JPH0987268A - ゾフィエリンの精製法 - Google Patents
ゾフィエリンの精製法Info
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- JPH0987268A JPH0987268A JP24296795A JP24296795A JPH0987268A JP H0987268 A JPH0987268 A JP H0987268A JP 24296795 A JP24296795 A JP 24296795A JP 24296795 A JP24296795 A JP 24296795A JP H0987268 A JPH0987268 A JP H0987268A
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- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 殺菌剤または抗血栓剤などに有用なゾフィエ
リンを工業的規模で効率的に精製する方法を提供するこ
と。 【解決手段】 ゾフィエリンまたはゾフィエリンがもつ
ジケトフラン構造の１または２個が開環したジカルボン
酸またはテトラカルボン酸の構造を有する化合物（開環
体）を含有する溶液を塩基性として陰イオン交換樹脂に
吸着させ、該樹脂から酸または無機塩を含む水溶液でゾ
フィエリンまたは開環体を溶出させ、溶出液を酸性とし
てゾフィエリンを析出させる。
リンを工業的規模で効率的に精製する方法を提供するこ
と。 【解決手段】 ゾフィエリンまたはゾフィエリンがもつ
ジケトフラン構造の１または２個が開環したジカルボン
酸またはテトラカルボン酸の構造を有する化合物（開環
体）を含有する溶液を塩基性として陰イオン交換樹脂に
吸着させ、該樹脂から酸または無機塩を含む水溶液でゾ
フィエリンまたは開環体を溶出させ、溶出液を酸性とし
てゾフィエリンを析出させる。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は殺菌剤または抗血栓
剤などに有用なゾフィエリンの精製法に関する。
剤などに有用なゾフィエリンの精製法に関する。
【０００２】
【従来の技術】式（Ｉ）：
【化２】 で表される化合物（ゾフィエリン）は、ゾフィエラ（Zo
pfiella ）属に属する微生物が生産する物質であり、抗
菌活性および抗血栓剤としての活性を有することが知ら
れている（特開平６−１８４１５７号公報）。
pfiella ）属に属する微生物が生産する物質であり、抗
菌活性および抗血栓剤としての活性を有することが知ら
れている（特開平６−１８４１５７号公報）。
【０００３】ゾフィエリンを単離する方法として、ゾフ
ィエラ属に属する微生物を培養して得られる培養液を濾
過し、得られた培養濾液を酸性とした後に酢酸エチルで
抽出し、抽出液をシリカゲルクロマトグラフィーおよび
ゲル濾過クロマトグラフィーを用いて精製し、さらに高
速液体クロマトグラフィーを用いて分取精製する方法が
知られている。
ィエラ属に属する微生物を培養して得られる培養液を濾
過し、得られた培養濾液を酸性とした後に酢酸エチルで
抽出し、抽出液をシリカゲルクロマトグラフィーおよび
ゲル濾過クロマトグラフィーを用いて精製し、さらに高
速液体クロマトグラフィーを用いて分取精製する方法が
知られている。
【０００４】しかし、該方法は、シリカゲルクロマトグ
ラフィーを含む多段階のクロマトグラフィーを使用する
こと、酢酸エチル、ベンゼン等の有機溶剤を多量に使用
することなどから工業的には不利な方法である。また、
ゾフィエリンは該方法により白色粉末として得られてい
るに過ぎず、これまで充分な純度が確保されていない。
