JPH0653676B2 - インターフェロンの相乗効果 - Google Patents

インターフェロンの相乗効果

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JPH0653676B2
JPH0653676B2 JP58199889A JP19988983A JPH0653676B2 JP H0653676 B2 JPH0653676 B2 JP H0653676B2 JP 58199889 A JP58199889 A JP 58199889A JP 19988983 A JP19988983 A JP 19988983A JP H0653676 B2 JPH0653676 B2 JP H0653676B2
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Description

【発明の詳細な説明】 本発明はインターフエロンの相乗効果に関するものであ
る。より詳細に述べると、本発明は、ヒトのガンマー
（γ）インターフエロン（ＩＦＮ−γ）（これはヒトの
免疫性インターフエロンと呼ばれることもある）を、ヒ
トのアルフアー（α）インターフエロン群（ＩＦＮ−
α）、そのハイブリツド（雑種）およびヒトのベーター
（β）インターフエロン（ＩＦＮ−β）のいづれかと組
み合せると、単独で試験した時のそれぞれの活性に基づ
いて公正に予想し得る活性より遥かに高い生物活性が得
られるという知見に基づくものである。この実験結果
は、これまで組み換えＤＮＡ技術を用いる以外は得るこ
とのできなかつた、あらゆる意味において、それぞれの
インターフエロンだけを含有している非常に純粋な製剤
を使用したので、インターフエロン蛋白質自体の真の協
力作用であることを示している。
本発明の背景、特に実例を示し、その実際について更に
詳細な情報を提供するために本明細書で引用した刊行物
は、本明細書の末尾に番号を付してまとめた。
ヒトのインターフエロンは、観察された生物学的性質お
よび分子構造の違いに基づいて３つのグループに分類さ
れている。例えば、ヒトのα−インターフエロンは、そ
のアミノ酸配列のほぼ８０〜８５％が相同である一群の
蛋白質群である。このα−系列の蛋白質は、抗ウイルス
作用および細胞増殖阻止作用の両方を持つていることが
知られている（文献１〜１０）。同様に、ＩＦＮ−α群
に共通の相同性の約２５〜３０％しか持たないＩＦＮ−
βも生物学的活性を示す（文献１１）。最近まで最もつ
かみどころのなかつたインターフエロンであるＩＦＮ−
γは、他の系列のインターフエロンと本質的に相同する
ところはないが、それでも他の２系列のインターフエロ
ンが示す活性と、その性質を異にしない活性を示す（文
献１２）。
ＩＦＮ−αおよびＩＦＮ−βインターフエロンは、ウイ
ルスにさらした細胞により生産され、それから単離され
ている。ＩＦＮ−γインターフエロンは、特異な細胞分
裂刺激に応じてリンパ球内で誘発される。天然の資源か
ら得られたインターフエロン製剤は、生物学的活性を比
較する研究に使用されて来た（文献１３−１６）。これ
らの研究は、哺乳動物（マウス）の蛋白質系に基づくも
のではあるが、その結果を、ヒトのインターフエロン製
剤を用いて実施することのできる対応する研究に、その
まま示唆を与えるものではない。更に、これらの研究
は、やむなく比較的不純な製剤を用いて行なわれたの
で、得られた結果がインターフエロンとしてのインター
フエロンによるのか、他の干渉性の不純物（蛋白性の不
純物またはその他のもの、例えば各種のリンホカイン）
によるのか、あるいはその混合物の組合せの効果による
のか、という解釈上の混乱が生じる。更に、これらの比
較的不純な製剤を得るのに使用した細胞は、細胞変性効
果を持つていることが知られており、このことも事態を
更に複雑にしている。
組み換えＤＮＡ技術によつてヒトのインターフエロンが
生産されるまで（文献１、１１、１２、１８）、天然の
ヒトのインターフエロンの生物学的性質の確定的な決定
は、純粋な物質を得るのが困難であるが故に混乱してい
た。インターフエロンは強力な活性を有するが故に、そ
の様な不純な製剤でも生物学的な分析が可能であつた
が、その結果がどの程度、全部があるいは一部が、不純
