JPH10227779A - 糖化ヘモグロビンの測定方法 - Google Patents
糖化ヘモグロビンの測定方法Info
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- JPH10227779A JPH10227779A JP3021797A JP3021797A JPH10227779A JP H10227779 A JPH10227779 A JP H10227779A JP 3021797 A JP3021797 A JP 3021797A JP 3021797 A JP3021797 A JP 3021797A JP H10227779 A JPH10227779 A JP H10227779A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 従来の充填剤を用いて、簡便に糖化ヘモグロ
ビン、特にＨｂＡ１ｃピークの分離が改良された糖化ヘ
モグロビンの測定方法を提供する。 【解決手段】 溶離液、試料の希釈液および洗浄液から
選ばれる少なくとも一つにイオンペア試薬（例、１−ペ
ンタンスルホン酸）が含有されていることを特徴とする
カチオン交換液体クロマトグラフィーによる糖化ヘモグ
ロビンの測定方法。
ビン、特にＨｂＡ１ｃピークの分離が改良された糖化ヘ
モグロビンの測定方法を提供する。 【解決手段】 溶離液、試料の希釈液および洗浄液から
選ばれる少なくとも一つにイオンペア試薬（例、１−ペ
ンタンスルホン酸）が含有されていることを特徴とする
カチオン交換液体クロマトグラフィーによる糖化ヘモグ
ロビンの測定方法。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、カチオン交換液体
クロマトグラフィーによる糖化ヘモグロビンの測定方法
に関する。
クロマトグラフィーによる糖化ヘモグロビンの測定方法
に関する。
【０００２】
【従来の技術】糖化ヘモグロビンとは血液中の糖がその
濃度に比例して赤血球に入った後に、ヘモグロビンと結
合して生成したものであり、その濃度は過去１〜２カ月
間の血液中の平均的な糖濃度を反映すると言われてい
る。そして血糖値や尿糖値に比べ生理的要因に左右され
にくいので、血液中の糖化ヘモグロビンの濃度は、糖尿
病の診断の指標とされ、特に、糖化ヘモグロビンのう
ち、糖化ヘモグロビンＡ１ｃ（以下、ＨｂＡ１ｃとい
う）分画が糖尿病の診断の最適な指標として広く使用さ
れている。
濃度に比例して赤血球に入った後に、ヘモグロビンと結
合して生成したものであり、その濃度は過去１〜２カ月
間の血液中の平均的な糖濃度を反映すると言われてい
る。そして血糖値や尿糖値に比べ生理的要因に左右され
にくいので、血液中の糖化ヘモグロビンの濃度は、糖尿
病の診断の指標とされ、特に、糖化ヘモグロビンのう
ち、糖化ヘモグロビンＡ１ｃ（以下、ＨｂＡ１ｃとい
う）分画が糖尿病の診断の最適な指標として広く使用さ
れている。
【０００３】血液中の糖化ヘモグロビンの濃度の測定
は、主にカチオン交換液体クロマトグラフィー法により
行われている（特公平８−７１９８号公報参照）。血液
中のＨｂＡ１ｃの濃度は、血液試料をカチオン交換液体
クロマトグラフィーにかけて得られるクロマトグラムに
おける全ヘモグロビンピーク（糖化ヘモグロビンピーク
＋非糖化ヘモグロビンピーク）面積を１００とした場合
の、ＨｂＡ１ｃピーク面積の割合（％）として表され
る。この測定方法は、近年では、測定時間の短縮化が進
み、１検体あたり数分間で測定が行われている。また、
この測定の溶離液としては、一般のカチオン交換液体ク