ラフィーを含む多段階のクロマトグラフィーを使用する
こと、酢酸エチル、ベンゼン等の有機溶剤を多量に使用
することなどから工業的には不利な方法である。また、
ゾフィエリンは該方法により白色粉末として得られてい
るに過ぎず、これまで充分な純度が確保されていない。
【０００５】一方、ゾフィエリンは、抽出条件等によ
り、ゾフィエリンがもつジケトフラン構造の１または２
個が開環したジカルボン酸またはテトラカルボン酸の構
造を有する化合物となり得ることが知られている（特開
平６−１８４１５７号公報）。
り、ゾフィエリンがもつジケトフラン構造の１または２
個が開環したジカルボン酸またはテトラカルボン酸の構
造を有する化合物となり得ることが知られている（特開
平６−１８４１５７号公報）。
【０００６】しかし、開環体が、いかなる条件下でゾフ
ィエリンとなり得るかについては知られていない。
ィエリンとなり得るかについては知られていない。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】殺菌剤または抗血栓剤
などに有用なゾフィエリンを工業的規模で効率的に精製
する方法を提供することを目的とする。
などに有用なゾフィエリンを工業的規模で効率的に精製
する方法を提供することを目的とする。
【０００８】
【課題を解決するための手段】本発明によれば、ゾフィ
エリンが塩基性条件下で開環体に、開環体が酸性条件下
でゾフィエリンに、それぞれ容易に変換することを利用
することにより、ゾフィエリンを陰イオン交換樹脂を用
いて精製する方法が提供される。
エリンが塩基性条件下で開環体に、開環体が酸性条件下
でゾフィエリンに、それぞれ容易に変換することを利用
することにより、ゾフィエリンを陰イオン交換樹脂を用
いて精製する方法が提供される。
【０００９】すなわち、本発明はゾフィエリンまたは開
環体を含有する溶液を塩基性として陰イオン交換樹脂に
吸着させ、該樹脂から酸または無機塩を含む水溶液でゾ
フィエリンまたは開環体を溶出させ、溶出液を酸性とし
てゾフィエリンを析出させることよりなるゾフィエリン
の精製法を提供する。
環体を含有する溶液を塩基性として陰イオン交換樹脂に
吸着させ、該樹脂から酸または無機塩を含む水溶液でゾ
フィエリンまたは開環体を溶出させ、溶出液を酸性とし
てゾフィエリンを析出させることよりなるゾフィエリン
の精製法を提供する。
【００１０】
【発明の実施の形態】本発明に用いるゾフィエリンまた
は開環体を含有する溶液としては、ゾフィエラ属に属す
る微生物、例えばゾフィエラ・カルバータ（Zopfiella
curvata ）No.37-3株（ＦＥＲＭ Ｐ−１３０６７）
を培養して得られる培養液（特開平６−１８４１５７号
公報）等が挙げられる。
は開環体を含有する溶液としては、ゾフィエラ属に属す
る微生物、例えばゾフィエラ・カルバータ（Zopfiella
curvata ）No.37-3株（ＦＥＲＭ Ｐ−１３０６７）
を培養して得られる培養液（特開平６−１８４１５７号
公報）等が挙げられる。
【００１１】本発明に用いる溶液がゾフィエラ属に属す
る微生物を培養して得られる培養液である場合は、その
まま用いてもよいが、該培養液を遠心分離または濾過を
行うことにより菌体と培養濾液とに分離して、それぞれ
を用いてもよい。菌体を用いる場合、菌体をそのまま、
または菌体を超音波、ボールミル、ホモゲナイザー等で
破砕して用いてもよいし、さらにメタノール、エタノー
ル、プロパノール、ブタノール、アセトン、酢酸エチ
ル、アセトニトリル、クロロホルム等の有機溶媒（以
下、単に有機溶媒ともいう）により抽出して得られる溶
媒抽出物として用いてもよい。培養濾液を用いる場合、
