【発明の詳細な説明】
酸化窒素合成酵素阻害剤としての２環アミジン誘導体
本発明は２環アミジン誘導体、その製造方法、それらを含有する組成物および
治療におけるその使用に関する。
特定のアミジン誘導体が治療適用における使用に関して報告されている。Ｎ−
フェニルアミジン誘導体は米国特許3669974号(USVPharmaceutical Corp.)および
英国特許出願2226562(Boots)において糖尿病の治療における使用に関して記載さ
れている。N′N″ジ置換アミジンは国際特許出願WO 92/04054号（オレゴン大学
）において高血圧、抑鬱および幻覚誘発状態の治療における使用に関して記載さ
れている。炎症の治療および高血圧の治療における鎮痛剤としての特定のアミジ
ンおよび対称ビスアミジンの使用は、ベルギー国特許717740号および英国特許11
80629号（共にDelalande）に記載されている。アミジン誘導体はまた、ドイツ国
特許出願DE-OS-2321330(Bayer)号において除草剤としての使用に関して記載され
ている。
疾患の治療における酸化窒素合成酵素の阻害剤の使用は、例えば、国際特許出
願WO 94/12163号（Abbott）、WO 93/13066号およびWO 94/12165号（共にWallcom
e）および欧州特許出願446699号(Merrell Dow)、547558号および558468号（共に
ワシントン大学）に記載されている。治療における酸化窒素合成酵素阻害剤の使
用はまたWO 95/00505号、WO 95/09619号、WO 95/09621号(全てWellcome)、WO 95
/10266号(Otsuka)、WO 95/11231号およびWO 95/11014号(共にSearle)にも記載さ
れており、これら６文献は本出願の最も早い優先日より後に公開されている。
出願人は以前特に神経変性疾患の治療における酸化窒素合成酵素
の阻害剤であるグアニジン誘導体およびアミジン誘導体の使用を記載している（
WO 94/21621号、WO 95/05363号）。これらの内二番目の者は、本出願の最も早い
優先日より後に公開されている。
我々は今回有用な薬学的活性を有する新しい２環アミジン誘導体群を発見した
。
本発明の第１の特徴によれば、下記式：
〔式中ＤはＯ、ＮまたはＳから選択されるヘテロ原子１〜４個を有する５員複素
環式芳香族環であり、場合により炭素原子でハロゲン、トリフルオロメチル、ア
ルキルC1-6、ニトロまたはシアノで置換されており、そしてそれは、式Ｉの化合
物の残りの部分に炭素原子を介して連結されており；
ＡはN(X)またはCH(-(CH2)m-NXY)であり；
ＵはNH、ＯまたはCH2であり；
Ｖは(CH2)aであり；
Ｗは(CH2)bであり；
ａおよびｂは独立して０〜３の整数を示すが、
ただし、ａ＋ｂは１〜３の範囲であり；
ＸおよびＹは独立して水素、アルキルC1-6または基-(CH2)nQであるか、または
-NXYはピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニルまたはテトラヒドロイソキノ
リニルであり；
Ｑはビフェニルまたはフェニルであり、場合によりアルキルC1-6、アルコキシ
C1-6、ペルフルオロアルキルC1-6、ハロゲン、ニトロま
たはシアノから選択される１つ以上の基で置換されており；
ｍは０〜５の整数であり；
ｎは０〜６の整数であるか；
または、鎖U-V-A-Wは不飽和である以外は上記の通り定義されるか、
または、鎖U-V-A-Wは基-(CH2)m-NXYにより炭素原子において置換されている-N
H-CH2-CH2-O-であり、ここでｍ、ＸおよびＹは前記の通り定義される〕の化合物
および薬学的に許容されるその塩である。
式Ｉの化合物の好ましい群は式ＩＡ
〔式中Ｔは-(CH2)m-NXYで置換されたC3-5飽和または不飽和のアルキレン鎖；-(C
H2)m-NXYで置換された-O-(CH2)2-NH-；または-U-(CH2)a-N(X)-(CH2)b-であり；
ＸおよびＹは独立して、水素、アルキルC1-6または基-(CH2)nQであるか、また
は-NXYはピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニルまたはテトラヒドロイソキ
ノリニルであり；
ＱはアルキルC1-6、アルコキシC1-6、トリフルオロメチル、ハロゲン、ニトロ
またはシアノで場合により置換されたフェニルであり；
そしてＵ、ｍ、ｎ、ａ、ｂおよびＤは前記の通り定義されるか；
ただしＴが-U-(CH2)a-N(X)-(CH2)b-でありＸが-(CH2)nQである場合は、ｎは０
〜５の整数である〕で定義される化合物および薬学的
に許容されるその塩である。
Ｄは好ましくは、Ｏ、ＮまたはＳから選択される１つのヘテロ原子を含み、場
合により炭素原子においてハロゲンにより置換されている５員の複素環式芳香族
環を表す。特に好ましくは、Ｄはチエニル、フリルまたはピロリル、特にチエニ
ルまたはフリル、いっそう特別にはチエニル、そしてもっとも特別には２−チエ
ニルを表す。
Ｔは、好ましくは-(CH2)m-NXYで置換されたC3-5飽和または不飽和アルキレン
鎖、特に-(CH2)m-NXYで置換されたC3-5飽和アルキレン鎖、とりわけ-(CH2)m-NXY
で置換されたC3-4飽和アルキレン鎖を表す。
Ｔが-(CH2)m-NXYで置換されたC3-5飽和または不飽和アルキレン鎖、または-(C
H2)m-NXYで置換された-O-(CH2)2-NXYの場合、ＸおよびＹは独立して水素、アル
キルC1-6または基-(CH2)Oであるのが好ましい。特に好ましくは、ＸおよびＹは
独立して水素、メチル、エチルまたは基-(CH2)nQを表し、そしてＸおよびＹの一
方が水素を表し、他方が水素または基-(CH2)nQを表すのがとりわけ好ましい。
ｍは０または１、とりわけ０を表すのが好ましい。
Ｔが-U-(CH2)a-N(X)-(CH2)b-を表す場合、ＵはCH2を表すのが好ましい。
Ｔが-U-(CH2)a-N(X)-(CH2)b-を表す場合、ａ＋ｂは１または２であるのが好ま
しい。
Ｔが-U-(CH2)a-N(X)-(CH2)b-を表す場合、Ｘは水素、アルキルC1-6または基-(
CH2)nQを表すのが好ましい。
Ｘおよび／またはＹが-(CH2)nQである場合は、好ましくはｎは０、１または２
、特に１である。
Ｑは好ましくはアルキルC1-6またはハロゲンで場合により置換されたフェニル
であるが、特に好ましくはＱは未置換のフェニルである。
本発明によれば、更に、下記工程：
(a) 下記式II：
〔式中Ｕ、Ｖ、ＡおよびＷは上記で定義した通りである〕の相当する化合物を、
下記式III：
〔式中Ｄは上記で定義した通りであり、そしてＬは脱離基である〕の化合物と反
応させることにより、式Ｉの化合物を製造すること；
(b) 下記式IV：
〔式中Ｕ、Ｖ、ＡおよびＷは上記で定義した通りであり、そしてHAは酸である〕
の相当する化合物を、下記式Ｖ：
〔式中Ｄは上記で定義した通りである〕の化合物と反応させることにより式Ｉの
化合物を製造すること；
(c) Ｘが水素であるような式Ｉの相当する化合物を、下記式VI：
R9-L VI
〔式中R9はアルキルC1-6または基-(CH2)nQであり、Ｌは脱離基である〕の化合物
と反応させることにより、ＡがN(X)であり、そしてＸがアルキルC1-6または基-(
CH2)nQであるような式Ｉの化合物を製造すること；
(d) ＸおよびＹの一方または両方が水素であるような式Ｉの相当する化合物を式
VIの化合物と反応させることにより、AがCH(-(CH2)m-NXY)でありＸおよびＹの少
なくとも一方がアルキルC1-6または基-(CH2)nQであるような式Ｉの化合物を製造
すること；
(e) 下記式VII：
〔式中Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＤは上記で定義した通りである〕の相当する化
合物を還元することによりＡがCH(-(CH2)m-NXY)でありｍが１〜５の整数である
ような式Ｉの化合物を製造すること；
(f) 下記式VIII：
〔式中Ｕ、Ｖ、Ｗ、ｍおよびＤは上記で定義した通りである〕の相当する化合物
を還元することによりＡがCH(-(CH2)m-NXY)でありＸおよびＹの両方が水素であ
るような式Ｉの化合物を製造すること；
(g) 下記式IX：
〔式中Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＤおよびＹは上記で定義した通りである〕の相当する化合物
を還元することによりＡがCH(-(CH2)m-NXY)でありＸが水素であり、そしてｍが
１〜５の整数であるような式Ｉの化合物を製造すること；
(h) 下記式Ｘ：
〔式中Ｑ、ｍ、Ｕ、Ｖ、ＷおよびＤは上記で定義した通りである〕の相当する化
合物を還元することによりＡがCH(-(CH2)m-NXY)でありＸおよびＹの一方が水素
であり、そして他方が-(CH2)nQであり、ここでｎは１〜６の整数であるような式
Ｉの化合物を製造すること；
(i) 下記式XI：
〔式中Ｑ、ｍ、Ｕ、Ｖ、ＷおよびＤは上記で定義した通りである〕の相当する化
合物を還元することによりＡがCH(-(CH2)m-NXY)でありＸおよびＹの一方が水素
であり、そして他方が-(CH2)nQであり、ここでｎは１〜６の整数であるような式
Ｉの化合物を製造すること；
(j) 下記式XII：
〔式中Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＤおよびＹは上記で定義した通りである〕の相当する化合物
を還元することによりＡがCH(-NXY)でありＸが水素であるような式Ｉの化合物を
製造すること；
そして所望により式Ｉの得られた化合物またはその別の塩を薬学的に許容され
る塩に変換することまたはその逆の操作を行うこと；を包含する式Ｉの化合物お
よび薬学的に許容されるその塩の製造方法が提供される。
工程(a)においては、反応は、室温と溶媒還流温度の間の温度で、適当な溶媒
、例えば低級アルコール、例えばエタノール、イソプロパノールまたはｔ−ブタ
ノール中、反応体の混合物を撹拌することにより行う。反応時間は、特に、溶媒
および脱離基の性質により異なり、48時間までであってよいが、典型的には１〜
５時間である。Ｌで示される適当な脱離基は、チオアルキル、スルホニル、トリ
フルオロ炭素スルホニル、ハライド、アルキルおよびアリールアルコールおよび
トシル基を包含し、他の例はAdvanced Organic Chemistry(J．March(1985)第３
版，McGraw-Hill)、p315に記載されているものや、当該分野で知られているもの
である。
工程(b)においては、反応は好ましくは適当な溶媒の存在下、数時間２化合物
の混合物を還流することにより行うが、その場合、反応温度は容易に縮合が起こ
るのには十分な高温であるが形成されたアミジンが分解するほど高温であっては
ならない。反応温度は室温
〜約250℃で変化することができるが約100〜200℃で行うのが好ましい。ｏ−ジ
クロロベンゼンが特に好ましい溶媒であり、触媒として４−ジメチルアミノピリ
ジンを添加することが有用であることが判明した。冷却により２層が形成され、
溶媒を傾瀉し、反応混合物に水性塩基を添加することにより、後処理を行う。あ
るいは、反応体が溶媒に可溶である場合は、溶媒を真空下に蒸発させ、反応混合
物に水を添加して後処理する。酸HAは有機または無機の酸、例えば、塩酸、臭化
水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、酢酸、乳酸、コハク酸、フマル酸
、リンゴ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸またはメタンスルホン酸
であってよい。
工程(c)では、反応は例えば12時間までの時間室温で塩基性条件下不活性溶媒
中２化合物を反応させることにより、標準的条件下行う。式VIの化合物と反応さ
せる前に水素化ナトリウムでアミンを処理することが望ましいことがしばしば認
められた。Ｌは好ましくはハライド、特にブロミドである。
