JPH072956B2

JPH072956B2 - 固定化酵素配合洗浄剤

Info

Publication number: JPH072956B2
Application number: JP28667886A
Authority: JP
Inventors: 周治佐久間; 芳徳久保木; 公則渥美; 宗輝斉藤; 恵二郎藤田; 勉石崎
Original assignee: デンタル化学株式会社
Priority date: 1986-12-03
Filing date: 1986-12-03
Publication date: 1995-01-18
Anticipated expiration: 2010-01-18
Also published as: JPS63139997A

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は、固定化アミラーゼ、固定化プロテアーゼ、及
び固定化リパーゼのうち少くとも一種の固定化酵素を含
有している固定化酵素配合洗浄剤に関する。

（従来の技術）従来より、脂肪酸塩、アルキル硫酸塩、アルキルベンゼ
ンスルホン酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテ
ル、ポリオキシエチレンアルキルフエニルエーテルなど
の界面活性剤に、炭酸ソーダー、珪酸ソーダー、ゼオラ
イトなどのビルダー、カルボキシメチルセルロース、酸
化防止剤、漂白剤、蛍光増白剤、殺菌剤その他の物質を
調合し、洗浄剤を作り、その用途、成分などに応じて、
化粧、洗濯用などの石ケン類、衣服、住居、台所用など
の洗剤、その他に分類される。これらの洗浄剤は、その
成分により酸性からアルカリ性までの広いpHを有してい
る。たとえば、石ケン類、衣服、住居用洗剤はpH9-11の
アルカリ性を示す。汚れの原因である糖質、脂質、蛋白
質などの除去を促進するため、近時、これらの洗剤に酵
素を調合し、汚れの原因を分解除去し、洗浄力を高める
方法がとられるようになった。然しながら、これらの洗
剤類は、種々の界面活性剤、各種のイオン類、漂白剤そ
の他の薬物を含み、しかも酸性のものからアルカリ性の
ものまでと、そのpH域が広いので、これら洗剤類に酵素
をそのまゝ添加しても安定に存在せず、長期の保存中に
失活したり、短時間の洗浄の間にその活性を充分に発揮
できぬという問題を生じる。又、酵素は温度に敏感であ
るので、酵素作用温度以上の温度で洗浄できないという
問題があった。このため、特に、洗浄に適した耐アルカ
リ性酵素の開発が進められ、耐アルカリ性プロテアーゼ
が洗浄に使用されている。然しながら、それでも耐薬
品、耐温度性が充分とは云へず、洗剤に適した酵素の検
討がなお行われているのが現状である。

（発明が解決しようとする問題点）このような洗浄添加用酵素の弱点を解決するため、種々
検討した結果、一般に市販されている酵素を固定化して
洗剤に添加することにより、従来酵素添加洗剤の有する
不利点が解消され、耐薬品、耐温度性のよい安定な酵素
入り洗剤が調合されることを認めた。即ち、本発明は一
般に市販されている酵素類を固定化して、洗剤に配合し
たアルカリ性、加温下、界面活性剤、その他薬品の存在
下でも安定で、洗浄力の強い洗浄剤の組成を提供するも
のである。

（問題点を解決するための手段）本発明は、汚れの源となる糖類、蛋白質、脂質などを分
解する酵素、即ちアミラーゼ、プロテアーゼ、リパーゼ
を化学結合剤を用いて固定化して洗剤に配合するもので
ある。

アミラーゼは澱粉、グリコーゲンを加水分解する酵素
で、α−アミラーゼ、β−アミラーゼ、糖化型アミラー
ゼを含み、豚の膵臓、バチルス菌、アスペルギルス菌、
大麦々芽、唾液、スイートポテト、大麦よりのアミラー
ゼなどが市販されており、蛋白質を分解するプロテアー
ゼはペプシン、トリプシン、キモトリプシンその他の動
物系プロテアーゼ、パパイン、プロメライン、フイジン
などの植物系プロテアーゼ、カビ、細菌系プロテアーゼ
が市販され、脂質を分解するリパーゼは、トリアセチ
ン、トリステアリン、トリオレインなどの動物系リパー
ゼ、小麦胚芽、ヒマの種子、ナタネの種子よりの抽出品
などの植物系リパーゼ、カンジダ、クモノスカビよりの
抽出品のようなかび、細菌、酵母系のリパーゼが市販さ
れているが本発明にはこれら市販の酵素より任意に選択
して使用する。

