JPH10510552A

JPH10510552A - （１ｓ，２ｓ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン−１−イル）−１−プロパノールメタンスルホン酸塩三水和物

Info

Publication number: JPH10510552A
Application number: JP9509083A
Authority: JP
Inventors: アンディノ，マルタ，エム．; シネイ，テリー，ジー．; フィース，ユージーン，エフ．
Original assignee: ファイザーインク．
Priority date: 1995-08-11
Filing date: 1996-06-20
Publication date: 1998-10-13
Anticipated expiration: 2016-06-20
Also published as: AU5908496A; NO310458B1; DK0843661T3; JP3099072B2; EP0843661B1; IL122649A0; TNSN96104A1; IS4643A; CO4750830A1; WO1997007098A1; ATE215072T1; HRP960372B1; RS49521B; KR100291882B1; CN1615861A; CA2228752A1; IL122649A; CN1198739A; HRP960372A2; IS1945B

Abstract

(57)【要約】

Description

【発明の詳細な説明】（１Ｓ，２Ｓ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（４−ヒドロキシ−４ −フェニルピペリジン−１−イル）−１−プロパノールメタンスルホン酸塩三水和物本発明は、新規であり臨床学的に有益な、（１Ｓ，２Ｓ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン−１−イル） −１−プロパノールのメタンスルホン酸塩の三水和物（以後、「メシレート塩三水和物」と称する）に関する。前記のメシレート塩三水和物、並びに（１Ｓ，２Ｓ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン−１−イル）−１−プロパノールの相当する無水メシレート塩及び遊離塩基（以後、それぞれ「無水メシレート」及び「遊離塩基」と称する）は、Ｎ −メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）レセプターアンタゴニストとしての活性を有し、てんかん、不安、脳虚血、筋けいれん、多梗塞痴呆、外傷性脳損傷、痛み、エイズ関連痴呆、低血糖症、偏頭痛、筋萎縮性側索硬化症、薬剤及びアルコールの依存症、薬剤及びアルコールの禁断症状、精神病性状態、尿失禁、並びに変性中枢神経系（ＣＮＳ：ｃｅｎｔｒａｌｎｅｒｖｏｕｓｓｙｓｔｅｍ）障害、例えば、発作、アルツハイマー病、パーキンソン病、及びハンチントン病の治療に有用である。前記「遊離塩基」、前記「無水メシレート」及びそれらの製造方法については、１９９３年２月９日発行の米国特許第５１８５３４３号明細書中の方法を一般的に参照されたい。それらの化合物及び前記の或る種の障害におけるそれらの化合物の使用については、１９９３年１２月２１日発行の米国特許第５２７２１６０号明細書を、特に参照されたい。前記の障害の治療におけるそれらの化合物の使用については、国際特許出願ＰＣＴ／ＩＢ９５／００３８０号明細書（これは、米国を指定して、１９９５年５月１８日に出願された）を参照されたい。それらの化合物を、パーキンソン病の治療用に、視床外側腹側核から皮質中への興奮性フィードバックのバランスを増強することによって回復することができる化合物と組み合わせて使用することについては、国際特許出願ＰＣＴ／ＩＢ９５／００３９８号明細書（これは、米国を指定して、１９９５年５月２６日に出願された）を参照されたい。前記の米国特許及び特許出願は、参照としてその全体を本明細書中に取り入れる。ＮＭＤＡは、興奮性アミノ酸である。興奮性アミノ酸は、中枢神経系において興奮性神経伝達を媒介する重要な神経伝達物質群の１つである。グルタミン酸及びアスパラギン酸は、興奮性アミノ酸（ＥＡＡ：ｅｘｃｉｔａｔｏｒｙａｍｉｎｏａｃｉｄ）レセプターを活性化させる２つの内因性リガンドである。ＥＡＡレセプターには、イオノトロピック及びメタボトロピックの２種があり、それらは信号導入の態様が異なる。イオノトロピックＥＡＡレセプターには、ＮＭＤＡ、ＡＭＰＡ［２−アミノ−３−（５−メチル−３−ヒドロキシイソオキサゾール−４−イル）プロパン酸］、及びカイニン酸のそれぞれ型のレセプターを活性化させる選択的アゴニストによって特徴づけられる少なくとも３種類が存在する。イオノトロピックＥＡＡレセプターは、ナトリウムに関して透過可能なイオンチャンネルと関連しており、そしてＮＭＤＡレセプターの場合には、カルシウムに関して透過可能なイオンチャンネルと関連している。メタボトロピックレセプターは、膜関連Ｇ−タンパク質によるホスホイノシチド加水分解に関連しており、キスカル酸、イボテン酸（ｉｂｏｔｅｎｉｃａｃｉｄ）、及び（１Ｓ，３Ｒ）−１−アミノシクロペンタン１，３−ジカルボン酸によって活性化される。