JPH0940688A - 新規アントラサイクリン抗生物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 新規な制がん性抗生物質を提供する。 【解決手段】 下記一般式（Ａ）、 【化１】 （式中、Ｒ₁はメトキシカルボニル基または水酸基を、
Ｒ₂は水素原子または水酸基を表す。）で示される新規
アントラサイクリン抗生物質または薬理学的に許容され
るそれらの付加塩。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、制がん作用を有する新
規なアントラサイクリン抗生物質に関する。

【０００２】

【従来の技術】アントラサイクリン系抗生物質として
は、従来から放線菌の培養液から得られるダウノマイシ
ン（米国特許第３，６１６，２４２号）およびアドリア
マイシン（米国特許第３，５９０，０２８号）が知られ
ており、これらの化合物は、実験腫瘍に対して広い抗が
んスペクトルを有し、がん化学療法剤として臨床的にも
広く利用されている。しかし、ダウノマイシンおよびア
ドリアマイシンはかなり強力な抗がん作用を示すが決し
て満足できるものではない。そのため発酵法、半合成
法、微生物変換法など各種の手段により種々の類縁化合
物を創製する試みが行われており、さらにいくつかのア
ントラサイクリン抗生物質、例えばアクラシノマイシン
ＡおよびＢ（特公昭５１−３４９１５号）、４−デメト
キシ−１１−デオキシダウノマイシン（特開昭５７−２
６４９４号）、ロドマイシン群抗生物質（特開昭５６−
１５２９９号）などが提案されている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】制がん剤としてのアン
トラサイクリン抗生物質は、上述したように、各種の類
縁化合物が提案され、すでに一部は臨床的にも広く利用
されているものもあり、また臨床試験に供されているも
のもある。しかし、毒性、抗がん作用双方について共に
満足できるものはない。しかも制がん剤は、試験管内試
験、動物試験の結果が必ずしも人間の抗がん作用として
反映できないため、多角的な研究が要求される。そのた
め、制がん剤として一応の評価がされているアントラサ
イクリン系抗生物質について、さらに新たな部類に属す
る化合物の提案が望まれている。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、より有用
なアントラサイクリン抗生物質またはその合成中間体と
なり得る新規化合物を提案するため鋭意研究を重ねたと
ころ、アクラシノマイシン生産菌の１株であるストレプ
トミセス・ガリラエウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ
ｇａｌｉｌａｅｕｓ）ＭＡ１４４−Ｍ１株より単離した
抗生物質非生産性変異株が、アグリコン類（例えば、ア
クラビノン、β−ロドマイシノンなど）を基質として新
規なアントラサイクリン抗生物質を生産することを見出
し本発明を完成した。

【０００５】本発明により提供される新規アントラサイ
クリン抗生物質は、一般式（Ａ）

【化４】 （式中、Ｒ₁はメトキシカルボニル基または水酸基を、
Ｒ₂は水素原子または水酸基を表す。）で示される化合
物である。本発明者らは、一般式（Ａ）で示される化合
物のうち、下記式（Ａ−１）で示される抗生物質をＣＧ
１−Ｃ、下記式（Ａ−２）で示される抗生物質をＣＧ２
１−Ｃと命名した。以後、本明細書において各化合物を
上記名称を用いて説明する。

【０００６】

【化５】

【０００７】

【化６】

【０００８】上述の本発明の化合物は、培養白血病細胞
Ｌ１２１０に対して増殖阻止作用を有し、それ自体制が
ん剤として有用である。 （マウス白血病Ｌ１２１０培養細胞に対する増殖阻害作
用）１０％仔牛血清を含むＲＰＭＩ１６４０培地（ロー
ズウエルバーグ研究所）へＬ１２１０細胞を５×１０⁴
個／ｍｌ接種し、これに本発明の物質を０．００１〜１
０μｇ／ｍｌの濃度で添加し、３７℃にて炭酸ガス培養
器中で培養し、対照区に対する５０％増殖阻害濃度を求
めた。なお、本発明の物質は、あらかじめ０．１Ｍ酢酸
（ｐＨ３．０）中に１０ｍｇ／ｍｌ濃度で溶解した後、
Ｄｕｌｂｅｃｃｏ ＰＢＳ（−）（日水製薬株式会社
製）で希釈し、添加した。抗生物質ＣＧ１−Ｃおよび抗
生物質ＣＧ２１−Ｃのマウス白血病Ｌ１２１０培養細胞
に対する５０％増殖阻害濃度（ＩＣ₅₀）は、それぞれ
０．３０および０．０６μｇ／ｍｌであった。

