JPH07324088A - コレシストキニン−ｂ／ガストリン受容体拮抗剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【構成】 下記式によって特定される化合物若しくはそ
の製薬学的に許容される塩を有効成分とするコレシスト
キニン（ＣＣＫ）−Ｂ／ガストリン受容体拮抗剤。 （式中、Ｒ₁、Ｒ₂は、水素原子、低級アルキル基、ベン
ジル基、クロロベンジル基、フルオロベンジル基、トリ
フルオロメチルベンジル基、２-チエニルメチル基又は
２-（メチルチオ）エチル基、Ｒ₃、Ｒ₄は、水素原子、
メチル基又はハロゲン原子を表す。 【効果】 上記化合物はコレシストキニン（ＣＣＫ）−
Ｂ／ガストリン受容体拮抗作用を有し、ＣＣＫ−Ｂ／ガ
ストリン受容体が関与する疾患、例えば胃潰瘍、十二指
腸潰瘍、胃炎、逆流性食道炎、ゾリンジャー・エリソン
症候群、ガストリン感受性膵等の消化器系疾患や、食欲
調節系の障害、痛み、不安等の中枢神経系の障害等の治
療及び予防に有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、新規コレシストキニン
（ＣＣＫ）−Ｂ／ガストリン受容体拮抗剤、ＣＣＫ−Ｂ
／ガストリン受容体拮抗作用を有する化合物及び発酵法
による該化合物の製造法に関する。

【０００２】

【従来の技術】ＣＣＫ及びガストリンの受容体は、それ
ぞれのペプチドに対する親和力の差により、大きく２種
類（ＣＣＫ−Ａ受容体、及び、ＣＣＫ−Ｂ／ガストリン
受容体）に分類することができる。ＣＣＫ−Ａ受容体
は、消化管のうち、特に、膵臓に発現しており、消化酵
素の分泌に関与していると考えられている。一方、ＣＣ
Ｋ−Ｂ／ガストリン受容体は、主に脳と胃粘膜に発現し
ている。胃粘膜に発現しているＣＣＫ−Ｂ／ガストリン
受容体は、ガストリンによる胃酸分泌や胃粘膜増殖を制
御しており、中枢に発現している同受容体は、ＣＣＫに
よって誘導される精神不安やパニック症状に関係してい
ると考えられている。そのため、ＣＣＫ−Ｂ／ガストリ
ン受容体とそのリガンドとの結合の阻害は、過剰胃酸分
泌による胃潰瘍などの消化器疾患をはじめとして、不安
反応などをともなう中枢疾患の改善をもたらす可能性が
考えられる。また、ＣＣＫ−Ａ受容体拮抗作用が強い場
合は胆汁うっ滞や胆石等の副作用を生ずる可能性がある
ため、選択的なＣＣＫ−Ｂ受容体拮抗剤であることが望
ましいと考えられる。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、天然に
存在する多くの微生物が生産する物質について研究を行
っていたところ、アスペルギルス エスピー（Aspergil
lus sp.）Ｑ２０５４７（ＦＥＲＭ Ｐ−１３６６２）
の発酵によって製造される下記構造式化４で示される化
合物が、ＣＣＫ−Ｂ／ガストリン受容体拮抗剤として有
用であることを見い出し、先に特願平５−１４７７３３
号によりこれを開示した。

【０００４】

【化４】

【０００５】そして、本発明者らは、更に上記化４で示
される化合物について構造活性相関を明らかにするため
に、上記化合物生産菌を、天然アミノ酸の類似化合物
（例えばｐ−クロロフェニルアラニン）等を添加した改
変培地で培養して、活性（ＣＣＫ−Ｂ／ガストリン受容
体拮抗作用）を有する新たな誘導体を得、これらの化合
物を単離して本発明を完成した。本発明の目的は、新規
コレシストキニン（ＣＣＫ）−Ｂ／ガストリン受容体拮
抗剤、ＣＣＫ−Ｂ／ガストリン受容体拮抗作用を有する
化合物及び発酵法による該化合物の製造法を提供するこ
とにある。

【０００６】

【課題を解決するための手段】すなわち、本発明は、下
記構造式によって特定される化合物若しくはその製薬学
的に許容される塩を有効成分とするコレシストキニン
（ＣＣＫ）−Ｂ／ガストリン受容体拮抗剤に関する。

【０００７】

【化５】 （式中、Ｒ₁、Ｒ₂は、同一又は異なって、水素原子、低
級アルキル基、ベンジル基、クロロベンジル基、フルオ
ロベンジル基、トリフルオロメチルベンジル基、２-チ
エニルメチル基又は２-（メチルチオ）エチル基を表
し、Ｒ₃、Ｒ₄は、同一又は異なって、水素原子、メチル
基又はハロゲン原子を表す。但し、Ｒ₁、Ｒ₂の一方がイ
ソブチル基、イソプロピル基又はベンジル基のいずれか
であり、他方がベンジル基であり、かつＲ₃及びＲ₄が水
素原子である場合を除く。）

【０００８】また、本発明は、下記構造式によって特定
される化合物若しくはその製薬学的に許容される塩に関
する。

【０００９】

【化６】 （式中、Ｒ₁は、水素原子、メチル基、イソプロピル
基、ｐ-クロロベンジル基、ｐ-フルオロベンジル基又は
ｏ-トリフルオロメチルベンジル基を表し、Ｒ₂は、イソ
プロピル基、ベンジル基、ｐ-クロロベンジル基又はｐ-
フルオロベンジル基を表す。但し、Ｒ₁がイソプロピル
基、ｐ-クロロベンジル基又はｐ-フルオロベンジル基の
とき、Ｒ₂はＲ₁と同一基である。）

【００１０】更にまた、本発明は、アスペルギルス（As
pergillus）属に属し、上記化５又は化６によって特定
される化合物を生産する能力を有する微生物を培地に培
養し、培養物中に上記化合物を生産、蓄積させ、培養物
から生成蓄積した上記化合物を採取することを特徴とす
る上記化合物の製造法に関する。

【００１１】なお、本発明化合物は塩を形成する場合が
あり、塩としては、具体的には塩酸、臭化水素酸、ヨウ
化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の鉱酸、ギ酸、酢酸、
プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル
酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、
メタンスルホン酸、エタンスルホン酸等の有機酸、アス
パラギン酸、グルタミン酸等の酸性アミノ酸との酸付加
塩等が挙げられる。ＣＣＫ−Ｂ／ガストリン受容体拮抗
作用を有する本発明化合物生産菌としては、例えば神奈
川県足柄上郡山北町で採取された土壌から分離された微
生物アスペルギルス エスピー Ｑ２０５４７株を挙げ
ることができる。以下、この菌株の菌学的性状を説明す
る

【００１２】１．各種培地における性状 各種培地における性状は、以下に示すとおりである。培
養は２４℃で２週間行い、常法にしたがって観察した。 麦芽エキス寒天培地 生育は良好で、中央部が羊毛状に盛り上がる。分生子
頭、分生子の形成は非常に良好で、コロニー表面は黄褐
色を呈すが、周辺の若い分生子頭が形成された部分は灰
緑色を呈す。コロニー裏面は無色である。 バレイショ・ブドウ糖寒天培地 生育は良好で、菌糸はビロード状に拡がる。分生子頭、
分生子の形成は非常に良好で、コロニー表面は深緑色、
裏面は無色である。 ツアペック寒天培地 生育は良好で菌糸はビロード状に拡がる。分生子頭、分
生子の形成は良好で、コロニーの表面はクリーム色〜淡
褐色、裏面は無色である。 サブロー寒天培地 生育は良好で、菌糸はビロード状に拡がる。分生子頭、
分生子の形成は良好で、コロニーの表面はクリーム色、
周辺の若い分生子頭が形成された部分は淡緑色を呈す。
コロニー裏面は無色である。