ＮＭＤＡレセプターは、ナトリウムイオン及びカルシウムイオンを透過することのできるイオンチャンネルを開閉（ｇａｔｅ）する多くの特有結合部位からなる巨大分子複合体である［Ｈａｎｓｅｎ及びＫｒｏｇｓｇａａｒｄ−Ｌａｒｓｏｎ，Ｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｒｅｖ．，１０，５５−９４（１９９０）］。フェンシクリジン（ＰＣＰ）などの化合物のアンタゴニスト作用を発揮するイオンチャンネル中の部位、並びにグルタミン酸、グリシン、及びポリアミンに対する結合部位が存在する。競合性ＮＭＤＡアンタゴニストは、グルタミン酸結合部位との相互作用によってＮＭＤＡレセプターをブロックする化合物である。ＮＭＤＡグルタミン酸レセプターへの競合的に結合に関する特定の化合物の能力は、Ｍｕｒｐｈｙらによって「ＢｒｉｔｉｓｈＪ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，９５，９３２−９３８（１９８８）」中に記載されているように、放射性リガンド結合アッセイを用いて決定することができる。前記のアンタゴニストは、Ｈａｒｒｉｓｏｎ及びＳｉｍｍｏｎｄｓによって「ＢｒｉｔｉｓｈＪ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，８４，３８１− ３９１（１９８４）」中に記載されているように、ラット皮質性楔（ｃｏｒｔｉｃａｌｗｅｄｇｅ）アッセイを用いて、アゴニストと区別することができる。競合性ＮＭＤＡアンタゴニストの例としては、Ｄ−２−アミノ−５−ホスホノペンタン酸（Ｄ−ＡＰ５）、及びＤ−２−アミノ−７−ホスホノヘプタン酸を挙げることができる［Ｓｃｈｏｅｐｐら，Ｊ．Ｎｅｕｒ．Ｔｒａｎｓｍ．，８５，１３１−１４３（１９９１）］。また、本発明は、パーキンソン病に罹病しているほ乳類に、（１Ｓ，２Ｓ）− トランス−２−メチル−２−（４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン−１− イル）−１−ヒドロキシ−１−（４−ヒドロキシフェニル）エタノールメタンスルホン酸塩三水和物、及び視床外側腹側核から皮質中への興奮性フィードバックを増強することができる化合物を投与し、そのことによってパーキンソン病に罹病している前記のほ乳類における視床外側腹側核から皮質中への興奮性フィードバックのバランスを回復させることを含む、パーキンソン病に罹病しているほ乳類の治療方法にも関する。パーキンソン病の治療用に、前記の興奮性フィードバック増強剤と組み合わせて前記「遊離塩基」及び前記「無水メシレート」を使用することに関しては、国際特許出願ＰＣＴ／ＩＢ９５／００３９８号明細書（この明細書は既に参照しており、その全体を本明細書で取り入れている）を参照されたい。前記メシレート三水和物は、無水メシレートと比べて、治療剤として実質的に優れている。前記メシレート三水和物は、相当する無水塩よりも安定な結晶形態であり、保存期間が実質的に長く、そして結晶中に水分を含有しているので結晶構造が破壊されにくくなる。発明の簡単な開示本発明は、（１Ｓ，２Ｓ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン−１−イル）−１−プロパノールメタンスルホン酸塩三水和物に関する。また、本発明は、ＮＭＤＡをアンタゴナイズする量の（１Ｓ，２Ｓ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン− １−イル）−１−プロパノールメタンスルホン酸塩三水和物及び薬剤学的に許容することのできる担体を含み、ほ乳類（ヒトを含む）における、変性ＣＮＳ障害、例えば、発作、アルツハイマー病、パーキンソン病、及びハンチントン病；脊髄外傷、てんかん、不安、脳虚血、筋けいれん、多梗塞痴呆、外傷性脳損傷、痛み、エイズ関連痴呆、低血糖症、偏頭痛、筋萎縮性側索硬化症、薬剤及びアルコールの依存症、薬剤及びアルコールの禁断症状、精神病性状態、及び尿失禁から選択した障害の治療用の医薬組成物にも関する。また、本発明は、変性ＣＮＳ障害、例えば、発作、アルツハイマー病、パーキンソン病、及びハンチントン病；てんかん、不安、脳虚血、筋けいれん、多梗塞痴呆、外傷性脳損傷、痛み、エイズ関連痴呆、低血糖症、偏頭痛、筋萎縮性側索硬化症、薬剤及びアルコールの依存症、薬剤及びアルコールの禁断症状、精神病性状態、及び尿失禁から選択した障害の治療有効量で（１Ｓ，２Ｓ）−１−（４ −ヒドロキシフェニル）−２−（４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン−１ −イル）−１−プロパノールメタンスルホン酸塩三水和物及び薬剤学的に許容することのできる担体を含む、ほ乳類（ヒトを含む）における前記障害の治療用の医薬組成物にも関する。また、本発明は、変性ＣＮＳ障害、例えば、発作、アルツハイマー病、パーキンソン病、及びハンチントン病；てんかん、不安、脳虚血、筋けいれん、多梗塞痴呆、外傷性脳損傷、痛み、エイズ関連痴呆、低血糖症、偏頭痛、筋萎縮性側索硬化症、薬剤及びアルコールの依存症、薬剤及びアルコールの禁断症状、精神病性状態、及び尿失禁から選択した障害の治療有効量で（１Ｓ，２Ｓ）−１−（４ −ヒドロキシフェニル）−２−（４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン−１ −イル）−１−プロパノールメタンスルホン酸塩三水和物をほ乳類（ヒトを含む）に投与することを含む、前記ほ乳類（ヒトを含む）における前記障害の治療方法にも関する。