JPH06509122A - 高活性セルラーゼおよび軟化クレーを含む洗剤組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 高活性セルラーゼおよび軟化クレーを含む洗剤組成物技術分野 本発明は、高活性セルラーゼを軟化クレー（軟化用粘土）と組合わせて含む洗剤 組成物に関する。この洗剤組成物では、セルラーゼは、Ｃ１４ＣＭＣ法により決 定される高活性のセルラーゼを含む。好ましくは、本洗剤組成物は、軟化クレー をクレー凝集剤と共に、液体組成物の場合はクレー用の沈降防止剤を含む。

発明の背景 この分野では、良好な洗浄特性だけではなく、良好な織物軟化性能、および他の 織物を保護する特性をも示す洗剤組成物が必要とされている。

セルロース分解酵素、すなわちセルラーゼの、織物洗浄剤および織物の粗さを低 下させる薬剤としての効率は以前から認められており、ＧＢ−Ａ−２，０７５， ０２８、ＧＢ−Ａ−２，０９５，２７５およびＧＢ−Ａ−２゜０９４．８２６は 、洗浄性能を改良するためにセルラーゼを含む洗剤組成物を開示しており、ＧＢ −Ａ−１，３６８，５９９は、綿を含む織物の粗さを低下させるためのセルラー ゼの使用を記載しており、米国特許第４，４３５．３０７号は、粗さを低減する 洗剤添加剤として、ＡＣＸ　Ｉの記号を白゛する、ｌ１ｕｓｉｃｏｌａ　Ｉｎ５ ｏｌｅｎｓならびにその部分に由来するセルロース分解酵素の使用を開示してい る。

ＥＰ−Ａ−０２６９１６８は、セルラーゼを含む最適化洗剤組成物を記載してい るが、これは穏やかなアルカリ性ｐｌ！領域で配合されており、織物の洗浄、織 物の軟化、および織物の保護性能を組合わせている。

ＷＯ３９１０９２５９には、高いエンドアーゼ活性およびセルロースに対する親 和力を有するエンドグルカナーゼを含む、綿含有織物の粗さを低減させるのに効 果的なセルラーゼ組成物を記載している。

しかし、上記の先行技術の文献に記載されている様なセルラーゼ組成物は複雑な 混合物であり、ある特定の部分しか織物の保護に有効でないために、セルラーゼ の実用化が遅れており、そのために洗剤工業向けのセルラーゼの経済的な工業生 産は困難であり、織物に対する所望の効果を得るには、大量のセルラーゼ組成物 を使用する必要かある。

セルラーゼの製造も、洗剤への応用に関して十分に改良されていない。セルラー ゼを洗剤用途に選択するための基準は、ＥＰ−Ａ−３５００９８に記載されるＣ １４ＣＭ　Ｃ法により明確にできる様になった。高活性セルラーゼは、固定され た放射能標識を付けたカルボキシメチルセルロースの少なくとも１０％を除去す ることが分かっている。本発明による高活性の定義に入る好ましいセルラーゼの 群は、１９９０年５月５日提出の審査中のチンマーク特許出願第１１５９／９０ 号に記載されている。

とりわけ、本質的に、１ｌｕｓ＋１ｃｏｌａ　１ｎｓｏｌｅｎｓ　Ｄ　Ｍ　１８ ００に由来する、部分的に精製された約４３ｋＤセルラーゼに対して作られたモ ノクローナル抗体と免疫反応性である均質なエンドグルカナーゼ成分からなるセ ルラーゼ組成物が記載されている。

セルラーゼのこの特定のエンドグルカナーゼ成分はセルロース含有材料の処理に 有利であるという発見により、例えば組換え体ＤＮＡ技術によりセルラーゼを経 済的に製造できることになり、少量のセルラーゼ組成物だけを使用し、織物に対 する所望の効果を得ることができる。

ＥＰ−Ａ−３８１３９７は、酵素性能に対する低イオン強度の影響を、特にリパ ーゼに関して開示している。

しかし、驚くべきことに、本発明の選択された酵素に対する緊密なマトリックス の影響は、ＥＰ−Ａ−３８１３９７に記載されている様な先行技術のセルラーゼ から予想されるよりもはるかに大きい。

ＥＰ−Ａ−１７７１６５には、洗剤組成物で、軟化クレーをセルラーゼと共に使 用する方法が記載されている。

この特許の発明は、先行技術が２つの主要な軟化性または粗さ低減性洗剤組成物 の組合わせを開示していないことに基づいている。ＥＰ−Ａ−１７７１６５は、 それぞれの他の化り物を含む洗剤組成物からクレーまたはセルロースを除外する 理由はないことを認めている。しかし、ＥＰ−Ａ−１７７１６５は、本発明の選 択された群の高活性セルラーゼに対しては、クレーとの組合わせが、２種類の軟 化原料から期待される添加剤性能よりも有利であることを認識していない。

そこで、本発明の目的は、高活性セルラーゼおよび軟化クレーを含む、最適な軟 化性能を発揮する洗剤組成物を提供することである。もう一つの目的は、その様 な洗剤組成物を液体または顆粒の形で提供することである。

本発明のもう一つの目的は、高活性セルラーゼを軟化クレーと共に含む、織物、 特にセルロース繊維を含む織物に、優れた色の回復性および白色保持性を与える 洗剤組成物を提供することである。本発明のもう一つの目的は、さらに、特に約 ６０℃以下の温度で良好なしみ抜きおよび洗浄性能を示す洗剤組成物を提供する ことである。

本発明の別の目的は、その様な洗剤組成物を、比較的高い密度を口し、無機塩充 填材の含有量が低い、最適な軟化性能を示す、緻密な形で提供することである。

本発明のさらに別の目的は、本発明の必須化合物に加えて、貯蔵安定性のあるク レー分散マトリックスを形成するための沈降防止剤を含む液体洗剤組成物を提供 することである。本発明のさらにもう一つの目的は、必須化合物に加えて、さら に織物上に軟化クレーを堆積し昌くするためのクレー凝集剤を含む、液体または 顆粒状の洗剤組成物を提供することである。

発明の概要 本発明は、界面活性剤、ビルダー系およびセルラーゼを含む洗剤組成物であって 、該セルラーゼが、以下に詳細に説明するＣ　１．４　ＣＭ　Ｃ法により、固定 された、放射能標識を付けたカルボキシメチルセルロースの少なくとも１０％を 除去すること、およびさらに該洗剤組成物が軟化クレーをも含むことを特徴とす る洗剤組成物に関する。

または約４３ｋＤセルラーゼの同族体である、高度に精製されたエンドグルカナ ーゼに対して作られた抗体と免疫反応性を示す均質なエンドグルカナーゼからな る洗剤組成物が好ましい。さらに、軟化クレー、および表ＩＤＮｏ、　２および ＩＤＮｏ、４に示すアミノ酸配列を有するエンドグルカナーゼ酵素またはその同 族体であるセルラーゼを含む洗剤組成物が、本発明による相乗織物処理、特に軟 化にａ利であることが分かった。

定義 他に指示がない限り、下記の定義を以下に使用する。

−百分率は重量％である。

一軟化とは、洗浄以外の織物処理領域を表し、特に軟化、色の回復および白さの 維持、しわ防止、帯電防止、およびアイロン処理のし易さを含む。

発明の詳細な説明 本洗剤組成物は顆粒状または液状でよい。その形態は、例えば洗浄により軟化す る洗剤、低温または高温、自動洗濯機または半自動の手動洗濯などの、所望の用 途により異なる。

洗剤の形態は、界面活性剤、ビルダー、セルラーゼ、軟化クレーおよび特に所望 により使用する特定の組成物のための原料の選択および量に大きく影響する。液 体組成物には、軟化クレー用の沈降防止剤か望ましく、液体または顆粒状組成物 で、繊維上にクレーを堆積し易くさせるために使用する凝集剤と矛盾しない。し かし、個々の化合物および例をすべて詳細に説明することにより、当業者は本発 明の洗剤組成物を配合することができる。

界面活性剤 洗剤組成物には様々な界面活性剤を使用できる。陰イオン系、非イオン系、両性 および双生イオン系界面活性剤の代表的な一覧表およびこれらの界面活性剤の種 類は１９７２年５月２３日にノリスに公布された米国特許第３．６６４，９６１ 号に記載されている。

これには、陰イオン系界面活性剤の混合物、特にスルホン酸エンドグルカナーゼ および硫酸塩界面活性剤の重量比５：１〜１：２、好ましくは３：１〜２：３、 より好ましくは′３：１〜１．］の混合物が特に好適である。

好ましいスルホン酸塩には、アルキル基中に９〜１５、特に１１〜１３個の炭素 原子を有するアルキルベンゼンスルホン酸塩、および脂肪酸が０１□〜Ｃ１８脂 肪源、好ましくはＣＩ６〜Ｃ１８脂肪源に由来するアルファスルホン化メチル脂 肪酸エステルがある。それぞれの場合、陽イオンはアルカリ金属、好ましくはナ トリウムである。好ましい硫酸塩界面活性剤は、アルキル基中に１２〜１８個の 炭素原子を有する硫酸アルキルの、所望によりアルキル基中に１０〜２０、好ま しくは１０〜１６個の炭素原子を有し、平均エトキシル化度が１〜６であるエト キシ硫酸塩との混合物である。好ましいアルキル硫酸塩の例は、牛脂アルキル硫 酸塩、ココナツツアルキル硫酸塩、およびＣ１４〜Ｃ１５アルキル硫酸塩である 。各場合の陽イオンはやはりアルカリ金属陽イオン、好ましくはナトリウムであ る。

本発明に好適な非イオン系界面活性剤は、エチレンオキシドと疎水性部分の縮合 物で、平均親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）が８〜１７、好ましくは９．５〜 １３゜５、より好ましくは１０〜１２．５である界面活性剤である。疎水性（親 油性）部分は、性質が脂肪族でも芳香族でもよく、特定の疎水性基と縮合するポ リオキシエチレン基の長さは容品に調節でき、親水性および疎水性部分間の所望 のバランス度を有する水溶性化合物を得ることができる。

この種の、特に好ましい非イオン系界面活性剤は、アルコール１分子あたりエチ レンオキシド３〜８モルを含むＣ”−Ｃｔ　ｓ第一アルコールエトキシレート、 特にアルコール１分子−あたりエチレンオキシド６〜８モルを含むＣ１４〜Ｃ１ ５第一アルコール、およびアルコール１分子あたりエチレンオキシド３〜５モル を含むＣ１２〜Ｃ１４第一アルコールである。

別の種類の非イオン系界面活性剤は、一般式％式％） （式中、２はグルコースに由来する部分であり、Ｒは１２〜１８個の炭素原子を Ｈする飽和疎水性アルキル基てあり、ｔはＯ〜１０であり、口は２または３であ り、Ｘは１．３〜４である。） のアルキルポリグルコシド化合物を含み、これらの化合物は１０９６未満の未反 応脂肪アルコールおよび５０％未満の短鎖アルキルポリゲルコンドを含む。この 種の化合物およびそれらの洗剤への使用は、Ｅｌ’−Ｂ　００７００７７．００ ７５９９６および００９４１１８に記載されている。

