JPH08507760A

JPH08507760A - ヘルペスウイルスのリボヌクレオチド還元酵素のインヒビター

Info

Publication number: JPH08507760A
Application number: JP6519411A
Authority: JP
Inventors: ロバートデジール; ニールモス
Original assignee: バイオ‐メガベーリンガーインゲルハイムリサーチインコーポレイテッド
Priority date: 1993-03-03
Filing date: 1994-02-28
Publication date: 1996-08-20
Also published as: SG65553A1; FI954048L; FI954048A0; ATE197802T1; BR9406346A; US5476841A; NO953437D0; HUT72894A; AU683450B2; CZ224295A3; EP0618226A1; KR960701090A; PT618226E; DK0618226T3; NZ262073A; WO1994020528A1; CA2157196C; HU9502570D0; LV11037A; GR3035295T3

Abstract

(57)【要約】式 A-B-D-NHCH｛CH₂C(O)R¹｝C(O)-NHCH｛CR²(R³)-COOH｝C(O)-Eのペプチド誘導体が本明細書に開示される。［式中、Ａは二つの置換基を有する低級アルカノイルであり、その夫々の置換基はフェニルまたは一置換フェニルからなる群から独立に選ばれ、一置換基はアルキル、ハロ、ヒドロキシまたはアルコキシであり、ＢはＮ−メチルアミノ酸残基であり、Ｄはアミノ酸残基であり、Ｒ¹はアルキル、シクロアルキル、一置換アミノまたは二置換アミノであり、Ｒ²は水素またはアルキルであり、かつＲ³はアルキルであり、またはＲ²及びＲ³は結合されてシクロアルキルを形成し、かつＥは末端単位、例えば、アルキルアミノまたは一価のアミノ酸基、例えば、ＮＨＣＨ（アルキル）Ｃ（Ｏ）ＯＨである］その誘導体はヘルペス感染症を治療するのに有益である。

Description

【発明の詳細な説明】ヘルペスウイルスのリボヌクレオチド還元酵素のインヒビター発明の分野本発明は抗ウイルス性を有するペプチド誘導体及びこれらの誘導体を使用してウイルス感染症を治療する手段に関する。更に詳しくは、本発明はヘルペスウイルスに対し活性を示すペプチド誘導体（以下、“ペプチド”と称する）、ペプチドを含む医薬組成物、及びペプチドを使用してヘルペスウイルスの複製を抑制し、またヘルペス感染症を治療する方法に関する。発明の背景ヘルペスウイルスはヒト及び動物に対し広範囲の疾患を与える。例えば、単純ヘルペスウイルス、型１及び型２（HSV-1及びHSV-2）は夫々唇ヘルペス及び性器病変の原因である。水疱性口内炎ウイルス（VZV）は水痘及び帯状ヘルペスを生じ、またエプスタイン−バーウイルス（EBV）は感染性単核細胞症を生じる。過去20年にわたって、プリンヌクレオシド類縁体及びピリミジンヌクレオシド類縁体として知られている化合物のクラスが、ヘルペスウイルス感染症の治療用の新規な治療薬に関する研究において研究者らにより最も関心を受けていた。その結果、幾つかのヌクレオシド類縁体が抗ウイルス剤として開発されていた。現在までに最も成功したものは、陰部単純ヘルペス感染症を治療するための特別上等な薬剤であるアシクロビルである。それにもかかわらず、幾つかの有意な進歩にもかかわらず、ヘルペスウイルス感染症を治療するのに有効な、安全な治療薬に対する要望が絶えずある。この分野における現行の治療薬の総説につき、ナハタ（M.C.Nahata），“抗ウイルス薬：薬物速度論、副作用及び治療上の使用”，J.Pharm.Technol.，3，100（1987）を参照のこと。本件出願は、ヘルペスウイルスに対する活性を有する一群のペプチド誘導体を開示する。安全の広い限界と組み合わせて、ヘルペスウイルスに対するこれらのペプチドの選択的作用は、ペプチドをヘルペス感染症を治療するのに望ましい薬剤にする。下記の文献が抗ヘルペス活性と関連していたペプチドまたはペプチド誘導体を開示する。デュチア（B.M.Dutia）ら，Nature，321，439（1986）、コーヘン（E.A.Cohen）ら，Nature，321，441（1986）、スバク−シャープは（J.H.Subak-Sharpe）ら，英国特許出願第2185024号（1987 年、７月８日に公開）、ゴウドリュー（P.Gaudreau）ら，J.Biol.Chem.，262，12413（1987）、コーヘン（E.A.Cohen）ら，米国特許第4,795,740号（1989年、１月３日）、フライディンガー（R.Freidinger）ら，米国特許第4,814,432号（1989年、３月2 1日）、ガースキィ（V.M.Garskey）ら，米国特許第4,837,304号（1989年、６月６日）、コロノ（R.Colonno）ら，米国特許第4,845,195号（1989年、７月４日）、ゴウドリュー（P.Gaudreau）ら，J.Med.Chem.，33，723（1990）、アダムス（J.Adams）ら，欧州特許出願第408,973号（1991年、１月23日に公開）、ビューリュー（P.L.Bealieu）ら，欧州特許出願第411,332号（1991年、２月６日に公開）、アダムス（J.Adams）ら，欧州特許出願第411,333号（1991年、２月６日に公開）、アダムス（J.Adams）ら，欧州特許出願第411,334号（1991年、２月６日に公開）、トルマン（R.L.Tolman）ら，欧州特許出願第412,595号（1991年、２月13日に公開）、アッシュトン（W.T.Ashton）ら，欧州特許出願第438,873号（1991年、７月31日に公開）、ビューリュー（P.L.Bealieu）ら，欧州特許出願第461,546号（1991年、12月18日に公開）、ゴウドリュー（P.Gaudreau）ら，J.Med.Chem.，35，346（1992）、デジール（R.Deziel）及びギンドン（Y.Guindon）、カナダ特許出願第2,033,488 号（1992年、7月１日に公開）、並びにチャン（L.L.Chang）ら，Biorganic＆Medicinal ChemistryLetters，2，1207（1 992）従来の論文の主題ペプチドは、特徴的な構造上の相違及び生物学上の相違により本件出願のペプチドとは区別し得る。以下に使用される略号及び記号は、この出願の“発明の詳細な説明”の項目において定義される。発明の要約本発明のペプチドまたはその治療上許される塩は式１ A-B-D-NHCH｛CH₂C（O）R¹｝C（O）-NHCH｛CR²（R³）C（O）OH｝C（O）-E １により表される。［式中、Ａは二置換低級アルカノイルであり、その置換基の夫々はフェニル及び一置換フェニルからなる群から独立に選ばれ、一置換基は低級アルキル、ハロ、ヒドロキシ及び低級アルコキシからなる群から選ばれ、ＢはN（CH₃）CHR⁴C（O）（式中、Ｒ⁴は低級アルキルである）であり、ＤはNH-CHR⁵C（O）（式中、Ｒ⁵は低級アルキルまたはカルボキシ、ヒドロキシ、メルカプトもしくはベンジルオキシで一置換された低級アルキルである）であり、Ｒ¹は低級アルキル、低級シクロアルキル、｛１−（低級アルキル）−（低級シクロアルキル）｝、またはＮＲ⁶Ｒ⁷（式中、Ｒ⁶は水素または低級アルキルであり、かつＲ⁷は低級アルキルであり、またはＲ⁶及びＲ⁷はそれらが結合されている窒素原子と一緒になってピロリジノ、ピペリジノ、モルホリノまたは４−メチルピペラジノを形成する）であり、Ｒ²は水素または低級アルキルであり、かつＲ³は低級アルキルであり、またはＲ²及びＲ³はそれらが結合されている炭素原子と一緒になって低級シクロアルキルを形成し、かつＥはＮＨＲ⁸（式中、Ｒ⁸は（４−９Ｃ）アルキル；低級シクロアルキル；低級アルキルで一置換または二置換された低級シクロアルキルまたは（低級アルキル） −（低級シクロアルキル）である）であり、またはＥはＮＨＣＨ（Ｒ⁹）−Ｚ（式中、Ｒ⁹は（４−９Ｃ）アルキル、低級シクロアルキルまたは（低級シクロアルキル）−（低級アルキル）であり、かつＺはＣＨ₂ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂またはＣ（Ｏ）ＯＲ¹⁰（式中、Ｒ¹⁰は低級アルキルである）である）である）本発明のペプチドの好ましい群は、Ａがフェニル、４−（低級アルキル）フェニル、４−ハロフェニルまたは４−（低級アルコキシ）フェニルで二置換された低級アルカノイルであり、Ｂが（N-Me）Val、（N-Me）Ileまたは（N-Me）Tbgであり、Ｄが（Ｓ）−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−メチル酪酸または（Ｒ） −２−アミノ−３−メルカプト−３−メチル酪酸のアミノ酸残基またはVal、Ile 及びTbgから選ばれたアミノ酸残基であり、Ｒ¹が低級アルキル、低級シクロアルキル、｛１−（低級アルキル）−（低級シクロアルキル）｝、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ、ピロリジノまたはモルホリノであり、Ｒ²及びＲ³が先に定義されたとおりであり、かつＥがＮＨＲ³（式中、Ｒ⁸は（４−９Ｃ）アルキル；低級シクロアルキル；低級アルキルで一置換または二置換された低級シクロアルキル；または（低級アルキル）−（低級シクロアルキル）である）であり、またはＥがＮＨＣＨ（Ｒ⁹）−Ｚ（式中、Ｒ⁹は（４−９Ｃ）アルキルまたは（低級シクロアルキル）メチルである）であり、かつＺが先に定義されたとおりである式１により表され、またはその治療上許される塩である。