JPH068249B2

JPH068249B2 - メラニン生成抑制外用剤

Info

Publication number: JPH068249B2
Application number: JP63140404A
Authority: JP
Inventors: 龍彦堤
Original assignee: MARUZEN SEIYAKU KK
Current assignee: MARUZEN SEIYAKU KK
Priority date: 1988-06-09
Filing date: 1988-06-09
Publication date: 1994-02-02
Anticipated expiration: 2009-02-02
Also published as: JPH01311011A

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、メラニン生成抑制外用剤に関するものであ
る。なお、この明細書で外用剤とは、化粧料のほか、外
用に用いられる軟膏剤、ローション剤、リニメント剤、
乳剤などの医薬部外品を包含する。

〔従来の技術〕

皮膚が黒くなる原因の一つとして、アミノ酸の一種であ
るチロシンにチロシナーゼが作用することによる色素・
メラニンの生成がある。そこで、従来、アスコルビン
酸、プラセンターエキス、コウジ酸、桑白皮エキス、チ
ロシナーゼ活性阻害作用を有する各種動植物抽出物（た
とえば特開昭５８−２２５００４号公報、特開昭６１−
１２２０９号公報）等を化粧料に配合することにより、
上記原因による皮膚黒色化やシミ、ソバカスの発生を防
止することが提案され、一部、実施されている。しかし
ながら、アスコルビン酸類は酸化され易く、それを配合
した化粧料の変色、変臭を招くという欠点がある。また
動植物抽出物系のものは、その効果が十分でなく、ま
た、安定性や色、臭気等の点でも問題があり、実用可能
なものはほとんどない。

〔発明が解決しようとする問題点〕

本発明の目的は、上述のような現状に鑑み、従来公知の
チロシナーゼ活性阻害物質よりも少量ですぐれた作用を
示す物質を用いた使い易く且つ効果的なメラニン生成抑
制外用剤を提供することにある。

〔課題を解決するための手段〕

本発明によるメラニン生成抑制外用剤は、下記構造式の
グラブリジンまたは（および）グラブレンを有効成分と
して含有するものである。

グラブリジンおよびグラブレンは、天然に甘草の１種Gl
ycyrrhiza glabra Linn var（ソ連、アフガン、トル
コカンゾウ）に微量含まれているが、その薬理作用につ
いての報告はなく、グラブリジンについて抗菌作用が、
またグラブレンについて抗酸化作用および抗菌作用が、
それぞれ知られているにすぎない。

本発明者らは、グラブリジンおよびグラブレンが優れた
チロシナーゼ活性阻害作用を示すことを初めて見いだ
し、本発明を完成した。

原料甘草・Glycyrrhiza glabra Linn varからグラブ
リジンおよびグラブレンを抽出するには、この甘草の根
部またはその水（もしくはアンモニア水）抽出残渣（た
とえばグリチルリチンを抽出した残渣）を有機溶媒で抽
出する。使用可能な抽出用有機溶媒の例としては、メタ
ノール、エタノール等の低級脂肪族アルコール；アセト
ン等の低級脂肪族ケトン；ジオキサン、エチルエーテル
等の低級脂肪族エーテル；塩化メチレン、クロロホルム
など炭素原子数１〜４のハロゲン化炭化水素；酢酸エチ
ル、酢酸n-ブチル、酢酸イソブチルなど炭素原子数３〜
７のエステル；n-ヘキサン、ベンゼン等の炭化水素類；
およびこれらの溶媒の２種以上の混合物がある。これら
の溶媒により上記甘草から有効成分を抽出するには、被
処理原料を約５〜１５倍量の溶媒に浸漬して還流下に加
熱するか、約５〜１５倍量の溶媒に常温で浸漬すればよ
い。得られる抽出液から溶媒を留去して得られる抽出物
は、茶褐色の固体である。この抽出物は、そのままで
も、チロシナーゼ活性阻害作用の点では十分利用可能な
ものであるが、必要ならば、脱臭、脱色等の精製処理を
施し、さらにはグラブリジンおよびグラブレンの純品に
近い純度まで精製してから用いてもよい。

本発明のメラニン生成抑制外用剤の形態は前述のように
多岐にわたり、色白作用を特徴とする化粧料の場合も、
たとえば化粧水、クリーム、乳液、パックなど、各種皮
膚用化粧料が有り得る。

グラブリジンおよびグラブレンの好ましい配合量は、剤
種、期待されるメラニン生成抑制効果の程度などによつ
ても異なるが、通常０．０００７〜０．０５％程度が適
当である。