工程(d)は工程(c)に関して上記した条件と同様の条件下実施してよい。
工程(e)では、還元は不活性溶媒、例えばTHF中、ジボランで処理することによ
り行ってよい。好適度は低いが適当である別の試薬には水素化リチウムアルミニ
ウムおよび接触水素化に適する試薬、例えばPd/C上H2が包含される。これらの反
応のために用いる反応条件の更に詳細な記述は、J．MarchのAdvanced Organic C
hemistry，p1099およびその引用文に記載されている。
工程(f)では、還元反応は多くの条件下、例えば、J．MarchのAdvanced Organi
c Chemistry，p1103〜1104に記載の通り実施して
よい。これらには、接触水素化、Zn、SnまたはFe金属、AlH3-AlCl3、スルフィド
等の使用が包含される。好ましくはPd/C触媒の存在下３〜６時間大気圧で水素化
することにより反応を行う。
工程(g)、(i)および(j)では、標準的条件下ホウ水素化ナトリウムまたはシア
ノホウ水素化ナトリウムで化合物を処理することにより還元を行ってよい。
工程(h)では、反応は工程(e)について上記した条件と同様の条件下で行ってよ
い。
式(Ｉ)の化合物の塩は、適切な酸の１当量以上と遊離の塩基または塩、エナン
チオマー、互変異性体またはその保護された誘導体を反応させることにより形成
してよい。反応は塩が不溶の溶媒または媒体中、または、塩が可溶の溶媒中、例
えば、水、ジオキサン、エタノール、テトラヒドロフランまたはジエチルエーテ
ル中、または溶媒混合物中で行ってよく、真空下に除去するか凍結乾燥により除
去する。反応は複分解工程であってよく、あるいは、イオン交換樹脂上で行って
よい。
式IIの化合物は、下記式XIII：
〔式中Ｕ、Ｖ、ＡおよびＷは上記した通りである〕の相当する化合物の還元によ
り製造してよい。
還元反応は、工程(f)に関して上記した条件と同様の条件下行ってよい。
式IIの特定の化合物は、知られたものを用いるか、それ自体知ら
れた従来の方法で製造してよい。その他の式IIの化合物は、上記工程(c)〜(j)で
記載した方法と同様の方法に従って、より簡単な置換基を用いて知られた化合物
から製造してよい。例えば、上記工程(j)と同様にして、ＡがCH(-NXY)でありＸ
が水素であるような式ＸIIIの特定の化合物は、式NH2Yの化合物のニトロ化２環
式ケトンとの反応により形成された相当するイミンの還元により製造することが
好都合であることを発見した。
式IVの化合物は、式IIの化合物の製造に関して記載した方法と同様にして製造
してよい。式IVの化合物は、塩基で処理することにより式IIの相当する化合物に
変換してよい。式IIの化合物は、プロトン酸、例えば上記したものの１つで処理
することにより相当する式IVの化合物に変換してよい。
式IIIの化合物は、知られたものを用いるか、または、知られた方法により製
造してよい。、例えば、Ｌがチオアルキルであるような式IIIの化合物は、下記
式ＸIV：
〔式中Ｄは上記した通りである〕の相当するチアミドをヨウ化アルキルで処理す
ることにより製造してよい。
式VII、VII、IX、Ｘ、XIおよびXIIの化合物は、式Ｉの化合物の製造で記載し
た方法と同様の方法により製造してよい。このような化合物は、より簡単な置換
基を有する化合物から、従来の方法、例えばアミンとカルボン酸または活性化さ
れたその誘導体との反応によるアミド（VII、Ｘ）の形成、または、アミンとア
ルデヒドとの反応に
よるイミン（IX、XI、XII）の形成により、容易に製造してよい。
式Ｖ、VI、ＸIIIおよびＸIVの化合物は、知られたものを用いるか、または、
それ自体知られた従来の方法で製造してよい。
当業者の知るとおり、アミンまたはその他の反応性の基はGreeneとwutsによる
標準的テキストProtecting groups in Organic Syn-thesis，第２版(1991)に記
載の保護基を用いて保護することが望ましい。例示できるアミン保護基は、アル
キルオキシカルボニルC2-7、例えばｔ−ブチルオキシカルボニル、フェニルアル
キルオキシカルボニルC8-13、例えばベンジルオキシカルボニルまたは好ましく
はトリフルオロアセテートを包含する。脱保護は、水性の塩基、酸による処理、
または、水素による処理により、通常通り行う。
本発明の化合物および中間体は、標準的方法により、その反応混合物から単離
してよい。
「アルキルC1-6」という用語は、直鎖、分枝鎖の飽和、不飽和の脂肪族および
環状のアルキル基で、炭素原子１〜６個を有するものを包含する。
式Ｉの化合物は、互変異性体、エナンチオマーまたはジアステレオマー型で存
在してよく、これら全ては本発明の範囲に含まれる。種々の光学異性体は、従来
の方法、例えば分別結晶またはHPLCを用いて化合物のラセミ混合物から分離する
ことにより単離してよい。あるいは、個々のエナンチオマーをラセミ化が起こら
ないような反応条件下、適切な光学活性出発物質の反応により製造してよい。
中間体化合物もまた、、エナンチオマー型で存在してよく、精製されたエナン
チオマー、ジアステレオマー、ラセミ体または混合物として使用してよい。
式Ｉの化合物は動物において有用な薬理学的活性を有する。特に、これらは有
用な酸化窒素合成酵素阻害活性を有し、酸化窒素の合成または過剰合成が一因と
なるようなヒトの疾患または症状、例えば、低酸素症、例えば心停止および心臓
発作の場合など、神経変性性疾患、例えば低酸素症、低血糖症、癲癇などの疾患
における、そして外傷、（脊髄および頭部の傷害）における神経変性および／ま
たは神経壊死、高圧酸素による痙攣および中毒、痴呆症、例えば老年前痴呆症、
アルツハイマー病およびエイズ関連痴呆症、Sydenham舞踏病、パーキンソン病、
Tourette症候群、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、コルサコフ病、大脳血
管疾患に関る虚弱、睡眠障害、分裂病、抑鬱、自閉症、季節性情緒障害、時差ぼ
け、月経前症候群(PMS)に関る抑鬱または他の症状、不安および敗血症性ショッ
ク等の治療または予防において有用であることが期待できる。式Ｉの化合物はま
た、アヘン類およびジアゼピンへの耐性の予防および退行、薬物中毒の治療、疼
痛緩解および偏頭痛および他の血管性頭痛の治療において活性を示すことが期待
される。本発明の化合物はまた有用な免疫抑制活性を示し、炎症、神経性炎症、
可逆性閉塞性気道疾患、例えば喘息および成人呼吸困難症候群(ARDS)の治療また
は予防、胃腸運動性疾患、癌の治療、分娩誘発、胃酸分泌抑制および骨格筋の収
縮力の増強に有用である。
式Ｉの化合物は特に神経変性性疾患、偏頭痛の治療、またはアヘン類およびジ
アゼピンへの耐性の予防および退行、または、薬物中毒の治療において、とりわ
け神経変性性疾患の治療において、有利である。
即ち、本発明の別の態様によれば、薬剤として使用するための、
式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩が提供される。
本発明の更に別の態様によれば、上記した疾患または症状の治療または予防の
ための医薬の製造における式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩の使用
が提供される。
更にまた、上記した疾患または症状を有する、またはそれらになり易いヒトに
式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩の治療有効量を投与することを包
含するこれらの疾患または症状の１つの治療または予防法が提供される。
上記した治療適応症に対しては、投与量は、当然ながら使用する化合物、投与
方法および望ましい治療方法により異なる。しかしながら一般的には、化合物を
１mg〜2000mg（固体形態として計量）の一日当たり用量でヒトに投与する場合に
、望ましい結果が得られる。
式Ｉの化合物および薬学的に許容されるその塩は、そのまま、または、経腸ま
たは非経腸投与のための適切な医薬製剤の形態で使用してよい。
本発明によれば、薬学的に許容される希釈剤または担体との混合物中に式Ｉの
化合物または薬学的に許容されるその塩を好ましくは80％未満、更に好ましくは
50％未満含有するような薬学的製剤が提供される。
適当な希釈剤および担体の例は、当業者周知のものである。
酸化窒素合成酵素は多くのイソ酵素型を有しており、式Ｉの化合物または薬学
的に許容されるその塩は、BredtとSnyderのProc．Natl．Acad．Sci．(1990)87，
682〜685およびForstermann等のEur．J．Pharm．(1992)225，161〜165の方法に
基づいた操作により、以
下に記載するとおり、その酸化窒素合成酵素活性に関してスクリーニングしてよ
い。酸化窒素合成酵素は3H−Ｌ−アルギニンを3H−Ｌ−シトルリンに変換し、こ
れを陽イオン交換クロマトグラフィーにより分離し、シンチレーション計数によ
り定量することができる。スクリーニングＡ
(A) ニューロン酸化窒素合成酵素活性に関するスクリーニング
酵素はラットの海馬または小脳から単離した。雄性Sprague-Dawleyラット（25
0〜270g）の小脳または海馬を二酸化炭素麻酔と断首の後に単離する。小脳また
は海馬の上澄みは、50mMトリス−塩酸＋１mM EDTA緩衝液（pH7.2、25℃）中でホ
モゲナイズし、20,000gで15分間遠心分離することにより調製する。残存Ｌ−ア
ルギニンはDowex AG-50W-X8ナトリウム型および水素型のカラムを順次通したク
ロマトグラフィー、次いで、さらに30秒間1000gで遠心分離することにより、上
澄みから除去する。
検定のために、最終上澄み25μlを、Ｌ−アルギニン溶液(濃度18μM 1H−Ｌ−
アルギニン、96nM 3H−Ｌ−アルギニン)25μl、および、検定緩衝液（50mM、HEP
ES、１mM EDTA、1.5mM CaCl2、pH7.4）25μlまたは緩衝液中被験化合物25μlの
何れかが22℃の温度で入った試験管12本の各々に添加する。各々の試験管に、完
全検定緩衝液(50mM HEPES、１mM EDTA、1.5mM CaCl2、１mM DTT、100μM NADPH
、10μg／mlカルモジュリン、pH7.4)75μlを添加することにより反応を開始し、
10分後停止緩衝液（20mM HEPES、２mM EDTA、pH5.5）２mlを添加することにより
反応を停止する。
標識したＬ−シトルリンはDowex AG-50W-X8 200〜400メッシュカ
ラム上のクロマトグラフィーにより標識Ｌ−アルギニンから分離する。各反応終
了物１mlを個別の１mlカラムに添加し、溶出液を蒸留水１mlに２回洗浄した洗液
およびシンチレーションカクテル16mlと合わせる。次にＬ−シトルリンをシンチ
レーション計数により定量する。
小脳上澄みを用いた典型的な実験では、基礎放射能は7,000dpm／mlの放射能を
有する試薬ブランクよりも20,000dpm／ml試料増大する。１μMの濃度で酸化窒素
合成酵素を60％阻害する標準物質のＮ−ニトロ−Ｌ−アルギニンを検定で試験す
ることにより、操作法の有効性を確認する。スクリーニングＢ
(B )マクロファージ酸化窒素合成酵素活性に関するスクリーニング
培養ネズミマクロファージ細胞系統J774A-1（Imperial Cancer Research Fund
の研究室から入手）から誘導後に酵素を調製する。J774A-1細胞は10％ウシ胎児
血清、４mM Ｌ−グルタミンおよび抗生物質(100単位／mlペニシリンＧ、100μg
／mlストレプトマイシンおよび0.25μg／mlアンホテリシンＢ)を添加したダルベ
ッコ改変イーグル培地（DMEM）中培養する。細胞は37℃、５％二酸化炭素の湿潤
雰囲気下に維持した培地35mlの入った225cm2容のフラスコ内で通常どおり生育さ
せる。
酸化窒素合成酵素は、インターフェロン−γ(IFNγ)およびリポ多糖類（LPS）
への応答として細胞に生産させる。全面培養フラスコの培地を取り出し、１μg
／mlのLPSおよび10単位／mlのIFNγを含有する拓しい培地25ml（フラスコ当たり