物の存在によるものかが不明であつた（文献１９、２
０）。蛋白質の相互作用および混合活性は、よく知られ
てはいないが、あり得る現象である。従つて、この様な
比較的不純な製剤からは、明確な生物活性の結果を予測
し得ない。事実、更に純度の良い製剤を得ようと試みた
結果、もつと不純な製剤について観察されたものとは異
なるレベルの活性が得られたという報告がある（文献１
９）。
比較的不純な物質を用いて行なわれたインターフエロン
製剤（マウスについては文献１４、１５、ヒトについて
は１７）を混合した時の増強効果を調べる為に行なわれ
た研究から、原因と結果について憶測を超えた結論を出
すことは、科学的に根拠のないことであろう。これらの
研究は、増強についての憶測の基礎を提供したけれど
も、実際の増強効果があつたという証拠は明らかにされ
なかつた（文献１４）。
本発明は、不純な物質を用いて行なわれる研究に付随す
る問題に対処するものであり、インターフエロンによる
インターフエロンの相乗効果を証明するために必要な証
拠を提供するものである。組み換えＤＮＡ技術の出現に
より、遺伝子的に変換した宿主培養物から、ヒトのイン
ターフエロンを多量に、そして従来得られなかつた純度
で生産、単離することができる様になつた（文献１、１
１、１２、１８）。従つて、各種のヒトのインターフエ
ロンが互いに及ぼし合う真の効果についての仮説を試験
することができることとなつた。本発明は、この様な試
験の結果、完成されたものである。
本発明の第１の目的は、ヒトのα−インターフエロン
（ＩＦＮ−α）、そのハイブリツドおよびヒトのβ−イ
ンターフエロン（ＩＦＮ−β）からなる群から選ばれる
インターフエロンと、ヒトのγ−インターフエロン（Ｉ
ＦＮ−γ）との、相乗効果的な、薬学的に純粋な混合物
からなる組成物を提供することにある。第２の目的は、
ＩＦＮ−α、そのハイブリツドおよびＩＦＮ−βと組み
合わせるとＩＦＮ−γの生物学的活性が相加的にではな
く、相乗的に増大するという注目すべき発見に基づい
て、1)薬学的に純粋な、相乗効果を発揮する量の該イン
ターフエロン群を混合することにより相乗効果を生ぜし
める方法および、2)薬学的に純粋な、相乗効果を発揮す
る該インターフエロンの組み合せ物を、そのままで、あ
るいは通常の薬学的に許容し得る賦形剤または担体と混
合して使用することによりヒトを治療する方法、を提供
するものである。更に本発明の目的は、上記のインター
フエロン組み合せ物を含有する医薬組成物の製造法およ
び相乗的な生物学的効果を得る目的で該医薬組成物をヒ
トに投与する方法を提供することにある。
本発明の思想は、薬学的に純粋なヒトのα−、β−およ
びγ−インターフエロン組み合せ物は、生物学的活性が
相乗的に増大するという点にあり、従つて本発明は、本
明細書中に具体的にあるいは示唆的に記載された特定の
態様だけに関するものではない。
本発明における２種の試剤を組み合せた時の応答を効果
的に図式的に分析する為に、各試剤を別々に、そして組
み合せて使用した時の効果を示すデータを利用してイソ
ボログラム(isobologram)を作成する（文献２１〜２
４）。この方法は例えばＩＦＮ−αＡ、ＩＦＮ−β1、
およびＩＦＮ−γの抗増殖作用を分析するのに用いられ
て来た。ここに記載されている１つの実験に使用された
ヒトＩＦＮ、ＩＦＮ−αＡ（以前はＬｅＩＦ−Ａまたは
ＩＦＮ−α2と呼ばれた）、ＩＦＮ−β1およびＩＦＮ−
γは、E.coli（大腸菌）中で合成され（文献１、１１、
１２、１８）、これら３つのインターフエロンは、ＳＤ
Ｓポリアクリルアミドゲル電気泳動およびＨＰＬＣ分析
によれば、純度９５％以上で用いられた初めてのもので
あつた（文献７）。この程度の純度のハイブリツドＩＦ
Ｎ−αもまた入手可能である（文献３、２５）。ＩＦＮ
の比較は、ＩＦＮ−αＡおよびＩＦＮ−γはＮＩＨヒト
白血球標準（Ｇ０２３−９０１−５２７）、ＩＦＮ−β
1はＮＩＨヒト線維芽細胞標準（Ｇ０２３−９０２−５
２７）に対して標準化し、水疱性口内炎ウイルスをチヤ
レンジしたHeLa細胞で生物検定した抗ウイルス単位に基
づいて行なつた。対照標準は、Antiviral Substance Pr
ogram of the National Institute of Allergy and Inf