〔実施例〕

以下、実施例を示して本発明を説明する。なお、実施例
１において用いた甘草は、いずれもGlycyrrhiza glabra
Linn varである。

実施例１（甘草抽出例）甘草の根の細切物１００ｇを１の酢酸エチルとともに
２時間還流下に加熱して、酢酸エチル可溶成分を抽出し
た。抽出液を分離した抽出残渣について同様の操作を繰
り返し、合計１．８の抽出液を得た。この抽出液の溶
媒を留去し、さらに減圧乾燥して、グラブリジンおよび
グラブレンを含有する抽出物２．８ｇを得た。これを抽
出物Ａとする。

甘草根細切物１００ｇを１の塩化メチレンに常温で５
時間浸漬して、塩化メチレン可溶成分を抽出した。抽出
液を分離した抽出残渣について同様の操作を繰返し、合
計１．７の抽出液を得た。この抽出液の溶媒を留去
し、さらに減圧乾燥して、グラブリジンおよびグラブレ
ンを含有する抽出物２．５ｇを得た。これを抽出物Ｂと
する。

n-ヘキサン５部にアセトン２部を混合した抽出溶媒１
で甘草根細切物１００ｇを２時間還流下に加熱して、溶
媒可溶成分を抽出した。抽出液を分離した抽出残渣につ
いて同様の操作を繰り返し、合計１．６の抽出液を得
た。この抽出液の溶媒を留去し、さらに減圧乾燥して、
グラブリジンおよびグラブレンを含有する抽出物２．３
ｇを得た。これを抽出物Ｃとする。

実施例２（グラブリジンおよびグラブレンの精製例）実施例１による抽出物Ａ２．８ｇを少量のクロロホルム
に溶解し、得られた溶液をシリカゲル（ワコーゲルＣ-3
00，和光純薬工業株式会社）にまぶしたのち、乾燥す
る。このシリカゲルを、あらかじめシリカゲル５００ｇ
を充填したカラムの上に積層充填し、クロロホルム／メ
タノール混合液（３０：１）で溶出し、グラブリジン含
有画分およびグラブレン含有画分を採取した。目的物の
溶出は、薄層クロマトグラフイー（展開溶媒：クロロホ
ルム／メタノール；担体：メルク社シリカゲル６０Ｆ；
検出方法：１９％硫酸噴霧後加熱）によつて確認した。
各画分の溶媒を減圧下に留去して、固形のグラブリジン
画分０．８ｇおよびグラブレン画分０．１６ｇを得た。

このグラブリジン画分を少量のメタノールに溶解し、溶
液を逆相シリカゲル（３０〜５０メツシユ，ODSG-3，水
戸化学技術研究所製）にまぶして乾燥する。この逆相シ
リカゲルを、あらかじめ逆相シリカゲル２００ｇを充填
したカラムの上に積層充填し、水／アセトニトリル（３
０：７０）で分離溶出し、グラブリジン含有画分を採取
した。減圧下に溶媒を留去して、精製グラブリジン画分
０．４５ｇを得た。これをさらにアセトン５mlに溶解
し、５℃に一夜冷却すると、グラブリジンの淡黄色結晶
０．４ｇが得られた。

同様にしてグラブレン画分を精製し、精製グラブレン画
分０．１ｇを得、これをヘキサン３mlから再結晶させ
て、無色のグラブレン結晶０．０８ｇを得た。

比較例１（異種甘草抽出物の調製） Glycyrrhiza echinata L.（スペインカンゾウ）、Glycy
rrhiza inflata Batal（中国シンキヨウカンゾウ）及び
Glycyrrhiza uralensis Fisher et De Candelle（中国
東北西北カンゾウ）について、それぞれ抽出物Ａの場合
と同様の酢酸エチルによる抽出を行い、抽出物ｘ、ｙお
よびｚを得た。

比較例２（Glycyrrhiza glabra Linn varの水抽出物
の調製）実施例１で用いたGlycyrrhiza glabra Linn varの根
を粗砕し、その１００ｇを精製水１０００mlに浸漬し、
蒸気浴上で２時間加熱して水溶性成分を抽出した。さら
に、抽出液を分離した残渣について同様の抽出操作を行
い、抽出液合計１８０００mlを得た。これを減圧下で濃
縮したのち減圧乾燥して、抽出物ｄを得た（収量２０．
６ｇ）。