ペプチドの更に好ましい群は、Ａが２−（フェニルメチル）−３−フェニルプロピオニル、２−｛（４−フルオロフェニル）−メチル｝−３−（４−フルオロフェニル）プロピオニル、２−｛（４−メトキシフェニル）メチル｝−３−フェニルプロピオニルまたは２−｛（４−メトキシフェニル）メチル｝−３−（４− メトキシフェニル）プロピオニルであり、Ｂが（N-Me）Valまたは（N-Me）Ileであり、ＤがVal、IleまたはTbgであり、Ｒ¹が１−メチルエチル、１，１−ジメチルエチル、１，１−ジメチルプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、１−メチルシクロペンチル、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ、ピロリジノまたはモルホリノであり、Ｒ²が水素であり、かつＲ³がメチル、エチル、１−メチルエチル、１，１−ジメチルエチルまたはプロピルであり、かつＲ²およびＲ³を有する炭素原子が（R）-配置を有し、またはＲ² およびＲ³が夫々独立にメチルまたはエチルであり、またはＲ²およびＲ³がそれらが結合されている炭素原子と一緒になってシクロブチル、シクロペンチルもしくはシクロヘキシルを形成し、かつＥがＮＨＲ⁸（式中、Ｒ⁸は２，２−ジメチルプロピル、１（R），２，２−トリメチルプロピル、１（R）−エチル−２，２− ジメチルプロピル、２，２−ジメチルブチル、３，３−ジメチルブチル、１（R ），２，２−トリメチルブチル、１（R），３，３−トリメチルブチル、１（R） −エチル−３，３−ジメチル、またはシクロヘキシルメチルである）であり、またはＥがＮＨＣＨ（Ｒ⁹）−Ｚ（式中、Ｒ⁹を有する炭素原子は（S）-配置を有し、Ｒ⁹は１，１−ジメチルエチル、１−メチルプロピル、２−メチルプロピル、２，２−ジメチルプロピルまたはシクロヘキシルメチルであり、かつＺはＣＨ₂ ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂またはＣ（Ｏ）ＯＲ¹⁰（式中、Ｒ¹⁰はメチル、エチルまたはプロピルである）である）である式１により表され、またはこれらの治療上許される塩である。ペプチドの最も好ましい群は、Ａが２−（フェニルメチル）−３−フェニルプロピオニルであり、Ｂが（N-Me）Valであり、ＤがTbgであり、Ｒ¹が１−メチルエチル、１，１−ジメチルエチル、１−メチルプロピル、１，１−ジメチルプロピル、２，２−ジメチルプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、１−メチルシクロペンチル、ピロリジノまたはモルホリノであり、Ｒ²が水素であり、かつＲ³がメチル、エチル、１−メチルエチルまたはプロピルであり、かつＲ²およびＲ³を有する炭素原子が（R）-配置を有し、またはＲ²及びＲ³ が夫々独立にメチルまたはエチルであり、またはＲ²及びＲ³がそれらが結合されている炭素原子と一緒になってシクロブチル、シクロペンチルもしくはシクロヘキシルを形成し、かつＥがＮＨＲ⁸（式中、Ｒ⁸は２，２−ジメチルプロピル、１（R），２，２−トリメチルプロピル、１（R）−エチル−２，２−ジメチルプロピル、２，２−ジメチルブチルまたは１（R）−エチル−３，３−ジメチルブチルである）であり、またはＥがＮＨＣＨ（Ｒ⁹）−Ｚ（式中、Ｒ⁹を有する炭素原子は（S）-配置を有し、Ｒ⁹は２，２−ジメチルプロピルであり、かつＺはＣＨ₂ ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂またはＣ（Ｏ）ＯＲ¹⁰（式中、Ｒ¹⁰ はメチル、エチルまたはプロピルである）である）である式１により表され、またはこれらの治療上許される塩である。抗ヘルペスウイルス有効量の式１のペプチド、またはその治療上許される塩、及び医薬もしくは獣医薬上許される担体を含む医薬組成物が本発明の範囲内に含まれる。また、式１のペプチド、またはその治療上許される塩、及び局所適用に適した生理学上許される担体を含む化粧品組成物が本発明の範囲内に含まれる。本発明の重要な局面は、抗ヘルペスウイルス有効量の式１のペプチド、またはその治療上許される塩を哺乳類に投与することによる哺乳類のヘルペスウイルス感染症の治療方法を伴う。別の重要な局面は、ヘルペスウイルスをヘルペスウイルスのリボヌクレオチド還元酵素抑制量の式１のペプチド、またはその治療上許される塩と接触させることによるヘルペスウイルスの複製の抑制方法を伴う。更に別の局面は、抗ヘルペスウイルス有効量の式１のペプチド、またはその治療上許される塩と、抗ウイルスヌクレオシド類縁体の組み合わせを哺乳類に投与することによる哺乳類のヘルペスウイルス感染症の治療方法を伴う。その組み合わせを含む医薬組成物がまた本発明の範囲内にある。式１のペプチドの調製方法が、以下に記載される。発明の詳細な説明全般式１はまた下記のように示される。アミノ酸またはアミノ酸誘導体に関する“残基”という用語は、相当するα− アミノ酸からカルボキシ基のヒドロキシル及びα−アミノ基の一つの水素を脱離することにより誘導された基を意味する。一般に、アミノ酸及び保護基を表示するのに本明細書に使用される略号は生化学命名法のIUPAC-IUBコミッションの推奨に基いている（European Journal ofBi ochemistry 138，9（1984）を参照のこと）。例えば、Val、Ile、Asp及びLeuは夫々L-バリン、L-イソロイシン、L-アスパラギン酸及びL-ロイシンの残基を表す。式１のペプチドの主たる直線軸（即ち、主鎖）中にある不斉炭素原子（末端基Ａ及びＺ（Ｅの）を除くが、Ｅが本明細書で定義されたＮＨＣＨ（Ｒ⁹）−Ｚである場合の“Ｒ⁹”を有する炭素原子を含む）は、Ｓ配置を有する。末端基Ａ中、及びＥが本明細書で定義されたＮＨＲ⁸を表す場合の末端基Ｅ中のアミノ酸または誘導アミノ酸残基の側鎖中にある不斉炭素原子は、Ｓ配置またはＲ配置を有していてもよい。記号“Tbg”は（S）−２−アミノ−３，３−ジメチルブタン酸のアミノ酸残基を表す。記号“γMeLeu”は（S）−２−アミノ−４，４−ジメチルペンタン酸のアミノ酸残基を表す。記号“γMeロイシノール”は、一つの水素がα−アミノ基から除去された（S）−２−アミノ−４，４−ジメチルペンタノールを表す。本明細書に使用されるその他の記号は、（S）−３−メチル-２−（メチルアミノ）−ブタン酸の残基につき（N-Me）Valであり、（S）−３−メチル-２−（メチルアミノ）ペンタン酸の残基につき（N-Me）Ileであり、（S）−２−（メチルアミノ）−３，３−ジメチルブタン酸の残基につき（N-Me）Tbgであり、（S）− α−アミノ−１−カルボキシシクロブタン酢酸の残基につきAsp（cyBu）であり、（S）−α−アミノ−１−カルボキシシクロペンタン酢酸の残基につきAsp（cy Pn）であり、また３−（R）−メチル−Ｌ−アスパラギン酸（即ち、｛S-（R^*,S^* ）｝−２−アミノ−３−メチルブタン二酸）の残基につきAsp｛（R）-Me｝である。本明細書に使用される“ハロ”という用語は、ブロモ、クロロ、フルオロまたはヨードから選ばれたハロ基を意味する。本明細書に使用される“低級アルカノイル”という用語は、２〜６個の炭素原子を含む直鎖１−オキソアルキルまたは４〜６個の炭素原子を含む分岐鎖１−オキソアルキル、例えば、アセチル、プロピオニル（１−オキソプロピル）及び２ −メチル−１−オキソプロピルを意味する。本明細書に使用される“（４−９Ｃ）アルキル”という用語は、４〜９個の炭素原子を含む直鎖アルキル基及び分岐鎖アルキル基を意味し、例えば、１−メチルプロピル、２−メチルプロピル、２，２−ジメチルプロピル、１，２，２−トリメチルプロピル、３，３−ジメチルブチル、１−エチル−２，２−ジメチルブチル及び４，４−ジメチルペンチルが挙げられる。