ectious Diseases，National Institutes of Health，
ワシントンＤＣから自由に入手できる。ヒトの黒色腫セ
ルライン、Hs２９４ＴはCell Culture Department，Nav
al Biosciences Laboratory，OaklandＣＡで着手、クロ
ーンされ、Biological Carcinogenesis Branch of Nati
onal Cancer Institute of the National Institutes o
f Health，Bethesda，Marylandから入手できる。このセ
ルラインの起源、特性および細胞遺伝学については既に
報告されている（文献２６、２７）。これらの細胞の増
殖は部分的に純化されたヒトの白血病ＩＦＮにより阻止
されること、およびこの阻止によつて、細胞の生活能力
は衰えないことがわかつている（文献２７）。
本明細書に於いて、「遺伝子的に変換した宿主細胞」と
は、それ自体（内性）の過程での固有の生産物ではない
ポリペプチド（外来性ポリペプチド）を生産せしめる様
に、人為的に挿入されたＤＮＡ配列を含有している微生
物、または哺乳動物の培養物（カルチヤー）を包含す
る、その他の細胞培養物を意味する。組み換えＤＮＡ技
術の最近の精密さにより、例えばE.coliに哺乳動物の蛋
白質を生産せしめるべく、ＤＮＡ配列を操作することが
可能となつた。宿主細胞の遺伝子的変換によつてもたら
されるこの様な生産も、上記の用語を、その効果の面で
定義づけている。
また、組み換えＤＮＡ技術により、外来性ポリペプチ
ドを実質的に純粋な形で生産することができる。という
のは、宿主細胞によつて同様の起源の他の蛋白質が生産
されることがなく、他の宿主細胞物質からの生成物の分
離が容易だからである。組み換えＤＮＡ技術により、最
近、少なくとも約９５％以上の純度の外来性蛋白質を生
産することができる様になつた。この限度を、本明細書
では「実質的に不純物を含まない」と定義する。この限
度は、天然から得られる、リンホカインや細胞変性物質
の様な他の干渉物質を含んでいないインターフエロン製
剤より大きい等級量の活性レベルに相当するものであ
る。例えば、組み換えヒト白血球インターフエロン（Ｉ
ＦＮ−α）および線維芽細胞インターフエロン（ＩＦＮ
−β）の比活性は、約１×１０8単位／総蛋白質（mg）
と計算されており、ヒトのγ−インターフエロン（ＩＦ
Ｎ−γ）のそれは、少なくとも１０6単位／mgのオーダ
ーである。
本発明で使用される組み換えＩＦＮを、例えば細菌から
純化することができる１つの方法を、ＩＦＮ−γを例に
とつて以下の一般的手順に示す。
1.高圧でホモジナイザを通過させ、流出液を氷浴で冷却
することによる、高電導率の溶菌緩衝液（約pH８）中の
細胞の抽出。
2.攪拌下、例えば４℃でのポリエチレン−イミン添加に
よるＤＮＡの沈殿化。
3.細菌性蛋白質のpH沈殿、再びＩＦＮ−γを溶液中に保
持。
4.４℃で遠心分離して固形物を分離。
5.限外過による、pH再調節の後の上澄液の濃縮。
6.低電導率緩衝液に対する濃縮物の透析。
7.遠心分離による固形物の分離とＩＦＮ−γの溶液中へ
の残留。
8.カルボキシメチルセルロースでのイオン交換クロマト
グラフイー、イオン強度を増大させるグラジエント法で
溶出。
9.燐酸カルシウムゲルでのクロマトグラフイー、イオン
強度を増大させるグラジエント法で溶出。
10.弱い変性条件下でのカルボキシメチルセルロースで
のイオン交換クロマトグラフイー、イオン強度を増大さ
せるグラジエント法で溶出。
11.ゲル過クロマトグラフイーによる分離。
以上の方法で純度９５％以上の物質が得られる。
本明細書に於いて「薬学的に純粋」なる用語は、組み換
えＤＮＡ技術により調製し得る、信頼のおける生物学的
試験および例えばヒトの治療のために投与するのに適し
た、上で定義したインターフエロンの製剤を意味する。
相乗効果的混合物は、それに従えば各薬物のＭＩＣ（最
小阻止濃度）の４分の１またはそれ以下の組み合せで、
所望の観察された効果が得られるという、標準的な、認
められた根本的原理で定義される（文献２４）。その様
にインターフエロンを各種の比率で試験し、イソボログ
ラム（後述）を作成すると、相乗効果は、少なくとも0.
