JPH07501534A - ガンの治療のためのクレアチンホスフェート又はホスホエノールピルビン酸の使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ガンの治療のためのクレアチンホスフェート又はホスホエノールピルビン酸の使 用 本発明は、ガンの治療を意図した薬剤の調製のためのホスホアミド結合若しくは エノールホスフェート結合を有する化合物の使用に関する。

本説明のフレームワーク内で、ホスフェート結合を有する化合物は、その化学構 造に下記の基を含有する任意の化合物を意味すると解される。

このような化合物の好ましい例は、クレアチンホスフェート（ホスフェートクレ アチンとも呼ばれる）である。これは、を椎動物に広く存在する物質であり、ま たこれは、特に横紋筋に存在するが、血液及び細胞外液には存在しない。他の例 にはアルギニンホスフェートがあり、これは、無を椎動物の筋肉に見出される。

同様に、エノールホスフェート結合を有する化合物は、その化学構造に以下の基 を含有する任意の化合物を意味するとこのような化合物の好ましい例には、ホス ホエノールピルビン酸があり、これは、解糖に含まれる内因性の代謝産物であり 、従って、生理学的な条件下では細胞に局在化され、血液には存在しない。

上記の化合物のホスホアミド又はエノールホスフェート結合は、いわゆるエネル ギーに富んだ結合の一群に属する。

ＥＰ−Ａ−０１９９１１７及びＥＰ−Ａ−０２２２２５７の書類には、一般的な 条件下における心臓病及び特に心筋梗塞の治療のための結晶状態のホスホクレア チン及びそのナトリウム塩の使用が開示されている。

ＷＯ３３１０２３９１の書類には、一般的な条件下におけるアデノシン三リン酸 と混合されたホスホエノールピルビン酸の塩を含有する薬学的な組成物が開示さ れている。前記組成物は、虚血によって細胞に起こるダメージを治療及び防ぐた めのものである。

ＵＳ−４７６９３１８の書類は、種々のホスホエノールピルビン酸誘導体を含有 する溶液に関連している。この溶液は、血液の保存のためのものである。

最後に、ＥＰ−Ａ−２３９−３５７の書類には、虚血に伴う心臓若しくは腎臓病 の治療のためにホスホエノールピルビン酸の１ナトリウム塩を使用することが開 示されている。

ホスホアミド結合又はエノールホスフェート結合を有する化合物が、特に種々の 未知の薬学的性質、特に顕著な抗腫瘍活性を有すること（これは本発明の基本で ある）が発見された。

従って、本発明は主に、ホスホアミド又はエノールホスフェート結合から選択さ れるエネルギーに富んだ結合を有する少なくとも１つの化合物を、腫瘍の治療を 意図した薬剤の調製のために使用することに関する。

目下の１つの好ましい態様において、エネルギーに富んだ結合を有する上記の化 合物は、クレアチンホスフェート及びその薬学的に許容しうる塩、特にナトリウ ム塩である。

他の態様としては、エネルギーに富んだ結合を有する化合物はホスホエノールピ ルビン酸及びその薬学的に許容しうる塩、特にナトリウム塩である。

本発明に従って得られる薬剤で処理されうる腫瘍は、特に初期の腫瘍、又は化学 療法に抵抗するようになる腫瘍、例えばアデノカルチノーマ（結腸、膵臓、胃、 気管支、腎臓、乳房、子宮、卵巣）二類表皮癌（上気道消化管（ｕｐｐｅｒ　ｒ ｅ−ｓｐｉｒａｔｏｒｙ−ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　ｔｒａｃｔ）　、気管支、尿路 、肛門、皮膚）；悪性黒色腫；軟組織肉腫；白血病；リンパ腫；及び多発性骨髄 腫である。

これらの薬剤は、一般に従来の方法によって調製され、静脈的、巨丸薬又は間欠 的若しくは連続的散布（ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ）の形態、動脈的、腹腔内的、又は 筋肉内的に投与される。これらの投与量は、２４時間当たり５０ｍｇから５ｇ／ ｋｇ体重まで変化する。

本発明の１つの特性に従えば、本薬剤は、投与量単位の形態での組成物である。

有利には、投与量単位は０．１から５０ｇの活性成分を含有する。

好ましい態様では、この薬剤は、０．１から５０ｇの活性成分を含有する注射可 能な製剤として製剤化される。

１つの有利な態様として、本薬剤の上記の活性成分は、投与モードに適合した混 合剤（ｂｕｌｋｉｎｇ　ａｇｅｎｔ）で希釈されうる。このような混合剤は、当 業者に周知であり、特に有利な混合剤の例には以下のようなものがある。

