JPH1077295A

JPH1077295A - 副甲状腺ホルモンおよび副甲状腺ホルモン関連ペプチドのアナログの合成方法

Info

Publication number: JPH1077295A
Application number: JP9198072A
Authority: JP
Inventors: Humberto Bartolome Arzeno; ウンベルト・アルセーノ
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 1996-07-30
Filing date: 1997-07-24
Publication date: 1998-03-24
Anticipated expiration: 2017-07-24
Also published as: JP4229992B2; MX9705719A; PL321391A1; ZA976555B; BR9704138A; DK0822200T3; TW505654B; KR100518982B1; AR016981A2; TR199700714A2; CO4650046A1; DE69730787T2; HRP970416A2; US6849710B1; NO973482L; ATE277080T1; CN1174845A; AR008094A1; YU32197A; AU3236297A

Abstract

(57)【要約】【課題】骨粗鬆症に苦しむものを含めた哺乳動物被検
体における骨重量の回復のために改善された治療的特性
を有するＰＴＨのアナログおよびＰＴＨｒＰのアナログ
を提供すること。【解決手段】副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）もしくは副
甲状腺ホルモン関連ペプチド（ＰＴＨｒＰ）の合成ポリ
ペプチドアナログまたはその塩の合成方法であって、こ
こで、配列番号８５、８６、２６、２７、２８、２９、
および３０から選択されるアミノ酸残基（２２−３１）
が両親媒性αヘリックスを形成し、ａ）該ポリペプチドの前駆体ペプチドフラグメントを、
液相もしくは固相技術により独立して合成する工程；ｂ）該フラグメントを相互に縮合させて所望のポリペプ
チド産物を形成させる工程；およびｃ）アミノ酸保護基を除去する工程、を包含する方法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】この発明は、骨粗鬆症の処置
に有用な、ある新規な副甲状腺ホルモンおよび副甲状腺
ホルモン関連ペプチドのアナログの合成方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】骨粗鬆症は代謝的骨疾患 (metabolic bo
ne disease) の最も一般的な形態であり、その徴候は骨
喪失の骨折段階（骨減少症：osteopenia）であると考え
られ得る。骨粗鬆症は多くの潜在的な疾患に対して二次
的に起こり得るのであるが、全症例の９０％が特発性で
あるようである。閉経後の女性は、特に特発性骨粗鬆症
の危険性が高い（閉経後骨粗鬆症もしくはＩ型骨粗鬆
症）。特発性骨粗鬆症の危険性が高いもう一つの群は、
両性の初老者である（老人性骨粗鬆症もしくはII型骨粗
鬆症）。骨粗鬆症はまた、コルチコステロイドの使用、
寝たきりもしくは長い病床生活、アルコール漬け、糖尿
病、性腺傷害性化学療法 (gonadotoxic chemotherapy)
、過プロラクチン血症、神経性食欲不振、原発性もし
くは続発性無月経および卵巣摘出にも関連している。

【０００３】種々の形態の骨粗鬆症において、骨折 (bo
ne fracture)は、機械的な破損点に達した骨喪失の結果
であり、頻繁に起こるものである。閉経後骨粗鬆症は、
手首および脊椎骨 (spine)の骨折によって特徴づけられ
るが、一方、大腿骨頸 (femoral neck) 骨折は、老人性
骨粗鬆症の顕著な特徴であるようである。

【０００４】それにより骨粗鬆症において骨が失われる
機作は、それにより骨格がそれ自体を再生する過程にお
ける不均衡が関与すると考えられている。この過程は、
骨再造形 (bone remodeling)と名付けられている。それ
は、活動の一連の不連続なポケットにおいて生じる。こ
れらのポケットは、骨吸収部位としての所定の骨表面上
で骨基質内において同時に現れる。破骨細胞（骨溶解も
しくは骨再吸収細胞）は、骨の一般的に一定の寸法 (co
nstant dimension) の部分の再吸収を司っている。この
再吸収過程に、破骨細胞によって残された空洞を次に新
しい骨で再充填する骨芽細胞（骨形成細胞）の出現が続
く。

【０００５】健康な成人被験者では、破骨細胞および骨
芽細胞が形成される比率は、骨形成と骨再吸収の均衡が
とれるようなものである。しかし、骨粗鬆症では、骨が
作られるより速い速度で骨が失われることになる骨再造
形過程における不均衡が進む。この不均衡はほとんどの
個体において彼らが年をとるにつれてある程度起きるの
であるが、閉経後骨粗鬆症もしくは卵巣摘出後において
は、より重篤であり、より若年齢で起こる。

【０００６】Adachi et alは、Seminars in Arthritis
and Rheumatism 22:6, 375-84 (June 1993) において、
コルチコステロイド誘導骨粗鬆症の病態生理学に関する
矛盾する多くのデータにも関わらず、骨形成の相対的な
減少と骨再吸収の相対的な増加があることが一般的に認
められるということを報告している。結果として骨折お
よび骨壊死を伴う骨喪失は、コルチコステロイド治療の
結果よく起こる。骨喪失がコルチコステロイド治療の最
初の６〜１２ヶ月以内に急速に起こるという証拠があ
る；また、骨喪失とコルチコステロイド用量との間には
緊密な関係があるようである。男性もコルチコステロイ
ドの効果に対して同等に感受性である。骨折と骨壊死の
推定発生率は、３０〜５０％の範囲である。

【０００７】さらなる骨喪失を遅らせるか、より望まし
くは骨重量の正味の増加を生じさせるという目的を持っ
て骨粗鬆症を処置しようとする多くの試みがあった。エ
ストロゲンおよびビスホスホネートのようなある物質
は、骨粗鬆症におけるさらなる骨喪失を遅らせるようで
ある。骨喪失を遅らせる物質は、骨再吸収と骨形成の期
間の差違のため、骨重量を増加させ得るようである（３
〜７％程度）。しかし、この明らかな増加は、時間に限
界があり、連続的でなく、「再造形空間」の減少による
ものである。さらに、再吸収と形成の間に密接な関連が
あるため、骨再吸収を妨げる治療は最終的に骨形成をも
妨げるのである。

【０００８】副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）による処置が
骨の代謝回転の増加と正の (positive) カルシウム均衡
の両方を導くということが示唆されてきた。しかし、ヒ
トの臨床試験は、小柱骨 (trabecular bone)のいかなる
増加も皮質骨の減少によって相殺され、その結果、骨総
量における正味の増加はないことを示した。

【０００９】Hefti et al は、Clinical Science 62, 3
89-396 (1982) において、ｂＰＴＨ（１−８４）もしく
はｈＰＴＨ（１−３４）のいずれかを毎日皮下に投与す
ることにより、全体内カルシウムと個々の骨の灰分が正
常な成体雌ラットでも骨粗鬆症の成体雌ラットでも増加
したということを報告した。

【００１０】Liu et al は、J. Bone. Miner. Res. 6,
10, 1071-1080 (1991)において、成体雌ラットの卵巣摘
出が、骨芽細胞数および小柱骨破骨細胞数の有意な増加
を伴って、近位の脛骨幹端 (proximal tibial metaphys
is) における小柱骨のパーセンテージの４７％の喪失を
誘導したということに注目した。ｈＰＴＨ（１−３４）
を毎日皮下注射することにより、小柱骨の喪失は完全に
逆転し、偽薬 (sham)が作用していた対照のそれを上回
る小柱骨の量を生じた。骨芽細胞数は増加し、破骨細胞
数は減少した。

【００１１】Hock et alは、J. Bone Min. Res. 7, 1,
65-71 (1992)において、ｈＰＴＨ（１−３４）を健康な
成体雄ラットに１２日間毎日皮下注射することにより小
柱骨カルシウムおよび皮質骨カルシウムならびに乾燥重
量が増加したことを報告した。全骨重量、小柱骨体積、
小柱の太さおよび数、ならびに骨芽細胞表面が増加し
た。

【００１２】哺乳動物の副甲状腺ホルモン、例えば、ヒ
ト（ｈＰＴＨ）、ウシ（ｂＰＴＨ）、およびブタ（ｐＰ
ＴＨ）は、８４アミノ酸残基の単一ポリペプチド鎖で、
分子量約９，５００を有する。生物学的活性は、明らか
に最小限必要とされる残基（１−３４）を有するＮ−末
端部分に関係している。

【００１３】ヒトＰＴＨのＮ−末端セグメントは、ウシ
およびブタホルモンのＮ−末端セグメントと、それぞれ
わずか３および２アミノ酸残基だけ異なっている：ｈＰＴＨ（１−３４）： Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu 1 5 10 15 Asn Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp 20 25 30 Val His Asn Phe （配列番号１）；ｂＰＴＨ（１−３４）： Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Met His Asn Leu Gly Lys His Leu 1 5 10 15 Ser Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp 20 25 30 Val His Asn Phe （配列番号２）；ｐＰＴＨ（１−３４）： Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu 1 5 10 15 Ser Ser Leu Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp 20 25 30 Val His Asn Phe （配列番号３）。

【００１４】ＰＴＨの主な機能は、細胞外流体内の一定
濃度のＣａ²⁺を維持するのに役立つ適応性のある変化を
導き出すことである。ＰＴＨは腎臓に作用して尿からの
Ｃａ²⁺の尿細管再吸収を増加させ、ならびにカルシフェ
ジオールのカルシトリオールへの変換を刺激し、それは
腸からのＣａ²⁺の吸収を司る。一つの顕著な効果は、骨
からのＣａ²⁺の動員 (mobilization) を促進することで
ある。ＰＴＨは骨に作用してＣａ²⁺とホスフェートの再
吸収率を増加させる。ＰＴＨは破骨細胞による骨再吸収
率を刺激し、間葉細胞の破骨細胞への分化率を増大さ
せ、そしてこれら後者の細胞の半減期を延長する。ＰＴ
Ｈの作用が長引くことにより、骨形成骨芽細胞の数もま
た増加する；したがって、骨代謝回転および再造形の率
が促進される。しかし、個々の骨芽細胞は、正常のもの
に比べ活動が少ないようである。

【００１５】Rosenblatt, et al は、米国特許第４，４
２３，０３７号、同第４，９６８，６６９号および同第
５，００１，２２３号において、Ｎ−末端（１−６）ア
ミノ酸の欠失およびPhe⁷、Met^8,18 、およびGly¹² の選
択的置換により得たＰＴＨアンタゴニストを開示した。
Tyr³⁴ −ＮＨ₂ は、伝えるところによれば、これらの化
合物の活性および安定性を増大させたという。

【００１６】副甲状腺ホルモン関連ペプチド（ＰＴＨｒ
Ｐ）は、１４０＋アミノ酸タンパク質であり、ＰＴＨｒ
Ｐとそのフラグメントは、ＰＴＨの主要な生物学的作用
を再生する。ＰＴＨｒＰは、多くのヒトおよび動物の腫
瘍ならびに他の組織によって作り上げられ、悪性の高カ
ルシウム血症において働く。ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）
の配列は以下のようである： Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 1 5 10 15 Gln Asp Leu Arg Arg Arg Phe Phe Leu His His Leu Ile Ala Glu 20 25 30 Ile His Thr Ala （配列番号４）。