25ＦＩＣ（フラクシヨナル阻止濃度）点に達するくぼん
だ曲線によつて示すことができる。従つて、この基準を
参照すると、試験した組み合せのＭＩＣを知ることがで
き、相乗効果的混合を達成するのに必要な各成分のＭＩ
Ｃがわかる。
Hs２９４Ｔセルラインについてここに記載した如く行な
つた生物検定に基づき、ＩＦＮ−γとＩＦＮ−αの有効
的な相乗効果量は、ＩＦＮ−γが約0.5〜約7.7μｇ／m
l、ＩＦＮ−αは約2.5〜約0.3μｇ／mlの範囲とするこ
とができる、と結論し得る。同様の計算から、ＩＦＮ−
γの量が約２〜約４５μｇ／mlであり、ＩＦＮ−βが約
0.07〜約0.008μｇ／mlであるという結論も得られる。
実際の使用量は、上の計算に固有の制限により、比較的
広い範囲で変えることができる。しかし、本明細書の記
載に基づき、本発明の相乗効果を発揮させ得る活性成分
の量をもつと正確に決定することは、当業者の通常の技
術範囲で行なうことができる。
添付の第１図は、細胞の増殖に及ぼすＩＦＮ−γおよび
ＩＦＮ−αＡの効果を示すものである。ヒトの黒色腫細
胞（Hs２９４Ｔ）は、１０％の牛胎児血清を加えたDulb
ecco改良のEagle培地（Gibco）中、単層として増殖させ
た。(a)投与量−応答曲線、細胞を植え付けてから（１
×１０5細胞／３５mmの容器）２４時間後に、培養液
を、増加濃度のＩＦＮ−γ またはＩＦＮ−αＡ を含有している新しい培地で置き換えた。ＩＦＮ添加９
６時間後に生存細胞を数え、対照細胞（ＩＦＮ処置を受
けないもの）の％で表わした。(b)(i)ＩＦＮ−γおよび
ＩＦＮ−αＡ単独（●）；(ii)一定量のＩＦＮ−αＡ
（５０、１００、１５０単位／ml）と増加する濃度のＩ
ＦＮ−γとの組み合せ（○）；(iii)一定量のＩＦＮ−
γ（２５単位／ml）と増加する濃度のＩＦＮ−αＡとの
組み合せ（○）、の投与量−応答曲線から得られる５０
％細胞増殖阻止濃度から描いたイソボログラム。値はフ
ラクシヨナル阻止濃度（ＦＩＣ）で表わしてある。ＩＦ
Ｎ−γについては、1.0のＦＩＣは３５単位／mlを表わ
し、ＩＦＮ−αＡについては1.0のＦＩＣは５００単位
／mlを表わす。（ ）内の値は、明細書に記載した様な
各組み合せのＦＩＣインデツクスを表わす。
第２図は細胞増殖に及ぼすＩＦＮ−γおよびＩＦＮ−β
1の効果を示している。この実験の筋書きは第１図の説
明に記載してある。(a)ＩＦＮ−γ およびＩＦＮ−β1 の投与量−応答曲線。(b)(i)ＩＦＮ−γ単独およびＩＦ
Ｎ−β1単独（●）；(ii)一定量のＩＦＮ−γ（１０、
２５または５０単位／ml）と増加濃度のＩＦＮ−β1と
の組み合せ（○）；および(iii)一定量のＩＦＮ−β
1（５、１０または１５単位／ml）と増加濃度のＩＦＮ
−γとの組み合せ、の投与量−応答曲線から得た５０％
細胞増殖阻止濃度に基づいて描いたイソボログラム。第
１図(b)と同様、値はＦＩＣで表わしてある。ＩＦＮ−
γについては、1.0のＦＩＣは２００単位／ml、ＩＦＮ
−β1については、1.0のＦＩＣは１６単位／mlを表わ
す。
第３図は細胞増殖に及ぼすＩＦＮ−αＡおよびＩＦＮ−
β1の効果のイソボログラムである。この実験の筋書き
は第１図の説明に記載してある。値はフラクシヨナル阻
止濃度に標準化し、代表的実験からの結果を表わしてい
る：実験１（●）；実験２（○）；実験３（▲）。細胞
増殖を５０％阻止したＩＦＮ−αＡ単独およびＩＦＮ−
β1単独の濃度はそれぞれ８００〜２０００単位／ml、
および１０〜３２単位／mlであつた。これらの値はＦＩ
Ｃ1.0に標準化された（●）。
ＩＦＮ−γとＩＦＮ−αＡの相互作用の分析は第１図
に、ＩＦＮ−γとＩＦＮ−β1のそれは第２図に示し