ロマトグラフィー用の緩衝液などが用いられている。
は、主にカチオン交換液体クロマトグラフィー法により
行われている（特公平８−７１９８号公報参照）。血液
中のＨｂＡ１ｃの濃度は、血液試料をカチオン交換液体
クロマトグラフィーにかけて得られるクロマトグラムに
おける全ヘモグロビンピーク（糖化ヘモグロビンピーク
＋非糖化ヘモグロビンピーク）面積を１００とした場合
の、ＨｂＡ１ｃピーク面積の割合（％）として表され
る。この測定方法は、近年では、測定時間の短縮化が進
み、１検体あたり数分間で測定が行われている。また、
この測定の溶離液としては、一般のカチオン交換液体ク
ロマトグラフィー用の緩衝液などが用いられている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】この血液中のＨｂＡ１
ｃ濃度の測定のカチオン交換液体クロマトグラフィーに
おいて、ＨｂＡ１ｃ分画は他の糖化ヘモグロビンピーク
と隣接しており、血液試料によってはＨｂＡ１ｃピーク
に他のピークが重なったりして、正確な測定ができなく
なるという問題があった。しかしながら、この問題を充
填剤の改良で解決するのは大変困難であり、また、カチ
オン交換液体クロマトグラフィーの測定条件の改良によ
って解決するのも難しい。
ｃ濃度の測定のカチオン交換液体クロマトグラフィーに
おいて、ＨｂＡ１ｃ分画は他の糖化ヘモグロビンピーク
と隣接しており、血液試料によってはＨｂＡ１ｃピーク
に他のピークが重なったりして、正確な測定ができなく
なるという問題があった。しかしながら、この問題を充
填剤の改良で解決するのは大変困難であり、また、カチ
オン交換液体クロマトグラフィーの測定条件の改良によ
って解決するのも難しい。
【０００５】本発明は上記問題点を解決するものであ
り、その目的は、従来の充填剤を用いて、簡便に糖化ヘ
モグロビン、特にＨｂＡ１ｃピークの分離が改良された
糖化ヘモグロビンの測定方法を提供することにある。
り、その目的は、従来の充填剤を用いて、簡便に糖化ヘ
モグロビン、特にＨｂＡ１ｃピークの分離が改良された
糖化ヘモグロビンの測定方法を提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明の糖化ヘモグロビ
ンの測定方法は、溶離液、試料の希釈液および洗浄液か
ら選ばれる少なくとも一つにイオンペア試薬が含有され
ていることを特徴とするカチオン交換液体クロマトグラ
フィーによる糖化ヘモグロビンの測定方法である。
ンの測定方法は、溶離液、試料の希釈液および洗浄液か
ら選ばれる少なくとも一つにイオンペア試薬が含有され
ていることを特徴とするカチオン交換液体クロマトグラ
フィーによる糖化ヘモグロビンの測定方法である。
【０００７】本発明において用いられる充填剤として
は、公知のカチオン交換充填剤が用いられる。例えば、
基材となる粒子に、カルボキシル基、スルホン酸基など
のカチオン交換能を有する官能基が導入された充填剤が
挙げられる。上記基材としては、ポリマー系基材（例え
ば、ポリスチレン、ポリアクリレート等の合成高分子微
粒子；ポリアミノ酸、多糖類等の天然高分子微粒子な
ど）、無機系基材（例えば、シリカ粒子など）などが挙
げられる。上記官能基を導入する方法としては、例え
ば、上記の官能基を有するモノマーを材料として重合す
る；基材となる粒子を調製した後、官能基を有する低分
子化合物を化学反応によって結合させるなどの方法が挙
げられる。充填剤の平均粒径としては、１〜２０μｍが
好ましい。
は、公知のカチオン交換充填剤が用いられる。例えば、