【００１７】ｈＰＴＨとｈＰＴＨｒＰとの間の相同性は
主として１３個のＮ−末端残基に限られており、そのう
ち８個が同一である；ｈＰＴｈの（２５−３４）レセプ
ター結合領域の１０アミノ酸のうちわずかに１個がｈＰ
ＴＨｒＰで保存されている。コンホメーションの類似性
が共通の活性の基礎かもしれない。Cohen, et alは、J.
Biol. Chem. 266, 3, 1997-2004 (1991) において、Ｐ
ＴＨ（１−３４）およびＰＲＨｒＰ（１−３４）の配列
の多くが、特に領域（５−１８）および（２１−３４）
において、αヘリックス様立体配置を呈することを示唆
したが、この立体配置が生理学的条件下でカルボキシ末
端について広がっているかどうかという幾分かの疑問が
あることに特に言及している。そのような二次構造は、
脂質相互作用、レセプター相互作用、および／または構
造安定性にとって重要であり得る。

【００１８】骨粗鬆症に苦しむものを含めた哺乳動物被
験体における骨重量の回復に関して改善された治療的特
性を有するＰＴＨのアナログおよびＰＴＨｒＰのアナロ
グは、既に国際特許出願公開第ＷＯ９４／０１４６０号
において開示されている。

【００１９】

【発明が解決しようとする課題】したがって、骨粗鬆症
に苦しむものを含めた哺乳動物被験体における骨重量の
回復に関して改善された治療的特性を有するＰＴＨのア
ナログおよびＰＴＨｒＰのアナログを提供することが本
発明の課題である。

【００２０】

【課題を解決するための手段】副甲状腺ホルモン（ＰＴ
Ｈ）もしくは副甲状腺ホルモン関連ペプチド（ＰＴＨｒ
Ｐ）の合成ポリペプチドアナログまたはその塩の改良さ
れた合成方法であって、ここで、配列番号８５、８６、
２６、２７、２８、２９、および３０から選択されるア
ミノ酸残基（２２−３１）が両親媒性α−ヘリックスを
形成し、ａ）該ポリペプチドの前駆体ペプチドフラグメ
ントを、液相もしくは固相技術により独立して合成する
工程；ｂ）該フラグメントを相互に縮合させて所望のポ
リペプチド産物を形成させる工程；およびｃ）アミノ酸
保護基を除く工程、を包含する方法を提供することが本
発明の目的である。

【００２１】１つの実施態様において、この発明は、
ａ）樹脂支持体上で上記ポリペプチドの前駆体ペプチド
フラグメントを独立して合成する工程；ｂ）そのポリペ
プチドのフラグメントをそれらの各々の樹脂支持体から
解離させる工程；ｃ）そのフラグメントを連続的に縮合
させて所望のポリペプチド産物を形成する工程；および
ｄ）アミノ酸保護基を除去する工程、を包含するそのよ
うな改良された方法を提供する。

【００２２】好ましい実施態様においては、ポリペプチ
ドのＣ−末端以外のすべてのフラグメントをそれらのそ
れぞれの樹脂支持体から解離させ、ｃ）そのフラグメン
トを樹脂結合Ｃ−末端フラグメントと連続的に縮合させ
て所望のポリペプチド産物を形成させ；ｄ）アミノ酸保
護基を除き、そしてポリペプチド産物を樹脂支持体から
解離させる。

【００２３】より具体的には、ａ）固体樹脂支持体上で
所望のポリペプチドの前駆体ペプチドフラグメントを独
立して合成する工程；ｂ）該所望のポリペプチドの意図
した最後のＣ−末端以外のすべての前駆体ペプチドフラ
グメントをそれらの各々の樹脂支持体から解離させる工
程；ｃ）該解離させた前駆体ペプチドフラグメントを樹
脂結合Ｃ−末端ペプチドフラグメントと連続的に縮合さ
せて所望のポリペプチド産物を形成する工程；ｄ）該側
鎖保護基を除去する工程；およびｅ）該ポリペプチド産
物を該樹脂支持体から解離させる工程、を包含する。

【００２４】好ましい実施態様においては、これらの方
法は３つの前駆体ペプチドフラグメント：Ｎ−末端フラ
グメント、中間部フラグメント、およびＣ−末端フラグ
メントを用いて実施される。より好ましい実施態様にお
いては、これらのフラグメントは、所望の最終ポリペプ
チドの配列と一致する場合、グルタミン酸、グリシン、
もしくはロイシン残基をそのＣ−末端に有する。最も好
ましい実施態様においては、このポリペプチド産物は、
３つの前駆体ペプチドフラグメント、Ｎ−末端、中間
部、およびＣ−末端から調製され、ここで、Ｎ−末端フ
ラグメントはそのＣ−末端としてGly を有し、中間部フ
ラグメントはそのＣ−末端としてLeu を有し、そしてＣ
−末端フラグメントはそのそのＮ−末端としてLeu を有
する。別の実施態様においては、中間部ペプチドフラグ
メントはＣ−末端Glu を有し、そしてＣ−末端フラグメ
ントはＮ−末端Leu を有する。

【００２５】好ましい実施態様においては、本発明の方
法は、上記最終ポリペプチド産物は、下式：Xaa¹ Xaa²
Xaa³ Xaa⁴ Xaa⁵ Xaa⁶ Xaa⁷ Leu His Asp Xaa¹¹ Gly Xaa
¹³ Ser Ile Gln Asp Leu Xaa¹⁹ Xaa²⁰ Xaa²¹ Xaa^22-31
Xaa³² Xaa³³ Xaa³⁴ Xaa³⁵ Xaa³⁶ Xaa³⁷ Xaa³⁸ Term、こ
こで：Xaa¹は存在しないか、またはAla であり；Xaa²は
存在しないか、またはVal であり；Xaa³は存在しない
か、またはSer であり；Xaa⁴は存在しないか、またはGl
u もしくはGlu(OCH₃) であり；Xaa⁵は存在しないか、ま
たはHis もしくはAla であり；Xaa⁶は存在しないか、ま
たはGln であり；Xaa⁷は存在しないか、またはLeu であ
り；Xaa¹¹ はLys 、Arg 、またはLeu であり；Xaa¹³ は
Lys 、Arg 、Tyr 、Cys 、Leu 、Cys(CH₂CONH(CH₂)₂NH
(ビオチニル))、Lys(７−ジメチルアミノ−２−オキソ
−２Ｈ−１−ベンゾピラン−４−アセチル）、またはLy
s(ジヒドロシンナモイル）であり；Xaa²⁰ はArg または
Leu であり；Xaa¹⁹ およびXaa²¹ は独立してLys 、Ala
、またはArg であり；Xaa^22-31は配列番号８５、８
６、２６、２７、２８、２９、または３０から選択さ
れ；Xaa³² はHis 、Pro 、またはLys であり；Xaa³³ は
存在しないか、またはPro 、Thr 、Glu 、もしくはAla
であり；Xaa³⁴ は存在しないか、またはPro 、Arg 、Me
t 、Ala 、hSer、hSerlactone 、Tyr 、もしくはLeu で
あり；Xaa³⁵ は存在しないか、またはPro 、Glu 、Ser
、Ala 、もしくはGly であり；Xaa³⁶ は存在しない
か、またはAla 、Arg 、もしくはIle であり；Xaa³⁷ は
存在しないか、またはArg 、Trp 、もしくは３−（２−
ナフチル）−Ｌ−アラニンであり；Xaa³⁸ は存在しない
か、またはAla もしくはhSerであるか、あるいはXaa
^38-42はThr Arg Ser Ala Trp であり；およびTermはＯ
ＲまたはＮＲ₂ であって、各Ｒは独立してＨ、（Ｃ₁ −
Ｃ₄)アルキルもしくはフェニル（Ｃ₁ −Ｃ₄)アルキルで
ある；のＰＴＨもしくはＰＴＨｒＰアナログ、ならびに
それらの薬学的に受容可能な塩を含む。

【００２６】好ましい実施態様においては、本発明の方
法は、上記ＰＴＨもしくはＰＴＨｒＰのポリペプチドア
ナログが、下式：Xaa¹ Val Ser Glu Ile Gln Xaa⁷ Xaa⁸
His Asn Xaa¹¹ Gly Lys His Leu Xaa¹⁶ Ser Xaa¹⁸ Xaa
¹⁹ Arg Xaa²¹ Xaa^22-31 His Asn Xaa³⁴ Term、ここで：
Xaa¹はSer またはAla であり；Xaa⁷はLeu またはPhe で
あり；Xaa⁸はLeu 、met 、またはNle であり；Xaa¹¹ は
Leu またはLys であり；Xaa¹⁶ はAsn またはSer であ
り；Xaa¹⁸ はLeu 、Met 、またはNle であり；Xaa¹⁹ は
Glu 、Thr 、またはArg であり；Xaa²¹ はVal 、Ser 、
またはArg であり；Xaa^22-31は配列番号２６、２７、２
８、２９、または３０から選択され；Xaa³⁴ はPhe 、hS
er、またはTyr であり；TermはＯＲまたはＮＲ₂ であ
り、ここでＲはＨまたは（Ｃ₁ −Ｃ₄)アルキルである；
ならびに、それらの薬学的に受容可能な塩を含む。

【００２７】好ましい実施態様においては、本発明の方
法は、上記ＰＴＨもしくはＰＴＨｒＰアナログが、以
下：

【００２８】

【表１】

【００２９】

【表２】

【００３０】

【表３】

【００３１】からなる群から選択される。

【００３２】好ましい実施態様においては、本発明の方
法は、上記ＰＴＨもしくはＰＴＨｒＰアナログが、配列
番号７のポリペプチド：

【００３３】

【表４】

【００３４】である。

【００３５】好ましい実施態様においては、上記第１の
（Ｎ−末端）フラグメントがＡＶＳＥＨＱＬＬＨＤＫＧ
を含み、前記第２の（中間部）フラグメントがＫＳＩＱ
ＤＬＲＲＲＥＬを含み、そして前記第３の（Ｃ−末端）
フラグメントがＬＥＫＬＬＥＫＬＨＴＡを含む。

【００３６】好ましい実施態様においては、前記第３の
（Ｃ−末端）フラグメントが、ＬＥＫＬ、ＬＥＫＬ、お
よびＨＴＡの縮合によって形成される。

【００３７】好ましい実施態様においては、上記第１の
（Ｎ−末端）フラグメントがＡＶＳＥＨＱＬＬＨＤＫＧ
を含み、前記第２の（中間部）フラグメントがＫＳＩＱ
ＤＬＲＲＲＥを含み、そして前記第３の（Ｃ−末端）フ
ラグメントがＬＬＥＫＬＬＥＫＬＨＴＡを含む。

【００３８】好ましい実施態様においては、前記第３の
（Ｃ−末端）フラグメントが、ＬＬＥＫ、ＬＬＥＫ、お
よびＬＨＴＡの縮合によって形成される。

【００３９】さらに、ＰＴＨもしくはＰＴＨｒＰアナロ
グの調製のための上記の方法を行って、得られたＰＴＨ
もしくはＰＴＨｒＰアナログを、１以上の薬学的に受容
可能な添加剤と混合することを特徴とする医薬組成物の
調製方法、特に、骨粗鬆症、特に骨折治癒の処置のため
の医薬組成物の調製のための方法を提供することが本発
明の目的である。

