【発明の詳細な説明】
エンドセリン受容体拮抗薬
発明の分野
本発明は、新規ジヒドロイソインドール誘導体、これらの化合物を含有する医
薬組成物およびエンドセリン受容体拮抗薬としてのそれらの使用に関する。
エンドセリン（ＥＴ）は、血管内皮により合成され放出される非常に有効な血
管収縮ペプチドである。エンドセリンは、３種類の異性体、ＥＴ−１、ＥＴ−２
およびＥＴ−３として存在する［特記しない限り、「エンドセリン」は、エンド
セリンのイソフォームのいずれかまたは全てを意味する］。エンドセリンは、心
臓血管系、特に、冠動脈、腎臓および脳循環に対して強い影響を及ぼす。エンド
セリンの高い放出または異常な放出は、心臓血管、脳血管、呼吸および腎臓の病
体生理学の病理発生に関与する平滑筋収縮に関連する。本態性高血圧症、急性心
筋梗塞、クモ膜下出血、アテローム性動脈硬化症の患者および透析を受けている
尿毒症の患者の血漿において、エンドセリンの上昇したレベルが報告された。
in vivoで、エンドセリンは、血圧および心拍出量に対して影響を及ぼす。ラ
ットにおけるＥＴの静脈内ボーラス注射（０.１〜３nmol／kg）は、一過性の用
量関連降圧応答（０.５〜２分持続する）、次いで、動脈血圧の持続性の用量依
存性上昇（投与後２〜３時間高い値を維持できる）を生じる。ラットにおける３
nmol／kgより多い投与量は、しばしば致命的であることが証明されている。
エンドセリンは、腎血管床における優先的な効果を生じることが明らかである
。これは、ＧＦＲ、尿量、尿ナトリウムおよびカリウム排出の著しい減少を伴う
腎血流の顕著に長い持続性減少を生じる。エンドセリンは、心房性ナトリウム排
出増加性ペプチドの著しい増加にもかかわらず持続性抗ナトリウム排出増加性効
果を生じる。エンドセリンは、また、血漿レニン活性を刺激する。これらの知見
は、ＥＴが腎機能の調節に関係し、急性腎不全、シクロスポリン腎毒性、放射対
照（radio contrast）誘発性腎不全および慢性腎不全を含む種々の腎障害に関係
す
ることを示唆するものである。
研究から、in vivoで、脳脈管系がエンドセリンの血管拡張薬効果および血管
収縮効果の両方に非常に敏感であることが判明した。したがって、ＥＴは、脳血
管痙攣、クモ膜下出血の致死的結果の重要なメディエイターでありえる。
ＥＴは、また、重篤な無呼吸および虚血性病変などの直接的中枢神経系効果を
も示し、これは、ＥＴが脳梗塞の発生および神経細胞死に寄与することを示唆す
るものである。
ＥＴは、心筋虚血［Ｎicholsら、Ｂr.Ｊ.Ｐharm.９９：５９７−６０１、１９
８９およびＣlozelおよびＣlozel、Ｃirc.Ｒes.、６５：１１９３−１２００、
１９８９］、冠動脈血管痙攣［Ｆukudaら、Ｅur.Ｊ.Ｐharm.１６５：３０１−３
管平滑筋細胞増殖［Ｔakagi、Ｂiochem ＆ Ｂiophys.Ｒes.Ｃommun.、１６８：
５３７−５４３、１９９０、Ｂobekら、Ａm.Ｊ.Ｐhysiol.２５８：４０８−Ｃ４
１５、１９９０］およびアテローム性動脈硬化症［Ｎakakiら、Ｂiochem．＆
Ｂiophys.Ｒes.Ｃommun.）１５８：８８０−８８１、１９８９およびＬermanら
、Ｎew Ｅng.Ｊ.of Ｍed.３２５：９９７−１００１、１９９１］にも関係して
いた。冠動脈バルーン血管形成後、エンドセリンのレベルが増加することが判明
している［Ｋadelら、Ｎo.２４９１ Ｃirc.８２：６２７、１９９０］。
さらに、エンドセリンは、単離された、ヒト気管支を含む哺乳動物気道組織の
有効な収縮薬であることが判明している［Ｕchidaら、Ｅur.Ｊ.of Ｐharm.１５
４：２２７−２２８、１９８８、ＬaＧente、Ｃlin.Ｅxp.Ａllergy ２０：３４
３−３４８、１９９０；およびＳpringallら、Ｌancet、３３７：６９７−７０
１、１９９１］。エンドセリンは、間質性肺繊維症および関連肺高血圧症［Ｇla
rdら、Ｔhird Ｉnternational Ｃonference on Ｅndothelin、１９９３、ｐ.３
４］およびＡＲＤＳ（成人呼吸窮迫症候群）［Ｓanaiら、前掲、ｐ.１１２］の
病原において役割を果たす。
エンドセリンは、胃粘膜における出血性および壊死性損傷［Ｗhittleら、Ｂr.
Ｊ.Ｐharm.９５：１０１１−１０１３、１９８８］；レイノー現象
［Ｃinninielloら、Ｌancet ３３７：１１４−１１５、１９９１］；クローン病
および潰瘍性大腸炎［Ｍunchら、Ｌancet、Ｖol.３３９、ｐ.３８１］；片頭痛
［Ｅdmeads、Ｈeadache、１９９１年２月ｐ．１２７］；敗血症［Ｗeitzbergら
、Ｃirc.Ｓhock ３３：２２２−２２７、１９９１；Ｐittetら、Ａnn.Surg.２１
３：２６２−２６４、１９９１］、シクロスポリン誘発性腎不全または高血圧症
［Ｅur.Ｊ.Ｐharmacol.、１８０：１９１−１９２、１９９０、Ｋidney Ｉnt、
３７：１４８７−１４９１、１９９０］および内毒素ショックおよび他の内毒素
誘発性疾患［Ｂiochem.Ｂiphys.Ｒes.Ｃommun.、１６１；１２２０−１２２７、
１９８９、Ａcta Ｐhysiol.Ｓcand.１３７：３１７−３１８、１９８９］および
炎症性皮膚疾患［Ｃlin Ｒes.４１：４５１および４８４、１９９３］および筋
肉変性に関連していた。
エンドセリンは、妊娠の子癇前症［Ｃlarkら、Ａm.Ｊ.Ｏbstet.Ｇynecol.、１
９９２年３月、ｐ.９６２−９６８；Ｋamorら、Ｎ.Ｅng.Ｊ.of Ｍed.、１９９０
年１１月２２日、ｐ.１４８６−１４８７；Ｄekkerら、Ｅur.Ｊ.Ｏb.and Ｇyn.a
nd Ｒep.Ｂio．４０（１９９１）２１５−２２０；Ｓchiffら、Ａm.Ｊ.Ｏstet.