また、本発明は、ＮＭＤＡをアンタゴナイズする量の（１Ｓ，２Ｓ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン− １−イル）−１−プロパノールメタンスルホン酸塩三水和物をほ乳類（ヒトを含む）に投与することを含む、前記ほ乳類（ヒトを含む）における、変性ＣＮＳ障害、例えば、発作、アルツハイマー病、パーキンソン病、及びハンチントン病；てんかん、不安、脳虚血、筋けいれん、多梗塞痴呆、外傷性脳損傷、痛み、エイズ関連痴呆、低血糖症、偏頭痛、筋萎縮性側索硬化症、薬剤及びアルコールの依存症、薬剤及びアルコールの禁断症状、精神病性状態、及び尿失禁から選択した障害の治療方法にも関する。本発明は、（１Ｓ，２Ｓ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン−１−イル）−１−プロパノールメタンスルホン酸塩三水和物と、視床外側腹側核から皮質中への興奮性フィードバックのバランスを回復することができる薬剤との相乗的な組み合わせを、パーキンソン病治療有効量でほ乳類（ヒトを含む）に投与することを含む、前記ほ乳類（ヒトを含む）におけるパーキンソン病の治療方法に関する。また、本発明は、（１Ｓ，２Ｓ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン−１−イル）−１−プロパノールメタンスルホン酸塩三水和物と、ドーパミンアゴニスト、ドーパミンＤ１アゴニスト、ドーパミンＤ２アゴニスト、ドーパミン／β−アドレナリンレセプターアゴニスト、ドーパミン／５−ＨＴ取り込み阻害剤／５−ＨＴ−１Ａアゴニスト、ドーパミン／オピエートアゴニスト、アドレノレセプターアゴニスト、α２−アドレナリンアンタゴニスト／ドーパミンアゴニスト、α２−アドレナリン／ドーパミンＤ２アゴニスト、ドーパミン取り込み阻害剤、モノアミンオキシダーゼ阻害剤、モノアミンオキシダーゼ−Ｂ阻害剤、カテコールメチルトランスフェラーゼ（ＣＯＭＴ）阻害剤、及びレボドパからなる群から選択した興奮性フィードバック増強剤との相乗的な組み合わせのパーキンソン病治療有効量で、ほ乳類（ヒトを含む）を治療することを含む、前記ほ乳類（ヒトを含む）におけるパーキンソン病の治療方法にも関する。図面の簡単な説明図１は、前記メシレート三水和物の粉末Ｘ線回析スペクトル［前記「無水メシレート」を相対湿度（ＲＨ）８１％下で平衡した後にＳｉｅｍｅｎｓＤ５０００回析装置で測定した］を示す図面であり、回析角（角度＝２シータ）に対する強度（ＣＰＳ）として表している。図２は、前記「無水メシレート」の粉末Ｘ線回析スペクトルを示す図面であり、ＳｉｅｍｅｎｓＤ５０００回析装置で測定して、回析角（角度＝２シータ）に対する強度（ＣＰＳ）として表している。以下の表１及び表２において、図１及び図２のそれぞれのスペクトルから選択したピークを、回析角（２シータ）、ｄ−間隔（ｄ）、相対強度、及び最大強度によって同定する。発明の詳細な説明前記「メシレート塩三水和物」は、明瞭に規定された幅の狭いＸ線回析ピーク（図１）を示す白色結晶性個体であり、前記「無水メシレート」において、回析パターンの分解が少なく、背景が高く、そして２θ＞２６°での回析ピークが無いこと（図２）とは対照的である。この三水和物メシレートに関しては、１つの結晶形態だけが観察された。この結晶形態は、水中での良好な溶解能（ｐＨ３及びｐＨ７の緩衝水溶液中で、それぞれ２５ｍｇ／ｍｌ及び１５ｍｇ／ｍｌ）を有する。前記「メシレート塩三水和物」は、以下の方法によって調製することができる。前記「遊離塩基」を３０℃で水中に溶解する。この溶液にメタンスルホン酸少なくとも１当量を加え、そして得られた混合物を６０〜６５℃に暖める。前記の暖めた溶液をろ過して粒状物をなくすことができる。その溶液を最初の容量の約４０％まで濃縮し、１０℃以下まで冷却し、ろ過によって単離して、そして水分含有量が約１１．３％（ＫａｒｌＦｉｓｃｈｅｒｔｉｔｒａｔｉｏｎで計測）となるまで乾燥する。得られた結晶性「メシレート塩三水和物」は、再結晶化法によって更に精製することができる。前記「無水メシレート」を８１％ＲＨ環境下で平衡すると、前記「メシレート塩三水和物」に変換されることになるであろう。前記「遊離塩基」及び前記「無水メシレート」は、米国特許５２７２１６０号明細書（これは、既に参照しており、その全体を本明細書で取り入れている）中に記載の通りに調製することができる。１−（４−ヒドロキシフェニル）−２− （４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン−１−イル）−１−プロパノールラセミ体を分割して前記「遊離塩基」及び相当する（１Ｒ，２Ｒ）エナンチオマーを形成することについては、実施例１で具体的に示す。前記「遊離塩基」の他の調製方法（このことは、前記「メシレート塩三水和物」の合成の具体例でもある）を実施例２に記載する。