およ
び１９７５年５月２７日に発行されたカナダ国特許第96
8,286号が包含される。
７年７月４日に発行された米国特許第4,098,661号、１
９６３年１０月２３日付の英国特許第1,061,043号およ
び１９７５年５月２７日に発行されたカナダ国特許第96
8,286号が包含される。
発明の概要 今回一定のグルカンが魚病の治療に対するワクチンの使
用において著しい、有利な効果を示すことが認められ
た。殊に重要なものはβ−１，３−グルカン類、殊にシ
ゾフィラン（ＳＰＧ）およびスルケログルカンである。
これらの水溶性β−１，３−グルカン類は三重ラセン構
造を有すると報告されている。シゾフィランは真菌シゾ
フィラム・コムーネ(Schizophyllum commune)の培養濾
液中の、アセトン、エタノールまたは他の水混和性溶媒
を沈殿剤として用いる沈殿により製造される。スクレロ
グルカンはスクレロチウム(Sclerotium)の選択種の培養
濾液から同様な方法で得られる。上記化合物は次の構造
式により表わされる： シゾフィランおよびスクレログルカンの構造 レンチナンの構造 従って、本発明はβ−１，３−グルカン類の免疫促進お
よびワクチン増強効果に向けられ、これらの化合物が魚
の治療および魚中のワクチン予防に有効であることの意
外な観察に基づく。
用において著しい、有利な効果を示すことが認められ
た。殊に重要なものはβ−１，３−グルカン類、殊にシ
ゾフィラン（ＳＰＧ）およびスルケログルカンである。
これらの水溶性β−１，３−グルカン類は三重ラセン構
造を有すると報告されている。シゾフィランは真菌シゾ
フィラム・コムーネ(Schizophyllum commune)の培養濾
液中の、アセトン、エタノールまたは他の水混和性溶媒
を沈殿剤として用いる沈殿により製造される。スクレロ
グルカンはスクレロチウム(Sclerotium)の選択種の培養
濾液から同様な方法で得られる。上記化合物は次の構造
式により表わされる： シゾフィランおよびスクレログルカンの構造 レンチナンの構造 従って、本発明はβ−１，３−グルカン類の免疫促進お
よびワクチン増強効果に向けられ、これらの化合物が魚
の治療および魚中のワクチン予防に有効であることの意
外な観察に基づく。
従って第１の観点において本発明は、β−１，６−結合
シングルグルコース側鎖をもつβ−１，３−結合主鎖を
有するβ−１，３−グルカンをワクチン処理魚に投与す
ることを含む魚ワクチンの効力を増強する方法である。
シングルグルコース側鎖をもつβ−１，３−結合主鎖を
有するβ−１，３−グルカンをワクチン処理魚に投与す
ることを含む魚ワクチンの効力を増強する方法である。
なお他の観点において本発明は魚ワクチンの効力を増強
することができ、β−１，６−結合シングルグルコース
側鎖をもつβ−１，３−結合主鎖を有するβ−１，３−
グルカンを魚に許容できる担体と組合せて含む組成物で
ある。
することができ、β−１，６−結合シングルグルコース
側鎖をもつβ−１，３−結合主鎖を有するβ−１，３−
グルカンを魚に許容できる担体と組合せて含む組成物で
ある。
担体は、典型的には注射可能な組成物のための食塩水お
よび経口投与される組成物のための餌である。餌と混合
する前にα−セルロースをグルカンと混合することが望
ましい。
よび経口投与される組成物のための餌である。餌と混合
する前にα−セルロースをグルカンと混合することが望
ましい。
特に好ましい態様において、本発明は抗原源およびβ−
１，６−結合シングルグルコース側鎖をもつβ−１，３
−結合主鎖を有するβ−１，３−グルカンを含む魚ワク
チンの効力を増強する組成物を提供する。好ましくは抗
原源はワクチンである。
１，６−結合シングルグルコース側鎖をもつβ−１，３
−結合主鎖を有するβ−１，３−グルカンを含む魚ワク
チンの効力を増強する組成物を提供する。好ましくは抗
原源はワクチンである。
実験研究 実験操作は一定β−１，３−グルカンの、ホルマリン殺
バクテリンの性能を増強し、サケ科魚の非特異免疫系を
刺激してそれらが病原体の悪性な攻撃(virulent challe
nge)の間、高い生存を示すことができる能力を決定する
ために開発された。攻撃のために選んだモデル系は、フ
ルンケル症(frunculois)の病原体であり、この病気にお
ける細胞媒介免疫の連座が報告されているのでエロモナ
ス・サルモニシダ(Aeromonas salmonicida)であった。
細胞媒介免疫は細菌性腎臓病（BKD）、水産養殖魚を悩
ませる他の病気、に対する免疫保護において主要な役割
を演ずるが、しかし感染の過程が長く、フルンケル症モ
デル系の使用を必要にする。
バクテリンの性能を増強し、サケ科魚の非特異免疫系を
刺激してそれらが病原体の悪性な攻撃(virulent challe
nge)の間、高い生存を示すことができる能力を決定する
ために開発された。攻撃のために選んだモデル系は、フ
ルンケル症(frunculois)の病原体であり、この病気にお
ける細胞媒介免疫の連座が報告されているのでエロモナ
ス・サルモニシダ(Aeromonas salmonicida)であった。
細胞媒介免疫は細菌性腎臓病（BKD）、水産養殖魚を悩
