JPH072630B2 - う蝕予防剤 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はストレプトコッカス・ミ
ュータンス菌の全菌体又は菌体成分を動物に免疫して得
られる抗体を配合することにより、歯垢の形成を抑制し
てう蝕を予防することができるう蝕予防剤に関し、更に
詳述すれば抗体を長期間安定に保持し、それ故抗体の効
果を長期に亘って確実に発揮させることができるう蝕予
防剤に関する。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】歯の表
面に付着する歯垢は、約７０％が細菌、約２０％が細菌
により形成された多糖及び約１０％が食物残渣であり、
固く歯面にこびりついている。そして、その内部に貯え
られた酸がエナメル質を脱灰し、う蝕を引き起こすとい
われており、歯垢はう蝕の原因として注目されている。

【０００３】この歯垢は主にストレプトコッカス・ミュ
ータンスを中心とする口腔内細菌がショ糖から多糖を合
成することによって形成が促進される。即ち、ストレプ
トコッカス・ミュータンスはＧＴＦ（グルコシルトラン
スフェレース、デキストラン合成酵素）を産生し、これ
によりショ糖からデキストラン、ムタン等の粘着性多糖
を合成する。そして、この合成された多糖はストレプト
コッカス・ミュータンスをはじめ、他の菌（病原菌）を
巻き込み、一定の菌叢を有する歯垢を形成する。また、
ストレプトコッカス・ミュータンス等の菌は種々の糖を
利用して酸を産生し、この酸は多糖及び菌の壁の中に滞
留することにより、エナメル表面を脱灰していく。

【０００４】従って、う蝕を予防するためには、その大
きな原因とされているストレプトコッカス・ミュータン
ス数の抑制、歯垢の形成を抑制、阻害することが望まれ
る。

【０００５】従来、ストレプトコッカス・ミュータンス
の口腔内への定着を抑制する方法として、ストレプトコ
ッカス・ミュータンス全菌体を牛に免疫することによっ
て得られる母乳を使用する方法が知られてる（英国特許
第１５０５５１３号明細書）。

【０００６】本発明者らもストレプトコッカス・ミュー
タンス菌に由来する各種の抗原に対する抗体の中でスト
レプトコッカス・ミュータンス菌の口腔内の定着を阻害
する抗体の検討を行った。その結果、ストレプトコッカ
ス・ミュータンス菌、該菌の細胞壁画分、該菌の線維状
構造画分、該菌の線毛成分画分、該菌のグルコシルトラ
ンスフェレース画分、該菌のプロテイン抗原画分等を哺
乳動物に免疫することによって得られる抗血清及び乳中
の抗体が歯垢形成抑制効果を有することを見い出した
が、これらの抗体はう蝕予防剤中に必ずしも十分安定に
保持されず、特にラウリル硫酸ナトリウム等のアニオン
系界面活性剤の存在により失活し易い問題がある。この
ため、前記抗体の効果を長期に亘り良好に発揮させるた
めにはこれらの抗体をう蝕予防剤中に安定配合する必要
がある。

【０００７】

【課題を解決するための手段及び作用】本発明者らは、
上記事情に鑑み、ストレプトコッカス・ミュータンス菌
の全菌体又は菌体成分で動物を免疫することによって得
られる抗体をう蝕予防剤中に安定配合することについて
鋭意研究を行った結果、これら抗体をカラギーナンと併
用した場合、抗体をう蝕予防剤中に長期間に亘り安定に
保持させることができ、特に抗体を失活させ易いラウリ
ル硫酸ナトリウム等のアニオン系界面活性剤が配合され
ていても、カラギーナンの存在で前記抗体の失活が可及
的に防止され、長期間保存した後でも抗体の効果を有効
に発揮させることができることを知見し、本発明をなす
に至ったものである。

【０００８】以下、本発明につき更に詳しく説明する。
本発明のう蝕予防剤は、上述したように、ストレプトコ
ッカス・ミュータンス菌の全菌体又は菌体成分を抗原と
し、この抗原で動物を免疫することによって得られる抗
体が配合されているものである。