【０００９】上記のアントラサイクリン抗生物質の製造
は、アクラシノマイシン、シネルビンあるいはロドマイ
シン系抗生物質およびその類縁化合物を生産する能力を
有する土壌分離株または公知の菌株を変異源として例え
ば、紫外線あるいはＮ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニ
トロソグアニジン（ＮＴＧ）を用いる通常の変異処理に
より容易に単離される抗生物質（または色素）非生産性
で、アクラビノンおよびβ−ロドマイシノンをそれぞれ
抗生物質ＣＧ１−Ｃおよび抗生物質ＣＧ２１−Ｃに変換
する能力を有する菌株を、適当な栄養源からなる培地に
培養し、アクラビノンおよびβ−ロドマイシノンを適当
な時期に添加することにより行うことができる。

【００１０】これらの菌株のうち具体的なものとして
は、アントラサイクリン抗生物質アクラシノマイシンＡ
の生産菌として知られているストレプトミセス・ガリラ
エウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇａｌｉｌａｅｕ
ｓ）ＭＡ１４４−Ｍ１株（ＡＴＣＣ３１１３３またはＦ
ＥＲＭ Ｐ−２４５５）から単離した抗生物質非生産性
変異株で、かつ上記変換能を有する変異株、ストレプト
ミセス・ガリラエウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇ
ａｌｉｌａｅｕｓ）ＭＡ１４４−Ｍ１．ＫＥ３０３株を
挙げることができるが、上記変換能を有する菌株であれ
ばいかなる属に属する菌株でも用いることができる。該
菌株は、昭和５４年２月８日付で工業技術院微生物工業
技術研究所（現、生命工学工業技術研究所）にＦＥＲＭ
Ｐ−４８０８として寄託され、昭和６３年９月１２日
付でＦＥＲＭ ＢＰ−２０４８として国際寄託に移管さ
れている。

【００１１】以下にＫＥ３０３株の菌学的性状を示す。 （１）形態 良く分枝した基中菌糸より、鉤状〜螺旋状の気中菌糸を
形成し、輪生枝は認められない。成熟した胞子鎖は１０
個以上の胞子の連鎖を認める。胞子の大きさは０．４〜
０．８×０．８〜１．６μｍ位であり、胞子の表面は平
滑である。 （２）各種培地における生育状態（２７℃） 色の記載について（ ）内に示す標準は、コンティナー
・コーポレーション・オブ・アメリカのカラー・ハーモ
ニィ・マニュアル（Ｃｏｎｔａｉｎｅｒ Ｃｏｒｐｏｒ
ａｔｉｎ ｏｆ ＡｍｅｒｉｃａのＣｏｌｏｒ ｈａｒ
ｍｏｎｙ ｍａｎｕａｌ）を用いた。

【００１２】（２−１）シュークロース・硝酸塩寒天培
地 発育は白色〜うす黄（２ｄｂ）を呈し、気中菌糸は着生
せず、溶解性色素も認められない。 （２−２）グルコース・アスパラギン寒天培地 発育はうす黄（１ｂａ）〜黄緑（１・１／２ｅｃ）であ
り、明るい灰色（ｄ）の気中菌糸を着生する。溶解性色
素は認められない。 （２−３）グリセリン・アスパラギン寒天培地 淡黄緑色（１ｃｂ）〜明るい灰味を帯びたオリーブ色
（１・１／２ｇｅ）の発育上に、黄味灰色〜明るい灰色
（２ｄｃ）の気中菌糸を着生し、溶解性色素は認められ
ない。 （２−４）スターチ・無機塩寒天培地 うす黄色（１ｂａ）〜うす黄緑（１ｃｂ）の発育上に、
明るい灰色（２ｆｅ）〜灰（ａ）の気中菌糸を着生し、
溶解性色素は認められない。