Ｇynecol．１９９２年２月、ｐ.６２４−６２８］；真性糖尿病［Ｔakahashiら
、Ｄiabetologia（１９９０）３３：３０６−３１０］；および腎臓移植後の急
性血管拒絶［Ｗatschingerら、Ｔransplantation、Ｖol.５２、Ｎo.４、ｐｐ.７
４３−７４６］に関連していた。
エンドセリンは、骨吸収および同化の両方を刺激し、骨再形成のカップリング
に関与する［Ｔatraiら、Ｅndocrinology、Ｖol.１３１、ｐ.６０３−６３７］
。
エンドセリンは、子宮腔内での精子の輸送を刺激することが報告されており［
Ｃaseyら、Ｊ.Ｃlin.Ｅndo and Ｍetabolism、Ｖol.７４、Ｎo.１、ｐ.２２３−
２２５］、したがって、エンドセリン拮抗物質は、男性避妊薬として有用である
。エンドセリンは、卵巣／月経周期を調節し［Ｋenegsberg、Ｊ.of Ｃlin.Ｅndo
.and Ｍet.、Ｖol.７４、Ｎo.１、ｐ．１２］、ヒトにおける陰茎血管緊張の調
節においても役割を果たす［Ｌauら、Ａsia Ｐacific Ｊ.of Ｐharm.、１９９１
、６：２８７−２９２およびＴejadaら、Ｊ.Ａmer.Ｐhysio.Ｓoc.、１９９
１、Ｈ１０７８−Ｈ１０８５］。エンドセリンは、ヒト前立腺平滑筋の有効な収
縮も媒介する［Ｌangenstroerら、Ｊ.Ｕrology、Ｖol.１４９、ｐ.４９５−４９
９］。
このように、エンドセリン受容体拮抗物質は、高血圧、肺高血圧、腎不全、虚
血誘発性腎不全、敗血症−内毒素誘発性腎不全の薬物療法に対する、放射線対照
誘発性腎不全、急性および慢性シクロスポリン誘発性腎不全、大脳血管障害、心
筋虚血、アンギナ、心不全、喘息、アテローム性硬化症、筋肉変性、レイノー現
象、潰瘍、敗血症、片頭痛、緑内障、内毒素ショック、内毒素誘発性多臓器不全
または播種性血管内凝固、シクロスポリン誘発性腎不全の予防および／または治
療に対する、ならびに再狭窄の予防のための血管形成術の佐剤として、糖尿病お
よび妊娠の子癇前症の予防および／または治療に対する、骨再形成および腎臓移
植おける、男性避妊薬として、不妊症および持続勃起および良性前立腺肥大症の
予防および／または治療に対する固有のアプローチを提供する。
発明の概要
本発明は、式(Ｉ)で示されるジヒドロイソインドール誘導体およびこれらの化
合物を含む医薬組成物、ならびに、限定されないが、高血圧、急性および慢性腎
不全、シクロスポリン誘発性腎毒性、発作、脳血管痙攣、心筋虚血、アンギナ、
心不全およびアテローム性硬化症を含む種々の心臓血管および腎臓病の治療にお
いて有用なエンドセリン受容体拮抗物質としての使用および再狭窄症の予防のた
めおよび良性前立腺肥大症のための血管形成における佐剤としての使用に関する
。
本発明は、さらに、エンドセリン受容体の拮抗を必要とするヒトを含む動物に
式(Ｉ)で示される化合物の有効量を投与することを特徴とするヒトを含む動物に
おけるエンドセリン受容体を拮抗するための方法により構成される。
発明の詳細な説明
本発明の化合物は、構造式(Ｉ)：
［式中、
Ｒ1は、−Ｘ(ＣＨ2)nＡrまたは−Ｘ(ＣＨ2)nＲ8であり；
Ｒ2は、水素、ＡrまたはＣ1-4アルキルであり；
Ｐ1は、テトラゾール、ＳＯ2ＮＲ7Ｒ11、ＣＯＮＲ7ＳＯ2Ｒ11または(ＣＨ2)s
Ｒ8であり；
Ｒ3およびＲ5は、独立して、水素、Ｒ11、ＯＨ、Ｃ1-8アルコキシ、Ｓ(Ｏ)qＲ11
、Ｎ(Ｒ6)2、Ｂr、Ｆ、Ｉ、Ｃl、ＣＦ3、ＮＨＣＯＲ6、Ｒ11ＣＯ2Ｒ7、−Ｘ−
Ｒ9−Ｙまたは−Ｘ(ＣＨ2)nＲ8であり（ここで、−Ｘ(ＣＨ2)nＲ8中の各メチレ
ン基は、非置換であっても、１または２個の−(ＣＨ2)nＡr基によって置換され
ていてもよい）；
Ｒ4は、水素、Ｒ11、ＯＨ、Ｃ1-5アルコキシ、Ｓ(Ｏ)qＲ11、Ｎ(Ｒ6)2、−Ｘ(
Ｒ11)、Ｂr、Ｆ、Ｉ、ＣlまたはＮＨＣＯＲ6であり（ここで、Ｃ1-5アルコキシ
は、非置換であっても、ＯＨ、メトキシまたはハロゲンで置換されていてもよい
）；
Ｒ6は、独立して、水素またはＣ1-4アルキルであり；
Ｒ7は、独立して、水素、Ｃ1-10アルキル、Ｃ2-10アルケニルまたはＣ2-8アル
キニルであるか（ここで、これらは、全て、非置換であっても、１個以上のＯＨ
、Ｎ(Ｒ6)2、ＣＯ2Ｒ12、ハロゲンまたはＸＣ1-5アルキルによって置換されてい
てもよい）；または、Ｒ7は、(ＣＨ2)nＡrであり；
Ｒ8は、水素、Ｒ11、ＣＯ2Ｒ7、ＣＯ2Ｃ(Ｒ11)2Ｏ(ＣＯ)ＸＲ7、ＰＯ3(Ｒ7)2
、ＳＯ2ＮＲ7Ｒ11、ＮＲ7ＳＯ2Ｒ11、ＣＯＮＲ7ＳＯ2Ｒ11、ＳＯ3Ｒ7、ＳＯ2Ｒ7
、Ｐ(Ｏ)(ＯＲ7)Ｒ7、ＣＮ、−ＣＯ2(ＣＨ2)mＣ(Ｏ)Ｎ(Ｒ6)2、Ｃ(Ｒ11)2Ｎ(Ｒ7
)2、Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ6)2またはテトラゾールであり；
Ｒ9は、(ＣＨ2)n、Ｃ1-10アルキレン、Ｃ2-10アルケニレンまたはフェニレニ
ルであるか（これらは、全て、非置換であっても、１個以上のＯＨ、Ｎ(Ｒ6)2、
ＣＯＯＨ、ハロゲンで置換されていてもよい）；または、Ｒ9は、＞Ｃ＝Ｏまた
はＸＣ1-5アルキルであってもよく；
Ｒ11は、水素、Ａr、Ｃ1-8アルキレン、Ｃ2-8アルケニレン、Ｃ2-8アルキニレ
ンであり（ここで、これらは、全て、非置換であっても、１個以上のＯＨ、ＣＨ2
ＯＨ、Ｎ(Ｒ6)2またはハロゲンで置換されていてもよい）；
Ｒ12は、水素、Ｃ1-6アルキル、Ｃ2-6アルケニルまたはＣ2-7アルキニルであ
り；
Ｘは、(ＣＨ2)n、Ｏ、またはＮＲ6であり；
Ｙは、ＣＨ3またはＸ(ＣＨ2)nＡrであり；
Ａrは、
ナフチル、インドリル、ピリジル、チエニル、オキサゾリジニル、オキサゾリル
、チアゾリル、イソチアゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イ
ミダゾリル、イミダゾリジニル、チアゾリジニル、イソオキサゾリル、オキサジ
アゾリル、チアジアゾリル、モルホリニル、ピペリジニル、ピペラジニル、ピロ
リル、またはピリミジルであり（これらは、全て、非置換であっても、１個以上
のＲ3またはＲ4基で置換されていてもよい）；
Ａは、Ｃ＝Ｏ、または[Ｃ(Ｒ6)2]mであり；
Ｂは、−ＣＨ2−または−Ｏ−であり；
Ｚ1およびＺ2は、独立して、水素、Ｃ1-8アルキル、Ｃ2-8アルケニル、Ｃ2-8