また、非イオン系界面活性剤としては、式ヒドロキシエチル、２−ヒドロキシプ ロピルまたはそれらの混合物であり、Ｒ２はＣ ５−３１ヒドロカルビルであり、 Ｚは、少なくとも３個のヒドロキシルが連鎖に直接結合したヒドロカルビル直鎖 を有するポリヒドロキシヒドロカルビル、またはそのアルコキシル化誘導体であ る。）のポリヒドロキシ脂肪酸アミド界面活性剤も好適である。

好ましくはＲＩはメチルであり、Ｒ２はココナツツアルキルの様な直鎖の０１１ −１５アルキルまたはアルケニル鎖またはそれらの混合物であり、Ｚは、還元性 アミノ化反応において、グルコース、フルクトース、マルトース、ラクトースの 様な還元糖に由来する。

その他の種類の界面活性剤は、アミンオキシドの様な半極性界面活性剤である。

好適なアミンオキシドは、モノｃ　−ｃ　、好ましくはｃｌｏ−ｃ１４Ｎ−アル キルまたはアルケニルアミンオキシドおよびプロピレン−１，３−ジアミンジオ キシドから選択されるが、ここで残りのＮ位置はメチル、ヒドロキシエチルまた はヒドロキシプロピル基により置換されている。

別の種類の界面活性剤は、ポリアミン系化合物の様な両性界面活性剤である。

陽イオン系界面活性剤も本発明の洗剤組成物に使用することができ、好適な第４ 級アンモニウム界面活性剤は、モノＣ８〜Ｃｉｅ、好ましくは０１０””　ｃ１ ４Ｎ−アルキルまたはアルケニルアンモニウム界面活性剤から選択されるが、こ こで残りのＮ位置はメチル、ヒドロキシエチルまたはヒドロキシプロピル基によ り置換されている。

各種界面活性剤の混合物、より詳しくは陰イオン系−非イオン系および陰イオン 系−非イオン系−陽イオン系混合物が好ましい。特に好ましい混合物は、英国特 許第２０４０９８７号および公開ヨーロッパ特許出願第００８７９１４号に記載 されている。洗剤組成物は、１〜７０１ｍ　９６の界面活性剤を含むことができ るが、通常、界面活性剤は組成物中に１〜３０重量％、より好ましくは１０〜２ ５重量％の瓜で含まれる。

ビルダー ビルダー材料は、ここでは一般的に洗剤組成物の１０〜６０重量％の量で含まれ る。本発明の組成物は、リン酸塩含ａビルダーを全く、または実質的に含まず（ 実質的に含まないとは、ここでは洗剤ビルダー系全体の１％未満を構成するとい うことである）、ビルダー系はここでは水溶性ビルダー、水に不溶性のビルダー 、またはそれらの混合物からなる。水に不溶性のビルダーは、無機イオン交換＋ ４料、一般的に無機水和アルミノケイ酸塩材料、特に水和したゼオライトＡ、Ｘ 、Ｂまたは〜５の様な水和した合成ゼオライトでよい。

好ましいアルミノケイ酸塩イオン交換材料は、単位セル式 ％式％ （式中、〜１はカルシウム交換陽イオンであり、２およびｙは少なくとも６であ り、２対ｙのモル比は１．０〜０．５であり、Ｘは少なくとも５であり、好まし くは７．５〜２７６であり、より好ましくは１０〜２６４である。） を有する。アルミノケイ酸塩材料は、水和した形であり、好ましくは１０％〜２ ８％の、より好ましくは１８％〜２２％の水を含む結晶性である。

上記のアルミノケイ酸塩イオン交換材料は、さらに粒子径が０．１〜１０ミクロ ン、好ましくは０．２〜４ミクロンであるのが特徴である。ここで用語「粒子径 」は、例えば走査電子顕微鏡を使用する顕微鏡測定の様な通常の分析技術により 決定される、与えられたイオン交換材料の平均粒子直径である。アルミノケイ酸 塩イオン交換材料は、さらにカルシウムイオン交換能力が、無水状態で計算して 少なくとも２００ｍｇ当量のＣａ　ＣＯａ水硬度／ｇアルミノケイ酸塩であり、 一般的に３００厘ｇ　ｅｑ、／ｇ〜３５２　Ｂ　ｅｑ、／ｇであるのが特徴であ る。ここで使用するアルミノケイ酸塩イオン交換材料は、さらにＧＢ−１゜４２ ９．１４３に詳細に記載されているカルシウムイオン交換率が特徴である。

本発明の粒子に有用なアルミノケイ酸塩イオン交換材料は、市販されており、天 然の材料でもよいが、合成品が好ましい。アルミノケイ酸塩イオン交換材料の製 造方法は、米国特許第３，９８５，６６９号に記載されている。本発明に有用な 、好ましい合成結晶性アルミノケイ酸塩イオン交換材料はゼオライトＡ１ゼオラ イトＢ１ゼオライトＸ５ゼオライトＨ８の記号で市販の製品およびそれらの混合 物である。特に好ましい実施態様では、結晶性アルミノケイ酸塩イオン交換材料 はゼオライトＡであり、式 ％式％ （式中、Ｘは２０〜３０、特に２７である。）を有する。弐Ｎａ　［（ＡＩＯ） 　（ＳｉＯ）　１８６　２　８１３　２　１０Ｂ −１０，２７６ＨＯのゼオライトＸならびにＮ　ａ　ａ［（ＡＩＯ）　（Ｓｉｎ ２）６１７．５Ｈ２０のゼ第ライトＨＳも好適である。

別の好適な水溶性無機ビルダー材料は、層状ケイ酸塩、例えば５ＫＳ−６（ヘキ スト）である。５ＫＳ−６はケイ酸ナトリウム（Ｎａ２Ｓ１２０５）からなる結 晶性層状ケイ酸塩である。Ｃａ”７Ｍｇ”＋結合能力が高いのは、主として陽イ オン交換機構によるものである。熱水中では、この材料の溶解性が高くなる。

水溶性ビルダーは、単量体またはオリゴマー性のカルボン酸塩キレート化剤でよ い。

カルボキシル基を１個含む好適なカルボン酸塩には、ヘルギー国特許第８３１， ３６８号、第８２１．３６９号、および第８２１，３７０号に記載されている様 に、乳酸、グリコール酸、およびそれらのエーテル誘導体がある。２個のカルボ キシル基を含むポリカルボン酸塩には、コハク酸、マロン酸、（エチレンジオキ シ）ジ酢酸、マレイン酸、ジグリコール酸、酒石酸およびフマル酸の水溶性塩、 ならびに独国特許第２，４４６，６８６号、および第２，４４６，６８７号、お よび米国特許第３゜９３５．２５７号に記載されているエーテルカルボン酸塩、 ベルギー特許第８４０，６２３号に記載されているスルフィニルカルボン酸塩が ある。３個のカルボキシル基を含むポリカルボン酸塩には、特に、水溶性のクエ ン酸塩、アコニット酸塩およびシトラコン酸塩、ならびに英国特許第１．３７９ ．　２４１号に記載されている様なカルボキシメチルオキシコハク酸塩の様なコ ハク酸誘導体、オランダ国出願第７２０５８７３号に記載されているラクトキシ コハク酸塩、および英国特許第１，３８７゜４４７号に記載されている２−オキ サ−１，１，３−プロパントリカルボン酸塩の様なオキシポリカルボン酸塩があ る。４個のカルボキシル基を含むポリカルボン酸塩には、英国特許第１，２６１ ，８２９号に記載のオキシジコハク酸塩、１，１，２．２−エタンテトラカルボ ン酸塩、１，１．３．３−プロパンテトラカルボン酸塩および１，１，２．３− プロパンテトラカルボン酸塩がある。スルホ置換基を含むポリカルボン酸塩には 、英国特許第１，３９８，４２１号および第１，３９８，４２２号および米国特 許第３，９３６，４４８号に記載のスルホコハク酸塩誘導体、および英国特許第 １，０８２，１７９号に記載のスルホン化熱分解クエン酸塩があり、ホスホン置 換基を含むポリカルボン酸塩は英国特許第１゜４３９．０００号に記載されてい る。

脂環式および複素環式ポリカルボン酸塩には、シクロペンタン−シス、シス、シ ス−テトラカルボン酸塩、シクロペンタノエンペンタカルボン酸塩、２，３，４ ．５−テトラヒドロフラン−シス、シスーンスーテトラカルボン酸塩、２，５− テトラヒドロフラン−シス−ジカルボン酸塩、２，２，５．５−テトラヒドロフ ラン−テトラカルボン酸塩、１，２，３，４，５．６−ヘキサン−ヘキサカルボ ン酸塩およびソルビトール、マンニトールおよびキンリトールの様な多価アルコ ールのカルボキシメチル誘導体がある。芳香族ポリカルボン酸塩には、英国時５ １第１，４２５，３４３号に記載されているメリト酸、ピロメリト酸およびフタ ル酸の誘導体がある。

上記の中で、好ましいポリカルボン酸塩は、１分子あたり３個までのカルボキシ ル基を含むヒドロキシカルボン酸塩、より詳しくはクエン酸塩である。

本組成物で使用するのに好ましいビルダー系には、ゼオライトＡの様な水溶性ア ルミノケイ酸塩ビルダー、およびクエン酸の様な水溶性カルボン酸塩キレート化 剤である。さらに、ポリカルボキンレート重合体をも含むビルダー系が、ビルダ ー系のみならず、本発明の洗剤組成物に軟化性能を与える上で有益であることが 分かった。

ポリカルボキシレート重合体は先行技術、例えばＥＰ−Ａ−１３７６６９に詳細 に説明されている。

本発明の組成物用のビルダー系の一部を構成できる他のビルダー材料には、アル カリ金属の炭酸塩、重炭酸塩、ケイ酸塩の様な無機材料、および有機ホスホン酸 塩、アミノポリアルキレンホスホン酸塩およびアミノポリカルボン酸塩の様な有 機材料がある。

セルラーゼ 酵素の活性および特にセルラーゼ酵素の活性は、様々な用途に対して異なった分 析方法により測定されている。

これらの方法はすべて、予想される使用時の性能の実用的な評価、または少なく とも使用時の性能と相関性のあるｍ定を行うことを試みている。ヨーロッパ特許 出願ＥＰ−Ａ−３５００９８に詳細に記載されている様に、多くの方法、特にセ ルラーゼメーカーにより頻繁に使用されている方法には、クリーニング洗剤組成 物中のセルラーゼの使用時の性能との十分な相関性がない。これは、様々な他の 使用条件によるものであり、その使用条件に対してこれらの活性計１定方法が開 発されたのである。