た。実験の組み立ては両データとも同じである。Hs２９
４Ｔ細胞を増加する濃度の１つのクラスのＩＦＮ（ＩＦ
Ｎ１）単独、もう１つのクラスのＩＦＮ（ＩＦＮ２）単
独、または両ＩＦＮの組み合せ物と共にインキユベート
した。組み合せ物は、一定の準阻止量のＩＦＮ２と混合
した増加濃度のＩＦＮ１、および準阻止量のＩＦＮ１と
混合した増加濃度のＩＦＮ２からなつている。生存細胞
の数はＩＦＮの添加９６時間後に測定し、２−３ダブリ
ングを通過した対照細胞（ＩＦＮ処置を受けなかつたも
の）の％で表わした。細胞増殖を５０％阻止するのに必
要なＩＦＮの濃度をそれぞれのイソボログラムに示す。
細胞増殖を５０％阻止するのに必要な各ＩＦＮ単独の濃
度は、実験ごとに変動した。このことは、ＩＦＮ分析
（アツセイ）に於ける偏差もあろうが、細胞過程におけ
る、ＩＦＮによりひき起される細胞増殖阻止効果に対す
る細胞の感受性が変化することを示している。従つて、
この種の実験において本質的な一貫性を得るためには、
１つのイソボログラムに使用する全ての点を同じ実験か
ら得ることが必要であつた。即ち、複製培養を同時にＩ
ＦＮ１、ＩＦＮ２およびＩＦＮ１およびＩＦＮ２の組み
合せ物で処理し、組み合せ物で使用した各ＩＦＮの濃度
を間違いなく全て準阻止的とした。
第１図(a)の投与量−応答曲線からわかる様に、５００
単位／mlのＩＦＮ−αＡまたは３５単位／mlのＩＦＮ−
γにより細胞増殖が５０％阻止される。ＩＦＮ−γおよ
びＩＦＮ−αＡ単独および組み合せ物の５０％阻止点か
ら描いたイソボログラムを第１図(b)に示す。横座標お
よび縦座標の点は、細胞増殖の５０％阻止に必要なそれ
ぞれＩＦＮ−αＡ単独およびＩＦＮ−γ単独の、1.0の
フラクシヨナル阻止濃度（ＦＩＣ）値に標準化された量
を表わしている。これらの点の間に引かれた線上の、組
み合せ処置により得られる点は、相加効果を表わすこと
になる。この線より左にくぼんだ曲線を形成する点は相
加以上の応答、即ち相乗的応答を示し、一方この線より
右側のくぼんだ曲線を形成する点は、阻止あるいは拮抗
作用を意味する準−相加応答（sub-additive respons
e）を表わすことになる。第１図(b)に示す様に、ＩＦＮ
−αＡおよびＩＦＮ−γの混合物を使つて得た５０％点
は、相加直線の左にくぼんだ曲線を形成し、相乗応答の
基準に適うものであつた。
ＩＦＮ−γおよびＩＦＮ−β1の効果を第２図に示す。
細胞を２００単位／mlのＩＦＮ−γまたは１６単位／ml
のＩＦＮ−β1で処理すると、細胞の増殖は５０％阻止
される（第２図ａ）。ＩＦＮ−γ単独、ＩＦＮ−β1単
独およびＩＦＮ−γとＩＦＮ−β1の組み合せの５０％
阻止点から描いたイソボログラムを第２図(b)に示す。
第１図と同様に、全ての点はフラクシヨナル阻止濃度で
表わされており、得られたくぼんだ曲線は超相加的な、
即ち相乗的な応答を表わしている。
この細胞系における、ＩＦＮ−αＡとＩＦＮ−β1を組
み合せた時の相互作用も調べた。第１図および第２図の
様に、各種濃度のＩＦＮ−αＡおよびＩＦＮ−β1単独
および組み合せ物で細胞を処理した。この様な実験で得
られた結果は第３図に示す様に一貫性のないものであ
り、ある組み合せでは相乗作用の定義に合致し、ある組
み合せでは拮抗的であるらしいことがわかつた。これ
は、ＩＦＮ−γとＩＦＮ−αＡまたはＩＦＮ−β1との
組み合せで処理した場合、再現性よく、第１図および第
２図に示す様な相乗的応答が得られたことと著しい対照
をなすものであつた。第３図に示したデータは、ＩＦＮ
−αＡとＩＦＮ−β1の相互作用は、ＩＦＮ−γとＩＦ
Ｎ−αＡあるいはＩＦＮ−β1とのそれよりも複雑であ
ることを示している。
