JPH07118247A - チアゾール酢酸誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 一般式 【化１】 （式中のＸ^1-4は同一または異なるハロゲン原子を意味
する。）で示されるチアゾール酢酸誘導体またはその塩 【効果】 血管平滑筋弛緩作用，気道平滑筋弛緩作用，
血小板凝集抑制作用，抗炎症作用などを有し，抗炎症
剤，気管支拡張剤として有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は，ホスホジエステラーゼ
阻害活性を有するチアゾール酢酸誘導体に関する。

【０００２】

【従来の技術】従来から，細胞内ｃＡＭＰ濃度を増加さ
せる薬物が細胞の機能を調節することが知られており，
このｃＡＭＰを増加させる薬物の１つにｃＡＭＰ分解酵
素であるホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）に対する阻害
薬がある。ＰＤＥには少なくとも５つのアイソザイムが
知られており，各アイソザイムを阻害することによっ
て，様々な効果が期待できる。各アイソザイムはその分
布や in vitro においてＰＤＥ活性に影響を与える物質
を指標にして以下のように分類されている。ＰＤＥＩは
心筋，脳，肝臓などに分布し，Ｃａ²⁺とカルモジュリン
存在下で活性が増強されることを特徴とし，ＰＤＥ II
はｃＧＭＰ存在下で活性が増強されることを特徴とす
る。ＰＤＥ III は心筋，血管，血小板などに分布し，
ｃＧＭＰ存在下で活性が阻害されることを特徴とする。
ＰＤＥ IV は脳，気管，腎，白血球（好中球，肥満細
胞，マクロファージ，好酸球など）に分布し，ｃＡＭＰ
と特異的に反応することを特徴とする。ＰＤＥ Ｖは血
管平滑筋，血小板などに分布し，ｃＧＭＰと特異的に反
応することを特徴とする。ＰＤＥ阻害薬の効果として
は，血管平滑筋弛緩作用，気道平滑筋弛緩作用，血小板
凝集抑制作用，抗炎症作用などが期待される。このよう
に各アイソザイムにより，その阻害効果は様々である
が，全てのアイソザイムに対し阻害作用を有するＰＤＥ
阻害剤としてはキサンチン誘導体が知られている。その
中の１つであるテオフィリンは，抗炎症剤，気管支拡張
剤，血小板凝集抑制剤として多用されているが，効果が
弱く副作用も報告されている。また，現在キサンチン誘
導体のうち最も効果が強いＰＤＥ阻害剤として，ＩＢＭ
Ｘ(3-isobutyl-1-methyl-xanthine) が知られている(Ch
ristian S., BiochemicalPharmacology. vol. 42, No.
1, p153-162, 1991；以下引用文献とする）。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】そこで本発明者らは，
より強力なＰＤＥ阻害活性を有する化合物につき鋭意研
究した結果，キサンチン誘導体とは全く異なった化学構
造を有するチアゾール酢酸誘導体を見いだした。即ち本
発明は，新規なＰＤＥ阻害活性を有する医薬殊に抗炎症
作用，気管支拡張作用に有用なチアゾール酢酸誘導体を
提供することを目的とする。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明は下記一般式
（Ｉ）

【化２】 （式中，Ｘ^1-4は同一または異なるハロゲン原子を意味
する。）で示されるチアゾール酢酸誘導体またはその塩
に関する。本発明化合物（Ｉ）につき詳述するとＸ^1-4
においてハロゲン原子としてフッ素原子，塩素原子，臭
素原子及びヨウ素原子が挙げられるが，好ましくは塩素
原子である。本発明の化合物（Ｉ）には場合により互変
異性体や各種の水和物，各種溶媒和物，結晶多形等も存
在するが，本発明化合物にはこれら化合物の単離された
もの及びその混合物全ての化合物が含まれる。また，本
発明の化合物は塩を形成することもでき，本発明には化
合物（Ｉ）及びその異性体の製薬的許容される塩も含ま
れる。このような塩としては，リチウム，ナトリウム，
カリウム等のアルカリ金属との塩，マグネシウム，カル
シウム等のアルカリ土類金属との塩，アルミニウム塩，
アンモニウム塩あるいはトリメチルアミン，トリエチル
アミン等の有機塩基との塩が挙げられる。これらの塩に
は常法により導くことができる。