アルキニル、ＯＨ、Ｃ1-8アルコキシ、Ｓ(Ｏ)qＣ1-8アルキル、Ｎ(Ｒ6)2、Ｂr、
Ｆ、Ｉ、Ｃl、ＮＨＣＯＲ6、−Ｘ−Ｒ9−Ｙ、−Ｘ(ＣＨ2)nＲ8、フェニル、ベン
ジルまたはＣ3-6シクロアルキルであるか（ここで、Ｃ1-8アルキル、Ｃ2-8アル
ケニルまたはＣ2-8アルキニルは、所望により、ＣＯＯＨ、ＯＨ、ＣＯ(ＣＨ2)n
ＣＨ3、ＣＯ(ＣＨ2)nＣＨ2Ｎ(Ｒ6)2またはハロゲンによって置換されていてもよ
い）；またはＺ1およびＺ2は、一緒になって、隣接する炭素上で−Ｏ−Ａ−Ｏ−
であってもよく；
Ｚ3は、Ｚ1または−Ｘ−Ｒ9−Ｙであり；
ｑは、０、１または２であり；
ｎは、０〜６の整数であり；
ｓは、１〜６の整数であり；
ｍは、１、２または３であり；
点線は、二重結合の任意の存在を示す；ただし、Ｐ1は、(ＣＨ2)sＮＨ2ではな
い］
で表されるか、またはその医薬上許容される塩である。
医薬上許容される塩錯体も本発明に含まれる。
全てのアルキル基、アルケニル基、アルキニル基およびアルコキシ基は、直鎖
であっても分枝鎖であってもよい。「ハロゲン」なる語は、ヨード、フルオロ、
クロロまたはブロモを意味するために用いられる。アルキル基は、１個以上のハ
ロゲンで過ハロゲン化まで置換されていてもよい。
本発明の化合物は、１個以上の不斉炭素原子を含有してもよく、ラセミ形およ
び光学活性形で存在してもよい。これらの化合物およびジアステレオ異性体は、
全て、本発明の範囲内に含まれる。
本発明は、アルゴン下、−７８℃で、ＴＨＦなどの溶媒中、(２)：
［式中、Ｚ1、Ｚ2およびＺ3は、式Ｉにおける定義と同じである］
で示されるような好適に置換されているオルトブロモ安息香酸を２当量のｎ−ブ
チルリチウムと反応させ、次いで、ＴＨＦなどの好適な溶媒中、式(３)：
で示される酸塩化物を添加して、式(４)：
で示される化合物を提供することによって製造することができる前記式(Ｉ)：
で示される化合物である。
酢酸中、Ｚnなどの好適な還元剤による化合物(４)の処理により、式(５)：
で示されるフェニル置換フタリドが得られる。
還流させながら、エーテルなどの好適な溶媒中、式(６)：
Ｒ1ＭgＢr (６)
［式中、Ｒ1は、式Ｉにおける定義と同じである］
で示される有機マグネシウム化合物で(５)を処理し、酸処理した後、式(７)：
で示される化合物が得られる。
ジョーンズ試薬によるなどの適切な条件下での(７)の酸化により、式(８)：
で示される化合物が得られる。
式(１０)：
で示されるイソインドールは、エタノール中のホウ水素化ナトリウムの存在下、
還流させながら、エタノールなどの好適な溶媒中、式(９)
Ｈ2ＮＱ (９)
［式中、Ｑは、水素または(ＣＨ2)sＲ8である］
で示される第１アミンによる(８)の処理によって得ることができる。
１０％パラジウム−炭などの好適な触媒の存在下、加圧下、熱酢酸中、または
水素ガスで、Ｚn(Ｃu)などの適切な条件下、式(１０)で示されるイソインドール
の還元により、式(１１)：
で示される化合物が得られる。
式(１１)で示される化合物は、所望により、ＱからＰ1へのアシル化またはア
ルキル化によって式(Ｉ)で示される化合物に転換してもよい。
適当な操作および化学機能性の保護により、式(Ｉ)で示される残りの化合物の
合成は、前記と類似の方法により行われる。
式(Ｉ)で示される化合物またはその医薬上許容される塩をヒトおよび他の哺乳
動物の治療に用いるために、通常、標準的な製薬プラクティスに従って、医薬組
成物として製剤化される。
式(Ｉ)で示される化合物およびその医薬上許容される塩は、所定の疾患の治療
に関する標準的な方法で、例えば、経口投与、非経口投与、舌下投与、経皮投与
、直腸投与、吸入による投与または口腔内投与される。
経口投与した場合、活性な、式(Ｉ)の化合物およびその医薬上許容される塩は
、シロップ、錠剤、カプセルおよびロゼンジ剤として製剤化することができる。
シロップ製剤は、一般に、化合物または塩の、矯味矯臭剤または着色料を含む液
体担体、例えば、エタノール、落花生油、オリーブ油、グリセリンまたは水中懸
濁液または溶液からなる。組成物が錠剤の形態である場合、固体製剤を調製する
のに慣用的に用いられるいずれの医薬担体も用いることができる。このような担
体の例としては、ステアリン酸マグネシウム、白土、タルク、ゼラチン、寒天、
ペクチン、アラビアガム、ステアリン酸、デンプン、ラクトースおよびスクロー
スが挙げられる。組成物がカプセル剤の形態である場合、例えば、ゼラチン硬カ
プセル中、前記担体を用いるような、いずれの慣用的な被包化も適している。組
成物がゼラチン軟カプセルの形態である場合、分散剤または懸濁液剤の調製に慣
用的に用いられるいずれの医薬担体、例えば、水性ガム、セルロース、シリケー
ト
または油を考慮してもよく、ゼラチン軟カプセル中に配合される。
典型的な非経口組成物は、化合物または塩の、所望により非経口的に許容でき
る油、例えば、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、レシチン、落
花生油、またはゴマ油などを含有してもよい無菌の水性または非水性担体中溶液
または懸濁液からなる。
典型的な吸入用組成物は、乾燥粉末として投与してもよい溶液、懸濁液または
乳液の形態、またはジクロロジフルオロメタンまたはトリクロロフルオロメタン
などの慣用の噴射剤を用いたエアロゾルの形態である。
典型的な坐剤製剤は、この方法で投与した場合に活性である式(Ｉ)で示される
化合物またはその医薬上許容される塩および結合剤および／または滑沢剤、例え
ば、ポリマーグリコール、ゼラチン、カカオ脂または他の低融点植物性ワックス
または脂肪またはその合成類似体からなる。
典型的な経皮製剤は、慣用の水性または非水性ビヒクル、例えばクリーム、軟
膏、ローションまたはペーストからなるか、または、医療用プラスター、貼付剤
または膜の形態である。
好ましくは、組成物は、単位投与形態、例えば、錠剤、カプセルまたは計量器
付エアロゾルであり、患者が単一用量を自分で投与できるようになっている。
経口投与用の各投与単位は、適当には、式(Ｉ)で示される化合物またはその医
薬上許容される塩を遊離酸換算で、０.１mg〜５００mg／kg、好ましくは１mg〜
１００mg／kg含有し、非経口投与用の各投与単位は、適当には、０.１mg〜１０
０mg含有する。鼻腔内投与用の各投与単位は、適当には、１人あたり１〜４００
mg、好ましくは、１０〜２００mgを含有する。局所用製剤は、適当には０.０１