【００１３】（２−５）チロシン寒天培地 茶灰味黄褐（３ｇｅ）〜茶灰（４ｅｉ）の発育上に、う
す灰色の気中菌糸を遅れて僅かに着生し、溶解性色素は
黒色を呈する。 （２−６）栄養寒天培地 発育は灰黄味（３ｅｃ）であり、黄味がかった灰色（２
ｄｃ）〜うす灰（ｄ）の気中菌糸を着生する。溶解性色
素は茶色を呈する。 （２−７）イースト・麦芽寒天培地 うすオリーブ茶（２ｇｃ）〜うす黄緑（１・１／２ｅ
ｃ）の発育上に、明るい灰色（３ｆｅ〜３ｉｈ）の気中
菌糸を着生し、溶解性色素は生成しないか、僅かに茶色
を帯びる。 （２−８）オートミール寒天培地 うす黄（２ｄｂ）〜灰黄（３ｅｃ）の発育上に、黄味灰
（２ｄｃ）〜明るい灰（ｄ）の気中菌糸を着生し、溶解
性色素は褐色を帯びる。

【００１４】（３）生理的性質 （３−１）生育温度範囲：マルトース・イースト・エキ
ストラクト寒天培地（マルトース１．０％、酵母エキス
（オリエンタル酵母工業株式会社製）０．４％、糸寒天
３．５％）を使用し、ｐＨ６．０において、２０℃、２
４℃、２７℃、３０℃、３７℃、５０℃の各温度で実験
したところ、５０℃を除いてそのいずれの温度でも生育
するが、最適温度は２７℃〜３７℃付近と思われる。 （３−２）ゼラチンの液化：１５％単純ゼラチン培地の
場合、２０℃で培養したところ、培養１４日目頃から液
化がみられ、その作用は弱い方である。グルコース・ペ
プトン・ゼラチン培地の場合、２０℃で培養したとこ
ろ、培養７日目頃から液化が始まり、その作用は弱い方
〜中程度である。 （３−３）スターチの加水分解：スターチ・無機塩寒天
培地を使用して２７℃で培養したところ、培養５日目頃
から僅かに水解性がみられるが、その作用は弱い方であ
る。 （３−４）スキムミルクの凝固、ペプトン化：培養５日
目頃よりペプトン化が始まり、１７日目頃にはほぼ完了
し、その作用は中程度〜強い方である。凝固はみられな
い。

【００１５】（３−５）メラニン様色素の生成：トリプ
トファン・イースト・ブロス、ペプトン・イースト・鉄
・寒天、およびチロシン寒天培地を使用して２７℃で培
養したところ、いずれの培地でもメラニン様色素の生成
が認められる。 （３−６）各種炭素源の利用性：フリドハム・ゴトリー
ブ寒天培地上に各種の炭素源を加え、２７℃において生
育を見たところ、Ｌ−アラビノース、Ｄ−キシロース、
Ｄ−グルコース、Ｄ−フルクトース、シュークロース、
イノシトール、Ｌ−ラムノース、ラフィノースを利用し
てよく発育し、Ｄ−マンニトールは利用しない。 （３−７）リンゴ酸カルシウムの溶解：リンゴ酸カルシ
ウム寒天培地を使用して２７℃で培養したところ、リン
ゴ酸カルシウムの溶解が認められ、その作用は強い方で
ある。 （３−８）硝酸塩の還元反応：１．０％硝酸ナトリウム
含有ペプトン水を使用して２７℃で培養したところ、陽
性である。

【００１６】本発明の出発物質は下記一般式（Ｂ）、

【化７】 （式中、Ｒ₁はメトキシカルボニル基または水酸基を、
Ｒ₂は水素原子または水酸基を表す。）で示される生物
学的に不活性なアグリコン類である。すなわち、一般式
（Ｂ）において、Ｒ₁がメトキシカルボニル基、Ｒ₂が水
素原子であるアクラビノン、Ｒ₁およびＲ₂が水酸基であ
るβ−ロドマイシノンが用いられ、それぞれ抗生物質Ｃ
Ｇ１−Ｃおよび抗生物質ＣＧ２１−Ｃに変換される。