培養濾液をそのまま、または濃縮して用いてもよい。
る微生物を培養して得られる培養液である場合は、その
まま用いてもよいが、該培養液を遠心分離または濾過を
行うことにより菌体と培養濾液とに分離して、それぞれ
を用いてもよい。菌体を用いる場合、菌体をそのまま、
または菌体を超音波、ボールミル、ホモゲナイザー等で
破砕して用いてもよいし、さらにメタノール、エタノー
ル、プロパノール、ブタノール、アセトン、酢酸エチ
ル、アセトニトリル、クロロホルム等の有機溶媒（以
下、単に有機溶媒ともいう）により抽出して得られる溶
媒抽出物として用いてもよい。培養濾液を用いる場合、
培養濾液をそのまま、または濃縮して用いてもよい。
【００１２】本発明に用いる溶液は、水酸化ナトリウ
ム、水酸化カリウム、アンモニア水等で塩基性、好まし
くはｐＨ８〜１４に調整した後、陰イオン交換樹脂、好
ましくは強塩基性陰イオン交換樹脂に吸着させる。な
お、ゾフィエリンから開環体への変換反応は、ｐＨ８の
水溶液中で反応温度３０℃の場合、通常４時間で終了す
る。
ム、水酸化カリウム、アンモニア水等で塩基性、好まし
くはｐＨ８〜１４に調整した後、陰イオン交換樹脂、好
ましくは強塩基性陰イオン交換樹脂に吸着させる。な
お、ゾフィエリンから開環体への変換反応は、ｐＨ８の
水溶液中で反応温度３０℃の場合、通常４時間で終了す
る。
【００１３】陰イオン交換樹脂としては、市販のものと
して、例えばＤＩＡＩＯＮ ＰＡ３０４、ＰＡ３０８、
ＰＡ４１２、（以上、三菱化学社製）、ＡＭＢＥＲＬＩ
ＴＥＩＲＡ−４００、ＩＲＡ−９０４、Ａ−２７（以
上、ローム・アンド・ハース社製）、ＤＯＷＥＸ １、
２、１１（以上、ダウケミカル社製）、ＤＵＯＬＩＴＥ
ＥＳ−１０９、Ａ−１０１Ｄ（以上、デュオライト社
製）等が用いられる。
して、例えばＤＩＡＩＯＮ ＰＡ３０４、ＰＡ３０８、
ＰＡ４１２、（以上、三菱化学社製）、ＡＭＢＥＲＬＩ
ＴＥＩＲＡ−４００、ＩＲＡ−９０４、Ａ−２７（以
上、ローム・アンド・ハース社製）、ＤＯＷＥＸ １、
２、１１（以上、ダウケミカル社製）、ＤＵＯＬＩＴＥ
ＥＳ−１０９、Ａ−１０１Ｄ（以上、デュオライト社
製）等が用いられる。
【００１４】塩基性に調整した溶液に含まれる開環体を
陰イオン交換樹脂に吸着させるためには、該溶液と陰イ
オン交換樹脂とを単に混合するだけでもよいし、陰イオ
ン交換樹脂を充填したカラムに該溶液をＳＶ０.1 〜３
の流速で通液してもよい。
陰イオン交換樹脂に吸着させるためには、該溶液と陰イ
オン交換樹脂とを単に混合するだけでもよいし、陰イオ
ン交換樹脂を充填したカラムに該溶液をＳＶ０.1 〜３
の流速で通液してもよい。
【００１５】開環体を吸着させた陰イオン交換樹脂を洗
浄せずに、または水もしくは水を含む有機溶媒（以下、
含水有機溶媒という）を通液して洗浄後、該陰イオン交
換樹脂に酸もしくは無機塩を含む水または酸もしくは無
機塩を含む含水有機溶媒（以下、溶出液という）をＳＶ
０.１〜３の流速で通液してゾフィエリンまたは開環体
を溶出する。
浄せずに、または水もしくは水を含む有機溶媒（以下、
含水有機溶媒という）を通液して洗浄後、該陰イオン交
換樹脂に酸もしくは無機塩を含む水または酸もしくは無
機塩を含む含水有機溶媒（以下、溶出液という）をＳＶ
０.１〜３の流速で通液してゾフィエリンまたは開環体
を溶出する。
【００１６】酸としては、塩酸、硫酸、硝酸等が用いら
れ、酸性、好ましくはｐＨ１〜４となるように溶出液に
添加される。
れ、酸性、好ましくはｐＨ１〜４となるように溶出液に
添加される。
【００１７】無機塩としては、ナトリウム、カリウム、
カルシウム、アンモニウムからなる塩酸塩、硫酸塩、硝
酸塩、炭酸塩、重炭酸塩等が用いられ、塩濃度が１〜５
