JPH09224647A - Ｖａ菌根菌の培養方法 - Google Patents
Ｖａ菌根菌の培養方法Info
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- JPH09224647A JPH09224647A JP5543196A JP5543196A JPH09224647A JP H09224647 A JPH09224647 A JP H09224647A JP 5543196 A JP5543196 A JP 5543196A JP 5543196 A JP5543196 A JP 5543196A JP H09224647 A JPH09224647 A JP H09224647A
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Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】ＶＡ菌根菌の培養に際し、菌糸の生長を促進さ
せ、菌体量の増加を図るための優れた手段を提供する。 【構成】アルギン酸オリゴ糖をＶＡ菌根菌培養用培地に
添加し（添加量:10■100ppm)培養を行う。
せ、菌体量の増加を図るための優れた手段を提供する。 【構成】アルギン酸オリゴ糖をＶＡ菌根菌培養用培地に
添加し（添加量:10■100ppm)培養を行う。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、ＶＡ菌根菌の人工
培養に際して菌糸の生長を促進させ菌体量の増加を図る
方法に関するものである。
培養に際して菌糸の生長を促進させ菌体量の増加を図る
方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】ＶＡ菌根菌（Vesicular Arbuscular Myc
orrhizal fungi）は土壌中に存在し、植物の根に感染し
共生することで、生長促進、養分吸収向上、果実品質の
向上、また、耐病性を付与するなどの作用を示す。その
ため、農業生産に応用することを目的として人工的に培
養し、菌糸や胞子を大量生産する技術が検討されてい
る。例えば、無機塩類を主体とする培地を用いた非バイ
オトロピックな培養方法（特表昭60-501390）や器官培
養した植物の根と共生させて培養する方法（特開平02-2
27068）などが報告されている。しかし、糖類、オリゴ
糖、特に、アルギン酸オリゴ糖を用いたＶＡ菌根菌の培
養生産技術はこれまで報告されていなかった。
orrhizal fungi）は土壌中に存在し、植物の根に感染し
共生することで、生長促進、養分吸収向上、果実品質の
向上、また、耐病性を付与するなどの作用を示す。その
ため、農業生産に応用することを目的として人工的に培
養し、菌糸や胞子を大量生産する技術が検討されてい
る。例えば、無機塩類を主体とする培地を用いた非バイ
オトロピックな培養方法（特表昭60-501390）や器官培
養した植物の根と共生させて培養する方法（特開平02-2
27068）などが報告されている。しかし、糖類、オリゴ
糖、特に、アルギン酸オリゴ糖を用いたＶＡ菌根菌の培
養生産技術はこれまで報告されていなかった。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】ＶＡ菌根菌の人工培養
では菌糸の生長が遅かったり、宿主植物の供給や培地の
調製が繁雑であったりして安定的でないことが多い。本
発明の目的は、アルギン酸オリゴ糖を用いてＶＡ菌根菌
を培養することにより菌糸生長を促進させ大量生産が容
易となる技術を提供することにある。
では菌糸の生長が遅かったり、宿主植物の供給や培地の
調製が繁雑であったりして安定的でないことが多い。本
発明の目的は、アルギン酸オリゴ糖を用いてＶＡ菌根菌
を培養することにより菌糸生長を促進させ大量生産が容
易となる技術を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは上記課題を
解決するため鋭意検討を行った結果、ＶＡ菌根菌の培養
の際、その培地にアルギン酸オリゴ糖（以下「ＡＯ」と
略記する）を添加し、使用することによりＶＡ菌根菌の
菌糸生長を促進させることができることを見出し、本発
明を完成するに至った。以下本発明について詳細に説明
する。
解決するため鋭意検討を行った結果、ＶＡ菌根菌の培養
の際、その培地にアルギン酸オリゴ糖（以下「ＡＯ」と
略記する）を添加し、使用することによりＶＡ菌根菌の
菌糸生長を促進させることができることを見出し、本発
明を完成するに至った。以下本発明について詳細に説明
する。
【０００５】本発明においてＡＯとは以下のように定義
される。アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、又はアル
ギン酸を含有する昆布等の藻類や微生物起源の多糖体な
どを原料とし、これらをアルギン酸リアーゼなどの酵素
で分解するか、または塩酸などの酸で加水分解して得ら
れるオリゴ糖混合物である。オリゴ糖の構成糖成分はグ
ルロン酸およびマンヌロン酸を主成分とする。そして、
（ａ）重合度が２〜２０でグルロン酸のみで構成される
オリゴ糖、（ｂ）重合度が２〜２０でマンヌロン酸のみ
で構成されるオリゴ糖、及び（ｃ）重合度が２〜２０で