前記「メシレート塩三水和物」の吸湿性を、０％、５２％及び９８％に調節した相対湿度（ＲＨ）条件下、及び研究室周囲条件下（２４〜２７℃，３１〜６４％ＲＨ）で研究した。５２％ＲＨ及び９８％ＲＨ条件、あるいは周囲条件下では、重量の変化がないことが観察された。０％ＲＨでは、水和水の欠損が観察された。０％ＲＨにおいて観察された重量欠損は、可逆的なものであり；高い湿度にさらすと、無水形態は、水和形態へと素早く平衡する。重量の欠損は、ポリエチレン袋で、４０℃／３０％ＲＨで保存した多量の安定性サンプルにおいても観察された（９ヶ月で１０％を超える重量が欠損した）。対照的に、以下の表３で示すように、実質的な重量増加が、周囲条件下で、前記「無水メシレート」に関して観察された。前記「メシレート塩三水和物Iのプロトン及び炭素核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトル前記「メシレート塩三水和物」のプロトン及び炭素核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルを以下に示す。ＣＤ₃ＯＤにおける化学シフトの割り当て［テトラメチルシラン（ＴＭＳ）に関して］は、¹Ｈ−¹Ｈシフト相関実験（ＣＯＳＹ）、¹Ｈ−¹ ³ Ｃ分極移動による無ひずみ強化実験（ＤＥＰＴ：ｄｉｓｔｏｒｔｉｏｎｌｅｓｓｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔｂｙｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎｔｒａｎｓｆｅｒ）、及び¹Ｈ−¹³Ｃ異種核化学シフト相関(ＨＥＴＣＯＲ：ｈｅｔｅｒｏｎｕｃｌｅａｒｃｈｅｍｉｃａｌｓｈｉｆｔｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ)二次元ＮＭＲ実験を基にして作成した。プロトン及び炭素のピークの試験的な割り当ては、以下の通りであり、前記「メシレート塩三水和物」の構造と一致する。（１）：６”位及び２”位は、化学的に等価ではなく；割り当てが互換可能である。（２）：５”位及び３”位は、化学的に等価ではなく、割り当てが互換可能である。１．９６−２．０６ｐｐｍでのプロトン分裂パターンは、高−フィールド器械（５００ＭＨｚ）上で得た場合には、２つの二重線として現れたが、より低いフィールド器械（３００ＭＨｚ）で得た場合には、１つの三重線として現れた。これは、メシレートから発生する塩効果によるものと考えられる。前記「メシレート塩三水和物」は、前記「無水メシレート」及び前記「遊離塩基」と同様に、その抗虚血活性及び興奮性アミノ酸レセプターブロック能力に基づく選択的神経保護活性を有する。この化合物の神経保護活性を評価する好ましい方法が、ＩｓｍａｉｌＡ．ＳｈａｌａｂｙらによってＪ．Ｐｈａｒｍ．ａｎｄＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ,２６０,９２５(１９９２)中に記載されている。この論文は、参照としてその全体を本明細書中に取り入れ、以下に記載する。細胞の培養：１７日令胎児ラット（ＣＤ，ＣｈａｒｌｅｓＲｉｖｅｒＢｒｅｅｄｉｎｇＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社，Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，マサチューセッツ州）の海馬細胞を、培養基［２ｍＭグルタミン、２１ｍＭグルコース、ペニシリン／ストレプトマイシン（それぞれ５０００単位）、１０％（１〜７日令）胎児ウシ血清、及び１０％（１〜２１日令）ウマ血清を含み、非必須アミノ酸を含む最小必須培地］を含む血清中で、ＰＲＩＭＡＲＩＡ培養プレート（Ｆａｌｃｏｎ社，ＬｉｎｃｏｌｎＰａｒｋ，ニュージャージー州）で、２〜３週間培養する。細胞を、９６ウエルマイクロタイタプレートに、８０，０００細胞／ウエルの密度で植えるか、又は２４ウエル培養プレートに、２５０，０００細胞／ウエルの密度で植える。培養物を、５％ＣＯ₂−９５％空気を含む湿潤ＣＯ₂組織培養インキュベーターの中で、３７℃で生育させる。非神経細胞の増殖は、培養６日目〜８日目に、２０μＭウリジン及び２０μＭ−５−フルオロ−２−デオキシウリジン（ＳｉｇｍａＣｈｅｍｉｃａｌ社，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ミズーリ州）を加えることにより制御する。培養基は、２日〜３日毎に新鮮なストックと交換する。グルタメート毒性：培養物を、最初に植えてから２〜３週間後に、グルタメート毒性に関して評価する。培養基を除去し、そして培養物をＣＳＳ［すなわち、ＮａＣｌ＝１２ｍｍｏｌ、ＫＣｌ＝５．４ｍｍｏｌ、ＭｇＣｌ₂＝０．８ｍｍｏｌ、ＣａＣｌ₂＝１．８ｍｍｏｌ、グルコース＝１５ｍｍｏｌ、及び４−（２−ヒドロキシエチル）− １−ピペラジンエタンスルホン酸＝２５ｍｍｏｌ（ｐＨ７．４）］で２回ゆすぐ。次に、培養物を種々の濃度のグルタメートに１５分間、３７℃でさらす。前記インキュベートの後に、培養物を、グルタメートを含まないＣＳＳで３回、及び血清を含まない新鮮な培養基で２回ゆすぐ。次に、培養物を、無血清培養基中で２０〜２４時間インキュベートする。グルタメートに１５分間さらす前記の操作の２分前、及びその操作中に供試化合物を加える。