JPH0768137B2 - アルブミン製剤及びその製法 - Google Patents
アルブミン製剤及びその製法Info
- Publication number
- JPH0768137B2 JPH0768137B2 JP1153137A JP15313789A JPH0768137B2 JP H0768137 B2 JPH0768137 B2 JP H0768137B2 JP 1153137 A JP1153137 A JP 1153137A JP 15313789 A JP15313789 A JP 15313789A JP H0768137 B2 JPH0768137 B2 JP H0768137B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- albumin
- preparation
- content
- treatment
- solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/76—Albumins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2/00—Disinfection or sterilisation of materials or objects, in general; Accessories therefor
- A61L2/02—Disinfection or sterilisation of materials or objects, in general; Accessories therefor using physical processes
- A61L2/04—Heat
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/76—Albumins
- C07K14/765—Serum albumin, e.g. HSA
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2103/00—Materials or objects being the target of disinfection or sterilisation
- A61L2103/05—Living organisms or biological materials
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、アルブミン製剤及びその製法に関する。より
詳細には、擬集体含量、夾雑蛋白質含量等が低減された
血清アルブミン製剤及びその製法に関する。
詳細には、擬集体含量、夾雑蛋白質含量等が低減された
血清アルブミン製剤及びその製法に関する。
［従来の技術及び発明が解決しようとする課題］ 血清アルブミンは血漿中に最も多く含まれている蛋白質
で、血液中で浸透圧の維持、栄養物質や代謝物質と結合
してその運搬などの機能を果たしている。上記血清アル
ブミンを含有する製剤は、アルブミンの喪失及びアルブ
ミン合成低下による低アルブミン血症、出血性ショック
などの治療に用いられている。アルブミン製剤は、そこ
に混入してくる懸念のあるウイルスを不活化するため
に、通常、アルブミン含有水溶液の状態での加熱処理が
汎用されている。このような方法により製造される市販
のアルブミン製剤をゲル濾過分析法で分析すると、該製
剤中には擬集体が存在することが知られている。この擬
集体（通常、ポリマーと称されるので、以下、ポリマー
という）は上記の加熱処理前には殆ど存在しないことか
ら、加熱処理により熱に不安定な夾雑蛋白質の作用でア
ルブミンが擬集化したものと考えられる。市販ほアルブ
ミン製剤は安全に広く使用されていることから、このポ
リマーが特に人に害を及ぼすとは考えられていないが、
加熱変性物であることより、製剤中にできるだけ含有し
ないことが好ましい。
で、血液中で浸透圧の維持、栄養物質や代謝物質と結合
してその運搬などの機能を果たしている。上記血清アル
ブミンを含有する製剤は、アルブミンの喪失及びアルブ
ミン合成低下による低アルブミン血症、出血性ショック
などの治療に用いられている。アルブミン製剤は、そこ
に混入してくる懸念のあるウイルスを不活化するため
に、通常、アルブミン含有水溶液の状態での加熱処理が
汎用されている。このような方法により製造される市販
のアルブミン製剤をゲル濾過分析法で分析すると、該製
剤中には擬集体が存在することが知られている。この擬
集体（通常、ポリマーと称されるので、以下、ポリマー
という）は上記の加熱処理前には殆ど存在しないことか
ら、加熱処理により熱に不安定な夾雑蛋白質の作用でア
ルブミンが擬集化したものと考えられる。市販ほアルブ
ミン製剤は安全に広く使用されていることから、このポ
リマーが特に人に害を及ぼすとは考えられていないが、
加熱変性物であることより、製剤中にできるだけ含有し
ないことが好ましい。
また、アルブミン中にはトランスフェリンなどのように
アルブミンと物理化学的性質の比較的よく似た夾雑蛋白
質が含まれており、分画法等の慣用の手段では効率的に
分離することが困難であり、アルブミン製剤中に夾雑蛋
白質が残存するという問題がある。
アルブミンと物理化学的性質の比較的よく似た夾雑蛋白
質が含まれており、分画法等の慣用の手段では効率的に
分離することが困難であり、アルブミン製剤中に夾雑蛋
白質が残存するという問題がある。
本発明は上記の課題を解決すべく創案されたもので、本
発明者らが種々検討を重ねた結果、アルブミンを高度に
精製することにより、トランスフェリン等の夾雑蛋白質
含量を激減させ得ると共に加熱処理してもポリマーが検
出されないことを見出して完成したものである。即ち、
本発明はポリマー含量及び夾雑蛋白質含量の少ないアル
ブミン製剤及びその製法を提供することを目的とする。
発明者らが種々検討を重ねた結果、アルブミンを高度に
精製することにより、トランスフェリン等の夾雑蛋白質
含量を激減させ得ると共に加熱処理してもポリマーが検
出されないことを見出して完成したものである。即ち、
本発明はポリマー含量及び夾雑蛋白質含量の少ないアル
ブミン製剤及びその製法を提供することを目的とする。
［課題を解決するための手段］ 上記の課題を解決すべくなされた本発明のアルブミン製
剤は、ゲル濾過分析法により測定したポリマー含量が検
出限界以下であることを特徴とする製剤、及びMancini