【００１７】これらの変換用アグリコン類は、それ自体
公知の化合物であり、発酵法（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏ
ｎ，３０，３７８７〜３７９１（１９７４）、Ｊｏｕｒ
ｎａｌｏｆ Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２８（１０），
８３０〜８３４（１９７５）、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，３６（８），１０８０〜１０
８３（１９８３）、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｔｉｂ
ｉｏｔｉｃｓ，３９（７），９０２〜９０９（１９８
６）、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ
ｓ，４０（１），１１６〜１２１（１９８７））、合成
法（Ｃａｎ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．，６５，３１〜３４（１９
８７）、Ｌｉｅｂｉｇｓ Ａｎｎ．Ｃｈｅｍ．，１０，
９４９〜９５３（１９８８）、Ｃｈｅｍ．Ｂｅｒ．，１
１３（９），２９７６〜２９９３（１９８０））のいず
れの方法によっても製造することができる。

【００１８】本発明の抗生物質ＣＧ１−ＣおよびＣＧ２
１−Ｃは、以下に示した方法により製造することができ
る。まず寒天斜面培地（酵母エキス０．３％、可溶性澱
粉１．０％、寒天１．５％、ｐＨ７．２）で培養し、４
〜１０℃で保存された上記の変換能を有する菌株（例え
ばＫＥ３０３株）を例えば澱粉、グルコース、有機窒素
源、無機塩類からなる通常の液体培地へ接種し、２５〜
３２℃にて１〜３日間振盪培養して種母を調製する。次
に通常の液体培地、例えばシュークロース、グルコー
ス、大豆粉、無機塩類よりなる培地へ、上記の種母を１
〜３％接種し、２５〜３２℃にて１５〜４８時間振盪培
養を行い、対数増殖期へ達した培養液に基質として、上
記アグリコン類をメタノールに溶解あるいは懸濁して最
終添加量１０〜５００μｇ／ｍｌとなるように添加し、
さらに４８〜１５０時間培養を続けて微生物変換させ
る。なお、発酵中の発泡を抑制するため、例えばアデカ
ノール（商品名：旭電化工業株式会社製）、シリコーン
−ＫＭ７５（商品名：信越化学株式会社製）などの消泡
剤を適宜添加することができる。

【００１９】微生物変換が完了した培養物から抗生物質
ＣＧ１−ＣおよびＣＧ２１−Ｃを単離、採取するには、
発酵終了後の培養物を遠心分離により菌体と上澄みに分
離し、菌体から目的の抗生物質を含有する粗色素をアセ
トン、クロロホルム、メタノール、酢酸エチル、トルエ
ン、希薄鉱酸もしくは酸性緩衝液などを用いて抽出す
る。これを吸着担体、例えば合成吸着樹脂、シリカゲル
を用いたクロマトグラフィーにより処理するか、陰イオ
ン交換樹脂、陽イオン交換樹脂を用いる処理、ゲル濾
過、向流分配法などの常法を単独あるいは適宜組合せて
精製操作を行う。例えば、粗抽出物を架橋デキストラン
ゲル（セファデックスＬＨ−２０：ファルマシア社製）
カラムでゲル濾過し、目的物を未変換のアグリコンと分
離させ、次いでプレパラティブシリカゲル薄層（ＰＦ
₂₅₄：メルク社製）で溶媒を変えて精製操作を繰り返す
ことにより容易に目的の抗生物質ＣＧ１−ＣおよびＣＧ
２１−Ｃを単離、採取することができる。

【００２０】また抗生物質ＣＧ１−ＣおよびＣＧ２１−
Ｃは、前述したとおりにアミノ糖を有することから、無
機酸または有機酸とのそれ自体公知の造塩反応によっ
て、容易に用いた酸に対応する酸付加塩を製造すること
ができる。好適に用いることのできる酸として、例えば
硫酸、塩酸、臭化水素酸、硝酸、リン酸、酢酸、プロピ
オン酸、マレイン酸、オレイン酸、パルミチン酸、クエ
ン酸、コハク酸、酒石酸、フマル酸、グルタミン酸、パ
ントテン酸、ラウリルスルホン酸、メタンスルホン酸、
ナフタレンスルホン酸などが挙げられる。