−無水リン酸二水素ナトリウム／リン酸水素ナトリウムを含有するリン酸バッフ ァー −クエン酸ナトリウム／クエン酸を含有するクエン酸バッファー −ナトリウムラクテート／乳酸を含有する乳酸バッファー −塩化ナトリウム 我々の有利な態様において、上記の活性成分は、投与モードに適合した再構成溶 媒（ｒｅｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｎｇ　５ｏｌｖｅｎｔ）に希釈されうる。

再構成溶媒は、当業者に周知である。この例としては以下のようなものがある。

−注射可能な製剤用の水； −０，９％ＮａＣｌ　ニ ー　５％〜１５％のグルコース溶液； −１０〜２０％のマンニトール； −２０〜３０％ソルビトール； −クエン酸三ナトリウム塩溶液。

本発明はまた、人の腫瘍を治療するための方法を含むこともねらいとしている。

この方法は、ホスホアミド結合又はエノールホスフェート結合を有する少なくと も１種の化合物を治療として効果的な景投与することを具備する。

ホスホアミド結合又はエノールホスフェート結合を有する化合物の薬学的性質は 、他の試験を用いて種々の腫瘍細胞に関してクレアチンホスフェートの効果を評 価することによって行われる。

観測された効果が、この分子中のホスホアミド結合の存在に起因することは明白 である。

ホスホエノールピルビン酸に関する相補試験によって、類似の薬学的性質が、エ ノールホスフェート結合を有する化合物から得られうろことが示唆される。

ホスホアミド結合又はエノールホスフェート結合を有する化合物の薬学的性質を 試験することを可能にさせる実験計画及び結果が以下に示される。

腫瘍を、癌細胞の皮下接種によってヌードマウスに作製した。この後、接種から １週間後にＵＰ９９９−２４７で計画されたクレアチンホスフェート又はＮａＣ ｌの腹腔内注射を１週間に６又は７日行った。治療の後、動物の体重を量り、腫 瘍の大きさを毎週測定した。

５ｗ１ｓｓ系の４週齢ヌードマウスを、加圧下においてアイソレーター（無菌環 境）中で飼育した。

ヒト癌細胞系、即ちＣａｃｏ２（結腸）、ＳＫ−ＭＥＬ５（メラノーマ）、Ｃａ ｐａｎ−１（膵Ｒ）及びＮＣｌ−Ｈ６９（小細胞肺）は、ｌＯから２０％のウシ 胎児血清及び１％の可欠アミノ酸を含有する異なった媒体で培養される。

ＰＢＳ中の５Ｘ１０６（ＳＫ−ＭＥＬ５）、９Ｘ１０６（Ｃａｃｏ２）　、２Ｘ １０５（Ｃａｐａｎ−１）、２．３Ｘ１０６（ＮＣＩ−Ｈ６９）個の細胞が、各 々のマウスの右側に皮下的に接種された。操作は無菌条件下のフード中で行われ た。

接種の後毎週、動物の体重を測定し、腫瘍を滑りはさみ尺（ｓｌｉｄｉｎｇ　ｃ ａｌｉｐｅｒ）で測定した。

該（半楕円体の）腫瘍の容積は、以下の式によって言１算しくＤＥＴＨＬＥＦＳ ＥＮ　Ｌ、Ａ、、ＰＲＷＩＴＴ　Ｊ、Ｍ、Ｓ、、ＭＥＮＤＥＬ・５ｏ）ＩＮ　Ｍ 、Ｌ、、腫瘍成長曲線の分析（Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｔｕ−ｍｏｒ　ｇｒｏ ｗｔｈ　ｃｕｒｖｅｓ、）Ｊ、Ｎａｔｌ、Ｃａｎｃｅｒ　Ｉｎ５Ｌｉ゛Ｌｕｔｅ 、１９６８．　４０．　３８９−４０８；　ＲＡＤＵＬＯＶＩＣＳ、、ＭＬＬＬ ＥＲＧ、、５ＣＨＡＬＬＹ　Ａ、Ｖ、、ボンバスチン／ガストリン遊離ペプチド 拮抗剤（ＲＣ・３０９５）を用いた治療によるヌードマウス中でのＨＴ、２９ヒ ト結腸癌異種移植の成長阻害Ｎｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ 　ＨＴ・２９　ｈｕｍａｎ　ｃｏ−１ｏｎ　ｃａｎｃｅｒ　ｘｅｎｏｇｒａｆｔ ｓ　ｉｎ　ｎｕｄｅ　ｍ１ｃｅ　ｂｙ　ｔｒ−ｅａＬｍｅｎｔ　ｗｉｔｈ　ｂｏ ｍｂｅｓｉｎ／ｇａｓＬｒｉｎ　ｒｅｌｅａｓｉｎｇｐｅｐｔｉｄｅ　ａｎｔａ ｇｏｎｉｓｔ　（ＲＣ゛３０９５））　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、。