【０００９】ここで、抗原として用いるストレプトコッ
カス・ミュータンス菌は、例えばＢＨＩ培地の透析外液
を培地として使用し、生育した菌を洗浄後ホルマリン処
理するなど、公知の培養、前処理を行ったものが使用し
得る。この場合、ストレプトコッカス・ミュータンス菌
としては、人の口腔内より分離されるヒト型ストレプト
コッカス・ミュータンス菌で血清型がｃ，ｄ，ｅ，ｆも
しくはｇ型の菌株又は突然変異株が望ましく、特に人の
口腔内に多在する血清型分類ｃに属するものが好まし
い。このようなストレプトコッカス・ミュータンス菌と
しては、ＮＣＴＣ１０４４９、Ｉｎｇｂｒｉｔｔ，ＯＭ
Ｚ７０，ＪＣ−２等が挙げられ、また突然変異株として
Ｋ−Ｄｐ株（ＦＥＲＭ−ＢＰ３１７）、ＫＨ２株（ＦＥ
ＲＭ−Ｐ７１６６）、Ｋ−ＩＩＩ株（微工研菌寄第６３
１４号）等が好適に用いられる。

【００１０】本発明に用いられる抗体を得るための抗原
としては、上述したストレプトコッカス・ミュータンス
菌の全菌体又は菌体成分、特にストレプトコッカス・ミ
ュータンス菌の細胞壁画分、線維状構造画分、線毛成分
画分、グルコシルトランスフェレース（ＧＴＦ）画分、
プロテイン抗原画分が使用される。

【００１１】この場合、ストレプトコッカス・ミュータ
ンス菌の細胞壁画分はブリーワイズ〈Ｂｌｅｉｗｅｉ
ｓ〉らの方法（ジャーナル・オブ・バクテリオロジー
〈Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．〉，８８，１１９８−１２
００，１９６４）に従い、ブラウンの細胞破砕機を使用
し、直径０．１７〜０．１８ｍｍのガラスビーズを用い
て破砕処理を行い、得られた細胞壁をトリプシンで処理
して細胞壁に混在するタンパク質を除去し、蒸留水で洗
浄後凍結乾燥を行うという方法等により調製したものな
どが使用できる。線維状（ｐｉｌｉ状又はｆｉｍｂｒｉ
ａｌ状）構造物画分はジェイ・バン・ホーテ〈Ｊ．Ｖａ
ｎ Ｈｏａｔｅ〉らの方法（アーカイブス・オブ・オー
ラルバイオロジー〈Ａｒｃｈ．Ｏｒａｌ．Ｂｉｏ．〉，
１６，１１３１−１１４１，１９７１）に従い、ＢＨＩ
透析培地に５％ショ糖を加え、嫌気的条件下で培養し、
培養液の遠心分離上清に３倍量のエタノールを加えて沈
殿を集めるという方法等により調製したものなどが使用
できる。

【００１２】また、線毛成分画分として、鶴水らの方法
（日本細菌学雑誌，３８（１）４７１，１９８３）に従
い、１Ｍの食塩を含んだリン酸緩衝溶液のような溶媒を
用いて培養バクテリアから通常の細胞壁抽出法により調
製されたその純粋な構造物画分が用いられる。具体的に
は、例えばストレプトコッカス・ミュータンス変異株Ｋ
−Ｄｐ株の線毛成分画分として、該菌株を液体培養した
後、この培養液に硫酸アンモニウムを加えて３３％飽和
とし、上清を除去したのちに沈降物に１Ｍ塩化ナトリウ
ム添加リン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を加えて４℃で３日
間撹拌し、次いで遠心分離により菌体を除去し、上清に
硫酸アンモニウムを加えて６０％飽和とし、沈降部分を
リン酸緩衝液で透析した後、ショ糖密度勾配超遠心分画
法によってショ糖密度８〜１５％付近の分画を得、リン
酸緩衝液で再び透析を行って得られる線毛成分画分が用
いられる。

【００１３】更に、ＧＴＦ画分は井上らの方法（マイク
ロバイアル・アスペクト・オブ・デンタル・カリエス
〈Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｄｅｎ
ｔａｌｃａｒｉｅｓ〉Ｖｏｌ．ＩＩＩ，６６５−６８
２，１９７６〔インフォメーション・レトリアバル・イ
ンコーポレーション〈Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｎ Ｒｅｔｒ
ｉｅｖａｌ Ｉｎｃ．〉〕）に従い、ＢＨＩ透析培地に
ストレプトコッカス・ミュータンスを植菌し、生育後遠
心分離により菌体を除去し、上清に硫酸アンモニウムを
加えて４０％硫酸アンモニウム画分の沈殿を５０ｍＭの
リン酸緩衝液で透析し、濃縮した液を用いるという方法
等により調製したものなどが使用できる。