ＥＰ−Ａ−３５００９８に記載されている方法は、クリーニング洗剤組成物中の セルラーゼ活性を等綴付けするためのｆ期し得る相関関係を有する様に開発され ていしたがって、本発明は、ＥＰ−Ａ−３５００９８に開示されている方法を使 用してセルラーゼをふるい分け、本発明にＨ用なセルラーゼを、本発明の目的に 合わないセルラーゼと区別する。ＥＰ−Ａ−３５００９８に開示されている、以 下にＣ１４ＣＭＣ法と呼ぶ、このふるい分は方法を以Ｆに説明する。

原理 ふるい分けるためのＣ１４ＣＭＣ法の原理は、洗濯溶液中の限定されたセルラー ゼ濃度において、固定されたカルボキンメチルセルロースが布基材から除去され る率を測定することである。ＣＭＣの除去は、Ｃ１４放射性炭素を使用し、ＣＭ Ｃの一部を放射能標識付けすることにより１ｌＦ１定する。セルラーゼ処理前後 の、布括材上の放射性Ｃ１４の量を単に計数するだけで、セルラーゼ活性を評価 することができる。

試料調製 ＣＭ　Ｃ調製、　放射性ＣＭ　ＣＩＦＡ溶液は表１により調製する。ｈｋ射外性 ＣＭＣ、ＥＰ−Ａ−３５００９８に記載のノｊメ去によりｊすられる。

織物基材、　織物基材は、大きさが５Ｃ■ｘ５ｃｍのモスリン綿布地である。こ れらの基材の中央部に放射能標識を付けたＣＭＣ原溶液０．３５ｍ１を落とす。

次いでモスリン綿／＋ｉ地を空気乾燥させる。

ＣＭＣの固定化：　モスリン綿布地上に放射性標識を付けたＣＭＣを固定するた めに、オリギナル　ハウナウ、独国、製のローンドロメーター装置「リニテスト 　オリギナル　ハウナラ」を使用する。ローンドロメーターの金属容器に４００ １の硬水（４５ｓｏｌ／リツトルのＣａ＋＋イオン）を満たす。容器１個あたり 最大１３枚の布地を使用できる。次いで、容器をローンドロメーター装置中で４ ０分間にわたり２０℃〜６０℃の加熱サイクルで熱処理する。熱処理後、布地を 水道水で１分間すすぐ。布地を絞り、少なくとも３０分間空気乾燥させる。ＥＰ −Ａ−３５００９８により、放射性ＣＭＣを固定した布地は、洗浄せずに「ブラ ンク試料」として測定することもクリーニング試験溶液：クリーニング試験溶液 は、表１１の組成により調製する。ｐｌｌを７．５に調節する。クリーニング試 験溶液は、セルラーゼ試験試料を加える原液である。加えるべきセルラーゼの量 を決定する前に、１００％水を加えてクリーニング試験溶液を希釈しない様に注 意する。このふるい分は試験で使用するセルラーゼの量は、クリーニング試験溶 液中のセルラーゼタンパク質が２５ｘｌＯ−６重量％（１４，５℃で０．２５ミ リグラム／リツトル）になる様にする。

洗浄法二次いで、放射性標識ＣＭＣがこのように接種された見本を、洗濯シミュ レーション法で処理する。洗濯法は、独国ハウナウのオリジナル・ハウナラによ るローンゾロメーター型装置［リニテスト、オリジナル・）＼ウナウ（１，１ｎ ｉｔｅｓｔ、Ｏｒｉｇｉｎａｌ　ｌ１ａｕｎａｕ）　Ｊで模擬する。個々の見本 を、２０ｃ■３のガラス製バイアルに入れる。バイアルに洗濯試験液１０１を充 填し、次いで、液密にシールする。５個までのバイアルを、各ローンゾロメータ ージャーに入れる。ジャーに洗濯シミュレーション用熱伝達媒体として水を充填 する。洗濯シミュレーションは、４０分にわたって２０℃から６０℃までの昇温 サイクルとして行う。

試料の加工後、バイアルは、浄水中に入れ、その後に谷見本は、バイアルから取 り、流れる軟水下でビーカー中ですすぎ、絞り、少なくとも３０分間風乾させる 。

ＤＩ定： 放射性標識ＣＭ　Ｃ除去をａｌｌ定するために、シンチレーションカウンター、 例えば、ＬＫＢ１２１０ウルトラベータンンチレーションカウンターを、使用す る。最も正確な結果をｉ！Ｉるたに、特定のシンチレーションカウンターの最適 の操作用指図マニュアルに従うべきである。例えば、ＬＫＢ　１２１０ウルトラ ベータシンチレーシヨンカウンターの場合には、下記方法に従うべきである。測 定すべき見本を、シンチレータ−液体（例えば、バラカードからのンンチレータ ー２９９）１２ｍｌが充填されたプラスチック製バイアルに入れる。次いで、見 本は、少なくとも３０分間安定化させる。次いで、バイアルを、ＬＫＢ　１２１ ０ウルトラベータシンチレーシヨンカウンターに入れ、見本のそれぞれの放射能 カウントが得られる。

セルラーゼのみによるＣＭＣ除去量を１ｌｌｌ定するために、同時に接種されて いるがセルラーゼなしの洗濯試験液中で処理されている見本の１ｌＦＩ定が、必 要である。次いで、セルラーゼの活性は、放射性標識ＣＭＣ除去率として表現す る。この％は、下記式によって計算する：（式中、ＸＯはセルラーゼなしの洗濯 試験液で処理された見本の放射能シンチレーションカウントであり、ＸＣは評価 すべきセルラーゼを含有する洗濯試験液で処理された見本の放射能シンチレーシ ョンカウントである）。

統計的考慮、方法確認： 統計的に確実な結果を与えるためには、標準の統計的分析を、使用すべきである 。所定の例の場合には、ＬＫＢ１２１０ウルトラベータシンチレーションカウン ターを使用して、各放射能シンチレーションカウント用の３つの見本の試料サイ ズを使用することができることが見出された。

内部クロスチェックによる方法を確認するためには、ＥＰ−Ａ第３５００９８号 明細書に準拠する「ブランク試料」の測定および計算が、推奨される。このこと は、誤差を検出し且つ排除することであろう。

結果の解釈： 記載されたスクリーニング試験は、本発明の一部分を構成しないセルラーゼと比 較して本発明の活性基準を満たすセルラーゼを同定するための迅速な独特の信頼 できる方法を与える。

前記Ｃ１４ＣＭ　Ｃ法に準拠する固定化放射性標識ＣＭＣの１００６以上の除去 は、それぞれのセルラーゼが本発明の要件を満たすことを示すことが見出された 。

１０％より高い除去率がそれぞれのセルラーゼの高活性を示すことが、当業者に 自明であろう。それゆえ、ＣＩ４ＣＭ　Ｃ法に準拠する洗濯試験液中のタンパク 質濃度で、放射性標識ＣＭＣの除去２５％超または好ましくは５０　％超を与え るセルラーゼは、洗濯洗剤において使用するためのセルラーゼの一層良い性能の 指摘を与えるであろうことか予想される。

また、Ｃ１４ＣＭ　Ｃ法用セルラーゼのより高い濃度の使用は、より高い除去率 を与えるであろうことが予想された。しかしながら、セルラーゼ濃度と、それに よって得られる除去率との間の線型の証明された相関は存在しない。

また、Ｃ１４ＣＭ　Ｃ法用セルラーゼのより高い濃度の使用は、より高い除去率 を与えるであろうことが予想された。

表■：放射性Ｃ１４標識ＣＭＣストック溶液（すべて全溶液の重量％）で十分に 明白な読み取りを可能にする放射能を与えるために非放射性ＣＭＣおよび放射性 ＣＭＣを含む。例えば、放射性ＣＭＣは、活性０．７ミリキユ一リー／ｇを有す ることができ且つ非放射性ＣＭＣと１：６．７の比率で混合できる。

表１１・洗濯試験液 （すべて全溶液の重量％） 本発明によれば、好ましいセルラーゼは、デンマーク特シγ出願第１１５９／９ ０号明細書に記載のようなものである。例えば、本発明の組成物で有用なセルラ ーゼ製剤は、本質上、ｌ１ｕｓｉｃｏｌａ　１ｎｓｏｌｃｎｓ、Ｄ　Ｓ　Ｋ　１ ８００に由来する高精密４３ＫＤセルラーゼに対して上げられた抗体と免疫反応 性であるか前記４３ＫＤエンドグルカナーゼに相同的である均質エンドグルカナ ーゼ成分からなることができる。

本発明に係るすべてのセルラーゼ酵素は、前記スクリーニング試験の基準を満た さなければならないことを強調すべきである。しかしながら、テンマーク特許出 願第１１５９／９０号明細書においては、追加の基準は、確立されていて、本ス クリーニング試験との組み合せで好ましいセルラーゼ酵素を同定することを可能 にする。

本発明の組成物で特に有用なセルラーゼ製剤は、スクリーニング試験に加えて、 エンドグルカナーゼ成分が全タンパク質ＩＢ当たり少なくとも約５０、好ましく は少なくとも約６０、特に少なくとも約９０ＣＭＣ−エンドアーゼ単位のＣＭＣ −エンドアーゼ活性を示すものである。特に、好ましいエンドグルカナーゼ成分 は、全タンパク質ｌｌ１ｇ当たり少なくとも１００１００Ｃエンドアーゼ単位の ＣＭＣ−エンドアーゼ活性を示す。

本文脈においては、「ＣＭＣ−エンドアーゼ活性」なる用語は、以下に詳述のよ うに本発明のセルラーゼ製剤のインキュベーション後にカルボキシメチルセルロ ース（ＣＭＣ）の溶液の粘度減少によって測定する時にセルロースをグルコース 、セロビオースおよびトリオースに分解する能力によるエンドグルカナーゼ成分 のエンドグルカナーゼ活性を意味する。

ＣＭＣ−エンドアーゼ（エンドグルカナーゼ）活性は、次の通りＣＭＣの粘度減 少から測定できる。ｐＨ９，０で０．１Ｍ１−リス緩衝液中にＣＭＣ３５ｇ／ｌ 　（）＼−キュレス７　Ｌ　Ｆ　Ｄ）を含有する基質溶液は、調製する。分析す べき酵素試料は、同じ緩衝液に溶解する。基質溶液１０−１および酵素溶液０， ５１は混合し、４０℃に温度調節された粘度計［例えば／＼−ヶ（Ｉｌａａｋｅ 　）　Ｖ　Ｔ　１８１、ＮＶセンサー、１８１　ｒｐｓ　］に移す。粘度読取り は、混合し、ｌｉＳ度’う０分経過後に、できるだけ早く行う。粘度をこれらの 条件下で半分に減少する酵素の量は、ＣＭＣ−エンドアーゼ活性の１単位または ＣＥＶｕ／す・ソトルと定義する。

ＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）および当業者に既 知の方法で標識タンパク質での等電点電気泳動は、本文脈で使用なセルラーゼ製 剤中のエンドグルカナーゼ成分のそれぞれ分子量および等重点（ｐ　Ｉ）を測定 するために使用した。このようにして、特定のエンドグルカナーゼ成分の分子− 量を測定したところ、４３ＫＤてあった。このエンドグルカナーゼの等電点をＡ ｌ１定（、たところ、約５．１であった。

セロビオヒドロラーゼ活性は、セロビオースｐ−ニトロフェニルに対する活性と 定義してもよい。活性は、３７℃およびｐＨ７、Ｏて１分当たり放出されるニト ロフェニル１０＝モルと決定される。本エンドグルカナーゼ成分は、本質上セロ ビオヒドロラーゼ活性を有していないことが見出された。

本発明のセルラーゼ製剤中のエンドグルカナーゼ成分は、最初、多数の精製法、 即ち、米国特許第４，４３５゜３０７号明細書に係る粗Ｈ，１ｎｓｏｌｅｓセル ラ一ゼ混合物の逆相ＨＰＬＣ精製を包含する方法によって単離した。

この方法は、驚異的なことに、驚異的な程高いエンドグルカナーゼ活性のため予 想外に好ましい性質を有する単成分としての４３ＫＤエンドグルカナーゼの単離 を生じた。

また、スクリーニング試験に加えて、本組成物で有用なセルラーゼ酵素は、エン ドグルカナーゼ活性を示す酵素（以下で「エンドグルカナーゼ酵素」と称する） （これらの酵素は添付配列リストＩＤ＃２に示すアミノ酸配列をａする）、また はエンドグルカナーゼ活性を示すそれらの相同体と更に定義できる。

本文脈においては、「相同体」なる用語は、成る特定の条件下で（例えば、５Ｘ ＳＳＣにブレソーキングし、４０℃でホルムアミド２０％と５×デンハート溶液 とリン酸ナトリウム５０ｍＭ（ｐＨ６，８）と変性音波処理子ラン胸腺ＤＮＡ５ ０μｇとの溶液中で１時間予備ハイブリッド形成した後、ＡＴＰ１００μＭが補 給された同じ溶液中で４０℃で１８時間ハイブリッド形成する）このアミノ酸配 列を有するエンドグルカナーゼ酵素用ＤＮＡコーディングと同しプローブにハイ ブリッド形成するＤＮＡによってコート化したポリペプチドを示そうとする。

用語は、１個以上のアミノ酸残基を未変性配列のＣ末端およびＮ末端の一方また は両方に付加すること、未変性配列の１個以上の部位での１個以上のアミノ酸残 基の置換、未変性アミノ酸配列のいずれかの末端または両方の末端または未変性 配列内の１個以上の部位での１個以上のアミノ酸残基の欠失、または未変性配列 における１個以上の部位での１個以上のアミノ酸残基の挿入により得られる前記 配列の誘導体を包含しようとする。

て微生物の寄託の国際認識についてのブダペスト条約（ブダペスト条約）の規定 に従ってＦＲＧのＤ−３３００ブラウンシユハイグのマツシャーオーダ・ヘゲＩ Ｂのトイチェ・サムルング・フォノ・ミクロオルガニスメンで１９８１年１０７ −１１日に寄託された菌株ＤＳＭ１８００によって生産できるものであってもよ い。

なお史に他のアスペクトにおいては、ここで有用なセルラーゼ酵素は、スクリー ニング試験に加えて、添付配列リストＩＤ＃４に示すアミノ酸配列を有するエン ドグルカナーゼ酵素またはエンドグルカナーゼ活性を示すそれらの相同体（上に 定義のように）と定義できる。前記に従ってＦＲＧのＤ−３３００ブラウンシユ バイグのマツシャーオーダー・ベグＩＢのトイチェ・サムルング・フォノ・ミク ロオルガニスメンで１９８３年６月６日に寄託された菌株ＤＳＭ２６７２によっ て生産できるものであってもよい。

更に、相同的エンドグルカナーゼは、セルロース分解ら誘導してもよいことが意 図される。

しかしながら、本発明のセルラーゼ製剤の工業的生産の場合には、組換えＤＮＡ 技術、または所望の酵素活性の過剰生産を保証するために包含する微生物の発酵 または突然変異の調節を包含する他の技術を使用することが好ましい。このよう な方法および技術は、技術上既知であり且つ当業者によって容易に実施できる。

　エンドグルカナーゼ成分は、このように、前記エンドグルカナーゼ成分または 前記エンドグルカナーゼ成分の前駆体をコード化するＤＮＡ配列並びにエンドグ ルカナーゼ成分またはその前駆体をコード化するＤＮＡ配列の発現を可能にする 機能をコード化するＤＮＡ配列を担持する組換えＤＮＡベクターで形質転換され た宿主細胞を、培地中でエンドグルカナーゼ成分またはその前駆体の発現を可能 にする条件下で培養し、エンドグルカナーゼ成分を培養物から回収することから なる方法によって生産できるものであってもよい。

前記のようなエンドグルカナーゼまたは前駆体型の酵素をコード化するＤＮＡ配 列を含むＤＮＡ構築物（ｃｏｎｓＬｒｕｃｔ　）は、添付配列リストＩＤ＃１ま たはＩＤ＃３に示すようなりＮＡ配列、またはその修飾を有するＤ　Ｎ　Ａ　ｌ ｌ構築物包含する。ＤＮＡ配列の好適な修飾の例は、エンドグルカナーゼの別の アミノ酸配列を生じないがＤＮＡ構築物が導入される宿主生物のコドン使用に対 応するヌクレオチド置換、または異なるアミノ酸配列を生しないので未変性酵素 とは異なる性質を有するエンドグルカナーゼ突然変異体を生ずることがある異な るタンパク質構造を場合によって生ずるヌクレオチド置換である。可能な修飾の 他の例は、配列のいずれかの末端での１個以上のヌクレオチドの挿入、またはい ずれかの末端または配列内の１個以上のヌクレオチドの欠失である。

ここで有用なエンドグルカナーゼ酵素をコード化するＤＮＡ構築物は、確立され た標準法、例えば、Ｓ、Ｌ。

ビューケージおよびＭ、Ｈ，カルサーズによりＴｅｌ　ｒａｈｅｄｒａｎ　１． ｃｔＬｃｒｓ　２２．　１９８１　、ｐ　ｐ、１８５９−１．８６９に記載のホ スホアミダイト法、またはマテス等によりＥＭＢＯＴｏｕｒｎａｌ　３，１９８ ４．ｐｐ、８０１−８０５に記載の）ｊ　ｉＪによって合成的に生産してもよい 。ホスホアミダイト法によれば、オリゴヌクレオチドは、例えば、自動ＤＮＡ合 成装置中で合成し、精製し、アニールし、結合し、好適なベクター中でクローン 化する。

エンドグルカナーゼ酵素またはその前駆体をコード化するＤＮＡ構築物は、例え ばＨｕｓｌｃｏｌａ　！ｎ５ｏｌｅｓｓ　Ｄ　Ｓ　Ｍ２３Ｃ６などのセルラーゼ 生産微生物のｃ　ＤＮＡまたはゲノムライブラリーを樹立し、常法により、例え ば、標−１１９８９年参照）に従ってエンドグルカナーゼの全または部分アミノ 酸配列に基づいて合成されたオリゴヌクレオチドプローブを使用するハイブリッ ド形式により、または適当な酵素活性（即ち、上に定義のようなＣＭＣ−エンド アーゼ活性）を発現するクローンのために選ぶことにより、または未変性セルラ ーゼ（エンドグルカナーゼ）に対する抗体と反応性であるタンパク質を生産する クローンのために選ぶことにより正のクローンのために選抜することによって単 離してもよい。

最後に、ＤＮＡ構築物は、標準技術に従って合成、ゲノムまたはｃ　ＤＮＡ起源 （適宜）のフラグメント（フラグメントは全ＤＮＡ構築物の各種の部分に対応） を結合することによって生産された混合合成／ゲノム、混合合成／ｃＤＮＡまた は混合ゲノム／ｃ　ＤＮＡ起源を有していてもよい。また、ＤＮＡ構築物は、特 定のプライマー、例えば、米国特許第４，６８３，２０２号明細書またはＲ，に 、サイキ等、５ｃｉｅｎｃｅ　２３９．　１９８８．　ｐ　ｐ。

４８７−４９１に記載のようなものを使用するポ１ツメラーゼ連鎖反応によって 生産してもよい。

前記ＤＮＡｔＡ築物か挿入される組換え発現ベクターとしては、好都合には組換 えＤＮＡ法に付してもよい０かなるベクターも挙げられ、且つベクターの選択は 、Ｌｆｆしば、ベクターを導入すべき宿主細胞に依存するであろう。このように 、ベクターは、自律複製ベクター、即ち、染色体外エンテイテイーとして存在す るベクター（その複製は染色体複製に無関係である）、例えば、プラスミドであ ってもよい。或いは、ベクターは、宿主細胞に導入する時に、宿主細胞ゲノムに 組込み、１以上の染色体（この中にベクターか組込まれている）と−緒に複製し たものであってもよい。

ベクターにおいては、エンドグルカナーゼをコード化するＤＮＡ配列は、操作上 、好適なプロモーターおよびターミネータ−配列に連結すべきである。プロモー ターは、選択の宿主細胞中の転写活性を示すいかなるＤＮＡ配列であってもよく 且つ宿主細胞に相同または非相同のいずれかのタンパク質をコード化する遺伝子 から誘導してもよい。それぞれエンドグルカナーゼ、プロモーターおよびターミ ネータ−用ＤＮＡ配列コーディングを結合するために且つそれらを好適なベクタ ーに挿入するために使用する方法は、当業者に周知である（例えば、サムプルツ ク等の前掲書参照）。

前記ＤＮＡ構築物または前記発現ベクターで形質転換またはクロカビ（＾ｓｐｅ ｒｇｌｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ　）に属してもよい。

菌類細胞は、それ自体既知の方法で原形質体を形成し、原形質体を形質転換した 後、細胞壁を再生することを包含する方法によって形質転換してもよい。コウジ カビ属を宿主微生物として使用することは、ＥＰ第２３８０２３号明細書（ノボ ・インダストリＡ／Ｓ）に記載されていおり、その内容はここに参考文献として 編入する。また、宿主細胞は、酵母細胞、例えば、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｃｓ ｃｅｒｃｖｉｓｉａｅの菌株であってもよい。

或いは、宿主細胞は、最近、特に５ｔｒｅｐｔｏ■ｙｃｅｓおよびバチルス（Ｂ ａｃｉ　Ｉ　Ｉｕｓ）の菌株および大腸菌（Ｅ　、　ｃｏｌｉ、　）であっても よい。細菌細胞の形質転換は、常法に従って、例えば、サムプルツク等、Ｍｏ１ ｅｃｕｌａｒ　Ｃｌｏｎｌｎｇ　：＾Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｍａｎｕａｌ　（ コールド・スプリング・）１−バー、１９８９）に記載のように行ってもよい。