ｍｏｌ／Ｌとなるように溶出液に添加される。
カルシウム、アンモニウムからなる塩酸塩、硫酸塩、硝
酸塩、炭酸塩、重炭酸塩等が用いられ、塩濃度が１〜５
ｍｏｌ／Ｌとなるように溶出液に添加される。
【００１８】ゾフィエリンまたは開環体を含む溶出液を
そのまま、または該溶出液に含まれる有機溶媒を留去
後、酸性、好ましくはｐＨ１〜４に調整することによ
り、ゾフィエリンが結晶または沈殿物として析出してく
る。なお、開環体からゾフィエリンへの変換反応は、ｐ
Ｈ２の水溶液中で反応温度３０℃の場合、通常２時間で
終了する。
そのまま、または該溶出液に含まれる有機溶媒を留去
後、酸性、好ましくはｐＨ１〜４に調整することによ
り、ゾフィエリンが結晶または沈殿物として析出してく
る。なお、開環体からゾフィエリンへの変換反応は、ｐ
Ｈ２の水溶液中で反応温度３０℃の場合、通常２時間で
終了する。
【００１９】析出したゾフィエリンは、遠心分離、濾
過、洗浄、乾燥等の通常の操作により、結晶または粉末
として得ることができる。
過、洗浄、乾燥等の通常の操作により、結晶または粉末
として得ることができる。
【００２０】
実施例１ ゾフィエラ・カルバータ No.37-3株をポテトデキストロ
ース培地（ディフコ社製）を含有する液体培地（ｐＨ
７.０）に植菌し、２５℃で５日間培養した。得られた
培養液をポテトデキストロース培地にポリペプトン０.
１％、酵母エキス０.１％、トマトジュース（食塩添
加、カゴメ社製）１０％（Ｗ／Ｗ）を添加してなる培地
（ｐＨ７.０）に接種し、１４０ｒｐｍ、２５℃で１２
日間振盪培養を行った。
ース培地（ディフコ社製）を含有する液体培地（ｐＨ
７.０）に植菌し、２５℃で５日間培養した。得られた
培養液をポテトデキストロース培地にポリペプトン０.
１％、酵母エキス０.１％、トマトジュース（食塩添
加、カゴメ社製）１０％（Ｗ／Ｗ）を添加してなる培地
（ｐＨ７.０）に接種し、１４０ｒｐｍ、２５℃で１２
日間振盪培養を行った。
【００２１】培養終了後、培養液１４Ｌに同量のアセト
ンを添加して１時間攪拌後、濾過して濾液を得た。濾液
を吸着レジンＳＰ−２０７（三菱化学社製）３５０ｍｌ
に吸着させ、６０％アセトン１０５０ｍｌで洗浄した
後、７０％アセトンで溶出した。溶出液を蒸発乾固させ
た後、メタノール１００ｍｌを添加して溶解させた。溶
解液に水４０ｍｌを添加し、室温にて４時間攪拌した
後、分離機にて回収して乾燥させることにより高速液体
クロマトグラフィー（以下、ＨＰＬＣという）純度９０
％のゾフィエリンの粉末が５.７ｇ得られた。
ンを添加して１時間攪拌後、濾過して濾液を得た。濾液
を吸着レジンＳＰ−２０７（三菱化学社製）３５０ｍｌ
に吸着させ、６０％アセトン１０５０ｍｌで洗浄した
後、７０％アセトンで溶出した。溶出液を蒸発乾固させ
た後、メタノール１００ｍｌを添加して溶解させた。溶
解液に水４０ｍｌを添加し、室温にて４時間攪拌した
後、分離機にて回収して乾燥させることにより高速液体
クロマトグラフィー（以下、ＨＰＬＣという）純度９０
％のゾフィエリンの粉末が５.７ｇ得られた。
【００２２】得られたゾフィエリン５ｇを水５００ｍｌ
に懸濁後、水酸化ナトリウムによりｐＨ１０に調整し、
４時間攪拌した。なお、得られた溶液についてＨＰＬＣ
および薄層クロマトグラフィー（以下、ＴＬＣという）
を用いて以下の条件で分析したところ、該溶液中には開
環体のみが検出された。 ＨＰＬＣ カラム：GL-pack nucleosil 5C18 I.D.4.6mm×150mm
（GLサイエンス社製） 移動層：０.０５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６）／アセトニ