実施例３上記各例で得られた抽出物Ａ〜Ｃ、ｄおよびｘ〜ｚ、グ
ラブリジンおよびグラブレン（結晶化品）、アスコルビ
ン酸について、チロシナーゼ阻害活性を測定した。測定
法は次のとおりである。

［試薬］Ａ：L-チロジン溶液（１．０mg/ml）０．５ml Ｂ：M/15リン酸緩衝液（pH６．８）２．０ml Ｃ：１％硫酸銅溶液０．０５ml Ｄ：チロシナーゼ溶液（６mg/100ml）０．５ml ［試料溶液］試料をエタノールに溶解した後、M/50リン酸緩衝液で希
釈する。１回２mlを使用。

［操作］試料溶液にＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄの各液を加え、３７℃で１
時間インキユベートしたのち６４０nmの吸光度A_tを測定
する。

Ｅ液の代わりにm/50リン酸緩衝液２．０mlを加え、
と同様に操作して、６４０nmの吸光度A_bを測定する。

Ｄ液の代わりに精製水を０．５ml加え、と同様に操
作して、６４０nmの吸光度A_oを測定する。

種々の濃度の試料溶液について上記測定を行い、次式
によるチロシナーゼ阻害率が５０％になる試料添加量を
内挿法で求める。

また、上記各抽出物について、高速液体クロマトグラフ
イーによりグラブリジンおよびグラブレンの定量を行な
つた。分析条件は次のとおりである。まず試料約２５mg
を精秤し、これをエタノールに溶かして全量を１００ml
とする。別に、グラブリジンおよびグラブレンの標準液
（濃度約４mg/100mlエタノール）を用意する。試料溶液
と標準液を下記条件の高速液体クロマトグラフイーにか
ける。

カラム：オクタデシルシリル化シリカゲル (Wakopak 5C18,4.6mmφ×250mm) カラム温度：４０℃ 移動相：アセトニトリル−２％酢酸(60：40) 流速１ml/min 検出器：紫外吸光光度計（波長２８２nm）注入量：２０μｌ測定結果は表１のとおりであつた。

実施例４エタノール１５．０％モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン（２０ＥＯ）１．０パラオキシ安息香酸０．２香料０．２抽出物Ａ０．０２精製水７２．６グリセリン５．０ 1,3-ブチレングリコール６．０色素適量上記（室温にて混合し均一溶液としたもの）を用意
し、を攪拌しつつを徐々に添加して、シミ防止化粧
水を調製した。

この化粧水を３０〜４０才の女性２０人に毎日被用させ
た。２週間使用後のシミの軽減度を調べたところ、効果
あり７名、やや効果あり１０名、効果なし３名で、有効
率は８５％であり、優れたシミ防止作用を有することが
確認された。

実施例５ステアリン酸１５％セタノール１．０グラブリジン０．００３水酸化カリウム０．７グリセリン５．０プロピレングリコール３．０殺菌・防腐剤適量精製水７５％香料０．３上記を８２℃に、を８０℃に、それぞれ加熱溶解
し、攪拌しながらをに徐々に加えて乳化を行う。５
０℃にてを添加し、３０℃まで冷却して、シミ、ソバ
カス防止バニシングクリームを調製した。

実施例６スクワラン５．０％ワセリン２．０サラシミツロウ０．５セスキオレイン酸ソルビタン０．８ポリオキシエチレンオレイルエーテル（２０ＥＯ）１．２グラブレン０．０１殺菌・防腐剤適量プロピレングリコール１％水溶液５．０エタノール３．２カルボキシビニルポリマー（１％水溶液）１８．０水酸化ナトリウム０．１精製水６３．９香料０．３上記を７５℃に、を７３℃に、それぞれ加熱溶解
し、攪拌しながらをに徐々に加えて乳化させる。そ
の後を加えてから３０℃に冷却して、シミ、ソバカス
防止エモリエントローシヨンを調製した。

〔発明の効果〕

実施例３の結果から明らかなように、グラブリジンおよ
びグラブレンはチロシナーゼ阻害活性が強く、少量で有
効であり、副作用もなく、淡黄色（グラブリジン）また
は無色（グラブレン）であり、また、化学的にも安定な
物質であるから、多くの化粧料、外用剤等に自由に配合
することができる。したがつて本発明によれば、従来よ
りも使い易く効果も優れた様々なメラニン生成抑制外用
剤を提供することが可能になる。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】グラブリジンを有効成分として含有するこ
とを特徴とするメラニン生成抑制外用剤。
【請求項２】グラブレンを有効成分として含有すること
を特徴とするメラニン生成抑制外用剤。