〜１.０％の式(Ｉ)の化合物を含有する。
経口投与の１日投与計画は、適当には、遊離酸換算で、式(Ｉ)の化合物または
その医薬上許容される塩約０.０１mg／kg〜４０mg／kgである。非経口投与の１
日投与計画は、適当には、遊離酸換算で、式(Ｉ)で示される化合物またはその医
薬上許容される塩約０.００１mg／kg〜４０mg／kgである。鼻腔内投与および経
口吸入の１日投与計画は、適当には、約１０〜約５００mg／人である。活性成分
は、１日に１〜６回、所望の活性を示すのに充分なだけ投与される。
本発明の化合物を本発明に従って投与した場合、許容できない毒学的影響は、
予想されない。
式(Ｉ)で示されるの化合物の生物活性を以下の試験により示す：
Ｉ．結合検定
Ａ）膜調製（ラット小脳または腎皮質）
ラット小脳または腎皮質を迅速に切開し、直ちに液体窒素中で凍結させるか、
または、凍結させずに用いた。組織、すなわち小脳に関しては１〜２g、または
、腎皮質に関しては３〜５gを２０mＭトリスＨＣlおよび５mＭ ＥＤＴＡを含有
する緩衝液（ｐＨ７.５）１５mlの中、４℃で、モーター駆動式ホモジナイザー
を用いて均質化した。ホモジネートをチーズクロスを通して濾過し、２０,００
０×ｇで１０分間、４℃で遠心分離した。上清を除去し、４０,０００×ｇで３
０分間、４℃で遠心分離した。得られたペレットを５０mＭトリス、１０mＭ Ｍg
Ｃl2を含有する少量の緩衝液（pＨ７.５）中に再懸濁した；小バイアルでアリコ
ートにし、液体窒素中で凍結させた。膜を希釈して、結合検定における小脳およ
び腎皮質の各試験管に対して蛋白質１および５マイクログラムを得た。
新たに単離したラット腸間膜動脈および副行脈管床（collateral vascular be
d）を氷冷生理食塩水（氷上）中で洗浄し、リンパ節を大動脈に沿って除去した
。次いで、該組織を、腸間膜動脈〜６gに関して１５ml容積中、４℃で、２０mＭ
トリスおよび５mＭ ＥＤＴＡ（pＨ７.５）を含有する緩衝液（ｐＨ７.５）中ポ
リトロンを用いて均質化した。ホモジネートをチーズクロスを通して濾過し、２
,０００×ｇで１０分間、４℃で遠心分離した。上清を除去し、４０,０００×ｇ
で３０分間、４℃で遠心分離した。得られたペレットを、小脳および腎皮質に関
して前記したように再懸濁した。膜蛋白質約１０マイクログラムを結合実験の各
試験管に関して用いた。
Ｂ）ＣＨＯ細胞膜調製
ヒトＥＴAおよびＥＴB受容体で安定にトランスフェクトしたＣＨＯ細胞を、１
０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を補足したダルベッコ修飾イーグル培地（ＤＭＥＭ
）
中、２４５mm×２４５mm組織培養プレート中で増殖させた。融合細胞をプロテア
ーゼ抑制カクテル（５mＭ ＥＤＴＡ、０.５mＭ ＰＭＳＦ、５μg／mlロイペプチ
ン、および０.１Ｕ／mlアプロチニン）を含有するＤＰＢＳ（ダルベッコのリン
酸緩衝塩溶液）で洗浄し、同一の緩衝液中にかきおとした。８００×ｇで遠心分
離した後、細胞を液体窒素中で凍結させ、氷上で解凍し、次いで、２０mＭトリ
スＨＣl（pＨ７.５）およびプロテアーゼ抑制カクテルを含有する溶解緩衝液中
で均質化（ガラスダンス型ホモジナイザーを用いて３０回）することにより溶解
した。未破壊細胞および核を除去するために、８００×ｇで１０分間、初回遠心
分離した後、４０,０００×ｇで１５分間、上清を遠心分離し、ペレットを５０m
ＭトリスＨＣl、pＨ７.５および１０mＭ ＭgＣl2中に再懸濁させ、少量のアリコ
ートを、液体Ｎ2中で凍結した後、−７０℃で保存した。ＢＣＡ法および標準と
してウシ血清アルブミンを用いて、蛋白質を測定した。
Ｃ） [125Ｉ]ＥＴ−１結合プロトコール
ラット小脳（２〜５mg蛋白質／分析試験管）または腎皮質（３〜８マイクログ
ラム蛋白質／分析試験管）またはＣＨＯ細胞膜（ＥＴAおよびＥＴB受容体に関し
てそれぞれ４〜６および１〜２マイクログラムの膜蛋白質を含有する）由来の膜
への[125Ｉ]ＥＴ−１結合を、合計容積１００マイクロリットルの５０mＭトリス
ＨＣl、１０mＭ ＭgＣl2、０.０５％ＢＳＡ、ｐＨ７.５緩衝液中、３０℃で６０
分間、インキュベートした後、測定した。膜蛋白質を緩衝液または所定濃度の化
合物を入れた試験管に添加した。[125Ｉ]ＥＴ−１（２２００Ｃｉ／ミリモル）
を、ＢＳＡを含有する同一の緩衝液中で希釈して、最終濃度を０.２〜０.５nＭ
ＥＴ−１とした。全結合および非特異性結合を１００nＭ未標識ＥＴ−１の非存
在下および存在下で測定した。インキュベーション後、５０mＭトリスおよび１
０mＭ ＭgＣl2を含有する冷緩衝液（pＨ７.５）３.０mlで反応を停止した。ワッ
トマンＧＦ／Ｃ濾紙を通して濾過し、ブランデル（Ｂrandel）セルハーベスター
を用いてフィルターを冷緩衝液３mlで５回洗浄することによって、膜結合放射能
を遊離リガンドから分離した。濾紙を７５％の効率でガンマカウンターで計測し
た。本発明の化合物に関するＩＣ50は、０.０１nm〜５０μＭの範囲である。
II．in vitro血管平滑筋活性
ラット大動脈を結合組織および付着脂肪を除き、長さ約３〜４mmの環状セグメ
ントに切断する。血管リングを以下の組成（ミリモル）のクレブス−重炭酸塩溶
液を入れた臓器浴チャンバー（１０ml）中につるす：ＮaＣl、１１２.０；ＫＣl
、４.７；ＫＨ2ＰＯ4、１.２；ＭgＳＯ4、１.２；ＣaＣl2、２.５；ＮaＨＣＯ3
、２５.０；およびデキストロース、１１.０。組織浴溶液を３７℃に維持し、連
続して９５％Ｏ2／５％ＣＯ2を通気する。大動脈の静止張力を１gに維持し、２
時間平衡化させ、その間、浴溶液を１５〜２０分ごとに替える。等尺性緊張を、
グラス（Ｇrass）ＦＴ０３力−変換トランスデューサーを有するベックマン（Ｂ
eckman）Ｒ−６１１ダイノグラフで記録する。ＥＴ−１または他の収縮作用物質
に対する累積濃度応答曲線を拮抗物質を段階的に添加する方法により作成する。
ＥＴ−１濃度は、前の濃度で定常状態収縮応答を生じた後にのみ増加する。各組
織において１つだけＥＴ−１に対する濃度応答曲線が得られる。ＥＴ受容体拮抗
物質を、収縮作用物質に対する濃度応答の始まる３０分前に対の組織に添加する
。
ＥＴ−１誘発血管収縮は、各実験の始めに測定する各組織に関しての６０mＭ
ＫＣlにより得られる応答のパーセンテージで表す。データは、平均±Ｓ.Ｅ.Ｍ.