基材となる粒子に、カルボキシル基、スルホン酸基など
のカチオン交換能を有する官能基が導入された充填剤が
挙げられる。上記基材としては、ポリマー系基材（例え
ば、ポリスチレン、ポリアクリレート等の合成高分子微
粒子；ポリアミノ酸、多糖類等の天然高分子微粒子な
ど）、無機系基材（例えば、シリカ粒子など）などが挙
げられる。上記官能基を導入する方法としては、例え
ば、上記の官能基を有するモノマーを材料として重合す
る；基材となる粒子を調製した後、官能基を有する低分
子化合物を化学反応によって結合させるなどの方法が挙
げられる。充填剤の平均粒径としては、１〜２０μｍが
好ましい。
【０００８】本発明で用いられる液体クロマトグラフの
システムは、公知の液体クロマトグラフのシステムが用
いられる。すなわち、例えば、図１のようなシステムで
ある。溶離液１が切り替え機構（図示せず）を通り、送
液ポンプ２により試料導入装置３を経由して、充填剤が
充填された分離カラム４に入り、この分離カラム４によ
り試料中の各成分が分離される。分離された各成分は検
出器５によって、例えば、吸光度を測定する等によって
検出される。
システムは、公知の液体クロマトグラフのシステムが用
いられる。すなわち、例えば、図１のようなシステムで
ある。溶離液１が切り替え機構（図示せず）を通り、送
液ポンプ２により試料導入装置３を経由して、充填剤が
充填された分離カラム４に入り、この分離カラム４によ
り試料中の各成分が分離される。分離された各成分は検
出器５によって、例えば、吸光度を測定する等によって
検出される。
【０００９】液体クロマトグラフィー測定の具体的な条
件は、流速は０．２〜５ｍｌ／分程度、検出には４１５
ｎｍの吸光度測定が適当である。測定試料は、溶血され
た血液であり、例えば、血液抗凝固剤（例えば、フッ化
ナトリウムなど）が収容された採血管により採血された
全血血液を、溶血剤（トリトンＸ−１００などの界面活
性剤を含む緩衝液など）で５０〜３００倍程度に溶血・
希釈したものが挙げられる。測定試料の液体クロマトグ
ラフへの注入量は１０〜３００μｌ程度が適当である。
件は、流速は０．２〜５ｍｌ／分程度、検出には４１５
ｎｍの吸光度測定が適当である。測定試料は、溶血され
た血液であり、例えば、血液抗凝固剤（例えば、フッ化
ナトリウムなど）が収容された採血管により採血された
全血血液を、溶血剤（トリトンＸ−１００などの界面活
性剤を含む緩衝液など）で５０〜３００倍程度に溶血・
希釈したものが挙げられる。測定試料の液体クロマトグ
ラフへの注入量は１０〜３００μｌ程度が適当である。
【００１０】本発明において、液体クロマトグラフィー
の溶離条件については、溶離液は、一般のカチオン交換
液体クロマトグラフィー用の緩衝液などが用いられる。
例えば、リン酸、塩酸、酢酸、水酸化ナトリウム、水酸
化カリウムなどの無機酸や無機塩基またはその塩；クエ
ン酸、フタル酸などの有機酸またはその塩など；これら
の混合物が挙げられる。
の溶離条件については、溶離液は、一般のカチオン交換
液体クロマトグラフィー用の緩衝液などが用いられる。
例えば、リン酸、塩酸、酢酸、水酸化ナトリウム、水酸
化カリウムなどの無機酸や無機塩基またはその塩；クエ
ン酸、フタル酸などの有機酸またはその塩など；これら
の混合物が挙げられる。
【００１１】本発明で用いられるイオンペア試薬として
は、溶液中においてイオン対を形成し得る公知の試薬が
用いられる。例えば、塩化テトラブチルアンモニウム、
臭化テトラブチルアンモニウム、リン酸テトラブチルア
ンモニウム等のオニウムイオン塩；１−ヘキサスルホン