）と交換する。培地中17〜
20時間経過後、フラスコ表面から細胞板状塊を掻き取ることにより細胞を回収す
る。遠心分離（1000g、10分間）により細胞を集め、細胞沈澱物に、50mMトリス
塩酸（pH7.5、20℃）、10％（v/v）グリセロール、0.1％(v/v)トリトン−Ｘ−10
0、0.1μMジチオスレイトールおよびロイペプチン(２μg／ml)、大豆トリプシン
阻害剤（10μg／ml）、アプロチニン（５μg／ml）およびフェニルメチルスルホ
ニルフルオリド(50μg／ml)を含有するプロテアーゼ阻害剤のカクテルを含有す
る溶液を添加することにより溶解物を調製する。
検定のために、基質カクテル（50mMトリス塩酸（pH7.5、20℃）、400μM NADP
H、20μMフラビンアデニンジヌクレオチド、20μMフラビンモノヌクレオチド、
４μMテトラヒドロビオプテリン、12μMＬ−アルギニンおよび0.025μCi Ｌ−〔3
H〕アルギニン）25μlを50mMトリス塩酸中の被験化合物の溶液25μlの入った96
穴のフィルタープレート(0.45μM孔径）のウエルに入れる。細胞溶解物(上記の
通り調製)50μlを添加することにより反応を開始し、室温で１時間インキュベー
トした後、３mMニトロアルギニンおよび21mM EDTAの水溶液50μlを添加すること
により終了させる。
Dowex AG-50Wを用いて標識したＬ−シトルリンを標識したＬ−アルギニンから
分離する。，Dowex 50W(Na+型)の25％水性スラリー150μlを検定検体に添加し、
その後全体を96穴プレートで濾過する。濾液70μlを採取し、固体シンチラント
の入った96穴プレートのウエルに添加する。試料を乾燥させた後、シンチレーシ
ョン計数によりＬ−シトルリンを定量する。
典型的な実験では、70μlの試料当たり300dpmの基礎放射能が試薬対照では190
0dpmに増大する。10μMのIC50（50％阻害濃度）を示
すアミノグアニジンを標準物質として試験し、操作法の有効性を確認する。スクリーニングＣ
(C) 内皮細胞酸化窒素合成酵素活性に関するスクリーニング
酵素は、ヒト膀静脈内皮細胞（HUVECs）から、Pollock等（1991）Proc．Nat．
Acad．Scj.，88，10480〜10484の方法に基づいた操作法により単離する。HUVECs
はClonetics Corp(San Diego，CA，USA)から購入し、全面培養まで培養した。酸
化窒素合成酵素の収量が大きく低下することなく35〜40代まで細胞を継代培養す
ることができる。細胞が全面培養に達した時点で、ダルベッコのリン酸塩緩衝食
塩水に再懸濁し、10分間800rpmで遠心分離し、細胞ペレットを、氷冷50mMトリス
塩酸、１mM EDTA、10％グリセロール、１mMフェニルメチルスルホニルフルオリ
ド、２μMロイペプチン、pH4.2中でホモゲナイズする。60分間34,000rpmで遠心
分離した後、更に20mM CHAPSを含有するホモゲナイズ用緩衝液中に溶解する。30
分氷上でインキュベートした後、懸濁液を30分間34,000rpmで遠心分離する。得
られた上澄みは要時まで−80℃で保存する。
検定のために、最終上澄み25μlを、Ｌ−アルギニン溶液(濃度12μM 1H−Ｌ−
アルギニン、64nM 3H−Ｌ−アルギニン)25μlおよび検定緩衝液（50mM HEPES、
１mM EDTA、1.5mM CaCl2、pH7.4）25μlまたは緩衝液中被験化合物25μlの何れ
かが22℃の温度で入った試験管12本の各々に添加する。各々の試験管に、完全検
定緩衝液（50mM、HEPES、１mM EDTA、1.5mM CaCl2、１mM DTT、100μM NADPH、1
0μg／mlカルモジュリン、12μMテトラヒドロビオプテリン、pH7.4）25μlを添
加することにより反応を開始し、10分後停止緩衝液
（20mM HEPES、２mM EDTA、pH5.5）２mlを添加することにより反応を停止する。
標識したＬ−シトルリンはDowex AG-50W-X8 200〜400メッシュカラム上のクロ
マトグラフィーにより標識Ｌ−アルギニンから分離する。各反応終了物１mlを個
別の１mlカラムに添加し、溶出液を蒸留水１mlに２回洗浄した洗液およびシンチ
レーションカクテル16mlと合わせる。次にＬ−シトルリンをシンチレーション計
数により定量する。
典型的な実験では、基礎放射能は1,500dpm／mlの放射能を有する試薬ブランク
よりも5,000dpm／ml試料増大する。１μMの濃度で酸化窒素合成酵素を70〜90％
阻害する標準物質のＮ−ニトロ−Ｌ−アルギニンを検定で試験することにより、
操作法の有効性を確認する。
化合物はまた、脳貫通の程度を測定するために半ビボ（ex-vivo）検定で試験
してよい。スクリーニングＤ
(D) ニューロン酸化窒素合成酵素活性に関する半ビボ検定
雄性Sprague-Dawleyラット（250〜275g）に0.9％食塩水に溶解した被験化合物
10mg／kgまたは対照として食塩水のみを静脈内投与した。投与後所定時間（典型
的には２〜24時間）後、ラットを屠殺し、小脳を摘出し、スクリーニングＡに記
載した通り上澄みを調製し、酸化窒素合成酵素活性を検定した。
更に確認試験として、小脳上澄み画分を2′−5′−ADPセファロースカラム（
酸化窒素合成酵素を結合する）に適用し、次いでNADPHで溶離した。溶出液の酸
化窒素合成酵素活性をスクリーニングＡの操作法に従って調べた。
ラット脳を貫通しニューロン酸化窒素合成酵素を阻害するような化合物は、上
澄み調製物および2′−5′−ADPセファロースカラム溶出液の両方で、酸化窒素
合成酵素活性の低下を示した。
酸化窒素合成酵素阻害活性に関するスクリーニングにおいて、化合物の活性は
IC50（検定で50％酵素阻害をもたらす薬剤濃度）で表わす。被験化合物のIC50は
まず化合物の１、10および100μM溶液の阻害活性から推定した。10μMで少なく
とも50％酵素を阻害した化合物は、IC50を測定できるようにより適切な濃度を用
いた再試験に付した。
上記したスクリーニングＡ（酸化窒素合成酵素のニューロン性イソ酵素型に対
する活性のスクリーニング）では、後記する実施例１の化合物が10μM未満のIC5 0
値を示し、有用な治療活性を有することが期待された。スクリーニングＢおよ
びＣ（酸化窒素合成酵素のマクロファージ性および内皮細胞性イソ酵素型に対す
る活性のスクリーニング）では、実施例１の化合物はスクリーニングＡで得られ
た値の10倍を超えるIC50値を示し、望ましい選択性を有することが解った。
実施例２〜９、10(a)〜(f)、11〜13および19〜24の化合物もスクリーニングＡ
で試験し、やはり、10μM未満のIC50値を示した。即ち、これらの化合物もまた
有用な治療活性を有することが期待された。
式Ｉの化合物および薬学的に許容されるその塩は、毒性がより低く、薬効がよ
り高く、選択性がより高く、より長時間作用が持続し、活性の領域がより広く、
より強力であり、副作用がより少なく、より容易に吸収され、あるいは上記した
治療分野で知られ使用されて
いた他の物質に無かった薬理学的特性を有する点において有利である。
式Ｉの化合物および薬学的に許容されるその塩は、また、酸化窒素合成酵素の
ニューロン性のイソ酵素型に対してより選択的であり、このため、他のイソ酵素
型の阻害に伴う副作用特性の低い有用な治療活性を示すことが期待される。
本発明を以下の実施例により説明する。
実施例 １
Ｎ−（（２−（フェニルメチル）アミノ）インダン−５−イル）−２−チオフェ
ンカルボキシイミドアミド二シュウ酸塩
(a) ５−ニトロ−２−インダノン
本化合物はHeusler，Schieffer Ber.，(1899)32，33の方法により製造した。
(b) ５−ニトロ−２−（フェニルメチル）アミノインダン
５−ニトロ−２−インダノン（1.48g、8.36ミリモル）、ベンジルアミン（4.4
0ml、41.8ミリモル）、酢酸（15.0ml）、４Åモレキュラーシーブ（20ml）、THF
（15ml）およびメタノール（15ml）を０℃に冷却したフラスコに導入した。次に
シアノホウ水素化ナトリウム（1.05g、16.7ミリモル）を５分間かけて少しずつ
添加した。混合物を14時間撹拌し、セライトで濾過し、濃縮してシロップ状とし
た。混合物を２Ｎ水酸化ナトリウムで塩基性とし、エーテル（３×50ml）で抽出
した。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、濾過し、濃
縮し、シリカゲル上のクロマトグラフィー(３％メタノール／塩化メチレン)に付
し、５−ニトロ−２−（フェニルメチル）アミノインダン(1.18g、53％)を得た
。MS(M＋H）+
＝269
(c) ２−（５−ニトロインダニル）−Ｎ−（フェニルメチル）トリフルオロアセ
トアミド
塩化メチレン（50ml）中の５−ニトロ−２−（フェニルメチル）アミノインダ
ン（1.18g、4.40ミリモル）およびトリエチルアミン（0.61ml、4.40ミリモル）
の撹拌溶液に、無水トリフルオロ酢酸（0.63ml、4.40ミリモル）を滴下添加した
。１分間撹拌した後、溶媒を水に注ぎこみ、塩化メチレン（３×20ml）で抽出し
た。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、シリカゲルの
短い充填カラムで濾過（20％酢酸エチル／ヘキサン）し、２−（５−ニトロイン
ダニル）−Ｎ−（フェニルメチル）トリフルオロアセトアミド（1.17g、73％）
を得た。MS(M＋H)+＝365
(d) ２−（５−アミノインダニル）−Ｎ−（フェニルメチル）トリフルオロアセ
トアミド
THF／MeOH（100ml、１：１）中の２−（５−ニトロインダニル）−Ｎ−（フェ
ニルメチル）トリフルオロアセトアミド（1.17g、3.21ミリモル）の撹拌溶液に
触媒量の10％Pd/Cを添加した。混合物を１時間50psiで水素添加し、セライトで
濾過し、濃縮して得られた２−（５−アミノインダニル）−Ｎ−（フェニルメチ
ル）トリフルオロアセトアミドはTLCによれば均質であり、直接段階(f)で使用し
た。
(e) Ｓ−メチル−２−チオフェンチオカルボキシイミドヨウ化水素酸塩
アセトン（60ml）中の２−チオフェンカルボキシチオアミド（Maybridge Chem
ical）（11.1g）の溶液をヨードメタン（13.4g）で処理した。22℃６時間の後、
生成した黄色の固体を濾過して採取し、アセトン（２×25ml）で洗浄し、乾燥し
てＳ−メチル−２−チオフェンチオカルボキシイミドヨウ化水素酸塩18.45gを得
た。融点195℃（分解）
(f) Ｎ−（（２−（フェニルメチル）アミノ）インダン−５−イル）−２−チオ
フェンカルボキシイミドアミド二シュウ酸塩
イソプロパノール（６ml）／DMF(0.5ml)中の２−（５−アミノインダニル）−
Ｎ−（フェニルメチル）トリフルオロアセトアミド(1.0g、3.0ミリモル)の溶液
に、Ｓ−メチル−２−チオフェンチオカルボキシイミドヨウ化水素酸塩(0.85g、
3.0ミリモル)を添加した。混合物を14時間撹拌し、メタノール(６ml)および２Ｎ
NaOH(６ml)で希釈し、0.5時間50℃に加熱した。混合物を水に注ぎこみ、酢酸エ
チル（３×30ml）中に抽出した。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウ
ム上に乾燥し、濾過し、シリカゲル上のクロマトグラフィー（20％メタノール／
塩化メチレン）に付し、遊離の塩基として標題化合物を得た。IPA／シュウ酸で
処理して白色固体としてＮ−（（２−（フェニルメチル）アミノ）インダン−５
−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド二シュウ酸塩(0.47g、30％)
を得た。融点130〜135℃
実施例 ２
Ｎ−（（２−（フェニルメチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナフト−７
−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド
(a) ７−ニトロ−3,4−ジヒドロ−2(1H)−ナフタレンオン
本化合物はJ．Med．Chem．(1989)32，2128に記載の方法に従って製造した。
(b) ７−ニトロ−２−（（フェニルメチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロ
ナフタレン
７−ニトロ−3,4−ジヒドロ−2(1H)−ナフタレノン（1.50g、7.85ミリモル）
、ベンジルアミン（4.30ml、39.3ミリモル）、酢酸（8.0ml）、４Åモレキュラ
ーシーブ（20ml）、THF（15ml）およびメタノール（15ml）を０℃に冷却したフ
ラスコに導入した。次にシアノホウ水素化ナトリウム（0.99ｇ、15.7ミリモル）
を５分間かけて少しずつ添加した。混合物を14時間撹拌し、セライトで濾過し、
濃縮してシロップ状とした。混合物を２Ｎ水酸化ナトリウムで塩基性とし、エー
テル（３×50ml）で抽出した。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム
上に乾燥し、濾過し、濃縮し、シリカゲル上のクロマトグラフィー（３％メタノ
ール／塩化メチレン）に付し、７−ニトロ−２−（（フェニルメチル）アミノ）
−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレン（2.10g、95％）を得た。MS(M＋H)+＝283
(c) ２−（７−ニトロ−（1,2,3,4−テトラヒドロナフチル））−Ｎ−（フェニ
ルメチル）トリフルオロアセトアミド
塩化メチレン（50ml）中の７−ニトロ−２−（（フェニルメチル）アミノ）−
1,2,3,4−テトラヒドロナフタレン（2.10g、7.45ミリモル）およびトリエチルア
ミン（1.07ml、7.45ミリモル）の撹拌溶液に、無水トリフルオロ酢酸（1.05ml、
7.45ミリモル）を滴下添加した。１分間撹拌した後、溶媒を水に注ぎこみ、塩化
メチレン（３×20ml）で抽出した。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシ
ウム上に乾燥し、シリカゲルの短い充填カラムで濾過（20％酢酸エチ
ル／ヘキサン）し、２−（７−ニトロ−（1,2,3,4−テトラヒドロナフチル））
−Ｎ−（フェニルメチル）トリフルオロアセトアミド（2.55g、90％）を得た。M
S(M＋H)+＝379
(d) ２−（７−アミノ−（1,2,3,4−テトラヒドロナフチル））−Ｎ−（フェニ
ルメチル）トリフルオロアセトアミド
THF／MeOH(100ml、１：１)中の２−（７−ニトロ−（1,2,3,4−テトラヒドロ
ナフチル））−Ｎ−（フェニルメチル）トリフルオロアセトアミド（2.55g、6.7
5ミリモル）の撹拌溶液に触媒量の10％Pd/Cを添加した。混合物を１時間50psiで
水素添加し、セライトで濾過し、濃縮して得られた２−（７−アミノ−（1,2,3,
4−テトラヒドロナフチル））−Ｎ−（フェニルメチル）トリフルオロアセトア
ミドはTLCによれば均質であり、直接次段階で使用した。
(e) Ｎ−（（２−（フェニルメチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナフト
−７−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド
イソプロパノール（10ml）中の２−（７−アミノ−（1,2,3,4−テトラヒドロ
ナフチル））−Ｎ−（フェニルメチル）トリフルオロアセトアミド（2.11g、6.0
7ミリモル）の溶液に、Ｓ−メチル−２−チオフェンチオカルボキシイミドヨウ
化水素酸塩（1.72g、6.07ミリモル）を添加した。混合物を14時間撹拌し、メタ
ノール（６ml）および２Ｎ NaOH（６ml）で希釈し、0.5時間50℃に加熱した。混
合物を水に注ぎこみ、酢酸エチル（３×30ml）中に抽出した。合わせた抽出液を
水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、濃縮して得られた固体を再結晶（塩
化メチレン／ヘキサン）し、白色固体としてＮ−（（２−（フェニルメチル）ア
ミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナ
フト−７−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド（0.66g、30％）を
得た。融点119〜120℃
実施例 ３
Ｎ−（（２−アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナフト−７−イル）−２−チオ
フェンカルボキシイミドアミド二シュウ酸塩
(a) ７−ニトロ−２−アミノ−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレン塩酸塩
７−ニトロ−１−テトラロン（1.50g、7.85ミリモル）、酢酸アンモニウム(6.
05ml、78.5ミリモル)、酢酸（8.0ml）、４Åモレキュラーシーブ(20ml)、THF（1
5ml）およびメタノール（15ml）を０℃に冷却したフラスコに導入した。次にシ
アノホウ水素化ナトリウム（0.99g、15.7ミリモル）を５分間かけて少しずつ添
加した。混合物を１時間撹拌し、セライトで濾過し、濃縮してシロップ状とした
。混合物を２Ｎ水酸化ナトリウムで塩基性とし、エーテル（３×50ml）で抽出し
た。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮
し、油状物とした。化合物は塩酸塩として単離した。７−ニトロ−２−アミノ−
1,2,3,4−テトラヒドロナフタレン塩酸塩（1.00g、56％）融点＞300℃
(b) ２−（７−ニトロ−（1,2,3,4−テトラヒドロナフチル））−Ｎ−トリフル
オロアセトアミド
塩化メチレン（50ml）中の７−ニトロ−２−アミノ−1,2,3,4−テトラヒドロ
ナフタレン塩酸塩（1.00g、4.39ミリモル）およびトリエチルアミン（1.22ml、8
.77ミリモル）の撹拌溶液に、無水トリフルオロ酢酸（0.62ml、4.39ミリモル）
を滴下添加した。１分間撹拌した後、溶媒を水に注ぎこみ、塩化メチレン（３×
20ml）で抽出し
た。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、シリカゲルの
短い充填カラムで濾過（20％酢酸エチル／ヘキサン）し、２−（７−ニトロ−（
1,2,3,4−テトラヒドロナフチル））−Ｎ−トリフルオロアセトアミド（0.78g、
62％）を得た。MS(M＋H)+＝289
(c) ２−（７−アミノ−（1,2,3,4−テトラヒドロナフチル））−Ｎ−トリフル
オロアセトアミド
THF／MeOH（100ml、１：１）中の２−（７−ニトロ−（1,2,3,4−テトラヒド
ロナフチル））−Ｎ−トリフルオロアセトアミド（0.76g、2.21ミリモル）の撹
拌溶液に触媒量の10％Pd/Cを添加した。混合物を１時間50psiで水素添加し、セ
ライトで濾過し、濃縮して得られた２−（７−アミノ−（1,2,3,4−テトラヒド
ロナフチル））−Ｎ−トリフルオロアセトアミドはTLCによれば均質であり、直
接次反応で使用した。
(d) Ｎ−（（２−アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナフト−７−イル）−２−
チオフェンカルボキシイミドアミド二臭化水素酸塩
イソプロパノール(10ml)中の２−（７−アミノ−（1,2,3,4−テトラヒドロナ
フチル））−Ｎ−トリフルオロアセトアミド（0.70g、2.71ミリモル）の溶液に
、Ｓ−メチル−２−チオフェンチオカルボキシイミドヨウ化水素酸塩（0.77g、2
.71ミリモル）を添加した。混合物を14時間撹拌し、メタノール（６ml）および
２Ｎ NaOH(６ml)で希釈し、0.5時間50℃に加熱した。混合物を水に注ぎこみ、酢
酸エチル（３×30ml）中に抽出した。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネ
シウム上に乾燥し、濾過し、濃縮し、シリカゲル上のクロマトグラフィー（20％
メタノール／塩化メチレン）に付し、得ら
れた油状物を二臭化水素酸塩：Ｎ−（（２−アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロ
ナフト−７−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド二臭化水素酸塩（
0.37g、32％）に変換した。分解＞210℃
実施例 ４
Ｎ−（（１−アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナフト−７−イル）−２−チオ
フェンカルボキシイミドアミド二シュウ酸塩
(a) ７−ニトロ−１−アミノ−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレン
７−ニトロ−１−アミノ−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンは７−ニトロ−
２−アミノ−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンに準じて製造した。化合物は塩
酸塩として単離した（0.30g、12％）。融点＞300℃
(b) １−（７−ニトロ−（1,2,3,4−テトラヒドロナフチル））−Ｎ−トリフル
オロアセトアミド
１−（７−ニトロ−（1,2,3,4−テトラヒドロナフチル））−Ｎ−トリフルオ
ロアセトアミドは２−（７−ニトロ−（1,2,3,4−テトラヒドロナフチル））−
Ｎ−トリフルオロアセトアミドに準じて製造した（0.35g、95％）。MS(M＋H)+＝
289
(c) １−（７−アミノ−（1,2,3,4−テトラヒドロナフチル））−Ｎ−トリフル
オロアセトアミド
１−（７−アミノ−（1,2,3,4−テトラヒドロナフチル））−Ｎ−トリフルオ
ロアセトアミドは２−（７−アミノ−（1,2,3,4−テトラヒドロナフチル））−
Ｎ−トリフルオロアセトアミドに準じて製造し、直接次反応に用いた。
(d) Ｎ−（（１−アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナフト−７−イル）−２−
チオフェンカルボキシイミドアミド二シュウ酸塩
Ｎ−（（１−アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナフト−７−イル）−２−チ
オフェンカルボキシイミドアミド二シュウ酸塩は二シュウ酸塩として単離した以
外はＮ−（（２−アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナフト−７−イル）−２−
チオフェンカルボキシイミド二臭化水素酸塩に準じて製造した（0.18g、33％）
。分解＞155℃
実施例 ５
Ｎ−（（２−アミノ）インダン−５−イル）−２−チオフェンカルボキシイミド
アミド二シュウ酸塩
(a) ５−ニトロ−２−アミノインダン塩酸塩
０℃の２−アミノインダン塩酸塩（19.11g、0.112モル）に硫酸（60ml）次い
で硝酸カリウム（11.84g、0.117モル）を添加した。混合物を室温に戻し、更に
２時間撹拌し、次に氷／50％水酸化ナトリウム（計500ml）中に注ぎこんだ。混
合物をエーテル（３×200ml）で抽出し、合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マ
グネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮して得られた油状物を塩酸塩に変換した。
イソプロパノール／メタノールから再結晶させて５−ニトロ−２−アミノインダ
ン塩酸塩（14.58g、60％）を得た。融点＞30℃
(b) ２−（５−ニトロインダニル）−Ｎ−トリフルオロアセトアミド
塩化メチレン（50ml）中の５−ニトロ−２−アミノインダン塩酸塩(1.00g、5.