本明細書に単独で、またはその他の基と組み合わせて使用される“低級アルキル”という用語は、１〜６個の炭素原子を含む直鎖アルキル基及び３〜６個の炭素原子を含む分岐鎖アルキル基を意味し、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ヘキシル、１−メチルエチル、１−メチルプロピル、２−メチルプロピル及び１，１−ジメチルエチルが挙げられる。本明細書に使用される“｛１−（低級アルキル）−（低級シクロアルキル）｝ ”という用語は、１位に低級アルキル置換基を有する低級シクロアルキル基、例えば、１−エチルシクロプロピル、１−プロピルシクロペンチル及び１−プロピルシクロヘキシルを意味する。本明細書に単独で、またはその他の基と組み合わせて使用される“低級シクロアルキル”という用語は、３〜６個の炭素原子を含む飽和環状炭化水素基を意味し、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルが挙げられる。本明細書に使用される“低級アルコキシ”という用語は、１〜４個の炭素原子を含む直鎖アルコキシ基及び３〜４個の炭素原子を含む分岐鎖アルコキシ基を意味し、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、１−メチルエトキシ、ブトキシ及び１，１−ジメチルエトキシが挙げられる。後者の基はtert−ブトキシとして普通知られている。本明細書に使用される“医薬上許される担体”または“獣医薬上許される担体 ”という用語は、活性成分に悪影響しない活性成分の無毒性の、一般に不活性なビヒクルを意味する。本明細書に使用される“生理学上許される担体”という用語は、その中に含まれる活性成分と反応せず、またはその有効性を低下しない一種以上の無毒性の賦形剤の許される化粧品ビヒクルを意味する。本明細書に使用される“獣医薬上許される担体”という用語は、薬物と反応せず、またはその有効性を低下しない一種以上の無毒性の医薬上許される賦形剤を含む、薬物を家畜動物に投与するための生理学上許されるビヒクルを意味する。 “有効量”という用語は、抗ウイルス剤の前もって決めた抗ウイルス量、即ち、生体内のウイルス生物に対し有効であるのに充分な薬剤の量を意味する。本明細書に使用される“カップリング剤”という用語は、アミノ酸またはペプチド遊離カルボキシ基と別のアミノ酸またはペプチドの遊離アミノ基の脱水カップリングを行って反応体間にアミド結合を形成できる薬剤を意味する。同様に、このような薬剤は酸とアルコールのカップリングを行って相当するエステルを生成し得る。これらの薬剤はカルボキシ基を活性化することにより脱水カップリングを促進し、また容易にする。このようなカップリング基及び活性化された基の記載がペプチド化学の一般の書籍、例えば、E.Schroder及びK.L.Lubke，“ペプチド”，１巻，Academic Press，ニューヨーク，N.Y.，1965，2-128頁、並びにK .D.Kopple，“ペプチド及びアミノ酸”，W.A.Benjamin，Inc.，ニューヨーク，N .Y.，1966，33-51頁に含まれる。カップリング剤の例は、ジフェニルホスホリルアジド、１，１’−カルボニルジイミダゾール、ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、またはジシクロヘキシルカルボジイミドの存在下の１−ヒドロキシベンゾトリアゾールである。非常に実用的かつ有益なカップリング剤は、単独または１−ヒドロキシベンゾトリアゾールの存在下の（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（B.Castroら，Tetrahedron Letters，1219（1975）に記載されており、また、D.Hudson，J.Org.Chem.，53，617（1988）を参照のこと）である。更に別の非常に実用的かつ有益なカップリング剤は、市販の２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール-１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレートである。方法式１のペプチドは、アミノ酸残基及び／またはペプチドフラグメントの古典的溶液カップリングの如きペプチド合成に普通使用される方法をその中に含む方法により調製し得る。このような方法が、例えば、上記のE.Schroder及びK.Lubke により一連の書籍、“ペプチド：分析、合成、生物学”，E.Grossら編集，Aca-d emic Press，ニューヨーク，N.Y.，1979-1987，１巻〜８巻に記載され、またJ.M .Stewart及びJ.D.Youngにより“固相ペプチド合成”，第２編，PierceChem.Co. ，ロックフォード，IL，USA，1984に記載されている。ペプチドの上記の方法の共通の特徴は、保護基が最終的に除去されるまでその部位に起こる化学反応を阻止する適当な保護基による種々のアミノ酸残基または誘導アミノ酸残基（または、必要により、ペプチドの非ペプチドフラグメント）の反応性側鎖基の保護である。また、その物がカルボキシ基と反応する間のアミノ酸またはフラグメントのα−アミノ基の保護、続いてその後の反応をその位置で行わせるためのα−アミノ保護基の選択的除去が共通している。別の共通の特徴は、ペプチドの所望の配列が構築された後に保護基が除去されるまで化学反応がその部位で起こることを阻止する適当な保護基によるアミノ酸残基または存在する場合のペプチドフラグメントのＣ末端カルボキシル（これはペプチドのＣ末端官能基になるべきである）の初期の保護である。それ故、一般に、式１のペプチドは、適当なアミノ酸残基または誘導アミノ酸残基と、ペプチドの非ペプチドフラグメント（例えば、主要な中間体）（これらは必要により適当に保護される）のペプチドの配列の順序の段階的カップリング、そして段階的カップリングの完結時に存在する全ての保護基を除去して式１のペプチドを得ることにより調製し得る。更に特別な方法が以下の実施例に説明される。殆どの中間体及びそれらの調製方法が、1991年２月６日に公開されたJ.Adams らの欧州特許出願第411332号、1991年２月６日に公開されたJ.Adamsらの欧州特許出願第411,334号及び1992年７月１日に公開されたR.Deziel及びY.Guidonのカナダ特許出願第2,033,448号により記載されている。本発明のペプチドのＮ末端の形成に必要とされる、フェニルまたは一置換フェニルにより二置換された低級アルカン酸が知られており、また既知の方法により調製し得る。例えば、L.L.Changら，Bioorganic＆Medicinal Chemistry Lette-r s，2，1207（1992）を参照のこと。ジベンジル酢酸がM.R.Dolique，Ann.Chim.（ Paris），15（10），425（1931）並びにF.Krollpfeiffer及びA.Rosenberg,Chem. Ber.，69，465（1936）により記載されている。本発明の式１のペプチドは治療上許される塩の形態で得られる。特別なペプチドが塩基として作用する残基を有する場合、このような塩基の塩の例は有機酸、例えば、酢酸、乳酸、コハク酸、メタンスルホン酸またはｐ−トルエンスルホン酸だけでなく、ポリマー酸、例えば、タンニン酸またはカルボキシメチルセルロースとの塩であり、また無機酸、例えば、ハロゲン水素酸、例えば、塩酸、もしくは硫酸、またはリン酸との塩である。所望により、特別な酸付加塩がR.A.Boi- ssonnasら，Helv.Chim.Acta，43，1849（1960）により記載された方法で適当なイオン交換樹脂による処理により別の酸付加塩、例えば、無毒性の医薬上許される塩に変換される。特別なペプチドが一つ以上の遊離カルボキシ基を有する場合、カルボキシ基のこのような塩の例はナトリウム、カリウムまたはカルシウム陽イオンとの塩、または有機塩基、例えば、トリエチルアミンもしくはＮ−メチルモルホリンとの塩である。抗ヘルペス活性式１のペプチドの抗ウイルス活性は、単純ヘルペスウイルス、型１及び型２（ HSV-1及びHSV-2）、並びにその他のヘルペスウイルス、例えば、水痘帯状疱疹ヘルペスウイルス（VZV）及びエプスタインーバーウイルス（EBV）の複製に関する化合物の抑制効果を示す生化学的方法、微生物学的方法及び生物学的方法により実証し得る。以下の実施例において、ヘルペスリボヌクレオチド還元酵素に対する抑制効果が式１の例示ペプチドにつき観察される。ヘルペスリボヌクレオチド還元酵素のこの特別な抑制に関連して、正常細胞複製に必要とされる細胞リボヌクレオチド還元酵素活性に対するペプチドの比較的小さい効果またはこのような効果の不在が注目に値する。