酸、１−オクタスルホン酸、１−ペンタンスルホン酸な
どのアルキルスルホン酸およびそれらのナトリウム塩な
どが挙げられる。
は、溶液中においてイオン対を形成し得る公知の試薬が
用いられる。例えば、塩化テトラブチルアンモニウム、
臭化テトラブチルアンモニウム、リン酸テトラブチルア
ンモニウム等のオニウムイオン塩；１−ヘキサスルホン
酸、１−オクタスルホン酸、１−ペンタンスルホン酸な
どのアルキルスルホン酸およびそれらのナトリウム塩な
どが挙げられる。
【００１２】本発明の糖化ヘモグロビンの測定方法は、
溶離液、試料の希釈液および洗浄液から選ばれる少なく
とも一つにイオンペア試薬が含有されていることを特徴
とする。上記試料の希釈液には、試料の溶解液も含まれ
る。上記洗浄液とは、液体クロマトグラフシステムの流
路などを洗浄するための液を指す。また、イオンペア試
薬は、溶離液、試料の希釈液および洗浄液から選ばれる
少なくとも一つの他にも、分析・測定時に用いられる試
薬のいずれに添加してもよい。イオンペア試薬を含む試
薬と、充填剤との相互作用を安定化させるには、溶離液
に添加するのが最も好ましい。複数の溶離液を用いる場
合には、ＨｂＡ１ｃを溶出させる溶離液に添加すること
が必要であるが、この場合でも他の溶離液にも添加して
おいてもよい。
溶離液、試料の希釈液および洗浄液から選ばれる少なく
とも一つにイオンペア試薬が含有されていることを特徴
とする。上記試料の希釈液には、試料の溶解液も含まれ
る。上記洗浄液とは、液体クロマトグラフシステムの流
路などを洗浄するための液を指す。また、イオンペア試
薬は、溶離液、試料の希釈液および洗浄液から選ばれる
少なくとも一つの他にも、分析・測定時に用いられる試
薬のいずれに添加してもよい。イオンペア試薬を含む試
薬と、充填剤との相互作用を安定化させるには、溶離液
に添加するのが最も好ましい。複数の溶離液を用いる場
合には、ＨｂＡ１ｃを溶出させる溶離液に添加すること
が必要であるが、この場合でも他の溶離液にも添加して
おいてもよい。
【００１３】上記の溶離液、試料の希釈液および洗浄液
としては、従来より液体クロマトグラフィー分析に用い
られている公知のものが挙げられる。溶離液としては、
例えば、上記の溶離条件についての説明で述べたカチオ
ン交換液体クロマトグラフィー用の緩衝液などが挙げら
れる。試料の希釈液としては、例えば、トリトンＸ−１
００などの界面活性剤を含む水溶液；上記溶離液を構成
する物質よりなる緩衝液などが挙げられる。上記洗浄液
としては、上記希釈液と同様のものが挙げられる。
としては、従来より液体クロマトグラフィー分析に用い
られている公知のものが挙げられる。溶離液としては、
例えば、上記の溶離条件についての説明で述べたカチオ
ン交換液体クロマトグラフィー用の緩衝液などが挙げら
れる。試料の希釈液としては、例えば、トリトンＸ−１
００などの界面活性剤を含む水溶液；上記溶離液を構成
する物質よりなる緩衝液などが挙げられる。上記洗浄液
としては、上記希釈液と同様のものが挙げられる。
【００１４】溶離液、試料の希釈液および洗浄液から選
ばれる少なくとも一つに含有されるイオンペア試薬の含
有量は、充填剤や溶液組成によっても異なるが、通常、
０．１〜１０ｍＭが好ましい。
ばれる少なくとも一つに含有されるイオンペア試薬の含
有量は、充填剤や溶液組成によっても異なるが、通常、
０．１〜１０ｍＭが好ましい。
【００１５】本発明においては、溶離液、試料の希釈液
および洗浄液から選ばれる少なくとも一つにイオンペア
試薬が含有されることにより、充填剤種類を変えること
なく、試料と充填剤とのカチオン交換反応を細かく調節