適当なりＮＡ配列のスクリーニングおよびベクターの構築は、標準法によって行 ってもよい。サムプルツク等の前掲書参照。

形質転換された宿主細胞を培養するために使用する培地は、問題の宿主細胞を成 長するのに好適ないかなる通常の培地であってもよい。発現されたエンドグルカ ナーゼは、好都合には、培地に分泌してもよく且つ細胞を遠心分離または濾過に より培地から分離し、培地のタンパク質成分を硫酸アンモニウムなどの塩により 沈殿した後、イオン交換クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィ ーなどのクロマトグラフィー法を施すことを包含する周知の方法によって、それ から回収してもよい。

前記のような組換えＤＮＡ技術、タンパク質精製技術、発酵および突然変異の技 術または技術上周知である他の技術を使用することによって、高純度のエンドグ ルカナーゼを与えることが可能である。

前記セルラーゼの本組成物中の量は、洗浄液に配送すべき酵素タンパク質の量が ０．００５〜４０Ｂ／洗浄液１リツトル、好ましくは０．０１〜１０ｍｇ／洗浄 液１リットルであるような量であるべきである。

柔軟化粘土 本洗剤組成物の１つの必須成分は、柔軟化粘土である。

技術上使用されるいかなる粘土またはそれらの混合物も、本発明て使用てきる。

好ま１２い例は、英国特許第１゜４（］（１，８９８号明細書または米国特許第 ５，０１９゜２９２号明細書に開示されている。

このような粘」−のうちには、各種の熱処理カオリンおよび６種の多層スメクタ イトが包含される。技術から既知のように、好ましいスメクタイト粘土は、少な くとも５０ｍｅｑ／粘度１００ｇの陽イオン交換容ｆｉ（０，２〜０．６の層電 荷に対応）を示す。

５〜５０μｍ範囲内の粒径を有する粘土が、更に好ま追加的に好ましいスメクタ イト粘土は、一般式（式中、ｙは０てあり；またはｙが０でないならば、ＭｅＩ ＩＩはＡ　１　ｓ　Ｆ　ｅまたはＢであり、Ｍｎ＋は一価（ｎ−１）または二価 （ｎ＝２）金属イオンであり、例えば、Ｎａ５Ｋ、Ｍｇ、Ｃｕ、Ｓ　ｒから選ば れる）のへクトライト粘土である。（ｘ＋ｙ）の値は、ヘクトライト粘土の層電 荷である。本発明の洗剤組成物に好適なヘクトライト粘土は、少なくとも５０％ が０．２３〜０．３１の範囲内であるような層電荷分布を有する。

少なくとも６５％が０．２３〜０．３１の範囲内であるような層電荷分布を有す る天然起源のへクトライト粘土が、好ましい。

布帛柔軟化スメクタイト粘土鉱物の特定の非限定例は、次の通りである： ナトリウムモンモリロナイト ボルフ１ノイ（Ｖｏｌｃｌａｙ　）　Ｂ　Ｃ””ゲルホ・ノイド（Ｇｃｌｗｂｌ Ｌｅ）　ＣＰ　””チギソージェル（Ｔｈｉｘｏ　−Ｊｅｌ　）　（Ｒ）ペン・ エイ・ゲル（Ｂｅｎ　−Ａ　−Ｇｅｌ　）　（Ｒ）ラポナイト　（Ｌａｐｏｎｉ ｔｅ）　Ｓ　Ｐ　”ナトリウムサポナイト バランｌ、（［ａｒａｓｙｍ　）　Ｎ　Ａ　Ｓ　］、　ＯＯ””カルシウムモン モリナイト ッ７　ト、’ｙ　−ｙ　−’ｌ　（Ｓｏｆｔ　Ｃ１ａｒｋ）　（＋？）キモウロ スからのＣ５Ｍ−粘土（１？）本を明で白゛用な柔軟化粘土の量は、洗剤組成物 の形に依ｒ１する。一般に、それは、（］、５％、１％または８％の下限から５ ［１０ｏ、２０％または１５％の上限までであることができる。

好ましい任意成分 粘土凝集剤は布帛処理組成物においては通常用いられない。逆に、人は粘土汚れ を布帛から除去する上で役立つ粘土分散剤を用いようとする。しかしながら、粘 土凝集剤は油井掘削のような他の産業で及び冶金における鉱石浮選のために非常 によく知られている。これら物質のほとんどはエチレンオキシド、アクリルアミ ド、アクリル酸、ジメチルアミノエチルメタクリレート、ビニルアルコール、ビ ニルピロリドン、エチレンイミンのようなモノマーから誘導されるかなり長鎖の ポリマー及びコポリマーである。グアーゴムのようなゴム類も同様に適切である 。

エチレンオキシド、アクリルアミド又はアクリル酸のポリマーが好ましい。これ らのポリマーはそれらの分子量（重量平均）が１００，０００〜１０百万の範囲 内であるならば粘土の沈着を劇的に高めることが発見された。

このようなポリマーは好ましくは１５０，０００〜５百万、更に好ましくは１５ ，０００〜８００，０００の（重量平均）分子量を有する。

最も好ましいポリマーはポリ（エチレンオキシド）である。分子量分布は狭い分 子量分布のポリ（エチレンオキシド）の標準に対してゲル透過クロマトグラフィ ーを用いて容品に調べることができる。

粘土凝集剤の量は粘土の％として表示した場合０〜２１、）　９６の範囲である 。８００，０００以下のく重量平均）分子量を有する粘土凝集剤の場合、好まし い量は粘土の２〜２０％である。８００，０００を超える（重量平均）分子量の 場合、好ましい量は粘土の０．００５〜２％である。

もう１つの好ましい任意成分は、置換ポリシロキサンであり、シロキサンの量は 粘土の重量で０〜５０％、好ましくは０．１〜２０％、最も好ましくは１．０〜 １０％の範囲である。

本発明で有用なンロキサン類は下記一般式を有する柔軟化直鎖又は分岐鎖有機官 能基ポリジーＣアルキルシロキサンとして記載できる： 」二記式中ＲはＣアルキルである； Ｒ′はＲ又は（Ｃオキシド）　のポリエーテルであり、Ｈ又はＲのキャッピング 基を有する：Ｒ′は分岐鎖又は直鎖Ｃアルキルである：■−４ ｑｌ及びｑｌは整数である； ｍ及び（ｑｌ、＋ｑ２）は４〜１７００の整数である：ｎはＯ〜６の整数である ； Ｙは（Ｃオキシド）ｋのポリエーテル（ｋは７〜１００の平均値を有する）であ り、Ｈ又はＣアルキルのキャッピング基を有する； 又はＹは以下である： 上記においてＸ及びＶは−Ｈ，−Ｃアルキル、一〇−アリール、−Ｃシクロアル キル、−ＣＮＨ−ＣＯＲから選択される；但し窒素ｌ−６２ゝ は下記を表すように四級化できる： ■ 上記においてＷはＸ及びＶから選択できる；又はＹは以下である： Ｈ−Ｃ−Ｔ Ｈ−−Ｃ−−Ｈ 上記においてＴ及びＰは−Ｈ，−ＣＯＯＨ。

−ｃｏｏ−ｃ　アルキル又はエポキシーＣシクロアルキルから選択される。

」二記一般式の好ましいンロキサン類は（ｑｌ＋ｑ２）が５０〜１５００の整数 、ｍが４〜１００の整数であることて特徴付けられる。

上記一般式の最も好ましいンロキサン類は下記のいずれかで特徴付けられる。

−ＲＳＲ−はメチル、Ｒ′はプロピル、（ｑｌ＋ｑ２）は３２９、ｍは２１、ｎ は１、Ｙは１２のエチルオキシド及び酢酸キャッピング基からなるポリエーテル である：又は −ＲＳＲ−はメチル、Ｒ′はプロピル、（ｑｌ＋ｑ２）は４８５、ｍは１５、ｎ は１、Ｙは１２のエチルオキシド及び酢酸キャッピング基からなるポリエーテル である；又は −Ｒ，Ｒ−はメチル、Ｒ′はメチル−２−プロピル、（ｑｌ　＋　ｑｌ）は１４ ７０、ｍは３０、ｎは１、Ｙは−（アミノエチル）アミンである。

本発明の洗剤組成物は水性分散液として液体形で提供できる。液体形である場合 、洗剤組成物は柔軟化粘土、シロキサン及び粘土凝集剤と一緒に沈降防止剤を更 に含むことが好ましい。

適切な沈降防止剤は粒子を液体洗剤組成物内に懸濁させる上で十分に活性化され た支持マトリックスを提供しなければならない。

この意味における粒子は液体洗剤組成物の望ましい性質のために懸濁化しうるサ イズの顆粒又は小滴である。

通常粒度は２００μｍ以下である。個別的粒子は、洗剤組成物の必須又は任意化 合物を１種以上含むことができる。

最後に、許容される沈降防止剤は製品の粘性、弾性又は美観に悪影響を与えては ならない。

これらの沈降防止剤又はその混合物は本発明の組成物ｒｔ１０．２５〜５％のレ ベルで用いられる。

例えばベントン（Ｂｅｎｔｏｎｅ■）群の粘土及びヒユームドシリカのような親 有機性四級化アンモニウム粘土化合物が本発明で使用に適した沈降防止剤の例で ある。ベントン■レオロジー添加剤はカチオン及び少くとも１０の炭素原子を有 する少くとも１つのアルキル基を含む有機化合物と離層格子を含んだ粘土の製品 として記載されている。ベントン■はある有機液で膨潤する性質を有する。

親有機性四級化アンモニウム粘土化合物が米国特許第４゜２８７．０８６号明細 書で記載されたように好ましい沈降防止剤である。

ヒユームドシリカも本発明の組成物に優れた沈降防止特性を付与する。ヒユーム ドシリカは水素−酸素炉で四塩化ケイ素の燃焼により得られるコロイド形のシリ カとして通常定義される。ヒユームトンリカはインキ、樹脂、ゴム、ペイント及 び化粧品で増粘剤、チキソトロープ及び補強剤として通常用いられる。ＣＡＤ− ０−３ＩＬ■ヒー−ムトシリカは本発明で使用に適した沈降防止剤である。ベン トン■粘土、ヒユームドシリカ又はセルロース系懸濁化剤の混合物も適切な沈降 防止剤である。

得られた液体組成物のレオロジー特性は商業上許容される製品にとり非常に重要 である。糸引性（即ち、弾性）、濃厚又は塊状として記載できる液体は望ましく ない。

上記沈降防ＩＬ剤はこれらの望ましくないレオロジー性質を避けており、一方で 良好な消費者アピール性を有する流動性均一製品を維持している。約１００〜約 １０００ｋｇ／　（ｍｓ）範囲内の粘度が望ましい。