【００１４】また、プロテイン抗原画分はレーナー〈Ｌ
ｅｈｎｅｒ〉らの方法（ジャーナル・オブ・ジェネラル
・マイクロバイオロジー〈Ｊ．Ｇｅｎｅｒａｌ Ｍｉｃ
ｒｏｂｉｏｌｏｇｙ〉，１２２，２１７−２２５，１９
８１）に従い、ＢＨＩ透析培地で培養し、遠心して得ら
れた上清を７５％の硫酸アンモニウムを用いて分画し、
沈殿を採取し、この沈殿を６Ｍ尿素存在下でＤＥ−５２
カラムクロマトグラフィーを行い、更にプロテイン抗原
画分を生理食塩水に溶かし、透析後セフアロースＣＬ６
Ｂにてゲル濾過を行って画分を得るという方法等により
調製したものなどが使用し得る。

【００１５】前記抗原を動物に免疫する方法は通常の方
法が採用できる。また、免疫される動物としてはヤギ、
ヒツジ、ウマ、ウシ、ウサギ等の哺乳動物が有効に用い
られる。

【００１６】本発明は上述したように前記抗原を哺乳動
物に免疫することによって得られる抗血清、乳中の抗体
を有効成分として使用するものであるが、本発明におい
てはこの抗体を含む抗血清及び乳を用いてもよく、また
抗血清及び乳から分離精製された抗体を用いてもよい。
更に、これらの１種を単独で使用しても２種以上を混合
して使用してもよい。

【００１７】なお、抗体（抗血清や乳中のプロテイン画
分）は通常の抗体精製法に従い、抗血清や乳から分離す
ることができる。抗体精製法としては塩析法、ゲル濾過
法、イオン交換クロマトグラフィー、アフィニティクロ
マトグラフィーなどを挙げることができ、このなかで硫
酸アンモニウムを用いた塩析法が好ましい。塩析法は、
抗血清と乳を好ましくは４０％より多くない濃度におい
て硫酸アンモニウムで飽和し、沈殿を精製し、引続き沈
殿を生理食塩水で塩析し、抗体として精製沈殿を得るも
のである。好ましい抗体はウマ抗血清、ウシ抗血清及び
乳から得られるものである。

【００１８】抗体の投与量は、０．０００１〜５０ｇ／
ｋｇ／日とすることが好ましく、この場合抗体はこれを
含む剤型全体の０．０００２〜１０％（重量％、以下同
じ）、特に０．００２〜５％の配合量とし、上記投与量
において使用することが好ましい。

【００１９】本発明のう蝕予防剤は、上記抗体に加えて
この抗体の安定化剤としてカラギーナンを配合するもの
であり、これにより抗体の失活を効果的に防止すること
ができ、特に抗体を失活させ易いアニオン活性剤等が配
合されていても抗体を長期間に亘り安定して保持でき
る。

【００２０】ここで、カラギーナンとしては、ι，κ，
λの各タイプの単独又は混合物が好ましく使用し得る。

【００２１】カラギーナンの配合量は、う蝕予防剤全体
の０．００１〜１０％、特に０．０５〜５％とすること
が好ましい。

【００２２】本発明のう蝕予防剤にあっては、前記抗体
に加えてフッ素化合物、クロルヘキシジン類、溶菌酵
素、バクテリオシン、グルコシルトランスフェレースイ
ンヒビター、プロテアーゼ及びデキストラナーゼから選
ばれる１種以上のシネルギストを組合せて用いることが
でき、これにより更にストレプトコッカス・ミュータン
スの定着が抑制されて歯垢形成抑制効果が著しく高ま
り、う蝕予防効果を向上させることができる。

【００２３】この場合、フッ素化合物としては、モノフ
ルオルリン酸ナトリウム、モノフルオルリン酸カリウ
ム、モノフルオルリン酸水素ナトリウム、モノフルオル
リン酸アンモニウム等のモノフルオルリン酸塩、フッ化
ナトリウム、フッ化カリウム、フッ化リチウム、フッ化
アンモニウム等のアルカリ金属フッ化物、ヘキサフルオ
ルジルコン酸カリウム、ヘキサフルオルチタン酸カリウ
ム、フッ化セシウム、フッ化ニッケル、フッ化ジルコニ
ウム、フッ化銀、ヘキシルアミンハイドロフルオライ
ド、ラウリルアミンハイドロフルオライド、セチルアミ
ンハイドロフルオライド、グリシンハイドロフルオライ
ド、リシンハイドロフルオライド、アラニンハイドロフ
ルオライド等が用いられる。これらの中で、モノフルオ
ルリン酸ナトリウム、モノフルオルリン酸カリウムのよ
うなモノフルオルリン酸塩、フッ化ナトリウム、フッ化
カリウム、フッ化アンモニウムのようなアルカリ金属フ
ッ化物、フッ化第１錫、フッ化塩化第１錫等の第１錫含
有フッ化物が好ましく使用し得るが、特にモノフルオル
リン酸ナトリウム、フッ化ナトリウム、フッ化第１錫が
好適に用いられる。

