JPH0931071A - （ｒ）−（−）−マッソイアラクトンの製造方法・その製造物および香料組成物 - Google Patents
（ｒ）−（−）−マッソイアラクトンの製造方法・その製造物および香料組成物Info
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 微生物を培養し、その培養物あるいは菌体乃
至培地あるいは本培養物より得た抽出物に酸処理の如き
簡単な化学的処理を施し、（Ｒ）−（−）−マッソイア
ラクトンを製造する。上記方法で製造した（Ｒ）−
（−）−マッソイアラクトンおよびそれを有効成分とし
て含有する香料組成物。 【効果】 本発明により、これまで植物からの抽出およ
び多段階合成により供給されてきた（Ｒ）−（−）−マ
ッソイアラクトンを一工程の化学反応で安価にかつ大量
に供給することが可能となる。
至培地あるいは本培養物より得た抽出物に酸処理の如き
簡単な化学的処理を施し、（Ｒ）−（−）−マッソイア
ラクトンを製造する。上記方法で製造した（Ｒ）−
（−）−マッソイアラクトンおよびそれを有効成分とし
て含有する香料組成物。 【効果】 本発明により、これまで植物からの抽出およ
び多段階合成により供給されてきた（Ｒ）−（−）−マ
ッソイアラクトンを一工程の化学反応で安価にかつ大量
に供給することが可能となる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は下記式
【０００２】
【化３】 で示される（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトン（Ｍａ
ｓｓｏｉａｌａｃｔｏｎｅ）の製造法に関するものであ
る。本発明者らは、微生物の培養物に対し、簡単な化学
的処理を施すことにより本化合物を一段階の化学反応で
製造する方法を開発した。詳細には、本発明は（Ｒ）−
（−）−マッソイアラクトンの簡便な製造法、（Ｒ）−
（−）−マッソイアラクトンおよび（Ｒ）−（−）−マ
ッソイアラクトンを有効成分として含む香料組成物に関
する。
ｓｓｏｉａｌａｃｔｏｎｅ）の製造法に関するものであ
る。本発明者らは、微生物の培養物に対し、簡単な化学
的処理を施すことにより本化合物を一段階の化学反応で
製造する方法を開発した。詳細には、本発明は（Ｒ）−
（−）−マッソイアラクトンの簡便な製造法、（Ｒ）−
（−）−マッソイアラクトンおよび（Ｒ）−（−）−マ
ッソイアラクトンを有効成分として含む香料組成物に関
する。
【０００３】
【従来の技術】ココナッツミルク様の香気を有する公知
の香料物質である（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトン
は各種の香料組成物の持続性香気香味付与乃至変調剤と
して飲食品、香粧品類、保健・医薬品などの広い分野で
有用であることが知られており、各種分野で用いられて
いる。これまで（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトンは
植物からの抽出または化学合成により製造されている。
植物からの抽出例としてはクリプトカリア マッソイア
（Ｃｒｙｐｔｏｃａｒｉａ ｍａｓｓｏｉａ）の樹皮油
の主成分として得られることが報告されている（日本化
学会誌５８，２４６−２５１（１９３７））。また、サ
トウキビの糖みつ成分から単離されるほか、ココナッツ
ミルクからも得られている。一方、化学合成による製造
法としてはこれまではほとんどがラセミ体の合成の報告
であった（特開昭６３−５７５８３、特開昭６３−２１
５６７６、特開昭６３−２２２１６４）。近年、光学活
性な（＋）−１，２−エポキシヘプタンから４工程で合
成される光学活性な（Ｒ）−（−）−マッソイアラクト
ンの合成が報告されている（特開平２−５９５６４）。
の香料物質である（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトン
は各種の香料組成物の持続性香気香味付与乃至変調剤と
して飲食品、香粧品類、保健・医薬品などの広い分野で
有用であることが知られており、各種分野で用いられて
いる。これまで（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトンは
植物からの抽出または化学合成により製造されている。
植物からの抽出例としてはクリプトカリア マッソイア
（Ｃｒｙｐｔｏｃａｒｉａ ｍａｓｓｏｉａ）の樹皮油
の主成分として得られることが報告されている（日本化
学会誌５８，２４６−２５１（１９３７））。また、サ
トウキビの糖みつ成分から単離されるほか、ココナッツ
ミルクからも得られている。一方、化学合成による製造
法としてはこれまではほとんどがラセミ体の合成の報告
であった（特開昭６３−５７５８３、特開昭６３−２１
５６７６、特開昭６３−２２２１６４）。近年、光学活
性な（＋）−１，２−エポキシヘプタンから４工程で合