【００１３】２．生理学的性質 生育ｐＨ範囲：４〜１０の範囲で生育し、最適生育ｐ
Ｈは５〜８である。 生育温度範囲：１５〜３７℃の範囲で生育し、最適温
度範囲は２４〜２７℃である。

【００１４】３．形態的特徴 バレイショ・ブドウ糖寒天培地に生育したコロニーを
顕微鏡下で観察すると、菌糸は隔壁を有し、高度に分枝
する。 分生子頭は通常、直径５０〜９０μｍ、放射状〜球形
であるが、しばしば非常に小型のものも形成される。 分生子柄は基底菌糸より立ち上がり、長さ１００〜３
００μｍ、直径３〜５．５μｍで、無色、滑面である。 頂のうは球形で、直径９〜１２μｍ、メトレは頂のう
のほとんど全体より生じ、大きさは７〜１０×２〜３μ
ｍであり、フィアライドの大きさは８〜１１×２〜３μ
ｍである。 分生子は球形〜亜球形、直径は４〜５μｍで、その表
面は刺状を呈している。

【００１５】以上の菌学的性質より、本菌株は不完全菌
のアスペルギルス（Aspergillus）属に属するものと判
断され、本菌株をアスペルギルス エスピー（Aspergil
lussp.）Ｑ２０５４７と命名した。本菌株は通産省工業
技術院生命工学工業技術研究所に受託番号ＦＥＲＭ Ｐ
−１３６６２号として寄託されている。なお、微生物は
人工的に、また自然に変異を起こしやすいが、本発明の
アスペルギルス エスピー Ｑ２０５４７株は天然から
分離された菌株のほかにこれを紫外線、Ｘ線、化学薬剤
などで人工的に変異させたもの及びそれらの自然変異株
についても包含するものである。

【００１６】（製造法）本発明化合物の製造法はアスペ
ルギルス エスピー Ｑ２０５４７株を培地に培養し、
培養物より採取することにより行われる。培養方法は一
般微生物の培養方法に準じて行われるが、通常は液体培
地による深部培養法が有利である。培養に用いられる培
地としては、アスペルギルス エスピーＱ２０５４７株
が利用する栄養源を含有する培地であればよいが、本発
明化合物を得るためには天然アミノ酸であるＬ-トリプ
トファン又はＬ-フェニルアラニンの類似化合物等を添
加してアミノ酸組成を変えた改変培地を用いる。

【００１７】具体的には、ｐ-クロロフェニルアラニ
ン、ｐ-フルオロフェニルアラニン、ｏ-トリフルオロメ
チルフェニルアラニン又は下記構造式化７で表される化
合物から選択した物質を添加した合成培地、半合成培地
あるいは天然培地が用いられる。

【化７】 （式中、Ｒは、水素原子、メチル基又はイソプロピル基
を表す。）

【００１８】培地の組成は、例えば炭素源としてはグル
コース、フルクトース、デンプン、植物油等が、窒素源
としては、肉エキス、ペプトン、グルテンミール、綿実
粕、大豆粉、落花生粉、魚粉、コーンスチープリカー、
乾燥酵母、酵母エキス、硫酸アンモニウム、硝酸アンモ
ニウム、尿素その他の有機、無機の栄養源が用いられ
る。また、金属塩としては、Ｎａ、Ｋ、Ｍｇ、Ｃａ、Ｚ
ｎ、Ｆｅなどの硫酸塩、硝酸塩、塩化物、炭酸塩、燐酸
塩などが必要に応じて添加される。更に、必要に応じて
メチオニン、システィン、シスチン、チオ硫酸塩、オレ
イン酸メチル、ラード油、シリコン油、界面活性剤など
の本発明化合物生成促進物質又は消泡剤を添加すること
もできる。

【００１９】培養条件としては好気的条件下に培養する
のが一般的に有利で、培養温度は約１５〜３７℃の範
囲、好ましくは約２５〜２７℃付近で行われる。培地の
ｐＨは約５〜１０、好ましくは約６〜８の範囲に保存す
ると好結果が得られる。培養期間は培地の組成、温度条
件に応じて適宜設定される。また、本発明の化合物は特
別な発酵法として、静止菌体を用いた発酵法を適用する
こともできる。すなわち、通常の培養により増殖した菌
体を適当な緩衝液により洗浄し、本発明化合物を生産す
るために必要最小限の物質を添加した緩衝液中にて洗浄
菌体を培養する。この方法は目的とする本発明化合物以
外の侠雑物の生産が少なく、効率よく目的物を生産する
ことができる。

【００２０】培養物より目的とする本発明化合物を単離
採取するには通常の微生物の培養物より生理活性物質を
単離する方法が適用される。目的物は培養液中及び菌体
に含有されるので遠心分離又は濾過により菌体を分離し
た後、濾過液及び菌体から抽出するか、若しくは培養液
そのままから抽出する。すなわち、適当な溶剤に対する
溶解性及び溶解度の差、種々の吸着剤に対する吸着親和
性の差、２種の液相間における分配の差などを利用する
一般の生理活性物質の製造に用いられる手段によって、
分離、採取、精製される。これらの方法は必要に応じて
単独に用いられ、あるいは任意の順序に組み合わせ、ま
た反復し適用できる。以下に、本発明化合物の検出、単
離及び精製のための一般的手段について述べる。

【００２１】アスペルギルス エスピーＱ２０５４７株
の培養物は例えば酢酸エチル、クロロホルム、塩化メチ
レン、ブタノール、メチルエチルケトン等、好ましくは
酢酸エチルのような水と混和しない有機溶媒と激しく攪
拌することにより抽出される。攪拌後、２相を分離し有
機相を集める。溶媒は減圧濃縮し固体又は油状の残渣を
得る。これを水と混和する溶媒例えばアセトン、メタノ
ール、エタノール等、好適な溶媒としてはメタノールの
少量に再溶解する。

【００２２】この溶液の一定量を順相又は逆相の薄層ク
ロマトグラフィー（ＴＬＣ）又は高速液体クロマトグラ
フィー（ＨＰＬＣ）のようなクロマトグラフ法による分
析に使用する。通常は、逆相ＨＰＬＣをその方法として
選択する。これはＯＤＳ（Ｃ₁₈）カラム上、水と有機溶
媒、例えばアセトニトリル、メタノール、テトラヒドロ
フランの混合物を使用した一定組成（isocratic）又は
グラジエント溶出により行う。この分析法（検知法は２
５４ｎｍの紫外(ＵＶ)吸収又はフォトダイオードアレイ
検出器もしくは質量分析器(ＭＳ)により行う）にて培地
の改変によって新たに生成した化合物を検出でき、また
それらの分取規模での精製における条件を確立できる。

【００２３】分離条件が確立した後、培養液抽出物を順
相、逆相のクロマトグラフィーにより分画し、目的とす
る本発明化合物を得る。得られた本発明化合物は紫外吸
収、質量分析、核磁気共鳴などの適当なスペクトル法に
より特徴を明らかにする。このようにして得られた本発
明化合物の構造及びＣＣＫ−Ｂ受容体（ＳＤラット脳）
に対する結合作用を表１、表２に一覧する。なお、ＣＣ
Ｋ−Ｂ受容体結合作用の実験法及び表中の化８、化９の
構造式を以下に示す。