トリル＝４／６ カラム温度：３５℃ 流量：１.０ｍｌ／Ｌ 検出：ＵＶ２５４ｎｍ 保持時間：ゾフィエリン；９分、開環体；１.７分 ＴＬＣ プレート：Ｍｅｒｃｋ ＨＰＴＬＣ Ｆ254 展開相：トルエン：アセトン：酢酸＝３６：１：１ Ｒｆ値：ゾフィエリン；０.５、開環体；０.１ 次に、該溶液をＤＩＡＩＯＮ ＰＡ４１２を充填したカ
ラム（φ３ｃｍ×１８ｃｍ）に流速１２５ｍｌ／ｈで通
液して吸着させ、水２５０ｍｌを通液して未吸着物を除
去した後、１Ｍ硫酸ナトリウムを通液して溶出を行い、
溶出液６２５ｍｌを開環体画分として取得した。この画
分を１２Ｎ塩酸にてｐＨ２に調整し、生じた結晶をバス
ケット分離機にて回収後、乾燥させることにより、ＨＰ
ＬＣ純度９５％の結晶が４.５ｇ得られた。得られた結
晶について、 1Ｈ−ＮＭＲおよび13Ｃ−ＮＭＲによる分
析を行った。
に懸濁後、水酸化ナトリウムによりｐＨ１０に調整し、
４時間攪拌した。なお、得られた溶液についてＨＰＬＣ
および薄層クロマトグラフィー（以下、ＴＬＣという）
を用いて以下の条件で分析したところ、該溶液中には開
環体のみが検出された。 ＨＰＬＣ カラム：GL-pack nucleosil 5C18 I.D.4.6mm×150mm
（GLサイエンス社製） 移動層：０.０５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６）／アセトニ
トリル＝４／６ カラム温度：３５℃ 流量：１.０ｍｌ／Ｌ 検出：ＵＶ２５４ｎｍ 保持時間：ゾフィエリン；９分、開環体；１.７分 ＴＬＣ プレート：Ｍｅｒｃｋ ＨＰＴＬＣ Ｆ254 展開相：トルエン：アセトン：酢酸＝３６：１：１ Ｒｆ値：ゾフィエリン；０.５、開環体；０.１ 次に、該溶液をＤＩＡＩＯＮ ＰＡ４１２を充填したカ
ラム（φ３ｃｍ×１８ｃｍ）に流速１２５ｍｌ／ｈで通
液して吸着させ、水２５０ｍｌを通液して未吸着物を除
去した後、１Ｍ硫酸ナトリウムを通液して溶出を行い、
溶出液６２５ｍｌを開環体画分として取得した。この画
分を１２Ｎ塩酸にてｐＨ２に調整し、生じた結晶をバス
ケット分離機にて回収後、乾燥させることにより、ＨＰ
ＬＣ純度９５％の結晶が４.５ｇ得られた。得られた結
晶について、 1Ｈ−ＮＭＲおよび13Ｃ−ＮＭＲによる分
析を行った。
【００２３】1Ｈ−ＮＭＲ(400MHz,CDCl3)δ; 0.93(3H,
t,J=7.1Hz), 0.96(3H,t,J=7.1Hz), 1.36-1.44(8H,m),
1.65-1.70(3H,m), 1.74(1H,d,J=4.1Hz), 1.83(1H,m),
2.88-3.10(4H,m), 3.13(1H,dd,J=15.4,14.9Hz), 3.29(1
H,t,J=13.0Hz), 3.99(1H,m)13 Ｃ−ＮＭＲ(100MHz,CDCl3)σ;13.8, 14.0, 18.5, 22.
4, 22.5, 25.0, 28.2, 28.5, 34.2, 34.9, 36.6, 41.7,
71.7, 141.0, 143.4, 145.1, 147.3, 165.0, 165.1, 1
65.4, 165.5 以上の結果より、得られた結晶がゾフィエリンであるこ
とを確認した。
t,J=7.1Hz), 0.96(3H,t,J=7.1Hz), 1.36-1.44(8H,m),
1.65-1.70(3H,m), 1.74(1H,d,J=4.1Hz), 1.83(1H,m),
2.88-3.10(4H,m), 3.13(1H,dd,J=15.4,14.9Hz), 3.29(1
H,t,J=13.0Hz), 3.99(1H,m)13 Ｃ−ＮＭＲ(100MHz,CDCl3)σ;13.8, 14.0, 18.5, 22.