【００２１】以下に実施例を挙げ、本発明をさらに詳細
に説明する。なお、下記の説明中特に記載がない限り表
示濃度は重量％である。

【００２２】

【実施例】

実施例１ ストレプトミセス・ガリラエウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙ
ｃｅｓ ｇａｌｉｌａｅｕｓ）ＭＡ１４４−Ｍ１．ＫＥ
３０３株（ＦＥＲＭ ＢＰ−２０４８）のＹＳ（酵母エ
キス０．３％、可溶性澱粉１．０％、寒天１．５％、ｐ
Ｈ７．２）斜面培養より１白金耳を採り、種母培地（可
溶性澱粉０．５％、グルコース０．５％、エスサンミー
ト（商品名：味の素株式会社製）１．０％、酵母エキス
０．１％、食塩０．１％、第二リン酸カリウム０．１
％、硫酸マグネシウム・７水和物０．１％、ｐＨ７．４
に調整、１２０℃、１５分加熱殺菌）１００ｍｌを含む
５００ｍｌ三角フラスコに接種した。これを２８℃にて
２日間回転振とう培養（２００ｒｐｍ）して種母を作成
した。

【００２３】次いで生産培地（エスサンミート（商品
名：：味の素株式会社製）３．０％、可溶性澱粉２．０
％、グルコース１．０％、酵母エキス０．１％、食塩
０．３％、第二リン酸カリウム０．１％、硫酸マグネシ
ウム・７水和物０．１％、炭酸カルシウム０．３％、ミ
ネラル混液０．１％（ｖ／ｖ）、ｐＨ８．２に調整、１
２０℃、１５分加熱殺菌）を５０ｍｌづつ５００ｍｌ三
角フラスコ１００本に入れ、これに上記種母を０．５ｍ
ｌづつ接種した。但し、ミネラル混液は、ＣｕＳＯ₄・
５Ｈ₂Ｏを２．３ｇ、ＦｅＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏを０．４ｇ、
ＭｎＣｌ₂・４Ｈ₂Ｏを３．２ｇ、ＺｎＳＯ₄・２Ｈ₂Ｏを
０．８ｇを蒸留水５００ｍｌに溶解したものである。

【００２４】接種した培地を２８℃で１日間振とう培養
した後、これに基質のアクラビノンのメタノール溶液
（３ｍｇ／ｍｌ）をフラスコ当り０．５ｍｌ（基質量と
して１．５ｍｇ）ずつ添加し、さらに４日間同一条件で
培養を継続した。培養終了後、培養液を集め、遠心分離
により菌体を分離した。集めた菌体にアセトンを５ｌ加
え、撹拌抽出した。これを濾過し、アセトン抽出液を採
り、約０．２ｌまで減圧濃縮した後、リン酸でｐＨ３．
０に調整し、さらにクロロホルムで抽出洗浄した。次い
で４Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨ８．０に調整し、クロロ
ホルム３ｌ（総量）で抽出した。このクロロホルム抽出
液を少量まで減圧濃縮し、これにｎ−ヘキサンを過剰に
加えて沈澱させ、濾過、真空乾燥して、抗生物質ＣＧ１
−Ｃを含む粗粉末を得た。

【００２５】実施例２ 実施例１で得た抗生物質ＣＧ１−Ｃの粗粉末をシリカゲ
ルカラムクロマトグラフィー（φ２０ｍｍ／１００ｇ；
ワコーゲルＣ２００：和光純薬株式会社製）にかけ、ク
ロロホルム／メタノール（１００：１〜２０：１）混液
で展開し、ＣＧ１−Ｃを溶出分取した。得られた画分を
水洗した後、濃縮乾固し、ＣＧ１−Ｃの部分精製粉末を
得た。次にこれを分取用シリカゲル薄層（２０ｃｍ×２
０ｃｍ；シリカゲル６０ＰＦ２５４：メルク社製）を用
いて精製した。薄層の下端より２．０ｃｍの位置に横線
状に塗布し、クロロホルム／メタノール／濃アンモニア
水（６：１：０．１）で展開した。ＣＧ１−Ｃに相当す
る黄色のバンド部分（Ｒｆ：約０．６）をかきとり、ク
ロロホルム／メタノール（７：１）混液で抽出した。抽
出液を水洗した後、濃縮乾固した。これを０．１Ｍ酢酸
緩衝液（ｐＨ３．０）５ｍｌに溶解し、トルエン２ｍｌ
で抽出洗浄した。抽出した残りの水層に０．１Ｎ水酸化
ナトリウムを添加してｐＨ８．０に調整し、クロロホル
ム１０ｍｌで抽出した。水洗した後、無水硫酸ナトリウ
ムで乾燥させ、これを減圧濃縮した。これに過剰のｎ−
ヘキサンを加え、撹拌し、生成した沈澱を濾過集積し、
真空乾燥して抗生物質ＣＧ１−Ｃを３ｍｇ得た。