１９９１、　５１．　６００６・６００９）。

１．２．２腫瘍成長のＵＰ９９９−２４７の効果に　る仇叉 治療は、接種の後７０で始め、ＵＰ９９９−２４７の腹腔内注射（治療群）又は 等張溶液（対照群）よりなる。それぞれの群は、１０から１５のマウスから構成 されている。動物（各々は背中に入れ墨をして識別できるようにしである）はマ クロ−ロンボックス（＋ｎａｋｒｏｌｏｎ　ｂｏｘｅｓ）に区分けした◇治療の 継続は、各々の試験系に対する治療の対象に依存する。

治療を停止したとき、腫瘍を除去し、病理学的解剖の分析のためにボーイング（ Ｂｏｕｉｎ’ｓ）固定液で固定した。

１．２．３投与計画 試験物は、０．９％ＮａＣｌ中で使用され、０．２Ｐのフイルターを用いて無菌 にされた。これを１ｍｅ／マウスの量で腹腔内的に投与した。

対照群にはｌ　ｍｌの０．９％ＮａＣｌを与えた。

投与計画は以下のとおりである。

ｌマウス当たり及び１回の注射化たり、０．０４ｍｍｏｌ、０．１ｍｍｏｌ、０ ．２ｍｍｏｌ及び０．　４ｍｍｏｌ。

これらの投与量は、腹腔内投与によって使用されうる最大投与量に従って、及び 薬学的試験において予め決定されている血漿濃度に従って選択される。

１．２．４結果の表示 以下のパラメーターは測定した個々の値から計算した。

−ｇでの体重、平均上標準偏差、毎週測定した。

−−での腫瘍の容積、平均上標準偏差、毎週測定した。

２、結果 結果は以下の表に示されている。

ヌードマウス中の小細胞肺癌（ＮＣＩ−８６９）の成長に関するＵＰ９９９−２ ４７の影響０，４閤ｏ１の投与量の効果試験 体重（ｇ） 腫瘍の容積（閣３） ヌードマウス中の膵臓癌（Ｃａｐａｎ−１）の成長に関するＵＰ９９９−２４７ の影響０．４ｗｏｌ／マウスの投与量の効果試験体重（ｇ） 腫瘍の容積（ＩＩＩ１１３） 得られた結果は、ヒト起源の種々の報告された腫瘍を有するヌードマウスにクレ アチンホスフェートを投与した後に、腫瘍の増殖が阻害されたことを示している 。

この阻害は、投与量依存性である。

体重の変化、及び動物の挙動を実験期間にわたって追跡した。

生物化学的及び血液学的評価を、動物が死亡した後に採集された血漿及び血液で 行った。説明した実験条件下で、クレアチンホスフェートは大量死を招かながっ た。

観測された変動は、試験された最も高い投与量で治療された動物のグループに関 係し、これはトランスアミナーゼ及びナトリウムの適度な増加、並びにアルカリ 性ホスファターゼ及び形成される血液要素の減少に因っている。