【００４０】

【発明の実施の形態】種々の一般的なヌクレオチドおよ
びアミノ酸に関する１文字および３文字表記は、Pure A
ppl. Chem. 31, 639-645 (1972) and 40, 277-290 (197
4)およびIUPAC-IUB Biochemical Nomenclature Commiss
ion において推奨されたようであり、37 CFR §1.822
(55 FR 18245、１９９０年５月１日) に従う。１文字お
よび３文字表記は以下のとおりである：アミノ酸３文字記号１文字記号アラニン Ala Ａアルギニン Arg Ｒアスパラギン Asn Ｎアスパラギン酸 Asp Ｄアスパラギン＋アスパラギン酸 Asx Ｂシステイン Cys Ｃグルタミン Gln Ｑグルタミン酸 Glu Ｅグルタミン＋グルタミン酸 Glx Ｚグリシン Gly Ｇヒスチジン His Ｈイソロイシン Ile Ｉロイシン Leu Ｌリジン Lys Ｋメチオニン Met Ｍフェニルアラニン Phe Ｆプロリン Pro Ｐセリン Ser Ｓスレオニン Thr Ｔトリプトファン Trp Ｗチロシン Tyr Ｙバリン Val Ｖ他のアミノ酸 Xaa Ｘ表記は、Ｄ−もしくはＤ，Ｌ−の指定がない限り、Ｌ−
アミノ酸を示す。あるアミノ酸は天然のものも非天然の
ものもアキラルであり、例えば、グリシンがそうであ
る。すべてのペプチド配列はＮ−末端を左側にそしてＣ
−末端を右側にして示される。

【００４１】本明細書中で用いられる他のアミノ酸およ
び化合物についてのさらなる表記は： hSer ホモセリン hSerlac ホモセリンラクトン Nle ノルロイシンである。

【００４２】「ＰＴＨもしくはＰＴＨｒｐの生理学的に
活性な短縮されたアナログ」とは、ＰＴＨもしくはＰＴ
Ｈｒｐにみられるアミノ酸の完全な相補物には欠ける
が、同様の生理学的応答を誘導するものを含む配列を有
するポリペプチドをいう。短縮されたＰＴＨもしくはＰ
ＴＨｒｐは、同様の生理学的応答を誘導するためにＰＴ
ＨもしくはＰＴＨｒｐと完全に相同である必要はない。
ＰＴＨ（１−３４）およびＰＴＨｒｐ（１−３４）が好
ましいが、限定的ではなく、これらの群の代表である。

【００４３】「両親媒性α−ヘリックス」とは、特定の
ポリペプチドによって示される二次構造をいい、そこで
は、アミノ酸が、ヘリックスの長軸方向を指向する向か
い合わせの極性および非極性表面を有するα−ヘリック
ス様立体配置をとっている。目的のポリペプチド中のα
−ヘリックス構造の可能性は、"Schiffer-Edmundsonwhe
el"〔M. Schiffer and A. B. Edmundson, Biophys. J.
7, 121 (1967)〕の構造により、適当なピッチの構造に
より、そしてヘリックスが外接しているシリンダーの向
かい合った面上の親水性残基および親油性残基の分離に
注意することによりある程度探索し得る。あるいは、観
察によって立証できる証拠、例えば、円二色性データも
しくはＸ線回折データが利用可能であり得、それらは所
定のポリペプチドにおけるα−ヘリックス様領域の存在
を指示する。理想的なα−ヘリックスは１回転あたり
３．６アミノ酸残基を有し、隣接した側鎖は１００°の
弧によって分離されている。Eisenberg et al は、Natu
re 299, 371-374 (1982)およびProc. Natl. Acad. Sci.
USA 81, 140-144 (1984) において、疎水性スケールを
ヘリックスホイールと組み合わせて両親媒性ヘリックス
の概念を定量した。疎水性モーメントの平均は、ヘリッ
クスを構成している成分アミノ酸の疎水性のベクトル合
計として定義された。以下のアミノ酸についての疎水性
は、Eisenberg(1984)により「コンセンサス」スケール
として報告されたものである。

【００４４】

【表５】

【００４５】１回転あたり３．６アミノ酸残基を有する
（もしくは側鎖間が１００°（＝３６０°／３．６）の
弧）理想的なα−ヘリックスの疎水性モーメント、μ
_H 、は、以下から計算し得る：

【００４６】

【数１】

【００４７】式中、Ｈ_N はＮ^thアミノ酸の疎水性値であ
り、周期数δ＝１００°の配列におけるＮアミノ酸から
合計をとる。疎水性モーメントは、＜μ_H ＞を得るため
にμ_HをＮで割ることにより残基あたりの平均疎水性モ
ーメントとして表現され得る。１００°±２０°におけ
る約０．２０以上の＜μ_H ＞の値は、両親媒性ヘリック
ス形成を暗示する。ｈＰＴＨｒｐ（２２−３１）および
ｈＰＴＨ（２２−３１）の１００°での＜μ_H ＞の値
は、それぞれ０．１９および０．３７である。

【００４８】Cornett, et al. は、J. Mol. Biol., 19
5, 659-685 (1987)において、両親媒性の予測物として
の「両親媒性指数 (amphipathic index)」の導入により
両親媒性α−ヘリックスの研究をさらに拡大した。彼等
は、公知のすべてのα−ヘリックスのほぼ半数が両親媒
性であり、主な頻度は１００°ではなくむしろ９７．５
°であり、１回転あたりの残基数は３．６より３．７に
近いと結論付けた。そのような細かい点は科学的には興
味あるところだが、所定の配列を両親媒性と分類するに
は、特に両親媒性α−ヘリックスを形成する配列を最初
から設計しているような場合には、Eisenberg, et al.
の基本的なアプローチで十分である。

【００４９】代わりの両親媒性α−ヘリックスアミノ酸
配列は、天然に生じるポリペプチドの所定のセグメント
の配列との相同性を欠くかもしれないが、類似した二次
構造、すなわち、向かい合わせの極性および非極性表面
を有するα−ヘリックスを生理学的環境において導く。
天然に生じるアミノ酸配列を代わりの配列で置き換える
ことは、変更された親ポリペプチドの生理学的活性、安
定性もしくはその他の特性に有益な影響を及ぼし得る。
そのような配列の設計および選択についての手引きは、
J. L. Krstenansky, et al., FEBS Letters 242, 2, 40
9-413 (1989)およびJ. P. Segrest, et al., Proteins:
Structure, Function, and Genetics 8, 103-117 (199
0)等に提供されている。

【００５０】ある配列が、この発明の配列であるために
十分に両親媒性であるかを決定する簡便な方法は、上で
定義した平均疎水性モーメントを計算することである。
１００°±２０°における残基あたりのピーク平均モー
メントが約０．２０を越えているなら、その時にはその
配列は両親媒性ヘリックスを形成し、この発明の配列で
ある。

【００５１】例えば、（配列番号２６）、Xaa=Glu につ
いての１００°での残基あたりの平均疎水性モーメント
は以下のように計算される：

【００５２】

【表６】

【００５３】この配列では、平均ピーク疎水性モーメン
トは、９２°で生じ、その値は０．４８である。

【００５４】一つの局面において、この発明は、ＰＴ
Ｈ、ＰＴＨｒＰ、ならびにＰＴＨおよびＰＴＨｒＰの生
理学的に活性なアナログもしくはそれらの塩の合成方法
を提供する。ここで、アミノ酸残基（２２−３１）は、
両親媒性のα−ヘリックスを形成し、その残基（２２−
３１）の配列は、以下から選択される：ａ）Xaa¹ Xaa² Leu Xaa⁴ Xaa⁵ Leu Xaa⁷ Xaa⁸ Xaa⁹ Xaa
¹⁰、ここで：Xaa¹およびXaa⁴は独立してGlu 、Glu(OC
H₃) 、His 、またはPhe であり；Xaa²はLeu またはPhe
であり；Xaa⁵はLys またはHis であり；Xaa⁷およびXaa
¹⁰ は独立してLeu またはIle であり；Xaa⁸はAla 、Arg
、またはGlu であり；そしてXaa⁹はLys またはGlu
（配列番号８５）であり；好ましくはGlu Leu Leu Glu
Lys Leu Leu Xaa Lys Leu であり、ここでXaa はGlu ま
たはArg （配列番号２６）であり；ｂ）Xaa¹ Xaa² Leu Xaa⁴ Arg Leu Leu Xaa⁸ Arg Leu 、
ここで：Xaa¹およびXaa⁴は独立してGlu 、Glu(OCH₃) 、
His 、またはPhe であり；Xaa²はLeu またはPhe であ
り；Xaa⁸はGlu またはLys （配列番号８６）であり；好
ましくはGlu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu で
あり、ここでXaa はGlu またはLys （配列番号２７）で
ある；ｃ）Ala Leu Ala Glu Ala Leu Ala Glu Ala Leu （配列
番号２８）ｄ）Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu （配列
番号２９）ｅ）Ala Phe Tyr Asp Lys Val Ala Glu Lys Leu （配列
番号３０）。

【００５５】別の局面において、この発明は、下式：Xa
a¹ Xaa² Xaa³ Xaa⁴ Xaa⁵ Xaa⁶ Xaa⁷ Leu His Asp Xaa¹¹
Gly Xaa¹³ Ser Ile Gln Asp Leu Xaa¹⁹ Xaa²⁰ Xaa²¹ X
aa^22-31 Xaa³² Xaa³³ Xaa³⁴ Xaa³⁵ Xaa³⁶ Xaa³⁷ Xaa³⁸
Term、ここで：Xaa¹は存在しないか、またはAla であ
り；Xaa²は存在しないか、またはVal であり；Xaa³は存
在しないか、またはSer であり；Xaa⁴は存在しないか、
またはGlu もしくはGlu(OCH₃) であり；Xaa⁵は存在しな
いか、またはHis もしくはAla であり；Xaa⁶は存在しな
いか、またはGln であり；Xaa⁷は存在しないか、または
Leu であり；Xaa¹¹ はLys 、Arg 、またはLeu であり；
Xaa¹³ はLys 、Arg 、Tyr 、Cys 、Leu 、Cys(CH₂CONH
(CH₂)₂NH(ビオチニル))、Lys(７−ジメチルアミノ−２
−オキソ−２Ｈ−１−ベンゾピラン−４−アセチル）、
またはLys(ジヒドロシンナモイル）であり；Xaa²⁰ はAr
g またはLeu であり；Xaa¹⁹ およびXaa²¹ は独立してLy
s 、Ala 、またはArg であり；Xaa^22-31は配列番号２
６、２７、２８、２９、または３０から選択され；Xaa
³² はHis 、Pro またはLys であり；Xaa³³ は存在しな
いか、またはPro 、Thr 、Glu 、もしくはAla であり；
Xaa³⁴ は存在しないか、またはPro 、Arg 、Met 、Ala
、hSer、hSerlactone 、Tyr 、もしくはLeu であり；X
aa³⁵ は存在しないか、またはPro 、Glu 、Ser 、Ala
、もしくはGly であり；Xaa³⁶ は存在しないか、また
はAla 、Arg 、もしくはIle であり；Xaa³⁷ は存在しな
いか、またはArg 、Trp 、もしくは３−（２−ナフチ
ル）−Ｌ−アラニンであり；Xaa³⁸ は存在しないか、ま
たはAla もしくはhSerであるか、あるいはXaa^38-42はTh
r Arg Ser Ala Trp であり；およびTermはＯＲまたはＮ
Ｒ₂ であって、各Ｒは独立してＨ、（Ｃ₁ −Ｃ₄)アルキ
ルもしくはフェニル（Ｃ₁ −Ｃ₄)アルキルである；なら
びに、それらの薬学的に受容可能な塩、のＰＴＨ、ＰＴ
ＨｒＰ、ならびにＰＴＨおよびＰＴＨｒＰの生理学的に
活性なアナログもしくはそれらの塩の合成方法を提供す
る。