法により測定したトランスフェリン含量が検出限界以下
であることを特徴とする製剤である。また、本発明のア
ルブミン製剤の製法は、血清アルブミン含有水溶液を陰
イオン交換体処理した後、陽イオン交換体処理し、次い
で加熱処理することを特徴とするものである。なお、上
記の製法中、アルブミン水溶液の処理に用いられる陰イ
オン交換体及び陽イオン交換体としては、それぞれ強陰
イオン交換体及び強陽イオン交換体が好ましい。
剤は、ゲル濾過分析法により測定したポリマー含量が検
出限界以下であることを特徴とする製剤、及びMancini
法により測定したトランスフェリン含量が検出限界以下
であることを特徴とする製剤である。また、本発明のア
ルブミン製剤の製法は、血清アルブミン含有水溶液を陰
イオン交換体処理した後、陽イオン交換体処理し、次い
で加熱処理することを特徴とするものである。なお、上
記の製法中、アルブミン水溶液の処理に用いられる陰イ
オン交換体及び陽イオン交換体としては、それぞれ強陰
イオン交換体及び強陽イオン交換体が好ましい。
本発明にかかる製剤の主成分であり又本発明にかかる製
法の出発原料であるアルブミンの由来には特に制限がな
く、具体的には哺乳動物、例えは、ヒト、ウシ、ウサギ
等に由来するものが挙げられ、特にヒト由来のものが使
用される。アルブミンを調製するための出発原料として
は、例えばコーン氏の冷アルコール分画によって得られ
た第Ｖ画分等が例示される。
法の出発原料であるアルブミンの由来には特に制限がな
く、具体的には哺乳動物、例えは、ヒト、ウシ、ウサギ
等に由来するものが挙げられ、特にヒト由来のものが使
用される。アルブミンを調製するための出発原料として
は、例えばコーン氏の冷アルコール分画によって得られ
た第Ｖ画分等が例示される。
本発明のアルブミン製剤は、上記の血清アルブミンを適
当な精製水に溶解したアルブミン含有水溶液を陰イオン
交換体処理した後、陽イオン交換体処理し、次いで加熱
処理することにより得られる。
当な精製水に溶解したアルブミン含有水溶液を陰イオン
交換体処理した後、陽イオン交換体処理し、次いで加熱
処理することにより得られる。
上記の工程において、アルブミン含有水溶液中のアルブ
ミン含量としては、通常、0.1〜30％（W/V、特に明示の
ない限り以下同様）程度、好ましくは約１〜10％に調整
される。
ミン含量としては、通常、0.1〜30％（W/V、特に明示の
ない限り以下同様）程度、好ましくは約１〜10％に調整
される。
本発明においては、まず、アルブミン水溶液を陰イオン
交換体処理に付して精製する。この陰イオン交換体処理
により、ハプトグロビン、α１−酸性糖蛋白質などのア
ルブミンより等電点の低い夾雑蛋白質が除去され精製さ
れる。使用される陰イオン交換体としては陰イオン交換
基（例えば、ジエチルアミノエチル基等）を有する不溶
性担体であればいずれも使用することができ、より具体
的には、この分野で慣用の陰イオン交換体、例えば、DE
AE−セファロース 、Ｑ−セファロース （いずれもフ
ァルマシア社製）、DEAE−トヨパール 、QAE−トヨパ
ール （いずれも東ソー社製）、A200セルロファイン
（生化学工業社製）、陰イオン交換樹脂等が例示され、
夾雑蛋白質除去効率の点からしてＱ−セファロース、QA
E−トヨパール等の強陰イオン交換体を用いるのが好ま
しい。
交換体処理に付して精製する。この陰イオン交換体処理
により、ハプトグロビン、α１−酸性糖蛋白質などのア
ルブミンより等電点の低い夾雑蛋白質が除去され精製さ
れる。使用される陰イオン交換体としては陰イオン交換
基（例えば、ジエチルアミノエチル基等）を有する不溶
性担体であればいずれも使用することができ、より具体
的には、この分野で慣用の陰イオン交換体、例えば、DE
AE−セファロース 、Ｑ−セファロース （いずれもフ
ァルマシア社製）、DEAE−トヨパール 、QAE−トヨパ
ール （いずれも東ソー社製）、A200セルロファイン
（生化学工業社製）、陰イオン交換樹脂等が例示され、
夾雑蛋白質除去効率の点からしてＱ−セファロース、QA
E−トヨパール等の強陰イオン交換体を用いるのが好ま
しい。
上記の陰イオン交換体を用いる処理は、アルブミン水溶
液を陰イオン交換体と接触させることにより行なわれ、
陰イオン交換体の使用量はアルブミン含有水溶液中の夾
雑蛋白質含量、陰イオン交換体の交換能等により適宜調
整されるが、アルブミン1g当り、陰イオン交換体0.1〜5
ml、通常3ml程度使用される。本方法はカラム法、バッ
チ法のいずれの方法にて行ってもよいが、夾雑蛋白質の
除去効率の面からカラム法にて行うのが好ましい。
液を陰イオン交換体と接触させることにより行なわれ、
陰イオン交換体の使用量はアルブミン含有水溶液中の夾
雑蛋白質含量、陰イオン交換体の交換能等により適宜調
整されるが、アルブミン1g当り、陰イオン交換体0.1〜5
ml、通常3ml程度使用される。本方法はカラム法、バッ
チ法のいずれの方法にて行ってもよいが、夾雑蛋白質の
除去効率の面からカラム法にて行うのが好ましい。
カラム法にて行う場合、前記のアルブミン水溶液をpH3
〜６程度、好ましくはpH4.5〜5.5、塩濃度としては0.00
1〜0.2Mの塩化ナトリウム程度、好ましくは0.001〜0.05
Mに調整し、緩衝液［例えは、0.02M酢酸ナトリウム（pH
5.1）］で平衡化した陰イオン交換体カラムを通過さ
せ、次いで同塩衝液で展開して非吸着分を回収すること
により行われる。上記の操作はアルブミンの変性を制御
するため、低温（通常、10℃以下）にて行うのが好まし
い。
〜６程度、好ましくはpH4.5〜5.5、塩濃度としては0.00
1〜0.2Mの塩化ナトリウム程度、好ましくは0.001〜0.05
Mに調整し、緩衝液［例えは、0.02M酢酸ナトリウム（pH
5.1）］で平衡化した陰イオン交換体カラムを通過さ
せ、次いで同塩衝液で展開して非吸着分を回収すること
により行われる。上記の操作はアルブミンの変性を制御
するため、低温（通常、10℃以下）にて行うのが好まし
い。
また、バッチ法にて行う場合、上記条件に調整したアル
ブミン水溶液に、陰イオン交換体を添加して接触させ、
10℃以下にて、30分〜２時間程度混和した後、遠心分離
等の手段により陰イオン交換体と分離し、上清を回収す
ることより行われる。
ブミン水溶液に、陰イオン交換体を添加して接触させ、
10℃以下にて、30分〜２時間程度混和した後、遠心分離
等の手段により陰イオン交換体と分離し、上清を回収す