4, 22.5, 25.0, 28.2, 28.5, 34.2, 34.9, 36.6, 41.7,
71.7, 141.0, 143.4, 145.1, 147.3, 165.0, 165.1, 1
65.4, 165.5 以上の結果より、得られた結晶がゾフィエリンであるこ
とを確認した。
【００２４】実施例２ 実施例１と同様な方法で得られた培養液１０Ｌを、水酸
化ナトリウムによりｐＨ８に調製し、４時間攪拌した。
この培養液にＤＩＡＩＯＮ ＰＡ４１２を２５０ｍｌ添
加して５時間攪拌後、ＤＩＡＩＯＮ ＰＡ４１２のみを
回収率９５％で捕集し、カラム（φ３.９ｃｍ×２０ｃ
ｍ）に充填した。カラムに水５００ｍｌを通液して未吸
着物を除去した後、１Ｎ塩酸−メタノールを通液して溶
出を行った。溶出液１.５Ｌをゾフィエリン画分として
取得し、この画分に等量の水を添加した。生じた結晶を
バスケット分離機にて回収後、乾燥させることにより、
ＨＰＬＣ純度９５％のゾフィエリンの結晶が４.５ｇ得
られた。回収率は８１％であった。
化ナトリウムによりｐＨ８に調製し、４時間攪拌した。
この培養液にＤＩＡＩＯＮ ＰＡ４１２を２５０ｍｌ添
加して５時間攪拌後、ＤＩＡＩＯＮ ＰＡ４１２のみを
回収率９５％で捕集し、カラム（φ３.９ｃｍ×２０ｃ
ｍ）に充填した。カラムに水５００ｍｌを通液して未吸
着物を除去した後、１Ｎ塩酸−メタノールを通液して溶
出を行った。溶出液１.５Ｌをゾフィエリン画分として
取得し、この画分に等量の水を添加した。生じた結晶を
バスケット分離機にて回収後、乾燥させることにより、
ＨＰＬＣ純度９５％のゾフィエリンの結晶が４.５ｇ得
られた。回収率は８１％であった。
【００２５】実施例３ 実施例１と同様な方法で得られた培養液１０Ｌを菌体分
離を行い、その菌体を乾燥した。この乾燥菌体１６０ｇ
を水に懸濁させ、懸濁液を水酸化ナトリウムによりｐＨ
１０に調整した。得られた溶液を濾過して得られた溶液
をＤＩＡＩＯＮＰＡ４１２を充填したカラム（φ３ｃｍ
×１８ｃｍ）に流速１２５ｍｌ／ｈで通液し、開環体を
吸着させた。カラムに水２５０ｍｌを通液して未吸着物
を除去した後、１Ｍ塩化ナトリウムを通液して溶出を行
い、開環体画分を８７５ｍｌ取得した。この画分を１２
Ｎ塩酸によりｐＨ２に調整して、生じた結晶をバスケッ
ト分離機にて回収後、乾燥させることにより、ＨＰＬＣ
純度９５％のゾフィエリンの結晶が５ｇ得られた。回収
率は８８％であった。
離を行い、その菌体を乾燥した。この乾燥菌体１６０ｇ
を水に懸濁させ、懸濁液を水酸化ナトリウムによりｐＨ
１０に調整した。得られた溶液を濾過して得られた溶液
をＤＩＡＩＯＮＰＡ４１２を充填したカラム（φ３ｃｍ
×１８ｃｍ）に流速１２５ｍｌ／ｈで通液し、開環体を
吸着させた。カラムに水２５０ｍｌを通液して未吸着物
を除去した後、１Ｍ塩化ナトリウムを通液して溶出を行
い、開環体画分を８７５ｍｌ取得した。この画分を１２
Ｎ塩酸によりｐＨ２に調整して、生じた結晶をバスケッ
ト分離機にて回収後、乾燥させることにより、ＨＰＬＣ
純度９５％のゾフィエリンの結晶が５ｇ得られた。回収
率は８８％であった。
【００２６】実施例４ 実施例１と同様な方法で得られた培養液１０００Ｌを硫
酸によりｐＨ２に調整し、７０℃で１時間攪拌後、濾過
により集菌した。集菌した菌体を水３００Ｌに懸濁さ
せ、懸濁液を水酸化ナトリウムによりｐＨ８に調整し、
４時間攪拌した。この懸濁液を濾過し、開環体を含む濾
液５００Ｌを取得した。得られた濾液をＤＩＡＩＯＮ
ＰＡ４１２を充填したカラム（φ２２ｃｍ×５３ｃｍ）
に流速２０Ｌ／ｈで通液して開環体を吸着させた。カラ
ムに水１４０Ｌを通液して未吸着物を除去した後、１Ｍ
塩化アンモニウムを通液して溶出を行い、開環体画分を
１４０Ｌ取得した。この画分を１２Ｎ塩酸によりｐＨ２
に調整して、生じた結晶をバスケット分離機にて回収
後、乾燥させることにより、ＨＰＬＣ純度９５％のゾフ