ウイルス複製に対する式１のペプチドの抑制効果を実証する方法は細胞培養技術である。例えば、1992年７月１日に公開されたR.Deziel及びY.Guindonのカナダ特許出願第2,033,488号を参照のこと。ペプチドの治療効果は、例えば、C.R.Brandtら，J.Virol.Meth.，36，209（19 92）により記載された抗ウイルス薬試験のための単純ヘルペスウイルス誘発眼疾患のマウスモデルに基くアッセイを使用することにより実験動物で実証し得る。本発明のペプチド、またはその治療上許される塩の一種が抗ウイルス剤として使用される場合、それは一種以上の医薬上許される担体を含むビヒクル中で温血動物、例えば、ヒト、ブタまたはウマに局所または全身に投与され、その比率はペプチドの溶解性及び化学的性質、投与の選択された経路及び通常の生物学的慣例により決められる。局所投与につき、ペプチドは0.1〜５％、好ましくは0.5〜２％の活性薬剤を含む医薬上許されるビヒクル中で製剤化し得る。このような製剤は溶液、クリームまたはローションの形態であってもよい。全身投与につき、式１のペプチドは医薬上許されるビヒクルまたは担体を含む組成物中で静脈内注射、皮下注射または筋肉内注射により投与される。注射による投与につき、無菌の水性ビヒクル（これはまたその他の溶質、例えば、緩衝剤または防腐剤だけでなくその溶液を等張性にするのに充分な量の医薬上許される塩またはグルコースを含んでいてもよい）中でペプチドを溶液で使用することが好ましい。上記の製剤に適したビヒクルまたは担体が通常の医薬の書籍、例えば、“レミントンの医薬科学”，第18編，マック・パブリッシング社，イーストン，ペンシルバニア州，1990に記載されている。ペプチドの投薬量は投与の形態及び選択された特別な活性薬剤により変化するであろう。更に、それは治療中の特別な宿主により変化するであろう。一般に、治療は、状況下の最適効果に達するまで小さい増分で開始される。一般に、ペプチドは一般に有害または有毒な副作用を生じないで抗ウイルス有効な結果を与える濃度レベルで投与されることが最も望ましい。局所投与に関して、ペプチドは、感染領域を覆うのに充分な量で、生体の感染領域、例えば、口腔または生殖腔の皮膚または一部に適当な局所製剤中で皮膚投与される。その治療は、病変が治癒するまで、例えば、４〜６時間毎に繰り返されるべきである。全身投与に関して、式１のペプチドは毎日体重１キログラム当たり10μg〜500 μgの投薬量で投与されるが、上記の変化が生じるであろう。しかしながら、毎日体重１キログラム当たり約10μg〜200μgの範囲である投薬量レベルが有効な結果を得るために使用されることが最も望ましい。本発明の別の局面は、生理学上許される化粧品担体と一緒に、ヘルペスウイルス予防量の式１のペプチド、またはその治療上許される塩を含む化粧品組成物を含む。付加的な成分、例えば、皮膚軟化剤が製剤中に含まれていてもよい。本発明の化粧品組成物は皮膚のヘルペス病変の発生を阻止するために予防上使用される。製剤は皮膚の感受性領域に夜に適用し得る。一般に、化粧品組成物は局所適用につき相当する医薬組成物よりも少ないペプチドを含む。化粧品組成物中のペプチドの量の好ましい範囲は0.01〜0.2重量％である。以上に開示された製剤はヘルペスウイルス感染症を治療するのに有効かつ比較的安全な医薬であることが示されるが、その他の抗ウイルス薬または薬剤とこれらの製剤の可能な同時の投与が排除されない。このようなその他の抗ウイルス薬または薬剤として、抗ウイルスヌクレオシド、例えば、アシクロビル、及び抗ウイルス表面活性剤または抗ウイルスインターフェロン、例えば、S.S.Asculai及びF.Rappにより米国特許第4,507,281号（1985年３月26日）に記載されたものが挙げられる。更に詳しくは、同時投与によりヘルペスウイルス感染症を治療することに関して、抗ウイルスヌクレオシド類縁体の抗ヘルペス活性は、それを式１のペプチドと組み合わせることにより、毒性作用を同時に増進しないで、相乗効果により増進し得ることがわかった。それ故、医薬上または獣医薬上許される担体と、有効量の抗ウイルスヌクレオシド類縁体またはその治療上許される塩と、式１のリボヌクレオチド還元酵素抑制ペプチドまたはその治療上許される塩の組み合わせとを含む哺乳類のヘルペス感染症を治療するための医薬組成物がここに提供される。また、哺乳類のヘルペスウイルス感染症を治療する方法がここに提供される。その方法は哺乳類に抗ヘルペスウイルス有効量の式１の化合物またはその治療上許される塩と、抗ウイルスヌクレオシド類縁体またはその治療上許される塩の組み合わせを投与することを含む。その組み合わせに使用される抗ウイルスヌクレオシド類縁体は、ヘルペスDNA ポリメラーゼ及び／またはそのオルタナティブ基質のウイルスDNAポリメラーゼインヒビターに酵素により（生体内で）変換し得るものである。抗ウイルスヌクレオシド類縁体は既知のヌクレオシド類縁体から選択し得る。本発明の好ましいヌクレオシド類縁体として、アシクロビル及びその類縁体、例えば、式２の化合物（式中、Ｒ¹¹は水素、ヒドロキシまたはアミノである）、またはその治療上許される塩が挙げられる。（Ｒ¹¹がヒドロキシである式２がアシクロビルを表す）。本発明による使用のためのその他の好ましい抗ウイルスヌクレオシド類縁体として、ビダラビン、イドクスリジン、トリフルリジン、ガンシクロビル、エドクスジン、ブロバビル、フィアシタビン、ペンシクロビル、ファムシクロビル及びロシクロビルが挙げられる。ヌクレオシド類縁体と式１のペプチドの上記の特定の組み合わせの抗ウイルス活性または抗ヘルペス活性に関して使用される場合の“相乗効果”という用語はその組み合わせの２種の個々の成分の予想の加法的効果よりも大きい抗ウイルス効果または抗ヘルペス効果を意味する。ヘルペス感染症を治療するために本発明の組み合わせを使用する場合、その組み合わせは、一種以上の医薬上許される担体を含むビヒクル中で温血動物、例えば、ヒト、ブタまたはウマに投与され、その比率はヌクレオシド類縁体及び式１のペプチドの溶解性及び化学的性質、選択された投与の経路、通常の生物学的慣例により、また２種の活性成分の相対量により決められて相乗の抗ウイルス効果を与える。その組み合わせは局所投与されることが好ましい。例えば、２種の活性薬剤（即ち、抗ウイルスヌクレオシド類縁体及び式１のペプチド、またはそれらの治療上許される塩）が医薬上許されるビヒクル中の溶液、エマルション、クリーム、またはローションの形態で製剤化し得る。このような製剤は0.01−1.0 重量％のヌクレオシド類縁体、またはその治療上許される塩、及び約0.05〜１重量％の式１のペプチド、またはその治療上許される塩を含み得る。いずれにしても、２種の活性薬剤が相乗の抗ヘルペス効果を与える量で医薬組成物中に存在する。下記の実施例は本発明を更に説明する。温度は摂氏で示される。溶液の％または比率は、特にことわらない限り、容積と容積の関係を表す。核磁気共鳴スペクトルはブルカー200または400MHzスペクトルメーターで記録された（400MHzスペクトルは前文に特記される）。化学シフト（δ）はppmで報告される。実施例に使用される略号として、Boc：tert-ブチルオキシカルボニル；Bzl：ベンジル；E tOH：エタノール；EtOAc：酢酸エチル；Et₂O：ジエチルエーテル；HPLC：高性能液体クロマトグラフィー；MeOH：メタノール；THF：テトラヒドロフランが挙げられる。実施例１カップリング反応のための全般の操作｛また、R.Knorrら，Tetrahedron Letters，30，1927（1989）を参照のこと｝第一反応体、即ち、遊離アミン（またはその塩酸塩）をCH₂Cl₂またはアセトニトリルに溶解し、その溶液を４℃に冷却する。窒素雰囲気下で、４当量のＮ−メチルモルホリンをその攪拌溶液に添加する。20分後に、１当量の第二反応体、即ち、遊離カルボン酸、及び1.05当量のカップリング剤を添加する（この目的に実用的かつ有効なカップリング剤は（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリス−（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートまたは好ましくは２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレートである）。その反応をTLCにより監視する。その反応の完結後に、CH₂Cl₂（またはアセトニトリル）を減圧で蒸発させる。残渣をEtOAcに溶解する。その溶液を1Nのクエン酸水溶液、10％のNa₂CO₃ 水溶液及び食塩水で連続して洗浄する。有機相を乾燥させ（MgSO₄）、濾過し、減圧で濃縮、乾燥させる。残渣をスチルのフラッシュクロマトグラフィー技術｛ W.C.Stillら，J.Org.Chem.