【００２４】実験法：ＳＤラット約１００匹を無麻酔下
で断頭後、速やかに全脳を摘出した。この全脳を１０倍
量の０．３２Ｍショ糖水溶液でテフロンガラスホモジナ
イザーを用いてホモジナイズした。ホモジネートを冷却
遠心機により、９００ｇ、１０分間遠心分離し、その上
清を更に１１５００ｇ、１５分間遠心分離した。得られ
た沈渣を０．０８％Triton Ｘ-１００、５０ｍＭ Tris-
ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．４）に懸濁した。この懸濁液を
３０分間放置後、再び１１５００ｇ、１５分間の遠心分
離を行い、その沈渣を５ｍＭ及び５０ｍＭ Tris-ＨＣｌ
緩衝液を用いて遠心分離操作により２回ずつ洗浄した。
この沈渣を５０ｍＭ Tris-ＨＣｌ緩衝液に懸濁し、−８
０℃に凍結保存したものを膜標品とした。

【００２５】膜標品を室温融解後、１０ｍＭ ＨＥＰＥ
Ｓ緩衝液（１３０ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＭｇＣｌ₂・
１ｍＭ ＥＧＴＡ、０．２５mg/ml bacitracin、ｐＨ
６．５）で希釈し、［¹²⁵Ｉ］ＢＨ・ＣＣＫ−８存在下
に、２５℃で１２０分間インキュベート後、吸引濾過に
よりＢ／Ｆ分離を行った。非特異的結合は１μＭのＣＣ
Ｋ−８存在下で決定した。受容体に結合した標識リガン
ドの量はγ−カウンターで計測した。標識リガンドの受
容体への最大結合量を１００％とし、被験薬の結合阻害
曲線よりＩＣ₅₀ （ＣＣＫ−Ｂ）値を求めた。

【００２６】

【化８】

【００２７】

【化９】

【００２８】

【表１】

【００２９】

【表２】

【００３０】また、化合物７について、ペンタガストリ
ン刺激によるＳＤラットの胃酸分泌抑制試験を行った。
実験法は以下のとおりである。 実験法：ウレタン（１．２５ｇ／ｋｇ腹腔内投与）によ
り麻酔したラットの気管にカニューレを挿入後開腹し、
胃・十二指腸部を露出した。噴門部結紮後、前胃部にポ
リエチレン性カニューレを装置した。更に、十二指腸に
小切開を施し、切開部より胃内方向にポリエチレン製カ
ニューレを挿入した。カニューレを固定するために幽門
部を結紮した。

【００３１】生理食塩水（ｐＨ７．０に調整）を３ml/m
inの速度で、前胃部から幽門部方向へ灌流した。灌流液
をｐＨ−スタット（東亜電波工業製、ＡＵＴ−２０１）
で連続滴定することにより胃酸分泌を測定した。連続滴
定は、滴定終点をｐＨ７．０とし、２５ｍＭ水酸化ナト
リウム溶液を滴下することにより行った。結果は１０分
毎の胃酸分析（μEq／１０分）として求めた。ペンタガ
ストリン（１５μｇ／ｋｇ／時間）を静脈内投与した。
ペンタガストリン注入後酸分泌は亢進し、注入後６０分
で最大値に達し安定する。その後、被験薬を静脈内投与
し、胃酸分泌を測定した。ペンタガストリン注入後の最
大値を１００％とした場合、化合物７は３μmol／kg
（静脈注射）において６３％の抑制効果を示した。

【００３２】更に、化合物７について、ＣＣＫ−Ａ受容
体（ラット膵臓）結合作用を測定した。実験法は以下の
とおりである。 実験法：ＳＤラットの膵臓を２０倍量の５０ｍＭ Tris-
ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．７）でポリトロン型ホモジナイ
ザーを用いてホモジナイズした。ホモジネートを超遠心
分離機により、５００００ｇ、１０分間の遠心分離を２
回行った。得られた沈渣を４０倍量の５０ｍＭ Tris-Ｈ
Ｃｌ緩衝液（０．２％ＢＳＡ、５ｍＭ ＭｇＣｌ₂、０．
１mg/ml bacitracin、５ｍＭ ＤＴＴ、ｐＨ７．７）に
懸濁して−８０℃に凍結保存したものを膜標品とした。

【００３３】膜標品を室温融解後、緩衝液で１０倍希釈
し、［³Ｈ］Ｌ−３６４、７１８存在下に、３７℃３０
分間インキュベート後、吸引濾過によりＢ／Ｆ分離を行
った。非特異的結合は１μＭのＬ−３６４、７１８の存
在下で決定した。受容体に結合した標識リガンドの量は
液体シンチレーションカウンターで計測した。化合物７
は、１５μＭの濃度において全くＣＣＫ−Ａ受容体に結
合作用を示さず、高いＣＣＫ−Ｂ選択性が認められた。
本発明の化合物はまた毒性が低く、医薬としての使用に
適している。

【００３４】以上の実験より、本発明の化合物は、ＣＣ
Ｋ−Ｂ受容体拮抗作用及びペンタガストリン刺激胃酸分
泌抑制作用を有していることから、ＣＣＫ−Ｂ／ガスト
リン受容体が関与する疾患の治療及び予防に有効であ
る。かかる疾患の例としては、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、
胃炎、逆流性食道炎、ゾリンジャー・エリソン症候群、
ガストリン感受性の消化器系疾患や、食欲調節系の障
害、痛み、不安等の中枢神経系の障害等が挙げられる。

【００３５】本発明化合物及び／又はその塩は錠剤、散
剤、細粒剤、カプセル剤、丸剤、液剤、注射剤、坐剤、
軟膏、貼付剤等に調製され、経口的（舌下投与を含む）
又は非経口的に投与される。製剤用の担体や賦形剤とし
ては、固体又は液体状の非毒性医薬用物質が挙げられ
る。これらの例としては、例えば乳糖、ステアリン酸マ
グネシウム、スターチ、タルク、ゼラチン、寒天、ペク
チン、アラビアゴム、オリーブ油、ゴマ油、カカオバタ
ー、エチレングリコール等やその他常用のものが例示さ
れる。本発明化合物の臨床的投与量は、適用される患者
の症状、体重、年齢や性別等を考慮して適宜決定される
が、通常成人１日あたり経口投与で１〜１０００ｍｇで
あり、これを１回あるいは数回に分けて投与する。

【００３６】

【実施例】以下、本発明の化合物の製造法の実施例及び
本発明の化合物を用いた製剤処方例を更に詳細に説明す
るが、本発明はこれらの実施例及び製剤処方例に限定さ
れるものではない。

【００３７】実施例１（化合物１、２の製造法の一例） グルコース１．０％、ポテトスターチ２．０％、酵母エ
キス０．５％、ポリペプトン０．５％、炭酸カルシウム
０．４％を含む液体培地（ｐＨ７．０）を作製し（以
降、この培地を「Ａ培地」と呼ぶ。）、これを５００ｍ
ｌ容の三角フラスコに各１００ｍｌずつ分注し、直径２
ｃｍのＯ-リングを１個入れ、１２１℃で２０分間滅菌
したものに、ポテト・デキストロース寒天培地上に生育
させた菌糸を掻きとって接種して、２８℃で４８時間振
とう培養を行い、種培養液とした。次に、生産培地とし
て５ｍＭ ｐ-クロロ-Ｌ-フェニルアラニンを含むＡ培地
を作製し、５００ｍｌ容の三角フラスコに１００ｍｌず
つ分注し、直径２ｃｍのＯ−リングを１個投入し、１２
１℃で２０分間滅菌したものに種培養液を３％の割合で
植菌した。これを２８℃で１２０時間振とう培養した。

【００３８】このようにして得られた培養液２．８ｌに
セライトを加え攪拌した後、濾過して濾液と菌体に分離
した。濾液は３ｌの酢酸エチルで抽出した。菌体は３ｌ
のアセトンを加えてよく攪拌し、濾過後濾液を減圧濃縮
し、アセトンを留去して菌体抽出物水溶液を得、これに
２ｌの３％炭酸水素ナトリウム溶液を加えアルカリ性と
し、３ｌの酢酸エチルで抽出した。培養濾液由来と菌体
由来の両酢酸エチル抽出物を合わせて濃縮し、１．１ｇ
の褐色の抽出物を得た。