ることより行われる。
上記の陰イオン交換体処理により精製されたアルブミン
水溶液は、必要に応じて、pH調整、濃度調整等がされた
後、陽イオン交換体処理に付してさらに精製する。この
陽イオン交換体処理により、アルブミンなどよりも高pH
に等電点のあるトランスフェリンなどの夾雑蛋白質が除
去されて精製される。使用される陽イオン交換体として
は陽イオン交換基（例えば、スルホ基、カルボキシル基
等）を有する不溶性担体であればいずれも使用すること
ができ、より具体的には、この分野で慣用の陽イオン交
換体、例えば、SP−セファデックス （ファルマシア社
製）、SPトヨパール 、TSKge1SP−5PW （いずれも東
ソー社製）等が例示され、夾雑蛋白質除去効率の点から
してSP−セファデックス、SPトヨパール等の強陽イオン
交換体を用いるのが好ましい。
水溶液は、必要に応じて、pH調整、濃度調整等がされた
後、陽イオン交換体処理に付してさらに精製する。この
陽イオン交換体処理により、アルブミンなどよりも高pH
に等電点のあるトランスフェリンなどの夾雑蛋白質が除
去されて精製される。使用される陽イオン交換体として
は陽イオン交換基（例えば、スルホ基、カルボキシル基
等）を有する不溶性担体であればいずれも使用すること
ができ、より具体的には、この分野で慣用の陽イオン交
換体、例えば、SP−セファデックス （ファルマシア社
製）、SPトヨパール 、TSKge1SP−5PW （いずれも東
ソー社製）等が例示され、夾雑蛋白質除去効率の点から
してSP−セファデックス、SPトヨパール等の強陽イオン
交換体を用いるのが好ましい。
上記の陽イオン交換体を用いる処理は、前記陰イオン交
換体処理により精製されたアルブミン水溶液を陽イオン
交換体と接触させることにより行われる。陽イオン交換
体の使用量はアレブミン水溶液中の夾雑蛋白質含量、陽
イオン交換体の交換能等により適宜調整されるが、アル
ブミン1g当り、陽イオン交換体0.1〜5ml、通常2ml程度
使用される。本方法はカラム法、バッチ法のいずれの方
法にて行ってもよいが、夾雑蛋白質の除去効率の面から
カラム法にて行うのが好ましい。
換体処理により精製されたアルブミン水溶液を陽イオン
交換体と接触させることにより行われる。陽イオン交換
体の使用量はアレブミン水溶液中の夾雑蛋白質含量、陽
イオン交換体の交換能等により適宜調整されるが、アル
ブミン1g当り、陽イオン交換体0.1〜5ml、通常2ml程度
使用される。本方法はカラム法、バッチ法のいずれの方
法にて行ってもよいが、夾雑蛋白質の除去効率の面から
カラム法にて行うのが好ましい。
カラム法にて行う場合、前記のアルブミン水溶液をpH4
〜８程度、好ましくはpH4.5〜6.5、より好ましくは5.5
〜6.0、塩濃度としては0.001〜0.2Mの塩化ナトリウム程
度、好ましくは0.001〜0.05Mに調整し、緩衝液［例え
ば、0.02M酢酸ナトリウム（pH5.5）］で平衡化した陽イ
オン交換体カラムを通過させ、次いで同緩衝液で展開し
て非吸着分を回収することにより行われる。上記の操作
はアルブミンの変性を抑制するため、低温（通常、10℃
以下）にて行うのが好ましい。
〜８程度、好ましくはpH4.5〜6.5、より好ましくは5.5
〜6.0、塩濃度としては0.001〜0.2Mの塩化ナトリウム程
度、好ましくは0.001〜0.05Mに調整し、緩衝液［例え
ば、0.02M酢酸ナトリウム（pH5.5）］で平衡化した陽イ
オン交換体カラムを通過させ、次いで同緩衝液で展開し
て非吸着分を回収することにより行われる。上記の操作
はアルブミンの変性を抑制するため、低温（通常、10℃
以下）にて行うのが好ましい。
また、バッチ法にて行う場合、上記条件に調整したアル
ブミン水溶液に、陽イオン交換体を添加して接触させ、
10℃以下にて、30分〜２時間程度混和した後、遠心分離
等の手段により陽イオン交換体と分離し、上清を回収す
ることにより行われる。
ブミン水溶液に、陽イオン交換体を添加して接触させ、
10℃以下にて、30分〜２時間程度混和した後、遠心分離
等の手段により陽イオン交換体と分離し、上清を回収す
ることにより行われる。
かかる陰イオン交換体処理及び陽イオン交換体処理によ
り精製されたアルブミン水溶液中に含まれる夾雑蛋白質
量は、ハプトグロビン、トランスフェリン及びα１−酸
性糖蛋白質が検出限界以下である。
り精製されたアルブミン水溶液中に含まれる夾雑蛋白質
量は、ハプトグロビン、トランスフェリン及びα１−酸
性糖蛋白質が検出限界以下である。
上記の陰イオン交換体処理及び陽イオン交換体処理によ
り夾雑蛋白質含量が低減されたアルブミン水溶液は適当
な濃度に調整し、例えば、バイアルに充填するなどの所
望の製剤形態に製剤化された後、加熱処理されて本発明
のアルブミン製剤が得られる。上記の加熱処理はアルブ
ミン製剤中に混入するおそれのあるウイルスを不活性化
するもので、アルブミン濃度５〜30％程度、通常５又は
20〜25％程度に調整した水溶液として行われ、加熱温度
としては、夾雑ウイルスを不活性するに十分な温度及び
時間行えばよく、例えば、50〜70℃、好ましくは約60℃
で、５〜20時間、好ましくは約10時間行われる。なお、
上記の加熱処理に際しては、必要に応じてアルブミンの
安定化剤、例えばＮ−アセチルトリプトファンナトリウ
ム、カプリル酸ナトリウム等を単独で又は混合して添加
してもよい。これらアルブミンの安定化剤は、製剤中に
含有されるアルブミン1g当り20〜60mg、好ましくは40mg
程度使用される。
り夾雑蛋白質含量が低減されたアルブミン水溶液は適当
な濃度に調整し、例えば、バイアルに充填するなどの所
望の製剤形態に製剤化された後、加熱処理されて本発明
のアルブミン製剤が得られる。上記の加熱処理はアルブ
ミン製剤中に混入するおそれのあるウイルスを不活性化
するもので、アルブミン濃度５〜30％程度、通常５又は
20〜25％程度に調整した水溶液として行われ、加熱温度
としては、夾雑ウイルスを不活性するに十分な温度及び
時間行えばよく、例えば、50〜70℃、好ましくは約60℃
で、５〜20時間、好ましくは約10時間行われる。なお、
上記の加熱処理に際しては、必要に応じてアルブミンの
安定化剤、例えばＮ−アセチルトリプトファンナトリウ
ム、カプリル酸ナトリウム等を単独で又は混合して添加
してもよい。これらアルブミンの安定化剤は、製剤中に
含有されるアルブミン1g当り20〜60mg、好ましくは40mg