いくつかの実験においては、グルタメートにさらした後やそれに続く２０〜２４時間の種々の時間に供試化合物を加える。細胞生存度は、興奮性毒素への露出から２０〜２４時間後に、サイトゾル酵素ＬＤＨの活性を測定することにより、普通の方法で評価する。ＬＤＨ活性は、マイクロタイタプレートの９６ウエルのそれぞれの培養基から決定する。培地のサンプル５０μｌを、１．３２ｍＭピルビン酸ナトリウムと２．９ｍＭ−ＮＡＤＨとを含む同容量のリン酸ナトリウムバッファー（０．１Ｍ，ｐＨ７．４）に加える。９６ウエルのそれぞれの反応混合物全体の３４０ｎｍ吸光度を、マイクロタイタプレート分光光度自動読み取り機(ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓ；ＭｅｎｌｏＰａｒｋ，カリフォルニア州)により、２分間に亘り５秒毎にモニターする。吸光度の割合を、ＩＢＭＳＯＦＴｍａｘｐｒｏｇｒａｍ（バージョン１．０１；ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓ）を用いて自動的に計算し、ＬＤＨ活性の指数として用いる。神経生存率の形態学的評価を、位相差顕微鏡法を用いて決定する。９６ウエル培養プレートでは良好な位相差像が得られないので、この目的には２４ウエルプレートで培養した細胞を用いる。定量には、どちらの培養物プレーティングもグルタメート毒性に対して等しく感受性があり、０．１〜１．０ｍＭのグルタメートにさらしてから２４時間後のＬＤＨ活性に２〜３倍の増加が認められる。試薬：ＤＴＧは、ＡｌｄｒｉｃｈＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｍｐａｎｙ（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ウイスコンシン州）から購入することができ、ハロペリドールは、ＲｅｓｅａｒｃｈＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ社（Ｎａｔｉｃｋ，マサチューセッツ州）から購入することができる。スペルミンは、ＳｉｇｍａＣｈｅｍｉｃａｌ社（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ミズーリ州）から購入することができる。ウマ血清及びウシ胎児血清は、Ｈｙｃｌｏｎｅ（Ｌｏｇａｎ，ユタ州）から購入することができる。培養基、グルタミン、及びペニシリン／ストレプトマイシンは、Ｇｉｂｃｏ社（ＧｒａｎｄＩｓｌａｎｄ，ニューヨーク州）から購入することができる。データ分析：神経毒性は、グルタメートにさらしてから２０〜２４時間後に、培養基中に存在するＬＤＨの活性を計測することにより定量することができる。培養基におけるＬＤＨ活性の増加と、ニューロンの破壊及び変質との間には、相関関係がある（Ｋｏｈ及びＣｈｏｉ，１９８７）。ＬＤＨの実際のレベルは培養物によって異なるので、データは、通常の方法では、バッファーで処理した同じ培養プレートのシスターウエルに関して表される。グルタメート及び薬剤で処理した培養物のＬＤＨ活性指数を得るには、処置群のＬＤＨ値から対照培養物のＬＤＨ値を減算する。薬剤処理に関するデータは、各実験に関して１ｍＭグルタメート（又はＮＭＤＡ）によって誘発されるＬＤＨの増加百分率として表される。興奮性毒によって誘発されるＬＤＨ増加量を５０％まで減少させるのに必要なＮＭＤＡアンタゴニスト濃度（ＩＣ₅₀）は、３つの独立した実験の蓄積された結果からのログ− プロビット（ｌｏｇ−ｐｒｏｂｉｔ）分析を用いて計算する。本発明の「メシレート塩三水和物」は、選択的神経保護性抗虚血活性及び興奮性アミノ酸ブロック活性を有するので、変性ＣＮＳ障害、例えば、発作、アルツハイマー病、パーキンソン病、及びハンチントン病；てんかん、不安、脳虚血、筋けいれん、多梗塞痴呆、外傷性脳損傷、痛み、エイズ関連痴呆、低血糖症、偏頭痛、筋萎縮性側索硬化症、薬剤及びアルコールの依存症、薬剤及びアルコールの禁断症状、精神病性状態、及び尿失禁から選択した障害の治療において有用である。前記の障害における全身的治療における投与量は、典型的には１日当たり約０．０２〜２５０ｍｇ／ｋｇ（典型的な体重５０ｋｇのヒトでは１日当たり０．００１〜１２．５ｇ）であり、投与経路に関係なく、単回又は複数回で行う。より好ましい投与量の範囲は、１日当たり約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約２５０ｍｇ／ｋｇである。病気の厳密な性質及び患者の状態によっては、当然、前記の範囲外の投与量を、担当医師が処方することもできる。経口投与が一般的に好ましいが、患者が嚥下することができないか、又は経口吸収がかえって良くない場合には、好ましい投与経路は、非経口（筋肉内、静脈内）又は局所投与となるであろう。前記「メシレート塩三水和物」は、薬剤学的に許容することのできるビヒクル又は希釈剤と一緒の医薬組成物の形態で投与することができる。前記の組成物は、所望の投与方式に適するように固体又は液体のビヒクル又は希釈剤を利用する通常の方法を用いて：経口投与用としては、錠剤、硬質又は軟質のゼラチンカプセル、懸濁液、顆粒、粉末等の形態；非経口投与用としては、注射用溶液又は懸濁液等の形態；そして局所投与用としては、溶液、ローション、軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、軟膏（ｓａｌｖｅ）等の形態に製剤化する。