【００３９】この１．１ｇの抽出物の一部を１．１ｇ／
５６０ｍｌの濃度（培養液を５倍に濃縮した濃度）にな
るようにメタノールに溶解した溶液を、ＨＰＬＣ（カラ
ム：Ｌ-ｃｏｌｕｍｎ ＯＤＳ、φ４．６×２５０ｍｍ
(化学品検査協会製)、溶媒：４５％アセトニトリル、流
速：０．７ml/min、検出：フォトダイオードアレイ検出
器(Waters 996)、前記化４で示される化合物の保持時間
１６．４分）で分析したところ、培地の改変（本実施例
ではｐ-クロロ-Ｌ-フェニルアラニンの添加）により生
成した化合物１（保持時間２２．４分）及び化合物２
（同３０．８分）が検出された。

【００４０】そこで、１．１ｇの抽出物を２０ｍｌのク
ロロホルム−メタノール（１：１）混液に溶解し、５ｇ
のシリカゲル６０Ｆ（２３０−４００メッシュ、メルク
社製）を加え溶媒留去し、抽出物をシリカゲル上にまぶ
しつけた。これをシリカゲルカラム（シリカゲル６０Ｆ
（２３０−４００メッシュ）、２５ｇ）上に上層し、カ
ラムをヘキサン−酢酸エチル（１：１）混液２００ｍｌ
にて洗浄した後、クロロホルム−メタノール（２５：
１）混液２００ｍｌにて溶出し、濃縮して化合物１及び
化合物２を含む画分２１０ｍｇを得た。

【００４１】この２１０ｍｇの画分を２ｍｌのクロロホ
ルムに溶解し、クロロホルムで平衡化したシリカゲルカ
ラム（同上、１２ｇ）上に載せクロロホルム５０ｍｌで
カラムを洗浄した後、クロロホルム−メタノール（５
０：１）混液を流して分画し、化合物１及び化合物２を
含む画分を３６．６ｍｇ得た。この３６．６ｍｇの画分
を２ｍｌの５０％アセトニトリルに溶解し、分取ＨＰＬ
Ｃ（カラム：ＳＴＲ ＰＥＲＰ ＯＤＳ−Ｈ、φ２０ｍｍ
×２５０ｍｍ(島津製作所製)、溶媒：４５％アセトニト
リル、流速：１７ml/min、検出波長：ＵＶ２５４ｎｍ）
にて分画し、保持時間２２分のピークの溶離液を集めて
減圧濃縮し、化合物１を１５．８ｍｇ得た。また、保持
時間２９分のピークの溶離液を同様に処理して化合物２
を１．２ｍｇ得た。得られた化合物１、２の理化学的性
質を以下に示す。

【００４２】化合物１： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：６９８ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図１に示すごとくである（重クロロホル
ム中、５００MHz）。

【００４３】化合物２： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：７３２ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図２に示すごとくである（重クロロホル
ム中、５００MHz）。

【００４４】実施例２（化合物３、４の製造法の一例） 生産培地としてＬ-５-メチルトリプトファン １ｍＭを
添加した培地Ａを用いる以外、すべて実施例１と同様に
して培養を行った。こうして得られた６００ｍｌの培養
液（菌体込み）を１ｌの酢酸エチルで抽出し、濃縮し、
３１０ｍｇの抽出物を得た。実施例１と同様にこの抽出
物をＨＰＬＣにて分析したところ、化合物３（保持時間
２１．１分）及び化合物４（保持時間２７．８分）が検
出された。

【００４５】そこで、この３１０ｍｇの抽出物をヘキサ
ン−酢酸エチル（１：１）混液６０ｍｌに溶解し、シリ
カゲルカラム（８ｇ）にこの溶液を通過させたのち、カ
ラムにクロロホルム−メタノール（２５：１）混液を流
して分画し、化合物３及び化合物４を含む画分を８４ｍ
ｇ得た。この８４ｍｇの画分を５ｍｌの５０％アセトニ
トリルに溶解し、分取ＨＰＬＣ（実施例１と同一条件）
にて分画し、保持時間２０分のピークの溶離液を集めて
濃縮し、化合物３を２３ｍｇ得た。また、保持時間２７
分のピークの溶離液を同様に処理して化合物４を０．５
ｍｇ得た。得られた化合物３、４の理化学的性質を以下
に示す。

【００４６】化合物３： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：６７８ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図３に示すごとくである（重クロロホル
ム中、５００MHz）。

【００４７】化合物４： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：６９２ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図４に示すごとくである（重クロロホル
ム中、５００MHz）。

【００４８】実施例３（化合物５、６の製造法の一例） 生産培地として Ｌ-ｐ-フルオロフェニルアラニン １ｍ
Ｍを添加した培地Ａを用いる以外、すべて実施例１と同
様にして培養を行った。こうして得られた２．８ｌの培
養液（菌体込み）を５ｌの酢酸エチルで抽出し、濃縮し
て得た酢酸エチル抽出物をＴＬＣ（シリカゲル６０Ｆを
使用、クロロホルム−メタノール（２５：１）混液にて
展開、エールリッヒ反応及びＵＶ２５４ｎｍにて検出）
で分析したところ、Ｒｆ値０．４５を示す前記化４で示
される化合物のすぐ下に化合物５（Ｒｆ値０．３９）及
び化合物６（Ｒｆ値０．３３）が検出された。

【００４９】そこで、酢酸エチル抽出物をクロロホルム
−メタノール（９：１）混液に溶解し、セライトを加え
溶媒留去してセライト上にまぶしつけ、ヘキサンで平衡
化したシリカゲルカラム（１５ｇ）に上層し、ヘキサン
−酢酸エチル（１：１）混液１５０ｍｌにてカラムを洗
浄した後、クロロホルム−メタノール（５０：１）混液
で溶出させ、化合物５及び化合物６を含む画分を１５０
ｍｇ得た。この画分を分取ＴＬＣ（シリカゲル６０Ｆを
使用、クロロホルム−メタノール（２５：１）混液にて
２回展開）にて分画し、粗製の化合物５及び化合物６を
各々４１ｍｇ、８．１ｍｇ得た。粗製の化合物５及び化
合物６は各々分取ＨＰＬＣ（溶媒：６５％メタノール、
流速：１３．２ml/minとした以外は実施例１と同一条
件）にて更に精製し、化合物５を９．８ｍｇ、化合物６
を６．４ｍｇ得た。得られた化合物５、６の理化学的性
質を以下に示す。

【００５０】化合物５： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：６８２ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図５に示すごとくである（重クロロホル
ム中、５００MHz）。

【００５１】化合物６： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：７００ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図６に示すごとくである（重クロロホル
ム中、５００MHz）。

【００５２】実施例４（化合物７、８の製造法の一例） 生産培地としてＬ-ｏ-クロロフェニルアラニン １ｍＭ
を添加した培地Ａを用いる以外、すべて実施例１と同様
に培養を行った。こうして得られた１ｌの培養液（菌体
込み）を１．５ｌの酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル
層を５ｍｌ抜取りＨＰＬＣ（実施例１と同一条件）にて
分析したところ、化合物７（保持時間２７．４分）及び
化合物８（保持時間４６．８分）が検出された。