【０００５】以下，本発明化合物の製造法を詳細に説明
する。

【化３】

【０００６】（式中，Ｘ^1-4は前述の通りであり，Ｒ¹は
塩素原子または臭素原子，あるいは水酸基，Ｒ²は塩素
原子，臭素原子またはヨウ素原子，あるいはメタンスル
ホニルオキシ基，パラトルエンスルホニルオキシ基等を
意味する。） 本発明化合物（Ｉ）を製造するには，まずエチル ２−
アミノチアゾール−４−イルアセテート (II) を原料と
し，これにジハロゲノベンゾイル化合物 (III)およびジ
ハロゲノベンジル化合物（Ｖ）を反応させチアゾールア
ミド化合物 (VI) を合成しこれをチオアミド化するこ
とによる。

【０００７】本発明化合物（Ｉ）を製造する過程の中間
体であるチアゾールアミド化合物 (VI) を合成する方法
には，エチル ２−アミノチアゾール−４−イルアセテ
ート(II) とジハロゲノベンゾイル化合物 (III) とを塩
基の存在下，氷冷下乃至加温下で反応させることにより
(IV) を得，次いで得られた (IV) とジハロゲノベンジ
ル化合物（Ｖ）とを室温乃至加温下で塩基の存在下反応
させることにより (VI) を得る方法（ａ製法），あるい
ははじめに原料であるエチル ２−アミノチアゾール−
４−イルアセテート (II) とジハロゲノベンジル化合物
（Ｖ）とを室温乃至加温下で塩基の存在下反応させるこ
とにより (VII) を得，次いで得られた (VII) とジハロ
ゲノベンゾイル化合物 (III) とを塩基の存在下，氷冷
下乃至加温下で反応させることにより(VI) を得る方法
（ｂ製法）の２通りの方法が挙げられる。

【０００８】これらの方法を用いて得られたチアゾール
アミド化合物 (VI) は Lawesson 試薬や五硫化リンなど
を用い，トルエン，ベンゼン，またはピリジンなどの溶
媒中加熱還流を行うことによりアミド部分をチオアミド
に変換させ (VIII) とし，これを常法の加水分解を行う
ことにより本発明化合物（Ｉ）を得ることができる。ａ
製法およびｂ製法においてジハロゲノベンゾイル化合物
(III) の式中Ｒ¹で示される置換基が塩素原子または臭
素原子の場合には，塩基としてトリエチルアミンまたは
ピリジンなどを用い，クロロホルム，ジクロロメタン，
ベンゼン，トルエン，テトラヒドロフランなどを溶媒と
して反応を行わせることができる。一方Ｒ¹が水酸基の
場合には常法のＤＣＣ法，活性エステル法，または混合
酸無水物法を用いて反応を行わせることができる。

【０００９】またジハロゲノベンジル化合物（Ｖ）は塩
基として水素化ナトリウム，水素化カリウム，ナトリウ
ムエトキシド，ナトリウムアミド，ｎ−ブチルリチウ
ム，カリウムヘキサメチルジシラジド，水酸化ナトリウ
ム，水酸化カリウムまたは炭酸カリウムなどを用いテト
ラヒドロフラン，ジメチルホルムアミド，ジメチルスル
ホキシド，エタノール，アセトニトリル，メチルエチル
ケトンまたはトルエンなどのこの反応に不活性な有機溶
媒中求核置換反応を行わせることができる。