実施例１：エナンチオマーである（１Ｓ，２Ｓ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン−１−イル）−１−プロパノール及び（１Ｒ，２Ｒ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン−１−イ）−１−プロパノール（＋）−酒石酸（３００ｍｇ，２ｍｍｏｌ）を、温メタノール３０ｍｌ中に溶解した。１Ｓ^*，２Ｓ^*−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン−１−イル）−１−プロパノールラセミ体（６５５ｍｇ，２ｍｍｏｌ）を全て一度に加えた。撹拌しながら穏やかに暖めて、無色の均質溶液を得た。周囲温度で２４時間放置して、綿毛様の白色沈殿３１９ｍｇ( ６６％)を得た。この生成物をメタノールから再結晶化処理して、白色固体として左旋性標記化合物の（＋）−酒石酸塩２６３ｍｇを得た；融点＝２０６．５− ２０７．５℃；［α］_D＝−３６．２°。この塩（１１５ｍｇ）を、飽和ＮａＨＣＯ₃（５０ｍｌ）に加えた。酢酸エチル（５ｍｌ）を加え、そしてその混合物を３０分間激しく撹拌した。水性相を酢酸エチルで繰り返し抽出した。有機層を一緒にして、ブラインで洗浄し、硫酸カルシウム上で乾燥し、そして濃縮した。その褐色（ｔａｎ）残さを、酢酸エチル−ヘキサンから再結晶化処理して、白色の左旋性標記化合物３２ｍｇ（３９％）を得た；融点＝２０３−２０４℃；［α］_D ＝−５６．９°。Ｃ₂₀Ｈ₂₅ＮＯ₃に関する理論値：Ｃ，７３．３７；Ｈ，７．７０；Ｎ，４．２８。実測値：Ｃ，７２．６１；Ｈ，７．４５；Ｎ，４．２１。前記の（＋）−酒石酸塩調製で得たろ液を、飽和水性ＮａＨＣＯ₃（１００ｍｌ）で処理し、そして酢酸エチルで充分に抽出した。一緒にした有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸カルシウム上で乾燥し、濃縮して、回収した出発材料（部分的に溶解）３８０ｍｇを得た。この材料を、メタノール３０ｍｌ中で、（−） −酒石酸（１７４ｍｇ）で前記のように処理した。２４時間放置した後に、ろ過によって生成物３２０ｍｇ（６６％）を得て、これを更にメタノールから再結晶化処理して、右旋性標記化合物の（−）−酒石酸塩２３９ｍｇを生成した；融点＝２０６．５−２０７．５℃；［α］_D＝＋３３．９°。後者を、前記の方法で、右旋性標記化合物に変換した（収率＝４９％）；融点＝２０４−２０５℃；［ α］_D=＋５８．４°。実測値：Ｃ，７２．９４；Ｈ，７．６４；Ｎ，４．２４。実施例２：（１Ｓ，２Ｓ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン−イル）−１−プロパノールメタンスルホン酸塩三水和物工程１５０ガロンのガラス裏打ち反応器に、アセトン１７．１ガロン、４’−ヒドロキシプロピオフェノン８．６５ｋｇ（５７．７ｍｏｌ）、炭酸カリウム９．９５ｋｇ（７２．０ｍｏｌ）、及び臭化ベンジル６．８リットル（５７．７ｍｏｌ）を入れた。この混合物を還流しながら（５６℃）２０時間加熱した。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）分析を行ったところ、反応が本質的に完了していたことが分かった。その懸濁液を雰囲気条件下で容量１０ガロンまで濃縮し、そして水１７．１ガロンを加えた。その懸濁液を、２５℃で１時間で顆粒化した。生成物を３０”ラップ上でろ過し、そして水４．６ガロン、続いてヘキサン６．９ガロンとイソプロパノール２．３ガロンとの混合物で洗浄した。４５℃で真空乾燥して、前記反応式で示す生成物１３．３５ｋｇ（９６．４％）を得た。４’−ヒドロキシプロピオフェノン９．８ｋｇ（６５．２５ｍｏｌ）を用いて前記の手順で２度目の実験を行った。乾燥して前記の生成物１５．１ｋｇ（９６．３％）を得た。工程２１００ガロンのガラス裏打ち反応器に、窒素雰囲気下で、塩化メチレン７５ガロン及び工程１の生成物２８．２ｋｇ（１１７．５ｍｏｌ）を入れた。その溶液を５分間撹拌し、続いて臭素１８．８ｋｇを入れた。その反応物を、２２℃で０．５時間撹拌した。ＴＬＣ分析を行ったところ、反応が本質的に完了していたことが分かった。その溶液に水３７ガロンを容れ、そしてその混合物を１５分間撹拌した。塩化メチレンを分離し、飽和水性炭酸水素ナトリウム１８．５ガロンで洗浄した。塩化メチレンを分離し、雰囲気条件下で容量４０ガロンまで濃縮し、そしてイソプロパノール６０ガロンを入れた。ポット温度８０℃まで濃縮を続け、最終容量４０ガロンを得た。その懸濁液を２０℃まで冷却し、１８時間顆粒化した。生成物を３０”ラップ上でろ過し、そしてイソプロパノール１０ガロンで洗浄した。４５℃で真空乾燥して、前記生成物２９．１ｋｇ（７７．６％）を得た。工程３２０ガロンのガラス裏打ち反応器に、窒素雰囲気下で、工程２の生成物４．９０ｋｇ（１５．３ｍｏｌ）、酢酸エチル７．０ガロン、４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン２．７０ｋｇ（１５．３ｍｏｌ）、及びトリエチルアミン１．