89ミリモル）およびトリエチルアミン(0.82ml、5.89ミリモル)の撹拌溶液に、無
水トリフルオロ酢酸(0.83ml、5.89ミリモル)を滴下添加した。１分間撹拌した後
、溶媒を水に注ぎこみ、塩化メチレン（３×20ml）で抽出した。合わせた抽出液
を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、シリカゲルの短い充填カラムで
濾過（20％酢酸エチル／ヘキサン）し、２−（５−ニトロインダニル）−Ｎ−ト
リフルオロアセトアミド（1.51g、93％）を得た。融点153〜154℃
(c) ２−（５−アミノインダニル）−Ｎ−トリフルオロアセトアミド
THF／MeOH（100ml、１：１）中の２−（５−ニトロインダニル）−Ｎ−トリフ
ルオロアセトアミド（0.58g、2.25ミリモル）の撹拌溶液に触媒量の10％Pd/Cを
添加した。混合物を１時間50psjで水素添加し、セライトで濾過し、濃縮して得
られた２−（５−アミノインダニル）−Ｎ−トリフルオロアセトアミドはTLCに
よれば均質であり、直接次段階で使用した。
(d) Ｎ−（（２−アミノ）インダン−５−イル）−２−チオフェンカルボキシイ
ミドアミド二シュウ酸塩
イソプロパノール（６ml）／DMF（0.5ml）中の２−（５−アミノインダニル）
−Ｎ−トリフルオロアセトアミド（0.52g、2.25ミリモル）の溶液に、Ｓ−メチ
ル−２−チオフェンチオカルボキシイミドヨウ化水素酸塩（0.64g、2.25ミリモ
ル）を添加した。混合物を14時間撹拌し、メタノール(６ml)および２Ｎ NaOH（
６ml）で希釈し、0.5時間50℃に加熱した。混合物を水に注ぎこみ、酢酸エチル
（３×30ml）中に抽出した。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上
に乾燥し、濾過し、シリカゲル上のクロマトグラフィー(20％メタノール／塩化
メチレン)に付し、遊離の塩基として標題化合物を得た。IPA／シュウ酸で処理し
て白色固体としてＮ−（（２−アミノ）インダン−５−イル）−２−チオフェン
カルボキシイミドアミド二シュウ酸塩(0.60g、50％)を得た。融点70℃（分解）
実施例 ６
Ｎ−（（２−（メチル）（フェニルメチル）アミノ）インダン−５−イル）−２
−チオフェンカルボキシイミドアミド二臭化水素酸塩
(a) ５−ニトロ−２−（フェニルメチル）アミノインダン塩酸塩
DMF(60ml)中の５−ニトロ−２−アミノインダン塩酸塩（3.00g、14.00ミリモ
ル）にトリエチルアミン（4.07ml、29.40ミリモル）次いでベンジルブロミド(1.
74ml、14.68ミリモル)を添加した。混合物を室温に加温し、１時間撹拌し、水(2
00ml)中に注ぎこみ、酢酸エチル（３×50ml）で抽出した。合わせた抽出液を水
で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、シリカゲルの短い充填カラムを通して
濾過し、シロップ状になるまで濃縮した。副題の化合物は塩酸塩として単離した
（2.29g、54％）。融点266℃（分解）
(b) ５−ニトロ−２−（メチル）（フェニルメチル）アミノインダン塩酸塩
DMF（100ml）中の５−ニトロ−２−（フェニルメチル）アミノインダン塩酸塩
（2.29g、7.52ミリモル）に、炭酸カリウム（2.60g、18.80ミリモル）次いでヨ
ウ化メチル(0.47ml、7.52ミリモル)を添加した。混合物を室温に加温し、16時間
撹拌し、水(400ml)に注ぎこみ、酢酸エチル(３×100ml)で抽出した。合わせた抽
出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、シリカゲルの短い充填カラム
を通して濾過し、シロップ状になるまで濃縮した。標題化合物は塩酸塩として単
離した（1.08g、45％）。融点28℃（分解）
(c) ５−アミノ−２−（メチル）（フェニルメチル）アミノインダン二塩酸塩
85％酢酸／水中の５−ニトロ−２−（メチル）（フェニルメチル）
アミノインダン塩酸塩（1.08g、3.39ミリモル）に亜鉛粉（3.0g）を添加した。
混合物を１分間撹拌し、セライトで濾過し、濃縮した。濃縮物を２Ｎ水酸化ナト
リウムで中和し、酢酸エチル（３×50ml）で抽出した。合わせた抽出液を水で洗
浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、濃縮してシロップ状物とした。油状物をIP
A／HClで処理し、濃縮し、直接次段階に使用した。
(d) Ｎ−（（２−（メチル）（フェニルメチル）アミノ）インダン−５−イル）
−２−チオフェンカルボキシイミドアミド二臭化水素酸塩
DMF(10ml)中の５−アミノ−２−（メチル）（フェニルメチル）アミノインダ
ン二塩酸塩にＳ−メチル−２−チオフェンチオカルボキシイミドヨウ化水素酸塩
（0.98g、3.45ミリモル）およびピリジン(0.2ml、3.29ミリモル)を添加した。混
合物を14時間撹拌し、水／２Ｎ NaOH中に注ぎこみ、酢酸エチル(３×50ml)で抽
出した。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、濾過し、
シリカゲル上のクロマトグラフィー（10％メタノール／塩化メチレン）に付し、
遊離の塩基として標題化合物を得た。IPA／HBrによる処理により白色固体として
Ｎ−（（２−（メチル）（フェニルメチル）アミノ）インダン−５−イル）−２
−チオフェンカルボキシイミドアミド二臭化水素酸塩（0.43g、25％）を得た。
融点196〜200℃
実施例 ７
Ｎ−（（１−アミノ）インダン−６−イル）−２−チオフェンカルボキシイミド
アミド二塩酸塩
(a) ６−ニトロ−１−アミノインダン塩酸塩
１−アミノインダン（10.0g、75.08ミリモル）を０℃で濃硫酸
（40ml）に添加した。混合物を室温に加温して溶媒和を促進し、その後、０℃に
冷却した。次に硝酸カリウム(7.60g、75.08ミリモル)を少しずつ添加し、混合物
を１時間室温で撹拌した後、氷／50％NaOHに注ぎこんだ。水溶液をクロロホルム
(３×100ml)で抽出した。合わせた抽出液を水で洗浄し、活性炭で脱色し、硫酸
マグネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮して油状物とした。IPA／HClで処理し、
副題の化合物（6.90g、43％）を得た。融点280℃（分解）
(b) ６−アミノ−１−アミノインダン塩酸塩
メタノール(100ml)中の６−ニトロ−１−アミノインダン塩酸塩（1.00g、4.66
ミリモル）の溶液に、触媒量の10％Pd/Cを添加した。混合物を１時間50psiで水
素添加し、セライトで濾過し、濃縮して得られた６−アミノ−１−アミノインダ
ン塩酸塩はTLCによれば均質であり、次段階に直接使用した。
(c) Ｎ−（（１−アミノ）インダン−６−イル）−２−チオフェンカルボキシイ
ミドアミド二塩酸塩
DMF／IPA（４ml、１：１）中の６−アミノ−１−アミノインダン塩酸塩（0.74
g、4.01ミリモル）にＳ−メチル−２−チオフェンカルボキシイミドヨウ化水素
酸塩（1.26g、4.41ミリモル）を添加した。混合物を50℃に加熱し、16時間撹拌
し、次に水／２Ｎ NaOHに注ぎこみ、酢酸エチル（３×50ml）で抽出した。合わ
せた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮して油状
物とした。IPA／HClで処理し、白色固体としてＮ−（（１−アミノ）インダン−
６−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド二塩酸塩（0.79g、60％）
を得た。融点＞200℃（分解）
実施例 ８
Ｎ−（（１−（フェニルメチル）アミノ）インダン−６−イル）−２−チオフェ
ンカルボキシイミドアミド二シュウ酸塩
(a) ６−ニトロ−１−（フェニルメチル）アミノインダン塩酸塩
DMF(30ml)中の６−ニトロ−１−アミノインダン塩酸塩（1.90g、8.85ミリモル
）にトリエチルアミン(2.05ml、18.06ミリモル)次いでベンジルブロミド（1.07m
l、9.03ミリモル）を添加した。混合物を室温に加温し、３時間撹拌し、水(100m
l)中に注ぎこみ、酢酸エチル（３×70ml）で抽出した。合わせた抽出液を水で洗
浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、シリカゲルの短い充填カラムを通して濾過
し、シロップ状になるまで濃縮した。標題の化合物は塩酸塩として単離した（1.
34g、50％）。融点234〜235℃
(b) ６−アミノ−１−（フェニルメチル）アミノインダン塩酸塩
メタノール（100ml）中の６−ニトロ−１−（フェニルメチル）アミノインダ
ン塩酸塩（1.34g、4.40ミリモル）に、触媒量の10％Pd/Cを添加した。混合物を
１時間50psiで水素添加し、セライトで濾過し、濃縮して得られた６−アミノ−
１−（フェニルメチル）アミノインダン塩酸塩はTLCによれば均質であり、次段
階に直接使用した。
(c) Ｎ−（（１−（フェニルメチル）アミノ）インダン−６−イル）−２−チオ
フェンカルボキシイミドアミド二シュウ酸塩
DMF(20ml)中の６−アミノ−１−（フェニルメチル）アミノインダン塩酸塩（1
.21g、4.40ミリモル）にＳ−メチル−２−チオフェンカルボキシイミドヨウ化水
素酸塩(1.38g、4.84ミリモル)を添加した。混合物を50℃に加熱し、16時間撹拌
し、次に水／２Ｎ NaOHに注ぎこみ、酢酸エチル（３×50ml）で抽出した。合わ
せた抽出液
を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮して油状物とした。
IPA／シュウ酸で処理し、白色固体としてＮ−（（１−（フェニルメチル）アミ
ノ）インダン−６−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド二シュウ酸
塩（1.06g、46％）を得た。融点＞120℃（分解）
実施例 ９
Ｎ−（（２−（（３−クロロフェニル）メチル）アミノ）インダン−５−イル）
−２−チオフェンカルボキシアミジン
(a) ２−（（３−クロロフェニル）カルボニル）アミノ−６−ニトロインダン
０℃の塩化メチレン（50ml）中の２−アミノ−６−ニトロインダン塩酸塩(1.5
g、7.0ミリモル)にトリエチルアミン（2.1ml、15.0ミリモル）次いで３−クロロ
ベンゾイルクロリド（1.0ml、7.5ミリモル）を添加した。混合物を直接水に注ぎ
こみ、層を分離させた。水層を塩化メチレン（２×20ml）で抽出し、合わせた抽
出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮して得られた油
状物はTLCでは均質であり、次段階に直接使用した。MS(M＋S)+＝317
(b) ２−（（３−クロロフェニル）メチル）アミノ−６−ニトロインダン
THF(75ml)中の２−（（３−クロロフェニル）カルボニル）アミノ−６−ニト
ロインダン（2.2g、7.0ミリモル）に、BH3・THF(1.0Ｍ、35ml、35ミリモル)を滴
下添加した。混合物を12時間還流し、０℃に冷却し、４Ｎ塩酸（60ml）でクエン
チングし、１時間還流した。得られた溶液を蒸発させて油状物とし、50％水酸化
ナトリウムで塩
基性とし、塩化メチレン（３×20ml）で抽出した。合わせた抽出液を水で洗浄し
、硫酸マグネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮して油状物とした。IPA／HClで処
理することにより、２−（（３−クロロフェニル）メチル）アミノ−６−ニトロ
インダン(2.１g、２段階88％)を得た。融点234〜237℃
(c) ２−（（３−クロロフェニル）メチル）アミノ−６−アミノインダン
85％AcOH／H2O(40ml)中の２−（（３−クロロフェニル）メチル）アミノ−６
−ニトロインダン塩酸塩(2.1g、6.13ミリモル)に、金属亜鉛(1.6g、24.5ミリモ
ル)を添加した。混合物を５分間撹拌し、セライトで濾過し、蒸発して油状物と
した。油状物を塩基性の水に注ぎこみ、クロロホルム（３×20ml）で抽出した。
合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮して
油状物とした。IPA／HClで処理することにより、２−（（３−クロロフェニル）
メチル）アミノ−６−アミノインダン(1.5g、70％)を得た。融点＞270℃
(d) Ｎ−（（２−（（３−クロロフェニル）メチル）アミノ）インダン−５−イ
ル）−２−チオフェンカルボキシアミジン
DMF（10ml）中の２−（（３−クロロフェニル）メチル）アミノ−６−アミノ
インダン二塩酸塩（1.5g、4.2ミリモル）、Ｓ−メチル−２−チオフェンカルボ
キシイミドヨウ化水素酸塩（1.3g、4.6ミリモル）およびピリジン(0.34ml、4.2