，43，2923（1978）｝に従ってシリカゲル（SiO₂）で精製する。実施例２中間体H-Asp（cyPn）（Bzl）-NH-（S）-CH｛CH₂C（CH₃ ） ₃｝CH₂OBzlの調製（a）（S）−α−アジド−１−｛（フェニルメトキシ）カルボニル｝−シクロペンタン酢酸：この化合物をエバンス補助物質（D.A.Evansら，J.Amer.Chem.Soc. ，112，4011（1990）を参照のこと）を使用する非対称アジド化方法に従って、M .N.Aboul-Eneinら，Pharm.ActaHelv.，55，50（1980）に記載された２−オキソスピロ［４．４］ノナン−１，３−ジオンから調製した。更に詳しくは、ブチルリチウムの1.6Mのヘキサン溶液（469ml、750ミリモル）をアルゴン雰囲気下で乾燥THF中のキラル補助物質、４（S）−（１−メチルエチル）−２−オキサゾリジノン｛96.8g、750ミリモル、L.N.Pridgen及びJ.Prol.， J.Org.Chem，54，3231（1989）により記載されている｝の溶液に-40℃で滴下して添加した。その混合物を-40℃で30分間攪拌し、次いで-78℃に冷却した。２− オキソスピロ［４．４］ノナン−１，３−ジオンをその冷却混合物に滴下して添加した。次いでその混合物を０℃で１時間攪拌した。その後、クエン酸の20％水溶液（w/v）（600ml）をその混合物に添加した。有機相を分離し、水相をEtOAc で抽出した。合わせた有機相を食塩水で洗浄し、乾燥させ（MgSO₄）、減圧で濃縮して３−｛２−（１−カルボキシ−シクロペンチル）−１−オキソエチル）｝ −４（S）−（１−メチルエチル）−２−オキサゾリジノンをピンク色の固体（3 00g）として得た。最後の固体（約750ミリモル）をアセトニトリル（１リットル）に溶解した。臭化ベンジル（128.3g、89.2ml、750ミリモル）及び１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］−ウンデカ−７−エン（114g、112ml、750ミリモル）をその溶液に添加した。その混合物をアルゴン雰囲気下で16時間攪拌した。揮発物を減圧で除去した。残渣をH₂O/EtOAcに溶解した。有機相を分離し、クエン酸の10％（w/v ）水溶液、食塩水で洗浄し、乾燥させ（MgSO₄）、減圧で濃縮、乾燥させて油を得た。その油をヘキサン/EtOAcで結晶化して相当するベンジルエステルを白色の固体として得た（204g、73％）。乾燥THF（200ml）中のこの化合物（70g、187ミリモル）の溶液を-78℃に冷却した。６％（w/v）のクメンを含むカリウム１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザンの0.66MのTHF溶液（286ml、189ミリモル）をその冷却溶液に15分間の期間にわたって添加した。その混合物を-78℃で45分間攪拌した。乾燥THF（ 100ml）中の２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホニルアジド（67g、21 6ミリモル）の溶液をその冷却混合物に一度に添加し、続いて２分後に氷酢酸（5 0ml、860ミリモル）を添加した。その混合物を温め、35〜45℃で１時間攪拌した。揮発物を減圧で除去した。黄色の残渣をヘキサン/EtOH（4:l、1.7リットル）ですり砕いた。得られる白色の固体をフィルターで回収した。濾液をSiO₂（230 〜240メッシュ）と混合した。揮発物を減圧で除去し、残留固体を減圧で35℃で乾燥させてクメンを除去した。次いで残留固体をSiO₂のカラムに入れた。残留固体及びSiO₂をヘキサン／EtOAc、9:1で溶離し、溶離液を濃縮して３−｛｛２（S ）−アジド−１−オキソ−２−｛１−｛（フェニルメトキシ）−カルボニル｝シクロペンチル｝−エチル｝−４（S）−（１−メチルエチル）−２−オキサゾリジノン（66g、86％）を得た。 THF/H₂O（3:1、608ml）中のこの化合物（13.42g、32.4ミリモル）の溶液を０ ℃に冷却した。過酸化水素/H₂O（3:7、16.3ml、H₂O₂518ミリモル）をその冷却溶液に添加し、続いてLiOH・H₂O（2.86g、68.2ミリモル）を添加した。その混合物を０℃で45分間攪拌し、次いで亜硫酸ナトリウムの10％（w/v）の水溶液（400ml ）で反応を停止した。NaHCO₃（1.93g）を添加した後、その混合物を減圧で濃縮した。キラル補助物質を20時間にわたって連続抽出（NaHCO₃水溶液／クロロホルム）により回収した。その後、水相を０℃に冷却し、濃HClの添加により酸性にし、次いでEtOAcで抽出した。抽出物を食塩水で洗浄し、乾燥させ（MgSO₄）、減圧で濃縮して所望の化合物を白色の固体（8.2g、84％）として得た。その化合物の¹H NMR（CDCl₃）は、δ1.6-1.8（m，5H），1.95-2.05（m，2H），2.20-2.30（ m，1H），4.55（s，1H），5.12（s，2H）及び7.4（m，5H）を示した。その化合物をこの実施例の項目（c）に使用する。（b）NH₂−（S）−CH｛CH₂C（CH₃）₃｝CH₂OBzl：H-γMeLeu-OHをA.Giannis及びK .Sandhoff，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，28，218（1989）の方法に従ってLiBH₄/M e₃SiClで還元してアミノアルコールNH₂−（S）−CH｛CH₂C（CH₃）₃｝CH₂OHを得た。乾燥THF（15ml）中のこの化合物（812mg、6.2ミリモル）、トリエチルアミン（659mg、6.51ミリモル）及びジ−tert−ブチルジカーボネート（1.42g、6.51 ミリモル）の混合物を窒素雰囲気下で４℃で15分間攪拌し、次いで室温で４時間攪拌した。THFを減圧で蒸発させた。残渣をEtOAcに溶解した。その溶液を10％のクエン酸水溶液、５％のNaHCO₃水溶液そして食塩水で洗浄した。有機相を乾燥させ（MgSO₄）、減圧で濃縮、乾燥させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（SiO₂、溶離剤：ヘキサン-EtOAc、2:1）により精製してBoc-NH−（S）−CH｛CH₂ C（CH₃）₃｝CH₂OH（1.23g、86％）を得た。硫酸水素テトラブチルアンモニウム（106mg）及び50％のNaOH水溶液（3ml）を塩化ベンジル（13ml）中のBoc-NH−（S）−CH｛CH₂C（CH₃）₃｝CH₂OH（1.23g、5 .35ミリモル）の溶液に連続して添加した。得られる混合物を35〜40℃で90分間攪拌し、EtOAcで希釈し、H₂Oそして食塩水で洗浄した。有機相を乾燥させ（MgSO₄ ）、揮発物を減圧で除去した。残渣をヘキサンに溶解した。その溶液をSiO₂のカラムに注入した。カラムをヘキサンで溶離して塩化ベンジルを除去し、次いでヘキサン-EtOAc（2:1）で溶離してBoc-NH−（S）−CH｛CH₂C（CH₃）₃｝CH₂OBzl を得た。この化合物の¹H NMR（CDCl₃）はδ0.95（s，9H），1.42（s，9H），1.3 0-1.55（m，2H），3.42（d，J=4Hz，2H），3.88（ブロード，1H），4.54（m，3H ），7.23-7.4（m，5H）を示した。この化合物（1.28g、3.99ミリモル）を6NのHC l/ジオキサン（10ml）に溶解した。その溶液を窒素雰囲気下で4℃で45分間攪拌した。溶媒を除去して所望の化合物の塩酸塩（1.05g）を得た。その化合物を更に精製しないでこの実施例の次の項目に使用する。（c）この実施例の標題化合物：先の項目のNH₂−（S）−CH｛CH₂C（CH₃）₃｝CH₂ OBzlの塩化水素塩を第一反応体として使用し、そしてこの実施例の項目（a）の（S）−α−アジド−１−｛（フェニルメトキシ）カルボニル｝シクロペンタン酢酸を第二反応体として使用して実施例１のカップリング操作に従うことにより、Ｎ−｛（S）−１−ベンジルオキシメチル−３，３−ジメチルブチル｝−（S） −α−アジド−１−｛（フェニルメトキシ）カルボニル｝シクロペンタンアセトアミドを得た。この化合物をN.Maitiら，Tetrahedron Letters，27，1423（1986 ）の方法に従って塩化スズ（II）で還元してこの実施例の標題化合物を得た。その化合物の¹H NMR（CDCl₃）はδ0.98（s，9H），1.22-2.25（m，12H），3.4（d ，J=4Hz，2H），3.64（s，1H），4.18（ブロードm，1H），4.52（s，2H），5.12 （s，2H），7.18（d，J=7Hz，1H），7.22-7.38（ブロードm，10H）を示した。