他の修正は、ラットで通常遭遇する変動に一致している。

クレアチンホスフェートは、静脈内的に投与された２４００ｍｇ／ｋｇまでの範 囲の投与量で優れた生物学的耐性を示した。

同様に、ホスホエノールピルビン酸は良い生物学的耐性を示し、大量死を招くこ となく　５００ｍｇ／ｋｇまでの投与量でラットに投与された。

ホスホアミド結合又はエノールホスフェート結合を有する化合物を基にした薬学 的組成物の非制限的な例は以下に見出される。

クレアチンホスフェートは、すぐに使用できる無菌溶液の形態、又は無菌の粉末 若しくは凍結乾燥物の形態であり得る。

この場合には、ラクトース、マンニトール、無水リン酸二水素ナトリウム／リン 酸水素ナトリウムを含有するリン酸バッファー、クエン酸ナトリウム／クエン酸 を含有するクエン酸バッファー、ナトリウムラクテート／乳酸を含有する乳酸バ ッファー、塩化ナトリウム、又は任意の比率でのこれらの混合剤の混合物から選 択される薬学的活性の全くない混合剤を、当業者に周知の方法で使用することが 有利であり得る。

再構成溶媒は、通常使用される注射溶液（０，９％ＮａＣ１，５％若しくは１５ ％グルコース溶液、２０〜３０％ソルビトール、クエン酸三ナトリウム塩溶液又 は注射可能な製剤）から選択されるか、又は一般に使用される、任意の他の利用 しうる散布溶液であり得る。

好ましくは、薬学的製剤は、２５ｇのクレアチンホスフェートを含有する無菌の 凍結乾燥物の形態を取り、１００−の０．９％塩化ナトリウムの溶液で再構成さ れる。

例１ −　クエン酸バッファー　ｐＨ７ −クエン酸　０．０３２９％ Ｎａ２）ＩＰＯ４’２Ｈ２００，２５３％−　グルコース　５％ −注射可能な製剤のための水→　ｑｓｑ　１００％凍結乾燥物を使用する場合は 、吸い上げ溶媒（ｔａｋｅ・ｕｐｓｏｌｖｅｎｔ）は注射可能な製剤のための水 である。

例２ −　リン酸バッファー　ｐｌ＋７．２ Ｎａ２ＨＰＯ４・２Ｈ２００，７５８％−ＮａＨ２ＰＯ４０，１８４％ −ＮａＣｌ　Ｏ，４４％ −注射可能な製剤のための水→　９５９１００％例３ −　マンニトール　５％ −注射可能な製剤のための水−ｑｓｑ　１００％凍結乾燥物を使用する場合は、 吸い上げ溶媒（ｔａｋｅ−ｕｐｓｏｌｖｅｎｔ）は注射可能な製剤のための水で ある。

例４ −　グルコース　５％ −注射可能な製剤のための水−ｑｓｑ　１００％凍結乾燥物を使用する場合は、 吸い上げ溶媒（ｔａｋｅ−ｕｐｓｏｌｖｅｎｔ）は注射可能な製剤のための水で ある。

例５ −　ＫＨ２ＰＯ４０，１７８％ −Ｎａ２ＨＰＯ４・２Ｈ２００，９５３％−　グルコース　２％ −注射可能な製剤のための水−ｑｓｑ　１００％凍結乾燥物を使用する場合は、 吸い上げ溶媒（ｔａｋｅ−ｕｐｓｏｌｖｅｎｔ）は注射可能な製剤のための水で ある。

国際調査報告　ＰＣＴ／ＦＲ９２１０１１１８

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. １．腫瘍の治療を意図した薬剤の調製のための、ホスホアミド結合又はエノール ホスフェート結合から選択されるエネルギーに富んだ結合を有する少なくとも１ つの化合物の使用。
2. ２．請求の範囲第１項に記載の使用であって、該エネルギーに富んだ結合を有す る化合物が、クレアチンホスフェート及びその薬学的に許容しうる塩、特にナト リウム塩である使用。
3. ３．請求の範囲第１項に記載の使用であって、該エネルギーに富んだ結合を有す る化合物が、ホスホエノールピルビン酸及びその薬学的に許容しうる塩、特にナ トリウム塩である使用。
4. ４．アデノカルチノーマ、類表皮癌及び悪性黒色腫から選択される腫瘍の治療を 意図した薬剤を調製するための請求の範囲第１項から第３項までの１項に記載の 使用。
5. ５．請求の範囲第１項から４項までの１項に記載の使用であって、該薬剤が投与 量単位の形態での組成物である使用。
6. ６．請求の範囲第５項に記載の使用であって、該投与量単位が０．１から５０ｇ の活性成分を含有する使用。
7. ７．請求の範囲第１項から６項の何れか１項に記載の使用であって、上記の薬剤 が注射可能な製剤からなる使用。