ませる他の病気、に対する免疫保護において主要な役割
を演ずるが、しかし感染の過程が長く、フルンケル症モ
デル系の使用を必要にする。
２系の攻撃を用いた。第１は液浸で、第２は共凄であ
る。次に死亡率数を２攻撃群間で比較できるように相対
力価の計算により調整した。相対力価は水槽間で良好な
再現性を示し、レンチナンおよびシゾフィラン増強ワク
チンはともに水槽内および水槽間で類似水準の力価を有
すると認められた。相対力価は表１により決定した。相
対力価は予防接種におけるパーセント死亡率で割った対
照におけるパーセント死亡率と規定される。
る。次に死亡率数を２攻撃群間で比較できるように相対
力価の計算により調整した。相対力価は水槽間で良好な
再現性を示し、レンチナンおよびシゾフィラン増強ワク
チンはともに水槽内および水槽間で類似水準の力価を有
すると認められた。相対力価は表１により決定した。相
対力価は予防接種におけるパーセント死亡率で割った対
照におけるパーセント死亡率と規定される。
結果は表１中に示される。
構造機能における類似性のため、以後の実験研究は１化
合物、シゾフィラン、で行なった。この化合物はレンチ
ナンより製造コストがかからない。それはバッチ発酵に
より製造できるが、しかしレンチナンはきのこ、しいた
け(Lentinus edodes)の子実体から抽出しなければなら
ず、それは日本ほかにおける普及した食品であり、化合
物レンチナンを高価にする。
合物、シゾフィラン、で行なった。この化合物はレンチ
ナンより製造コストがかからない。それはバッチ発酵に
より製造できるが、しかしレンチナンはきのこ、しいた
け(Lentinus edodes)の子実体から抽出しなければなら
ず、それは日本ほかにおける普及した食品であり、化合
物レンチナンを高価にする。
次段階の実験においてＳＰＧを３つの異なる形態で得
た。第１は精製し、広範に解重合した形態（ＳＰＧ−
Ｐ）であり、第２は単にわずかに解重合した粗抽出物
（ＳＰＧ−Ｃ）であり、第３は微粉菌糸体を含む培養ブ
ロス中の自生ＳＰＧ粗調製物（ＳＰＧ−Ｍ）である。
た。第１は精製し、広範に解重合した形態（ＳＰＧ−
Ｐ）であり、第２は単にわずかに解重合した粗抽出物
（ＳＰＧ−Ｃ）であり、第３は微粉菌糸体を含む培養ブ
ロス中の自生ＳＰＧ粗調製物（ＳＰＧ−Ｍ）である。
これらの形態のＳＰＧをＡ．サルモニシダ(A.salmonici
da)バクテリンおよび３異形態のＳＰＧのいずれか１つ
を含む混合物で腹腔内(i.p.)注射により魚に投与した。
da)バクテリンおよび３異形態のＳＰＧのいずれか１つ
を含む混合物で腹腔内(i.p.)注射により魚に投与した。
次いで魚をビルレントＡ．サルモニシダ中の液浸により
攻撃させ、生ずる死亡率をモニターした。結果は表２中
に示した。
攻撃させ、生ずる死亡率をモニターした。結果は表２中
に示した。
１：ＳＰＧ−ｍは最も粗形態のＳＰＧを示す。これは最
高分子量のＳＰＧを含むコロイド状微粉菌糸体の調製物
である。
高分子量のＳＰＧを含むコロイド状微粉菌糸体の調製物
である。
２：ＳＰＧ−ｃは多少精製され、多少解重合された粗形
態のＳＰＧである。
態のＳＰＧである。
３：ＳＰＧ−ｐは精製され、解重合された形態のＳＰＧ
である。
である。
上記から最粗形態のＳＰＧ（ＳＰＧ−Ｍ）が最も有効で
あったことが認められる。分子量の低下と共にワクチン
に対する増強の水準の減退があった。
あったことが認められる。分子量の低下と共にワクチン
に対する増強の水準の減退があった。
非特異的化学的予防剤としてのＳＰＧの効力を評価する
ために、さらに一連の実験を行なった。攻撃の２０日前
に２０mg/Kgの割合でi.p.注射したときに、魚は注射後
少くとも４０日後、抗原単独からなるワクチンをi.p.供
給した魚と同程度に保護されたことが認められた。これ
らの結果は、累積パーセント死亡率対時間に関するグラ
フである第１図中に要約される。曲線は食塩水注射魚
を、ＳＰＧ単独および抗原単独を注射した魚と比較して
示す死亡率曲線である。ＳＰＧ単独を注射した魚は抗原
単独で予防接種したものと同水準の保護を示す。この保
護は攻撃後約２０日間続くと思われる。魚はＳＰＧおよ
び抗原を第１図の曲線の０日の２０日前に注射された。
ために、さらに一連の実験を行なった。攻撃の２０日前
に２０mg/Kgの割合でi.p.注射したときに、魚は注射後
少くとも４０日後、抗原単独からなるワクチンをi.p.供
給した魚と同程度に保護されたことが認められた。これ
らの結果は、累積パーセント死亡率対時間に関するグラ
フである第１図中に要約される。曲線は食塩水注射魚
を、ＳＰＧ単独および抗原単独を注射した魚と比較して
示す死亡率曲線である。ＳＰＧ単独を注射した魚は抗原
単独で予防接種したものと同水準の保護を示す。この保
護は攻撃後約２０日間続くと思われる。魚はＳＰＧおよ
び抗原を第１図の曲線の０日の２０日前に注射された。
従ってそれらの結果はβ−１，３−グルカン類が魚の免
疫系を刺激する手段としておよびワクチンの効力を改善
する手段として、ともに有効であることを示す。
疫系を刺激する手段としておよびワクチンの効力を改善
する手段として、ともに有効であることを示す。
それらの結果は公表された予防接種の試みが不十分な結