実施例３（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp（cyPn）-γMe ロイシノール（式１、A=２−（フェニルメチル）−３−フェニルプロピオニル、 B=N-Me-VaL、D=Tbg、Ｒ¹＝ピロリジノ、Ｒ²及びＲ³はそれらが結合されている炭素原子と一緒になってシクロペンチルを形成し、かつE=NHCH（R⁹）-Z（式中、Ｒ ⁹は２，２−ジメチルプロピルであり、かつZ=CH₂OH））の調製 a）中間体Boc-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp（cyPn）（Bzl）-NH-（ S）-CH｛CH₂C（CH₃）₃｝CH₂OBzlの調製：実施例１のカップリング操作に従うことにより、実施例２の標題化合物（第一反応体）を1991年12月18日に公開された P.L.Beaulieuらの欧州特許出願第461,546号により記載されたBoc-Asp（ピロリジノ）-OH（第二反応体）とカップリングさせてBoc-Asp（ピロリジノ）-Asp（cyPn ）-NH-（S）-CH｛CH₂C（CH₃）₃｝CH₂OBzlを得た。順に、この化合物を脱保護し（6NのHCl/ジオキサン、45分、４℃）、同様の条件下でBoc-Tbg-OHとカップリングさせてBoc-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp（cyPn）-NH-（S）-CH｛CH₂C（CH₃）₃ ｝CH₂OBzlを得た。続いてこの化合物のBoc保護基を除去して（6NのHCl/ジオキサン、４℃、45分間）相当する遊離Ｎ−末端アミノ誘導体をその相当する塩酸付加塩の形態で得た。その後、このアミノ誘導体を同様の条件下でBoc-（N-Me）-Val -OHとカップリングさせて所望の中間体を得た。 b）標題化合物の調製：先の項目（a）の生成物を6NのHCl/ジオキサン中でその相当する遊離Ｎ−末端アミノ誘導体に変換した（４℃、45分間）。そのアミノ誘導体の塩酸付加塩（447mg、0.490ミリモル）をCH₂Cl₂（1.5ml）に溶解した。窒素の雰囲気下で、Ｎ−メチルモルホリン（200μl、1.83ミリモル）及びジベンジルアセチルクロリド（269mg、1.04ミリモル）をその溶液に添加した。その混合物を室温で７時間攪拌した。その後、揮発物を減圧で蒸発させた。残渣をEtOAcに溶解した。その溶液を1NのHCl水溶液、NaHCO₃の飽和水溶液そして食塩水で連続して洗浄し、乾燥させ（MgSO₄）、減圧で濃縮した。残渣をEtOH（5ml）に溶解した。その溶液を10％（w/w）のPd（OH）₂/C（100mg）の存在下で水素（１気圧）のもとに22時間攪拌（磁気）した。触媒をフィルターで回収し、濾液を濃縮、乾燥させた。残渣をアセトニトリル及びH₂Oの勾配（溶媒の夫々が0.06％のトリフルオロ酢酸を含む）を使用してC-18逆相カラムによるHPLCにより精製して標題化合物を白色の固体（220mg）として得た。¹H NMR（DMSO-d₆、400MHz、この化合物はDMSO中で回転異性体の4:1混合物として存在することに注目されたい）δ0.16 （d，J=6.5Hz，0.6H），0.22（d，J=6.5Hz，2.4H），0.71（d，J=6.5Hz，2.4H），0.75（d，J=6.5Hz，0.6H），0.80（s，1.8H），0.82（s，7.2H），0.87（s，9 H），1.40-1.55（m，7H），1.65-2.00（m，8H），2.52-3.90（m，13H），2.70（ s，2.4H），2.89（s，0.6H），4.21（d，J=9.5Hz，0.8H），4.34（d，J=9.5Hz， 0.2H），4.43（d，J=11Hz，少量の回転異性体からのシグナルと重なる、1H），4 .65-4.73（m，1H），4.82（d，J=10Hz，少量の回転異性体からのシグナルと重なる、1H），7.04-7.40（m，10.8H），7.57（d，J=8.5Hz，1H），8.01（d，J=10Hz ，少量の回転異性体からのシグナルと重なる、1H），8.25（d，J=9.5Hz，0.2H），8.30（d，J=7.5Hz，0.8H），8.51（d，J=7.5Hz，0.2H）；FAB質量スペクトル/ m/Z：939（M＋Na）⁺ 実施例４式１のペプチドのＣ末端の形成のための幾つかの代表的な中間体の調製（a）NH₂-（R）-CH（C₂H₅）C（CH₃）₃：乾燥ベンゼン（１リットル）中の４，４ −ジメチル−３−ペンタノン（106g、0.928モル）、トリエチルアミン（513ml、 3.68モル）、及び（R）-α−メチルベンジルアミン（114g、0.940モル）の冷却溶液（０℃）に、ベンゼン（200ml）中のTiCl₄（50.5ml、0.459モル）の溶液を、その混合物の温度を10℃以下の温度に保つような速度で添加した。その後、その混合物を40℃で３時間にわたって磁気攪拌し、室温に冷却し、ケイソウ土で濾過した。そのケイソウ土をEt₂Oで洗浄した。合わせた濾液及び洗浄液を濃縮した。残渣を乾燥MeOH（２リットル）に溶解した。その溶液を０℃に冷却し、混合物の温度を５℃以下に保ちながらNaBH₄（20g、0.53モル）を滴下して添加した。10％のHC l水溶液約2mlを添加し、MeOHを蒸発させた。残渣をEt₂Oに溶解した。その溶液を食塩水で洗浄し、乾燥させ（MgSO₄）、蒸発、乾燥させて赤みを帯びた油（NMRにより示されるようにジアステレオマーの18:1の混合物）を得た。その油をフラッシュクロマトグラフィー（SiO₂、溶離剤：EtOAc/ヘキサン、7:93）により精製してＮ−（１（R）−フエニルエチル）−１（R）−エチル−２，２−ジメチルプロピルアミンを液体（110g、54％）として得た。この物質をヘキサン（1.5リットル）に溶解した。ジオキサン（90ml）中の6NのHClを15分間の期間にわたってその溶液に添加した。得られる白色の固体をフィルターで回収し、次いでヘキサンで洗浄してＮ−（１（R）−フェニルエチル）−１（R）−エチル−２，２−ジメチルプロピル塩酸塩（125g、97％）を得た。¹H NMR（CDCl₃）δ0.55（t，J=7.5H z，3H），1.14（s，9H），1.54-1.95（m，2H），2.23（d，J=6.5Hz，3H），2.36 -2.44（m，1H），4.31-4.49（m，1H），7.30-7.48（m，3H），7.74-7.79（m，2H ） MeOH（120ml）中のこの化合物（41.5g）の溶液を10％（w/w）のPd/C（4.0g）と混合し、その混合物をパール水素発生装置で50psiの水素のもとに室温で48時間にわたって振とうした。その混合物を濾過し、濾液を濃縮して所望のNH₂-（R ）-CH（C₂H₅）C（CH₃）₃をその塩酸付加塩の形態で白色の固体（25g、100％）として得た。¹H NMR（CDCl₃）δ1.10（s，9H），1.22（t，J=7Hz，2H），1.58-l.9 0（m，2H），2.70-2.85（m，1H），8.10-8.40（ブロードs，3H）先の操作において４，４−ジメチル−３−ペンタノンを３，３−ジメチル−２ −ブタノンで置換した以外は同様にして、NH₂-（R）-CH（CH₃）C（CH₃）₃・HCl を得る。実施例５単純ヘルペスウイルス（HSV-１）リボヌクレオチド還元酵素の抑制 a）酵素の調製 HSV-1リボヌクレオチド還元酵素（部分精製されたもの）をE.A.Cohenら，J.Ge n.Virol.，66，733（1985）により記載されたようにして10プラーク形成単位／細胞で株FHSV-1ウイルスで感染された静止状態のBHK-21/Cl3細胞から得た。 b）アッセイ P.Gaudreauら，J.Biol.Chem.，262，12413（1987）により記載されたアッセイを使用してHSV-1リボヌクレオチド還元酵素活性を抑制する本発明の化合物の能力を評価する。結果を酵素活性の最大抑制の50％を生じる化合物の濃度（IC₅₀）として表す。夫々のアッセイに使用される酵素製剤の単位の数は、酵素製剤の比活性に基いて一定であった。結果は、試験化合物を用いない対照実験で得られた活性に対するものであり、互いに10％未満で変化した４つのアッセイの平均に相当する。実施例３の（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp（c yPn）-γMeロイシノールを先のアッセイに従って評価した場合、HSV-1リボヌクレオチド還元酵素活性の50％低下を生じる化合物の濃度、即ち、IC₅₀は0.17μM であることがわかった。実施例６細胞培養における単純ヘルペスウイルス（HSV-2）複製の抑制アッセイ： BHK-21/Cl3細胞（ATCC CCL 10）を、８％（v/v）のウシ胎児血清（FBS、ギブコ・カナダ社）を補給したα-MEM培地（ギブコ・カナダ社、バーリントン、オンタリオ、カナダ）を含む150cm²のＴ−フラスコ中で２日間インキュベートする（ 1.5ｘ10⁶細胞／フラスコ）。