成される光学活性な（Ｒ）−（−）−マッソイアラクト
ンの合成が報告されている（特開平２−５９５６４）。
【０００４】
【発明が解決しようとする問題点】マッソイアラクトン
はその（Ｒ）−（−）型の光学活性体とラセミ体間でに
おいが異なることが知られている。すなわち（Ｒ）−
（−）型の光学活性体はココナッツミルクの香りである
のに対し、ラセミ体はバター臭を呈する。そのため、品
質の一定した香料組成物の製造にあたっては、その目的
に応じて、高い光学純度を有する（Ｒ）−（−）−マッ
ソイアラクトンが不可欠であり、その簡便な製造法の開
発が望まれてきた。上述した植物由来の製造法は、多量
の植物を伐採せねばならず、大量供給に適さない。ま
た、必要に応じて（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトン
を生産する植物を入手するためには季節的環境的な制約
を免れることはできない。一方、化学合成による（Ｒ）
−（−）−マッソイアラクトンの製造法では、高い光学
純度を有する目的物を得るために、出発原料として高い
光学純度を有する比較的高価な光学活性体を出発原科を
用いる必要がある。また、出発原料から目的物への変換
には多工程を要せねばならない。さらに、各工程の反応
後に反応試剤や副生物と目的物を分離し、中間体乃至目
的物を逐一精製する必要がある。このため、工業的に大
量合成を行い、かつ迅速かつ安価に光学的に純粋な
（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトンを供給するために
はかかる化学合成特有の諸制約を受けねばならない。
はその（Ｒ）−（−）型の光学活性体とラセミ体間でに
おいが異なることが知られている。すなわち（Ｒ）−
（−）型の光学活性体はココナッツミルクの香りである
のに対し、ラセミ体はバター臭を呈する。そのため、品
質の一定した香料組成物の製造にあたっては、その目的
に応じて、高い光学純度を有する（Ｒ）−（−）−マッ
ソイアラクトンが不可欠であり、その簡便な製造法の開
発が望まれてきた。上述した植物由来の製造法は、多量
の植物を伐採せねばならず、大量供給に適さない。ま
た、必要に応じて（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトン
を生産する植物を入手するためには季節的環境的な制約
を免れることはできない。一方、化学合成による（Ｒ）
−（−）−マッソイアラクトンの製造法では、高い光学
純度を有する目的物を得るために、出発原料として高い
光学純度を有する比較的高価な光学活性体を出発原科を
用いる必要がある。また、出発原料から目的物への変換
には多工程を要せねばならない。さらに、各工程の反応
後に反応試剤や副生物と目的物を分離し、中間体乃至目
的物を逐一精製する必要がある。このため、工業的に大
量合成を行い、かつ迅速かつ安価に光学的に純粋な
（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトンを供給するために
はかかる化学合成特有の諸制約を受けねばならない。
【０００５】
【問題点を解決するための手段】そこで本発明者らは、
上記問題点を解決するため種々検討を重ねた結果、微生
物を培養し、その培養物に簡単な化学的処理を施すこと
により（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトンが得られる
ことを見出し、本発明を完成した。以下に本発明につい
て詳細を記述する。
上記問題点を解決するため種々検討を重ねた結果、微生
物を培養し、その培養物に簡単な化学的処理を施すこと
により（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトンが得られる
ことを見出し、本発明を完成した。以下に本発明につい
て詳細を記述する。
【０００６】本発明は微生物の培養物に簡単な化学的処
理を施し、反応液中に（Ｒ）−（−）−マッソイアラク
トンを生成せしめ、しかる後に通常の分離法を用いて
（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトンを分離するという
ものである。
理を施し、反応液中に（Ｒ）−（−）−マッソイアラク
トンを生成せしめ、しかる後に通常の分離法を用いて
（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトンを分離するという
ものである。
【０００７】微生物としては本発明に記載の処理により
（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトンを生成するもので
あれば何でもよく、例えば下記式
（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトンを生成するもので