ミリモル)を24時間撹拌した。混合物を水中に注ぎこみ、２Ｎ NaOHで塩基性とし
、酢酸エチル（３×50ml）で抽出した。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグ
ネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮し、シリカゲル上のクロマトグラフ
ィー(12％MeOH／塩化メチレン）に付し、無色の油状物を得た。IPA／HClで処理
することにより、Ｎ−（（２−（（３−クロロフェニル）メチル）アミノ）イン
ダン−５−イル）−２−チオフェンカルボキシアミジン（0.75g、40％）を得た
。融点297〜299℃
実施例 10
以下の化合物を実施例９の方法に従って製造した。
(a) Ｎ−（（２−（（２−メチルフェニル）メチル）アミノ）インダン−５−イ
ル）−２−チオフェンカルボキシアミジン；融点183℃
(b) Ｎ−（（２−（（３−メチルフェニル）メチル）アミノ）インダン−５−イ
ル）−２−チオフェンカルボキシアミジン；融点195℃
(c) Ｎ−（（２−（（４−メチルフェニル）メチル）アミノ）インダン−５−イ
ル）−２−チオフェンカルボキシアミジン；融点182℃
(d) Ｎ−（（２−（エチル）アミノ）インダン−５−イル）−２−チオフェンカ
ルボキシアミジン；融点236〜238℃
(e) Ｎ−（（２−（（（４−フェニル）フェニル）メチル）アミノ）インダン−
５−イル）−２−チオフェンカルボキシアミジン；融点182℃
(f) Ｎ−（（２−（（（４−ヘキシル）フェニル）メチル）アミノ）インダン−
５−イル）−２−チオフェンカルボキシアミジン；融点125℃
(g) Ｎ−（（２−（（３−ブロモフェニル）メチル）アミノ）インダン−５−イ
ル）−２−チオフェンカルボキシアミジン；融点182℃
実施例 11
Ｎ−（（２−（（３−クロロフェニル）メチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒ
ドロナフト−７−イル）−２−チオフェンカルボキシイミド
アミド
(a) ７−ニトロ−２−（（（３−クロロフェニル）メチル）アミノ）−1,2,3,4
−テトラヒドロナフタレン
７−ニトロ−3,4−ジヒドロ−2(1H)−ナフタレンオン（1.50g、7.85ミリモル
）、３−クロロベンジルアミン（4.70ml、39.3ミリモル）、酢酸（6.0ml）、４
Åモレキュラーシーブ（20ml）、THF（15ml）およびメタノール（15ml）を０℃
に冷却したフラスコに導入した。シアノホウ水素化ナトリウム（0.99g、15.7ミ
リモル）を５分間かけて少しずつ添加した。混合物を14時間撹拌し、セライトで
濾過し、濃縮してシロップ状物とした。混合物を２Ｎ水酸化ナトリウムで塩基性
とし、エーテル（３×50ml）で抽出した。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マ
グネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮し、シリカゲル上のクロマトグラフィー（
３％メタノール／塩化メチレン）に付した。油状物をIPA／HClで処理し、７−ニ
トロ−２−（（（３−クロロフェニル）メチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒ
ドロナフタレン塩酸塩（1.34g、50％）を得た。MS(M＋H)+＝317
(b) ７−アミノ−２−（（（３−クロロフェニル）メチル）アミノ）−1,2,3,4
−テトラヒドロナフタレン
85％AcOH／H2O（75ml）中の７−ニトロ−２−（（（３−クロロフェニル）メ
チル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレン塩酸塩（1.34g、3.80ミリモ
ル）に金属亜鉛（2.48g、38.0ミリモル）を添加した。混合物を５分間撹拌し、
セライトで濾過し、蒸発させて油状物とした。油状物を塩基性の水に注ぎこみ、
クロロホルム（３×20ml）で抽出した。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグ
ネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮して油状物とした。IPA／HClで処理
することにより、７−アミノ−２−（（（３−クロロフェニル）メチル）アミノ
）−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレン(1.4g、99％)を得た。MS(M＋H)+＝288
(c) Ｎ−（（２−（（３−クロロフェニル）メチル）アミノ）−1,2,3,4−テト
ラヒドロナフト−７−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド
DMF（15ml）中の７−アミノ−２−（（（３−クロロフェニル）メチル）アミ
ノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレン二塩酸塩（1.32g、3.70ミリモル）、Ｓ
−メチル−２−チオフェンチオカルボキシイミドヨウ化水素酸塩（1.3g、4.6ミ
リモル）およびピリジン（0.30ml、3.7ミリモル）を24時間撹拌した。混合物を
水中に注ぎこみ、２Ｎ NaOHで塩基性とし、酢酸エチル（３×50ml）で抽出した
。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮し
て油状物とした。IPA／シュウ酸で処理することにより、Ｎ−（（２−（（３−
クロロフェニル）メチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナフト−７−イル
）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド二シュウ酸塩（0.71g、33％）を得
た。分解＞100℃
実施例 12
Ｎ−（（２−（フェニルメチル）（メチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロ
ナフト−７−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド
(a) ７−ニトロ−２−（（フェニルメチル）（メチル）アミノ）−1,2,3,4−テ
トラヒドロナフタレン
DMF(30ml)中の７−ニトロ−２−（（フェニルメチル）アミノ）−1,2,3,4−テ
トラヒドロナフタレン(1.5g、5.4ミリモル)の撹拌溶
液に、炭酸カリウム（1.5g、10.8ミリモル）およびヨウ化メチル(0.36ml、5.8ミ
リモル)を添加した。混合物を24時間撹拌し、水に注ぎこみ、酢酸エチル（３×5
0ml）で抽出した。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し
、濾過し、濃縮して油状物とした。IPA／HClで処理することにより、７−ニトロ
−２−（（フェニルメチル）（メチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナフ
タレン塩酸塩（0.89g、50％）を得た。MS(M＋H)+＝297
(b) ７−アミノ−２−（（フェニルメチル）（メチル）アミノ）−1,2,3,４−テ
トラヒドロナフタレン
85％AcOH／H2O（75ml）中の７−ニトロ−２−（（フェニルメチル）（メチル
）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレン塩酸塩(0.89g、2.7ミリモル)に
金属亜鉛（3.5g、54.0ミリモル）を添加した。混合物を５分間撹拌し、セライト
で濾過し、蒸発させて油状物とした。油状物を塩基性の水に注ぎこみ、クロロホ
ルム（３×20ml）で抽出した。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム
上に乾燥し、濾過し、濃縮して油状物とした。IPA／HClで処理することにより、
７−アミノ−２−（（フェニルメチル）（メチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラ
ヒドロナフタレン（0.81g、88％）を得た。MS(M＋H)+＝267
(c) Ｎ−（（２−（フェニルメチル）（メチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒ
ドロナフト−７−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド
DMF（15ml）中の７−アミノ−２−（（フェニルメチル）（メチル）アミノ）
−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレン二塩酸塩（0.81g、2.4ミリモル）、Ｓ−メ
チル−２−チオフェンカルボキシイミドヨウ化
水素酸塩（0.74g、2.6ミリモル）およびピリジン（0.19ml、2.4ミリモル）を24
時間撹拌した。混合物を水中に注ぎこみ、２Ｎ NaOHで塩基性とし、酢酸エチル
（３×50ml）で抽出した。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に
乾燥し、濾過し、濃縮して、シリカゲル上のクロマトグラフィー（15％メタノー
ル／塩化メチレン）に付した。画分を濃縮して得られた固体を酢酸エチル／ヘキ
サンから再結晶させ、Ｎ−（（２−（フェニルメチル）（メチル）アミノ）−1,
2,3,4−テトラヒドロナフト−７−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドア
ミド二塩酸塩(0.14g、16％)を得た。融点176〜178℃
実施例 13
Ｎ−（（１−（フェニルメチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナフト−７
−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド
(a) ７−ニトロ−１−（（フェニルメチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロ
ナフタレン
７−ニトロ−１−テトラロン(2.0g、10.5ミリモル)、ベンジルアミン(1.2ml、
10.5ミリモル)およびチタニウムイソプロポキシド(3.9ml、13.1ミリモル)を合わ
せ、１時間撹拌した。混合物を無水エタノール（12ml）で希釈し、シアノホウ水
素化ナトリウム(0.44g、7.0ミリモル)で処理し、20時間撹拌した。固体を濾過し
、エタノールで洗浄した。エタノールを濃縮し、残存した油状物を次反応に直接
使用した。MS(M＋H)+＝283
(b) １−（７−ニトロ−（1,2,3,4−テトラヒドロナフチル））−Ｎ−（フェニ
ルメチル）トリフルオロアセトアミド
塩化メチレン（50ml）中の７−ニトロ−１−（（フェニルメチル）
アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレン（2.96g、10.50ミリモル）および
トリエチルアミン(1.46ml、10.50ミリモル)の撹拌溶液に、無水トリフルオロ酢
酸(1.46ml、10.50ミリモル)を滴下添加した。１分間撹拌した後、溶媒を水中に
注ぎこみ、塩化メチレン（３×20ml）で抽出した。合わせた抽出液を水で洗浄し
、硫酸マグネシウム上に乾燥し、シリカゲルの短い充填カラムを通して濾過（20
％酢酸エチル／ヘキサン）し、１−（７−ニトロ−（1,2,3,4−テトラロンナフ
チル））−Ｎ−（フェニルメチル）トリフルオロアセトアミド（1.90g、２段階4
8％）を得た。MS(M＋H)+＝379
(c) １−（７−アミノ−（1,2,3,4−テトラヒドロナフチル））−Ｎ−（フェニ
ルメチル）トリフルオロアセトアミド
THF／MeOH（100ml、１：１）中の１−（７−ニトロ−（1,2,3,4−テトラヒド
ロナフチル））−Ｎ−（フェニルメチル）トリフルオロアセトアミド（1.91g、5
.05ミリモル）の撹拌溶液に、触媒量の10％Pd/Cを添加した。混合物を１時間50p
siで水素添加し、セライトで濾過し、濃縮して得られた１−（７−アミノ−（1,
2,3,4−テトラヒドロナフチル））−Ｎ−（フェニルメチル）トリフルオロアセ
トアミドはTLCによれば均質であり、次段階に直接使用した。
(d) Ｎ−（（１−（フェニルメチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナフト
−７−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド
イソプロパノール（10ml）中の１−（７−アミノ−（1,2,3,4−テトラヒドロ
ナフチル））−Ｎ−（フェニルメチル）トリフルオロアセトアミド（1.76g、5.0
5ミリモル）の溶液にＳ−メチル−２−チオフェンチオカルボキシイミドヨウ化
水素酸塩（1.44g、5.05ミリモ
