JPH07120447A - グリコヘモグロビン分析計 - Google Patents
グリコヘモグロビン分析計Info
- Publication number
- JPH07120447A JPH07120447A JP26604793A JP26604793A JPH07120447A JP H07120447 A JPH07120447 A JP H07120447A JP 26604793 A JP26604793 A JP 26604793A JP 26604793 A JP26604793 A JP 26604793A JP H07120447 A JPH07120447 A JP H07120447A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- analysis
- time
- separation
- glycohemoglobin
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Abstract
(57)【要約】
【目的】患者から採血が行われる都度、分析が実行可能
なグリコヘモグロビン分析計を提供することを目的とす
る。 【構成】サンプリング機構１，送液機構２，分離・検出
機構３，データ処理機構４より構成される。 【効果】準備運転終了後待機させておき、分析時に同一
検体を繰り返し分析して定量値の差の絶対値がある一定
値以下になった時点で終了し、この時の定量値を打ち出
すことにより、断続的に訪れる外来患者の血液が分析で
きるという効果がある。
なグリコヘモグロビン分析計を提供することを目的とす
る。 【構成】サンプリング機構１，送液機構２，分離・検出
機構３，データ処理機構４より構成される。 【効果】準備運転終了後待機させておき、分析時に同一
検体を繰り返し分析して定量値の差の絶対値がある一定
値以下になった時点で終了し、この時の定量値を打ち出
すことにより、断続的に訪れる外来患者の血液が分析で
きるという効果がある。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、生化学分析装置及び方
法に係り、特に液体クロマトグラフィをベースにしたヘ
モグロビン亜分画を定量する分析計及び装置に関する。
法に係り、特に液体クロマトグラフィをベースにしたヘ
モグロビン亜分画を定量する分析計及び装置に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来、液体クロマトグラフィをベースに
したグリコヘモグロビン分析計は特開平3−255360 号公
報に記載されるように、分離カラムに陽イオン交換カラ
ムを、溶離液として塩濃度の異なる２ないし３種類の緩
衝液を使用し、ステップワイズあるいはグラジェント溶
出法によりヘモグロビンの亜分画を分離していた。この
方法は分離カラムの平衡化及び分離に時間を要し、１検
体当たりの分析時間が長かった。そのため、未知検体の
分析前に数回コントロールを分析し、分離カラムの平衡
化を十分に確保したあとで連続して分析しなければ効率
が悪かった。
したグリコヘモグロビン分析計は特開平3−255360 号公
報に記載されるように、分離カラムに陽イオン交換カラ
ムを、溶離液として塩濃度の異なる２ないし３種類の緩
衝液を使用し、ステップワイズあるいはグラジェント溶
出法によりヘモグロビンの亜分画を分離していた。この
方法は分離カラムの平衡化及び分離に時間を要し、１検
体当たりの分析時間が長かった。そのため、未知検体の
分析前に数回コントロールを分析し、分離カラムの平衡
化を十分に確保したあとで連続して分析しなければ効率
が悪かった。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】上記従来技術は分析を