【００５６】さらに別の局面において、この発明は、下
式（Ｉ）：Ala Val Ser Glu Xaa⁵ Gln Leu Leu His Asp
Xaa¹¹ Gly Xaa¹³ Ser Ile Gln AspLeu Xaa¹⁹ Arg Xaa
²¹ Xaa^22-31 Xaa³² Xaa³³ Xaa³⁴ Term、ここで：Xaa⁵
はHis またはAla であり；Xaa¹¹ およびXaa¹³ は独立し
てLys 、Arg 、またはLeu であり；Xaa¹⁹ およびXaa²¹
は独立してAla またはArg であり；Xaa^22-31は以下の
ａ）〜ｅ）から選択され：ａ）Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys Leu 、ここ
でXaa はGlu またはArg （配列番号２６）であり；ｂ）Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu 、ここ
でXaa はGlu またはLys （配列番号２７）であり；ｃ）Ala Leu Ala Glu Ala Leu Ala Glu Ala Leu （配列
番号２８）；ｄ）Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu （配列
番号２９）；ｅ）Ala Phe Tyr Asp Lys Val Ala Glu Lys Leu （配列
番号３０）；Xaa³² はHis またはLys であり；Xaa³³ は
Thr 、Glu 、またはAla であり；Xaa³⁴ はAla 、hSer、
Tyr 、またはLeu であり；およびTermはGly Arg Arg 、
lactone 、ＯＨまたはＮＲ₂ であり、ここで各ＲはＨま
たは（Ｃ₁ −Ｃ₄)アルキルであり；ならびに、それらの
薬学的に受容可能な塩（式（Ｉ））、に示す、生理学的
に活性な短縮されたホモログｈＰＴＨｒｐ（１−３４）
のポリペプチドアナログの合成方法を含む。

【００５７】本発明のより特定の局面は、式（Ｉ）のポ
リペプチドの合成を包含し、ここで、Xaa^22-31は（配列
番号２６）であり、それについての１００°での＜μ_H
＞は０．４５を越えている。本発明のさらに特定の局面
は、Xaa^22-31が（配列番号２６）であり、Xaa¹¹ および
Xaa¹³ がどちらもLys であり；そしてXaa¹⁹ およびXaa
²¹ がどちらもArg である、式（Ｉ）のポリペプチドを
包含する。本明細書中で開示される方法によって調製さ
れる代表的なポリペプチドは、以下を含むがそれらに限
定されない： Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Arg Lys Leu His Thr Ala OH（配列番号５）； Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala OH（配列番号６）； Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala NH₂ （配列番号７）； Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Thr hSer NH₂ （配列番号８）； Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Thr hSerlac （配列番号９）； Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala Gly Arg Arg OH（配列番号１０）；および Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu Lys Glu Leu NH₂ （配列番号１１）。

【００５８】この発明の別の局面は、Xaa^22-31が（配列
番号２６）であり、Xaa¹¹ およびXaa¹³ がどちらもLys
であり；そしてXaa¹⁹ およびXaa²¹ のうちの一方がArg
であり他方がAla である式（Ｉ）のポリペプチドの合成
を包含する。本明細書中で開示される方法によって調製
され得るこの亜種 (subgenus) の代表的なポリペプチド
は、以下を含むがそれらに限定されない： Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Ala Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala NH₂ （配列番号１２）および Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Ala Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala NH₂ （配列番号１３）。

【００５９】別の局面において、この発明は、Xaa^22-31
が（配列番号２６）であり；Xaa¹¹およびXaa¹³ のうち
一方がLeu であって他方がLys であり；そしてXaa¹⁹ お
よびXaa²¹ がいずれもArg である式（Ｉ）のポリペプチ
ドの合成を包含する。本発明の方法によって調製され得
るこの亜種の代表的なポリペプチドは、以下を含むがそ
れに限定されない： Ala Val Ser Glu Ala Gln Leu Leu His Asp Leu Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Ala Leu OH（配列番号１４）。

【００６０】別の局面において、この発明は、式（Ｉ）
のポリペプチドの合成を包含し、ここで、Xaa^22-31は
（配列番号２７）であり、それについての１００°での
＜μ_H＞は０．５０を越えている。この発明のさらなる
局面は、Xaa^22-31が（配列番号２７）であり、Xaa¹¹ お
よびXaa¹³ がどちらもLys もしくはどちらもArg であ
り；そしてXaa¹⁹ およびXaa²¹ がどちらもArg である、
式（Ｉ）のポリペプチドの合成を包含する。この発明の
方法によって調製され得るこの亜種の代表的なポリペプ
チドは、以下を含むがそれらに限定されない： Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg Leu His Thr Ala OH（配列番号１５）； Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg Leu His Thr Ala OH（配列番号１６）； Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Lys Arg Leu His Thr Ala OH（配列番号１７）；

【００６１】別の局面において、この発明は、式（Ｉ）
のポリペプチドの合成を包含し、ここで、Xaa^22-31は
（配列番号２８）であり、それについての１００°での
＜μ_H＞は約０．２５である。この発明の方法によって
調製され得るこの亜種の代表的なポリペプチドは、以下
を含むがそれに限定されない： Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Ala Leu Ala Glu Ala Leu Ala Glu Ala Leu His Thr Ala NH₂ （配列番号２０）。

【００６２】別の局面において、この発明は、式（Ｉ）
のポリペプチドの合成を包含し、ここで、Xaa^22-31は
（配列番号２９）であり、それについての１００°での
＜μ_H＞は約０．２８である。この発明の方法によって
調製され得るこの亜種の代表的なポリペプチドは、以下
を含むがそれらに限定されない： Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu His Thr Ala NH₂ （配列番号２１）。

【００６３】別の局面において、この発明は、式（Ｉ）
のポリペプチドの合成を包含し、ここで、Xaa^22-31は
（配列番号３０）であり、それについての１００°での
＜μ_H＞は約０．２９である。この発明の方法によって
調製され得るこの亜種の代表的なポリペプチドは、以下
を含むがそれらに限定されない： Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Ala Phe Tyr Asp Lys Val Ala Glu Lys Leu His Thr Ala NH₂ （配列番号２２）。

【００６４】この発明のさらに別の局面は、以下の式
（II）：Xaa¹ Val Ser Glu Ile Gln Xaa⁷ Xaa⁸ His Asn
Leu Gly Lys His Leu Xaa¹⁶ SerXaa¹⁸ Xaa¹⁹ Arg Xaa
²¹ Xaa^22-31 His Asn Xaa³⁴ Term、ここで：Xaa¹はSer
またはAla であり；Xaa⁷はLeu またはPhe であり；Xaa⁸
はmet またはNle であり；Xaa¹⁶ はAsn またはSer であ
り；Xaa¹⁸ はLeu 、Met またはNle であり；Xaa¹⁹ はGl
u またはArg であり；Xaa²¹ はVal またはArg であり；
Xaa^22-31は配列番号２６、２７、２８、２９、および３
０から選択され；Xaa³⁴ はPhe またはTyr であり；Term
はＯＨまたはＮＲ₂ であり、ここで各ＲはＨまたは（Ｃ
₁ −Ｃ₄)アルキルであり；ならびに薬学的に受容可能な
それらの塩、に示すｂＰＴＨ（１−３４）の生理学的に
活性なホモログのポリペプチドアナログの合成を包含す
る。

【００６５】この発明の方法によって合成され得る代表
的なポリペプチドは、以下を含むがそれらに限定されな
い： Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Nle His Asn Leu Gly Lys His Leu Ser Ser Nle Glu Arg Val Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Asn Tyr NH₂ （配列番号２３）および Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Nle His Asn Leu Gly Lys His Leu Ser Ser Nle Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Asn Tyr NH₂ （配列番号２４）。

【００６６】この発明のさらに別の局面において、３４
個未満のアミノ酸を有するＰＴＨおよびＰＴＨｒＰのア
ナログの合成方法が提供される。これらの化合物は以下
の一般式で表される： Ala Val Ser Glu Xaa⁵ Gln Leu Leu His Asp Xaa¹¹ Gly Xaa¹³ Ser Ile Gln Asp Leu Xaa¹⁹ Arg Xaa²¹ Xaa^22-31 Xaa³² Xaa³³ Xaa³⁴ Term、

【００６７】この発明の方法によって調製され得る代表
的なポリペプチドは、以下を含むがそれらに限定されな
い：化合物４１：AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHP-NH₂ Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 1 5 10 15 Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 20 25 30 Leu His Pro NH₂ （配列番号５５）。化合物４２：AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LP-NH₂ Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile 1 5 10 15 Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys 20 25 30 Leu Pro NH₂ （配列番号５６）。

【００６８】当業者は、ポリペプチドアナログの多くの
置換物 (permutation)が合成され、それらは、１００°
±２０°での残基あたりの平均疎水性モーメントが約
０．２０より大きいアミノ酸配列が（２２−３１）位に
挿入される限り、本明細書中に記載されたものの所望の
特性を有するということを理解するであろう。

【００６９】本発明のポリペプチドフラグメントは、以
下に記載されたような方法により合成されてもよい：固
相合成に関しては、G. Barany, R. B. Merrifield, The
Peptides, E. Gross and J. Meienhofer eds., Academ
ic Press, New York (1979),Vol.2, pp.1-284; J. M. S
tewart and J. D. Young, Solid Phase Peptide Synthe
sis, 2nd ed., Pierce Chemical Co., Rockford, Illin
ois (1984) およびJ.Meienhofer, Hormonal Proteins a
nd Peptides, Vol.2, Academic Press, NewYork, (197
3)、および液相合成に関しては、E. Schroder and K. L
ubke, The Peptides, Vol.1, Academic Press, New Yor
k, (1965) 。一般に、これらの方法は、保護アミノ酸の
伸長しつつあるペプチド鎖への連続的な添加を含む。通
常、最初のアミノ酸のアミノ基もしくはカルボキシル基
のいずれかと任意の反応性側鎖基が保護される。次い
で、この保護アミノ酸を、不活性な固体支持体に付着さ
せるか、もしくは液体で用いて、配列中の次のアミノ酸
であって、やはり適切に保護されているものを、アミド
結合の形成に反応し得る条件下で添加する。すべての所
望のアミノ酸が適切な配列に連結されたのち、保護基お
よび任意の固体支持体は取り除かれて、粗ポリペプチド
が産生される。このポリペプチドを、好ましくはクロマ
トグラフィーにより、脱塩および精製し、最終産物を得
る。

【００７０】この発明の実施においては、前駆体ペプチ
ドフラグメントを液相技術もしくは固相技術のいずれか
あるいはそれらの任意の組合せにより調製することがで
きる。例えば、いくつかのフラグメントを溶液中で調製
し、次いで、樹脂結合Ｃ−末端フラグメントと縮合させ
るか、あるいは各フラグメントを固相技術によって調製
し、樹脂から解離させ、溶液中で縮合させてもよいし、
あるいは液相および固相合成を混合したプロトコールを
用いてもよい。

【００７１】約４０アミノ酸未満を有するこの発明のＰ
ＴＨおよびＰＴＨｒＰアナログを調製する好ましい方法
は、固相フラグメント縮合ペプチド合成を包含する。こ
の方法では、最終生成物は、いくつかのペプチド前駆体
フラグメントの縮合の結果得られる。当業者の好みによ
りいかなるフラグメントの組合せを用いてもよい。例え
ば、３４アミノ酸産物は、２つの１７アミノ酸ペプチド
前駆体フラグメントから調製してもよいし、異なる長さ
の、３つのペプチド前駆体フラグメント、４つの前駆体
フラグメントなどから調製してもよい。実際の考察につ
いては、Tetrahedron, 49, 11065-11133 (1993) におけ
るP. LLoyd-Williams et al., "Convergent Solid Phas
e Peptie Synthesis" を参照されたい。