することができるようになるため、簡便に、糖化ヘモグ
ロビン、特にＨｂＡ１ｃピークの分離能が改良された糖
化ヘモグロビンの測定方法を提供する。
および洗浄液から選ばれる少なくとも一つにイオンペア
試薬が含有されることにより、充填剤種類を変えること
なく、試料と充填剤とのカチオン交換反応を細かく調節
することができるようになるため、簡便に、糖化ヘモグ
ロビン、特にＨｂＡ１ｃピークの分離能が改良された糖
化ヘモグロビンの測定方法を提供する。
【００１６】
【発明の実施の形態】以下、本発明の実施例及び比較例
を挙げることにより、本発明を詳細に説明するが、本発
明はこれに限定されるものではない。
を挙げることにより、本発明を詳細に説明するが、本発
明はこれに限定されるものではない。
【００１７】実施例１ 充填剤入りカラムの調製 特公平８−７１９７号公報の方法によりカチオン交換液
体クロマトグラフィー充填剤を調製した。すなわち、ジ
エチレングリコールジメタクリレート（新中村化学社
製）１００ｇ、ジビニルベンゼン（キシダ化学社製）２
００ｇを混合したものに、ベンゾイルパーオキサイド
（重合開始剤、和光純薬社製）１ｇを溶解した。この混
合物を４重量％ポリビニルアルコール（日本合成社製）
水溶液２．５リットルに添加し、攪拌しながら調粒した
後、窒素置換下で８０℃に加熱し重合を行った。８０℃
で２時間重合を行った後、アクリル酸５０ｇを添加し更
に８０℃で２時間重合し、生成物を熱水およびアセトン
で順次洗浄し、乾燥した。得られた粒子を、空気分級機
（日鉄鉱業社製、ターボクラシファイアＴＣ−１５Ｎ）
により分級し、平均粒径１０μｍの充填剤粒子を得た。
該充填剤を内径６ｍｍ、長さ７５ｍｍのステンレス製カ
ラムに充填した。
体クロマトグラフィー充填剤を調製した。すなわち、ジ
エチレングリコールジメタクリレート（新中村化学社
製）１００ｇ、ジビニルベンゼン（キシダ化学社製）２
００ｇを混合したものに、ベンゾイルパーオキサイド
（重合開始剤、和光純薬社製）１ｇを溶解した。この混
合物を４重量％ポリビニルアルコール（日本合成社製）
水溶液２．５リットルに添加し、攪拌しながら調粒した
後、窒素置換下で８０℃に加熱し重合を行った。８０℃
で２時間重合を行った後、アクリル酸５０ｇを添加し更
に８０℃で２時間重合し、生成物を熱水およびアセトン
で順次洗浄し、乾燥した。得られた粒子を、空気分級機
（日鉄鉱業社製、ターボクラシファイアＴＣ−１５Ｎ）
により分級し、平均粒径１０μｍの充填剤粒子を得た。
該充填剤を内径６ｍｍ、長さ７５ｍｍのステンレス製カ
ラムに充填した。
【００１８】液体クロマトグラフシステムとして図１
のシステムとした。送液ポンプ２としては、島津製作所
社製、ＬＣ−９Ａとし、試料導入装置３としては、積水
化学工業社製、ＡＳＵ−４２０とし、検出器５として
は、島津製作所社製、ＳＰＤ−６ＡＶとした。
のシステムとした。送液ポンプ２としては、島津製作所
社製、ＬＣ−９Ａとし、試料導入装置３としては、積水
化学工業社製、ＡＳＵ−４２０とし、検出器５として
は、島津製作所社製、ＳＰＤ−６ＡＶとした。
【００１９】液体クロマトグラフィーの測定条件 溶離条件：溶離液Ａ（５ｍＭの濃度で１−ペンタンスル
ホン酸を含む５０ｍＭリン酸緩衝液：ｐＨ６）および溶
離液Ｂ（３００ｍＭリン酸緩衝液：ｐＨ７）の２液を用
いたステップグラディエント溶出を行った。 流速：２．０ｍｌ／分 検出：４１５ｎｍ 試料として以下の試料１および試料２を用いた。 ・試料１（健常人血）：フッ化ナトリウム入り採血管で
健常人から採血し、これに０．１％トリトンＸ−１００