開始する時までに相当数の検体が確保できる施設では有
効であるが、小規模の病院のように外来患者が不定期に
しかも断続的に来るような施設では検体数が集まるまで
分析を遅らせるなどの対策が必要であった。一方、糖尿
病患者の増加に伴い、専門外来の病院が現れた。このよ
うな病院では検体数が多くても一日当たり数十検体であ
り、分析は外注に出されているのが通例であった。しか
し、このような場合には医師による患者への治療あるい
は生活指導は前回（通常約１ヵ月前）来院時の分析デー
タに基づいて行われることになる。グリコヘモグロビン
はその性質上約１〜２ヵ月前の血糖値を反映すると言わ
れているため、これまでのように外注分析をした場合２
〜３ヵ月前の血糖状態に基づいて指導することになり問
題があった。
開始する時までに相当数の検体が確保できる施設では有
効であるが、小規模の病院のように外来患者が不定期に
しかも断続的に来るような施設では検体数が集まるまで
分析を遅らせるなどの対策が必要であった。一方、糖尿
病患者の増加に伴い、専門外来の病院が現れた。このよ
うな病院では検体数が多くても一日当たり数十検体であ
り、分析は外注に出されているのが通例であった。しか
し、このような場合には医師による患者への治療あるい
は生活指導は前回（通常約１ヵ月前）来院時の分析デー
タに基づいて行われることになる。グリコヘモグロビン
はその性質上約１〜２ヵ月前の血糖値を反映すると言わ
れているため、これまでのように外注分析をした場合２
〜３ヵ月前の血糖状態に基づいて指導することになり問
題があった。
【０００４】本発明は、このような事情に基づいてなさ
れたものであり、患者から採血が行われる都度分析が実
行可能なグリコヘモグロビン分析計を提供することを目
的とする。
れたものであり、患者から採血が行われる都度分析が実
行可能なグリコヘモグロビン分析計を提供することを目
的とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】このような目的を達成す
るために、本発明は溶離液とポンプとを連結する配管を
カラム恒温ユニット内を通して加熱し気泡トラップにて
配管内の気泡がポンプに入らないようにしたものであ
る。
るために、本発明は溶離液とポンプとを連結する配管を
カラム恒温ユニット内を通して加熱し気泡トラップにて
配管内の気泡がポンプに入らないようにしたものであ
る。
【０００６】また、分離カラムが平衡状態に達するまで
待たずに分析する為に待機の状態から検体分析へ移行
後、即検体を連続して分析し、ｎ回目とｎ−１回目との
定量値の差の絶対値が指定された一定値以下になった時
点でその検体の分析を終了するようにしたものである。
待たずに分析する為に待機の状態から検体分析へ移行
後、即検体を連続して分析し、ｎ回目とｎ−１回目との
定量値の差の絶対値が指定された一定値以下になった時
点でその検体の分析を終了するようにしたものである。
【０００７】さらに、カラムのロット差及び装置間差が
存在しても許容しうるように、最大の繰返し回数ｎとｎ
回目とｎ−１回目の定量値の差（絶対値）が書き変え可
能としたものである。
存在しても許容しうるように、最大の繰返し回数ｎとｎ
回目とｎ−１回目の定量値の差（絶対値）が書き変え可
能としたものである。
【０００８】
【作用】本発明によるグリコヘモグロビン分析計は、分
離カラムを室温より高めに維持し、溶離液をこのカラム
恒温ユニット内を通過させて飽和状態にある溶存空気を
気泡とし、気泡トラップにて捕集する。これにより、待
機行程の低流量から分析行程の定常流量に移行時に速や
かに安定した流量状態を得ることができる。
離カラムを室温より高めに維持し、溶離液をこのカラム
恒温ユニット内を通過させて飽和状態にある溶存空気を