あれば何でもよく、例えば下記式
【０００８】
【化４】 （ただし、ｎ≧０の整数，Ｒ１−Ｒ５は任意の官能基）
で示される化合物を産生する微生物を用いることができ
る。例えば、下記式
で示される化合物を産生する微生物を用いることができ
る。例えば、下記式
【０００９】
【化５】 で示されるエキソフィリンＡ（Ｅｘｏｐｈｉｌｉｎ
Ａ）（ただし、Ｒ１＝Ｈ）またはハリメシンＣ（Ｈａｌ
ｙｍｅｃｉｎ Ｃ）ただしＲ１＝ＣＨ３ＣＯ）または下
記式
Ａ）（ただし、Ｒ１＝Ｈ）またはハリメシンＣ（Ｈａｌ
ｙｍｅｃｉｎ Ｃ）ただしＲ１＝ＣＨ３ＣＯ）または下
記式
【００１０】
【化６】 で示されるハリメシンＡ（Ｈａｌｙｍｅｃｉｎ Ａ）
（ただしＲ１＝ＣＨ３ＣＯ，Ｒ２＝Ｈ）またはハリメシ
ンＢ（Ｈａｌｙｍｅｃｉｎ Ｂ）（ただしＲ１＝ＣＨ３
ＣＯ，Ｒ２＝Ｄ−ｍａｎｎｏｓｙｌ）を産生する微生物
を用いることができる。
（ただしＲ１＝ＣＨ３ＣＯ，Ｒ２＝Ｈ）またはハリメシ
ンＢ（Ｈａｌｙｍｅｃｉｎ Ｂ）（ただしＲ１＝ＣＨ３
ＣＯ，Ｒ２＝Ｄ−ｍａｎｎｏｓｙｌ）を産生する微生物
を用いることができる。
【００１１】本発明において用いられる微生物としては
本発明に記載の処理により（Ｒ）−（−）−マッソイア
ラクトンを生成するものであれば何でもよく、例えばエ
キソフィアラ属，フサリウム属，アウレオバシディウム
属，トリコデルマ属のいずれかに属する微生物を用いる
ことができる。
本発明に記載の処理により（Ｒ）−（−）−マッソイア
ラクトンを生成するものであれば何でもよく、例えばエ
キソフィアラ属，フサリウム属，アウレオバシディウム
属，トリコデルマ属のいずれかに属する微生物を用いる
ことができる。
【００１２】エキソフィアラ属の微生物の例としてはエ
キソフィアラ・ピシフィラをあげることができる。
キソフィアラ・ピシフィラをあげることができる。
【００１３】エキソフィアラ・ピシフィラの例としては
エキソフィアラ・ピシフィラ ＮＩ１０１０２株をあげ
ることができる。なお本菌株は平成６年３月２４日に工
業技術院生命工学研究所に寄託されており、その受託番
号は微工研菌寄第１４２３２号である。
エキソフィアラ・ピシフィラ ＮＩ１０１０２株をあげ
ることができる。なお本菌株は平成６年３月２４日に工
業技術院生命工学研究所に寄託されており、その受託番
号は微工研菌寄第１４２３２号である。
【００１４】当該微生物の培養は原則として一般微生物
の培養法に準ずるが、通常は液体培地による深部培養が
適している。
の培養法に準ずるが、通常は液体培地による深部培養が
適している。
【００１５】培養に用いられる培地は当該微生物が利用
する培養源を含有する培地、合成培地、半合成培地、あ
るいは天然培地が用いられる。培地組成は炭素源として
例えばグルコース等、窒素源として例えばＬ−アスパラ
ギン等が用いられる。その他無機塩類として塩化ナトリ
ウム、塩化カリウム、リン酸二水素カリウム等が必要に
応じて用いられる。
する培養源を含有する培地、合成培地、半合成培地、あ
るいは天然培地が用いられる。培地組成は炭素源として
例えばグルコース等、窒素源として例えばＬ−アスパラ
ギン等が用いられる。その他無機塩類として塩化ナトリ
ウム、塩化カリウム、リン酸二水素カリウム等が必要に
応じて用いられる。
【００１６】培養条件はｐＨ：４〜９、温度：１０〜３
５℃で２〜１４日間、望ましくはｐＨ：６〜７、温度：
２２〜２７℃で５〜１０日間培養する。
５℃で２〜１４日間、望ましくはｐＨ：６〜７、温度：
２２〜２７℃で５〜１０日間培養する。
【００１７】本発明における培養物は、菌体と培地とを
分離することなく利用可能であることを特徴とする。菌
体と培地の混合物たる培養物は混合状態のまま以下の化
学的処理に用いられる。勿論、当該培養物に対して分離
操作を行うことによって得られる菌体あるいは培地単独
であっても、また、さらに培養物の抽出物、菌体抽出
物、培地抽出物の如き有機溶媒等による抽出操作を加え
ることによって得られる抽出物いずれであっても用いる
ことができることは言うまでもない。
分離することなく利用可能であることを特徴とする。菌
体と培地の混合物たる培養物は混合状態のまま以下の化
学的処理に用いられる。勿論、当該培養物に対して分離
操作を行うことによって得られる菌体あるいは培地単独
であっても、また、さらに培養物の抽出物、菌体抽出
物、培地抽出物の如き有機溶媒等による抽出操作を加え
ることによって得られる抽出物いずれであっても用いる
ことができることは言うまでもない。
【００１８】本発明で用いられる簡単な化学的処理と
は、培養物に対する化学的処理が（Ｒ）−（−）−マッ
ソイアラクトンを生成するものであればよく、公知の反
応を単独で用いても、またこれらを適宜組み合わせても
よい。
は、培養物に対する化学的処理が（Ｒ）−（−）−マッ
ソイアラクトンを生成するものであればよく、公知の反
応を単独で用いても、またこれらを適宜組み合わせても
よい。