液体組成物が可塑性レオロジーを示すことも望ましい。

可塑性流動特性を示す物質は加えた剪断応力が臨界最少値を超えた後に流動する だけである。

任意成分 本組成物は洗剤組成物の一部を通常形成する任意成分を典型的には含有する。再 沈着防止及び汚れ懸濁化剤、ケイ光増白剤、漂白剤、漂白活性化剤、起泡抑制剤 、抗凝固剤、色素及び顔料がこのような任意成分の例であり、所望により様々な 量で添加できる。

ここで適した再沈着防止及び汚れ懸濁化剤としてはメチルセルロース、カルボキ シメチルセルロース及びヒドロキシエチルセルロースのようなセルロース誘導体 がある。これらの物質は通常組成物の０．５〜１０重量％、更に好ましくは０． ７５〜８重１％、最も好ましくは１〜６重量％のレベルで用いられる。それらは 顆粒洗剤組成物たけてはなく液体洗剤組成物でも前記懸濁化剤を補うために使用 できる。

好ましいケイ光増白剤は性質上アニオン系であり、その例は４．４１−ビス（２ −ジェタノールアミノ−４−アニリノ−５−）リアジン−６−イルアミノ）スチ ルベン−２：２１−ジスルホン酸二ナトリウム、４．４”ビス（２−モルホリノ −４−アニリノ−ｓ−トリアジン−６＝イルアミノ）スチルベン−２：２１−ジ スルホン酸二ナトリウム、４，４１−ビス（２，４−ジアニリノ−５−トリアジ ン−６−イルアミノ）スチルベン−２；２１−ジスルホン酸二ナトリウム、４， ４１　１１−、、。

（２，４−ジアニリノ−８−トリアジン−６−イルアミノ）スチルベン−２−ス ルホン酸−ナトリウム、４．４１−ビス〔２−アニリノ−４−（Ｎ−メチル−Ｎ −２−ヒドロキシエチルアミノ）−Ｓ−トリアジン−６−イルアミノコスチルベ ン−２：２１−ジスルホン酸二ナトリラム、４，４　ビス（４−フェニル−２， １，３−トリアゾール−２−イル）スチルベン−２：２１−ジスルホン酸二ナト リウム、４，４　ビス〔２−アニリノ−４−（１−メチル−２−ヒドロキシエチ ルアミノ）−Ｓ−トリアジン−６−イルアミノコスチルベン−２：２１−ジスル ホン酸二ナトリウム及び２−スチルビル−４１１−（ナフト−１１，２，４，５ ）−１，２，３４す１　。

アゾール−２１１−スルホン酸ナトリウムである。

いかなる粒状無機過水和漂白剤も組成物の３〜４０重量９６、更に好ましくは８ 〜２５重量％、最も好ましくは１２〜２０ｍｆｆ１％の量で使用できる。このよ うな漂白剤の好ましい例は過ホウ酸ナトリウムー水和物及び四水和物、過炭酸塩 とそれらの混合物である。

もう１つの好ましい別にミックスされる成分は漂白活性化剤と通常称されるベル オキシカルボン酸漂白前駆物質であり、これは顆粒洗剤において小球又は凝集形 で加えられることか好ましい。このタイプの適切な化合物の例は英国特許第１５ ８６７６９号及び第２１４３２３１号明細書で開示され、それらの小球形への形 成方法は欧州公開特許出願第００６２５２３号明細書で記載されている。このよ うな化合物の好ましい例はテトラセチルエチレンジアミン及び３，５．５−トリ メチルへキサノイルオキシベンゼンスルホン酸ナトリウムである。

漂白活性化剤は通常組成物の０．５〜１０重量％、更に多くは１〜８重量％、好 ましくは２〜６重量％のレベルで用いられる。

もう１つの任意成分はシリコーン類及びシリカ−シリコーン混合物で例示される 起泡抑制剤である。シリコーン類は通常アルキル化ポリシロキサン物質で代表さ れ、一方シリカは様々なタイプのシリカエーロゲル、キセロゲル及び疎水性シリ カて例示される微細形で通常用いられる。これらの物質は起泡抑制剤が水溶性又 は水分散性で実質上非界面活性洗剤不浸透性キャリアで有利に放出できるように 配合された粒子として配合することができる。一方起泡抑制剤は液体キャリアに 溶解又は分散して、１種以上の他の成分にスプレーすることで適用してもよい。

前記のように、有用なシリコーン起泡制御剤は前記タイプのアルキル化シロキサ ン及び固体シリカの混合物からなることかできる。このような混合物は固体シリ カの表面にシリコーンを添加することで製造される。好ましいシリコーン起泡制 御剤は約１：１〜約１＝２のシリコ−ン対シラン化ンリカ重量比で約５００〜約 ２００，０００範囲の分子量を有するジメチルシリコーン液と完全に混合された １０〜２０ｍμ範囲の粒度及び５０ｒｒｒ／ｇ以上の比表面積を有する疎水性シ ラン化（最も好ましくはトリメチルシラン化）シリカで代表される。

好ましいシリコーン起泡制御剤はＢａｒｔｏｌ　Ｉｏｔａらの米国特許第３．９ ３３，６７２号明細書で開示されている。

他の特に有用な起泡抑制剤は１９７７年４月２８日付で公開されたドイツ特許出 願ＤＴＯ３第２，６４６，１２６号明細書で記載された自己乳化性シリコーン起 泡抑制剤である。このような化合物の例はダウ・コーニング（Ｄｏｗ　Ｃｏｒｎ ｉｎｇ）から市販されるＤＣ−５４４であって、それはシロキサ〉７／グリコー ルコポリマーである。

Ｌ記起泡抑制剤は通常組成物の０．００１〜２重量％、好ま【７くは００１〜１ 重量％のレベルで用いられる。

起泡調節剤の配合は別個の粒子として得ることが好ましく、これによりＣ−Ｃ脂 肪酸、微結晶ロウとエチμンオキシド及びプロピレンオキシドの高Ｍ　Ｗコポリ マーのような他の起泡制御物質をその中に含有させることができ、これらは配合 されてないとマトリックスの分散性に°ｐ′、影響を１ｊえる。このような起泡 調節粒子の形成技術は前記Ｂａｒｔｏｌ　Ｉｏｔａらの米国特許第３，９３３． ６７２号明細書で開示されている。

他の有用なポリマー物質は分子量が具体的には１０００〜１００００、更に具体 的ニ＋、ｔ　２０００〜８０００　。

最も好ましくは約４０００のポリエチｌノングリコール類である。これらは０． ２０〜５０〜５重量に好ましくは０．２５〜２．５ｆｆｆｆｆｉ９６のレベルで 用いられる。これらのポリマーと前記ホモ又はコポリマーポリカルボキシレート ポリマーは遷移金属不純物の存在下で白色維持、布帛灰分沈着と粘土、タンパク 質及び酸化性ｌりれのクリーニング効能を改善するためにａ益である。

本発明の組成物で有用な汚れ放出剤は慣用的には様々な配列下にあるテレフタル 酸とエチレングリコール及び／又はプロピレングリコール単位とのコポリマー又 はターポリマーである。このようなポリマーの例は一般譲渡された米国特許第４ １１６８８５号及び第４７１１７３０号と欧州公開特許出願第０２７２０３３号 明細書で開示されている。欧州特許Ａ第０２７２０３３号明細書で特に好ましい ポリマーは下記式を有する・（ＣＩｌ　（ＰＥＧ）　）　（ＰＯＩ＋）　［（Ｔ −ＰＯ）　（Ｔ−ＰＥＧ）３　４３０．７５　０，２５　２．８ ゜、４］Ｔ（ＰＯＩ＋）　（（ＰＥＧ）４３ｅｌ＋３）。、７５０．２５ 上記式中ＰＥＧは−（ＱＣＨ）Ｏ−１ｐｏはＣＯＣ３Ｈ６０）及びＴ　ｉ；ｉ　 （ｐ　ｃ　ＯＣ６Ｈ４ＣＯ）　テある。

典型的＋、：はＭＷ５０００〜２００００．好ましくハ１００００〜１５０００ のポリビニルピロリドン類のようなあるポリマー物質も洗浄プロセス中に布帛間 における不安定色素の移動を妨げる上で有用な剤を形成する。

他の／＋ｉ帛柔軟柔軟剤発明において洗剤組成物中に配合できる。これらの剤は タイプ上無機でも又は有機であってもよい。ｆＴ機市帛柔軟剤としては英国特許 Ａ第１５１４２７６号及び欧州特許Ｂ第００１１３４０号明細書で開示されたよ うな非水溶性三級アミン類、欧州特許Ｂ第００２６５２７号及び欧州特許Ｂ第０ ０２６５２８号明細書で開示されたそれらとモノＣ−Ｃ四級アンモニラム塩との 組合せと欧州特許Ｂ第０２４２９１９号明細書で開示されたようなジ長鎖アミド 類がある。布帛柔軟系の他の有用な有機成分としては欧州特許Ａ第０２９９５７ ５号及び第０３１３１４６号明細書で開示されたような高分子量ポリエチレンオ キシド物質がある。

非水溶性三級アミン類又はジ長鎖アミド物質のような有機布帛柔軟剤は０．５〜 ５重量％、通常１〜３重量％のレベルで配合され、−刃高分子量ポリエチレンオ キシド物質及び水溶性カチオン系物質は０．１〜２重量％、通常０．１５〜１． ５重量％のレベルで加えられる。顆粒洗剤の場合、これらの物質は組成物のスプ レー乾燥部分に通常加えられるが、一部の場合においてそれらを乾燥混合粒子と して加えるか又はそれらを組成物の他の固体成分に溶融液体としてスプレーする ことがより便利であろう。

ここでプロテアーゼ、リパーゼ及びアミラーゼのような特定のセルラーゼ製剤以 外の酵素も本組成物において存在できる。

製造プロセス 本発明による組成物は、それらが液体又は顆粒であるかに依存して、温度及びｐ Ｈ時間分布に応じた液体ミキシング、溶融、溶解、乾燥ミキシング、スプレー乾 燥、凝集、造粒とこれらあらゆる技術の組合せを含めた様々な方法から製造する ことができる。

顆粒洗剤組成物、特に高密度を有する本組成物（コンパクト）の好ましい製造方 法はスプレー乾燥、高速ミキサーでの凝集及び乾燥ミキシングの組合せからなる 。

比較的不溶性のアニオン系界面活性剤を含有する第一顆粒成分はスプレー乾燥さ れ、スプレー乾燥製品の一部は転用され、残部と再ブレンドされる前に低レベル のノニオン系界面活性剤スプレーに付される。第二顆粒成分はロディジ（Ｌｏｄ ｊｇｅ）Ｋ　Ｍ　ミキサーのような連続高速ブレンダーで中和剤として炭酸ナト リウムを用いるアニオン系界面活性剤酸の乾燥中和により製造される。次いで、 第−及び第二成分はカルボキンレートキレート化剤、無機ベルオキシゲン漂白剤 、漂白活性化剤、汚れ懸濁化剤、ケイ酸塩、ポリカルボキシレートポリマー及び 酵素のような他の乾燥ミックス成分と一緒にコンベヤベルトに供給され、そこか らそれらは水平回転ドラムに移され、そこで香料及びシリコーン起泡抑制剤が製 品上にスプレーされる。高度に好ましい組成物において、低（約２％）レベルの 微細結晶アルミノケイ酸塩が密度を増加させて顆粒流動特性を改善するために導 入されるドラムミキシングステップが更に用いられる。