果を生じたフルンケル症における原因物質のＡ．サルモ
ニシダに対する効果を示す。しかし、同様の結果が、ま
たサケ科魚の病原体である微生物、レニバクテリウム・
サルモニナルム(Renibacterium salmoninarum)により起
こされる細菌性腎臓病（ＢＫＤ）に対して達成できると
思われる。
果を生じたフルンケル症における原因物質のＡ．サルモ
ニシダに対する効果を示す。しかし、同様の結果が、ま
たサケ科魚の病原体である微生物、レニバクテリウム・
サルモニナルム(Renibacterium salmoninarum)により起
こされる細菌性腎臓病（ＢＫＤ）に対して達成できると
思われる。
前記実験結果はサケ科に属する魚に向けられている。し
かし、それらの実験結果は他の種、例えば観賞魚、観賞
趣味魚、コイ、タイ(sea bream)などに同様に適用でき
る。珠に、組成物がすべての魚に有効でないと当業者に
思わせるものが存在せず、本発明は水産養殖魚の治療に
珠に重要である。すべての魚種の免疫系中に実質的な等
質性が存在する。
かし、それらの実験結果は他の種、例えば観賞魚、観賞
趣味魚、コイ、タイ(sea bream)などに同様に適用でき
る。珠に、組成物がすべての魚に有効でないと当業者に
思わせるものが存在せず、本発明は水産養殖魚の治療に
珠に重要である。すべての魚種の免疫系中に実質的な等
質性が存在する。
第１図は実験研究中に記載される一定比較実験における
累積死亡率対時間に関する。
累積死亡率対時間に関する。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 特開 昭59−95220（ＪＰ，Ａ) 特開 昭62−201901（ＪＰ，Ａ) 特開 昭55−71701（ＪＰ，Ａ) 特開 平１−218615（ＪＰ，Ａ)
Claims (12)
- 【請求項１】β−１，６−結合シングルグルコース側鎖
を持つβ−１，３−結合主鎖を有するβ−１，３−グル
カンをワクチン処置魚に投与することを特徴とする魚ワ
クチンの効力を増強する方法。 - 【請求項２】ワクチンがエロモナス・サルモニシダに対
し有効なものである請求項(1)記載の方法。 - 【請求項３】魚がサケ科に属する種である請求項(1)記
載の方法。 - 【請求項４】グルカンがスクレログルカンである請求項
(1)記載の方法。 - 【請求項５】グルカンがシゾフィランである請求項(1)
記載の方法。 - 【請求項６】シゾフィランが非精製抽出物の形態で使用
される請求項(5)記載の方法。 - 【請求項７】抽出物が微粉菌糸体を含む培養ブロス中の
ネイティブシゾフィランである請求項(6)記載の方法。 - 【請求項８】β−１，３−グルカンが経口的に投与され
る請求項(1)記載の方法。 - 【請求項９】β−１，３−グルカンの用量が１５〜２０
mg毎キログラム体重の範囲内にある請求項(1)記載の方
法。 - 【請求項１０】抗原源およびβ−１，６−結合シングル
グルコース側鎖を持つβ−１，３−結合主鎖を有するβ
−１，３−グルカンを有効成分として含有する魚ワクチ
ンの効力を増強する組成物。 - 【請求項１１】抗原源がワクチンである請求項(10)記載
の組成物。 - 【請求項１２】グルカンがシゾフィランおよびスクレロ
グルカンからなる群から選ばれる請求項(10)記載の組成
物。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CA000591568A CA1330303C (en) | 1989-02-20 | 1989-02-20 | Composition and process to enhance the efficacy of a fish vaccine |
| CA591568 | 1989-02-20 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH02256620A JPH02256620A (ja) | 1990-10-17 |
| JPH064539B2 true JPH064539B2 (ja) | 1994-01-19 |
Family
ID=4139651
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2034925A Expired - Fee Related JPH064539B2 (ja) | 1989-02-20 | 1990-02-15 | 魚ワクチンの効力を増強する組成物および方法 |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5147862A (ja) |
| EP (1) | EP0384323B2 (ja) |
| JP (1) | JPH064539B2 (ja) |
| CA (1) | CA1330303C (ja) |
| DK (1) | DK0384323T4 (ja) |
| IE (1) | IE68067B1 (ja) |
| IS (1) | IS1860B (ja) |
| NZ (1) | NZ232575A (ja) |