グルロン酸とマンヌロン酸で構成されるオリゴ糖、の
（ａ）、（ｂ）、（ｃ）の混合物である。さらに、この
混合物をｐＨ１〜９、好ましくはｐＨ１〜３、温度６０
〜１３０℃、好ましくは１００〜１３０℃の条件下で１
５〜１８０分加熱処理して得られる加熱処理物もこれに
含まれる。このＡＯの詳細については、特公平４−３３
４０８号公報及び特公平５−２８５９７号公報に記載さ
れている。
される。アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、又はアル
ギン酸を含有する昆布等の藻類や微生物起源の多糖体な
どを原料とし、これらをアルギン酸リアーゼなどの酵素
で分解するか、または塩酸などの酸で加水分解して得ら
れるオリゴ糖混合物である。オリゴ糖の構成糖成分はグ
ルロン酸およびマンヌロン酸を主成分とする。そして、
（ａ）重合度が２〜２０でグルロン酸のみで構成される
オリゴ糖、（ｂ）重合度が２〜２０でマンヌロン酸のみ
で構成されるオリゴ糖、及び（ｃ）重合度が２〜２０で
グルロン酸とマンヌロン酸で構成されるオリゴ糖、の
（ａ）、（ｂ）、（ｃ）の混合物である。さらに、この
混合物をｐＨ１〜９、好ましくはｐＨ１〜３、温度６０
〜１３０℃、好ましくは１００〜１３０℃の条件下で１
５〜１８０分加熱処理して得られる加熱処理物もこれに
含まれる。このＡＯの詳細については、特公平４−３３
４０８号公報及び特公平５−２８５９７号公報に記載さ
れている。
【０００６】
【発明の実施の形態】本発明に用いるＡＯとしては、上
記の他に、さらに精製を目的にして、エタノールにより
分画した成分、例えば、上記オリゴ糖混合物の１０〜２
０％溶液を終濃度２０％のエタノールで沈殿させて得ら
れた成分（重合度８〜２０のオリゴ糖を主成分とする）
（成分Ａと称する）や、このように終濃度２０％のエタ
ノールで沈殿させた際に得られる上澄み液を終濃度９０
％のエタノールで沈殿させて得られた成分（重合度２〜
８のオリゴ糖を主成分とする）（成分Ｂと称する）など
もＡＯとして用いることができる。
記の他に、さらに精製を目的にして、エタノールにより
分画した成分、例えば、上記オリゴ糖混合物の１０〜２
０％溶液を終濃度２０％のエタノールで沈殿させて得ら
れた成分（重合度８〜２０のオリゴ糖を主成分とする）
（成分Ａと称する）や、このように終濃度２０％のエタ
ノールで沈殿させた際に得られる上澄み液を終濃度９０
％のエタノールで沈殿させて得られた成分（重合度２〜
８のオリゴ糖を主成分とする）（成分Ｂと称する）など
もＡＯとして用いることができる。
【０００７】本発明におけるＶＡ菌根菌の培養条件は、
ＡＯを含む寒天もしくは液体培地を使用し、pH 5.0 〜
8.0、25〜35°C行うのが好ましい。 ＡＯの濃度は対象
となる菌根菌の種類などに応じて適宜実施しうるが、効
果等を勘案して通常は10■100ppmが適当である。また、
ＡＯは単独で用いてもよいが、その他の培地成分（硝酸
カリウム、硝酸アンモニウム、燐酸2水素カリウム、塩
化カルシウムなどの無機成分、チアミン、ピリドキシン
などのビタミン類、リジン、グリシンなどのアミノ酸
類、グルコース、.シュークロースなどの糖類、その他
ペプトン、イーストエキスなど）と混合して用いること
ができる。
ＡＯを含む寒天もしくは液体培地を使用し、pH 5.0 〜
8.0、25〜35°C行うのが好ましい。 ＡＯの濃度は対象
となる菌根菌の種類などに応じて適宜実施しうるが、効
果等を勘案して通常は10■100ppmが適当である。また、
ＡＯは単独で用いてもよいが、その他の培地成分（硝酸
カリウム、硝酸アンモニウム、燐酸2水素カリウム、塩
化カルシウムなどの無機成分、チアミン、ピリドキシン
などのビタミン類、リジン、グリシンなどのアミノ酸
類、グルコース、.シュークロースなどの糖類、その他
ペプトン、イーストエキスなど）と混合して用いること
ができる。
【０００８】菌根菌としては例えば、Acaulospora, Ent
rophospora, Gigaspora,Sclerocystis, Scuttellospor
a, およびGlomus属のものを対象とすることができる。
rophospora, Gigaspora,Sclerocystis, Scuttellospor
a, およびGlomus属のものを対象とすることができる。
【０００９】
【実施例】以下、実施例によって本発明を具体的に説明
するが、これらは本発明を限定するものではない。
するが、これらは本発明を限定するものではない。
【００１０】実施例１ 菌糸の伸長に及ぼすＡＯの作用を確認するため、ＶＡ菌
根菌胞子を用いた培養試験を行った。ＡＯは前記のオリ
ゴ糖混合物（すなわち未分画であり成分Ａ、Ｂ、及び後
記成分Ｃとの混合物（Ａ＋Ｂ＋Ｃ）に相当する）［以
下、ＡＯ組成物と記す］、該ＡＯ組成物の２０％エタノ
ール沈殿物（即ち、成分Ａ）、Ａの上澄み液の９０％エ
タノール沈殿物（即ち成分Ｂ）、Ｂの上澄み液（成分Ｃ
と称する）の４種類を用い、これに水を対照として比較
した。各種被検液を含む寒天培地（pH 6.8、1.５％寒
天）を１２１℃でオートクレーブしたあと表面消毒した
Gigaspora ramisporophra Spain 胞子を１シャーレ（直
径:７０ｍｍ）あたり４個置き３０℃の暗黒下でインキ
ュベートした。培養約１４日後、胞子からの菌糸の伸長