【００２４】クロルヘキシジン類としては、塩酸クロル
ヘキシジン、グルコン酸クロルヘキシジン等が使用され
る。

【００２５】溶菌酵素としては、ストレプトマイセス・
グリシュース〈Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅ
ｕｓ〉，ストレプトマイセス・ディアスタートクロマジ
ェン〈Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｄｉａｓｔａｔｏｃ
ｈｒｏｍａｇｅｎｅｓ〉，ストレプトマイセス・ファリ
ノーザス〈Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｆａｒｉｎｏｓ
ｕｓ〉，キャラロプシィス属〈Ｃｈａｌａｒｏｐｓｉ
ｓ〉，フラボバクテリウム属〈Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒ
ｉｕｍ〉，ミキソバクター属〈Ｍｙｘｏｂａｃｔｅ
ｒ〉，スタフィロコッカス・エピデルミーディス〈Ｓｔ
ａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉ
ｓ〉，ミクロコッカス属〈Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ〉，
シュードモナス・アルギノサ〈Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
ａｅｔｕｇｉｎｏｓａ〉，エロモナス属〈Ａｅｒｏｍ
ｏｎａｓ〉，ストレプトマイセス・アルブス〈Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ ａｌｂｕｓ〉，ストレプトマイセス
・グロビスポラス〈Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｌｏ
ｂｉｓｐｏｒｕｓ〉等に由来するものが使用でき、バク
テリオシンとしてはエンテロバクター・クロアセ〈Ｅｎ
ｔｅｒｏｂａｃｔｏｒ ｃｌｏａｃａｅ〉，エッシュシ
ア・コリ〈Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ〉，プロ
テウス・ミアビリス〈Ｐｒｏｔｅｕｓ ｍｉａｂｉｌｉ
ｓ〉，シュードモナス・アルギノサ〈Ｐｓｅｕｄｏｍｏ
ｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ〉，ストレプトコッカス
・ミュータンス〈Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｍｕｔａ
ｎｓ〉，スタフィロコッカス・スタフィロリティカス
〈Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓｔａｐｈｙｌｏｌ
ｙｔｉｃｕｓ〉等に由来するものが使用できる。

【００２６】ＧＴＦインヒビターとしては、エリスリナ
ム属〈Ａｒｔｈｒｉｎｕｍ ｓｐ．〉，フザリウム属
〈Ｆｕｓａｒｉｎｕｍ ｓｐ．〉，ミクロフォミナ属
〈Ｍａｃｒｏｐｈｏｍｉｎａ ｓｐ．〉，ミクロモノス
ポラ属〈Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ ｓｐ．〉，ノ
モニラ属〈Ｇｎｏｍｏｎｉｅｌｌａ ｓｐ．〉，ノテュ
リスポリウム属〈Ｎｏｄｕｌｉｓｐｏｒｉｎｕｍ ｓ
ｐ．〉，アスペルギルス属〈Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ
ｓｐ．〉等に由来するものが好適に使用でき、具体的に
は特開昭５６−１０３１９３号公報、同５７−２８０９
７号公報、同５７−９８２１５号公報、同５７−１４６
５８７号公報記載のもの等が使用できる。

【００２７】プロテアーゼとしては、アスペルギルス属
〈Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓｐ．〉，バチルス属〈Ｂ
ａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．〉等に由来するものが好適に使
用でき、デキストラナーゼとしてはケトミウム属〈Ｃｈ
ａｅｔｏｍｉｕｍ ｓｐ．〉，ストレプトマイセス属
〈Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐ．〉等に由来するも
のが好適に使用できる。

【００２８】なお、本発明においては、これらシネルギ
スト成分の１種を単独で用いてもよく、２種以上を併用
するようにしてもよい。また、前記の抗体とシネルギス
ト成分とは一緒に混合して所定の剤型に調製してもよ
く、或いは抗体とシネルギスト成分とをそれぞれ別個の
剤型に調製し、使用時に両者を併用するようにしてもよ
い。