【００７２】一般に、α−アミノ（Ｎα）官能基および
任意の反応性側鎖は、酸感受性基もしくは塩基感受性基
によって保護される。保護基はペプチド結合形成の条件
に対して安定であるべきであり、一方、伸長したポリペ
プチド鎖に影響を及ぼさずに容易に除去され得るべきで
ある。適切なα−アミノ保護基は、ｔ−ブトキシカルボ
ニル（Ｂｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂ
ｚ）、ｏ−クロロベンジルオキシカルボニル、ビフェニ
ルイソプロピルオキシカルボニル、ｔ−アミロキシカル
ボニル（Ａｍｏｃ）、イソボルニルオキシカルボニル、
α、α−ジメチル−３，５−ジメトキシベンジルオキシ
カルボニル、ｏ−ニトロフェニルスルフェニル、２−シ
アノ−ｔ−ブトキシカルボニル、好ましくは９−フルオ
レニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）を含むがこれら
に限定されない。適切な側鎖保護基は：アセチル、ベン
ジル（Ｂｚｌ）、ベンジルオキシメチル（Ｂｏｍ）、ｔ
−ブチル、シクロヘキシル、ｏ−ブロモベンジルオキシ
カルボニル、ｔ−ブチルジメチルシリル、２−クロロベ
ンジル（Ｃｌ−ｚ）、２，６−ジクロロベンジル、２，
４−ジニトロフェニル、シクロペンチル、イソプロピ
ル、ピバリル、テトラヒドロピラン−２−イル、トシル
（Ｔｏｓ）、トリメチルシリル、メチルトリチル、メシ
チレンスルホニル（Ｍｔｓ）、４−メトキシ−２，３，
６−トリメチルベンゼンスルホニル（Ｍｔｒ）、２，
２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−
５−スルホニル（Ｐｂｆ）、２，２，５，７，８−ペン
タメチルクロマン−６−スルホニル（Ｐｍｃ）、および
トリチル（Ｔｒｔ）を含むがこれらに限定されない。

【００７３】固相合成では、Ｃ−末端アミノ酸が適切な
樹脂支持体に最初に付着する。適切な樹脂支持体は、ス
テップワイズ縮合の試薬および反応条件ならびに脱保護
反応に対して不活性であり、同時に、用いる溶媒中で不
溶性の物質である。市販の樹脂の例は、反応性の基で修
飾されたスチレン／ジビニルベンゼン樹脂、例えば、塩
化メチル化されたコ−ポリ（スチレン−ジビニルベンゼ
ン）、ヒドロキシメチル化されたコ−ポリ（スチレン−
ジビニルベンゼン）、およびベンジル化され、ヒドロキ
シメチル化されたフェニルアセトアミドメチル（ＰＡ
Ｍ）樹脂を含む。酸末端ペプチドを調製するために、Wa
ng樹脂を用いてもよい。好ましい樹脂は、ｐ−メチルベ
ンズヒドリルアミノ−コ−ポリ（スチレン−ジビニルベ
ンゼン）樹脂（ＭＢＨＡ）である。

【００７４】好ましい実施態様においては、Ｃ−末端フ
ラグメント以外のすべてのフラグメントは酸感受性樹
脂、例えば、Sasrin（２−メトキシ−４−アルコキシベ
ンジルアルコール）もしくは４−ヒドロキシメチル−３
−メトキシフェノキシ酪酸４−メチルベンズヒドリルア
ミン（ＨＭＰＢ−ＭＢＨＡ）上で調製される。ＨＭＰＡ
−ＭＢＨＡ、ＨＭＰＢ−ＢＨＡ、およびＨＭＰＡ−ＢＨ
Ａ樹脂もまた、カルボキシ末端ペプチドにとって適切で
ある。このＣ−末端フラグメントは、Knorr ハンドル−
ＭＢＨＡ樹脂を用いて調製される。Sieberアミド樹脂、
Rinkリンカー−ＭＢＨＡもしくはＢＨＡ樹脂、およびRa
mageリンカー−ＭＢＨＡもしくはＢＨＡ樹脂はすべてア
ミド末端ペプチドにとって適切である。これらの樹脂
は、最初のアミノ酸が既に結合している形で市販されて
おり、あるいは最初のアミノ酸はリンカーに付着させら
れていてもよい。ＨＭＰＢ−ＭＢＨＡおよびKnorr ハン
ドル樹脂はＭＢＨＡ樹脂から以下の実施例１、２および
３に記載されているようにして調製され得る。残りの保
護アミノ酸の連続的なカップリングは、当該分野で周知
の方法により行うことができる。各保護アミノ酸は、好
ましくは約１．５〜２．５モル過剰で導入され、カップ
リングは不活性で、非水性の極性溶媒、例えば、Ｎ−メ
チルピロリジノン（ＮＭＰ）、ジクロロメタン、ジメチ
ルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（Ｄ
ＭＳＯ）、もしくはそれらの混合物中で、好ましくは室
温で行われる。代表的なカップリング剤は、Ｎ，Ｎ′−
ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、Ｎ，Ｎ′
−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）もしくは他
のカルボジイミドであり、単独でもしくは１−ヒドロキ
シベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、Ｏ−アセチル尿
素、ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリス（ピ
ロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
（ＰｙＢｏｐ）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、他の
Ｎ−ヒドロキシイミドもしくはオキシムの存在下であ
る。あるいは、保護アミノ酸活性エステル（例えば、ｐ
−ニトロフェニル、ペンタフルオロフェニルなど）もし
くは対称無水物 (symmetrical anhidride)を用いてもよ
い。Ｆｍｏｃ−保護アミノ酸の連続的なカップリング
は、Ｆｍｏｃ基を取り除くため、２級アミン、例えば、
ピリジンの溶液を用いて行われる。ペプチド樹脂は、各
カップリング工程後にKaiser試験によりカップリングが
完了したことを検査してもよい。

【００７５】固相合成の最後に、完全に保護されたペプ
チドを、側鎖の保護基の成熟前脱保護を誘導しない条件
を用いて樹脂から除く。このペプチドは、鹸化 (saponi
fication) もしくはエステル交換反応または穏やかな酸
性脱保護レジメンにより、例えば、１％トリフルオロ酢
酸（ＴＦＡ）を用いて解離され得る。保護ペプチドはシ
リカゲルクロマトグラフィーにより精製することができ
る。

【００７６】溶液は脱塩し（例えば、BioRadAG-3（登録
商標）陰イオン交換樹脂を用いて）、ペプチドは、以下
のタイプの任意のもしくはすべてを用いる一連のクロマ
トグラフィー工程により精製することができる：誘導体
化されていないコ−ポリ（スチレン−ジビニルベンゼ
ン）、例えば、Amberlite （登録商標）XAD による疎水
性吸着クロマトグラフィー；シリカゲル吸着クロマトグ
ラフィー；カルボキシメチルセルロースによる陽イオン
交換クロマトグラフィー；例えばSephadex（登録商標）
G-25による分配クロマトグラフィー；向流分配；もしく
は逆相高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、特
に、オクチル−もしくはオクタデシルシリルシリカ（Ｏ
ＤＳ）結合相カラムパッキングによる陽イオン交換およ
び逆相ＨＰＬＣ。

【００７７】多重フラグメント合成の１つの実施態様に
おいては、中間部およびＮ−末端フラグメントを単離
し、連続的にＣ−末端フラグメントに縮合させる。ポリ
ペプチド産物は脱保護し、樹脂から解離させ、さらに精
製する。精製順序は一般に、クロマトグラフィー分離の
総合的な連続である。ＨＰＬＣ分析は、精製の順序およ
び選択を決定する。典型的な順序は、陽イオン交換、逆
相ＨＰＬＣ、そして逆相濃縮カラムである。最終溶液を
凍結乾燥させ、薬剤生成物を琥珀色ビンに保存する。保
護アミノ酸は、Genzyme (Cambridge, MA, USA)、Propep
tide (Princeton,NJ, USA) 、またはSynthetec (Alban
y, OR, USA) から入手した。

【００７８】

【実施例】配列番号７のポリペプチドは、３４アミノ酸
ペプチド、ＡＶＳＥＨＱＬＬＨＤＫＧＫＳＩＱＤＬＲＲ
ＲＥＬＬＥＫＬＬＥＫＬＨＴＡ−ＮＨ₂ であり、３つの
フラグメントを縮合させる手法を用いて調製した。Ｎ−
末端フラグメントは、アミノ酸１〜１２、中間部フラグ
メントは、アミノ酸１３〜２３、そしてＣ−末端フラグ
メントは、アミノ酸２４〜３４からなっていた。各フラ
グメントを、Vega 296 Automated Peptide Synthesizer
で固相法により調製した。Ｎα−保護基の解離とカップ
リング後の洗浄には自動化されたモードを用いた。カッ
プリング試薬および溶媒を、カップリング工程中に反応
容器に手で加えた。中間部およびＮ−末端フラグメント
をＨＰＬＣにより精製し、連続的にＣ−末端フラグメン
トに縮合させた。最終ポリペプチドを脱保護し、樹脂か
ら解離させ、そして精製した。

【００７９】実施例１．Ｎ−末端フラグメントの調製アミノ酸１−１２、ＡＶＳＥＨＱＬＬＨＤＫＧからなる
Ｎ−末端フラグメントを、酸感受性樹脂、４−ヒドロキ
シメチル−３−メトキシフェノキシ酪酸４−メチルベ
ンズヒドリルアミン（ＨＭＰＢ−ＭＢＨＡ）上で２５０
ミリモルの規模にて調製した。この樹脂を、ＭＢＨＡ樹
脂 (Novabiochem)から以下のとおりに調製した：

【００８０】

【表７】

【００８１】少なくとも１回のＤＭＦ／ＣＨ₂ Ｃｌ₂ の
洗浄後、第１のアミノ酸（¹²Ｇｌｙ）のカップリング
を、下記のプロトコールを使用し、ＤＭＦ／ＣＨ₂ Ｃｌ
₂(１／１）中でＦｍｏｃ−ＧｌｙＯＨ（１．５〜２．２
当量）、ＤＩＣ（１．５〜２．２当量）およびＤＭＡＰ
（０．０５当量）を用い、室温にて約１５時間行った：

【００８２】

【表８】

【００８３】次いでこの樹脂を、工程３〜８を反復する
ことにより洗浄し、下記のプロトコールを用いてキャッ
ピングした：

【００８４】

【表９】

【００８５】残るアミノ酸を、下記の保護アミノ酸を使
用し、逆の順序で引き続くカップリングサイクルにて樹
脂に結合させた：ａａ１１Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎε−ｔ−ブチルオキシカ
ルボニル−Ｌ−リジンａａ１０Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｌ−アスパラギン酸−β−
ｔ−ブチルエステルａａ９Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎ^im−トリチル−Ｌ−ヒス
チジンａａ８Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｌ−ロイシンａａ７Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｌ−ロイシンａａ６Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎ^g −トリチル−Ｌ−グル
タミンａａ５Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎ^im−トリチル−Ｌ−ヒス
チジンａａ４Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｌ−グルタミン酸−γ−ｔ
−ブチルエステルａａ３Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｏ−ｔ−ブチル−Ｌ−セリ
ンａａ２Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｌ−バリンａａ１Ｎα−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｌ−ア
ラニン