Families Citing this family (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2911554B2 (ja) * | 1990-06-25 | 1999-06-23 | 台糖株式会社 | 抗ウィルス剤 |
| CA2040374C (en) * | 1990-07-06 | 1998-06-16 | Gunnar Rorstad | Process for enhancing the resistance of aquatic animals to disease |
| IE65568B1 (en) * | 1990-10-22 | 1995-11-01 | Unilever Plc | Vaccine compositions for fish |
| JPH0665649B2 (ja) * | 1991-02-01 | 1994-08-24 | 台糖株式会社 | 甲殻類の生体防御能増強剤、感染症予防ワクチン及び飼料 |
| JP3522772B2 (ja) * | 1991-05-21 | 2004-04-26 | 台糖株式会社 | ワクチンの免疫効果増強剤 |
| EP0640348A1 (en) * | 1993-07-26 | 1995-03-01 | Akzo Nobel N.V. | Oil-based and water-based adjuvant mixture |
| NO300692B1 (no) * | 1994-04-29 | 1997-07-07 | Biotec Mackzymal As | Solubilisert forgrenet ß-1,3-glukan og anvendelse derav samt anvendelse av usolubilisert forgrenet ß-1,3-glukan |
| GB2308367B (en) * | 1995-12-22 | 1999-10-13 | Scottish Salmon Growers Ass | Aeromonas protein used as a vaccine component |
| US5786343A (en) * | 1997-03-05 | 1998-07-28 | Immudyne, Inc. | Phagocytosis activator compositions and their use |
| DE19911057C2 (de) * | 1999-03-12 | 2001-01-25 | Cognis Deutschland Gmbh | Haarkosmetische Zubereitungen |
| DE19911056B9 (de) * | 1999-03-12 | 2005-09-08 | Biotec Asa | Kosmetische Zubereitungen und deren Verwendung |
| DE19911052A1 (de) * | 1999-03-12 | 2000-09-21 | Cognis Deutschland Gmbh | Sonnenschutzmittel |
| US20020009463A1 (en) * | 2000-02-23 | 2002-01-24 | Jan Raa | Novel, non-antigenic, mucosal adjuvant formulation which enhances the effects of substances, including vaccine antigens, in contact with mucosal body surfaces |
| KR20020094269A (ko) * | 2001-06-08 | 2002-12-18 | 주식회사 더멋진 바이오텍 | 어류의 생장을 촉진시키는 베타글루칸을 포함한 사료 |
| US6939864B1 (en) | 2001-07-09 | 2005-09-06 | Purdue Research Foundation | Animal feed compositions and methods of using the same |
| MX2007013725A (es) | 2005-05-05 | 2008-04-09 | Sensient Flavors Inc | Produccion de beta-glucanos y mananos. |
| US20110129548A1 (en) * | 2006-10-20 | 2011-06-02 | Bioagra, Llc | Immunopotentiating Compositions Comprising Beta-1, 3/1, 6-D-Glucan and Uses Thereof |
| CN106259106A (zh) * | 2016-08-17 | 2017-01-04 | 广西吉品环保科技有限公司 | 一种南方丘陵地带坡地生态养殖草鱼的方法 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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