【００２９】これらシネルギスト成分の投与量は、フッ
素化合物の場合はフッ素換算で０．０００１〜１ｇ／ｋ
ｇ／日、クロルヘキシジン類の場合はクロルヘキシジン
として０．０００１〜１ｇ／ｋｇ／日、溶菌酵素及びバ
クテリオシンの場合は０．０００１〜１０ｇ／ｋｇ／
日、グルコシルトランスフェレースインヒビターの場合
は０．０００１〜１０ｇ／ｋｇ／日、プロテアーゼ、デ
キストラナーゼの場合はそれぞれ０．０００１〜５ｇ／
ｋｇ／日とすることができる。これらシネルギスト成分
はこれを含む剤型全体に対しフッ素化合物の場合はフッ
素換算で０．０００１〜０．１％、特に０．０００１〜
０．００１％、クロルヘキシジン類の場合はクロルヘキ
シジンとして０．１〜１０００ｐｐｍ、特に１０〜１０
０ｐｐｍ、溶菌酵素及びバクテリオシンの場合はそれぞ
れ０．０００１〜１０％、特に０．００１〜５％、グル
コシルトランスフェレースインヒビターの場合は０．０
００１〜１０％、特に０．００１〜５％、プロテアーゼ
の場合は０．０００１〜１０％、特に０．００１〜５
％、デキストラナーゼの場合は０．０００１〜１０％、
特に０．００１〜５％の配合量とし、上記投与量におい
て口腔内適用することができる。

【００３０】本発明に係るう蝕予防剤は、練歯磨、粉歯
磨、液状歯磨等の歯磨類、マウスウオッシュ、口腔内パ
スタ、歯肉マッサージクリーム、うがい用発泡錠剤等の
錠剤、トローチ、チューインガム、アイスクリーム、ホ
イップクリームなど、口腔内に適用される種々の態様に
調製され、使用されるが、本発明のう蝕予防剤の他の成
分としては、使用目的、使用態様に応じた適宜な成分が
用いられる。

【００３１】例えば、歯磨の調製には、第２リン酸カル
シウム・２水和物、第２リン酸カルシウム・無水物、第
１リン酸カルシウム、第３リン酸カルシウム、炭酸カル
シウム、ピロリン酸カルシウム、不溶性メタリン酸ナト
リウム、非晶質シリカ、結晶質シリカ、アルミノシリケ
ート、酸化アルミニウム、水酸化アルミニウム、第３リ
ン酸マグネシウム、炭酸マグネシウム、硫酸マグネシウ
ム、酸化チタン及びレジン等の研磨剤が通常５〜９５
％、好ましくは１５〜６０％の量で配合される。

【００３２】練歯磨のようなペースト状組成物の調製に
は、粘結剤が配合されるが、本発明では粘結剤としてカ
ラギーナンを用いる。この場合、カラギーナンに加えて
他の粘結剤を併用してもよい。ここで、他の粘結剤とし
ては、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチル
セルロース、カルボキシメチルヒドロキシエチルセルロ
ースナトリウム、ヒドロキシエチルセルロース、アルギ
ン酸ナトリウム、アラビアガム、キサンタンガム、トラ
ガカントガム、カラヤガム、ポリビニルアルコール、ポ
リアクリル酸ナトリウム、カルボキシビニルポリマー及
びポリビニルピロリドン等が挙げられる。なお、粘結剤
の配合量は通常０．３〜５％とすることができる。

【００３３】練歯磨及びマウスウオッシュのようなペー
スト状及び液状口腔用組成物の調製には、ポリエチレン
グリコール、エチレングリコール、ソルビトール、グリ
セリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリ
コール、キシリット、マルチット及びラクチット等の粘
稠剤が通常１０〜７０％の量で配合される。