相加性と相乗性を区別するのに、各組み合せで使用した
個々の試剤のＦＩＣ値の総計に等しいフラクシヨナル阻
止濃度（ＦＩＣ）を利用することができる。相乗的な応
答は、ＦＩＣインデツクスが0.5より小さいことで定義
される：即ち、各試剤のＦＩＣの1/4またはそれ以下の
組み合せで５０％の阻止が達成される場合である。ＦＩ
Ｃインデツクスが１というのは相加的応答である。第１
図(b)および第２図(b)のイソボログラムの点の（ ）内
に示したＦＩＣインデツクスは0.5以下であり、相乗的
応答の定義に合致するものである。例えば、第１図(b)
に示す様に、細胞増殖の５０％阻止は、５０単位／mlの
ＩＦＮ−αＡと８単位／mlのＩＦＮ−γの組み合せ量で
達成された（ＦＩＣインデツクスは0.3）。同様に、第
２図(b)に示す様に、４単位／mlのＩＦＮ−β1と１０単
位／mlのＩＦＮ−γとの組み合せ量で５０％の細胞増殖
阻止がみられた（ＦＩＣインデツクスは0.3）。この様
にして実験データを調べることにより、ＩＦＮ群間の活
性の程度を決定することができる。即ち、ＦＩＣインデ
ツクスが約0.3であるということは、ＩＦＮ−γとＩＦ
Ｎ−αＡまたはＩＦＮ−β1との相乗性の程度がこの細
胞系では同じであることを示している。
以上の結果から、ヒトの組み換えＩＦＮ−αＡ、ＩＦＮ
−β1またはＩＦＮ−γの高度に純化された製剤は、そ
れぞれヒトの黒色腫細胞の複製を阻止することができ、
細胞増殖の５０％阻止は、ＩＦＮ−αＡまたはＩＦＮ−
γより、低い濃度のＩＦＮ−β1で達成されることがわ
かる。
具体的な態様では、ＩＦＮ−γとＩＦＮ−αＡまたはＩ
ＦＮ−β1との組み合せの高純度の製剤でヒトの黒色腫
細胞を処理すると、各ＩＦＮ単独の場合に必要とされる
濃度より遥かに低い濃度で細胞増殖の５０％阻止が達成
されることがわかつた。抗増殖活性および抗ウイルス活
性は両者とも、１個のＩＦＮ分子の本質的な性質の例で
あるので、異なつたタイプの純化ＩＦＮの組み合せで処
置すると、その抗ウイルス活性に於いても同様の活性化
が得られることになる。
本発明に係る組み合せ物は、同様の活性を示す薬剤の投
与法として認められているいかなる方法によつても投与
することができる。例えば経口、非経口、局所投与など
が挙げられ、全身投与剤型であつてもよいが、局所的ま
たは静脈内注射が好ましい。
投与方法に応じて、本発明の組成物は固状、半固状、ま
たは液状の投与形態、例えば錠剤、ピル剤、カプセル
剤、粉末、液剤、懸濁剤などとすることができる。正確
な投与量を１回投与する為の単位投与形態にするのが好
ましい。この組成物は通常の薬学的担体、賦形剤を含ん
でいてもよく、更に他の医薬、薬学的試剤、担体、補助
剤などを含んでいてもよい。この様な賦形剤として他の
蛋白質、例えばヒトの血清アルブミンまたは血漿製剤を
含んでいてもよい。
投与される活性物質の量は、治療しようとする患者、疾
患の重さ、投与方法および担当医の判断に応じて変わ
る。
固状組成物の為の通常の非毒性固状担体としては、薬学
的等級のマンニツト、ラクトース、スターチ、ステアリ
ン酸マグネシウムなどが挙げられる。薬学的に投与し得
る液状組成物は、例えば水、食塩水、水性デキストロー
ス、グリセロール、エタノールなどの担体に溶解または
分散して、溶液または懸濁液の形で調製することができ
る。所望により、投与しようとする医薬組成物は、少量
の非毒性補助物質、例えば湿潤剤、乳化剤、pH緩衝剤な
ど、具体的には酢酸ナトリウムまたはソルビタンモノラ
ウレートなどを含んでいてもよい。この様な投与剤型を
製造する実際の方法は当業者にはよく知られているかあ
るいは、容易に推測できる（例えばRemington's Pharma