本発明による液体洗剤組成物の好ましい製造方法に関して、液体洗剤組成物はｐ Ｈ及び温度が常に一定に保たれるか又は液体洗剤の生産中に低下される場合に有 利に製造されることが発見された。

実施例 下記の実施例は、本発明を例示し、その理解を容易にするものである。

個々の成分に対する略号は、下記の意味を有する。

ＬＡＳ　：　線形ドデシルベンゼンスルホン酸のナトリウム塩 Ｔ　Ａ　Ｓ　：　１脂アルコール硫酸のナトリウム塩ＡＳ・　アルキル（ＣＦ４ 〜Ｃ，５）ｌｉＫ酸のナトリウム塩Ａ　Ｏ：　Ｃ１２〜Ｃ１４アルキルジメチル アミンオキシドＦＡ２５Ｅ７　エチレニ／オキシド約７モルでエトキシル化した （ＣＩ２〜Ｃ１５）脂肪アルコールＣＡＴ：　Ｃ１２〜Ｃ１４トリメチル（また はジメチル（ヒドロキシエチル））アンモニウムクロリド粘土、　モントモリロ ナイト粘土 ゼオライＩ−４Ａ　：　平均粒度が１〜１０μｍのゼオライト４Ａのナトリウム 塩 ５ＫＳ−６結晶性の重層シリケート（Ｉｌｏｃｃｈｓｔ）ＡＡ／ＭＡ　：　アク リル酸およびマレイン酸の共重合性ポリカルボキシレートポリマー ＰＡＰ　：　ポリアクリル酸ポリマー、分子量１０００→ＣＭＣ：　カルボキシ メチルセルロースホスホネート：　エチレンジアミンテトラメチレンホスホン酸 のナトリウム塩 ＡＯ５＋　Ａ−オレフィン（ＣＩ２〜Ｃｌ８）スルホン酸、ナトリウム塩 ＮＭＮ：　Ｎ−メチルＮ−１−デオキシグリシチル（ＣＩ２〜０１８）アルキル アミド ＥＤＴＡ：　エチレンジアミンテトラアセテートのナトＰ　Ｂ　４　：　Ｎ　ａ 　Ｂ　Ｏ−Ｈ０・３　Ｈ２０ＴＡＥＤ−テトラアセチルエチレンジアミンＮ０Ｂ Ｓ＋　ノナノイルオキシベンゼンスルホン酸ナトリウム Ｐ、Ａ、：　スルホン化フタロシアニン亜鉛シリケート（Ｒ−ｎ）：　ＳｉＯ／ Ｎａ２０−ｎアミラーゼ：　Ｔｅｒｍａｓｙｌ　ＯＵＴ　（Ｎｏｖｏ−Ｎｏｒｄ ｌｓｋ）リパーゼ：　Ｌｉｐｏｌａｓｃ　ＬＯＯＴ　（Ｎｏｖｏ−Ｎｏｒｄｌｓ ｋ）プロテアーゼ：　５ａｖｉｎａｓｅ　４Ｔ　（Ｎｏｖｏ−Ｎｏｒｄｌｓｋ） Ｓ　Ｐ　３００　：　Ｃｅｌｌｕｚｙｍｅ　５Ｐ３００　（Ｎｏｖｏ−Ｎｏｒｄ ｌｓｋ製の先行技術によるセルラーゼ） ４３　ｋ　Ｄ・　本発明に定義されたセルラーゼによる約４３ｋＤセルラーゼ ＳＳＳ　起泡抑制系（シリカ／シリコーン混合物）ＮＴＡ　：　ニトリロ三酢酸 のナトリウム塩ＴＡＥ−１，１：　エチレンオキシド約１１モルでエトキシル化 した牛脂アルコール ＤＴＭＡ　二牛脂メチルアミン ＣＦＡ・　ヤン油脂肪酸 ＨＦＡ　：　水素化Ｃ脂肪酸 ■６〜２２ 軟度の比較を容易にするため、下記の試験処理法を用いた。

清浄な缶出の洗濯荷重３．５ｋｇを、自動ドラム式洗濯機１ｖ１ｉｅｌｅＲ４２ ３中て６０℃で１．５時間洗浄し２　＋　２　＋ た。水の硬度は１リツトル当たりＣａ　／　Ｍ　ｇ２５モルであり、この組成濃 度は洗浄液では０．７％であった。軟度を評価するため、パイルタオル軟度トレ ーサーのｒｌｉＩ、ｙＩれを加えた。軟度の評価の前に、軟度トレーサーをライ ン乾燥した。

試験結果の評価は、２つの方法で行った。

比較用の軟度Ｊ・１価は、Ｏから４までのパネル得点単位の尺度を用いて専門判 定音が行った。この尺度では、０は差がない場合に１−７えられ、４は最大の差 に与えられる。

軟度は、Ｆ記のように使い古したパイル（＋ｉ切れを８回の洗浄サイクルの後に 評価した。

もう一方の軟度評価は、実験室軟度測定装置である、Ｋａｗａｂａｔａ　ＫＥＳ −ＦＢＩ装置、Ｋａｔ。

Ｔｅｃｈ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ　Ｌｔｄ、Ｊａｐａｎを用いて行った。

この装置では、軟度トレーサーは、２個の相互に移動可能なりランプの間に配置 される。比較用軟度は、５度の角度（２ＨＧ５）での剪断ヒステリシスによる８ 回の洗浄サイクルの後にＪｌ定した。剪断ヒステリシスの減少は、軟度性能の増 加を反映した。？１＃ｊ定値は３枚の使い古したパイル布切れの平均値である。

古くなった使用物は、１０回の通常の洗浄の最小値によって定義される。

実施例Ｉ〜１ｖ 基剤としての洗剤組成物を評価すると、最も近い先行技術と思われるＥＰ−Ａ− １７７１６５号明細書に対して選択した組成物は添加剤より高度な軟化性能を示 す。

実施例■および１１は、軟化用粘土とセルラーゼとを組み合わせることによって 悪影響を生じないという先行技術の理論を支持している。しかしながら、この結 果は、（＝１の利益も得られないということら示している。実際に、この先行技 術による開示の粘土とセルラーゼとの組み合わせは同の利益も得られないので、 これがもたらす生態環境および経済上の負担のためにこれが商業的に成功してい ないと考えられる。

実施例Ｉｌ＋および＋Ｖでは、１ｖは本発明によるものであるが、軟化用粘土と セルラーゼの性能によって添加剤を［回る利益が得られることを明らかに示して いる。

実施例１１からは、粘土の利益は、先行技術によるセルラーゼ環境°Ｃは０．３ ＰＳＵとなる。一方、４３ｋＤセルラーゼ環境で試験を行っている実施例１ｖで は、結果は６倍量−Ｌに増加して、数値は２ＰＳＵに達する。

実施例Ｉ〜１ｖの全試験結果を第１１！表に示す。用いた洗剤組成物は、第Ｖ表 の組成物ｌを基剤としている。第１ＩＩ表の最後の２欄では、軟化用粘土と組み 合わせる選択されたセルラーゼについて全般的に本発明が優れているという傾向 が見られる。しかしながら、このことは、Ｆ記の実施例で史に明確に説明される 。

実施例Ｖ　−Ｖｌｌｌ 基剤としての洗剤組成物である第Ｖ表の組成物１１を、前記の試験法によって評 価し、Ｋａｗａｂａｔａ装置でＡｌ１定する。

軟化を示ず４−１定値の減少は、粘土単独では５％であり、高活性セルラーゼ環 境独では１５％である。それ故、これらの組み合わせについて予想される値は約 ２０％であったか、意外なことにはこの組み合わせはこの予想値を上回り、ｒ・ 想値の約２倍の３９％に達する。

第Ｖ表の組成物１１１〜Ｘｌ＋は、軟化用粘土と高活性セルラーゼとを含み且つ 本発明の目的にしたがって行うことが判っている実施例では、布帛処理性能が極 めて良好である。

これらの組成物中の粘土はモントモリロナイトまたはへクトライト粘土であり、 組成物１１１〜１ｖでは１０％、組成物Ｖｌｌ　、ＶｌｌｌおよびＸでは１２％ 、組成物ｘ１およびＸｌ＋では８．６％の濃度であった。組成物ＩＸは、Ｂｅｎ Ｌｏｎｅ　Ｒ類の沈降防１１剤をなんており、粘１の沈降を防＋ｔ−するように なっている。セルラーゼは、一般的には洗浄溶液１リツトル当たり０．０１〜１ ０，０、好ましくは０．１〜０．５ｍｇ添加される。

第１１１表　実施例１〜１ｖの組成物および結果試験洗浄溶液は第ｖ表の洗剤（ ＤＩ）０．７重量％を含んでいた。

本発明の粘土が洗浄溶液の０．０８７５重量％加えられるときには、ＳＰｌう０ ０についてはセルラーゼタンパク質が、洗浄溶液の２２００Ｘ１０’重量？０と なり、４’３ｋＤについてはセルラーゼが洗浄溶液の２４Ｘ１０’重瓜％となる ようにセルラーゼを加えた。

これらの濃度は、ＣＭＣ−エンドアーセ活性が等しく洗浄溶液１リツトル当たり １０５ＥＶＵとなるように選択した。

第１ｖ表　粘土とセルラーゼとの相乗効果材　洗浄溶液のＩＯ’ｆｆｔｍ９６の タンパク質第Ｖ表　洗剤の組成 第Ｖ表続き 第Ｖ表　洗剤の組成 第ｖ表続き 配列　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１： Ｃ（＋ＡＡＡＴＧＡＣＡ　（ＴＣＣＣＡＡＴＣＡ　ＣＴＣＴＡＴＴＡＧＴ　ＴＣ ＴＴＧＴＡＣＡＴ　ＡＡＴＴＴＣＧＴＣＡ　ＴＣＣＣＴＣＣ`にＧ　１０２４ ＧＡＴＴＧＴＣＡＣＡ　ＴＡＡＡＴＧＣＡＡＴ　ＧＡＧＧＡＡＣＡＡτＧＡＧＴ ＡＣ１０６０配列：ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２＋ Ｉｕ 配列：ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３： ＡＡＡＡＡＡＡＭＡ　ＡＡＡＡＡＡＡＡＡ　１４７］配列・ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ ・４； ＡｓｒＩτ″ｈｒ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｌｅｕ　Ｇ）ｙ　Ａｓｐ　Ａｓｒ ＋　Ｈａｓ　Ｐｈｉ　Ａｓｐ　Ｌｅｕ　Ｍｅｔ　Ｍｅｔ　Ｐ秩B ＋３０　１３５　１４０ Ａｓｐ　Ｓｅｒ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ｇｌｕ　Ｌｅｕ　しｅｕ　Ｌｙｓ　Ａｓｏ　 Ｇｌｙ　Ｃｙｓ　Ｈｉｓ　Ｔｒｐ　Ａｒｑ　Ｐｈｅ　ＡｓｎＴｒｏＰｈｅ　Ｇｌ ｕ　Ａｓｎ　Ａｌｘ　Ａｓｐ　Ａｓｎ１４０　ＡＳ９　Ｐｈｅ　Ｔｈｒ　Ｐｈｅ 　Ｇｌｕ　Ｇｉｎ　Ｖｉｌ　Ｇ１ｎＣｙｓ　Ｐｒ＠　ｕｙｓ　Ａｌａ　ｕｅｕ　 しｅｕ　Ａｓｏ　１１ｅ　Ｓｅｒ　Ｃ１ｙ　Ｃｙｓ　Ｌｙｓ　Ａｒｇ　Ａｓｏ　 Ａｓｐ　Ａｓ。