として表す。競合する拮抗物質の解離定数（Ｋb）を、アランラクシャナ（Ａrun
lakshana）およびシールド（Ｓchild）の標準法により測定する。本発明の化合
物の効力範囲は、０.１nＭ〜５０mＭの範囲である。
以下の実施例は、例示的なものであって、本発明の化合物を限定するものでは
ない。
実施例１
（１ＲＳ,３ＲＳ）−[３−[(２−カルボキシメトキシ−４−メトキシ)フェニル]
−１−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−５−(プロパ−１−イルオキシ)(１
Ｈ,３Ｈ−ジヒドロ−イソインドール−２−イル)]酢酸，トリフルオロ酢酸塩
ａ）３−(プロパ−１−イルオキシ)ベンゾイル酢酸ベンジル
アルゴン下、ベンジルアルコール（０.１９７ml、１.９１mmol）、４−ジメチ
ルアミノピリジン（０.０７７g、０.６４mmol）の乾燥トルエン（５ml）中溶液
にトルエン（０.５ml）中の３−(プロパ−１−イルオキシ)ベンゾイル酢酸メチ
ル（０.３００g、１.２７mmol）を添加した。該反応を還流させながら２４時間
撹拌した。次いで、冷却後、該混合物を飽和塩化アンモニウムでクエンチし、酢
酸エチルに分配させた。合わせた有機抽出物を、水、食塩水で連続して洗浄し、
乾燥させた（ＭgＳＯ4）。減圧下、溶媒を除去した後、残留物のフラッシュクロ
マトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン（３：７））に付して、黄
色油状物として標記化合物（０.３２０g、８０％）を得た。
ｂ）３−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−２−[３−プロパ−１−イルオ
キシ)−ベンゾイル]プロペン酸ベンジル
３,４−(メチレンジオキシ)ベンズアルデヒド(４.８１g、３２.１mmol)、３−
(プロパ−１−イルオキシ)ベンゾイル酢酸ベンジル（１０.０g、３２.１mmol）
のベンゼン（５０ml）中溶液にピペリジン（０.３１ml、３.２１mmol）、次いで
、酢酸（１０滴）を添加した。該反応を、還流させながらディーンスターク装置
を装着して２時間撹拌した。溶媒を除去して、黄色油状物を得た。酢酸エチル／
ヘキサンから再結晶して、オフホワイト色固体として標記化合物を得た（９.８g
、６９％）。
ｃ）(１ＲＳ,２ＳＲ)−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−５−プロパ−１
−イルオキシ−３−オキソ−インダン−２−カルボン酸ベンジル
３−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−２−[３−プロパ−１−イルオキシ
)−ベンゾイル]プロペン酸ベンジル（９.３ｇ、２０.９mmol）のトリフルオロ酢
酸（４０ml）中溶液を室温で１.５時間撹拌した。溶媒を除去し、得られた残留
物を酢酸エチルに溶解させ、水、５％重炭酸ナトリウムおよび食塩水で連続して
洗浄した。有機抽出物を乾燥させ（ＭgＳＯ4）、減圧下、溶媒を除去して、黄色
油状物として標記化合物（９.８g、定量的）を得た。
ｄ）１−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−５−プロパ−１−イルオキシ
−３−オキソ−インダン
(１ＲＳ,２ＳＲ)−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−５−プロパ−１−イ
ルオキシ−３−オキソ−インダン−２−カルボン酸ベンジル（８.２g、１８.４m
mol）の熱酢酸（１３０ml）中溶液に、アルゴン下、１０％Ｐd／Ｃ（４.１g）、
次いで、１,４−シクロヘキサジエン（１７.４ml、１８５mmol）を添加した。該
反応は、発熱を伴い、ガス発生が観察された。該反応を、アルゴン下、室温で２
時間撹拌した。該混合物をセライトパッドを介して濾過し、真空濃縮した。残留
物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン（３：
７））に付して、ピンク色がかった固体として標記化合物を得た（５.０８g、９
３％）。
ｅ）３−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−６−プロパ−１−イルオキシ
インデン−１−オン
１−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−５−プロパ−１−イルオキシ−３
−オキソ−インダン（２.７g、９.０６mmol）、２,３−ジクロロ−５,６−ジシ
アノ−１,４−ベンゾキノン（２.４５g、１０.８７mmol）の１,４−ジオキサン
（８０ml）中溶液を還流させながら２時間撹拌した。減圧下、溶媒を除去し、得
られた残留物を塩化メチレンに溶解させ、濾過した。濾液を濃縮し、フラッシュ
クロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン（３：７））に付して
、赤色固体として標記化合物（１.４８g、５５％）を得た。
ｆ）(１ＲＳ)−１−[(２−ベンジルオキシ−４−メトキシ)フェニル]−１−ヒ
ドロキシ−３−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−６−プロパ−１−イルオ
キシ−１Ｈ−インデン
アルゴン下、０℃で、３−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−６−プロパ
−１−イルオキシインデン−１−オン（２.２g、７.４mmol）のＴＨＦ（５０ml
）中溶液に、ＴＨＦ：Ｅt2Ｏの１：１混合物（合計３０ml）中の２−ベンジルオ
キシ−４−メトキシフェニルマグネシウムブロミド（７.０７g、２２.３mmol）
の新しく調製した溶液を滴下した。該反応を０℃で２０分間撹拌した。次いで、
該混合物を１Ｎ ＨＣlでクエンチし、酢酸エチルで抽出した。次いで、有機抽出
物を水、食塩水で洗浄し、乾燥させた（ＭgＳＯ4）。減圧下、溶媒を除去した後
、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン
（３：７））に付して、オフホワイト色の結晶として標記化合物（１.７７g、４
６％）を得た。
ｇ）１−(２−ベンジルオキシ−４−メトキシベンゾイル)−２−(３,４−メチ
レンジオキシベンゾイル)−５−プロパ−１−イルオキシベンゼン
アルゴン下、(１ＲＳ)−１−[(２−ベンジルオキシ−４−メトキシ)フェニル]
−１−ヒドロキシ−３−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−６−プロパ−１
−イルオキシ−１Ｈ−インデン（０.１００g、０.１９mmol）の四塩化炭素：ア
セトニトリル：水の１：１：１混合物（合計１８ml）中溶液に塩化ルテニウム(I
II)水和物（０.０１０g、０.０４８mmol）、次いで、過ヨウ素酸ナトリウム（０
.０７１g、０.３２mmol）を添加した。該反応を室温で１.５時間撹拌した。１.