程度使用される。
欺くして得られたアルブミン製剤は、ゲル濾過分析法に
より測定したポリマー含量が検出限界以下であり、Manc
ini法により測定したトランスフェリン含量も検出限界
以下である。
より測定したポリマー含量が検出限界以下であり、Manc
ini法により測定したトランスフェリン含量も検出限界
以下である。
本発明のアルブミン製剤は、従来のアルブミン製剤と同
様な用量、用法にて使用される。
様な用量、用法にて使用される。
［発明の効果］ 本発明のアルブミン製剤は、加熱処理によりウイルスが
不活性化されていると共にポリマー含量及びトランスフ
ェリン等の夾雑蛋白質含量が極めて少なく、安全性、安
定性等に優れた製剤である。
不活性化されていると共にポリマー含量及びトランスフ
ェリン等の夾雑蛋白質含量が極めて少なく、安全性、安
定性等に優れた製剤である。
また、本発明のアルブミン製剤の製法は、陰イオン交換
体及び陽イオン交換体による処理により、さまざまな等
電点を持つ夾雑蛋白質が除去されたアルブミン水溶液を
加熱処理するもので、夾雑蛋白質に起因するポリマー化
を抑制することができ、ポリマー含量及び夾雑蛋白質含
量が少なく且つ混入が危惧されるウイルスが不活性され
たアルブミン製剤が得られる。
体及び陽イオン交換体による処理により、さまざまな等
電点を持つ夾雑蛋白質が除去されたアルブミン水溶液を
加熱処理するもので、夾雑蛋白質に起因するポリマー化
を抑制することができ、ポリマー含量及び夾雑蛋白質含
量が少なく且つ混入が危惧されるウイルスが不活性され
たアルブミン製剤が得られる。
［実施例］ 以下、本発明をより詳細に説明するため、実施例を挙げ
るが、本発明はこれらの実施例によってなんら限定され
るものではない。
るが、本発明はこれらの実施例によってなんら限定され
るものではない。
実施例１ （１）アルブミン水溶液の調製 コーン氏の冷アルコール分画によって得られた第Ｖ画分
ペースト（500g）を冷無菌蒸溜水2.0に溶解し、酢酸
を用いてpHを4.6に調整した後、約１時間撹拌した。次
いで、約−２℃にて濾過（フィルター:0.45μｍ）し、
さらに冷無菌蒸溜水2.0を加え、1N水酸化ナトリウム
でpH5.1に調整し、アルブミン水溶液を得た。
ペースト（500g）を冷無菌蒸溜水2.0に溶解し、酢酸
を用いてpHを4.6に調整した後、約１時間撹拌した。次
いで、約−２℃にて濾過（フィルター:0.45μｍ）し、
さらに冷無菌蒸溜水2.0を加え、1N水酸化ナトリウム
でpH5.1に調整し、アルブミン水溶液を得た。
（２）陰イオン交換体処理 QAE−トヨパール（580ml）をカラム（直径5cm×長さ18c
m）に充填し、0.5M塩化ナトリウムで十分に洗浄した
後、0.02M酢酸ナトリウム（pH5.1）で平衡化し、陰イオ
ン交換体カラムを作製した。このカラムに上記（１）の
アルブミン水溶液を通し、さらに冷0.02M酢酸ナトリウ
ム（pH5.1、２）で洗浄した。通過液と洗浄液とを合
わせ、0.8M炭酸水素ナトリウムにてpHを5.5に調整し
た。
m）に充填し、0.5M塩化ナトリウムで十分に洗浄した
後、0.02M酢酸ナトリウム（pH5.1）で平衡化し、陰イオ
ン交換体カラムを作製した。このカラムに上記（１）の
アルブミン水溶液を通し、さらに冷0.02M酢酸ナトリウ
ム（pH5.1、２）で洗浄した。通過液と洗浄液とを合
わせ、0.8M炭酸水素ナトリウムにてpHを5.5に調整し
た。
（３）陽イオン交換体処理 SP−トヨパール（400ml）をカラムに充填し、0.5M塩化
ナトリウムで十分に洗浄した後、0.02M酢酸ナトリウム
（pH5.5）で平衡化し、陽イオン交換体カラムを作製し
た。このカラムに上記（２）で得られたアルブミン水溶
液を通し、さらに0.02M酢酸ナトリウム（pH5.5、1.2
）で洗浄した。通過液と洗浄液とを合わせた後、ペリ
コンにて透析・濃縮し、A280＝149（アルブミン濃度:28
％）となるように調製した。
ナトリウムで十分に洗浄した後、0.02M酢酸ナトリウム
（pH5.5）で平衡化し、陽イオン交換体カラムを作製し
た。このカラムに上記（２）で得られたアルブミン水溶
液を通し、さらに0.02M酢酸ナトリウム（pH5.5、1.2
）で洗浄した。通過液と洗浄液とを合わせた後、ペリ
コンにて透析・濃縮し、A280＝149（アルブミン濃度:28
％）となるように調製した。
（４）加熱処理 上記（３）で得られたアルブミン水溶液に、該水溶液10
ml当り1.2mlの安定化剤水溶液（100ml中、Ｎ−アセチル
トリプトファン5.55g及びカプリル酸ナトリウム3.89g含
有）を添加し、1N水酸化ナトリウムにてpHを6.85に調整
した後、除菌濾過した。次いで、アルブミン濃度が25％
となるように調整した後、所定量をバイアルに分注し、
60℃にて10時間加熱処理してアルブミン製剤を得た。
ml当り1.2mlの安定化剤水溶液（100ml中、Ｎ−アセチル
トリプトファン5.55g及びカプリル酸ナトリウム3.89g含
有）を添加し、1N水酸化ナトリウムにてpHを6.85に調整
した後、除菌濾過した。次いで、アルブミン濃度が25％
となるように調整した後、所定量をバイアルに分注し、
60℃にて10時間加熱処理してアルブミン製剤を得た。
得られた本発明製剤中のポリマー含量をゲル濾過分析法
により測定したところ、ポリマーは検出されなかった。
なお、比較として、SP−トヨパールカラム処理工程を除
外した以外は上記製法と実質的に同様にして調製したア
ルブミン製剤（以下、比較製剤という）のポリマー含量
な、アルブミン含量に対して2.49重量％であり、本発明
のアルブミン製剤のポリマー含量は著しく低いものであ
った。なお、ゲル濾過分析は下記の条件にて行った。
により測定したところ、ポリマーは検出されなかった。
なお、比較として、SP−トヨパールカラム処理工程を除
外した以外は上記製法と実質的に同様にして調製したア
ルブミン製剤（以下、比較製剤という）のポリマー含量
な、アルブミン含量に対して2.49重量％であり、本発明
のアルブミン製剤のポリマー含量は著しく低いものであ
った。なお、ゲル濾過分析は下記の条件にて行った。
サンプル：本発明製剤及び比較製剤を、下記の緩衝液
で50倍に希釈し、濾過（フィルター:0.45μｍ）した溶
液を20μ注入した。
で50倍に希釈し、濾過（フィルター:0.45μｍ）した溶
液を20μ注入した。
カラム:TSKgelG3000SW（東ソー社製）を充填したカラ