【００１９】培養物に対する化学的処理としては具体的
には酸処理を最も好ましい例として示すことができる。
また、初めに水酸化ナトリウムの如きアルカリで処理
し、引き続き酸で処理してもよい。また、酸処理後、有
機溶媒中ピリジン存在下オキシ塩化リン処理などの脱水
処理を行ってもよい。一方、培養抽出物に対する化学的
処理としては、上記例のみならず有機溶媒中脱水縮合剤
を作用させることによっても達成される。具体的には有
機溶媒中触媒量のジメチルアミノピリジン存在下ジシク
ロヘキシルカルボジイミドを作用させることを例示でき
る。これらの化学的処理は、これらを繰り返しあるいは
適宜組み合わせて用いることも可能である。
には酸処理を最も好ましい例として示すことができる。
また、初めに水酸化ナトリウムの如きアルカリで処理
し、引き続き酸で処理してもよい。また、酸処理後、有
機溶媒中ピリジン存在下オキシ塩化リン処理などの脱水
処理を行ってもよい。一方、培養抽出物に対する化学的
処理としては、上記例のみならず有機溶媒中脱水縮合剤
を作用させることによっても達成される。具体的には有
機溶媒中触媒量のジメチルアミノピリジン存在下ジシク
ロヘキシルカルボジイミドを作用させることを例示でき
る。これらの化学的処理は、これらを繰り返しあるいは
適宜組み合わせて用いることも可能である。
【００２０】上記酸処理に用いることのできる酸として
は必要に応じて適宜選択することができる。具体的には
硫酸あるいはリン酸を好ましく例示することができる。
は必要に応じて適宜選択することができる。具体的には
硫酸あるいはリン酸を好ましく例示することができる。
【００２１】化学的処理を行う際の溶媒は、液体培地を
用いた培養物を直接用いる場合には特に必要とせず、上
記の酸を直接培地に添加するのみであることを特徴とす
る。菌体あるいは各種抽出物を用いる際あるいは液体培
地以外の培地で培養する際には適宜溶媒と組み合わせて
用いる。いずれの場合にも酸の添加量は制限されるもの
ではないが、例えば反応液中の濃度が０．０１規定から
６規定の範囲を好ましく例示できる。より好ましくは
０．１規定から１規定の範囲を例示できる。
用いた培養物を直接用いる場合には特に必要とせず、上
記の酸を直接培地に添加するのみであることを特徴とす
る。菌体あるいは各種抽出物を用いる際あるいは液体培
地以外の培地で培養する際には適宜溶媒と組み合わせて
用いる。いずれの場合にも酸の添加量は制限されるもの
ではないが、例えば反応液中の濃度が０．０１規定から
６規定の範囲を好ましく例示できる。より好ましくは
０．１規定から１規定の範囲を例示できる。
【００２２】溶媒の種類は適宜選択することができる。
具体的には水、メタノール、エタノール、ジエチルエー
テル、テトラヒドロフラン、ベンゼン、トルエン等を例
示することができる。
具体的には水、メタノール、エタノール、ジエチルエー
テル、テトラヒドロフラン、ベンゼン、トルエン等を例
示することができる。
【００２３】反応温度は必要に応じて適宜選択でき、例
えば室温から還流温度の範囲を好ましく例示できる。よ
り好ましくは還流温度を例示できる。反応時間としては
約１時間〜６時間の範囲を例示することができる。
えば室温から還流温度の範囲を好ましく例示できる。よ
り好ましくは還流温度を例示できる。反応時間としては
約１時間〜６時間の範囲を例示することができる。
【００２４】その後、（Ｒ）−（−）−マッソイアラク
トンの物理化学的性質を利用した通常の分離手段を用い
て目的の物質を得る。例えば、蒸留、水蒸気蒸留、溶剤
抽出、イオン交換、吸着または分配カラムクロマトグラ
フィー、ゲルろ過、透析法、沈殿法等を単独あるいは適
宜組み合わせて抽出、精製する。
トンの物理化学的性質を利用した通常の分離手段を用い
て目的の物質を得る。例えば、蒸留、水蒸気蒸留、溶剤
抽出、イオン交換、吸着または分配カラムクロマトグラ
フィー、ゲルろ過、透析法、沈殿法等を単独あるいは適
宜組み合わせて抽出、精製する。
【００２５】必要に応じて前々項の反応混合物を溶媒抽
出後、減圧濃縮し、残渣を得る。この残渣を再び溶媒に
溶解あるいは懸濁させ、酸添加後再度加熱処理を施し、
前述の如き後処理を行うことにより（Ｒ）−（−）−マ
ッソイアラクトンの収率を向上させることができる。溶
媒と酸の組み合わせは適宜選択すればよく、水中硫酸あ
るいはリン酸を好ましく例示することができる。さらに
好ましくはベンゼンあるいはトルエン中ｐ−トルエンス
ルホン酸を例示することができる。また、酸処理以外の
方法として、他の公知の脱水法、例えばピリジン中オキ
シ塩化リンを作用させることにより同様に（Ｒ）−
（−）−マッソイアラクトンを得ることができる。
出後、減圧濃縮し、残渣を得る。この残渣を再び溶媒に
溶解あるいは懸濁させ、酸添加後再度加熱処理を施し、
前述の如き後処理を行うことにより（Ｒ）−（−）−マ
ッソイアラクトンの収率を向上させることができる。溶
媒と酸の組み合わせは適宜選択すればよく、水中硫酸あ