５時間後、出発物質と所望の生成物の１：１混合物を観察した。該反応にさらに
塩化ルテニウム(III)水和物（０.０１０g）および過ヨウ素酸ナトリウム（０.０
７１g）を添加し、室温で２０分間撹拌し続けた。該混合物をセライトパッドで
濾過し、濾液を酢酸エチルと水とに分配した。合わせた有機抽出物を、水、食塩
水で連続して洗浄し、乾燥させた（ＭgＳＯ4）。減圧下、溶媒を除去した後、残
留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン（３
：７））に付して、黄色油状物として標記化合物（０.０５０g、５０％）を得た
。
ｈ）１−(２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾイル)−２−(３,４−メチレン
ジオキシベンゾイル)−５−プロパ−１−イルオキシベンゼン
１−(２−ベンジルオキシ−４−メトキシベンゾイル)−２−(３,４−メチレン
ジオキシベンゾイル)−５−プロパ−１−イルオキシベンゼン（０.４３７g、０.
８４mmol）の酢酸エチル：ヘキサンの１：１混合物（２０ml）中溶液に１０％Ｐ
d／Ｃ（０.０４０g）を添加し、該混合物を、６０psiの水素雰囲気下、２４時間
振盪した。該反応混合物をセライトパッドを介して濾過し、濾液を乾燥させた（
ＭgＳＯ4）。減圧下、溶媒を除去した後、残留物のフラッシュクロマトグラフィ
ー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン（３：７））に付して、薄黄色の油状物
として標記化合物を得た（０.２７０g、７２％）。
ｉ）(１ＲＳ)−１−ヒドロキシ−１−[(２−ヒドロキシ−４−メトキシ)フェ
ニル]−３−(３,４−メチレンジオキシフェニル−６−プロパ−１−イルオキシ
−１Ｈ−イソインドール
ボンベに１−(２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾイル)−２−(３,４−メチ
レンジオキシベンゾイル)−５−プロパ−１−イルオキシベンゼン（０.２７０g
、０.６０８mmol）を充填し、−７８℃に冷却し（アセトン／ドライアイス浴）
、液体アンモニア（１５ml）を添加し、該容器を密封した。該反応を、３００ps
iの定常圧に達するように６５℃で２４時間加熱した。該混合物が室温まで冷え
た後、圧力を徐々に開放し、得られた残留物を酢酸エチルに溶解させた。減圧下
、溶媒を除去した後、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、酢
酸エチル：ヘキサン（１：１））に付して、黄色油状物として標記化合物（０.
２００g、７６％）を得た。
ｊ）(１ＲＳ,３ＲＳ)−３−[(２−ヒドロキシ−４−メトキシ)フェニル]−１
−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−５−プロパ−１−イルオキシ−イソイ
ンドリン
アルゴン下、０℃で、撹拌しつつ、乾燥エーテル（２ml）を含有するフラスコ
に塩化アルミニウム（０.０３７g、０.２８mmol）、次いで、ＴＨＦ（０.２８ml
、０.２８mmol）中１Ｍ水素化アルミニウムリチウムを添加した。該混合物を０
℃で１５分間撹拌し、次いで、それに迅速に(１ＲＳ)−１−ヒドロキシ−１−[(
２−ヒドロキシ−４−メトキシ)フェニル]−３−(３,４−メチレンジオキシフェ
ニル−６−プロパ−１−イルオキシ−１Ｈ−イソインドール（０.０４３g、０.
１０mmol）を添加した。０℃で２０分間撹拌した後、該反応を水、１５％水酸化
ナトリウムおよび水でクエンチした。該混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた
有機抽出物を、水、食塩水で連続して洗浄し、乾燥させた（ＭgＳＯ4）。減圧下
、溶媒を除去した後、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、酢
酸エチル：ヘキサン（３：７））に付して、薄黄色の固体として標記化合物（０
.０１２g、２８％）を得た。
ｋ）トリフルオロメチルスルホニルオキシ酢酸メチル
アルゴン下、−５℃で、無水トリフリック酸（３.７ml、２０.０mmol）の塩化
メチレン（１０ml）中溶液に、グリコール酸メチル（１.８g、２０.０mmol）、
ピリジン（１.５５ml、２０.０mmol）および塩化メチレン無水物（５ml）の溶液
を３０分間かけて滴下した。該反応を０°〜５℃で１.５時間撹拌した。次いで
、該混合物を水で数回洗浄した。次いで、有機抽出物を水、食塩水で洗浄し、乾
燥させた（ＭgＳＯ4）。減圧下、溶媒を除去した後、残留物をフラッシュクロマ
トグラフィー（シリカゲル、塩化メチレン）に付して、無色の油状物として標記
化合物を得た（３.０g、６８％）。
ｌ）(１ＲＳ,３ＲＳ)−３−[(２−ヒドロキシ−４−メトキシ)フェニル]−１
−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−５−プロパ−１−イルオキシ−(１Ｈ,
３Ｈ−ジヒドロイソインドール−２−イル)酢酸メチル
アルゴン下、(１ＲＳ,３ＲＳ)−３−[(２−ヒドロキシ−４−メトキシ)フェニ
ル]−１−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−５−プロパ−１−イルオキシイ
ソインドリン（０.０６０g、０.１４mmol）の塩化メチレン（３ml）中溶液にト
リエチルアミン（０.０４０ml、０.２８mmol）、次いで、トリフルオロメチルス
ルホニルオキシ酢酸メチル（０.０６５g、０.２８mmol）を添加した。該反応を
室温で２４時間撹拌した。次いで、混合物を１Ｎ ＨＣlと酢酸エチルとに分配
した。有機抽出物を、水、食塩水で連続して洗浄し、乾燥させた（ＭgＳＯ4）。
減圧下、溶媒を除去した後、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲ
ル、酢酸エチル：ヘキサン（２：８））に付して、無色油状物として標記化合物
（０.０４０g、５７％）を得た。
ｍ）(１ＲＳ,３ＲＳ)−３−[(２−カルボメトキシメトキシ−４−メトキシ)フ
ェニル]−１−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−５−プロパ−１−イルオキ
シ−(１Ｈ,３Ｈ−ジヒドロイソインドール−２−イル)酢酸メチル
アルゴン下、(１ＲＳ,３ＲＳ)−３−[(２−ヒドロキシ−４−メトキシ)フェニ
ル]−１−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−５−プロパ−１−イルオキシ(
１Ｈ,３Ｈ−ジヒドロイソインドール−２−イル)酢酸メチル（０.０４０g、０.