ル）を添加した。混合物を14時間撹拌し、メタノール（６ml）および２Ｎ NaOH
（６ml）で希釈し、0.5時間50℃に加熱した。混合物を水中に注ぎこみ、酢酸エ
チル（３×30ml）で抽出した。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム
上に乾燥し、濾過し、濃縮して油状物とした。IPA／HBrによる処理により、白色
固体としてＮ−（（２−（フェニルメチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロ
ナフト−７−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド二臭化水素酸塩（
0.53g、20％）を得た。融点260〜262℃
実施例 14
Ｎ−（（１−（フェニルメチル）アミノ）−インダン−５−イル）−２−チオフ
ェンカルボキシイミドアミド
(a) ６−アセトアミド−（１−（（フェニル）メチル）アミノ）インダン
６−アセトアミド−１−インダノン(5.0g、27.6ミリモル)、ベンジルアミン(3
.1ml、27.9ミリモル)およびチタニウムイソプロポキシド（10.2ml、34.5ミリモ
ル）を合わせ、１時間撹拌した。混合物を無水エタノール（30ml）で希釈し、シ
アノホウ水素化ナトリウム(1.2g、19.3ミリモル)で処理し、20時間撹拌した。固
体を濾過し、エタノールで洗浄した。エタノールを濃縮し、残存した油状物を酢
酸エチルに溶解し、１Ｎ塩酸（３×50ml）で抽出した。水層を２Ｎ水酸化ナトリ
ウムで中和し、酢酸エチル(３×100ml)で抽出した。合わせた抽出液を水で洗浄
し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮して得られた油状物を更に精製
することなく次段階に使用した。
(b) ６−アミノ−（１−（（フェニル）メチル）アミノ）インダン
６−アセトアミド−（１−（（フェニル）メチル）アミノ）インダンを４Ｎ塩
酸（50ml）中で20分間還流し、冷却し、酢酸エチル（３×50ml）で抽出した。水
層を２Ｎ水酸化ナトリウムで中和し、酢酸エチル(３×100ml)で抽出した。合わ
せた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮して油状
物とした。油状物をIPAに溶解し、IAA／HClで処理し、二塩酸塩（2.0g、２段階2
4％）を得た。融点＞250℃（分解）
(c) Ｎ−（（１−（フェニルメチル）アミノ）インダン−５−イル）−２−チオ
フェンカルボキシイミドアミド
DMF（20ml）中６−アミノ−（１−（（フェニル）メチル）アミノ）インダン
二塩酸塩（2.0g、6.4ミリモル）に、Ｓ−メチル−２−チオフェンチオカルボキ
シイミドヨウ化水素酸塩（2.2g、7.7ミリモル）およびピリジン(0.57ml、7.1ミ
リモル)を添加した。混合物を20時間50℃で撹拌し、塩基性の水に注ぎこみ、酢
酸エチル(３×100ml)で抽出した。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシ
ウム上に乾燥し、濾過し、濃縮し、シリカゲル上のクロマトグラフィー（６％メ
タノール／塩化メチレン）に付した。抽出液を濃縮して得られた油状物をメタノ
ールに溶解し、IPA／HClで処理し、エーテルで磨砕した。固体を濾過して集めエ
ーテルで洗浄した（1.1g、40％）。融点＞180℃（分解）
実施例 15
実施例14の方法に従って以下の化合物を製造した。
Ｎ−（（１−（フェニルメチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナフト−
６−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド、融点＞200℃（分解）
実施例 16
Ｎ−（（２−（フェニルメチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒドロナフト−７
−イル）−２−フランカルボキシイミドアミド
(a) ２−（（フェニル）カルボニル）アミノ−７−ニトロテトラリン
THF（50ml）および10％炭酸カリウム（100ml）中の２−アミノ−７−ニトロテ
トラリン(2.8g、14.5ミリモル)に、ベンゾイルクロリド(1.7ml、15.3ミリモル)
を添加した。添加終了後、混合物を水で希釈して250mlとした。沈澱した固体を
濾過して集め、水で洗浄し、真空下に乾燥した（4.2g、98％）。融点194〜198℃
(b) ２−（（フェニル）メチル）アミノ−７−ニトロテトラリン塩酸塩
無水THF（100ml）中の２−（（フェニル）カルボニル）アミノ−７−ニトロテ
トラリン(4.2g、14.1ミリモル)に、ボラン−THF(49.3ml、１Ｍ THF、49.3ミリモ
ル)を添加した。混合物を５時間還流し、０℃に冷却し、４Ｎ塩酸を滴下添加す
ることによりクエンチングした。混合物を再度１時間還流し、真空下に濃縮し、
固体を濾過（水で洗浄）し、真空下に乾燥した(3.5g、78％)。融点＞300℃
(c) ２−（（フェニル）メチル）アミノ−７−アミノテトラリン塩酸塩
メタノール（100ml）中の２−（（フェニル）メチル）アミノ−７−ニトロテ
トラリン（2.0g、6.3ミリモル）の撹拌溶液に、触媒量の10％Pd/Cを添加した。
混合物を１時間50psiで水素添加し、セライトで濾過し、濃縮して得られた油状
物はTLCによれば均質であり、直接次段階に用いた。
(d) Ｎ−（（２−（フェニルメチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒド
ロナフト−７−イル）−２−フランカルボキシイミドアミド
DMF(20ml)中の２−（（フェニル）メチル）アミノ−７−アミノテトラリン塩
酸塩（1.8g、6.3ミリモル）にＳ−メチル−２−フランチオカルボキシイミドヨ
ウ化水素酸塩（2.0g、7.5ミリモル）を添加した。混合物を45℃で２時間撹拌し
、塩基性の水に注ぎこみ、酢酸エチル(３×100ml)で抽出した。合わせた抽出液
を洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮して油状物とした。油状
物をメタノールに溶解し、IPA／HClで処理し、エーテルで磨砕した。固体を濾過
して集め、エーテルで洗浄した(2.2g、84％)。融点＞195℃（分解）
実施例17および18のキラル中間体化合物の製造
２−アミノ−７−ニトロテトラリンの分割
アセトン200mlに溶解した２−アミノ−７−ニトロテトラリン(30g、156ミリモ
ル)をアセトン200mlに溶解したベンゾイル−Ｄ−酒石酸(58.7g、164ミリモル)に
添加した。濃厚なペースト状物を濾過し、アセトンで洗浄した。ペースト状物を
水／エタノール・アセトニトリル（１：１：１）３Ｌ中で還流し、熱時濾過した
。濾過して集めた固体を上記混合物（３×）から再結晶させ、キラルキャピラリ
ーゾーン電気泳動で測定したところ単一の異性体（5.25g、６％）が得られた。
融点240〜242℃
同様にしてジベンゾイル−Ｌ−酒石酸を用いることにより上記と同様の溶媒系
で対立するエナンチオマー(5.3g、６％)を得た。これはキラルキャピラリーゾー
ン電気泳動で測定したところ単一の異性体（5.3g、６％）が得られた。融点240
〜242℃
実施例 17
（＋）−Ｎ−（（２−（（フェニル）メチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒド
ロナフト−７−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド
(a)（＋）−２−（（フェニル）カルボニル）アミノ−７−ニトロテトラリン
THF（50ml）および10％炭酸カリウム（100ml）中の２−アミノ−７−ニトロテ
トラリン(1.8g、9.39ミリモル、ジベンゾイル−Ｄ−酒石酸から得られた)に、ベ
ンゾイルクロリド(1.2ml、10.1ミリモル)を添加した。添加終了後、混合物を水
で希釈して250mlとした。沈澱した固体を濾過して集め、水で洗浄し、真空下に
乾燥した(2.8g、100％)。融点208〜209℃、〔α〕D＋21.9°(c 0.33、DMSO)
(b)（＋）−２−（（フェニルメチル）メチル）アミノ−７−ニトロテトラリン
塩酸塩
無水THF(100ml)中の（＋）−２−（（フェニル）カルボニル）アミノ−７−ニ
トロテトラリン（2.8g、9.4ミリモル）に、ボラン−THF（32.8ml、１Ｍ THF、32
.8ミリモル）を添加した。混合物を５時間還流し、０℃に冷却し、４Ｎ塩酸を滴
下添加することによりクエンチングした。混合物を１時間還流し、真空下に濃縮
し、固体を濾過（水で洗浄）し、真空下に乾燥した（2.8g、94％）。融点＞300
℃、〔α〕D＋51.0°(c 0.33、DMSO)
(c)（＋）−２−（（フェニル）メチル）アミノ−７−アミノテトラリン塩酸塩
メタノール（100ml）中の（＋）−２−（（フェニル）メチル）アミノ−７−
ニトロテトラリン塩酸塩（2.8g、8.7ミリモル）の撹拌溶液
に、触媒量の10％Pd/Cを添加した。混合物を１時間50psiで水素添加し、セライ
トで濾過し、濃縮して得られたガラス状固体をTLCによれば均質であった。〔α
〕D＋73.3°(c 0.87、DMSO)
(d)（＋）−Ｎ−（（２−（（フェニルメチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒド
ロナフト−７−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド
DMF（20ml）中の（＋）−２−（（フェニル）メチル）アミノ−７−アミノテ
トラリン塩酸塩（2.5g、8.7ミリモル）にＳ−メチル−２−チオフェンチオカル
ボキシイミドヨウ化水素酸塩(3.0g、10.4ミリモル)を添加した。混合物を45℃で
４時間撹拌し、塩基性の水に注ぎこみ、酢酸エチル(３×100ml)で抽出した。合
わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮して油
状物とした。油状物をメタノールに溶解し、IPA／HClで処理し、エーテルで磨砕
した。固体を濾過して集め、エーテルで洗浄した。IPA／MeOH／Et2Oから１回再
結晶することにより白色固体（2.5g、66％）を得た。融点＞260℃（分解）、〔
α〕D＋44.5°(c 0.62、DMSO)
実施例 18
（−）−Ｎ−（（２−（（フェニル）メチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒド
ロナフト−７−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド
(a)（−）−２−（（フェニル）カルボニル）アミノ−７−ニトロテトラリン
THF（50ml）および10％炭酸カリウム（100mE）中の２−アミノ−７−ニトロテ
トラリン(1.8g、9.39ミリモル、ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸から得られた)に、ベ
ンゾイルクロリド(1.2ml、10.1ミリモ
ル)を添加した。添加終了後、混合物を水で希釈して250mlとした。沈澱した固体
を濾過して集め、水で洗浄し、真空下に乾燥した(2.8g、100％)。融点208〜209
℃、〔α〕D−24.0°(c 0.87、DMSO)
(b)（−）−２−（（フェニル）メチル）アミノ−７−ニトロテトラリン塩酸塩
無水THF（100ml）中の（−）−２−（（フェニル）カルボニル）アミノ−７−
ニトロテトラリン(2.8g、9.4ミリモル)に、ボラン−THF（32.8ml、１Ｍ THF、32
.8ミリモル）を添加した。混合物を５時間還流し、０℃に冷却し、４Ｎ塩酸を滴
下添加することによりクエンチングした。混合物を再度１時間還流し、真空下に
濃縮し、固体を濾過（水で洗浄）し、真空下に乾燥した（2.8g、94％）。融点＞
300℃、〔α〕D−59.4°(c 0.39、DMSO)
(c)（−）−２−（（フェニル）メチル）アミノ−７−アミノテトラリン塩酸塩
メタノール(100ml)中の（−）−２−（（フェニル）メチル）アミノ−７−ニ
トロテトラリン（2.8g、8.7ミリモル）の撹拌溶液に、触媒量の10％Pd/Cを添加
した。混合物を１時間50psiで水素添加し、セライトで濾過し、濃縮して得られ
たガラス状固体はTLCによれば均質であった。〔α〕D−74.6°(c 0.80、DMSO)
(d)（−）−Ｎ−（（２−（（フェニルメチル）アミノ）−1,2,3,4−テトラヒド
ロナフト−７−イル）−２−チオフェンカルボキシイミドアミド
DMF（20ml）中の（−）−２−（（フェニル）メチル）アミノ−７−アミノテ
トラリン塩酸塩（2.5g、8.7ミリモル）にＳ−メチル−２−チオフェンチオカル
ボキシイミドヨウ化水素酸塩(3.0g、10.4ミリ
モル)を添加した。混合物を45℃で４時間撹拌し、塩基性の水に注ぎこみ、酢酸