【００２６】以下に本発明の抗生物質ＣＧ１−Ｃの理化
学的性状を示す。 （１）外観：黄色粉末 （２）融点：１４２〜１４５℃（分解） （３）比旋光度：［α］_D ²⁰ ＋３６゜（ｃ ０．０
１、ＣＨＣｌ₃） （４）分子式：Ｃ₄₂Ｈ₅₂Ｎ₂Ｏ₁₅ （５）ＦＡＢマススペクトル：（（Ｍ＋Ｈ）⁺，Δ−
１．５ｍｍｕ） ８２５．３４３１ （６）ＵＶ吸収スペクトル：９０％メタノール溶液中で
測定した極大吸収は下記のとおりである（単位：ｎ
ｍ）。 λｍａｘ（Ｅ_1cm ^1%）：２２９（４１１）、２６２（２
９４）、２８２（２９４）、４３１（１１５） （７）ＩＲ吸収スペクトル（ＫＢｒ）：特徴的な吸収
は、下記のとおりである（単位：ｃｍ^-1）。 νｍａｘ：１６７２、１６２４

【００２７】（８）¹Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００Ｍ
Ｈｚ、ＣＤＣｌ₃）：主要な吸収は、下記のとおりであ
る。 δＴＭＳ（ｐｐｍ）：１．０９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３
３Ｈｚ），１．２３（ｄ，Ｊ＝６．６０Ｈｚ），１．２
８（ｄ，Ｊ＝６．６０Ｈｚ），１．４３（３Ｈ，ｄ，Ｊ
＝６．６１Ｈｚ），１．８５（ｂｒ ｔ），２．１２
（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．４８Ｈｚ ＆Ｊ＝４．４０Ｈ
ｚ），２．２０（ｓ），２．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１
５．４１Ｈｚ），２．３（１Ｈ），２．５２（１Ｈ，ｄ
ｄ，Ｊ＝１５．４１ ＆ Ｊ＝３．６７Ｈｚ），３．７
０（３Ｈ，ｓ），３．７４（１Ｈ，ｂｒ ｓ），３．７
８（１Ｈ，ｂｒ ｓ），４．００（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．
６０Ｈｚ），４．１１（１Ｈ，ｓ），４．１６（１Ｈ，
ｂｒ ｍ），４．５４（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．６０Ｈ
ｚ），４．６２（１Ｈ，ｂｒ ｑ），４．７４（２Ｈ，
ｂｒ ｓ），５．０４（１Ｈ，ｂｒ ｓ），５．２６
（１Ｈ，ｓ），５．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．６７Ｈ
ｚ），５．２９（１Ｈ，ｓ），５．５２（１Ｈ），７．
３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３４Ｈｚ），７．７０（１
Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３３Ｈｚ），７．７０（１Ｈ，ｓ），
７．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３４Ｈｚ），１２．０５
（１Ｈ，ｂｒ ｓ），１２．６９（１Ｈ，ｂｒ）