を含む１００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７）を添加して１
５０倍に溶血・希釈したものを試料１とした。 ・試料２（カルバミル化ヘモグロビン（以下、ＣＨｂと
いう）含有試料）：変性ヘモグロビンを含む試料とし
て、ＣＨｂを高濃度に含有する試料を調製した。すなわ
ち、０．２ｍｇ／ｄｌのシアン酸ナトリウム生理食塩水
溶液０．５ｍｌを、上記試料１のように採血した健常人
血０．５ｍｌに添加した。この混合物を４０℃で２時間
加温した。冷却後、上記試料１と同様にして溶血・希釈
したものを試料２とした。
ホン酸を含む５０ｍＭリン酸緩衝液：ｐＨ６）および溶
離液Ｂ（３００ｍＭリン酸緩衝液：ｐＨ７）の２液を用
いたステップグラディエント溶出を行った。 流速：２．０ｍｌ／分 検出：４１５ｎｍ 試料として以下の試料１および試料２を用いた。 ・試料１（健常人血）：フッ化ナトリウム入り採血管で
健常人から採血し、これに０．１％トリトンＸ−１００
を含む１００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７）を添加して１
５０倍に溶血・希釈したものを試料１とした。 ・試料２（カルバミル化ヘモグロビン（以下、ＣＨｂと
いう）含有試料）：変性ヘモグロビンを含む試料とし
て、ＣＨｂを高濃度に含有する試料を調製した。すなわ
ち、０．２ｍｇ／ｄｌのシアン酸ナトリウム生理食塩水
溶液０．５ｍｌを、上記試料１のように採血した健常人
血０．５ｍｌに添加した。この混合物を４０℃で２時間
加温した。冷却後、上記試料１と同様にして溶血・希釈
したものを試料２とした。
【００２０】ＨｂＡ１ｃの測定 上記試料１および試料２を測定し、ＨｂＡ１ｃ値を求め
た。 ・ＨｂＡ１ｃ値の算出：上記測定条件で試料１を分析し
た場合の、クロマトグラムを図２に示す。このクロマト
グラムにおいて、ピーク１は糖化ヘモグロビンＨｂＡ１
ａ及びＨｂＡ１ｂ、ピーク２は胎児性ヘモグロビンＨｂ
Ｆ、ピーク３は糖化ヘモグロビンＨｂＡ１ｃ、ピーク４
は非糖化（正常）ヘモグロビンＨｂＡ０である。ＨｂＡ
１ｃ値は、各ピーク面積から以下の算出式により求めら
れる。 ＨｂＡ１ｃ（％）＝〔（ＨｂＡ１ｃの面積）／（ＨｂＡ
１ａ及びＨｂＡ１ｂの面積＋ＨｂＦの面積＋ＨｂＡ１ｃ
の面積＋ＨｂＡ０の面積）〕×１００
た。 ・ＨｂＡ１ｃ値の算出：上記測定条件で試料１を分析し
た場合の、クロマトグラムを図２に示す。このクロマト
グラムにおいて、ピーク１は糖化ヘモグロビンＨｂＡ１
ａ及びＨｂＡ１ｂ、ピーク２は胎児性ヘモグロビンＨｂ
Ｆ、ピーク３は糖化ヘモグロビンＨｂＡ１ｃ、ピーク４
は非糖化（正常）ヘモグロビンＨｂＡ０である。ＨｂＡ
１ｃ値は、各ピーク面積から以下の算出式により求めら
れる。 ＨｂＡ１ｃ（％）＝〔（ＨｂＡ１ｃの面積）／（ＨｂＡ
１ａ及びＨｂＡ１ｂの面積＋ＨｂＦの面積＋ＨｂＡ１ｃ
の面積＋ＨｂＡ０の面積）〕×１００
【００２１】・また、上記測定条件で試料２を分析した
場合の、クロマトグラムを図３に示す。このクロマトグ
ラムにおいて、ピーク１は糖化ヘモグロビンＨｂＡ１ａ
及びＨｂＡ１ｂ、ピーク２は胎児性ヘモグロビンＨｂ
Ｆ、ピーク３は糖化ヘモグロビンＨｂＡ１ｃ、ピーク４
は非糖化（正常）ヘモグロビンＨｂＡ０、ピーク５はＣ
Ｈｂである。ＨｂＡ１ｃ値は、各ピーク面積から以下の
算出式により求められる。 ＨｂＡ１ｃ（％）＝〔（ＨｂＡ１ｃの面積）／（ＨｂＡ
１ａ及びＨｂＡ１ｂの面積＋ＨｂＦの面積＋ＣＨｂの面
積＋ＨｂＡ１ｃの面積＋ＨｂＡ０の面積）〕×１００
場合の、クロマトグラムを図３に示す。このクロマトグ