エチル(３×100ml)で抽出した。合わせた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウ
ム上に乾燥し、濾過し、濃縮して油状物とした。油状物をメタノールに溶解し、
IPA／HClで処理し、エーテルで磨砕した。固体を濾過して集め、エーテルで洗浄
した。IPA／MeOH／Et2Oから１回再結晶することにより白色固体（2.7g、71％）
を得た。融点＞260℃（分解）、〔α〕D−44.5°(c 0.57、DMSO)
実施例 19
Ｎ−（2,3,4,5−テトラヒドロ−１Ｈ−３−ベンズアゼピン−７−イル）チオフ
ェン−２−カルボキシイミドアミド
(a) 2,3,4,5−テトラヒドロ−１Ｈ−３−ベンズアゼピン−７−アミン一塩酸塩
エタノール（100ml）中の2,3,4,5−テトラヒドロ−７−ニトロ−１Ｈ−３−ベ
ンズアゼピン塩酸塩（1.68g、7.35ミリモル）の溶液に、炭素上５％パラジウム(
0.2g)を添加し、溶液をPaar水素添加装置に入れ、45psi水素下に加圧した。水素
の理論的取り込みが達成（２時間）された後、触媒を濾去し、水（25ml）で洗浄
した。濾液を濃縮した。無水エタノールを添加し、水が全て蒸発して固体が形成
されるまで蒸発させた。固体を熱エタノール（50ml）に溶解し、エーテル（75ml
）を添加することにより生成物を析出させた。固体を集め、風乾してオフホワイ
トの固体として生成物(2.43g、94％)を得た。融点288〜91℃
(b) Ｎ−（2,3,4,5−テトラヒドロ−１Ｈ−３−ベンズアゼピン−７−イル）チ
オフェン−２−カルボキシイミドアミド
ジメチルホルムアミド（2.0ml）およびイソプロパノール(2.0ml)
中の2,3,4,5−テトラヒドロ−１Ｈ−３−ベンズアゼピン−７−アミン一塩酸塩(
0.60g、3.0ミリモル）およびＳ−メチル２−チオフェンチオカルボキシイミドヨ
ウ化水素酸塩（1.1g、3.8ミリモル）の懸濁液を20時間雰囲気温度で撹拌した。
反応混合物から固体を採取し、イソプロパノール（５ml）および酢酸エチル（15
ml）で洗浄した。風乾した固体1.18gは混合塩であった。固体を水に溶解し、塩
基性化し、酢酸エチルで抽出した。溶媒を硫酸マグネシウム上に乾燥し、濃縮し
て黄色の固体として遊離の塩基を得た。これをイソプロパノール（30ml）に溶解
し、溶液が酸性になるまでイソプロパノール中の臭化水素で酸性化した。酢酸エ
チル（35ml）を添加することにより生成物を析出させた。生成物を集め、乾燥さ
せて二臭化水素酸塩として生成物（0.70g、54％）を得た。融点281〜３℃
実施例 20
Ｎ−（1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン−７−イル）チオフェン−２−カル
ボキシイミドアミド
(a) 1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン−７−アミン一塩酸塩
これは実施例19の段階(a)の方法に準じて製造した。エタノール（150ml）中の
７−ニトロ−1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン塩酸塩（3.00g、14.0ミリモル
）および炭素上５％パラジウム(0.3g)から、明るいローズ色の固体として生成物
（2.43g、94％）を得た。融点232〜４℃
(b) Ｎ−（1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン−７−イル）チオフェン−２−
カルボキシイミドアミド
これは実施例19の段階(b)の方法に準じて製造した。イソプロパノール(2.0ml)
およびジメチルホルムアミド（2.0ml）中の1,2,3,4
−テトラヒドロイソキノリン−７−アミン一塩酸塩（0.46g）およびＳ−メチル
２−チオフェンチオカルボキシイミドヨウ化水素酸塩（0.85g）を原料とし、後
処理の後、遊離の塩基として標題化合物（0.60g、94％）を得た。これをメタノ
ール／酢酸エチル溶液中のビスオキサレート塩に変換し、オフホワイトの固体と
して生成物（0.599、54％）を得た。融点199〜200℃（分解）
実施例 21
Ｎ−（２−ベンジル−1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン−７−イル）チオフ
ェン−２−カルボキシイミドアミド
(a) ２−ベンジル−７−ニトロ−1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン一塩酸塩
アセトニトリル（100ml）中の７−ニトロ−1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリ
ン一塩酸塩（2.50g、11.6ミリモル）および炭酸カリウム（2.0g）の溶液に、ア
セトニトリル（10ml）中のベンジルブロミド（2.22g、13.0ミリモル）を添加し
た。溶液を一夜撹拌し、次に固体を濾過して除いた。溶媒を真空下に除去し、得
られた固体を塩化メチレンと水との間に分配した。乾燥（硫酸マグネシウム）し
た有機層を濃縮し、得られた油状物をエタノール（50ml）に溶解した。この溶液
をエタノール中塩酸で酸性化した。形成した沈澱を固化させ、更にエタノール15
0mlおよびエーテル50mlを添加した。固体を集め風乾し、オフホワイトの固体と
して２−ベンジル−７−ニトロ−1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン塩酸塩（2
.78g、79％）を得た。融点256〜8℃（分解）
(b) ２−ベンジル−1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン−７−アミン塩酸塩
この化合物は実施例19の段階(a)の方法に準じて製造した。エタノール（100ml
）中の２−ベンジル−７−ニトロ−1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン（2.00g
、6.56ミリモル）および炭素上５％パラジウム(0.2g)から、黄色の固体として生
成物（1.05、78％）を単離した。融点257〜９℃（分解）
(c) Ｎ−（２−ベンジル−1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン−７−イル）チ
オフェン−２−カルボキシイミドアミド
この化合物は実施例19の段階(b)の方法に準じて製造した。イソプロパノール
（2.0ml）およびジメチルホルムアミド（2.0ml）中の２−ベンジル−1,2,3,4−
テトラヒドロイソキノリン−７−アミン一塩酸塩(0.50g、1.8ミリモル)およびＳ
−メチル２−チオフェンチオカルボキシイミドヨウ化水素酸塩(0.67g、2.3ミリ
モル)から、黄色の固体として標題化合物（0.53g、84％）を得た。これをイソプ
ロパノール中シュウ酸塩に変換した。m/e＝348(M＋H)
実施例 22
Ｎ−（1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン−５−イル）チオフェン−２−カル
ボキシイミドアミド二シュウ酸塩
この化合物は実施例20において上記した方法と同様の方法により製造した。融
点75℃（分解）
実施例 23
Ｎ−（1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン−６−イル）チオフェン−２−カル
ボキシイミドアミド
(a) 1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン−６−アミン一塩酸塩
酢酸(85ml)および2.5Ｍ塩酸（30ml）の溶液中にイソキノリン−６−アミン〔M
anske，R．H．F.等，J．Am．Chem．Soc.，72，4997
(1950)〕(4.40g、30.5ミリモル)および酸化白金(300mg)の溶液をParr水素化装置
に入れ、16時間水素45psi下で加圧した。溶媒を真空下に除去し、形成した塩を
水性炭酸カリウムと塩化メチレン中20％イソプロパノールとの間に分配した。乾
燥（硫酸マグネシウム）した有機層を濃縮し、得られた油状物を溶離剤としてク
ロロホルム中２％メタノールを用いたシリカゲル上のクロマトグラフィーに付し
、油状固体として生成物3.08g(93％)を得た。この生成物(3.08g、20.8ミリモル)
をエタノール200ml中に溶解し、0.1000Ｍ塩酸溶液１等量を添加した。溶媒を除
去し、固体として一塩酸塩を得た。MS 149(M＋H)
(b) Ｎ−（1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン−６−イル）チオフェン−２−
カルボキシイミドアミド
これは実施例19の段階(b)の方法に準じて製造した。イソプロパノール(2.0ml)
およびジメチルホルムアミド（2.0ml）中の1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン
−６−アミン一塩酸塩(0.90g、4.9ミリモル)およびＳ−メチル２−チオフェンチ
オカルボキシイミドヨウ化水素酸塩(1.08g、6.2ミリモル)を原料とし、後処理お
よびシリカゲル上のクロマトグラフィーの後、遊離の塩基として標題化合物（0.
74g、57％）を得た。融点170〜５℃
実施例 24
Ｎ−（イソキノリン−７−イル）チオフェン−２−カルボキシイミドアミド
(a) ７−ニトロイソキノリン
デカリン（75ml）中の７−ニトロ−3,4−ジヒドロイソキノリン(3.00g、17.0
ミリモル)および炭酸上５％パラジウム(3.0g)の溶
液を３時間還流下に加熱した。冷却後、溶液を濾過し、触媒をクロロホルム(200
ml)で洗浄した。溶媒を真空下に除去し、黄褐色の固体として７−ニトロイソキ
ノリン(1.63g)を得た。MS 175(M＋H)
(b) イソキノリン−７−アミン
エタノール（150ml）中の７−ニトロイソキノリン(1.62g、9.25ミリモル)を50
psiで３時間触媒としての炭酸上５％パラジウム(0.2g)上で、Parr水素化装置で
水素化した。反応混合物を濾過し、溶媒を減圧下に除去した。エタノール（３ml
）から固体を再結晶させ、黄褐色の固体としてイソキノリン−７−アミン（0.98
g）を得た。MS 145(M＋H)，NMR(CDCl3)9.02(s，1H)，8.29(d，1H)，7.63(d，1H)
，7.47(d，1H)，7.13(dd，H)，7.03(d，1H)，4.00(ブロード2H)
(c) Ｎ−（イソキノリン−７−イル）チオフェン−２−カルボキシイミドアミド
イソプロパノール（４ml）およびDMF(４ml)中のイソキノリン−７−アミン(0.
96g、6.7ミリモル)およびＳ−メチル２−チオフェンチオカルボキシイミド（2.4
2g、8.36ミリモル）の溶液を18時間撹拌した。溶液を希水酸化ナトリウム中に注
ぎこみ、塩化メチレンで抽出した。抽出液を硫酸マグネシウム上に乾燥し、溶媒
を蒸発させて得られた固体は放置したところ固化した。試料をシリカゲル上のカ
ラムクロマトグラフィー（アンモニアガスで飽和させたクロロホルム中５％メタ
ノール）で精製し、固体1.31gを得た。固体を酢酸エチル（25ml）から再結晶さ
せ、オフホワイトの固体として標題化合物1.05gを得た。融点177.5〜8.5℃
─────────────────────────────────────────────────────
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(51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ
Ａ６１Ｋ 31/34 ＡＢＥ 9454−4Ｃ Ａ６１Ｋ 31/34 ＡＢＥ
ＡＣＤ 9454−4Ｃ ＡＣＤ
ＡＣＪ 9454−4Ｃ ＡＣＪ
ＡＣＹ 9454−4Ｃ ＡＣＹ
ＡＤＵ 9454−4Ｃ ＡＤＵ
ＡＧＺ 9454−4Ｃ ＡＧＺ
31/38 ＡＥＤ 9454−4Ｃ 31/38 ＡＥＤ
31/47 ＡＡＡ 9454−4Ｃ 31/47 ＡＡＡ
Ｃ０７Ｄ 333/38 9455−4Ｃ Ｃ０７Ｄ 333/38
409/12 ２１５ 9159−4Ｃ 409/12 ２１５
521/00 7822−4Ｃ 521/00
(81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，
ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ
Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＡＵ，ＣＡ，ＦＩ，ＪＰ，Ｍ
Ｘ，ＮＯ，ＵＳ
(72)発明者 マリー，ロバート・ジヨン
アメリカ合衆国ニユーヨーク州 14618.
ブライトン．ラツクカインドライブ172
(72)発明者 マーツ，ジエイムズ・ラツセル
アメリカ合衆国ニユーヨーク州 14450.
フエアポート．ウオーターフオードウエイ
60