ィエリンの結晶が４８９ｇ得られた。回収率は７８％で
あった。
酸によりｐＨ２に調整し、７０℃で１時間攪拌後、濾過
により集菌した。集菌した菌体を水３００Ｌに懸濁さ
せ、懸濁液を水酸化ナトリウムによりｐＨ８に調整し、
４時間攪拌した。この懸濁液を濾過し、開環体を含む濾
液５００Ｌを取得した。得られた濾液をＤＩＡＩＯＮ
ＰＡ４１２を充填したカラム（φ２２ｃｍ×５３ｃｍ）
に流速２０Ｌ／ｈで通液して開環体を吸着させた。カラ
ムに水１４０Ｌを通液して未吸着物を除去した後、１Ｍ
塩化アンモニウムを通液して溶出を行い、開環体画分を
１４０Ｌ取得した。この画分を１２Ｎ塩酸によりｐＨ２
に調整して、生じた結晶をバスケット分離機にて回収
後、乾燥させることにより、ＨＰＬＣ純度９５％のゾフ
ィエリンの結晶が４８９ｇ得られた。回収率は７８％で
あった。
【００２７】
【発明の効果】本発明により、ゾフィエリンの工業的規
模での効率的な精製法が提供される。
模での効率的な精製法が提供される。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 31/34 ＡＤＺ Ａ６１Ｋ 31/34 ＡＤＺ Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｄ (Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｃ１２Ｒ 1:645） (72)発明者 木下 格 山口県防府市協和町２−２−306
Claims (1)
- 【請求項１】 式（Ｉ）： 【化１】 で表される化合物（以下、ゾフィエリンという）または
ゾフィエリンがもつジケトフラン構造の１または２個が
開環したジカルボン酸またはテトラカルボン酸の構造を
有する化合物（以下、開環体という）を含有する溶液を
塩基性として陰イオン交換樹脂に吸着させ、該樹脂から
酸または無機塩を含む水溶液でゾフィエリンまたは開環
体を溶出させ、溶出液を酸性としてゾフィエリンを析出
させることを特徴とするゾフィエリンの精製法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24296795A JPH0987268A (ja) | 1995-09-21 | 1995-09-21 | ゾフィエリンの精製法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24296795A JPH0987268A (ja) | 1995-09-21 | 1995-09-21 | ゾフィエリンの精製法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0987268A true JPH0987268A (ja) | 1997-03-31 |
Family
ID=17096901
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP24296795A Withdrawn JPH0987268A (ja) | 1995-09-21 | 1995-09-21 | ゾフィエリンの精製法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0987268A (ja) |
-
1995
- 1995-09-21 JP JP24296795A patent/JPH0987268A/ja not_active Withdrawn
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A300 | Withdrawal of application because of no request for examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300 Effective date: 20021203 |