【００３４】また、本発明う蝕予防剤には、アニオン系
界面活性剤、更にノニオン系，カチオン系，両性イオン
系の界面活性剤を０．１〜６％、特に０．３〜３％配合
することができる。この場合、本発明においては、上述
したようにカラギーナンの配合により、抗体を失活させ
易いアニオン系界面活性剤が配合されていても抗体の失
活を効果的に防止し得るため、アニオン系界面活性剤、
例えばラウリル硫酸ナトリウム、ミリスチル硫酸ナトリ
ウム等の炭素数が８〜１８のアルキル硫酸エステルの水
溶性塩、ラウリルモノグリセリド硫酸ナトリウム、ヤシ
油脂肪酸モノグリセリド硫酸ナトリウム、高級脂肪酸モ
ノグリセリド硫酸ナトリウム等の脂肪酸基の炭素数が１
０〜１８である水溶性の高級脂肪酸モノグリセリド硫酸
塩、α−オレフィンスルホネート、パラフィンスルホネ
ート、Ｎ−メチル−Ｎ−パルミトイルタウライドのナト
リウム塩、Ｎ−ラウロイルザルコシン酸ナトリウム、Ｎ
−ラウロイル−β−アラニンナトリウム塩等、なかでも
アルキル硫酸エステルの水溶性塩を有効に配合すること
ができる。

【００３５】また、ノニオン活性剤としては、ラウリン
酸ジエタノールアミド等の脂肪酸アルカノールアミド、
ショ糖モノ及びジラウレート等のショ糖脂肪酸エステ
ル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポ
リオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン
硬化ヒマシ油誘導体、ラクトース脂肪酸エステル、ラク
チトール脂肪酸エステル、マルチトール脂肪酸エステ
ル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロック
コポリマー等が挙げられ、これらの１種又は２種以上が
使用され、これらノニオン活性剤の配合により前記抗体
の安定性を更に高めることができる。

【００３６】更に、本発明う蝕予防剤には、必要に応じ
てペパーミント、スペアミント等の精油、ｌ−メントー
ル、カルボン、オイゲノール、アネトール等の香料素材
などの香料、サッカリンナトリウム、ステビオサイド、
ネオヘスペリジルジヒドロカルコン、グリチルリチン、
ペリラルチン、ｐ−メトキシシンナミックアルデヒドな
どの甘味剤、防腐剤などが適宜配合される。なお、本発
明においては、ムタナーゼ、ソルビン酸、アレキシジ
ン、ヒノキチオール、セチルピリジニウムクロライド、
アルキルグリシン、アルキルジアミノエチルグリシン
塩、アラントイン、ε−アミノカプロン酸、トラネキサ
ム酸、アズレン、ビタミンＥ、水溶性第一もしくは第二
リン酸塩、第四級アンモニウム化合物、塩化ナトリウ
ム、生薬抽出物などの有効成分を配合することもでき
る。

【００３７】また、他のタイプの組成物の場合も通常用
いられている適宜な成分を選び、通常の方法でそれらを
混合して調製される。

【００３８】ここで、本発明う蝕予防剤を液状又はペー
スト状に形成する場合、そのｐＨは必ずしも制限されな
いが、ｐＨ４〜１０、より望ましくは５〜９、特に５．
５〜７．５とすることが好ましい。

【００３９】本発明のう蝕予防剤は、適宜な容器に収容
されて保存され、使用に供せられる。例えば練歯磨の場
合には、プラスチックチューブやアルミニウム箔ラミネ
ートプラスチックチューブ等のプラスチック容器、アル
ミニウムチューブ等の金属容器に収容され得る。この場
合、前記抗体は金属容器中で比較的失活し易いが、カラ
ギーナンを配合することにより、抗体の金属容器中での
失活を良好に防止し得るため、本発明う蝕予防剤におい
ては、アルミニウムチューブ等の金属容器を有効に使用
し得る。

【００４０】

【発明の効果】本発明のう蝕予防剤は、その剤型等に応
じた適宜な態様で口腔内に適用するものであり、ストレ
プトコッカス・ミュータンス菌の全菌体又は菌体成分で
動物を免疫することによって得られる抗体がストレプト
コッカス・ミュータンス菌の口腔内の定着を阻害し、歯
垢の形成を抑制することにより、う蝕を予防するもので
あるが、本発明によればこの抗体にカラギーナンを併用
していることにより、抗体の失活が防止され、長期間保
存された後でも抗体の効果を有効に発揮し得るものであ
る。