０８mmol）の乾燥ＤＭＦ（０.５ml）中溶液に炭酸カリウム（０.１１g、０.８mm
ol）を添加した。該混合物を室温で２０分間撹拌し、次いで、ブロモ酢酸エチル
（０.０１２ml、０.１mol）を添加し、２４時間撹拌し続けた。該反応を１Ｎ Ｈ
Ｃlでクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機抽出物を、水、食塩水
で連続して洗浄し、乾燥させた（ＭgＳＯ4）。減圧下、溶媒を除去した後、残留
物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン（３：
７））に付して、無色油状物として標記化合物（０.０３０g、６４％）を得た。
ｎ）(１ＲＳ,３ＲＳ)−３−[(２−カルボキシメトキシ−４−メトキシ)フェニ
ル]−１−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−５−プロパ−１−イルオキシ−
(１Ｈ,３Ｈ−ジヒドロイソインドール−２−イル)酢酸
(１ＲＳ,３ＲＳ)−３−[(２−カルボメトキシメトキシ−４−メトキシ)フェニ
ル]−１−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−５−プロパ−１−イルオキシ−
(１Ｈ,３Ｈ−ジヒドロイソインドール−２−イル)酢酸メチル（０.０３０g、０.
０５２mmol）の熱イソプロパノール（２ml）中溶液に６Ｎ水酸化ナトリウム（０
.０４３ml、０.２６mmol）を添加した。該反応を還流させながら２時間撹拌した
。次いで、該混合物を３Ｎ ＨＣlでクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせ
た有機抽出物を、水、食塩水で連続して洗浄し、乾燥させた（ＭgＳＯ4）。減圧
下、溶媒を除去した後、得られた残留物を逆相ＨＰＬＣ（アセトニトリル：水（
１：１）および１％ＴＦＡ）によって精製して、白色固体として標記化合物（０
.０２０g、７１％）を得た。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ ５３６[Ｍ＋Ｈ]+；融点１５４
〜１５８℃（分解）；元素分析（Ｃ31Ｈ30Ｆ3ＮＯ11・３.５Ｈ2Ｏ）：理論値：
Ｃ,４１.９５；Ｈ,３.７３；Ｎ,１.６６、測定値：Ｃ,４２.１４；Ｈ,３.８２；
Ｎ,１.３３。
実施例２
(１ＲＳ,３ＲＳ)−３−(４−メトキシフェニル)−１−(３,４−メチレンジオ
キシフェニル)−(１Ｈ,３Ｈ−ジヒドロイソインドール−２−イル)酢酸の製造
ａ）２−ヒドキロシ−４'−メトキシアセトフェノン
１０℃で、塩化アルミニウム（２２.５g、０.１６９mmol）およびクロロベン
ゼン（５０ml）の混合物にアニソール（１８g、０.１６６mol）を添加した。温
度を２５℃以下に維持し、該反応に塩化ｏ−メトキシベンゾイル（２８g、０.１
６４mol）を滴下した。該反応を室温で３０分間撹拌し、次いで、蒸気浴上で２
時間加熱した。氷浴中で０°〜５℃に冷却した後、該混合物を１０％ＨＣl（１
００ml）で処理し、室温で１８時間撹拌した。生成物をエーテル（３×１００ml
）で抽出し、合わせた有機抽出物を５％水酸化ナトリウム（３×５０ml）で洗浄
した。合わせた水性抽出物を濃ＨＣlで酸性化し、エーテル（３×）で抽出した
。合わせた有機抽出物を水で洗浄し、乾燥させた（ＭgＳＯ4）。減圧下、溶媒を
除去して、琥珀色の油状物として標記化合物を得た（２２.９g、６１％）。
ｂ）２−ヒドロキシ−４'−メトキシアセトフェノン３,４−メチレンジオキシ
ベンゾイルヒドラゾン
３,４−メチレンジオキシベンズヒドラジン（４.８９g、２７.１mmol）、２−
ヒドロキシ−４'−メトキシアセトフェノン（６.１９g、２７.１mmol）のイソプ
ロパノール（１５０ml）中溶液に酢酸ナトリウム（１ｇ）を添加し、該混合物を
還流させながら２４時間撹拌した後、非常に少量の生成物が形成された。該反応
にさらに酢酸ナトリウム（１g）を添加し、還流させながら２４時間撹拌し続け
、この間に、沈殿物が形成した。該沈殿物を熱濾過して、固体として標記化合物
を得た（３.８g、３６％）。
ｃ）１−(４−メトキシベンゾイル)−２−(３,４−メチレンジオキベンゾイル
)ベンゼン
２−ヒドキシ−４'−メトキシアセトフェノン３,４−メチレンジオキシベンゾ
イルヒドラゾン（３.８３g、９.８２mmol）の酢酸（４０ml）中溶液に二酢酸ヨ
ードベンゼン（６.３２g、１９.６mmol）を添加し、懸濁液を室温で２４時間撹
拌し、次いで、還流させながら３時間撹拌した。該混合物を冷却し、次いで、酢
酸エチルと水とに分配させた。合わせた有機抽出物を、水、食塩水で連続して洗
浄し、乾燥させた（ＭgＳＯ4）。減圧下、溶媒を除去した後、残留物をフラッシ
ュクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン（３：７））に付し
て、オフホワイト色の固体として標記化合物を得た（２.４g、６８％）。
ｄ）(１ＲＳ)−１−ヒドロキシ−１−(４−メトキシフェニル)−３−(３,４−
メチレンジオキシフェニル)−１Ｈ−イソインドール
ボンベに１−(４−メトキシベンゾイル)−２−(３,４−メチレンジオキシベン
ゾイル)ベンゼン（１.０g、２.８mmol）を充填し、−７８℃に冷却し（アセトン
／ドライアイス浴）、液体アンモニア（２０ml）を添加し、該容器を密封した。
該反応を、３００psiの定常圧に達するように７０℃で２４時間加熱した。該混
合物が室温に冷えた後、圧力を徐々に開放し、茶色の残留物を酢酸エチルと水と
に分配させた。有機抽出物を３Ｎ ＨＣlで酸性化した。得られた水性層（塩酸塩
を含有する）を酢酸エチルで洗浄し、次いで、濃水酸化アンモニウムによる処理
によって塩基性化し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機抽出物を、水、食塩
水で連続して洗浄し、乾燥させた（ＭgＳＯ4）。減圧下、溶媒を除去して、茶色
の泡状物として標記化合物の異性体混合物を得た（０.９００g、９０％）。
ｅ）(１ＲＳ,３ＲＳ)−３−(４−メトキシフェニル)−１−(３,４−メチレン
ジオキシフェニル)イソインドリン