ム（直径7.8mm×長さ30cm）を使用した。
ム（直径7.8mm×長さ30cm）を使用した。
緩衝液:0.1M KH2PO4/0.3M Nacl（pH6.9） 流速:1ml/分 検出波長：λ＝280nm 装置：ウォーターズHPLCシステム また、得られた本発明製剤及び比較製剤中のα１−酸性
糖蛋白質（α１−AG）、ハプトグロビン（Hp）及びトラ
ンスフェリン（Tf）含量の測定を行い、その結果を第１
表に示す。なお、夾雑蛋白質含量の測定は一元免疫拡散
法（Mancini法:Mancini Gら、Immunochemistry,第２
巻、第３号、第235−254頁、1965年）により行った。こ
の際、用いた抗α１−酸性糖蛋白質血清、抗ハプトグロ
ビン血清及び抗トランスフェリン血清は、ウサギを免疫
動物として常法により調整したものである。これらの抗
血清より作製した一元免疫拡散用ゲルを用い、それぞれ
に対応する夾雑蛋白質に対する沈降輪面積の標準曲線を
第１図〜第３図に示す。
糖蛋白質（α１−AG）、ハプトグロビン（Hp）及びトラ
ンスフェリン（Tf）含量の測定を行い、その結果を第１
表に示す。なお、夾雑蛋白質含量の測定は一元免疫拡散
法（Mancini法:Mancini Gら、Immunochemistry,第２
巻、第３号、第235−254頁、1965年）により行った。こ
の際、用いた抗α１−酸性糖蛋白質血清、抗ハプトグロ
ビン血清及び抗トランスフェリン血清は、ウサギを免疫
動物として常法により調整したものである。これらの抗
血清より作製した一元免疫拡散用ゲルを用い、それぞれ
に対応する夾雑蛋白質に対する沈降輪面積の標準曲線を
第１図〜第３図に示す。
第１表に示されるように、本発明のアルブミン製剤はα
１−AG、Hp及びTfがいずれも検出限界以下であり、夾雑
蛋白質含量の極めて少ないものであることが判明した。
なお、第１図〜第３図から明らかなように、α１−AGの
検出限界は4mg/dlであり、Hpの検出限界は6.5mg/dlであ
り、Tfの検出限界は2mg/dlである。
１−AG、Hp及びTfがいずれも検出限界以下であり、夾雑
蛋白質含量の極めて少ないものであることが判明した。
なお、第１図〜第３図から明らかなように、α１−AGの
検出限界は4mg/dlであり、Hpの検出限界は6.5mg/dlであ
り、Tfの検出限界は2mg/dlである。
実施例２ 実施例１において、（２）の陰イオン交換体処理工程で
の0.8M炭酸水素ナトリウムによるpH調整をpH5.25とする
と共に（３）の陽イオン交換体処理工程のpH調整を5.25
とする以外は、実施例１と同様にして、アルブミン製剤
を調製した。
の0.8M炭酸水素ナトリウムによるpH調整をpH5.25とする
と共に（３）の陽イオン交換体処理工程のpH調整を5.25
とする以外は、実施例１と同様にして、アルブミン製剤
を調製した。
得られたアルブミン製剤について、実施例１と同様な方
法でポリマー含量及び夾雑蛋白質含量を測定した。その
結果、ポリマーは検出限界以下であり、またHp、α１−
AG及びTf含量も検出限界以下であった。
法でポリマー含量及び夾雑蛋白質含量を測定した。その
結果、ポリマーは検出限界以下であり、またHp、α１−
AG及びTf含量も検出限界以下であった。
第１図から第３図は、それぞれα１−酸性糖蛋白質、ハ
プトグロビン及びトランスフェリンに対する一元免疫拡
散法による標準曲線を示すグラフである。
プトグロビン及びトランスフェリンに対する一元免疫拡
散法による標準曲線を示すグラフである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 冨岡 新二 大阪府枚方市招提大谷２丁目1180番地の１ 株式会社ミドリ十字中央研究所内 (72)発明者 横山 和正 大阪府枚方市招提大谷２丁目1180番地の１ 株式会社ミドリ十字中央研究所内 (56)参考文献 特開 昭58−185524（ＪＰ，Ａ) 特開 昭58−90515（ＪＰ，Ａ) 赤堀 四郎 他 編「蛋白質化学３」 （昭和38年）共立出版，Ｐ．363〜367
Claims (3)
- 【請求項１】アルブミン製剤において、ゲル濾過分析法
により測定した擬集体含量が検出限界以下であることを
特徴とするアルブミン製剤。 - 【請求項２】アルブミン製剤において、Mancini法によ
り測定したトランスフェリン含量が検出限界以下である
ことを特徴とするアルブミン製剤。 - 【請求項３】血清アルブミン含有水溶液を陰イオン交換
体処理した後、陽イオン交換体処理し、次いで加熱処理
することを特徴とするアルブミン製剤の製法。
Priority Applications (9)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1153137A JPH0768137B2 (ja) | 1989-06-15 | 1989-06-15 | アルブミン製剤及びその製法 |
| DK90909363.5T DK0428758T3 (da) | 1989-06-15 | 1990-06-15 | Fremgangsmåde til fremstilling af et albuminpræparat |
| CA002033969A CA2033969C (en) | 1989-06-15 | 1990-06-15 | Albumin preparation and process for producing same |
| DE69031974T DE69031974T2 (de) | 1989-06-15 | 1990-06-15 | Verfahren zur herstellung einer albuminzubereitung |
| KR1019910700176A KR100186824B1 (ko) | 1989-06-15 | 1990-06-15 | 알부민 제제 및 이의 제조방법 |
| EP90909363A EP0428758B1 (en) | 1989-06-15 | 1990-06-15 | Method for producing an albumin preparation |
| EP97105247A EP0792887A1 (en) | 1989-06-15 | 1990-06-15 | Albumin preparation |