ラムにおいて、ピーク１は糖化ヘモグロビンＨｂＡ１ａ
及びＨｂＡ１ｂ、ピーク２は胎児性ヘモグロビンＨｂ
Ｆ、ピーク３は糖化ヘモグロビンＨｂＡ１ｃ、ピーク４
は非糖化（正常）ヘモグロビンＨｂＡ０、ピーク５はＣ
Ｈｂである。ＨｂＡ１ｃ値は、各ピーク面積から以下の
算出式により求められる。 ＨｂＡ１ｃ（％）＝〔（ＨｂＡ１ｃの面積）／（ＨｂＡ
１ａ及びＨｂＡ１ｂの面積＋ＨｂＦの面積＋ＣＨｂの面
積＋ＨｂＡ１ｃの面積＋ＨｂＡ０の面積）〕×１００
【００２２】・上記試料１および試料２のＨｂＡ１ｃ値
を求めた結果は、試料１は５．２％であり、試料２は
５．１％であった。すなわち、ＣＨｂの影響なくＨｂＡ
１ｃ値を測定できたことが分かる。
を求めた結果は、試料１は５．２％であり、試料２は
５．１％であった。すなわち、ＣＨｂの影響なくＨｂＡ
１ｃ値を測定できたことが分かる。
【００２３】比較例１ 実施例１における、液体クロマトグラフィーの測定条
件の項における、溶離液Ａ（５ｍＭの濃度で１−ペンタ
ンスルホン酸を含む５０ｍＭリン酸緩衝液：ｐＨ６）の
代わりに、１−ペンタンスルホン酸を含まない５０ｍＭ
リン酸緩衝液：ｐＨ６を用いたことの他は、実施例１と
同様に操作して試料１および試料２のＨｂＡ１ｃ値を求
めた。
件の項における、溶離液Ａ（５ｍＭの濃度で１−ペンタ
ンスルホン酸を含む５０ｍＭリン酸緩衝液：ｐＨ６）の
代わりに、１−ペンタンスルホン酸を含まない５０ｍＭ
リン酸緩衝液：ｐＨ６を用いたことの他は、実施例１と
同様に操作して試料１および試料２のＨｂＡ１ｃ値を求
めた。
【００２４】・ＨｂＡ１ｃ値の算出：試料１を分析した
場合の、クロマトグラムを図４、試料２を分析した場合
の、クロマトグラムを図５に示す。それぞれのＨｂＡ１
ｃ値は、試料１が５．１％、試料２が３．７％であっ
た。すなわち、試料２ではＨｂＡ１ｃ値が大きく低下し
た。これは、図５に示したクロマトグラムで分かる通
り、試料２では、ＣＨｂピーク５がＨｂＡ１ｃピーク３
に重なり、そのためＨｂＡ１ｃ値が低下したものであ
る。
場合の、クロマトグラムを図４、試料２を分析した場合
の、クロマトグラムを図５に示す。それぞれのＨｂＡ１
ｃ値は、試料１が５．１％、試料２が３．７％であっ
た。すなわち、試料２ではＨｂＡ１ｃ値が大きく低下し
た。これは、図５に示したクロマトグラムで分かる通
り、試料２では、ＣＨｂピーク５がＨｂＡ１ｃピーク３
に重なり、そのためＨｂＡ１ｃ値が低下したものであ
る。
【００２５】
【発明の効果】本発明の糖化ヘモグロビンの測定方法の
構成は、上記の通りであり、この方法を用いると、従来
の充填剤を用いて、簡便に糖化ヘモグロビン、特にＨｂ
Ａ１ｃを精度良く測定できる。
構成は、上記の通りであり、この方法を用いると、従来
の充填剤を用いて、簡便に糖化ヘモグロビン、特にＨｂ
Ａ１ｃを精度良く測定できる。
【図１】本発明で用いられる液体クロマトグラフのシス
テムの例を示す説明図である。
テムの例を示す説明図である。
【図２】実施例１における、試料１を用いて得られたク
ロマトグラムである。
ロマトグラムである。
【図３】実施例１における、試料２を用いて得られたク
ロマトグラムである。
ロマトグラムである。
【図４】比較例１における、試料１を用いて得られたク
ロマトグラムである。
ロマトグラムである。
【図５】比較例１における、試料２を用いて得られたク
ロマトグラムである。
ロマトグラムである。
１ 溶離液 ２ 送液ポンプ ３ 試料導入装置 ４ 分離カラム ５ 検出器
Claims (1)
- 【請求項１】 溶離液、試料の希釈液および洗浄液から