【００１０】

【発明の効果】本発明化合物（Ｉ）はＰＤＥ活性を阻害
することにより血管平滑筋弛緩作用，気道平滑筋弛緩作
用，血小板凝集抑制作用，抗炎症作用などを示し，これ
より抗炎症剤，気管支拡張剤として有用である。実験方法 ＰＤＥ活性測定法 本方法は前出の引用文献の方法に準じて行った。５ｍＭ
塩化マグネシウムと４ｍＭ２−メルカプトエタノールを
含む４０ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）にトリチ
ウムラベルしたｃＡＭＰ又はｃＧＭＰ１μＭを加え，そ
れぞれ緩衝液Ａ，緩衝液Ｇとする。緩衝液Ａ又は緩衝液
Ｇ２００μｌにラット心室もしくはヒト単球核細胞Ｕ９
３７より分離したＰＤＥの各アイソザイム２０μｌを加
え，これに試験化合物２．２μｌを加えて，３０℃で１
０分間反応させる。反応を９０℃の温水中に４５秒浸け
て停止し，氷中に１分間放置した後，５’−ヌクレオチ
ダーゼ５０μｌを加え，３０℃で１０分間反応させる。
これにメタノール１ｍｌを加えて反応を停止し，全量を
Dowex 1-x8 カラムを通過させる。さらにこのカラムを
メタノール０．５ｍｌで二回洗浄し，通過液を合わせた
ものに液体シンチレーター６ｍｌを加えて放射活性を測
定した。以上のような方法で，ラジオエンザイムアッセ
イ法を用いてＰＤＥ活性の測定を行った。ＰＤＥの各ア
イソザイムは，Ｉ，II，III，IV 型をラット心室より，
IV 型をヒト単球核細胞Ｕ９３７より，Q-sepharose fas
t frow カラムを用いた方法で単離して用いた。薬物
は，いずれもジメチルスルホキシドに溶解して用いた。

【００１１】組織及び，培養細胞からのＰＤＥ調製法 １）ラット心室よりの調製 ＳＤラット（雄 ８週齢）４匹より心室を摘出し，細切
後１０ｍＭトリス塩酸緩衝液（２ｍＭ塩化マグネシウ
ム，１ｍＭジチオスライトール，０．２３ＴＩＵ／ｍｌ
アプロチニンを加えたもの）１０ｍｌを加え，ポリトロ
ンを用いてホモゲナイズする。この組織液を２６０００
ｒｐｍ，１５分遠心分離し，上清を取って０．４５ｍＭ
のフィルターで濾過する。 ２）培養細胞からの調製 ＲＰＭＩ １６４０培地を用いて培養したＵ９３７細胞
５×１０⁸個に対して１０ｍＭトリス塩酸緩衝液（２ｍ
Ｍ塩化マグネシウム，１ｍＭジチオスライトール，０．
２３ＴＩＵ／ｍｌアプロチニンを加えたもの）１０ｍｌ
を加え，超音波破砕機を用いて細胞を破砕する。この組
織液を３２０００ｒｐｍ，６０分遠心分離し上清を取っ
て０．４５ｍＭのフィルターで濾過する。 ３） Q-sepharose を用いた分離 Q-sepharose カラムを，２ｍＭ塩化マグネシウムを含む
１０ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．４）にて平衡化さ
せ，１），２）で得られた組織及び細胞破砕液を通過さ
せる。５０ｍＭ酢酸ナトリウムにて洗浄後，５０ｍＭか
ら１０００ｍＭの酢酸ナトリウム濃度勾配をかけて溶出
させる。その後１０００ｍＭの酢酸ナトリウムにて洗浄
し，一定量毎に分画する。上記の方法で Q-sepharose f
ast frow カラムを用いて，酢酸ナトリウム濃度勾配法
で１），２）で得られた組織及び細胞破砕液からＰＤＥ
アイソザイムを分離してアッセイに用いる。

【００１２】目的化合物の活性 上記の方法で求めた本発明化合物（Ｉ）の阻害活性を下
記に示す。

【表１】 以上の結果から，本発明化合物（Ｉ）は非常に強力な非
選択的ＰＤＥ阻害物質であることが見い出された。

【００１３】一般式（Ｉ）で示される化合物やその塩の
１種または２種以上を有効成分として含有する本発明医
薬製剤は通常用いられている製剤用の担体や賦形剤その
他の添加剤を用いて錠剤，丸剤，カプセル剤，顆粒剤，
散剤等による経口投与，あるいは注射剤，吸入剤，坐
剤，経皮等による非経口投与のいずれの形態であっても
よい。投与量は適用される患者の症状，体重，年令や性
別等を考慮して適宜決定される。