細胞をトリプシン処理し、次いで24ウェルプレート中の新しい培地に移してウェル当たり培地750μｌ中2.5ｘ10⁵の細胞を得た。細胞を37℃で６時間の期間にわたってインキュベートしてそれらをプレートに付着させる。その後、細胞を0.5％（v/v）のFBSを補給したα-MEM500μｌで１回洗浄し、次いで同培地（低血清）750μｌで３日間インキュベートする。血清飢餓のこの期間後に、低血清培地を除去し、細胞をBBMT500μｌ中で２〜３時間インキュベートする（BBMT培地はP.Brazeauら，Proc.Natl.Acad.Sci．USA，79，7909（ 1982）に記載されている）。その後、細胞をBBMT培地100μｌ中でHSV-2で感染させる（感染多重度=0.02PFU/細胞）（注：使用したHSV-2は株HG-52（Y.Lange-lie r及びG.Buttin，J.Gen.Virol.，57，21（1981）を参照のこと）であり、そのウイルスを-80℃で貯蔵した）。37℃におけるウイルス吸着１時間後に、培地を除去し、細胞をBBMT（３Ｘ250μｌ）で洗浄する。夫々のウェル中の細胞を、BBMT 培地200μｌに溶解した適当な濃度の試験薬剤を用いて、またはそれを用いずに（対照）インキュベートする。37℃におけるインキュベーション29時間後に、感染細胞を最初にプレートを-80℃で凍結し、続いて解凍することにより回収する。夫々のウェル中の細胞を融解する氷の断片の助けによりウェルの表面からこすり落とす。完全な解凍後に、細胞懸濁液を回収し、夫々のウェルをBBMT培地150 μｌですすぐ。ウイルス試料（懸濁液＋洗浄液）を４℃で４分間にわたって穏やかに音波処理する。細胞デブリを遠心分離（４℃で10分間の1000倍の重力）により除去する。上澄みを回収し、ウイルス力価の測定まで-80℃で貯蔵する。ウイルス力価をM.Langloisら，Journal of Biological Standardization，14 ，201（1986）の比色アッセイ方法の改良により行い、これは上記のR.Deziel及びY.Guindonにより詳細に記載されている。従って、ウイルス増殖抑制の％を種々の濃度の試験薬剤につき測定でき、そしてウイルス複製の50％抑制を行う試験薬剤の濃度、即ち、EC₅₀を計算し得る。実施例３の（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp（c yPn）-γMeロイシノールをこの実施例の細胞培養アッセイに従って評価した場合、HSV-1ウイルス複製の50％抑制を行う化合物の濃度、即ち、EC₅₀は３μMであることがわかった。本発明の使用に関する式１の化合物のその他の特別な例は、（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp-（cyPn）-γMeL eu-OH、（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp-（cyPn）-NHCH₂ C（CH₃）₃、及び（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp（cyPn）-NH-（R ）-CH（C₂H₅）C（CH₃）₃である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＣ０７Ｋ 1/02 7/06 // Ｃ１２Ｎ 9/99 9152−4Ｂ

Claims

【特許請求の範囲】１．式１のペプチドまたはその治療上許される塩。 A-B-D-NHCH｛CH₂C（O）R¹｝C（O）-NHCH｛CR²（R³）C（O）OH｝C（O）-E １［式中、Ａは二置換低級アルカノイルであり、その置換基の夫々はフェニル及び一置換フェニルからなる群から独立に選ばれ、一置換基は低級アルキル、ハロ、ヒドロキシ及び低級アルコキシからなる群から選ばれ、ＢはN（CH₃）CHR⁴C（O）（式中、Ｒ⁴は低級アルキルである）であり、ＤはNH-CHR⁵C（O）（式中、Ｒ⁵は低級アルキルまたはカルボキシ、ヒドロキシ、メルカプトもしくはベンジルオキシで一置換された低級アルキルである）であり、Ｒ¹は低級アルキル、低級シクロアルキル、｛１−（低級アルキル）−（低級シクロアルキル）｝、またはＮＲ⁶Ｒ⁷（式中、Ｒ⁶は水素または低級アルキルであり、かつＲ⁷は低級アルキルであり、またはＲ⁶及びＲ⁷はそれらが結合されている窒素原子と一緒になってピロリジノ、ピペリジノ、モルホリノまたは４ −メチルピペラジノを形成する）であり、Ｒ²は水素または低級アルキルであり、かつＲ³は低級アルキルであり、またはＲ²及びＲ³はそれらが結合されている炭素原子と一緒になって低級シクロアルキルを形成し、かつＥはＮＨＲ⁸（式中、Ｒ⁸は（４−９Ｃ）アルキル；低級シクロアルキル；低級アルキルで一置換または二置換された低級シクロアルキルまたは（低級アルキル）−（低級シクロアルキル）である）であり、またはＥはＮＨＣＨ（Ｒ⁹）− Ｚ（式中、Ｒ⁹は（４−９Ｃ）アルキル、低級シクロアルキルまたは（低級シクロアルキル）−（低級アルキル）であり、かつＺはＣＨ₂ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂またはＣ（Ｏ）ＯＲ¹⁰（式中、Ｒ¹⁰は低級アルキルである）である）である］２．Ａがフェニル、４−（低級アルキル）フェニル、４−ハロフェニルまたは４ −（低級アルコキシ）フェニルで二置換された低級アルカノイルであり、Ｂが（N-Me）Val、（N-Me）Ileまたは（N-Me）Tbgであり、Ｄが（S）−２−アミノ− ３−ヒドロキシ−３−メチル酪酸または（R）−２−アミノ−３−メルカプト− ３−メチル酪酸のアミノ酸残基またはVal、Ile及びTbgから選ばれたアミノ酸残基であり、Ｒ¹が低級アルキル、低級シクロアルキル、｛１−（低級アルキル） −（低級シクロアルキル）｝、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ、ピロリジノまたはモルホリノであり、Ｒ²及びＲ³が請求の範囲第１項に定義されたとおりであり、かつＥがＮＨＲ³（式中、Ｒ⁸は（４−９Ｃ）アルキル；低級シクロアルキル；低級アルキルで一置換または二置換された低級シクロアルキル；または（低級アルキル）−（低級シクロアルキル）である）であり、またはＥがＮＨＣＨ（Ｒ⁹）−Ｚ（式中、Ｒ⁹は（４−９Ｃ）アルキルまたは（低級シクロアルキル）メチルである）であり、かつＺが請求の範囲第１項に定義されたとおりである請求の範囲第１項に記載のペプチド、またはその治療上許される塩。３．Ａが２−（フェニルメチル）−３−フェニルプロピオニル、２−｛（４−フルオロフェニル）メチル｝−３−（４−フルオロフェニル）プロピオニル、２− ｛（４−メトキシフェニル）メチル｝−３−フェニルプロピオニルまたは２−｛（４−メトキシフェニル）メチル｝−３−（４−メトキシフエニル）プロピオニルであり、Ｂが（N-Me）-Valまたは（N-Me）-Ileであり、ＤがVal、IleまたはTb gであり、Ｒ¹が１−メチルエチル、１，１−ジメチルエチル、１，１−ジメチルプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、１−メチルシクロペンチル、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ、ピロリジノまたはモルホリノであり、Ｒ²が水素であり、かつＲ³がメチル、エチル、１−メチルエチル、１，１−ジメチルエチルまたはプロピルであり、かつＲ²及びＲ³を有する炭素原子が（R）-配置を有し、またはＲ²およびＲ³が夫々独立にメチルまたはエチルであり、またはＲ²およびＲ³がそれらが結合されている炭素原子と一緒になってシクロブチル、シクロペンチルもしくはシクロヘキシルを形成し、かつＥがＮＨＲ⁸（式中、Ｒ⁸は２，２−ジメチルプロピル、１（R），２，２−トリメチルプロピル、１（R）−エチル−２，２−ジメチルプロピル、２，２−ジメチルブチル、３，３−ジメチルブチル、１（R），２，２−トリメチルブチル、１（R），３，３−トリメチルブチル、１（R）−エチル−３，３−ジメチルまたはシクロヘキシルメチルである）であり、またはＥがＮＨＣＨ（Ｒ⁹）−Ｚ（式中、Ｒ⁹を有する炭素原子は（S）-配置を有し、Ｒ⁹ は１，１−ジメチルエチル、１−メチルプロピル、２−メチルプロピル、２，２ −ジメチルプロピルまたはシクロヘキシルメチルであり、かつＺはＣＨ₂ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂またはＣ（Ｏ）ＯＲ¹⁰（式中、Ｒ¹⁰はメチル、エチルまたはプロピルである）である）である請求の範囲第２項に記載のペプチド、またはその治療上許される塩。