| PCT/JP1990/000788 WO1990015617A1 (fr) | 1989-06-15 | 1990-06-15 | Preparation de l'albumine et methode pour produire cette derniere |
| ES90909363T ES2111538T3 (es) | 1989-06-15 | 1990-06-15 | Procedimiento para la produccion de una preparacion de albumina. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1153137A JPH0768137B2 (ja) | 1989-06-15 | 1989-06-15 | アルブミン製剤及びその製法 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP11043586A Division JPH11349490A (ja) | 1999-01-11 | 1999-01-11 | アルブミン製剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0317023A JPH0317023A (ja) | 1991-01-25 |
| JPH0768137B2 true JPH0768137B2 (ja) | 1995-07-26 |
Family
ID=15555816
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1153137A Expired - Lifetime JPH0768137B2 (ja) | 1989-06-15 | 1989-06-15 | アルブミン製剤及びその製法 |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (2) | EP0428758B1 (ja) |
| JP (1) | JPH0768137B2 (ja) |
| KR (1) | KR100186824B1 (ja) |
| CA (1) | CA2033969C (ja) |
| DE (1) | DE69031974T2 (ja) |
| DK (1) | DK0428758T3 (ja) |
| ES (1) | ES2111538T3 (ja) |
| WO (1) | WO1990015617A1 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014092727A1 (en) | 2012-12-14 | 2014-06-19 | General Electric Company | Flat reverse osmosis module and system |
| WO2014092725A1 (en) | 2012-12-14 | 2014-06-19 | General Electric Company | Membrane stack filtration module |
Families Citing this family (22)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2949846B2 (ja) * | 1990-11-30 | 1999-09-20 | 吉富製薬株式会社 | アルブミン製剤の保存方法 |
| JPH06501033A (ja) | 1991-07-12 | 1994-01-27 | ギスト ブロカデス ナムローゼ フェンノートシャップ | 血清アルブミンの精製方法 |
| US5849874A (en) * | 1991-07-12 | 1998-12-15 | Gist-Brocades, N.V. | Process for the purification of serum albumin |
| US5440018A (en) * | 1992-05-20 | 1995-08-08 | The Green Cross Corporation | Recombinant human serum albumin, process for producing the same and pharmaceutical preparation containing the same |
| US5521287A (en) * | 1992-05-20 | 1996-05-28 | The Green Cross Corporation | Recombinant human serum albumin, process for producing the same and pharmaceutical preparation containing the same |
| US5728553A (en) * | 1992-09-23 | 1998-03-17 | Delta Biotechnology Limited | High purity albumin and method of producing |
| JPH07126182A (ja) * | 1993-10-27 | 1995-05-16 | Green Cross Corp:The | 組換えヒト血清アルブミン製剤の滅菌方法 |
| JP3702474B2 (ja) | 1994-06-01 | 2005-10-05 | 三菱ウェルファーマ株式会社 | 血清アルブミン製剤の製造方法 |
| GB9902000D0 (en) | 1999-01-30 | 1999-03-17 | Delta Biotechnology Ltd | Process |
| AU2001236005A1 (en) | 2000-02-29 | 2001-09-12 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Preparations stabilized over long time |
| JP4798833B2 (ja) | 2000-10-24 | 2011-10-19 | 一般財団法人化学及血清療法研究所 | 加熱処理工程を含むヒト血清アルブミンの製造方法 |
| JP4798832B2 (ja) * | 2000-10-24 | 2011-10-19 | 一般財団法人化学及血清療法研究所 | ヒト血清アルブミン多量体の除去方法 |