るいはリン酸を好ましく例示することができる。さらに
好ましくはベンゼンあるいはトルエン中ｐ−トルエンス
ルホン酸を例示することができる。また、酸処理以外の
方法として、他の公知の脱水法、例えばピリジン中オキ
シ塩化リンを作用させることにより同様に（Ｒ）−
（−）−マッソイアラクトンを得ることができる。
【００２６】本発明者らは上記の微生物培養物の菌体に
下記式
下記式
【００２７】
【化７】 で示されるエキソフィリンＡ（Ｅｘｏｐｈｉｌｉｎ
Ａ）が含まれることを確認した。確認方法は以下の通り
である。培養物より菌体を分離し、クロロホルム−メタ
ノール抽出画分を得た。次いで、本画分をゲルろ過、引
き続き逆相ＨＰＬＣに供し、エキソフィリンＡを得た。
本確認試験によって得られたエキソフィリンＡの１Ｈ
ＮＭＲスペクトル（溶媒ＣＤ３ＯＤ：ＣＤＣｌ３＝３：
１）を図１に示す。
Ａ）が含まれることを確認した。確認方法は以下の通り
である。培養物より菌体を分離し、クロロホルム−メタ
ノール抽出画分を得た。次いで、本画分をゲルろ過、引
き続き逆相ＨＰＬＣに供し、エキソフィリンＡを得た。
本確認試験によって得られたエキソフィリンＡの１Ｈ
ＮＭＲスペクトル（溶媒ＣＤ３ＯＤ：ＣＤＣｌ３＝３：
１）を図１に示す。
【００２８】したがって、本発明に記した微生物の培養
物を酸処理することにより（Ｒ）−（−）−マッソイア
ラクトンが生じる反応は、エキソフィリンＡの如き３，
５−ジヒドロキシデカン酸のエステル結合による多量体
および３，５−ジヒドロキシデカン酸自体を中間体とし
て考えることができる。
物を酸処理することにより（Ｒ）−（−）−マッソイア
ラクトンが生じる反応は、エキソフィリンＡの如き３，
５−ジヒドロキシデカン酸のエステル結合による多量体
および３，５−ジヒドロキシデカン酸自体を中間体とし
て考えることができる。
【００２９】本発明により得られたマッソイアラクトン
は比旋光度（［α］Ｄ）が−１１４°（ｃ ０．１４）
であった。文献値（［α］Ｄ−１１４．５° Ｔｅｔｒ
ａｈｅｄｒｏｎ：Ａｓｓｙｍｍｅｔｒｙ ４，１０１７
−１０２６（１９９３））との比較から本発明により得
られたマッソイアラクトンはＲの絶対配置を有し、９９
％以上の光学純度であることが確認された。加えて本発
明により製造される（Ｒ）−（−）−マッソイアラクト
ンは既知の方法により製造された（Ｒ）−（−）−マッ
ソイアラクトンと同等の持続性のあるマイルドな甘いコ
コナッツミルク様の香気を有している。
は比旋光度（［α］Ｄ）が−１１４°（ｃ ０．１４）
であった。文献値（［α］Ｄ−１１４．５° Ｔｅｔｒ
ａｈｅｄｒｏｎ：Ａｓｓｙｍｍｅｔｒｙ ４，１０１７
−１０２６（１９９３））との比較から本発明により得
られたマッソイアラクトンはＲの絶対配置を有し、９９
％以上の光学純度であることが確認された。加えて本発
明により製造される（Ｒ）−（−）−マッソイアラクト
ンは既知の方法により製造された（Ｒ）−（−）−マッ
ソイアラクトンと同等の持続性のあるマイルドな甘いコ
コナッツミルク様の香気を有している。
【００３０】本発明により製造されたマッソイアラクト
ンは既知の方法により製造された（Ｒ）−（−）−マッ
ソイアラクトンと同等の香調を有することから、従来の
方法で製造された（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトン
を含有する香料組成物を製造するのと同様の方法で、本
発明により製造された（Ｒ）−（−）−マッソイアラク
トンを香気香味の有効成分として含有することを特徴と
する香料組成物を製造することができる。また、この香
料組成物を添加して、従来同様の風味を持つ果汁飲料、
炭酸飲料、アイスクリーム、洋菓子の如き飲食品類、タ
バコ類、シャンプー、ポマード、口紅の如き香粧品類、
室内芳香消臭剤、歯磨き、消毒用洗剤、シロップ剤の如
き保健・医薬品を提供できる。
ンは既知の方法により製造された（Ｒ）−（−）−マッ
ソイアラクトンと同等の香調を有することから、従来の
方法で製造された（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトン
を含有する香料組成物を製造するのと同様の方法で、本
発明により製造された（Ｒ）−（−）−マッソイアラク
トンを香気香味の有効成分として含有することを特徴と
する香料組成物を製造することができる。また、この香
料組成物を添加して、従来同様の風味を持つ果汁飲料、
炭酸飲料、アイスクリーム、洋菓子の如き飲食品類、タ
バコ類、シャンプー、ポマード、口紅の如き香粧品類、
室内芳香消臭剤、歯磨き、消毒用洗剤、シロップ剤の如
き保健・医薬品を提供できる。
【００３１】以下に本発明実施例を示すが、本発明は実
施例に限定されるものではない。
施例に限定されるものではない。
【００３２】
〈培養および集菌〉培地としてグルコース １％、Ｌ−
アスパラギン ０．０５％、リン酸二水素カリウム