５４ｋｇ（１５．３ｍｏｌ）を入れた。その溶液を還流しながら（７７℃）１８時間加熱した。得られた懸濁液を２０℃に冷却した。ＴＬＣ分析を行ったところ、反応が本質的に完了していたことが分かった。副産物（トリエチルアミン臭化水素酸塩）を３０”ラップ上でろ過し、そして酢酸エチル４ガロンで洗浄した。そのろ液を、真空条件下で容量１７リットルまで濃縮した。その濃縮物をヘキサン４８リットルに容れ、そして得られた懸濁液を２０℃で２時間顆粒化した。その生成物を３０”ラップ上でろ過し、そしてヘキサン４ガロンで洗浄した。５０ ℃で真空乾燥して、前記生成物４．９ｋｇ（７７％）を得た。工程２の生成物３．６ｋｇ（１１．３ｍｏｌ）を用いて、前記の手順で２度目の実験を行った。乾燥して前記の生成物４．１ｋｇ（８７％）を得た。工程４１００ガロンのガラス裏打ち反応器に、窒素雰囲気下で、２Ｂエタノール８７．０ガロン及び水素化ホウ素ナトリウム１．７ｋｇ（４５．２ｍｏｌ）を入れた。得られた溶液を２５℃で撹拌し、工程３の生成物９．４ｋｇ（２２．６ｍｏｌ）を入れた。その懸濁液を、２５〜３０℃で１８時間撹拌した。ＴＬＣ分析を行ったところ、トレオジアステレオマーへの反応が本質的に完了していたことが分かった。その懸濁液に水７．８リットルを入れた。その懸濁液を真空条件下で容量４０ガロンまで濃縮した。１時間顆粒化した後に、その生成物を３０”ラップ上でろ過し、そして２Ｂエタノール２ガロンで洗浄した。その湿潤生成物、２Ｂエタノール９．４ガロン、及び水８．７ガロンを、１００ガロンのガラス裏打ち反応器に入れた。その懸濁液を還流温度（７８℃）で１６時間撹拌した。その懸濁液を２５℃まで冷却し、３０”ラップ上でろ過し、そして水７ガロン、続いて２Ｂエタノール４ガロンで洗浄した。５０℃で空気乾燥して、前記生成物８．２ｋｇ（８６．５％）を得た。この材料を以下の方法で再結晶化した。１００ガロンのガラス裏打ち反応器に、工程３の生成物７．９ｋｇ（１８．９ｍｏｌ）、２Ｂエタノール２０ガロン及びアセトン４ガロンを入れた。その懸濁液を７０℃に加熱して溶液にした。その溶液を雰囲気条件下で容量１５ガロンまで濃縮した。その懸濁液を２５℃に冷却し、そして１時間顆粒化した。その生成物を３０”ラップ上でろ過した。その湿潤生成物及び２Ｂエタノール１１．７ガロンを、１００ガロンのガラス裏打ち反応器に入れた。この懸濁液を還流しながら（７８℃）１８時間加熱した。その懸濁液を２５℃まで冷却し、３０”ラップ上でろ過し、そして２Ｂエタノール２ガロンで洗浄した。５０℃で空気乾燥して、前記生成物５．６ｋｇ（７０．６％）を得た。工程５５０ガロンのガラス裏打ち反応器に、窒素雰囲気下で、炭素上１０％パラジウム（５０％水湿潤）８２５ｇ、工程４の生成物５．５ｋｇ（１３．２ｍｏｌ）、及びテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）１５．５ガロンを入れた。その混合物を、４０〜５０℃で２時間水素添加した。この時に、ＴＬＣ分析で反応が本質的に完了したことを示した。その反応物を、セライトでプレコートした１４”スパークラー（ｓｐａｒｋｌｅｒ）を通してろ過し、そしてＴＨＦ８ガロンで洗浄した。そのろ液を清潔な１００ガロンのガラス裏打ち反応器に移し、容量７ガロンまで真空濃縮し、そして酢酸エチル２１ガロンを入れた。懸濁液を、雰囲気条件下で、容量１０ガロン及びポット温度７２℃まで濃縮した。懸濁液を１０℃まで冷却し、３０”ラップ上でろ過し、そして酢酸エチル２ガロンで洗浄した。５５℃で空気乾燥して、前記生成物（すなわち、前記「遊離塩基」）３．９ｋｇ（９０％）を得た。工程６１００ガロンのガラス裏打ち反応器に、メタノール２０ガロン及び工程５の生成物（すなわち、前記「遊離塩基」）３．７ｋｇ（１１．４ｍｏｌ）を入れた。その懸濁液を６０℃に加熱し、そしてＤ−（−）−酒石酸１．７ｋｇ（１１．４ｍｏｌ）を入れた。得られた溶液を還流しながら（６５℃）３時間加熱すると、懸濁液が形成された。懸濁液を３５℃まで冷却し、３０”ラップ上でろ過し、そしてメタノール１ガロンで洗浄した。湿潤固体を、メタノール１０ガロンと一緒に１００ガロンのガラス裏打ち反応器に入れた。懸濁液を２５℃で１８時間撹拌した。その懸濁液を３０”ラップ上でろ過し、そしてメタノール２ガロンで洗浄した。５０℃で空気乾燥して、前記生成物［すなわち、前記「遊離塩基」（Ｒ− （＋）−エナンチオマー）の酒石酸塩］２．７ｋｇ（１０１％）を得た。この材料を以下の方法で精製した。１００ガロンのガラス裏打ち反応器に、メタノール１０．６ガロン及び前記の酒石酸塩２．６７ｇ（５．６ｍｏｌ）を入れた。その懸濁液を還流するように（８０℃）１８時間加熱した。その懸濁液を３０℃に冷却し、３０”ラップ上でろ過し、そしてメタノール４ガロンで洗浄した。５０℃で空気乾燥して、前記生成物（すなわち、前記「遊離塩基」の酒石酸塩）２．０５ｋｇ（７６．７％）を得た。工程７水３０リットル及び炭酸水素ナトリウム１０５６ｇ（１２．６ｍｏｌ）を、２０℃で、５５リットルのナルジェネ（ｎａｌｇｅｎｅ）槽に入れた。その得られた溶液に、工程６の生成物（すなわち、前記「遊離塩基」の酒石酸塩）２．０ｋｇ（４．２ｍｏｌ）を入れた。その懸濁液を４時間撹拌した。この間に、多量の泡が発生した。泡形成をしなくなった後に、懸濁液を３２ｃｍ漏斗上でろ過し、水１ガロンで洗浄した。