【００２８】（９）¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１００Ｍ
Ｈｚ、ＣＤＣｌ₃）：主要な吸収は、下記のとおりであ
る。 δＴＭＳ（ｐｐｍ）：６．６９，１５．６３，１７．４
３，１７．８７，２９．６６，３２．１６，３３．７
７，３４．２０，４３．１８，５２．５２，５７．１
３，６１．５７，６５．３９，６６．６８，６８．２
６，７０．７２，７１．７１，７２．９２，７４．０
３，８３．２９，９４．９０，９７．５０，９９．３
６，１０１．４９，１１４．６９，１１５．８５，１２
０．１７，１２０．９５，１２４．８２，１３１．３
６，１３２．９４，１３３．５３，１３７．３７，１４
２．６４，１５８．４２，１６２．１７，１６２．６
０，１７１．３１，１８１．３９，１９２．７４，１９
４．１３

【００２９】実施例３ ストレプトミセス・ガリラエウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙ
ｃｅｓ ｇａｌｉｌａｅｕｓ）ＭＡ１４４−Ｍ１．ＫＥ
３０３株（ＦＥＲＭ ＢＰ−２０４８）のＹＳ（酵母エ
キス０．３％、可溶性澱粉１．０％、寒天１．５％、ｐ
Ｈ７．２）斜面培養より１白金耳を採り、種母培地（可
溶性澱粉０．５％、グルコース０．５％、エスサンミー
ト（商品名：味の素株式会社製）１．０％、酵母エキス
０．１％、食塩０．１％、第二リン酸カリウム０．１
％、硫酸マグネシウム・７水和物０．１％、ｐＨ７．４
に調整、１２０℃、１５分加熱殺菌）１００ｍｌを含む
５００ｍｌ三角フラスコに接種した。これを２８℃にて
２日間回転振とう培養（２００ｒｐｍ）して種母を作成
した。

【００３０】次いで生産培地（エスサンミート（商品
名：：味の素株式会社製）３．０％、可溶性澱粉２．０
％、グルコース１．０％、酵母エキス０．１％、食塩
０．３％、第二リン酸カリウム０．１％、硫酸マグネシ
ウム・７水和物０．１％、炭酸カルシウム０．３％、ミ
ネラル混液０．１％（ｖ／ｖ）、ｐＨ８．２に調整、１
２０℃、１５分加熱殺菌）を５０ｍｌづつ５００ｍｌ三
角フラスコ１００本に入れ、これに上記種母を０．５ｍ
ｌづつ接種した。但し、ミネラル混液は、ＣｕＳＯ₄・
５Ｈ₂Ｏを２．３ｇ、ＦｅＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏを０．４ｇ、
ＭｎＣｌ₂・４Ｈ₂Ｏを３．２ｇ、ＺｎＳＯ₄・２Ｈ₂Ｏを
０．８ｇを蒸留水５００ｍｌに溶解したものである。

【００３１】接種した培地を２８℃で１日間振とう培養
した後、これに基質のβ−ロドマイシノンのメタノール
溶液（３ｍｇ／ｍｌ）をフラスコ当り０．５ｍｌ（基質
量として１．５ｍｇ）ずつ添加し、さらに４日間同一条
件で培養を継続した。培養終了後、培養液を集め、遠心
分離により菌体を分離した。集めた菌体にアセトンを５
ｌ加え、撹拌抽出した。これを濾過し、アセトン抽出液
を採り、約０．２ｌまで減圧濃縮した後、リン酸でｐＨ
３．０に調整し、さらにクロロホルムで抽出洗浄した。
次いで４Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨ８．０に調整し、ク
ロロホルム３ｌ（総量）で抽出した。このクロロホルム
抽出液を少量まで減圧濃縮し、これにｎ−ヘキサンを過
剰に加えて沈澱させ、濾過、真空乾燥して、抗生物質Ｃ
Ｇ２１−Ｃを含む粗粉末を得た。

【００３２】実施例４ 実施例３で得た抗生物質ＣＧ２１−Ｃの粗粉末を分取用
シリカゲル薄層（２０ｃｍ×２０ｃｍ；シリカゲル６０
ＰＦ２５４：メルク社製）を用いて精製した。薄層の下
端より２．０ｃｍの位置に横線状に塗布し、クロロホル
ム／メタノール／水／酢酸／濃アンモニア水（１２０：
５０：５：１：１）で展開した。ＣＧ２１−Ｃに相当す
る橙色のバンド部分（Ｒｆ：約０．６）をかきとり、ク
ロロホルム／メタノール（５：１）混液で抽出した。こ
の分取用シリカゲル薄層による精製操作をもう一度繰り
返した。得られた抽出液に０．１Ｍ酢酸を加え、酸水転
溶した。水層のｐＨを０．１Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨ
８．０に調整し、クロロホルム２０ｍｌで抽出した。水
洗した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、これを減圧
濃縮した。これに過剰のｎ−ヘキサンを加え、撹拌し、
生成した沈澱を濾過集積し、真空乾燥して抗生物質ＣＧ
２１−Ｃを６ｍｇ得た。