【００５３】そこで、残りの酢酸エチル層をセライトに
まぶしつけ、シリカゲルカラム（１５ｇ）に上層し、ヘ
キサン−酢酸エチル（１：１）混液１００ｍｌにてカラ
ムを洗浄した後、クロロホルム−メタノール（５０：
１）混液にて溶出し、化合物７及び化合物８を含む画分
を４３ｍｇ得た。この画分を１．５ｍｌの６６％アセト
ニトリルに溶解し、分取ＨＰＬＣ（溶媒：５０％アセト
ニトリルとした以外は実施例１と同一条件）にて分画
し、保持時間１６分のピークの溶出液を分取し濃縮して
化合物７を９ｍｇ得た。また、保持時間２５分のピーク
の溶出液を同様に処理して化合物８を９ｍｇ得た。得ら
れた化合物７、８の理化学的性質を以下に示す。

【００５４】化合物７： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：６９８ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図７に示すごとくである（重クロロホル
ム中、５００MHz）。

【００５５】化合物８： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：７３２ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図８に示すごとくである（重クロロホル
ム中、５００MHz）。

【００５６】実施例５（化合物９、１０の製造法の一
例） 生産培地としてＬ-ｍ-フルオロフェニルアラニン １ｍ
Ｍを添加した培地Ａを用いる以外、すべて実施例１と同
様に培養を行った。こうして得られた１ｌの培養液（菌
体込み）を１．５ｌの酢酸エチルで抽出した。酢酸エチ
ル層を５ｍｌ抜取りＨＰＬＣ（実施例１と同一条件）に
て分析したところ、化合物９（保持時間１８．７分）及
び化合物１０（保持時間２１．３分）が検出された。

【００５７】そこで、残りの酢酸エチル層をセライトに
まぶしつけ、シリカゲルカラム（１５ｇ）に上層し、ヘ
キサン−酢酸エチル（１：１）混液１００ｍｌにてカラ
ムを洗浄した後、クロロホルム−メタノール（５０：
１）混液にて溶出し、化合物９及び化合物１０を含む画
分を６１ｍｇ得た。この画分を１．２ｍｌの６６％アセ
トニトリルに溶解し、分取ＨＰＬＣ（溶媒：４１％アセ
トニトリルとした以外は実施例１と同一条件）にて分画
し、保持時間２６分のピークの溶出液を分取し濃縮して
化合物９を１１ｍｇ得た。また、保持時間２９分のピー
クの溶出液を同様に処理して化合物１０を４．５ｍｇ得
た。得られた化合物９、１０の理化学的性質を以下に示
す。

【００５８】化合物９： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：６８２ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図９に示すごとくである（重クロロホル
ム中、５００MHz）。

【００５９】化合物１０： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：７００ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図１０に示すごとくである（重クロロホ
ルム中、５００MHz）。

【００６０】実施例６（化合物１１、１２の製造法の一
例） 生産培地としてＬ-４-メチルトリプトファン １ｍＭを
添加した培地Ａを用いる以外、すべて実施例１と同様に
培養を行った。こうして得られた１．１ｌの培養液（菌
体込み）を１．５ｌの酢酸エチルで抽出した。酢酸エチ
ル層を５ｍｌ抜取りＨＰＬＣ（実施例１と同一条件）に
て分析したところ、化合物１１（保持時間１７．８分）
及び化合物１２（保持時間２９．０分）が検出された。

【００６１】そこで、残りの酢酸エチル層をセライトに
まぶしつけ、シリカゲルカラム（１５ｇ）に上層し、ヘ
キサン−酢酸エチル（１：１）混液１００ｍｌにてカラ
ムを洗浄した後、クロロホルム−メタノール（５０：
１）混液にて溶出し、化合物１１及び化合物１２を含む
画分を１２０ｍｇ得た。更にこの画分を再度シリカゲル
カラム（１５ｇ）にのせ、クロロホルム−メタノール
（１００：１）混液にて溶出し、化合物１１及び化合物
１２を含む画分を５２ｍｇ得た。この画分を１．５ｍｌ
の６６％アセトニトリルに溶解し、分取ＨＰＬＣ（溶
媒：４５％アセトニトリル、流速：１３．２ml/minとし
た以外は実施例１と同一条件）にて分画し、保持時間１
６分のピークの後半の溶出液を分取し濃縮して化合物１
１を１２．２ｍｇ得た。また、保持時間２６分のピーク
の溶出液を同様に処理して化合物１２を１．６ｍｇ得
た。得られた化合物１１、１２の理化学的性質を以下に
示す。

【００６２】化合物１１： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：６７８ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図１１に示すごとくである（重クロロホ
ルム中、５００MHz）。

【００６３】化合物１２： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶、 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：６９２ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図１２に示すごとくである（重クロロホ
ルム中、５００MHz）。

【００６４】実施例７（化合物１３、１４の製造法の一
例） 化合物１３、１４の生産培養は静止菌体を用いた。５０
０ｍｌ容三角フラスコ一本あたりに培地Ａ １００ｍｌ
を入れて滅菌し、実施例１と同様にして得られた種培養
液を凍結保存（−８０℃）したもの２ｍｌを接種し、２
８℃にて４０時間培養した。得られた培養液を１０００
０ｒｐｍにて１０分間遠心して上清を除き、菌体を集め
た。菌体を５０ｍＭのリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ８）
１００ｍｌに懸濁し再度遠心した。この洗浄操作を３回
繰り返し行い、静止菌体を得た。本操作により、培地１
００ｍｌあたり３０ｇの静止菌体が得られた。

【００６５】続いて生産培地として５０ｍＭ リン酸カ
リウム（ｐＨ８．０）、１ｍＭ Ｌ-フェニルアラニン、
１ｍＭ Ｌ-４-フルオロトリプトファンを含む液体培地
（培地Ｂ）を作製し１２１℃にて２０分間滅菌したもの
に上記の静止菌体２０ｇを接種し、２８℃にて４０時間
培養した。このようにして得られた１ｌの培養液（菌体
込み）を１．５ｌの酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル
層を５ｍｌ抜取りＨＰＬＣ（実施例１と同一条件）にて
分析したところ、化合物１３（保持時間１６．９分）及
び化合物１４（保持時間１８．６分）が検出された。

【００６６】そこで、酢酸エチル層を濃縮して得られた
残渣２８．１ｍｇを８０％アセトニトリル１．２ｍｌに
溶解し、不溶物を前処理カートリッジ（東ソーマイショ
リディスク、Ｈ−１３−５）により除き、分取ＨＰＬＣ
（溶媒：４０％アセトニトリル、流速：１３．２ml/min
とした以外は実施例１と同一条件）により分画し、保持
時間２９分のピーク（前記化４で示される化合物のピー
ク）のショルダーピーク部分の溶出液を集めて溶媒留去
し、化合物１３を１．０ｍｇ得た。また、保持時間３３
分のピークの溶出液を同様に処理して化合物１４を０．
９ｍｇ得た。得られた化合物１３、１４の理化学的性質
を以下に示す。

【００６７】化合物１３： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：６８２ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図１３に示すごとくである（重クロロホ
ルム中、５００MHz）。

【００６８】化合物１４： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：７００ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図１４に示すごとくである（重クロロホ
ルム中、５００MHz）。

【００６９】実施例８（化合物１５、１６の製造法の一
例） 化合物１５、１６の生産培養は実施例７と同様に静止菌
体を用いた。培養法は、生産培地としてＬ-５-フルオロ
トリプトファン １ｍＭをＬ-４-フルオロトリプトファ
ンの代わりに用いる以外すべて実施例７と同一である。
このようにして得られた１ｌの培養液（菌体込み）を
１．５ｌの酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層を５ｍ
ｌ抜取りＨＰＬＣ（実施例１と同一条件）にて分析した
ところ、化合物１５（保持時間１８．０分）及び化合物
１６（保持時間２０．２分）が検出された。