選ばれる少なくとも一つにイオンペア試薬が含有されて
いることを特徴とするカチオン交換液体クロマトグラフ
ィーによる糖化ヘモグロビンの測定方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3021797A JPH10227779A (ja) | 1997-02-14 | 1997-02-14 | 糖化ヘモグロビンの測定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3021797A JPH10227779A (ja) | 1997-02-14 | 1997-02-14 | 糖化ヘモグロビンの測定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10227779A true JPH10227779A (ja) | 1998-08-25 |
Family
ID=12297565
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3021797A Pending JPH10227779A (ja) | 1997-02-14 | 1997-02-14 | 糖化ヘモグロビンの測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH10227779A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008035748A1 (en) * | 2006-09-22 | 2008-03-27 | Arkray, Inc. | Blood analysis apparatus |
| JP2010237110A (ja) * | 2009-03-31 | 2010-10-21 | Sekisui Medical Co Ltd | ヘモグロビン類の分析方法及び蛋白質の分析方法 |
| CN113219075A (zh) * | 2018-12-29 | 2021-08-06 | 江山德瑞医疗科技有限公司 | 一种测定抗凝静脉全血糖化血红蛋白的试剂盒 |
| CN114712894A (zh) * | 2022-04-08 | 2022-07-08 | 无锡博慧斯生物医药科技有限公司 | 一种糖化血红蛋白层析柱的活化液、活化方法和应用 |
-
1997
- 1997-02-14 JP JP3021797A patent/JPH10227779A/ja active Pending
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008035748A1 (en) * | 2006-09-22 | 2008-03-27 | Arkray, Inc. | Blood analysis apparatus |
| US9429579B2 (en) | 2006-09-22 | 2016-08-30 | Arkray, Inc. | Blood analysis apparatus |
| JP2010237110A (ja) * | 2009-03-31 | 2010-10-21 | Sekisui Medical Co Ltd | ヘモグロビン類の分析方法及び蛋白質の分析方法 |
| CN113219075A (zh) * | 2018-12-29 | 2021-08-06 | 江山德瑞医疗科技有限公司 | 一种测定抗凝静脉全血糖化血红蛋白的试剂盒 |
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