【００３３】以下に本発明の抗生物質ＣＧ２１−Ｃの理
化学的性状を示す。 （１）外観：橙色粉末 （２）融点：１８７〜１９０℃（分解） （３）比旋光度：［α］_D ²⁰ ＋４３゜（ｃ ０．０
２、ＣＨＣｌ₃） （４）分子式：Ｃ₄₀Ｈ₅₀Ｎ₂Ｏ₁₅ （５）ＦＡＢマススペクトル：（（Ｍ＋Ｈ）⁺，Δ−
１．２ｍｍｕ） ７９９．３２７８ （６）ＵＶ吸収スペクトル：９０％メタノール溶液中で
測定した極大吸収は下記のとおりである（単位：ｎ
ｍ）。 λｍａｘ（Ｅ_1cm ^1%）：２０３（２８４）、２３５（５
２８）、２５５（３３９）、２８５（３６０）、４９５
（１８８）、５２９（１２４） （７）ＩＲ吸収スペクトル（ＫＢｒ）：特徴的な吸収
は、下記のとおりである（単位：ｃｍ^-1）。 νｍａｘ：１６００

【００３４】（８）¹Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００Ｍ
Ｈｚ、ＣＤＣｌ₃−ＣＤ₃ＯＤ（１０：１））：主要な吸
収は、下記のとおりである。 δＴＭＳ（ｐｐｍ）：１．１１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈ
ｚ），１．２２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．３０
（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．４２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝
７Ｈｚ），２．１８（ｓ），３．７８（１Ｈ，ｂｒ
ｓ），３．８１（１Ｈ，ｂｒ ｓ），４．０３（１Ｈ，
ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ），４．１３（１Ｈ，ｍ），４．５５
（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ），４．５７（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝
７Ｈｚ），４．８８（１Ｈ），５．０６（１Ｈ，ｂｒ
ｄ），５．１６（１Ｈ，ｂｒ ｓ），５．１８（１Ｈ，
ｓ），５．２９（１Ｈ，ｓ），５．５１（１Ｈ，ｂｒ
ｓ），６．１６（１Ｈ，ｂｒ ｓ），７．３３（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），７．７３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈ
ｚ），７．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）

【００３５】（９）¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１００Ｍ
Ｈｚ、ＣＤＣｌ₃−ＣＤ₃ＯＤ（１０：１））：主要な吸
収は、下記のとおりである。 δＴＭＳ（ｐｐｍ）：６．５３，１５．９１，１７．０
４，１７．９１，２９．２４，３０．３３，３２．６
７，３４．０４，４３．２６，６１．６５，６５．４
５，６６．１７，６６．９８，６８．４８，７０．５
９，７２．１９，７２．１９，７４．２０，８２．３
６，９５．０３，９５．０９，９９．３８，１０１．５
１，１１１．６７，１１２．２８，１１６．２０，１１
９．７７，１２４．８９，１３３．５８，１３５．０
２，１３７．２３，１３８．６８，１５６．５９，１５
７．１６，１６１．３３，１６２．５４，１８６．４
６，１９１．０２，１９５．０６

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 一般式（Ａ） 【化１】 （式中、Ｒ₁はメトキシカルボニル基または水酸基を、
   Ｒ₂は水素原子または水酸基を表す。）で示される新規
   アントラサイクリン抗生物質または薬理学的に許容され
   るそれらの付加塩。
2. 【請求項２】 式（Ａ−１） 【化２】 で示される新規アントラサイクリン抗生物質または薬理
   学的に許容されるそれらの付加塩。
3. 【請求項３】 式（Ａ−２） 【化３】 で示される新規アントラサイクリン抗生物質または薬理
   学的に許容されるそれらの付加塩。