| US7682608B2 (en) | 2001-08-29 | 2010-03-23 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Stabilized preparations containing antibody |
| US8258264B2 (en) | 2003-04-09 | 2012-09-04 | Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute | Process for producing albumin preparation |
| JP2006182649A (ja) * | 2003-04-09 | 2006-07-13 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | アルブミン凝集体及び／または不純蛋白質の除去方法 |
| CN102127164B (zh) | 2010-12-20 | 2013-01-30 | 武汉禾元生物科技有限公司 | 一种从水稻种子中提取重组人血清白蛋白的方法 |
| CN102532254B (zh) | 2010-12-24 | 2015-06-24 | 武汉禾元生物科技股份有限公司 | 一种从水稻种子中分离纯化重组人血清白蛋白的方法 |
| CN103880947B (zh) * | 2012-12-21 | 2016-01-13 | 武汉禾元生物科技股份有限公司 | 一种分离纯化高纯度重组人血清白蛋白的层析方法 |
| JP7302873B2 (ja) * | 2017-03-28 | 2023-07-04 | アドビトス ゲーエムベーハー | 輸送蛋白質含有マルチプルパス透析流体を再生するための新規組成物および方法 |
| US12161777B2 (en) | 2020-07-02 | 2024-12-10 | Davol Inc. | Flowable hemostatic suspension |
| US11739166B2 (en) | 2020-07-02 | 2023-08-29 | Davol Inc. | Reactive polysaccharide-based hemostatic agent |
| CN116744984A (zh) | 2020-12-28 | 2023-09-12 | 达沃有限公司 | 包含蛋白质和多官能化改性的基于聚乙二醇的交联剂的反应性干粉状止血材料 |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE405549B (sv) * | 1975-10-09 | 1978-12-18 | Pharmacia Fine Chemicals Ab | Forfarande for isolering av albumin ur plasmaprodukter genom kromatografisk fraktionering |
| JPS56125310A (en) * | 1980-03-07 | 1981-10-01 | Nippon Seiyaku Kk | Preparation of protein solution consisting essentially of lipoprotein of plasma with high specific gravity and serum albumin |
| JPS5795997A (en) * | 1980-12-08 | 1982-06-15 | Nippon Sekijiyuujishiya | Removal of admixed protein from albumin-containing solution in presence of water-soluble high polymer |
| EP0079739A3 (en) * | 1981-11-12 | 1984-08-08 | The Upjohn Company | Albumin-based nucleotides, their replication and use, and plasmids for use therein |
| JPS58185524A (ja) * | 1982-04-24 | 1983-10-29 | Asahi Chem Ind Co Ltd | 液体クロマトグラフイ−による体液成分の分離方法 |
| FR2543448A1 (fr) * | 1983-04-01 | 1984-10-05 | Rhone Poulenc Spec Chim | Procede de fractionnement du plasma |
| JPS61194027A (ja) * | 1985-02-25 | 1986-08-28 | Asahi Medical Kk | アルブミン製剤の製造法 |
| JP2562576B2 (ja) * | 1985-10-16 | 1996-12-11 | 旭メディカル 株式会社 | アルブミンとグロブリンの分離方法 |
| JPS6288962A (ja) * | 1985-10-16 | 1987-04-23 | Asahi Medical Co Ltd | クロマトグラフイ−によるアルブミンの短時間分離法 |
| JPS6383100A (ja) * | 1986-09-26 | 1988-04-13 | Green Cross Corp:The | ヒト尿中アルブミンの製造方法 |
| JP3554796B2 (ja) * | 1988-10-31 | 2004-08-18 | 三菱ウェルファーマ株式会社 | アルブミン製剤及びその製造方法 |
-
1989
- 1989-06-15 JP JP1153137A patent/JPH0768137B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1990
- 1990-06-15 ES ES90909363T patent/ES2111538T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1990-06-15 EP EP90909363A patent/EP0428758B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-06-15 DE DE69031974T patent/DE69031974T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1990-06-15 EP EP97105247A patent/EP0792887A1/en not_active Withdrawn