気泡とし、気泡トラップにて捕集する。これにより、待
機行程の低流量から分析行程の定常流量に移行時に速や
かに安定した流量状態を得ることができる。
【０００９】また、本発明による分析計は、分析行程に
移行後連続して同一検体を分析し、ｎ回目とｎ−１回目
の定量値の差（絶対置）がある一定値以下になった時点
で分析終了とする。液体クロマトグラフをベースとした
グリコヘモグロビン分析計では濃度の異なる２〜３種類
の溶離液を一定時間間隔で送液する。そのため、分離カ
ラムの状態が平衡化されるまで数回のサイクルが必要で
あり、従来は一連の分析の前に平衡化したあと検体分析
に入っていた。本発明では定量値が安定して出力される
まで繰返し分析するので平衡化前の誤った定量値が出力
されることはない。
移行後連続して同一検体を分析し、ｎ回目とｎ−１回目
の定量値の差（絶対置）がある一定値以下になった時点
で分析終了とする。液体クロマトグラフをベースとした
グリコヘモグロビン分析計では濃度の異なる２〜３種類
の溶離液を一定時間間隔で送液する。そのため、分離カ
ラムの状態が平衡化されるまで数回のサイクルが必要で
あり、従来は一連の分析の前に平衡化したあと検体分析
に入っていた。本発明では定量値が安定して出力される
まで繰返し分析するので平衡化前の誤った定量値が出力
されることはない。
【００１０】
【実施例】本発明によるグリコヘモグロビン分析計につ
いて図１により説明する。
いて図１により説明する。
【００１１】検体を吸引，吐出，注入するノズル１２，
ノズルを固定する可動アーム８，可動アーム８を駆動す
るモータ９，全血の検体を希釈・溶血する希釈ポート
７，検体の吸引等に使用するシリンジ１０，希釈・溶血
液１１，溶血サンプルを注入する注入弁１３から構成さ
れるサンプリング機構１，溶離液１４ａ，ｂ間で濃度勾
配を発生させるグラジェントユニット１６，送液ポンプ
１５から構成される送液機構２，溶血サンプルをヘモグ
ロビンの亜分画に分離する分離カラム１７，分離カラム
を室温より高く維持する恒温ユニット１８，検知器１９
から構成される分離・検出機構３，データ処理機構４よ
り構成される。溶離液が流通する配管２０は、グラジェ
ントユニット１６に至る途中で恒温ユニット１８を通過
する。もし、恒温ユニット１８を通過中に溶離液に気泡
が発生した場合は気泡トラップ２１で捕集するようにな
っている。
ノズルを固定する可動アーム８，可動アーム８を駆動す
るモータ９，全血の検体を希釈・溶血する希釈ポート
７，検体の吸引等に使用するシリンジ１０，希釈・溶血
液１１，溶血サンプルを注入する注入弁１３から構成さ
れるサンプリング機構１，溶離液１４ａ，ｂ間で濃度勾
配を発生させるグラジェントユニット１６，送液ポンプ
１５から構成される送液機構２，溶血サンプルをヘモグ
ロビンの亜分画に分離する分離カラム１７，分離カラム
を室温より高く維持する恒温ユニット１８，検知器１９
から構成される分離・検出機構３，データ処理機構４よ
り構成される。溶離液が流通する配管２０は、グラジェ
ントユニット１６に至る途中で恒温ユニット１８を通過
する。もし、恒温ユニット１８を通過中に溶離液に気泡
が発生した場合は気泡トラップ２１で捕集するようにな
っている。
【００１２】次に本分析計の動作について、図２を用い
て説明する。
て説明する。
【００１３】（１）スタート 電源を投入すると本分析計を構成する全ての部品に通電
される。
される。
【００１４】（２）準備運転 ポンプが通常の流量で送液を開始する。恒温ユニット１
８，カラム圧力，検知器１９のランプ強度等が安定した
ことを確認する。検出信号のノイズ，ドリフト，圧力等
がある一定条件を満足するまで動作する。
８，カラム圧力，検知器１９のランプ強度等が安定した