２＋０　２１５　２２０ Ｐｒｏ　Ｇｌｎ　Ｌｙｓ　Ｔｈｒ　Ｌｙｓ　Ａｓｐ　Ｓｆｒ　Ａｌａ　Ｐｒｏ　 Ｖａｌ　Ｖａｔ　Ｇｌｒ＋　Ｌｙｓ　Ｓｆｒ　Ｓａｒ　Ｔｈ■ Ｌｙｓ　Ｐｒｏ　ＡＴｍ　Ａｌａ　Ｇｉｎ　Ｐｒｏ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏτｈｒ　Ｌ ｙｓ　Ｐｒｏ　Ａｌａ　Ａｓｏ　Ｌｙｓ　Ｐｒｏ　Ｇ１ｎＩｈｒ　ＡＳＧＩ　Ｌ ｙｓ　Ｐｒｏ　Ｖａｌ　Ａｌａ　Ｔｈｒ　Ｌｙｓ　Ｐｒｏ　Ａｌａ　Ａｌａ　Ｔ ｈｒ　Ｌｙｓ　Ｐｒｏ　Ｖａｔ　Ｇ１■ ２９０　２９５　コ０Ｏ Ｐｒｏ　Ｖａｔ　Ａｓｎ　Ｌｙｓ　Ｐｒｏ　Ｌｙｓ　Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｇｉｎ　 Ｌｙｓ　Ｖａｌ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ｔｈｒ　Ｌｙｓ　Ｔｈｒ３０５　３１０　３ １５　コ２０ ＾ｒｇ　Ｇｌｙ　Ｓｅｒ　Ｃｙｓ　Ｐｒｏ　Ａｌａ　Ｌｙｓ　Ｔｈｒ　ＡＳＧＩ 　Ａｌａ　Ｔｈｒ　Ａｌａ　Ｌｙｓ　Ａｌａ　Ｓｅｒ　ＶａP ３２５　：ｌ］０　３コ５ Ｖａｌ　Ｐｒｏ　Ａｌａ　Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ｇｌｎ　Ｃｙｓ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　 Ｓｉｒ　Ｌｙｓ　Ｓｕｒ　Ａｌａ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ａｓｎ１４０　１３４５　 コ５Ｏ Ｇｌｙ　Ａｓｎ　Ｌｅｕ　ＡＬａ　Ｃｙｓ　Ａｌｉ　Ｔｈｒ　Ｃ１１Ｙ　Ｓｅｔ 　Ｌｙｓ　Ｃｙｓ　Ｖａｌ　Ｌｙｓ　Ｇ１ｒ＋　Ａｓｎ　Ｇ撃■ コ５５　３６０　３６５ 特　許　庁　長　官　殿 １　事件の表示 平成　４年特許願第５０６５９７号 ＰＣＴ／マＪＳ　９２１００１９０ ２　発明の名称 高活性セルラーゼおよび軟化クレーを含む洗剤組成物 ３　禰正にする者 事件との関係　特許出願人 発送日　平成　６年　３月　８日 ６　補正の対象 委任状、明細書及び請求の範囲の翻訳文、要約の翻訳文 フロントページの続き （５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，５識別記号　庁内整理番号（Ｃ１２Ｎ　１５１５６ Ｃ１２Ｒ１：６４５） （７２）発明者　ベーク、アンドレ　セザールベルギー国ポンハイデン、パトセ ステーンベーク、２７３ Ｉ

Claims (24)

【特許請求の範囲】
1. １．界面活性剤、ビルダー系、軟化用粘土およびセルラーゼを含んで成る洗剤組 成物であって、前記のセルラーゼが洗濯試験溶液のセルラーゼタンパク質２５× １０−６重量％においてＣ１４ＣＭＣ法により固定した放射能標識下カルボキシ メチルセルロースを少なくとも１０％除去することを特徴とする、洗剤組成物。
2. ２．セルラーゼ化合物が、Ｈｕｍｉｃｏｉａ　ｉｎｓｏｌｅｎｓ、ＤＳＭ１８０ ０由来の高度に精製された約４３ｋＤのセルラーゼに対して生じた抗体と免疫反 応性であるかまたは前記の約４３ｋＤのエンドグルカナーゼと相同性である均質 なエンドグルカナーゼ成分から本質的に成る、請求の範囲第１項に記載の洗剤組 成物。
3. ３．前記のセルラーゼのエンドグルカナーゼ成分の等電点が約５．１である、請 求の範囲第２項に記載の洗剤組成物。
4. ４．前記のエンドグルカナーゼ成分をまたは前記のエンドグルカナーゼ成分の前 駆体をコードするＤＮＡ配列並びにエンドグルカナーゼ成分またはその前駆体を コードするＤＮＡ配列を有する組換えＤＮＡベクターで形質転換した宿主細胞を 培地中において、エンドグルカナーゼ成分またはその前駆体を発現させることが でき且つエンドグルカナーゼ成分を培養物から回収することができる条件下で培 養することを含んで成る方法によって、前記のエンドグルカナーゼ成分を産生す ることができる、請求の範囲第２または３項に記載の洗剤組成物。
5. ５．セルラーゼ化合物が、添付の資料ＩＤＮｏ．２に示されるアミノ酸配列を有 するエンドグルカナーゼ酵素であるかまたはエンドグルカナーゼ活性を示すその 相同配列である、請求の範囲第１項に記載の洗剤組成物。
6. ６．前記のエンドグルカナーゼ酵素がＨｕｍｉｃｏｌａｉｎｓｏｌｅｎｓの１種 によって産生される、請求の範囲第５項に記載の洗剤組成物。
7. ７．セルラーゼ化合物が、添付の資料ＩＤＮｏ．４に示されるアミノ酸配列を有 するエンドグルカナーゼ酵素であるかまたはエンドグルカナーゼ活性を示すその 相同配列である、請求の範囲第１項に記載の洗剤組成物。
8. ８．前記のエンドグルカナーゼ酵素がＦｕｓａｒｉｕｍの１種、例えばＦｕｓａ ｒｉｕｍ　ｏｘｙｓｐｏｒｕｍによって産生される、請求の範囲第７項に記載の 洗剤組成物。
9. ９．前記の酵素が、この酵素をコードするＤＮＡ配列を含むＤＮＡ構造体によっ て産生される、請求の範囲第５〜８項のいずれか１項に記載の洗剤組成物。
10. １０．ＤＮＡ配列が添付の配列資料ＩＤ＝１またはＩＤ＝３に示されるものであ る、請求の範囲第９項に記載の洗剤組成物。
11. １１．前記の宿主細胞がＴｒｉｃｌｏｄｅｒｕｃａまたはＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕ ｓのようなカビの１株、好ましくはＡｓｐｅｒｉｇｉｌｌｕｓ　ｏｒｙｚａｅま たはＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ、またはＨａｎｓｅｎｕｌａまたはＳ ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓの１株に属する酵母細胞、例えばＳａｃｃｈａｒｏｍ ｙｃｅｓ　ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅの１株である、請求の範囲第５〜１０項のいず れか１項に記載の洗剤組成物。
12. １２．前記の宿主細胞が細菌の１株、例えばＢａｃｉｌｌｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏ ｍｙｃｅｓまたはＥ．ｃｏｌｉの１株である、請求の範囲節５〜１０項のいずれ か１項に記載の洗剤組成物。
13. １３．前記のセルラーゼが、洗濯溶液に放出される酸素タンパク質の量が洗濯溶 液１リットル当たり０．００５〜４０ｍｇ、好ましくは洗濯溶液１リットル当た り０．０１〜１０ｍｇとなる量で含まれている、請求の範囲第１〜１２項のいず れか１項に記載の洗剤組成物。
14. １４．軟化用粘土の量が、洗剤組成物の重量の０．５％〜５０％、好ましくは５ ％〜２０％、最も好ましくは８％〜１５％である、請求の範囲第１〜１３項のい ずれか１項に記載の洗剤組成物。
15. １５．前記の軟化用粘土が、スメクタイト、、好ましくはモントモリロナイトま たはヘクトライト粘土であり、カチオン交換容量が少なくとも５０ｍｅｑ／１０ Ｏｇである、請求の範囲第１〜１４項のいずれか１項に記載の洗剤組成物。
16. １６．ポリマー性粘土凝集剤を、前記の洗剤組成物の前記の粘土の２０重量％ま でをも含んでいる、請求の範囲第１〜１５項のいずれか１項に記載の洗剤組成物 。
17. １７．置換ポリシロキサンを、前記の洗剤組成物の粘土の５０重量％まで、好ま しくは１．１％〜２０重量％をも含む、請求の範囲第１６項に記載の洗剤組成物 。
18. １８．顆粒状洗剤である、請求の範囲第１〜１７項のいずれか１項に記載の洗剤 組成物。
19. １９．前記の組成物が無機充填剤塩を１５重量％しか含まず、密度が組成物１リ ットル当たり５５０〜９５０ｇである、請求の範囲第１８項に記載の洗剤組成物 。
20. ２０．前記の無機充填剤塩が硫酸および塩化物のアルカリおよびアルカリ土類金 属塩から選択される、請求の範囲第１９項に記載の洗剤組成物。
21. ２１．無機充填剤塩を１０重量％を上回る量で含まない、請求の範囲第１９また は２０項に記載の洗剤組成物。
22. ２２．無機充填剤を５重量％を上回る量で含まない、請求の範囲第２１項に記載 の洗剤組成物。
23. ２３．密度が６５０〜８５０ｇ／リットルである、請求の範囲第１９〜２２項の いずれか１項に記載の洗剤組成物。
24. ２４．ホスフェート化合物を実質的に含まず、前記のビルダーが前記のポリカル ボキシレートポリマーの外に、アルミノシリケートイオン交換体、クエン酸塩、 カーボネートおよびそれらの混合物から選択される化合物をも含む、請求の範囲 第１〜２３項のいずれか１項に記載の洗剤組成物。