アルゴン下、０℃で、撹拌しつつ、乾燥エーテル（２ml）を含有するフラスコ
に塩化アルミニウム（０.０３７g、０.２８mmol）、次いで、ＴＨＦ（０.２８ml
、０.２８mmol）中１Ｍ水素化アルミニウムリチウムを添加した。該混合物を０
℃で５分間撹拌し、次いで、それに迅速に(１ＲＳ)−１−ヒドロキシ−１−(４
−メトキシフェニル)−３−(３,４−メチレンジオキシフェニル)−１Ｈ−イソイ
ンドール（０.０５０g、０.１４mmol）、次いで、乾燥ＴＨＦ（２ml）を添加し
た。０℃で１０分間撹拌した後、該反応を水、１５％水酸化ナトリウムおよび水
でクエンチした。該混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機抽出物を、水、
食塩水で連続して洗浄し、乾燥させた（ＭgＳＯ4）。溶媒を除去した後、残留物
をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン（３：７
））に付して、黄色固体として標記化合物を得た（０.０３０g、４５％）。ＭＳ
（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３４６[Ｍ＋Ｈ]+；融点：１２３〜１２５℃。
ｆ）(１ＲＳ,３ＲＳ)−３−(４−メトキシフェニル)−１−(３,４−メチレン
ジオキシフェニル)−(１Ｈ,３Ｈ−ジヒドロイソインドール−２−イル)酢酸メチ
ル
アルゴン下、(１ＲＳ,３ＲＳ)−１−(４−メトキシフェニル)−３−(３,４−
メチレンジオキシフェニル)イソインドリン（０.１４０g、０.４１mmol）の塩化
メチレン（３ml）中溶液にトリエチルアミン（０.０８５ml、０.６１mmol）、次
いで、トリフルオロメチルスルホニルオキシ酢酸メチル（０.０６５g、０.２８m
mol）を添加した。該反応を室温で２.５時間撹拌した。次いで、該混合物を酢酸
エチルと水とに分配させた。合わせた有機抽出物を、水、食塩水で連続して洗浄
し、乾燥させた（ＭgＳＯ4）。減圧下、溶媒を除去した後、残留物をフラッシュ
クロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン（３：７））に付して
、油状物として標記化合物を得た（０.１３０g、７６％）。
ｇ）(１ＲＳ,３ＲＳ)−３−(４−メトキシフェニル)−１−(３,４−メチレン
ジオキシフェニル)−(１Ｈ,３Ｈ−ジヒドロイソインドール−２−イル)酢酸
(１ＲＳ,３ＲＳ)−３−(４−メトキシフェニル)−１−(３,４−メチレンジオ
キシフェニル)−(１Ｈ,３Ｈ−ジヒドロイソインドール−２−イル)酢酸メチル（
０.１３０g、０.３１mmol）のイソプロパノール（３ml）中溶液に６Ｍ水酸化ナ
トリウム（０.１５１mmol）を添加した。該反応を還流させながら２４時間撹拌
した。有機溶媒を除去し、水性層を３Ｎ ＨＣlで酸性化し、酢酸エチルで抽出し
た。有機抽出物を、水、食塩水で連続して洗浄し、乾燥させた（ＭgＳＯ4）。減
圧下、溶媒を除去し、無色油状物として標記化合物を得た（０.１００g、８１％
）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４０４[Ｍ＋Ｈ]+；元素分析（Ｃ24Ｈ21ＮＯ5）：理
論値：Ｃ,７１.４５；Ｈ,５.２５；Ｎ,３.４７、測定値：Ｃ,７１.４４；Ｈ,５.
１７；Ｎ,３.４２；1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨz，ＣＤＣl3）δ７.３５(ｄ,Ｊ＝８
.７Ｈz,２Ｈ)、７.１７(ｄ,Ｊ＝８.７Ｈz,２Ｈ)、６.９５−６.８０(ｍｍ,７Ｈ)
、５.９４(ｓ,２Ｈ)、５.３４(ｓ,２Ｈ)、３.８１(ｓ,３Ｈ)、３.４７(ｓ,２Ｈ)
。
実施例３
本発明の化合物を配合する医薬用途に用いる製剤は、種々の形態で、種々の賦
形剤を用いて調製できる。このような製剤の例を以下に示す。
吸入製剤
式Ｉで示される化合物（１mg〜１００mg）を計量器付吸入器からエアロゾル化
して、各使用ごとに望ましい量がデリバリーされるようにする。
錠剤／成分 錠剤１個あたり
１．活性成分 ４０mg
（式Ｉで示される化合物）
２．コーンスターチ ２０mg
３．アルギン酸 ２０mg
４．アルギン酸ナトリウム ２０mg
５．ステアリン酸マグネシウム １.３mg
２.３mg
錠剤の工程
工程１ 成分Ｎo.１、Ｎo.２、Ｎo.３およびＮo.４を適当なミキサー／ブレン
ダー中でブレンドする。
工程２ 工程１のブレンドに充分な水を数回にわけて、各添加後に慎重に混合
しつつ添加する。このような水の添加および混合は、物質がコンシステンシーを
有するものであり、湿顆粒に変わるまで行う。
工程３ 湿塊をＮo.８メッシュ（２.３８mm）スクリーンを用いて振動造粒器
に通すことにより顆粒にする。
工程４ 次いで、湿顆粒を、オーブン中、１４０°Ｆ（６０℃）で乾燥するま
で乾燥させる。
工程５ 乾燥顆粒を成分Ｎo.５で滑沢化する。
工程６ 滑沢顆粒を適当な錠剤圧縮器で圧縮する。
非経口製剤
適当量の式Ｉで示される化合物を加熱しながらポリエチレングリコールに溶解
させることによって、非経口投与用医薬組成物を調製する。次いで、この溶液を
欧州薬局方注射用水で（１００mlに）希釈する。次いで、溶液を０.２２ミクロ
ン膜フィルターを通して濾過することによって滅菌し、無菌容器中に密封する。
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(51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ
Ａ６１Ｋ 31/40 ＡＥＤ 9454−4Ｃ Ａ６１Ｋ 31/40 ＡＥＤ
Ｃ０７Ｄ 405/06 ２０９ 9053−4Ｃ Ｃ０７Ｄ 405/06 ２０９
(72)発明者 フランツ，ロバート・ジーン
アメリカ合衆国19462ペンシルベニア州
プリマス・ミーティング、ワイルドフラワ
ー・ドライブ169番
(72)発明者 ラゴ，マリア・アンパロ
アメリカ合衆国19403ペンシルベニア州
オーデュボン、ポンドビュー・ドライブ
701番
(72)発明者 ガオ，アイミン
アメリカ合衆国19425ペンシルベニア州
チェスター・スプリングス、イートン・コ
ート 3505番