ことを確認する。検出信号のノイズ，ドリフト，圧力等
がある一定条件を満足するまで動作する。
【００１５】（３）リファレンス分析 準備運転完了条件をクリアしたら希釈ポート６に入れて
あるリファレンス（溶血液）を分析し、グリコヘモグロ
ビン（ＨｂＡ1c），ヘモグロビンＦ，ヘモグロビン（Ｈ
ｂＡ0）等の保持時間等を確認する。
あるリファレンス（溶血液）を分析し、グリコヘモグロ
ビン（ＨｂＡ1c），ヘモグロビンＦ，ヘモグロビン（Ｈ
ｂＡ0）等の保持時間等を確認する。
【００１６】（４）待機 溶離液の送液流量を通常分析時より低めに溶とし、分析
キーが押されるまで待機する。
キーが押されるまで待機する。
【００１７】（５）分析 分析キーを押すと分析行程に入る。ポンプの流量は通常
状態に上がり、可動アーム８が前方にスライドし検体の
一定量を吸引する。次に検体を希釈・溶血液１１ととも
に希釈ポート６に吐出する。この溶血サンプルを注入ポ
ート７より注入弁１３に送る。このとき注入弁１３の流
路は破線に示すようになっている。次に注入弁１３を実
線の流路に切り換え、同時に濃度の異なる溶離液１４
ａ，ｂを混合しグラジェントを発生し、分離カラムへと
溶血サンプルを導いてヘモグロビン亜分画に分離する。
１回目に注入した溶血サンプルの分離が終了したら希釈
ポートに残っている溶血サンプルを注入ポート７により
再度注入し分離を開始する。この分析をｎ回繰り返す
が、ｎ回目の定量値とｎ−１回目の定量値の差がある一
定値以下になったらこの検体の分析を終了として待機す
る。繰り返し数ｎは整数であり任意に設定できる。も
し、設定した繰り返し数ｎと同じだけ分析してもｎ回目
とｎ−１回目の定量値の差が一定値以下にならない場合
にはエラーを表示し、ストップする。
状態に上がり、可動アーム８が前方にスライドし検体の
一定量を吸引する。次に検体を希釈・溶血液１１ととも
に希釈ポート６に吐出する。この溶血サンプルを注入ポ
ート７より注入弁１３に送る。このとき注入弁１３の流
路は破線に示すようになっている。次に注入弁１３を実
線の流路に切り換え、同時に濃度の異なる溶離液１４
ａ，ｂを混合しグラジェントを発生し、分離カラムへと
溶血サンプルを導いてヘモグロビン亜分画に分離する。
１回目に注入した溶血サンプルの分離が終了したら希釈
ポートに残っている溶血サンプルを注入ポート７により
再度注入し分離を開始する。この分析をｎ回繰り返す
が、ｎ回目の定量値とｎ−１回目の定量値の差がある一
定値以下になったらこの検体の分析を終了として待機す
る。繰り返し数ｎは整数であり任意に設定できる。も
し、設定した繰り返し数ｎと同じだけ分析してもｎ回目
とｎ−１回目の定量値の差が一定値以下にならない場合
にはエラーを表示し、ストップする。
【００１８】次に実際の分析例について説明する。
【００１９】分離カラムにはカルボキシメチル基を導入
したメタアクリレートポリマーゲルを充填したものを使
用した。カラムサイズは内径４.６mm ，長さは３５mmで
ある。溶離液には５２.５ｍmol／ｌリン酸緩衝液（ｐＨ
６.２）と２１０ｍmol／ｌのリン酸緩衝液（ｐＨ６.
１）を使用した。分析時の流量は１.２ｍｌ／min，待機
時は０.２ｍｌ／minとし、カラム温度は４０℃とした。
希釈・溶血液には０.１％の界面活性剤(Triton Ｘ−１
００）を用い、全血の検体を希釈・溶血液で約２００倍
に希釈して溶血サンプルとした。この１０μｌを注入し
た。ヘモグロビン亜分画の検知には波長４１５ｎｍ可視
光度計を使用した。上記した条件で得られたクロマトグ
ラムを図３に示す。
したメタアクリレートポリマーゲルを充填したものを使
用した。カラムサイズは内径４.６mm ，長さは３５mmで
ある。溶離液には５２.５ｍmol／ｌリン酸緩衝液（ｐＨ
６.２）と２１０ｍmol／ｌのリン酸緩衝液（ｐＨ６.