０．０５％を海水に溶解しｐＨ７．０に調整したものを
用いた。上記の液体培地５０ｍＬにエキソフィリンＡを
生産するエキソフィアラ・ピシフィラＮＩ １０１０２
株（微工研菌寄第１４２３２号）を一白金耳接種し、２
５℃で４日間振とう培養した（１）。さらに同じ組成の
液体培地５００ｍＬに（１）を加え、２５℃で４日間振
とう培養した（２）。最後に同じ組成の培地１５Ｌに
（２）を加え２５℃で１０日間培養した。
アスパラギン ０．０５％、リン酸二水素カリウム
０．０５％を海水に溶解しｐＨ７．０に調整したものを
用いた。上記の液体培地５０ｍＬにエキソフィリンＡを
生産するエキソフィアラ・ピシフィラＮＩ １０１０２
株（微工研菌寄第１４２３２号）を一白金耳接種し、２
５℃で４日間振とう培養した（１）。さらに同じ組成の
液体培地５００ｍＬに（１）を加え、２５℃で４日間振
とう培養した（２）。最後に同じ組成の培地１５Ｌに
（２）を加え２５℃で１０日間培養した。
【００３３】〈化学的処理と精製〉上記の培養物（１０
０ｍＬ）に濃硫酸（０．２９ｍＬ）を加え、４時間加熱
還流した。反応液を室温に戻し、５規定水酸化ナトリウ
ム水溶液で中性とした後、ジエチルエーテル（５０ｍ
Ｌ）で３回抽出した。抽出液を濃縮後、得られた残渣を
シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ Ｋ
ｉｅｓｅｌｇｅｌ ６０，Ａｒｔ．７７３４ １０ｇ；
溶出溶媒 ヘキサン：酢酸エチル＝５：１）で精製し、
１．４ｍｇの（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトンを無
色油状物質として得た。本法により得られた（Ｒ）−
（−）−マッソイアラクトンの物理化学的データを以下
に示す。
０ｍＬ）に濃硫酸（０．２９ｍＬ）を加え、４時間加熱
還流した。反応液を室温に戻し、５規定水酸化ナトリウ
ム水溶液で中性とした後、ジエチルエーテル（５０ｍ
Ｌ）で３回抽出した。抽出液を濃縮後、得られた残渣を
シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ Ｋ
ｉｅｓｅｌｇｅｌ ６０，Ａｒｔ．７７３４ １０ｇ；
溶出溶媒 ヘキサン：酢酸エチル＝５：１）で精製し、
１．４ｍｇの（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトンを無
色油状物質として得た。本法により得られた（Ｒ）−
（−）−マッソイアラクトンの物理化学的データを以下
に示す。
【００３４】１Ｈ ＮＭＲ（９０ＭＨｚ：ＣＤＣｌ３）
スペクトルデータ δ０．９０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ） １．１−１．９（ｍ，８Ｈ） ２．３６（２Ｈ，ｍ） ４．４５（１Ｈ，ｍ） ６．１０（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１０，２Ｈｚ） ７．００（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１０，５Ｈｚ） 比旋光度［α］Ｄ−１１４°（ｃ ０．１４，ＣＨＣｌ
３
スペクトルデータ δ０．９０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ） １．１−１．９（ｍ，８Ｈ） ２．３６（２Ｈ，ｍ） ４．４５（１Ｈ，ｍ） ６．１０（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１０，２Ｈｚ） ７．００（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１０，５Ｈｚ） 比旋光度［α］Ｄ−１１４°（ｃ ０．１４，ＣＨＣｌ
３
【００３５】〈エキソフィリンＡの確認試験〉上記培養
物（１５Ｌ）より菌体を分離し、５倍量のクロロホルム
−メタノール（２：１）を加え、ディスパーサーで５分
間（３回）、超音波で５分間抽出した。抽出液をろ過し
た後、ろ液の４分の１量の水を加え二層分配した。有機
層を脱水後濃縮乾固した。次いで、本画分をゲルろ過
（ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＨＷ−４０：移動相 アセト
ン）で精製した。エキソフィリンＡ含有画分を引き続き
逆相ＨＰＬＣ（ＯＤＳ Ｈｉｂａｒ ＲＴ２５０−１０
Ｌｉｃｈｒｏｓｏｒｂ ＲＰ−１８：移動相 アセト
ニトリル：水：トリフルオロ酢酸＝３：１：０．００２
流量 ２ｍＬ／分）に供し、保持時間１５分にピーク
を示すエキソフィリンＡを得た。
物（１５Ｌ）より菌体を分離し、５倍量のクロロホルム
−メタノール（２：１）を加え、ディスパーサーで５分
間（３回）、超音波で５分間抽出した。抽出液をろ過し
た後、ろ液の４分の１量の水を加え二層分配した。有機
層を脱水後濃縮乾固した。次いで、本画分をゲルろ過
（ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＨＷ−４０：移動相 アセト
ン）で精製した。エキソフィリンＡ含有画分を引き続き
逆相ＨＰＬＣ（ＯＤＳ Ｈｉｂａｒ ＲＴ２５０−１０
Ｌｉｃｈｒｏｓｏｒｂ ＲＰ−１８：移動相 アセト
ニトリル：水：トリフルオロ酢酸＝３：１：０．００２
流量 ２ｍＬ／分）に供し、保持時間１５分にピーク
を示すエキソフィリンＡを得た。
【００３６】
【発明の効果】本発明の効果を列挙すれば以下の如くな
る。 （１）微生物の培養物に対して分離操作なしに直接化学
的処理を行い、最低一段階の化学反応で（Ｒ）−（−）
−マッソイアラクトンを得ることができるため簡便であ
る。 （２）微生物の培養物を用いるため、（Ｒ）−（−）−
マッソイアラクトンの用時大量調製が可能となる。 （３）得られた（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトンは
高い光学純度を有し、従来の製造法と同等の品質を提供
することができる。 （４）特殊な試薬を用いることがないため廃液等の処理
が平易で安全である。
る。 （１）微生物の培養物に対して分離操作なしに直接化学
的処理を行い、最低一段階の化学反応で（Ｒ）−（−）
−マッソイアラクトンを得ることができるため簡便であ
る。 （２）微生物の培養物を用いるため、（Ｒ）−（−）−
マッソイアラクトンの用時大量調製が可能となる。 （３）得られた（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトンは
高い光学純度を有し、従来の製造法と同等の品質を提供
することができる。 （４）特殊な試薬を用いることがないため廃液等の処理
が平易で安全である。
【００３７】
【図１】エキソフィリンＡの１Ｈ ＮＭＲスペクトル
（溶媒 ＣＤ３ＯＤ：ＣＤＣｌ３＝３：１）を示す。
（溶媒 ＣＤ３ＯＤ：ＣＤＣｌ３＝３：１）を示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 // Ａ２４Ｂ 15/40 Ａ２４Ｂ 15/40 (Ｃ１２Ｐ 7/62 Ｃ１２Ｒ 1:645） (Ｃ１２Ｐ 7/62 Ｃ１２Ｒ 1:77） (Ｃ１２Ｐ 7/62 Ｃ１２Ｒ 1:885） (72)発明者 土志田 純子 東京都八王子市北野町559−６ 日本水産 株式会社中央研究所内
Claims (8)
- 【請求項１】 微生物を培養し、その培養物に対し化学
的処理を施すことにより下記式 【化１】 で示される化合物（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトン
（Ｍａｓｓｏｉａｌａｃｔｏｎｅ）を製造することを特
徴とする（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトンの製造方
法。 - 【請求項２】 微生物が下記式 【化２】 （ただし、ｎ≧０の整数，Ｒ１−Ｒ５は任意の官能基）
で示される化合物を産生する微生物である請求項１記載
の（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトンの製造法。 - 【請求項３】 微生物がエキソフィアラ（Ｅｘｏｐｈｉ
ａｌａ）属，フサリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属，アウ
レオバシディウム（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ）属，
トリコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）属のいずれか
に属する微生物である請求項１記載の（Ｒ）−（−）−
マッソイアラクトンの製造法。 - 【請求項４】 エキソフィアラ属に属する微生物がエキ
ソフィアラ・ピシフィラ（Ｅｘｏｐｈｉａｌａ ｐｉｓ
ｃｉｐｈｉｌａ）である請求項３記載の（Ｒ）−（−）
−マッソイアラクトンの製造法。 - 【請求項５】 エキソフィアラ・ピシフィラがエキソフ
ィアラ・ピシフィラＮＩ １０１０２（微工研菌寄第１
４２３２号）である請求項４記載の（Ｒ）−（−）−マ
ッソイアラクトンの製造法。 - 【請求項６】 化学的処理が酸処理である請求項１乃至
５記載のいずれかの（Ｒ）−（−）−マッソイアラクト
ンの製造法。 - 【請求項７】 請求項１乃至６に示すいずれかの方法で
製造される（Ｒ）−（−）−マッソイアラクトン。 - 【請求項８】 請求項７記載の（Ｒ）−（−）−マッソ
イアラクトンを有効成分として含有することを特徴とす