【００４１】

【実施例】以下、実験例及び実施例を示し、本発明を具
体的に説明する。なお、下記実験例及び実施例に使用し
た抗血清、母乳及び抗体の製造例を次に示す。

【００４２】〔製造例〕下記抗原を使用し、下記の方法
によりその抗血清及び母乳を得た。 （１）抗原ストレプトコッカス・ミュータンス ＢＨＩ培地の透析外液を培地として使用し、生育した菌
を洗浄した後、ホルマリン処理したものを使用。ストレプトコッカス・ミュータンスの細胞壁画分 ブリーワイズ〈Ｂｌｅｉｗｅｉｓ〉らの方法（ジャーナ
ル・オブ・バクテリオロジー〈Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏ
ｌ．〉，８８，１１９８−１２００，１９６４）に従っ
て調製したものを使用。ストレプトコッカス・ミュータンスの線維状構造物画分 ジェイ・バン・ホーテ〈Ｊ．Ｖａｎ Ｈｏａｔｅ〉らの
方法（アーカイブス・オブ・オーラルバイオロジー〈Ａ
ｒｃｈ．Ｏｒａｌ．Ｂｉｏ．〉，１６，１１３１−１１
４１，１９７１）に準じて調製したものを使用。ストレプトコッカス・ミュータンスのグルコシルトラン
スフェレース画分 井上らの方法（マイクロバイアル・アスペクト・オブ・
デンタル・カリエス〈Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｓｐｅｃ
ｔｓ ｏｆ ｄｅｎｔａｌ ｃａｒｉｅｓ〉Ｖｏｌ．Ｉ
ＩＩ，６６５−６８２，１９７６〔インフォメーション
・レトリアバル・インコーポレーション〈Ｉｎｆｏｒｍ
ａｔｉｎ Ｒｅｔｒｉｅｖａｌ Ｉｎｃ．〉〕）に従っ
て調製したものを使用。ストレプトコッカス・ミュータンスのプロテイン抗原画
分 レーナー〈Ｌｅｈｎｅｒ〉らの方法（ジャーナル・オブ
・ジェネラル・マイクロバイオロジー〈Ｊ．Ｇｅｎｅｒ
ａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ〉，１２２，２１７−
２２５，１９８１）に従って調製したものを使用。ストレプトコッカス・ミュータンスの線毛成分画分 鶴水らの方法（日本細菌学雑誌，３８（１）４７１，１
９８３）に従って調製したものを使用。

【００４３】（２）抗血清、母乳及び抗体の調製法 ５０〜１００μｇ／ｍｌの抗原を等量のフロイント完全
アジュバントと混合し、妊娠ヤギ、ウマ、ウシ又はウサ
ギの背部皮下に体重１ｋｇ当り０．３ｍｌを注射して免
疫し、その後２〜４週間おきに抗原とフロイント不完全
アジュバントとを混合したもので３回免疫し、出産後に
初乳を採取した。また、抗血清については上記と同様に
４回免疫後採血し、凝固させ、その遠心上清をサンプル
とした。

【００４４】次に、上記初乳サンプルに等量の０．９％
食塩水を加え、１５０００ｒｐｍで６０分間遠心分離し
た後、上層の脂肪と沈降物を除いて中間の液成分を採取
し、これに濃塩酸を加えてｐＨ４に調整した。更に、５
０００ｒｐｍで３０分間遠心分離し、その上清をトリス
ハイドロキシアミノメタンで中和した後、硫酸アンモニ
ウムを加えて７５％飽和にし、得られた沈降物を採取
し、これをリン酸緩衝液で透析して、母乳の抗体成分
（内液）を得た。

【００４５】また、上記抗血清に硫酸アンモニウムを加
えて５０％飽和とし、得られた沈降物をリン酸緩衝液で
透析して、抗血清の抗体（内液）を得た。

【００４６】〔実験例１〕下記処方の練歯磨を調製し
た。 水酸化アルミニウム ４３％ ６０％ソルビット液 ３５ プロピレングリコール ３．０ 粘結剤 １．０ ゼラチン ０．３ サッカリンナトリウム ０．１ 香料 １．０ モノフルオルリン酸ナトリウム ０．７６ メチルパラベン ０．２ ブチルパラベン ０．０１ ラウリル硫酸ナトリウム ０．８ ラウリン酸ジエタノールアミド １．０ 馬抗Ｓ．ミュータンス１０４４９株線毛成分血清 ０．５水 残 合 計 １００．０％

【００４７】次に、上記練歯磨を４０℃で２週間保存し
た後、その抗体活性を下記方法により測定し、抗体残存
率を調べた。結果を表１に示す。なお、結果は粘結剤と
してカラギーナンを用いた練歯磨を４０℃で２週間保存
した後の抗体活性を１００とした場合の相対活性度で示
した。