４．２−（フェニルメチル）−３−フェニルプロピオニルであり、Ｂが（N-Me） Valであり、ＤがTbgであり、Ｒ¹が１−メチルエチル、１，１−ジメチルエチル、１−メチルプロピル、１，１−ジメチルプロピル、２，２−ジメチルプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、１−メチルシクロペンチル、ピロリジノまたはモルホリノであり、Ｒ²が水素であり、かつＲ³がメチル、エチル、１−メチルエチルまたはプロピルであり、かつＲ²およびＲ³を有する炭素原子が（R）-配置を有し、またはＲ²及びＲ³が夫々独立にメチルまたはエチルであり、またはＲ²及びＲ³がそれらが結合されている炭素原子と一緒になってシクロブチル、シクロペンチルもしくはシクロヘキシルを形成し、かつＥがＮＨＲ⁸ （式中、Ｒ⁸は２，２−ジメチルプロピル、１（R），２，２−トリメチルプロピル、１（R）−エチル−２，２−ジメチルプロピル、２，２−ジメチルブチルまたは１（R）−エチル−３，３−ジメチルブチルである）であり、またはＥがＮＨＣＨ（Ｒ⁹）−Ｚ（式中、Ｒ⁹を有する炭素原子は（S）-配置を有し、Ｒ⁹は２，２−ジメチルプロピルであり、かつＺはＣＨ₂ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂またはＣ（Ｏ）ＯＲ¹⁰（式中、Ｒ¹⁰はメチル、エチルまたはプロピルである）である）である請求の範囲第３項に記載のペプチド、またはその治療上許される塩。５．（PhCH2）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp（cyPn）-γMe ロイシノール、（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp-（cyPn）-γM eLeu-OH、（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp-（cyPn）-NHC H₂C（CH₃）₃、及び（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp（cyPn）-NH- （R）-CH（C₂H₅）C（CH₃）₃ からなる群から選ばれた請求の範囲第１項に記載のペプチド。６．抗ヘルペスウイルス有効量の請求の範囲第１項に記載のペプチド、またはその治療上許される塩、及び医薬上もしくは獣医薬上許される担体を含むことを特徴とする医薬組成物。７．ペプチドが、（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp（cyPn）-γMe ロイシノール、（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp-（cyPn）-γM eLeu-OH、（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp-（cyPn）-NHC H₂C（CH₃）₃、及び（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp（cyPn）-NH- （R）-CH（C₂H₅）C（CH₃）₃ からなる群から選ばれる請求の範囲第６項に記載の医薬組成物。８．請求の範囲第１項に記載のペプチド、またはその治療上許される塩、及び局所適用に適した生理学上許される担体を含むことを特徴とする化粧品組成物。９．抗ヘルペスウイルス有効量の請求の範囲第１項に記載のペプチド、またはその治療上許される塩を啼乳類に投与することを特徴とする啼乳類のヘルペスウイルス感染症の治療方法。 10．ペプチドが、（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp（cyPn）-γMe ロイシノール、（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp-（cyPn）-γM eLeu-OH、（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp-（cyPn）-NHC H₂C（CH₃）₃、及び（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp（cyPn）-NH- （R）-CH（C₂H₅）C（CH₃）₃ からなる群から選ばれる請求の範囲第９項に記載の方法。 11．ヘルペスウイルスをヘルペスウイルスのリボヌクレオチド還元酵素抑制量の請求の範囲第１項に記載のペプチド、またはその治療上許される塩と接触させることによるヘルペスウイルスの複製の抑制方法。 12．ペプチドが、（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp（cyPn）-γMe ロイシノール、（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp-（cyPn）-γM eLeu-OH、（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp-（cyPn）-NHC H₂C（CH₃）₃、及び（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp（cyPn）-NH- （R）-CH（C₂H₅）C（CH₃）₃ からなる群から選ばれる請求の範囲第11項に記載の方法。 13．医薬上もしくは獣医薬上許される担体、及び有効量の抗ウイルスヌクレオシド類縁体またはその治療上許される塩と、請求の範囲第I項に記載のリボヌクレオチド還元酵素抑制ペプチド、またはその治療上許される塩の組み合わせを含むことを特徴とする医薬組成物。 14．ヌクレオシド類縁体が式２の化合物（式中、Ｒ¹¹は水素、ヒドロキシまたはアミノである）、またはその治療上許される塩である請求の範囲第13項に記載の医薬組成物。 15．抗ウイルスヌクレオシド類縁体がビダラビン、イドクスリジン、トリフルリジン、ガンシクロビル、エドクスジン、ブロバビル、フィアシタビン、ペンシクロビル、ファムシクロビル及びロシクロビルからなる群から選ばれる請求の範囲第13項に記載の医薬組成物。 16．哺乳類に有効量の抗ウイルスヌクレオシド類縁体、またはその治療上許される塩と、請求の範囲第１項に記載の式１のリボヌクレオチド還元酵素抑制ペプチド、またはその治療上許される塩の組み合わせを投与することを特徴とする哺乳類のヘルペスウイルス感染症の治療方法。 17．ヌクレオシド類縁体及び式１のペプチドを逐次または同時に投与する請求の範囲第16項に記載の方法。 18．その組み合わせを局所投与する請求の範囲第16項に記載の方法。 19．抗ウイルスヌクレオシド類縁体が、アシクロビル、６−デオキシアシクロビル、２，６−ジアミノ−９−｛（２−ヒドロキシエトキシ）メチル｝プリン、ビダラビン、イドクスリジン、トリフルリジン、ガンシクロビル、エドクスジン、ブロバビル、フィアシタビン、ペンシクロビル、ファムシクロビル及びロシクロビルからなる群から選ばれる請求の範囲第16項に記載の方法。 20．哺乳類に有効量の請求の範囲第６項に記載の医薬組成物（その組成物のペプチドは（PhCH₂）₂CHC（O）-（N-Me）-Val-Tbg-Asp（ピロリジノ）-Asp（cyPn）- γMeロイシノールである）を投与することを特徴とする啼乳類の単純ヘルペスウイルス型１または型２感染症の治療方法。 21．a）アミノ酸残基または誘導アミノ酸残基、及びペプチドの非ペプチドフラグメントの、ペプチドの配列の順序の、段階的カップリング： i）保護基が段階的カップリングの完結後に最終的に除去されるまで、残基またはフラグメントの反応性側鎖基を適当な保護基で保護して化学反応がその部位で起こることを阻止し、 ii）カップリング反応体の遊離カルボキシ基が第二反応体の遊離α−アミノ基とカップリングする間にカップリング反応体のα−アミノ基をα−アミノ保護基により保護し（そのα−アミノ保護基は選択的に除去されてその後のカップリング工程をそのα−アミノ基で行わせることができるものである）、そして iii）存在する場合のアミノ酸残基またはペプチドフラグメントのアミノ酸残基のＣ末端カルボキシル（これは保護ペプチドのＣ末端官能基になる）を、ペプチドに所望されるアミノ酸配列が構築された後まで化学反応がその部位で起こることを阻止する適当な保護基で保護し、そしてｂ）カップリングの完結時に、保護基を除去し、必要により通常の変換を行って請求の範囲第１項に記載のペプチドを得、所望によりそのペプチドを治療上許される塩に変換することを特徴とする請求の範囲第１項に記載のペプチド、またはその治療上許される塩の調製方法。