【００８６】カップリングはＮＭＰ中において１．５〜
２．２当量のアミノ酸（０．１〜０．２５M ）、ＨＯＢ
ｔおよびＤＩＣを使用して室温にて行った。１．５〜３
時間後、ＤＭＳＯを添加し、１．５〜３時間、カップリ
ングを継続した。各カップリングは次の工程を含んでい
た：

【００８７】

【表１０】

【００８８】カップリングの完全性を、Kaiser試験によ
り確認し；試験が正である場合には、場合によりＰｙＢ
ＯＰをカップリング試薬として使用して工程８〜１４を
反復した。

【００８９】保護ペプチドを樹脂から解離させるため
に、この樹脂の懸濁物をＣＨ₂ Ｃｌ₂中１％ＴＦＡ中で
（４mL/gm レジン）０℃または室温にて最長１５分間撹
拌した。この溶液を濾過し、５％ＮａＨＣＯ₃ にて抽出
した。樹脂のＴＦＡ処理を３回反復した。有機部分を合
わせ、水、５％ＮａＨＳＯ₄ 、および再度水にて洗浄し
た。有機相を硫酸ナトリウムにて乾燥させ、蒸発させ
た。残渣を下記のとおりにＨＰＬＣにて精製した：カラム：Zorbax Pro-10/150 Ｃ８，６″×４０cm カラム温度：室温流速：２. ２〜３．０mL／分cm² 検出器波長：２５０nm 移動相：トリエチルアミン、ＣＨ₃ ＣＮを含む０. １％
ＨＯＡｃ、pH６〜６. ２。

【００９０】保護ペプチドを、６５〜７０％ＣＨ₃ ＣＮ
中でカラムに負荷した。勾配を、ＣＨ₃ ＣＮの割合が８
５％まで増加するように操作した。画分を合わせ、濃縮
し、生成物をＣＨ₂ Ｃｌ₂ 抽出により単離した。有機相
を、重炭酸ナトリウムの希釈溶液または水にて洗浄し、
硫酸ナトリウムにて乾燥させ、濾過し、そして蒸発させ
た。

【００９１】実施例２．中間部フラグメントの調製アミノ酸１３−２３、ＫＳＩＱＤＬＲＲＲＥＬからなる
中間部フラグメントを、酸感受性樹脂、４−ヒドロキシ
メチル−３−メトキシフェノキシ酪酸４−メチルベン
ズヒドリルアミン（ＨＭＰＢ−ＭＢＨＡ）上で２３０ミ
リモルの規模にて調製した。この樹脂を、ＭＢＨＡ樹脂
から上の実施例１に記述されるように調製した。第１の
アミノ酸（ａａ２４）を、Ｆｍｏｃ−Ｌ−ロイシンを使
用して、示したようにして取り込んだ。残るアミノ酸
を、実施例１の手法を使用し、引き続くカップリングサ
イクルにて樹脂に結合させた：ａａ２３Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｌ−グルタミン酸−γ−ｔ
−ブチルエステルａａ２２Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎ^g −４−メトキシ−２，
３，６−トリメチルベンジルスルホニル−Ｌ−アルギニ
ンａａ２１Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎ^g −４−メトキシ−２，
３，６−トリメチルベンジルスルホニル−Ｌ−アルギニ
ンａａ２０Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎ^g −４−メトキシ−２，
３，６−トリメチルベンジルスルホニル−Ｌ−アルギニ
ンａａ１９Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｌ−ロイシンａａ１８Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｌ−アスパラギン酸−β−
ｔ−ブチルエステルａａ１７Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎ^g −トリチル−Ｌ−グル
タミンａａ１６Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｌ−イソロイシンａａ１５Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｏ−ｔ−ブチル−Ｌ−セリ
ンａａ１４Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎε−ｔ−ブチルオキシカ
ルボニル−Ｌ−リジン

【００９２】実施例１に教示したようにしてペプチドを
遊離酸として樹脂から解離させ、有機部分を抽出し、乾
燥させ、そして蒸発させた。残渣をジクロロメタン中に
溶解し、ｔ−ブチルメチルエーテル（ｔ−ＢｕＯＭｅ）
に添加することによって沈殿させてもよい。濾過後、ｔ
−ＢｕＯＭｅにて洗浄し、真空乾燥させた後に、生成物
を前述のZorbaxカラム上で、７５％ＣＨ₃ ＣＮを用いて
イソクラティックに検出器波長２６７nmにてＨＰＬＣに
より精製した。

【００９３】実施例３．Ｃ−末端フラグメントの調製アミノ酸２４−３４、ＬＥＫＬＬＥＫＬＨＴＡからなる
Ｃ−末端フラグメントを、Ｆｍｏｃ−２，４−ジメトキ
シ−４′−（カルボキシメトキシ）−ベンズヒドリルア
ミン・リンカーを使用し、ＭＢＨＡ樹脂上で１３０ミリ
モル規模にて下記のように調製した：

【００９４】

【表１１】

【００９５】残るアミノ酸を、下記の保護アミノ酸を使
用し、逆の順序で引き続くカップリングサイクルにて樹
脂に結合した：ａａ３４Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｌ−アラニンａａ３３Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｏ−ｔ−ブチル−Ｌ−スレ
オニンａａ３２Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎ^im−トリチル−Ｌ−ヒス
チジンａａ３１Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｌ−ロイシンａａ３０Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎε−ｔ−ブチルオキシカ
ルボニル−Ｌ−リジンａａ２９Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｌ−グルタミン酸−γ−ｔ
−ブチルエステルａａ２８Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｌ−ロイシンａａ２７Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｌ−ロイシンａａ２６Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎε−ｔ−ブチルオキシカ
ルボニル−Ｌ−リジンａａ２５Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｌ−グルタミン酸−γ−ｔ
−ブチルエステルａａ２４Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｌ−ロイシン

【００９６】カップリングはアミノ酸３４から２６まで
について、ＮＭＰ中において１．５〜２．２当量のアミ
ノ酸、ＨＯＢｔおよびＤＩＣを使用して室温にて１．５
〜３時間行われた。アミノ酸２４および２５について
は、３当量のアミノ酸、ＨＯＢｔおよびＤＩＣを使用し
た。１．５〜３時間後、２０％ＤＭＳＯを添加し、１．
５〜３時間、カップリングを継続した。各カップリング
はＦｍｏｃ解離およびカップリング後の洗浄を含み、次
の工程を含んでいた：

【００９７】

【表１２】

【００９８】カップリングの完全性は、各カップリング
工程に後にKaiser試験により確認した。試験が正である
場合（＞１．５％が未カップリング）には、工程８〜１
４を反復し；試験が負の場合には、この樹脂をアセチル
化した。

【００９９】実施例４．３つのフラグメントの縮合上記の実施例１、２および３に記述されるようにして、
３つのフラグメントを調製した。Ｃ−末端フラグメント
の残留するＮα−Ｆｍｏｃ基を、実施例３のプロトコー
ルの最後に記述した工程１〜７を使用して除去した。

【０１００】中間部フラグメントＢ（１７２ｇ、６１．
８ミリモル）、ＨＯＢｔ（５９．２ミリモル）、ＨＯＡ
ｔ（３．７ミリモル）およびＤＩＣ（６１．９ミリモ
ル）を、ＮＭＰ（９００mL）およびＣＨ₂ Ｃｌ₂ 中のＣ
−末端フラグメント樹脂（１９０ｇ、４１ミリモル）に
添加した。この混合物を、室温にて２２時間撹拌した。
ＤＩＰＥＡ（７mL）を添加し、撹拌をさらに１日継続し
た。この樹脂を、実施例１（工程９〜１３）に記述した
ように洗浄した。Kaiser試験は、２％未満の未結合の残
留物を示した。この樹脂をアセチル化し（実施例３、工
程１４〜２０）、Ｆｍｏｃ基を除去した（実施例３、工
程１〜７）。

【０１０１】Ｎａ塩としてのＮ−末端フラグメントＡ
（１５３ｇ、６２．４ミリモル）、ＨＯＢｔ（５９．２
ミリモル）、ＨＯＡｔ（３．７ミリモル）、ＰｙＢＯＰ
（６２．５ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（１２５．１５
ミリモル）を、ＮＭＰ（９００mL）およびＣＨ₂ Ｃｌ₂
中の樹脂に添加した。この混合物を室温にて２４時間撹
拌し、濾過し、洗浄した（実施例３、工程９〜１３）。
Kaiser試験は、１％未満の未結合残留物の存在を示し
た。この樹脂をアセチル化し、反応器から取り出し、減
圧下で乾燥させた。

【０１０２】チオアニソール（１５２．６mL）およびＴ
ＦＡ（１L ）中のフェノール（６０．３ｇ）の溶液を、
Ｎ₂ 下でペプチド−樹脂（６４ｇ）に添加した。この混
合物を、−１０℃に冷却し、ＴＭＳＢｒを徐々に添加し
た。この混合物を閉鎖系内で−１０℃にて０．５時間、
室温にて１〜２時間撹拌した。この混合物を減圧下、５
０℃にて半分の容量まで濃縮し、樹脂を濾過し、ＴＦＡ
（２５０mL）および氷酢酸（２５０mL）で２回洗浄し
た。濾液を、ｔ−ブチルメチルエーテル：ヘキサンの
３：１混合物（６．５L ）に添加することにより沈殿さ
せた。粗ペプチドを濾過し、ｔ−ブチルメチルエーテ
ル、トルエン、およびｔ−ブチルメチルエーテル（各２
×２５０mL）にて洗浄し、メタノール（５００mL）への
溶解およびｔ−ブチルメチルエーテル（７L ）への添加
により沈殿生成させた。この粗精製物を濾過し、ｔ−ブ
チルメチルエーテルにて洗浄し、減圧下で乾燥させて３
３ｇのペプチドを得た。

【０１０３】同様の方法で、酸末端ペプチドのかわりに
適当な樹脂を用いて、以下のＰＴＨｒＰアナログを調製
し得る：

【０１０４】

【表１３】

【０１０５】

【表１４】

【０１０６】

【表１５】

【０１０７】〔Met³⁴ ，Ala³⁵ 〕（配列番号２５）、Ａ
ＶＳＥＨＱＬＬＨＤＫＧＫＳＩＱＤＬＲＲＲＥＬＬＥＫ
ＬＬＥＫＬＨＴＭＡ−ＮＨ₂ （配列番号２５）は、上述
の方法に従って、調製および精製し得る。このポリペプ
チドは、以下のようにホモセリンラクトンに変換され得
る。精製ペプチドを４４％ギ酸に溶解する。この溶液
を、４４％ギ酸中のシアノゲンブロマイド（７００ｍ
ｇ）およびフェノール（１．６mg）の混合溶液と０℃に
て合わせる。この溶液を０℃にて２時間、室温にて２時
間撹拌する。生成物の形成は、ＨＰＬＣ（Vydac(登録商
標) Ｃ−１８、３００オングストローム、４．６×２
５０mm、流速１．２mL／分、１０分間で０．１％ＴＦＡ
中の２５〜４５％アセトニトリルの勾配）により監視し
得る。試料を濃縮し、調製用ＲＰ−ＨＰＬＣ（Vydac(登
録商標）Ｃ−１８、０．１％ＴＦＡ中の２５〜４５％
アセトニトリルの勾配）により精製して配列番号９を得
る。