１）を使用した。分析時の流量は１.２ｍｌ／min，待機
時は０.２ｍｌ／minとし、カラム温度は４０℃とした。
希釈・溶血液には０.１％の界面活性剤(Triton Ｘ−１
００）を用い、全血の検体を希釈・溶血液で約２００倍
に希釈して溶血サンプルとした。この１０μｌを注入し
た。ヘモグロビン亜分画の検知には波長４１５ｎｍ可視
光度計を使用した。上記した条件で得られたクロマトグ
ラムを図３に示す。
【００２０】図２に示すフローにより、それぞれ３本の
カラムを用いて分析した結果を表１に示す。検体は糖尿
病患者３人の血液を用いた。カラム１と２は新品を，カ
ラム３は約２０００検体分析したものを使用した。新品
のカラムの場合には１回目の定量値が高めに出る傾向が
あるが、これは１回の分析でヘモグロビンＡ0(HbA0）が
完全に溶出しきれずにカラムに残留しているためと考え
られる。表１に見るように繰り返し数ｎを３に設定し、
さらに定量値の差の絶対値を０.１ に設定すればカラム
１及び２は３回分析した時点で、カラム３では２回分析
した時点で分析は終了することがわかる。
カラムを用いて分析した結果を表１に示す。検体は糖尿
病患者３人の血液を用いた。カラム１と２は新品を，カ
ラム３は約２０００検体分析したものを使用した。新品
のカラムの場合には１回目の定量値が高めに出る傾向が
あるが、これは１回の分析でヘモグロビンＡ0(HbA0）が
完全に溶出しきれずにカラムに残留しているためと考え
られる。表１に見るように繰り返し数ｎを３に設定し、
さらに定量値の差の絶対値を０.１ に設定すればカラム
１及び２は３回分析した時点で、カラム３では２回分析
した時点で分析は終了することがわかる。
【００２１】
【表１】
【００２２】
【発明の効果】以上の説明から明らかなように準備運転
終了後待機させておき、分析時に同一検体を繰り返し分
析して定量値の差の絶対値がある一定値以下になった時
点で終了し、この時の定量値を打ち出すことにより、断
続的に訪れる外来患者の血液が分析できるという効果が
ある。
終了後待機させておき、分析時に同一検体を繰り返し分
析して定量値の差の絶対値がある一定値以下になった時
点で終了し、この時の定量値を打ち出すことにより、断
続的に訪れる外来患者の血液が分析できるという効果が
ある。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明によるグリコヘモグロビン分析計の流路
を示す図である。
を示す図である。
【図２】本発明の分析手順を示す図である。
【図３】図１に示すグリコヘモグロビン分析計により得
られるクロマトグラムである。
られるクロマトグラムである。
【符号の説明】 １…サンプリング機構、２…送液機構、３…分離・検出
機構、４…データ処理機構、５…検体、８…可動アー
ム、９…駆動モータ、１０…シリンジ、１３…注入弁、
１４…溶離液、１５…送液ポンプ、１６…グラジェント
ユニット、１７…分離カラム、１８…恒温ユニット、１
９…検知器。
機構、４…データ処理機構、５…検体、８…可動アー
ム、９…駆動モータ、１０…シリンジ、１３…注入弁、
１４…溶離液、１５…送液ポンプ、１６…グラジェント
ユニット、１７…分離カラム、１８…恒温ユニット、１
９…検知器。
Claims (3)
- 【請求項１】検体を吸引・吐出し、希釈・溶血後その一
定量を注入するサンプリング機構と、塩濃度の異なる２
種類以上の溶離液を送液する送液機構と、サンプリング
機構により注入された溶血検体をヘモグロビン亜分画に
分離し、各分画を検知する分離・検出機構と、該分離・
検出機構からの検出信号を処理して定量計算を行うデー
タ処理機構からなるグリコヘモグロビン分析計におい
て、分離・検出機構を構成する分離カラムを室温より５
℃以上高く維持するように恒温ユニットを設け、溶離液
貯槽と送液ポンプとを連結する配管が前記恒温ユニット
内を通るようにするとともに、恒温ユニットと送液ポン
プを連結する配管途中に気泡トラップを設けたことを特
徴とするグリコヘモグロビン分析計。 - 【請求項２】請求項１に記載のグリコヘモグロビン分析
計において、電源を投入後ポンプ圧力，出力信号レベ
ル，出力信号ノイズ等の条件を満足するまで動作する準
備運転行程、準備運転終了後分析が実施されるまで溶離
液流量を準備運転あるいは／及び分析中よりも低くして
待機する待機行程、同一の未知検体を連続して２回以上
ｎ回分析し、ｎ回目の定量値とｎ−１回目の定量値との
差の絶対値が指定された一定値以下になった時に分析を
終了し、待機行程に移行する行程から構成される分析手
順を具備したことを特徴とするグリコヘモグロビン分析
計。 - 【請求項３】請求項２に記載のグリコヘモグロビン分析
計において、ｎ回目とｎ−１回目との定量値との差の絶
対値及び繰返し数ｎを書換え可能としたことを特徴とす
るグリコヘモグロビン分析計。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP26604793A JP3271394B2 (ja) | 1993-10-25 | 1993-10-25 | グリコヘモグロビン分析計 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP26604793A JP3271394B2 (ja) | 1993-10-25 | 1993-10-25 | グリコヘモグロビン分析計 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07120447A true JPH07120447A (ja) | 1995-05-12 |