これらの酵素を固定化する方法として、グルタルアルデ
ヒド、無水マレイン酸・エチレン共重合物、N,N′−ポ
リメチレンビスヨードアセトアミド、N,N′−エチレン
ビスマレイミド、ヘキサメチレンジイソシアネート、ヘ
キサメチレンジアミン、ビス−アゾベンジジン、ビスア
ゾベンジジン−2,2′−ジスルホニックアシッド、３−
（ジメチルアミノ）プロピルイソシアニット、Ｎ−エチ
ル−５−フェニルイソオキサゾリウム−３′−スルホナ
ート、などの化学結合剤を用い、不溶性担体であるハイ
ドロキシアパタイトに吸着結合処理させて用いる。

酵素及び固定化試薬は、酵素を添加する洗剤のpHにより
適宜選択することができる。例えばアルカリ性の洗剤に
添加する酵素の固定化にはビオブラーゼ、トリプシンな
どアルカリ側でも作用する酵素をビスジアゾベンジジン
−2,2′−ジスルホン酸のような酸性の結合剤で処理す
ることが好ましく、酸性洗剤に添加する場合はペプシ
ン、パパインのように酸性側でも作用する酵素をヘキサ
メチレンジアミンのような塩基性結合剤で処理すること
が好ましい。これら酵素の固定化は公知の方法で行うこ
とができる。即ち、結合剤、不溶性担体酵素を中性付近
の緩衝溶液に加え、低温（約５℃）で数時間撹拌しなが
ら反応させる。得られた不溶性の固定化酵素は、使用し
た緩衝溶液、次いで冷水で充分洗浄し、凍結乾燥により
乾燥する。

このようにして得られた固定化酵素を、界面活性剤、ビ
ルダー、漂白剤、その他洗剤に使用する薬品と常法によ
り調合することにより目的の洗浄剤組成をえる。

（作用）固定化酵素を洗剤に配合すると、酵素が固定化されてい
るため、温度、pHに関し幅広い活性を示し、イオン、界
面活性剤、漂白剤などによる妨害をうけにくくなり、固
定化しない酵素に比しミハエリ常数が増加しているの
で、酵素反応に時間がかからず、短時間で汚れを分解す
る。

以下実施例で具体的に本発明を説明する。使用した固定
化酵素のアミラーゼは大麦アミラーゼ、プロテアーゼは
ビオプラーゼ、リパーゼは小麦胚芽リパーゼであり、こ
れらをいずれもグルタルアルデヒドで架橋したものであ
る。各例において、添加成分中固体は夫々微粉砕し、45
℃に加温した界面活性剤中に攪拌しながら徐々に添加
し、添加終了後その温度で30分攪拌をつづけたのち放置
して室温に冷却した。