【００７０】そこで、酢酸エチル層を濃縮して得られた
残渣３７．４ｍｇを８０％アセトニトリル１．２ｍｌに
溶解し、不溶物を前処理カートリッジ（東ソーマイショ
リディスク、Ｈ−１３−５）により除き、分取ＨＰＬＣ
（溶媒：４０％アセトニトリル、流速：１３．２ml/min
とした以外は実施例１と同一条件）により分画し、保持
時間３３分のピークの溶出液を集めて溶媒留去し、化合
物１５を６．７ｍｇ得た。また、保持時間３８分のピー
クの溶出液を同様に処理して化合物１６を１．９ｍｇ得
た。得られた化合物１５、１６の理化学的性質を以下に
示す。

【００７１】化合物１５： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：６８２ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図１５に示すごとくである（重クロロホ
ルム中、５００MHz）。

【００７２】化合物１６： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：７００ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図１６に示すごとくである（重クロロホ
ルム中、５００MHz）。

【００７３】実施例９（化合物１７、１８の製造法の一
例） 生産培地としてＬ-ｏ-フルオロフェニルアラニン １ｍ
Ｍを添加した培地Ａを用いる以外、すべて実施例１と同
様に培養を行った。こうして得られた１ｌの培養液（菌
体込み）を１．５ｌの酢酸エチルで抽出した。酢酸エチ
ル層を５ｍｌ抜取りＨＰＬＣ（実施例１と同一条件）に
て分析したところ、化合物１７（保持時間１８．２分）
及び化合物１８（保持時間２０．５分）が検出された。

【００７４】そこで、残りの酢酸エチル層をセライトに
まぶしつけ、シリカゲルカラム（１５ｇ）に上層し、ヘ
キサン−酢酸エチル（１：１）混液１００ｍｌにてカラ
ムを洗浄した後、クロロホルム−メタノール（５０：
１）混液にて溶出し、化合物１７及び化合物１８を含む
画分を４４ｍｇ得た。この画分を１．５ｍｌの７５％ア
セトニトリルに溶解し、分取ＨＰＬＣ（溶媒：４０％ア
セトニトリル、流速：１３．２ml/minとした以外は実施
例１と同一条件）にて分画し、保持時間２７分のピーク
の溶出液を分取し濃縮して化合物１７を１２．４ｍｇ得
た。また、保持時間３０分のピークの溶出液を同様に処
理して化合物１８を７．３ｍｇ得た。得られた化合物１
７、１８の理化学的性質を以下に示す。

【００７５】化合物１７： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：６８２ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図１７に示すごとくである（重クロロホ
ルム中、５００MHz）。

【００７６】化合物１８： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：７００ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図１８に示すごとくである（重クロロホ
ルム中、５００MHz）。

【００７７】実施例１０（化合物１９の製造法の一例） 化合物１９の生産培養は実施例７と同様に静止菌体を用
いた。培養法は、生産培地として５０ｍＭ リン酸カリ
ウム（ｐＨ８．０）、１０ｍＭ Ｌ-トリプトファン及び
８０ｍＭ Ｌ-ロイシンからなる培地を用いる以外すべて
実施例７と同一である。このようにして得られた１ｌの
培養液（菌体込み）を１．５ｌの酢酸エチルで抽出し
た。酢酸エチル層を５ｍｌ抜取りＴＬＣ（実施例３と同
一条件）にて分析したところ、化合物１９（Ｒｆ値０．
３８）が検出された。

【００７８】そこで、酢酸エチル層を濃縮して得られた
残渣１５４ｍｇをセライトにまぶしつけ、シリカゲルカ
ラム（８ｇ）に上層した。ヘキサン−酢酸エチル（１：
１）混液５０ｍｌにてカラムを洗浄した後、クロロホル
ム−メタノール（５０：１）混液にて溶出し、化合物１
９を含む画分を５３ｍｇ得た。この５３ｍｇの画分を分
取ＴＬＣ（シリカゲル６０Ｆを使用、クロロホルム−メ
タノール（３０：１）混液にて１回展開）にて分画した
ところ、化合物１９を少量成分として含む画分が１３．
８ｍｇ得られた。

【００７９】この１３．８ｍｇの画分を再度分取ＴＬＣ
（シリカゲル６０Ｆを使用、クロロホルム−メタノール
（５０：１）混液にて４回展開）にて分画し、粗製の化
合物１９を２．５ｍｇ得た。粗製の化合物１９は分取Ｈ
ＰＬＣ（溶媒：４０％アセトニトリル、流速：１３．２
ml/minとした以外は実施例１と同一条件）にて分画し、
保持時間３４分のピークの溶出液を集めて溶媒留去し、
化合物１９を１．９ｍｇ得た。得られた化合物１９の理
化学的性質を以下に示す。

【００８０】化合物１９： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：５９６ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図１９に示すごとくである（重クロロホ
ルム中、５００MHz）。

【００８１】実施例１１（化合物２０の製造法の一例） 生産培地としてＬ-ｏ-トリフルオロメチルフェニルアラ
ニン １ｍＭを添加した培地Ａを用いる以外、すべて実
施例１と同様に培養を行った。こうして得られた１ｌの
培養液（菌体込み）を１．５ｌの酢酸エチルで抽出し
た。酢酸エチル層を５ｍｌ抜取りＨＰＬＣ（実施例１と
同一条件）にて分析したところ、化合物２０（保持時間
３９．８分）が検出された。

【００８２】そこで、残りの酢酸エチル層をセライトに
まぶしつけ、シリカゲルカラム（２０ｇ）に上層し、ヘ
キサン−酢酸エチル（１：１）混液６０ｍｌにてカラム
を洗浄した後、クロロホルム−メタノール（３０：１）
混液にて溶出し、化合物２０を含む画分を得た。この画
分を１．５ｍｌの５０％アセトニトリルに溶解し、分取
ＨＰＬＣ（溶媒：４５％アセトニトリル、流速：１３．
２ml/minとした以外は実施例１と同一条件）にて分画
し、保持時間３９分のピークの溶出液を分取し濃縮して
化合物２０を０．７ｍｇ得た。得られた化合物２０の理
化学的性質を以下に示す。

【００８３】化合物２０： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：７３２ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図２０に示すごとくである（重クロロホ
ルム中、５００MHz）。

【００８４】実施例１２（化合物２１の製造法の一例） 生産培地としてＬ-メチオニン ８０ｍＭを添加した培地
Ａを用いる以外、すべて実施例１と同様に培養を行っ
た。こうして得られた１ｌの培養液（菌体込み）を１．
５ｌの酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層を５ｍｌ抜
取りＨＰＬＣ（実施例１と同一条件）にて分析したとこ
ろ、化合物２１（保持時間１２．０分）が検出された。

【００８５】そこで、残りの酢酸エチル層をセライトに
まぶしつけ、シリカゲルカラム（１５ｇ）に上層し、ヘ
キサン−酢酸エチル（１：１）混液１００ｍｌにて洗浄
した後、クロロホルム−メタノール（３０：１）混液に
て溶出し、化合物２１を含む画分を１４４．３ｍｇ得
た。この１４４．３ｍｇの画分を６０％アセトニトリル
２ｍｌに溶解し、分取ＨＰＬＣ（溶媒：３５％アセトニ
トリル、流速：１３．２ml/minとした以外は実施例１と
同一条件）にて分画し、保持時間３７分のピークの溶出
液を分取し濃縮して化合物２１を１０．４ｍｇ得た。得
られた化合物２１の理化学的性質を以下に示す。

【００８６】化合物２１： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：６４８ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図２１に示すごとくである（重クロロホ
ルム中、５００MHz）。

【００８７】実施例１３（化合物２２の製造法の一例） 生産培地としてＬ-６-メチルトリプトファン １ｍＭを
添加した培地Ａを用いる以外、すべて実施例１と同様に
培養を行った。こうして得られた１ｌの培養液（菌体込
み）を１．５ｌの酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層
を５ｍｌ抜取りＨＰＬＣ（実施例１と同一条件）にて分
析したところ、化合物２２（保持時間２１．３分）が検
出された。