５０℃で空気乾燥して、前記の生成物（すなわち、前記「遊離塩基」）１．２８ｋｇ（９３．５％）を得た。工程８工程７の生成物１２７７ｇ（３．９ｍｏｌ）及び水１４リットルを、２２リットルフラスコに入れた。その懸濁液を３０℃に暖め、そしてメタンスルホン酸３７５ｇ（３．９ｍｏｌ）を入れた。得られた溶液を６０℃に暖め、セライトを通すろ過によって透明にして、そして水２リットルで洗浄した。この汚れのない( スペックフリー)ろ液を、真空条件下で容量６リットルまで濃縮した。懸濁液を０〜５℃まで冷却し、１時間顆粒化した。生成物を１８”フィルター漏斗上でろ過し、そしてスペックフリー水（６３５ｍｌ）で洗浄した。２５℃で１８時間空気乾燥して、前記の生成物（すなわち、前記「メシレート塩三水和物」）１６４６ｇ（８８％）を得た。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＵ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＶ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＲ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者フィース，ユージーン，エフ. アメリカ合衆国コネチカット州レッドヤードヨーク・コート３

Claims

【特許請求の範囲】１．（１Ｓ，２Ｓ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（４−ヒドロキシ −４−フェニルピペリジン−１−イル）−１−プロパノールメタンスルホン酸塩三水和物。２．ＮＭＤＡアンタゴナイズ有効量の請求項１に記載の三水和物メシレート塩及び薬剤学的に許容することのできる担体を含む、ほ乳類における、変性ＣＮＳ障害、例えば、発作、アルツハイマー病、パーキンソン病、及びハンチントン病；てんかん、不安、脳虚血、筋けいれん、多梗塞痴呆、外傷性脳損傷、痛み、エイズ関連痴呆、低血糖症、偏頭痛、筋萎縮性側索硬化症、薬剤及びアルコールの依存症、薬剤及びアルコールの禁断症状、精神病性状態、及び尿失禁から選択した障害の治療用の医薬組成物。３．変性ＣＮＳ障害、例えば、発作、アルツハイマー病、パーキンソン病、及びハンチントン病；てんかん、不安、脳虚血、筋けいれん、多梗塞痴呆、外傷性脳損傷、痛み、エイズ関連痴呆、低血糖症、偏頭痛、筋萎縮性側索硬化症、薬剤及びアルコールの依存症、薬剤及びアルコールの禁断症状、精神病性状態、及び尿失禁から選択した障害の各々の治療において有効な量の請求項１に記載の三水和物メシレート塩、及び薬剤学的に許容することのできる担体を含む、ほ乳類における前記障害の治療用の医薬組成物。４．変性ＣＮＳ障害、例えば、発作、アルツハイマー病、パーキンソン病、及びハンチントン病；てんかん、不安、脳虚血、筋けいれん、多梗塞痴呆、外傷性脳損傷、痛み、エイズ関連痴呆、低血糖症、偏頭痛、筋萎縮性側索硬化症、薬剤及びアルコールの依存症、薬剤及びアルコールの禁断症状、精神病性状態、及び尿失禁から選択した障害の治療において有効な量で請求項１に記載の三水和物メシレート塩をほ乳類に投与することを含む、前記ほ乳類における前記障害の治療方法。５．ＮＭＤＡをアンタゴナイズする量の請求項１に記載の三水和物メシレート塩をほ乳類に投与することを含む、前記ほ乳類における、変性ＣＮＳ障害、例えば、発作、アルツハイマー病、パーキンソン病、及びハンチントン病；てんかん、不安、脳虚血、筋けいれん、多梗塞痴呆、外傷性脳損傷、痛み、エイズ関連痴呆、低血糖症、偏頭痛、筋萎縮性側索硬化症、薬剤及びアルコールの依存症、薬剤及びアルコールの禁断症状、精神病性状態、及び尿失禁から選択した障害の治療方法。６．（１Ｓ，２Ｓ）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（４−ヒドロキシ −４−フェニルピペリジン−１−イル）−１−プロパノールの請求項１に記載のメシレート塩三水和物と、視床外側腹側核から皮質中への興奮性フィードバックのバランスを回復することができる薬剤との相乗的な組み合わせを、パーキンソン病治療有効量でほ乳類に投与することを含む、前記ほ乳類におけるパーキンソン病の治療方法。７．請求項１に記載の「メシレート塩三水和物」と、ドーパミンアゴニスト、ドーパミンＤ１アゴニスト、ドーパミンＤ２アゴニスト、ドーパミン／β−アドレナリンレセプターアゴニスト、ドーパミン／５−ＨＴ取り込み阻害剤／５−ＨＴ −１Ａアゴニスト、ドーパミン／オピエートアゴニスト、アドレノレセプターアゴニスト、α２−アドレナリンアンタゴニスト／ドーパミンアゴニスト、α２− アドレナリン／ドーパミンＤ２アゴニスト、ドーパミン取り込み阻害剤、モノアミンオキシダーゼ阻害剤、モノアミンオキシダーゼ−Ｂ阻害剤、ＣＯＭＴ阻害剤、及びレボドパからなる群から選択した興奮性フィードバック増強剤との相乗的な組み合わせをパーキンソン病の治療有効量でほ乳類を治療することを含む、前記ほ乳類におけるパーキンソン病の治療方法。８．前記の興奮性フィードバック増強剤が、レボドパである請求項７に記載の方法。９．治療する障害がパーキンソン病である、請求項４又は請求項５に記載の方法。１０．治療する障害が、外傷性脳損傷又は脳虚血である、請求項４又は請求項５に記載の方法。