実施例に使用したアパタイト固定化酵素は、以下の方法
により製造された。

アミラーゼ、プロテアーゼ、及びリパーゼのうち少なく
とも１つの酵素を、アパタイト懸濁液に加える。

この懸濁液を攪拌させながら、架橋剤を加える。

このように反応させて得た、アパタイト固定化酵素を懸
濁液の状態或いは、凍結乾燥して使用する。

反応量を反応例に示します。

固定化アミラーゼ（反応例１）アミラーゼ 100mg アパタイト 2g グルタルアルデヒド（架橋剤濃度:28mg/100ml） 2ml 純水 50ml 固定化プロテアーゼ（反応例２）プロテアーゼ 150mg アパタイト 10g グルタルアルデヒド（架橋剤濃度:28mg/100ml） 8ml リン酸緩衝液（0.05mM、pH6.8） 100ml 固定化リパーゼ（反応例３）リパーゼ 100mg アパタイト 2g グルタルアルデヒド（架橋剤濃度:28mg/100ml） 4ml 純水 50ml 例1. 衣服洗浄剤 wt％過炭酸ナトリウム 20 炭酸ソーダ 30 固定化プロテアーゼ 20 モノステアリン酸プロピレングリコール 30 合計 100 例2. 衣服洗浄剤 wt％固定化プロテアーゼ６固定化アミラーゼ６固定化リパーゼ６ラウリルベンゼンスルホン酸ソーダ６セチルトリメチルアンモニウムクロライド５ C₁₄オレフィンスルホン酸ソーダ３硫酸ナトリウム 12 ケイ酸ナトリウム 12 アルミノケイ酸ナトリウム 12 モノステアリン酸プロピレングリコール 27 蛍光剤 5 合計100 例3. 衣服洗浄剤 wt％固定化プロテアーゼ 20 次亜塩素酸ナトリウム 30 モノステアリン酸プロピレングリコール 50 合計100 例4. 衣服洗剤 wt％固定化プロテアーゼ 20 オレリルエーテル硫酸エステルナトリウム 15 ポリオキシエチレンラウリルエーテル 24 モノステアリン酸プロピレングリコール 41 合計100 例5. 洗顔料 wt％固定化プロテアーゼ５固定化リパーゼ５トリクロサン１パラベン 0.25 ジブチルヒドロキシトルエン 0.75 プロピレングリコール 88 黄色４号適量香料適量例6. 全身洗浄料 wt％固定化プロテアーゼ５固定化リパーゼ５固定化アミラーゼ５トリクロサン１ジブチルヒドロキシトルエン１安息香酸ナトリウム３トリエタノールアミン 10 プロピレングリコール 70 緑色３号適量黄色４号適量香料適量参考例固定していない酵素を含む例１の組成の洗剤を対照とし
て、例１の組成の酵素活性を40℃で測定し、測定当初の
活性を夫々100として経時変化の比活性を示した。夫々
の洗剤1gを100mlにとかし、その1mlを各経時後採取し試
験液として用いた。ミルクカゼインを基質とし、試験液
を加えて作用させたあと、トリクロール酢酸を加えて沈
殿を濾別し、濾液の一定量を採取し炭酸ソーダ溶液及び
ホーリン試薬を一定量添加し、その発色を測定するホー
リン分析法により酵素活性を測定し以下の結果をえた。

この結果は、界面活性剤、塩類、漂白剤の存在下に固定
化酵素が比較的安定に存在していることを示している。

比較例他の水溶性固定化酵素含有洗顔料との比較試験ハイドロキシアパタイト固定化酵素含有洗顔料と、比較
対象群としてカルボキシメチルセルロースに架橋結合さ
せたプロテアーゼを用いての使用結果と、経時変化を調
べた。

配合組成は、実施例５の洗顔料組成である。

検査員20人が１日２回、７日連続使用して下記の結果を
えた。

色、臭いの経時変化は、どちらも認められなかった。

（発明の効果）本願発明により、酵素をハイドロキシアパタイトに架橋
結合させて固定化した酵素を洗剤に配合することによ
り、従来洗剤には使用されなかった酵素も洗剤への使用
が可能となり、耐薬品、耐温度性の洗剤が生成するとと
もに、その固定化した酵素を配合した洗顔料を使用する
と、従来の固定化酵素を配合した洗顔料より優れた効果
を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者渥美公則東京都中央区築地２丁目11番10号（築地中央ビル）デンタル化学株式会社内 (72)発明者斉藤宗輝東京都中央区築地２丁目11番10号（築地中央ビル）デンタル化学株式会社内 (72)発明者藤田恵二郎東京都中央区築地２丁目11番10号（築地中央ビル）デンタル化学株式会社内 (72)発明者石崎勉東京都中央区築地２丁目11番10号（築地中央ビル）デンタル化学株式会社内 (56)参考文献特開昭61−207499（ＪＰ，Ａ) 特開昭60−190497（ＪＰ，Ａ) 特開昭57−70199（ＪＰ，Ａ) 特開昭57−73098（ＪＰ，Ａ)

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】アミラーゼ、プロテアーゼ及びリパーゼの
うち少なくとも１つを、ハイドロキシアパタイトの不活
性担体に架橋結合させ、固定化した酵素を含有すること
を特徴とする固定化酵素配合洗浄剤。