【００８８】そこで、残りの酢酸エチル層をセライトに
まぶしつけ、シリカゲルカラム（１５ｇ）に上層し、ヘ
キサン−酢酸エチル（１：１）混液１００ｍｌにて洗浄
した後、クロロホルム−メタノール（３０：１）混液に
て溶出し、化合物２２を含む画分を４７．０ｍｇ得た。
この４７．０ｍｇの画分を５０％アセトニトリル２．２
ｍｌに溶解し、分取ＨＰＬＣ（溶媒：４５％アセトニト
リル、流速：１３．２ml/minとした以外は実施例１と同
一条件）にて分画し、保持時間２１分のピークの溶出液
を分取し濃縮して化合物２２を０．７ｍｇ得た。得られ
た化合物２２の理化学的性質を以下に示す。

【００８９】化合物２２： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：６７８ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図２２に示すごとくである（重クロロホ
ルム中、５００MHz）。

【００９０】実施例１４（化合物２３、２４の製造法の
一例） 生産培地としてチエニルアラニン １ｍＭを添加した培
地Ａを用いる以外、すべて実施例１と同様にして培養を
行った。こうして得られた１ｌの培養液（菌体込み）を
５ｌの酢酸エチルで抽出し、濃縮して得た酢酸エチル抽
出物をＴＬＣ（シリカゲル６０Ｆを使用、クロロホルム
−メタノール（２５：１）混液で展開、エールリッヒ反
応及びＵＶ２５４ｎｍにて検出）にて分析したところ、
Ｒｆ値０．４５を示す前記化４で示される化合物のすぐ
下に化合物２３（Ｒｆ値０．４０）及び化合物２４（Ｒ
ｆ値０．３７）が検出された。

【００９１】そこで、酢酸エチル抽出物をクロロホルム
−メタノール（９：１）混液に溶解し、セライトを加え
溶媒留去してセライト上にまぶしつけ、ヘキサンで平衡
化したシリカゲルカラム（１０ｇ）に上層し、ヘキサン
−酢酸エチル（１：１）混液１００ｍｌにてカラムを洗
浄した後クロロホルム−メタノール（５０：１）混液で
溶出させ、化合物２３及び化合物２４を含む画分を６
０．６ｍｇ得た。この画分を分取ＴＬＣ（シリカゲル６
０Ｆを使用、クロロホルム−メタノール（５０：１）混
液にて４回展開後、同（３０：１）混液にて１回展開）
にて分画し、化合物２３を７．２ｍｇ、化合物２４を
１．７ｍｇ得た。得られた化合物２３、２４の理化学的
性質を以下に示す。

【００９２】化合物２３： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：６７０ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図２３に示すごとくである（重クロロホ
ルム中、５００MHz）。

【００９３】化合物２４： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：６７６ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図２４に示すごとくである（重クロロホ
ルム中、５００MHz）。

【００９４】実施例１５（化合物２５の製造法の一例） Ｌ-トリプトフィルグリシン（フナコシ(株)製）１ｇを
キシレン １００ｍｌに懸濁し、３日間加熱還流した。
冷却後、得られた沈澱を濾取し、冷エタノールで洗浄後
乾燥し、シクロTrp-Glyを白色固体として７６９ｍｇ得
た。生産培地として上記で得たシクロTrp-Gly ４ｍＭを
添加した（シクロTrp-Glyはジメチルスルホキシド溶液
として添加）培地Ａを用いる以外、すべて実施例１と同
様に培養を行った。こうして得られた０．５ｌの培養液
（菌体込み）を１ｌの酢酸エチルで抽出した。酢酸エチ
ル層を５ｍｌ抜取りＨＰＬＣ（溶媒：２５％〜５５％ア
セトニトリル直線グラジエントとした以外は実施例１と
同一条件）にて分析したところ、化合物２５が検出され
た。

【００９５】そこで、酢酸エチル層をセライト上にまぶ
しつけ、シリカゲルカラム（１５ｇ）に上層し、ヘキサ
ン−酢酸エチル（１：１）混液１００ｍｌで洗浄した
後、クロロホルム−メタノール（４０：１）混液にて溶
出し、化合物２５を含む画分を２４ｍｇ得た。この２４
ｍｇの画分を２ｍｌの７０％アセトニトリルに溶解し、
分取ＨＰＬＣ（溶媒：３８％アセトニトリル、流速：１
３．２ml/minとした以外は実施例１と同一条件）にて分
画し、保持時間９．５分のピークの溶出液を集めて溶媒
留去し、化合物２５を１０ｍｇ得た。得られた化合物２
５の理化学的性質を以下に示す。

【００９６】化合物２５： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：５７４ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図２５に示すごとくである（重クロロホ
ルム中、５００MHz）。

【００９７】実施例１６（化合物２６の製造法の一例） Ｌ-トリプトフィル-Ｌ-バリン（フナコシ(株)製）１ｇ
をキシレン １００ｍｌに懸濁し、３日間加熱還流し
た。冷却後、得られた沈澱を濾取し、冷ベンゼンで洗浄
し乾燥し、シクロTrp-Valを灰色固体として７９０ｍｇ
得た。生産培地として上記で得たシクロTrp-Val ４ｍＭ
を添加した（シクロTrp-Valはジメチルスルホキシド溶
液として添加）培地Ａを用いる以外、すべて実施例１と
同様に培養を行った。こうして得られた０．５ｌの培養
液（菌体込み）を１ｌの酢酸エチルで抽出した。酢酸エ
チル層を５ｍｌ抜取りＨＰＬＣ（溶媒：２５％〜５５％
アセトニトリル直線グラジエントとした以外は実施例１
と同一条件）にて分析したところ、化合物２６が検出さ
れた。

【００９８】そこで、酢酸エチル層をセライト上にまぶ
しつけ、シリカゲルカラム（１５ｇ）に上層し、ヘキサ
ン−酢酸エチル（１：１）混液１５０ｍｌで洗浄した
後、クロロホルム−メタノール（４０：１）混液にて溶
出し、化合物２６を含む画分を１９４ｍｇ得た。この１
９４ｍｇの画分を３ｍｌの７０％アセトニトリルに溶解
し、分取ＨＰＬＣ（溶媒：４０％アセトニトリル、流
速：１３．２ml/minとした以外は実施例１と同一条件）
にて分画し、保持時間１２分のピークの溶出液を集めて
溶媒留去し、化合物２６を２２ｍｇ得た。得られた化合
物２６の理化学的性質を以下に示す。

【００９９】化合物２６： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：５６８ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図２６に示すごとくである（重クロロホ
ルム中、５００MHz）。

【０１００】実施例１７（化合物２７の製造法の一例） Ｌ-トリプトフィル-Ｌ-アラニン（フナコシ(株)製）１
ｇをキシレン １００ｍｌに懸濁し、３日間加熱還流し
た。冷却後、得られた沈澱を濾取し、冷ベンゼンで洗浄
し乾燥し、シクロTrp-Alaを灰色固体として８１２ｍｇ
得た。生産培地として上記で得たシクロTrp-Ala ４ｍＭ
を添加した（シクロTrp-Alaはジメチルスルホキシド溶
液として添加）培地Ａを用いる以外、すべて実施例１と
同様に培養を行った。こうして得られた０．５ｌの培養
液（菌体込み）を１ｌの酢酸エチルで抽出した。酢酸エ
チル層を５ｍｌ抜取りＨＰＬＣ（溶媒：２５％〜５５％
アセトニトリル直線グラジエントとした以外は実施例１
と同一条件）にて分析したところ、化合物２７が検出さ
れた。