ceutical Sciens,Mack Publishing Company,Easton,Pen
nsylvania，１５版、１９７５参照）。投与する組成物
あるいは製剤は、いづれも、治療しようとする患者に所
望の治療効果を与えるのに有効な量の活性成分を含んで
いる。
以下に本明細書で引用した文献を列挙する。
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18.Goeddel et al.,Nature 290,20(1981). 19.Blalock et al.,Cellular Immunology 49,390(198
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19(1981).
【図面の簡単な説明】
第１図は細胞増殖に及ぼすＩＦＮ−γおよびＩＦＮ−α
Ａの効果を示すグラフ、第２図は細胞増殖に及ぼすＩＦ
Ｎ−γおよびＩＦＮ−β1の効果を示すグラフ、第３図
は細胞増殖に及ぼすＩＦＮ−αＡおよびＩＦＮ−β1の
効果のイソボログラムである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 エルンスト・ハ−・リンダ−クネヒト アメリカ合衆国カリフオルニア94070サ ン・カルロス・バウア−・ドライブ812番 (56)参考文献 特開 昭55−98118（ＪＰ，Ａ) 特開 昭55−154919（ＪＰ，Ａ)

Claims (5)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】組み換えＤＮＡ技術によって製造され、不
    純物を実質的に含まないように精製された、ヒトのγ−
    インターフェロンとヒトのα−インターフェロンおよび
    ヒトのβ−インターフェロンからなる群から選ばれた第
    ２のインターフェロンを含有し、γ−インターフェロン
    とα−インターフェロンの場合には１：５〜２６：１
    （重量／重量）の範囲で、そしてγ−インターフェロン
    とβ−インターフェロンの場合には２８：１〜５６０
    ０：１（重量／重量）の範囲で混合された、該γ−イン
    ターフェロンと該第２のインターフェロンの相互作用の
    結果である相乗的な生物学的作用を有する細胞増殖阻止
    剤組成物。
  2. 【請求項２】各インターフェロン成分の純度が総蛋白質
    の９５重量％以上である第１項に記載の組成物。
  3. 【請求項３】組み換えＤＮＡ技術によって製造され、不
    純物を実質的に含まないように精製された、ヒトのγ−
    インターフェロンとヒトのα−インターフェロンおよび
    ヒトのβ−インターフェロンからなる群から選ばれた第
    ２のインターフェロンを、γ−インターフェロンとα−
    インターフェロンの場合には１：５〜２６：１（重量／
    重量）の範囲で、そしてγ−インターフェロンとβ−イ
    ンターフェロンの場合には２８：１〜５６００：１（重
    量／重量）の範囲で混合することからなる、該γ−イン
    ターフェロンと該第２のインターフェロンの相互作用の
    結果である相乗的な生物学的作用を有する細胞増殖阻止
    剤組成物の製造方法。
  4. 【請求項４】各インターフェロン成分の純度が総蛋白質
    の９５重量％以上である第３項に記載の方法。
  5. 【請求項５】該インターフェロンを通常の薬学的担体と
    混合する追加の工程をさらに含有する第４項に記載の方
    法。
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