を実体顕微鏡およびパソコンによる画像処理法によって
測定し総延長で表した。 結果は下記表１の通りであ
る。
根菌胞子を用いた培養試験を行った。ＡＯは前記のオリ
ゴ糖混合物（すなわち未分画であり成分Ａ、Ｂ、及び後
記成分Ｃとの混合物（Ａ＋Ｂ＋Ｃ）に相当する）［以
下、ＡＯ組成物と記す］、該ＡＯ組成物の２０％エタノ
ール沈殿物（即ち、成分Ａ）、Ａの上澄み液の９０％エ
タノール沈殿物（即ち成分Ｂ）、Ｂの上澄み液（成分Ｃ
と称する）の４種類を用い、これに水を対照として比較
した。各種被検液を含む寒天培地（pH 6.8、1.５％寒
天）を１２１℃でオートクレーブしたあと表面消毒した
Gigaspora ramisporophra Spain 胞子を１シャーレ（直
径:７０ｍｍ）あたり４個置き３０℃の暗黒下でインキ
ュベートした。培養約１４日後、胞子からの菌糸の伸長
を実体顕微鏡およびパソコンによる画像処理法によって
測定し総延長で表した。 結果は下記表１の通りであ
る。
【００１１】 表１ 被検液 濃度（ppm） 総菌糸長（平均値 単位 ± 標準誤差,mm） AO組成物（A+B+C） 100 193.8 ± 28.3 AO組成物（A+B+C） 10 64.4 ± 8.9 20%エタノール沈殿物(A) 100 136.5 ± 26.5 90%エタノール沈殿物(B) 100 50.0 ± 7.5 上澄み (C) 100 12.7 ± 2.7 対照（水） 32.2 ± 4.7
【００１２】表−1 に示すようにＡＯ組成物（Ａ＋Ｂ＋
Ｃ）、ＡＯ組成物の２０％エタノール沈殿物（Ａ）およ
びＡの上澄み液の９０％エタノール沈澱物（Ｂ）がＶＡ
菌根菌の菌糸生長を促進することがわかる。
Ｃ）、ＡＯ組成物の２０％エタノール沈殿物（Ａ）およ
びＡの上澄み液の９０％エタノール沈澱物（Ｂ）がＶＡ
菌根菌の菌糸生長を促進することがわかる。
【００１３】
【発明の効果】ＶＡ菌根菌の人工培養に際して、その培
地にアルギン酸オリゴ糖を添加することにより、菌根菌
の菌糸の生長を促進させ、菌体量の増加を図ることがで
きる。本発明に従えば、効率的なＶＡ菌根菌製剤生産を
可能にするための優れた手段を提供することができその
意義は極めて大きい。 - 1 -
地にアルギン酸オリゴ糖を添加することにより、菌根菌
の菌糸の生長を促進させ、菌体量の増加を図ることがで
きる。本発明に従えば、効率的なＶＡ菌根菌製剤生産を
可能にするための優れた手段を提供することができその
意義は極めて大きい。 - 1 -
Claims (3)
- 【請求項１】 アルギン酸オリゴ糖を添加した培地を使
用することを特徴とするＶＡ菌根菌の培養方法。 - 【請求項２】 アルギン酸オリゴ糖がオリゴ糖混合物を
終濃度２０％のエタノールにより沈殿させて得られる成
分である請求項１記載のＶＡ菌根菌の培養方法。 - 【請求項３】 アルギン酸オリゴ糖がオリゴ糖混合物を
終濃度２０％のエタノールにより沈殿させた上澄み液を
終濃度９０％のエタノールにより沈殿させて得られる成
分である請求項１記載のＶＡ菌根菌の培養方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5543196A JPH09224647A (ja) | 1996-02-20 | 1996-02-20 | Ｖａ菌根菌の培養方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5543196A JPH09224647A (ja) | 1996-02-20 | 1996-02-20 | Ｖａ菌根菌の培養方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09224647A true JPH09224647A (ja) | 1997-09-02 |
Family
ID=12998406
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5543196A Pending JPH09224647A (ja) | 1996-02-20 | 1996-02-20 | Ｖａ菌根菌の培養方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH09224647A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2982241A1 (en) | 2014-08-06 | 2016-02-10 | INOQ GmbH | A method of mycorrhization of plants and use of saccharides in mycorrhization |
-
1996
- 1996-02-20 JP JP5543196A patent/JPH09224647A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2982241A1 (en) | 2014-08-06 | 2016-02-10 | INOQ GmbH | A method of mycorrhization of plants and use of saccharides in mycorrhization |
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