る香料組成物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21231895A JP3779751B2 (ja) | 1995-07-18 | 1995-07-18 | （ｒ）−（−）−マッソイアラクトンの製造方法・その製造物および香料組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21231895A JP3779751B2 (ja) | 1995-07-18 | 1995-07-18 | （ｒ）−（−）−マッソイアラクトンの製造方法・その製造物および香料組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0931071A true JPH0931071A (ja) | 1997-02-04 |
| JP3779751B2 JP3779751B2 (ja) | 2006-05-31 |
Family
ID=16620568
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP21231895A Expired - Fee Related JP3779751B2 (ja) | 1995-07-18 | 1995-07-18 | （ｒ）−（−）−マッソイアラクトンの製造方法・その製造物および香料組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3779751B2 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6245376B1 (en) * | 1998-03-12 | 2001-06-12 | International Flavors & Fragrances Inc. | Cola beverages comprising tastand additives from Saccharum officinarum leaves |
| CN102653531A (zh) * | 2011-03-04 | 2012-09-05 | 上海爱普植物科技有限公司 | 一种马索亚内酯的合成方法 |
| JP2017507673A (ja) * | 2014-02-27 | 2017-03-23 | キャラボット | アウレオバシジウム プルランス（ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｐｕｌｌｕｌａｎｓ）の株からラクトンを生成する方法 |
| WO2024227943A1 (en) * | 2023-05-04 | 2024-11-07 | Firmenich Sa | Method for the production of lactones |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20260002184A1 (en) * | 2024-06-27 | 2026-01-01 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture | Method for producing massoia lactone from liamocins |
-
1995
- 1995-07-18 JP JP21231895A patent/JP3779751B2/ja not_active Expired - Fee Related
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|---|---|---|---|---|
| US6245376B1 (en) * | 1998-03-12 | 2001-06-12 | International Flavors & Fragrances Inc. | Cola beverages comprising tastand additives from Saccharum officinarum leaves |
| CN102653531A (zh) * | 2011-03-04 | 2012-09-05 | 上海爱普植物科技有限公司 | 一种马索亚内酯的合成方法 |
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| US10196659B2 (en) | 2014-02-27 | 2019-02-05 | Charabot | Method for producing lactones from a strain of Aureobasidium pullulans |
| WO2024227943A1 (en) * | 2023-05-04 | 2024-11-07 | Firmenich Sa | Method for the production of lactones |
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3779751B2 (ja) | 2006-05-31 |
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