| JP3271394B2 JP3271394B2 (ja) | 2002-04-02 |
Family
ID=17425660
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP26604793A Expired - Fee Related JP3271394B2 (ja) | 1993-10-25 | 1993-10-25 | グリコヘモグロビン分析計 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3271394B2 (ja) |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH09264889A (ja) * | 1996-03-28 | 1997-10-07 | Tosoh Corp | 液体クロマトグラフィーを用いた糖化ヘモグロビン測定装置のデータ処理方法 |
| JP2006023280A (ja) * | 2004-06-09 | 2006-01-26 | Hitachi High-Technologies Corp | 液体クロマトグラフ |
| JP2007040810A (ja) * | 2005-08-03 | 2007-02-15 | Hitachi High-Technologies Corp | 液体クロマトグラフ装置 |
| WO2007091654A1 (ja) | 2006-02-09 | 2007-08-16 | Arkray, Inc. | 液体クロマトグラフィ装置 |
| WO2007094242A1 (ja) | 2006-02-16 | 2007-08-23 | Arkray, Inc. | 脱気装置およびそれを備えた液体クロマトグラフィ装置 |
| WO2007111282A1 (ja) | 2006-03-24 | 2007-10-04 | Arkray, Inc. | グリコヘモグロビン濃度測定方法および濃度測定装置 |
| WO2007111283A1 (ja) | 2006-03-24 | 2007-10-04 | Arkray, Inc. | グリコヘモグロビン濃度測定方法および濃度測定装置 |
| JP2012053063A (ja) * | 2004-06-09 | 2012-03-15 | Hitachi High-Technologies Corp | 液体クロマトグラフ |
| WO2024219150A1 (ja) * | 2023-04-17 | 2024-10-24 | 株式会社島津製作所 | 液体クロマトグラフシステムおよび制御システム |
-
1993
- 1993-10-25 JP JP26604793A patent/JP3271394B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| WO2007091654A1 (ja) | 2006-02-09 | 2007-08-16 | Arkray, Inc. | 液体クロマトグラフィ装置 |
| EP2221616A2 (en) | 2006-02-09 | 2010-08-25 | ARKRAY, Inc. | Liquid chromatography apparatus |
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| US8495906B2 (en) | 2006-02-16 | 2013-07-30 | Arkray, Inc. | Degasifier and liquid chromatograph equipped therewith |
| WO2007111282A1 (ja) | 2006-03-24 | 2007-10-04 | Arkray, Inc. | グリコヘモグロビン濃度測定方法および濃度測定装置 |
| WO2007111283A1 (ja) | 2006-03-24 | 2007-10-04 | Arkray, Inc. | グリコヘモグロビン濃度測定方法および濃度測定装置 |
| US8268625B2 (en) | 2006-03-24 | 2012-09-18 | Arkray, Inc. | Method of measuring glycated hemoglobin concentration and concentration measuring apparatus |
| WO2024219150A1 (ja) * | 2023-04-17 | 2024-10-24 | 株式会社島津製作所 | 液体クロマトグラフシステムおよび制御システム |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3271394B2 (ja) | 2002-04-02 |
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