【実施例】以下，実施例により本発明をさらに詳細に説
明するが，本発明はこれらの実施例に限定されるもので
はない。

【００１４】

【化４】 （ｉ）エチル ２−アミノチアゾール−４−イルアセテ
ート５．５８ｇのクロロ１ホルム溶液６０ｍｌにトリエ
チルアミン３．６４ｍｌを加え氷冷下攪拌する。この溶
液に３，４−ジクロロベンゾイルクロリド７．５４ｇの
クロロホルム溶液１０ｍｌを滴下し，室温で１０分間攪
拌した後，５時間加熱還流した。冷後，反応液を飽和炭
酸水素ナトリウム水溶液，１０％塩酸および飽和食塩水
で洗浄した後，無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧
下溶媒を留去し，得られた結晶をｎ−ヘキサンおよびエ
ーテルの混合溶媒で洗浄して エチル ２−（３，４−
ジクロロベンズアミド）チアゾール−４−イルアセテー
ト７．７７ｇを得た。

【００１５】(ii) 水素化ナトリウム０．４４ｇ（６０
％鉱油中）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド懸濁溶液
に，先に得た エチル ２−（３，４−ジクロロベンズ
アミド）チアゾール−４−イルアセテート３．５９ｇを
少しずつ加えた。全て加え終った後５０℃で３０分攪拌
し，再び冷却した。３，４−ジクロロベンジルクロリド
２．１５ｇのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液３０ｍ
ｌを滴下し，滴下後８０℃で２時間攪拌した。溶液を減
圧下留去し，残渣に水を加え，ジクロロメタンで抽出し
た。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後，溶媒
を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ーに付し，ｎ−ヘキサン−酢酸エチルの混合溶媒（２：
１）溶出部より得られる結晶をｎ−ヘキサンおよびエー
テルの混合溶媒で洗浄し，エチル ２−［Ｎ−（３，４
−ジクロロベンジル）−３，４−ジクロロベンズアミ
ド］チアゾール−４−イルアセテート３．０６ｇを得
た。

【００１６】(iii) エチル ２−［Ｎ−（３，４−ジク
ロロベンジル）−３，４−ジクロロベンズアミド］チア
ゾール−４−イルアセテート２．０７ｇに Lawesson 試
薬１．２２ｇおよびトルエン２０ｍｌを加え，１時間加
熱還流した。減圧下溶媒を留去し，残渣をシリカゲルカ
ラムクロマトグラフィーに付した。ｎ−ヘキサン−クロ
ロホルム（１：１）溶出部より得られる結晶をエーテル
で洗浄し，エチル ２−［Ｎ−（３，４−ジクロロベン
ジル）−３，４−ジクロロチオベンズアミド］チアゾー
ル−４−イルアセテート１．６ｇを得た。

【００１７】(iv) エチル ２−［Ｎ−（３，４−ジク
ロロベンジル）−３，４−ジクロロチオベンズアミド］
チアゾール−４−イルアセテート１．５ｇに１Ｎ水酸化
ナトリウム１０ｍｌおよびメタノール３０ｍｌを加え，
７０℃で１時間攪拌した。メタノールを留去し，残渣に
水を加え，１Ｎ塩酸で中和した。析出した結晶をイソプ
ラパノールで洗浄して ２−［Ｎ−（３，４−ジクロロ
ベンジル）−３，４−ジクロロチオベンズアミド］−４
−チアゾール酢酸１．１５ｇを得た。 融点 ２００〜２０３℃（分解） 核磁気共鳴スペクトル（ＤＭＳＯ−ｄ₆，ＴＭＳ内部標
準）

【００１８】δ：４．００（２Ｈ，ｓ），５．７２（２
Ｈ，ｓ），７．０８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ
ｚ），７．２８（１Ｈ，ｓ），７．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝２Ｈｚ），７．５８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．
６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），８．１２（１Ｈ，ｄ
ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈｚ），８．１８（１Ｈ，ｓ）

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 31/425 ＡＥＤ // Ｃ１２Ｎ 9/99

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 一般式（Ｉ） 【化１】 （式中，Ｘ^1-4は同一または異なるハロゲン原子を意味
   する。）で示されるチアゾール酢酸誘導体またはその塩