【０１０１】そこで、酢酸エチル層をセライト上にまぶ
しつけ、シリカゲルカラム（１５ｇ）に上層し、ヘキサ
ン−酢酸エチル（１：１）混液２００ｍｌで洗浄した
後、クロロホルム−メタノール（４０：１）混液にて溶
出し、化合物２７を含む画分を得た。この画分を分取Ｈ
ＰＬＣ（溶媒：３８％アセトニトリル、流速：１３．２
ml/min以外実施例１と同一条件）にて分画し、保持時間
１２分のピークの溶出液を集めて溶媒留去し、化合物２
７を２０ｍｇ得た。得られた化合物２７の理化学的性質
を以下に示す。

【０１０２】化合物２７： (1)性状 ：白色固体 (2)溶解性 ：クロロホルム、二塩化メチレン、アセト
ンに易溶、メタノール、エタノール、酢酸エチルに可
溶、エーテル、ｎ-ヘキサン、水に難溶 (3)呈色反応：ヨウ素、エールリッヒ反応に陽性 (4)分子量（ＦＡＢ−ＭＳから決定）：５８８ (5)核磁気共鳴スペクトル¹ Ｈ−ＮＭＲ：図２７に示すごとくである（重クロロホ
ルム中、５００MHz）。

【０１０３】処方例 (1)５０ｍｇ錠 化合物７を２００ｇ、乳糖２８８ｇ、結晶セルロース７
２ｇを流動層造粒装置を使用して均一に混合した。これ
に１０％ヒドロキシプロピルセルロース溶液２００ｇを
噴霧して造粒した。乾燥後、２０メッシュの篩を通し、
これにカルボキシメチルセルロースカルシウム１６ｇ、
ステアリン酸マグネシウム４ｇを加えて混合し、ロータ
リー打錠機で７．５ｍｍ×８．４Ｒの臼杵を使用して１
錠当り１５０ｍｇの錠剤とした。表３にこの錠剤の組成
を示す。

【０１０４】

【表３】

【０１０５】(2)２００ｍｇ錠 化合物７を４００ｇ、乳糖９４ｇ、結晶セルロース６２
ｇを流動層造粒装置を使用して均一に混合した。これに
１０％ヒドロキシプロピルセルロース溶液２００ｇを噴
霧して造粒した。乾燥後、２０メッシュの篩を通し、こ
れにカルボキシメチルセルロースカルシウム１８ｇ、ス
テアリン酸マグネシウム６ｇを加えて混合し、ロータリ
ー打錠機で９．５ｍｍ×８．５Ｒの臼杵を使用して１錠
当り３００ｍｇの錠剤とした。表４にこの錠剤の組成を
示す。

【０１０６】

【表４】

【０１０７】

【発明の効果】以上説明したように、本発明の化合物は
コレシストキニン（ＣＣＫ）−Ｂ／ガストリン受容体拮
抗作用を有し、ＣＣＫ−Ｂ／ガストリン受容体が関与す
る疾患、例えば胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胃炎、逆流性食
道炎、ゾリンジャー・エリソン症候群、ガストリン感受
性膵等の消化器系疾患や、食欲調節系の障害、痛み、不
安等の中枢神経系の障害等の治療及び予防に有用であ
る。

【図面の簡単な説明】

【図１】化合物１の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである（重
クロロホルム中）。

【図２】化合物２の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである（重
クロロホルム中）。

【図３】化合物３の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである（重
クロロホルム中）。

【図４】化合物４の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである（重
クロロホルム中）。

【図５】化合物５の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである（重
クロロホルム中）。

【図６】化合物６の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである（重
クロロホルム中）。

【図７】化合物７の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである（重
クロロホルム中）。

【図８】化合物８の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである（重
クロロホルム中）。

【図９】化合物９の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである（重
クロロホルム中）。

【図１０】化合物１０の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである
（重クロロホルム中）。

【図１１】化合物１１の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである
（重クロロホルム中）。

【図１２】化合物１２の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである
（重クロロホルム中）。

【図１３】化合物１３の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである
（重クロロホルム中）。

【図１４】化合物１４の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである
（重クロロホルム中）。

【図１５】化合物１５の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである
（重クロロホルム中）。

【図１６】化合物１６の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである
（重クロロホルム中）。

【図１７】化合物１７の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである
（重クロロホルム中）。

【図１８】化合物１８の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである
（重クロロホルム中）。

【図１９】化合物１９の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである
（重クロロホルム中）。

【図２０】化合物２０の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである
（重クロロホルム中）。

【図２１】化合物２１の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである
（重クロロホルム中）。

【図２２】化合物２２の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである
（重クロロホルム中）。

【図２３】化合物２３の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである
（重クロロホルム中）。

【図２４】化合物２４の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである
（重クロロホルム中）。

【図２５】化合物２５の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである
（重クロロホルム中）。

【図２６】化合物２６の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである
（重クロロホルム中）。

【図２７】化合物２７の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである
（重クロロホルム中）。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｄ 519/00 ３１１ Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｂ 7432−4Ｂ //(Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｃ１２Ｒ 1:66） (72)発明者 花里 敏枝 東京都板橋区高島平２−32−２−637 (72)発明者 矢沢 秀典 千葉県我孫子市つくし野７−７−52 ダイ アパレス我孫子306

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記構造式によって特定される化合物若
   しくはその製薬学的に許容される塩を有効成分とするコ
   レシストキニン（ＣＣＫ）−Ｂ／ガストリン受容体拮抗
   剤。 【化１】 （式中、 Ｒ₁、Ｒ₂は、同一又は異なって、水素原子、低級アルキ
   ル基、ベンジル基、クロロベンジル基、フルオロベンジ
   ル基、トリフルオロメチルベンジル基、２-チエニルメ
   チル基又は２-（メチルチオ）エチル基を表し、 Ｒ₃、Ｒ₄は、同一又は異なって、水素原子、メチル基又
   はハロゲン原子を表す。但し、Ｒ₁、Ｒ₂の一方がイソブ
   チル基、イソプロピル基又はベンジル基のいずれかであ
   り、他方がベンジル基であり、かつＲ₃及びＲ₄が水素原
   子である場合を除く。）
2. 【請求項２】 下記構造式によって特定される化合物若
   しくはその製薬学的に許容される塩。 【化２】 （式中、 Ｒ₁は、水素原子、メチル基、イソプロピル基、ｐ-クロ
   ロベンジル基、ｐ-フルオロベンジル基又はｏ-トリフル
   オロメチルベンジル基を表し、 Ｒ₂は、イソプロピル基、ベンジル基、ｐ-クロロベンジ
   ル基又はｐ-フルオロベンジル基を表す。但し、Ｒ₁がイ
   ソプロピル基、ｐ-クロロベンジル基又はｐ-フルオロベ
   ンジル基のとき、Ｒ₂はＲ₁と同一基である。）
3. 【請求項３】 アスペルギルス（Aspergillus）属に属
   し、請求項１又は２記載の化合物を生産する能力を有す
   る微生物を培地に培養し、培養物中に請求項１又は２記
   載の化合物を生産、蓄積させ、培養物から生成蓄積した
   請求項１又は２記載の化合物を採取することを特徴とす
   る請求項１又は２記載の化合物の製造法。
4. 【請求項４】 アスペルギルス（Aspergillus）属に属
   する微生物が、アスペルギルス エスピー（Aspergillu
   s sp.）Ｑ２０５４７（ＦＥＲＭ Ｐ−１３６６２）で
   ある請求項３記載の製造法。
5. 【請求項５】 ｐ-クロロフェニルアラニン、ｐ-フルオ
   ロフェニルアラニン、ｏ-トリフルオロメチルフェニル
   アラニン又は下記化合物から選択した物質を含む培地で
   アスペルギルス属に属する微生物を培養することによる
   請求項３又は４記載の製造法。 【化３】 （式中、Ｒは、水素原子、メチル基又はイソプロピル基
   を表す。）