【００４８】抗体活性測定法 歯磨１ｇに対して４ｍｌのリン酸緩衝液（０．１Ｍ，ｐ
Ｈ７）を加え、歯磨中の可溶成分をリン酸緩衝液に溶解
した後、遠心分離し、その上清液を採取する。この上清
液中の抗体成分の活性をストレプトコッカス・ミュータ
ンス変異株Ｋ−Ｄｐ株の菌体を抗原としてＥＬＩＳＡ法
（イング バル イー．等，ジャーナル・オブ・イムノ
ロジー〈Ｅｎｇ ｖａｌｌ Ｅ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉ
ｍｍｕｎｏｌ．〉，１０９：１２９−１３５，１７９
２）で測定する。

【００４９】抗体成分の活性は４０５ｎｍでの吸光度を
指標とした場合に最大の吸光度を示したヘプトン配合歯
磨を１００％とした。

【００５０】

【表１】

【００５１】以下、実施例を示す。 〔実施例１〕歯磨 プロピレングリコール ２．５％ カラギーナン １．０ メチルパラベン ０．１ ブチルパラベン ０．０１ 安息香酸ナトリウム ０．２ ６０％ソルビット液 ３０．０ サッカリンナトリウム ０．１５ モノフルオルリン酸ナトリウム ０．７６ 塩酸クロルヘキシジン ０．０１ ラウリル硫酸ナトリウム ０．８ ラウロイルザルコシン酸ナトリウム ０．２ ポリオキシエチレン（４０モル）硬化ヒマシ油 ０．８ 香料 ０．６ 研磨性シリカ ３５．０ 馬抗Ｓ．ミュータンスＪＣ２株全菌体抗体 ０．０１ リゾチーム ０．０１精製水 残 合 計 １００．０％

【００５２】 〔実施例２〕洗口剤 ポリオキシエチレン（４０モル）ソルビタンモノステアレート ３．０％ カラギーナン ０．０１ リン酸２ナトリウム １．２５ クエン酸 ０．８８ グルコン酸クロルヘキシジン ０．０１ モノフルオルリン酸ナトリウム ３．８ 馬抗Ｓ．ミュータンス１０４４９株全菌体抗体 ０．１ ソルビット １５．０ 香料 ０．８ サッカリンナトリウム ０．２精製水 残 合 計 １００．０％ 使用後に水で１０倍に希釈する。

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ストレプトコッカス・ミュータンス菌の
   全菌体又は菌体成分で動物を免疫することによって得ら
   れる抗体が配合されていると共に、カラギーナンが配合
   されてなることを特徴とするう蝕予防剤。
2. 【請求項２】 ストレプトコッカス・ミュータンス菌が
   ヒト型ストレプトコッカス・ミュータンス菌で血清型が
   ｃ，ｄ，ｅ，ｆもしくはｇ型の菌株又は突然変異株であ
   る特許請求の範囲第１項記載のう蝕予防剤。
3. 【請求項３】 突然変異株がストレプトコッカス・ミュ
   ータンス変異株Ｋ−Ｄｐ株，ＫＨ２株又はＫ−ＩＩＩ株
   である特許請求の範囲第２項記載のう蝕予防剤。
4. 【請求項４】 菌体成分がストレプトコッカス・ミュー
   タンス菌の細胞壁画分，線維状構造画分，線毛成分画
   分，グルコシルトランスフェレース画分又はプロテイン
   抗原画分である特許請求の範囲第１項乃至第３項いずれ
   か記載のう蝕予防剤。
5. 【請求項５】 抗体としてこの抗体を含む抗血清又は乳
   を配合した特許請求の範囲第１項乃至第４項いずれか記
   載のう蝕予防剤。
6. 【請求項６】 抗体としてこの抗体を含む抗血清又は乳
   から分離したものを配合した特許請求の範囲第１項乃至
   第４項いずれか記載のう蝕予防剤。
7. 【請求項７】 抗体の配合量が予防剤全体の０．０００
   ２〜１０重量％である特許請求の範囲第１項乃至第６項
   いずれか記載のう蝕予防剤。
8. 【請求項８】 カラギーナンの配合量が予防剤全体の
   ０．００１〜１０重量％である特許請求の範囲第１項乃
   至第７項いずれか記載のう蝕予防剤。
9. 【請求項９】 う蝕予防剤のｐＨを４〜１０の範囲とし
   た特許請求の範囲第１項乃至第８項いずれか記載のう蝕
   予防剤。
10. 【請求項１０】う蝕予防剤のｐＨを５〜９の範囲とした
    特許請求の範囲第９項記載のう蝕予防剤。