【０１０８】

【表１６】

【０１０９】同様に、この方法に従って、配列番号７９
が調製され得る。

【０１１０】

【表１７】

【０１１１】ホモセリンアミドを調製するために、粗製
ホモセリンラクトンアナログ、化合物４を濃縮し、メタ
ノール中の飽和ＮＨ₃ 、２５mLにより処理した。この溶
液を０℃にて２時間、室温にて１６時間撹拌した。反応
は、ＨＰＬＣ（Vydac(登録商標）Ｃ−１８、３００オ
ングストローム、４．６×２５０mm、流速１．２mL／
分、０．１％ＴＦＡ中の２５−４５％アセトニトリルの
勾配）により監視し得る。この溶液を濃縮し、調製用Ｒ
Ｐ−ＨＰＬＣ（Vydac(登録商標）Ｃ−１８、０．１％
ＴＦＡ中の２５−４５％アセトニトリルの勾配）により
精製する。ホモセリンアミドペプチドの分画を集め、凍
結乾燥して配列番号８を得る。

【０１１２】

【表１８】

【０１１３】同様に、Ｃ−末端としてメチオニンを使用
し、この方法に従って化合物２２、２３および２８を調
製し得る。

【０１１４】

【表１９】

【０１１５】ホモセリンアルキルアミドは、ホモセリン
ラクトンを対応するアルキルアミンの過剰量を含むＤＭ
Ｆ中に溶解することによりホモセリンラクトンから同様
に調製し得る。室温にて数日撹拌後（反応は分析用ＨＰ
ＬＣにて監視し得る）、この混合物を蒸発乾固し、ペプ
チドを調製用ＨＰＬＣにて精製する。ホモセリンアルキ
ルアミドの代表例は、化合物５５および５６である。

【０１１６】

【表２０】

【０１１７】上記ホモセリンラクトンアナログの水溶液
は、ブタ肝臓エステラーゼ（SigmaChemical Company, S
t. Louis, MO)で処理し得る。ラクトンのＣ−末端ホモ
セリンへの加水分解は、分析用ＨＰＬＣにて監視し得
る。加水分解が完了したものと判断される場合には、こ
の物質は上述のように調製用ＨＰＬＣにて精製され得
る。

【０１１８】

【表２１】

【０１１９】この発明は、３個のフラグメントからの３
４アミノ酸ポリペプチドの合成の開示により例示されて
きたが、異なるフラグメントからの異なる長さの別のＰ
ＴＨおよびＰＴＨｒＰアナログについても同様に適用し
得る。一般的に、グルタミン酸、グリシン、ロイシンお
よびプロリンは、好ましいフラグメントのＣ−末端であ
る。前述の実施例において、フラグメント２および３の
間のロイシン−ロイシンカップリングは、予期せぬ高収
率を与えた。同様にロイシン−ロイシンカップリング
は、フラグメント１−７、８−２３、２４−２７、およ
び２８−３４からの配列番号７のポリペプチドの調製に
より利用され得た。他の実施態様においては、アミノ酸
２４−２７（ＬＥＫＬ）が２８−３１と同じである場
合、溶液または固体相技術のいずれかによって４個のア
ミノ酸のフラグメントを調製し、それ自身を縮合してフ
ラグメント２４−３１を与えることもできる。あるい
は、４アミノ酸フラグメント２３−２６（ＬＬＥＫ）を
調製し、自身で縮合させて２３−３０のフラグメントを
与えることもできる。精製の容易性は、容易に結晶化す
るより小さなフラグメントの使用により促進されるが、
フラグメント数の増加は、より多くのフラグメント縮合
工程を必要とする。

【０１２０】

【配列表】配列番号１配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 1 5 10 15 Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His 20 25 30 Asn Phe

【０１２１】配列番号２配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Ser 1 5 10 15 Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His 20 25 30 Asn Phe

【０１２２】配列番号３配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Ser 1 5 10 15 Ser Leu Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His 20 25 30 Asn Phe

【０１２３】配列番号４配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Phe Phe Leu His His Leu Ile Ala Glu Ile His 20 25 30 Thr Ala

【０１２４】配列番号５配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Arg Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１２５】配列番号６配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１２６】配列番号７配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１２７】配列番号８配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：34 他の情報：Xaa34 = hSer 配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Xaa

【０１２８】配列番号９配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：34 他の情報：Xaa34 = hSerlac 配列ＡｌａＶａｌＳｅｒＧｌｕＨｉｓＧｌｎＬｅｕＬｅｕＨｉｓ
ＡｓｐＬｙｓＧｌｙＬｙｓＳｅｒＩｌｅＧｌｎ１５
１０１５ＡｓｐＬｅｕＡｒｇＡｒｇＡｒｇＧｌｕＬｅｕＬｅｕＧｌｕ
ＬｙｓＬｅｕＬｅｕＧｌｕＬｙｓＬｅｕＨｉｓ２０２５
３０ＴｈｒＸａａ

【０１２９】配列番号１０配列の長さ：３７アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯ配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala Gly Arg Arg 35

【０１３０】配列番号１１配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列ＡｌａＶａｌＳｅｒＧｌｕＨｉｓＧｌｎＬｅｕＬｅｕＨｉｓ
ＡｓｐＬｙｓＧｌｙＬｙｓＳｅｒＩｌｅＧｌｎ１５
１０１５ＡｓｐＬｅｕＡｒｇＡｒｇＡｒｇＧｌｕＬｅｕＬｅｕＧｌｕ
ＬｙｓＬｅｕＬｅｕＧｌｕＬｙｓＬｅｕＬｙｓ２０２５
３０ＧｌｕＬｅｕ

【０１３１】配列番号１２配列の長さ：３４アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Ala Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１３２】配列番号１３配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列ＡｌａＶａｌＳｅｒＧｌｕＨｉｓＧｌｎＬｅｕＬｅｕＨｉｓ
ＡｓｐＬｙｓＧｌｙＬｙｓＳｅｒＩｌｅＧｌｎ１５
１０１５ＡｓｐＬｅｕＡｒｇＡｒｇＡｌａＧｌｕＬｅｕＬｅｕＧｌｕ
ＬｙｓＬｅｕＬｅｕＧｌｕＬｙｓＬｅｕＨｉｓ２０２５
３０ＴｈｒＡｌａ

【０１３３】配列番号１４配列の長さ：３４アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu Ala Gln Leu Leu His Asp Leu Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Ala Leu

【０１３４】配列番号１５配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列ＡｌａＶａｌＳｅｒＧｌｕＨｉｓＧｌｎＬｅｕＬｅｕＨｉｓ
ＡｓｐＬｙｓＧｌｙＬｙｓＳｅｒＩｌｅＧｌｎ１５
１０１５ＡｓｐＬｅｕＡｒｇＡｒｇＡｒｇＧｌｕＬｅｕＬｅｕＧｌｕ
ＡｒｇＬｅｕＬｅｕＧｌｕＡｒｇＬｅｕＨｉｓ２０２５
３０ＴｈｒＡｌａ

【０１３５】配列番号１６配列の長さ：３４アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１３６】配列番号１７配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列ＡｌａＶａｌＳｅｒＧｌｕＨｉｓＧｌｎＬｅｕＬｅｕＨｉｓ
ＡｓｐＡｒｇＧｌｙＡｒｇＳｅｒＩｌｅＧｌｎ１５
１０１５ＡｓｐＬｅｕＡｒｇＡｒｇＡｒｇＧｌｕＬｅｕＬｅｕＧｌｕ
ＡｒｇＬｅｕＬｅｕＬｙｓＡｒｇＬｅｕＨｉｓ２０２５
３０ＴｈｒＡｌａ

【０１３７】配列番号１８配列の長さ：３４アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：29 他の情報：Xaa29 = Lys-(OCCH₂(OCH₂CH₂)₂OCH₃) 配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１３８】配列番号１９配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：２９他の情報：Ｘａａ２９＝Ｌｙｓ−（ＯＣＣＨ_２（Ｏ
ＣＨ_２ＣＨ_２）_１１０ＯＣＨ_３配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１３９】配列番号２０配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Ala Leu Ala Glu Ala Leu Ala Glu Ala Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１４０】配列番号２１配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１４１】配列番号２２配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Ala Phe Tyr Asp Lys Val Ala Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１４２】配列番号２３配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：8 他の情報：Xaa8 = Nle 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：18 他の情報：Xaa18 = Nle 配列 Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Xaa His Asn Leu Gly Lys His Leu Ser 1 5 10 15 Ser Xaa Glu Arg Val Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Asn Tyr

【０１４３】配列番号２４配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：8 他の情報：Xaa8 = Nle 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：18 他の情報：Xaa18 = Nle 配列 Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Xaa His Asn Leu Gly Lys His Leu Ser 1 5 10 15 Ser Xaa Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Asn Tyr

【０１４４】配列番号２５配列の長さ：35 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Met Ala 35

【０１４５】配列番号２６配列の長さ：10 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：中間部配列の特徴特徴を表す記号：Ｍｏｄｉｆｉｅｄ−ｓｉｔｅ存在位置：８他の情報：Xaa8 = GluまたはArg 特徴を表す記号：Region 存在位置：1..10 他の情報：配列番号２６は配列番号５，６，７，８，
９，１０，１１，１２，１３および１４の２２〜３１位
にはめ込まれる配列 Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys Leu 1 5 10

【０１４６】配列番号２７配列の長さ：10 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：中間部配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：8 他の情報：Xaa8 = Glu, Lys またはLys-(OCCH₂PEGX) 特徴を表す記号：Region 存在位置：1..10 他の情報：配列番号２７は配列番号１５，１６，１７，
１８，および１９の２２〜３１位にはめ込まれる配列ＧｌｕＬｅｕＬｅｕＧｌｕＡｒｇＬｅｕＬｅｕＸａａＡｒｇ
Ｌｅｕ１５
１０

【０１４７】配列番号２８配列の長さ：１０アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：中間部配列の特徴特徴を表す記号：ペプチド存在位置：1..10 他の情報：配列番号２８は配列番号２０の２２〜３１位
にはめ込まれる配列 Ala Leu Ala Glu Ala Leu Ala Glu Ala Leu 1 5 10

【０１４８】配列番号２９配列の長さ：10 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：中間部配列の特徴特徴を表す記号：ペプチド存在位置：1..10 他の情報：配列番号２９は配列番号２１の２２〜３１位
にはめ込まれる配列 Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu 1 5 10

【０１４９】配列番号３０配列の長さ：10 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：中間部配列の特徴特徴を表す記号：ペプチド存在位置：1..10 他の情報：配列番号３０は配列番号２２の２２〜３１位
にはめ込まれる配列 Ala Phe Tyr Asp Lys Val Ala Glu Lys Leu 1 5 10

【０１５０】配列番号３１配列の長さ：88 塩基対配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：cDNA ハイポセティカル：ＮＯアンチセンス：ＮＯ配列ＣＣＴＣＴＡＧＡＴＣＴＣＣＧＣＧＧＣＧＣＴＡＧＣＡＴＧＧＣＴＧＴ
ＴＴＣＴＧＡＡＣＡＴＣＡＧＣＴＧＣＴＴＣＡＴＧＡＣＡＡＡ６０ＧＧＴＡＡＡＴＣＧＡＴＴＣＡＡＧＡＴＣＴＧＡＧＡＣＧＴＣ
８８

【０１５１】配列番号３２配列の長さ：９０塩基対配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：cDNA ハイポセティカル：ＮＯアンチセンス：ＹＥＳ配列 CCTCGAAGCT TATGCATCAT TATCTAGACA TAGTATGCAG CTTTTCAAGC AGTTTCTCCA 60 GCAGCTCGCG ACGTCTCAGA TCTTGAATCG 90

【０１５２】配列番号３３配列の長さ：23 塩基対配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：cDNA ハイポセティカル：ＮＯアンチセンス：ＮＯ配列 CCTCTAGATC TCCGCGCGCT AGC 23

【０１５３】配列番号３４配列の長さ：24 塩基対配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：cDNA ハイポセティカル：ＮＯアンチセンス：ＹＥＳ配列 CCTCGAAGCT TATGCATCAT TATC 24

【０１５４】配列番号３５配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Leu His Asn Leu Gly Lys His Leu Ser 1 5 10 15 Ser Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Asn Tyr

【０１５５】配列番号３６配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Ｍｏｄｉｆｉｅｄ−ｓｉｔｅ存在位置：３４他の情報：Xaa = hSer 配列 Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Leu His Asn Leu Gly Lys His Leu Ser 1 5 10 15 Ser Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Asn Xaa

【０１５６】配列番号３７配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：34 他の情報：Xaa = hSer 配列 Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Leu His Asn Lys Gly Lys His Leu Ser 1 5 10 15 Ser Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Asn Xaa

【０１５７】配列番号３８配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Lys Leu Lys Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１５８】配列番号３９配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１５９】配列番号４０配列の長さ：35 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg Leu His 20 25 30 Thr Ala Pro 35

【０１６０】配列番号４１配列の長さ：37 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg Leu His 20 25 30 Thr Ala Gly Arg Arg 35

【０１６１】配列番号４２配列の長さ：38 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：38 他の情報：Xaa = hSer 配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg Leu His 20 25 30 Thr Ala Gly Arg Arg Xaa 35

【０１６２】配列番号４３配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Tyr

【０１６３】配列番号４４配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Tyr Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１６４】配列番号４５配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列ＡｌａＶａｌＳｅｒＧｌｕＨｉｓＧｌｎＬｅｕＬｅｕＨｉｓ
ＡｓｐＬｙｓＧｌｙＣｙｓＳｅｒＩｌｅＧｌｎ１５
１０１５ＡｓｐＬｅｕＡｒｇＡｒｇＡｒｇＧｌｕＬｅｕＬｅｕＧｌｕ
ＬｙｓＬｅｕＬｅｕＧｌｕＬｙｓＬｅｕＨｉｓ２０２５
３０ＴｈｒＡｌａ

【０１６５】配列番号４６配列の長さ：３４アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：13 他の情報：Xaa = Cys(CH₂CONH(CH₂)₂NH(ビオチニル)) 配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Xaa Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１６６】配列番号４７配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：１３他の情報：Ｘａａ＝Ｌｙｓ（７−ジメチルアミノ-2
- オキソ-2H-1-ベンゾピラン-4-アセチル配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Xaa Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１６７】配列番号４８配列の長さ：35 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala Gly 35

【０１６８】配列番号４９配列の長さ：33 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：4 他の情報：Xaa4 = Glu(OCH₃) 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：10 他の情報：Xaa10 = Asp(OCH₃) 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：17 他の情報：Xaa17 = Asp(OCH₃) 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：22 他の情報：Xaa22 = Glu(OCH₃) 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：25 他の情報：Xaa25 = Glu(OCH₃) 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：29 他の情報：Xaa29 = Glu(OCH₃) 配列 Ala Val Ser Xaa His Gln Leu Leu His Xaa Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Xaa Leu Arg Arg Arg Xaa Leu Leu Xaa Lys Leu Leu Xaa Lys Leu His 20 25 30 Ala

【０１６９】配列番号５０配列の長さ：33 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：4 他の情報：Xaa4 = Glu(OCH₃) 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：10 他の情報：Xaa10 = Asp(OCH₃) 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：17 他の情報：Xaa17 = Asp(OCH₃) 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：22 他の情報：Xaa22 = Glu(OCH₃) 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：25 他の情報：Xaa25 = Glu(OCH₃) 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：29 他の情報：Xaa29 = Glu(OCH₃) 配列 Ala Val Ser Xaa His Gln Leu Leu His Xaa Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Xaa Leu Arg Arg Arg Xaa Leu Leu Xaa Lys Leu Leu Xaa Lys Leu His 20 25 30 Ala

【０１７０】配列番号５１配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：34 他の情報：Xaa = hSer 配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Xaa

【０１７１】配列番号５２配列の長さ：35 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala Pro 35

【０１７２】配列番号５３配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Pro

【０１７３】配列番号５４配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Pro

【０１７４】配列番号５５配列の長さ：33 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Pro

【０１７５】配列番号５６配列の長さ：32 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu Pro 20 25 30

【０１７６】配列番号５７配列の長さ：37 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Arg Ser Ala Trp 35

【０１７７】配列番号５８配列の長さ：42 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg Leu His 20 25 30 Thr Ala Gly Arg Arg Thr Arg Ser Ala Trp 35 40

【０１７８】配列番号５９配列の長さ：42 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg Leu His 20 25 30 Thr Arg Gly Arg Arg Thr Arg Ser Ala Trp 35 40

【０１７９】配列番号６０配列の長さ：42 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Ｍｏｄｉｆｉｅｄ−ｓｉｔｅ存在位置：１３他の情報：Xaa13 = Lys(ジヒドロシンナモイル) 配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Xaa Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg Leu His 20 25 30 Thr Arg Gly Arg Arg Thr Arg Ser Ala Trp 35 40

【０１８０】配列番号６１配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：8 他の情報：Leu8 = Nle 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：18 他の情報：Leu18 = Nle 配列 Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Leu His Asn Leu Gly Lys His Leu Ser 1 5 10 15 Ser Leu Thr Arg Ser Ala Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His 20 25 30 Asn Tyr

【０１８１】配列番号６２配列の長さ：35 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Met Ala

【０１８２】配列番号６３配列の長さ：33 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：33 他の情報：Xaa = Thr 1,4- ジアミノブチリルラクタム配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Xaa

【０１８３】配列番号６４配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Phe Phe Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１８４】配列番号６５配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu His Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１８５】配列番号６６配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu His Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１８６】配列番号６７配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Ile Ala Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１８７】配列番号６８配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Glu Ile His 20 25 30 Thr Ala

【０１８８】配列番号６９配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：34 他の情報：Xaa = hSer 配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Xaa

【０１８９】配列番号７０配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：34 他の情報：Xaa = hSer 配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Xaa

【０１９０】配列番号７１配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：両形態配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala

【０１９１】配列番号７２配列の長さ：37 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Arg Ser Ala Trp 35

【０１９２】配列番号７３配列の長さ：36 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：36 他の情報：Xaa = Ala 3-(2-ナフチル)-L-アラニン配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Arg Ser Xaa 35

【０１９３】配列番号７４配列の長さ：37 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列ＡｌａＶａｌＳｅｒＧｌｕＨｉｓＧｌｎＬｅｕＬｅｕＨｉｓ
ＡｓｐＬｙｓＧｌｙＬｙｓＳｅｒＩｌｅＧｌｎ１５
１０１５ＡｓｐＬｅｕＡｒｇＡｒｇＡｒｇＧｌｕＬｅｕＬｅｕＧｌｕ
ＬｙｓＬｅｕＬｅｕＧｌｕＬｙｓＬｅｕＨｉｓ２０２５
３０ＴｈｒＡｌａＳｅｒＡｌａＴｒｐ３５

【０１９４】配列番号７５配列の長さ：３８アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala Glu Ile Arg Ala 35

【０１９５】配列番号７６配列の長さ：37 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala Glu Ile Arg 35

【０１９６】配列番号７７配列の長さ：36 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala Glu Ile 35

【０１９７】配列番号７８配列の長さ：35 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala Glu 35

【０１９８】配列番号７９配列の長さ：34 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：Ｎ−末端配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：8 他の情報：Leu8 = Nle 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：18 他の情報：Leu18 = Nle 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：34 他の情報：Xaa = hSerlac 配列 Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Leu His Asn Lys Gly Lys His Leu Ser 1 5 10 15 Ser Leu Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His 20 25 30 Asn Xaa

【０１９９】配列番号８０配列の長さ：32 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：中間部配列 Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu 1 5 10 15 Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala 20 25 30

【０２００】配列番号８１配列の長さ：28 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：中間部配列 Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu 1 5 10 15 Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala 20 25

【０２０１】配列番号８２配列の長さ：27 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：中間部配列 Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu 1 5 10 15 Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala 20 25

【０２０２】配列番号８３配列の長さ：41 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：中間部配列 Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile Gln Asp Leu 1 5 10 15 Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg Leu His Leu His 20 25 30 Arg Gly Arg Arg Thr Arg Ser Ala Trp 35 40

【０２０３】配列番号８４配列の長さ：35 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：タンパク質ハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：中間部配列 Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu 1 5 10 15 Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg Leu His Ala Gly Arg Arg Thr Arg 20 25 30 Ser Ala Trp 35

【０２０４】配列番号８５配列の長さ：10 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：中間部配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：1 および 4 他の情報：Xaa1およびXaa4 = Glu, Glu(OCH₃), His，ま
たはPhe 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：2 他の情報：Xaa2 = LeuまたはPhe 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：5 他の情報：Xaa5 = LysまたはHis 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：7 および 10 他の情報：Xaa7およびXaa10 = Leu またはIle 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：8 他の情報：Xaa8 = Ala, Arg,またはGlu 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：9 他の情報：Xaa9 = LysまたはGlu 配列 Xaa Xaa Leu Xaa Xaa Leu Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5 10

【０２０５】配列番号８６配列の長さ：10 アミノ酸配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドハイポセティカル：ＮＯフラグメント型：中間部配列の特徴特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：1 および 4 他の情報：Xaa1およびXaa4 = Glu, Glu(OCH₃), His, ま
たはPhe 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：2 他の情報：Xaa2 = LeuまたはPhe 特徴を表す記号：Modified-site 存在位置：8 他の情報：Xaa8 = Glu, Lys またはLys(COCH₂PEGX) 配列ＸａａＸａａＬｅｕＸａａＡｒｇＬｅｕＬｅｕＸａａＡｒｇ
Ｌｅｕ１５
１０

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ｃ０７Ｋ 7/06 Ａ６１Ｋ 37/24 ＡＤＴ 14/635 ＡＥＧ

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）もしくは副
甲状腺ホルモン関連ペプチド（ＰＴＨｒＰ）の合成ポリ
ペプチドアナログまたはその塩の合成方法であって、こ
こで、配列番号８５、８６、２６、２７、２８、２９、
および３０から選択されるアミノ酸残基（２２−３１）
が両親媒性αヘリックスを形成し、ａ）該ポリペプチドの前駆体ペプチドフラグメントを、
液相もしくは固相技術により独立して合成する工程；ｂ）該フラグメントを相互に縮合させて所望のポリペプ
チド産物を形成させる工程；およびｃ）アミノ酸保護基を除去する工程、を包含する方法。
【請求項２】配列ＡＶＳＥＨＱＬＬＨＤＫＧである合
成ペプチド。
【請求項３】配列ＫＳＩＱＤＬＲＲＲＥＬである合成
ペプチド。
【請求項４】配列ＬＥＫＬＬＥＫＬＨＴＡである合成
ペプチド。
【請求項５】配列ＫＳＩＱＤＬＲＲＲＥである合成ペ
プチド。
【請求項６】配列ＬＬＥＫＬＬＥＫＬＨＴＡである合
成ペプチド。
【請求項７】請求項１記載のＰＴＨもしくはＰＴＨｒ
Ｐアナログの調製方法を行って、得られたＰＴＨｒＰア
ナログを１以上の薬学的に受容可能な添加剤と混合する
ことを特徴とする、医薬組成物の調製方法。