- 1990-06-15 CA CA002033969A patent/CA2033969C/en not_active Expired - Fee Related
- 1990-06-15 WO PCT/JP1990/000788 patent/WO1990015617A1/ja not_active Ceased
- 1990-06-15 DK DK90909363.5T patent/DK0428758T3/da active
- 1990-06-15 KR KR1019910700176A patent/KR100186824B1/ko not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 赤堀四郎他編「蛋白質化学３」（昭和３８年）共立出版，Ｐ．３６３〜３６７ |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014092727A1 (en) | 2012-12-14 | 2014-06-19 | General Electric Company | Flat reverse osmosis module and system |
| WO2014092725A1 (en) | 2012-12-14 | 2014-06-19 | General Electric Company | Membrane stack filtration module |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO1990015617A1 (fr) | 1990-12-27 |
| JPH0317023A (ja) | 1991-01-25 |
| DE69031974T2 (de) | 1998-06-04 |
| KR920700043A (ko) | 1992-02-19 |
| CA2033969A1 (en) | 1990-12-16 |
| KR100186824B1 (ko) | 1999-05-01 |
| EP0428758A1 (en) | 1991-05-29 |
| DK0428758T3 (da) | 1998-03-16 |
| DE69031974D1 (de) | 1998-02-26 |
| ES2111538T3 (es) | 1998-03-16 |
| CA2033969C (en) | 2002-10-29 |
| EP0792887A1 (en) | 1997-09-03 |
| EP0428758A4 (en) | 1992-04-15 |
| EP0428758B1 (en) | 1998-01-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR970010923B1 (ko) | 혈장단백질의 크로마토그래피 분리법 | |
| EP0428758B1 (en) | Method for producing an albumin preparation | |
| CA2155630C (en) | Low temperature albumin fractionation using sodium caprylate as a partitioning agent | |
| JP4359347B2 (ja) | 抗体の高収率精製およびウイルス不活性化のためのクロマトグラフイー法 | |
| JP3554796B2 (ja) | アルブミン製剤及びその製造方法 | |
| EP1268551B1 (en) | A METHOD OF PRODUCING IgG | |
| AU2001273907A1 (en) | A method of producing IgG | |
| EP0077870A2 (en) | Process for heat treatment of aqueous solution containing human blood coagulation factor VIII | |
| JPH0580455B2 (ja) | ||
| CA2094347C (en) | A method of producing a factor viii preparation | |
| JP3702474B2 (ja) | 血清アルブミン製剤の製造方法 | |
| JP2931630B2 (ja) | 熱処理された因子▲ｖｉｉｉ▼のゲル▲ろ▼過 | |
| HU204282B (en) | Process for producing albumine-solutions purified with anionic detergent | |
| US5277818A (en) | Albumin preparation and process for preparing the same | |
| JPH0582367B2 (ja) | ||
| JP2001055340A (ja) | アルブミン製剤の製造方法 | |
| JPH04234326A (ja) | アルブミン製剤及びその製法 | |
| CA1335369C (en) | Process for the purification and pasteurization of urokinase | |
| JP2982296B2 (ja) | アルブミン含有水溶液の精製法 | |
| JPH01301625A (ja) | 因子８のゲル濾過法 | |
| JPH11349490A (ja) | アルブミン製剤 | |
| JPH10265407A (ja) | 免疫グロブリン製剤 | |
| JPH01258700A (ja) | 血液凝固第４因子の精製方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080726 Year of fee payment: 13 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090726 Year of fee payment: 14 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |