JPH10511346A - 子宮、卵巣、及び乳腫瘍において抗増殖活性を有するカルコン及びこれらのエステル - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、子宮、卵巣、及び乳腫瘍の治療及び予防における、いくつかの天然または合成のカルコン及び２２個までの炭素原子を含んでいる飽和及び不飽和の直鎖または分岐した脂肪酸とこれらのエステルの使用、並びにそれらを含んでいる調製物（ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ）に関する。イソコルドイン、コルドイン、２−ヒドロキシデリシン、２’，４’−ジヒドロキシカルコン、４，２’，４’−トリヒドロキシカルコンのようなカルコンは、II型のエストロゲンレセプターに対する著しい親和性、並びに子宮、卵巣、及び乳腫瘍細胞系に対する抗増殖活性を有する。これらの分子は、そのような腫瘍の治療及び予防の両方において有用であることが判明した。

Description

【発明の詳細な説明】 子宮、卵巣、及び乳腫瘍において抗増殖活性を有するカルコン及びこれらのエス テル 本発明は、子宮、卵巣、及び乳腫瘍の治療及び予防における、カルコン化合物 または２２個までの炭素原子を含んでいる飽和及び不飽和の直鎖もしくは分岐し た脂肪酸とこれらのエステルの使用、並びにそれらを含む製剤に関する。 最近、いくつかのフラボノイドが、いくつかの腫瘍において抗癌活性（Ｃａｎ ｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ４８、５７５４、１９８８）及び化学的予防活性（ Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．５３、２３、１９９０）を有することが判明した。特に 、植物においてほとんど遍在するフラボノイドであるクエルセチンは、従来の化 学療法との相乗活性に加えて、ヒト白血病細胞の増殖に対して（Ｂｒ．Ｊ．ｏｆ Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ ７５、４８９、１９９０）及び他の細胞系に対して （Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ ６２、９４２、１９９０−Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅ ｒ ４６、１１１２、１９９０−Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｐｈａｒ ｍａｃｏｌ．２８、２５５、１９９１−Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃ Ｏｎｃｏｌｏ ｇｙ ４５、１３、１９９１、１９９２）いくらかの阻害活性を示した。増殖に 対するそのような阻害作用の機構は未知であるけれども、II型のエストロゲンレ セプターとこのフラボノイドの相互作用に関係しているようである（Ｊ．Ｓｔｅ ｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍ．３０、７１、１９８８）。これらの部位は、最初、 ラットの子宮において、１９７８年にＣｌａｒｋにより記述されており（Ｊ．Ｂ ｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５３、７６３０、１９７８）、同じステロイド及び組織特 異性を示すが、 これらはエストロゲンレセプター（ＥＲ）より高濃度で存在し、そしてエストラ ジオールに対してＥＲ（ＫＤ：０．２−１ｎＭ）より低い明白な親和性解離定数 （ＫＤ：１０−２０ｎＭ）を有するので、「真の」ＥＲと異なる。 今回、意外にも、カルコン構造化合物、イソコルドイン、４−ヒドロキシデリ シン、２−ヒドロキシデリシン、３−ヒドロキシデリシン、２’，４’−ジヒド ロキシカルコン、４，２’，４’−トリヒドロキシカルコン、及びコルドインが 、子宮、卵巣、及び乳腫瘍細胞株に対する著しい抗増殖活性と共に、既知の生成 物よりも非常に高い、II型のエストロゲンレセプターに対する顕著な親和性を有 することが見いだされた。 上に挙げた化合物の構造は、以下の通りである。 構造を以下に示す、４−ヒドロキシコルドイン及びジヒドロコルドインのよう な化学構造に関する限り前者に厳密に関係した他のカルコンは、上記のレセプタ ーに対する何の親和性も示さない。 従って、本発明は、第一の態様において、抗癌活性を有する薬剤の調製のため の、特に、II型のエストロゲンレセプターを発現している腫瘍の治療のための、 式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。 本発明はまた、さらなる態様により、２２個までの炭素原子を含んでいる飽和 または不飽和の直鎖または分岐した脂肪酸と式（Ｉ）の化合物のエステルも提供 する。特に好ましくは、酢酸、酪酸、パルミチン酸、またはキシメニン酸とのエ ステルである。 本発明のエステルは、経口により投与されることができ、これらは、カルコン Ｉのプロドラッグとして作用するようである。 最後に、本発明は、適当な添加剤との混合において、化合物Ｉまたはこれらの エステルを活性成分として含んでいる製剤組成を提供する。 化合物（Ｉ）は、Ｉｌ Ｆａｒｍａｃｏ、３０、４４９−５５、１９７５；Ｉ ｌ Ｆａｒｍａｃｏ、３２、２６１−６９、１９７７；Ｉｌ Ｆａｒｍａｃｏ、３０、３２６−４２、１９７５により報告された従来法により 調製されることができる。 II型のエストロゲンレセプターに対する化合物Ｉの親和性及び卵巣腫瘍細胞に 対する抗増殖活性は、以下の表において報告される。 エストロゲンレセプター結合の評価は、卵巣及び他の器官の腫瘍細胞に対して 行われている。仔牛血清及び培地を無菌に保つための２００ｕｎｉｔｓ／ｍｌの ペニシリンを加えた最小必須培地上で、単層培養で細胞を増殖させた。試験を再 現できるようにするために、これらの細胞を毎週トリプシンで処理し、８ｘ１０^-4 の密度でプレート上に置き、そして５％ＣＯ₂及び湿気を含んでいる大気下の ３７℃で培養した。化合物の活性を評価するために、最少量の基質で、１ｘ１０^-5 ／ｍｌの濃度で、 これらの細胞をウェル（Ｆａｌｃｏｎ ３０４６、Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎ ｓｏｎ ＮＹ）中に置いた。２４時間後、基質を新しい基質と置き換え、そして 無水エタノールに溶解したカルコンを加えた。試験する活性成分なしに、コント ロールを同様にキャリヤーと処理した。７２時間の試験期間の間、上記の処理を ２４時間の時間間隔で繰り返した。２４時間後、細胞を段階的な量の標識したエ ストラジオール（³Ｈ−Ｅ２ ４０Ｃｉ／ｍｍｏｌ Ａｍｅｒｓｈａｎ ＵＫ） のみまたは１００倍量のジエチルスチルベストロールの存在下で４℃で２．５時 間インキュベートした。インキュベーション時間の最後に、細胞を新しい基質で すばやく洗浄し、そして１Ｍ ＮａＯＨと３０分間インキュベートした。放射能 をシンチレーター（ｓｃｉｎｔｉｌｌｅｒ）により測定し、そしてジエチルスチ ルベストロールを含んでいるまたは含んでいない調製物間の差として、結合特異 性を計算した。結果を、従来法に従って、細胞当たりの結合部位の数として表す 。処理したものの増殖に対してコントロールの増殖を比較する細胞の直接計算に より、細胞増殖に対する阻害を評価する。 文献の従来の条件に従って、ヌード無胸腺マウスに移植した腫瘍の大きさを測 定することにより示されたように、本発明の化合物は、インビボにおいて細胞増 殖を阻害した。１から１００ｍｇ／ｋｇまでの服用量でのこれらの動物の処理は 、調べた腫瘍が個体の高い割合において消失するまでの、これらの著しい退行を 明白に示した。ヒトにおいて、化合物Ｉは、タモキシフェンのような既知の薬剤 よりも高い、卵巣、乳、及び子宮腫瘍に対する活性を示した。 上に挙げた試験において、イソコルドイン、コルドイン、及び２’， ４’−ジヒドロキシカルコンは、特に著しい活性を示した。 本発明の化合物は、都合よく、経口または注入により投与されることができ、 経口投与に対しては、天然または合成のリン脂質が、カルコンと安定な脂溶性の 複合体を形成するので特に有用であることが判明し、中鎖トリグリセリド及び同 類の添加物もまた有用であることがわかった。本発明の化合物の服用量は、広い 範囲内で、主に経口により投与されると、例えば１０から３００ｍｇ／日まで変 わることができる。 以下の実施例は、さらに本発明を例示する。 実施例Ｉ−キシメニン酸コルドインの調製 ７ｇの４−Ｏ−プレニル−２−ヒドロキシアセトフェノンを、１０ｇのピペリ ジン及び７０ｍｌのエタノール中、７ｇのベンズアルデヒドと６０−７０℃で反 応させる。３６時間後、溶媒を真空下で除き、その残留物を１００ｍｌのベンゼ ンで溶解し、これを２Ｎ ＨＣｌで完全に洗浄する。ベンゼンを除いた後、残留 物をシリカゲルカラム上で精製し、３．５ｇのコルドインを得る。得られたコル ドインを、２０ｍｌの無水ピリジン中、３ｇの塩化キシメニン酸と反応させる。 この反応混合物を水に注ぎ、その生成物を塩化メチレンで抽出する。メタノール からの結晶化後、ｍ．ｐ．１６４−１６６℃を有する、４．２ｇのキシメニン酸 コルドインを得る。 実施例II−パルミチン酸イソコルドインの調製 １０ｇの３−Ｃ−プレニルｒｅｓアセトフェノン（ｐｒｅｎｙｌｒｅｓａｃｅ ｔｏｐｈｅｎｏｎｅ）及び１０ｇのｐ−ヒドロキシベンズアルデヒドを、１５ｇ のピペリジン及び２００ｍｌの無水エタノールに溶解し、６０℃で４時間保持す る。溶媒を除いた後、残留物を５０ｍｌの２ Ｎ ＨＣｌに懸濁し、その生成物を塩化メチレンで抽出する。塩素化溶媒を除い た後、残留物をシリカゲル上で精製し、ｍ．ｐ．１６０−１℃を有する、４．１ ｇのイソコルドインを得る。この生成物を３０ｍｌの無水ピリジン中８ｇの塩化 パルミトイルと反応させる。この反応混合物を水で希釈し、シリカゲル上で精製 した後、ｍ．ｐ．１３１−１３２℃を有する、６．２ｇのジパルミトイルイソコ ルドインを得る。 実施例III−コルドイン及びイソコルドインの酢酸エステル及び酪酸エステル の調製 これらの生成物を、それぞれ、対応する酸の塩化物または無水物を用いて、実 施例Ｉ及びIIに従って調製する。（酢酸コルドイン ｍ．ｐ．１３１−３℃；酪 酸コルドイン ｍ．ｐ．１２４−６℃） 実施例IV−ジパルミトイルホスファチジルコリンとイソコルドインの複合体の 調製 ３．０８ｇのイソコルドインを３０ｍｌの塩化メチレンに懸濁し、７．９ｇの ジパルミトイルホスファチジルコリンを加え、撹拌しながら１時間反応させたま まにする。これらの試薬を完全に溶解すると、その反応混合物を少量に濃縮し、 濃縮物を５０ｍｌのｎ−ヘキサン中に注ぐ。沈殿した固形物質を濾過し、真空下 で４０℃で一晩乾燥させ、ｍ．ｐ．７０℃を有する、７．２ｇのリン脂質イソコ ルドイン複合体を得る。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項 【提出日】１９９６年１１月２１日 【補正内容】 請求の範囲 １． 酢酸、酪酸、パルミチン酸、キシメニン酸と、イソコルドイン、コルドイ ン、４−ヒドロキシデリシン、２−ヒドロキシデリシン、３−ヒドロキシデリシ ン、２’，４’−ジヒドロキシカルコン、４，２’，４’−トリヒドロキシカル コンのエステル。 ２． 請求の範囲１に記載のコルドインまたはイソコルドインのエステル。 ３． 抗癌及びII型のエストロゲンレセプターに対する拮抗活性を有する薬剤の 調製のための、酢酸、酪酸、パルミチン酸、キシメニン酸と、イソコルドイン、 コルドイン、４−ヒドロキシデリシン、２−ヒドロキシデリシン、３−ヒドロキ シデリシン、２’，４’−ジヒドロキシカルコン、４，２’，４’−トリヒドロ キシカルコンのエステルの使用。 ４． 天然または合成のリン脂質と、イソコルドイン、コルドイン、４−ヒドロ キシデリシン、２−ヒドロキシデリシン、３−ヒドロキシデリシン、２’，４’ −ジヒドロキシカルコン、４，２’，４’−トリヒドロキシカルコンの複合体。 ５． 適当な添加剤との混合において、請求の範囲１−２のイソコルドイン、コ ルドイン、４−ヒドロキシデリシン、２−ヒドロキシデリシン、３−ヒドロキシ デリシン、２’，４’−ジヒドロキシカルコン、４，２’，４’−トリヒドロキ シカルコンのエステル、または請求の範囲４の複合体を活性成分として含んでい る製剤組成。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ｃ０７Ｃ 69/28 Ｃ０７Ｃ 69/28 // Ａ６１Ｋ 31/66 Ａ６１Ｋ 31/66 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，Ｕ Ｇ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，Ｂ Ｙ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＰ， ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，Ｍ Ｄ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ， ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． 抗癌及びII型のエストロゲンレセプターに対する拮抗活性を有する薬剤の 調製のための、イソコルドイン、コルドイン、４−ヒドロキシデリシン、２−ヒ ドロキシデリシン、３−ヒドロキシデリシン、２’，４’−ジヒドロキシカルコ ン、４，２’，４’−トリヒドロキシカルコン、及び２２個までの炭素原子を含 んでいる飽和または不飽和の直鎖または分岐した脂肪酸とこれらのエステルの使 用。 ２． ２２個までの炭素原子を含んでいる飽和または不飽和の直鎖または分岐し た脂肪酸と、イソコルドイン、コルドイン、４−ヒドロキシデリシン、２−ヒド ロキシデリシン、３−ヒドロキシデリシン、２’，４’−ジヒドロキシカルコン 、４，２’，４’−トリヒドロキシカルコンのエステル。 ３． 酸が、酢酸、酪酸、パルミチン酸、キシメニン酸から選択される、請求の 範囲２に記載のエステル。 ４． 請求の範囲２または３に記載のコルドインまたはイソコルドインのエステ ル。 ５． 天然または合成のリン脂質と、イソコルドイン、コルドイン、４−ヒドロ キシデリシン、２−ヒドロキシデリシン、３−ヒドロキシデリシン、２’，４’ −ジヒドロキシカルコン、４，２’，４’−トリヒドロキシカルコンの複合体。 ６． 適当な添加剤との混合において、イソコルドイン、コルドイン、４−ヒド ロキシデリシン、２−ヒドロキシデリシン、３−ヒドロキシデリシン、２’，４ ’−ジヒドロキシカルコン、４，２’，４’−トリヒドロキシカルコン、または 請求の範囲２−４のエステル、または請求の 範囲５の複合体を活性成分として含んでいる製剤組成。