JPH11131089A - 油脂の精製方法 - Google Patents
油脂の精製方法Info
- Publication number
- JPH11131089A JPH11131089A JP9357281A JP35728197A JPH11131089A JP H11131089 A JPH11131089 A JP H11131089A JP 9357281 A JP9357281 A JP 9357281A JP 35728197 A JP35728197 A JP 35728197A JP H11131089 A JPH11131089 A JP H11131089A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- oil
- phospholipase
- oils
- fats
- enzyme
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Edible Oils And Fats (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】油脂を精製する工程において、油脂中のリン脂
質を効率よく分解除去する。 【解決手段】酸性ホスホリパーゼＡ１を粗原油又は脱ガ
ム油に作用させることにより、油脂中のリン脂質を効率
的にリゾリン脂質に変換させて油不溶性とし、油脂から
リン脂質の除去を容易にする。酸性ホスホリパーゼＡ１
を粗原油又は脱ガム油に作用させる手段として、担体に
固定化することにより、反復使用が可能となり、リゾ化
率も向上する。
質を効率よく分解除去する。 【解決手段】酸性ホスホリパーゼＡ１を粗原油又は脱ガ
ム油に作用させることにより、油脂中のリン脂質を効率
的にリゾリン脂質に変換させて油不溶性とし、油脂から
リン脂質の除去を容易にする。酸性ホスホリパーゼＡ１
を粗原油又は脱ガム油に作用させる手段として、担体に
固定化することにより、反復使用が可能となり、リゾ化
率も向上する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、油脂の精製方法に
関するものである。詳しくは、油脂に酸性ホスホリパ−
ゼＡ１を作用させ、油脂原料から採油直後の油脂分から
懸濁する諸物質を除去した油脂（以下これを粗原油と称
する）、又は粗原油を強制的に水和処理し、水和性ガム
質を析出させ、遠心分離して得られた油脂（以下これを
脱ガム油と称する）中のリン脂質を効率良く分解除去す
る油脂の精製方法に関する。
関するものである。詳しくは、油脂に酸性ホスホリパ−
ゼＡ１を作用させ、油脂原料から採油直後の油脂分から
懸濁する諸物質を除去した油脂（以下これを粗原油と称
する）、又は粗原油を強制的に水和処理し、水和性ガム
質を析出させ、遠心分離して得られた油脂（以下これを
脱ガム油と称する）中のリン脂質を効率良く分解除去す
る油脂の精製方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】植物由来の粗原油にはリン脂質を主体と
する極性脂質、糖脂質、糖、遊離脂肪酸、金属塩（Ｃ
ａ、Ｍｇ、Ｆｅ等）、色素、有臭成分等の不純物が含ま
れているため、脱ガム、脱酸、脱色、脱ロウ、脱臭等の
各工程において、それらの不純物を除去して、利用価値
の高い優れた品質の精製油に仕上げることが必要であ
り、これを油脂の精製と言う。油脂の精製においてその
挙動の最も注目されるのは、リン脂質を主成分としたガ
ム質の存在である。この水溶性または油溶性のガム質を
一括してホスファチドと呼ぶ。各種の粗原油中のホスフ
ァチド含量を表１に示す。
する極性脂質、糖脂質、糖、遊離脂肪酸、金属塩（Ｃ
ａ、Ｍｇ、Ｆｅ等）、色素、有臭成分等の不純物が含ま
れているため、脱ガム、脱酸、脱色、脱ロウ、脱臭等の
各工程において、それらの不純物を除去して、利用価値
の高い優れた品質の精製油に仕上げることが必要であ
り、これを油脂の精製と言う。油脂の精製においてその
挙動の最も注目されるのは、リン脂質を主成分としたガ
ム質の存在である。この水溶性または油溶性のガム質を
一括してホスファチドと呼ぶ。各種の粗原油中のホスフ
ァチド含量を表１に示す。
【０００３】
【表１】 （出典 宮川高明、食用油製造の実際、 p81 (1988)）。
【０００４】油脂に残存するリン脂質を主成分としたガ
ム質は、加熱による着色、異臭の発生および安定性の劣
化等の原因となるため、リン脂質の適切な分離、除去は
金属塩の排除と共に油脂精製の成否を左右する重要な工
程である。このプロセスを脱ガム工程と言う。
ム質は、加熱による着色、異臭の発生および安定性の劣
化等の原因となるため、リン脂質の適切な分離、除去は
金属塩の排除と共に油脂精製の成否を左右する重要な工
程である。このプロセスを脱ガム工程と言う。
【０００５】脱ガム工程では、粗原油に温水を加えてホ
スファチド（リン脂質）等を水和、析出させ、遠心分離
機でガム質を除去して脱ガム油とする。表２に脱ガム処
理前後の大豆油の成分の変化を示す。油脂の品質に好ま
しくない影響を与える各成分が、脱ガム処理によって大
きく減少している。
スファチド（リン脂質）等を水和、析出させ、遠心分離
機でガム質を除去して脱ガム油とする。表２に脱ガム処
理前後の大豆油の成分の変化を示す。油脂の品質に好ま
しくない影響を与える各成分が、脱ガム処理によって大
きく減少している。
【０００６】
【表２】 出典 J. C. Seegers,Fette・Seifen・Anstrichmittel 87, 541 (1985)。
【０００７】油脂の精製工程においては、上記の脱ガム
処理後、遊離脂肪酸を苛性ソ−ダで中和、除去すること
が必須であり、このプロセスを脱酸工程と言う。
処理後、遊離脂肪酸を苛性ソ−ダで中和、除去すること
が必須であり、このプロセスを脱酸工程と言う。
【０００８】この工程においては、油脂中に存在する粘
物質、ホスファチド（リン脂質）、金属塩、着色成分等
が、排水と多量の油脂を含む産業廃棄物として発生する
ことが問題となっていた。また、粗原油又は脱ガム油中
には、単なる水和によって析出分離する親水性ガムの他
に、Ｃａ、Ｍｇ、Ｆｅ等の金属塩と結合し、油溶性ガム
として油脂中に溶解し、除去することの難しいリン脂質
が存在しており、粗原油又は脱ガム油からできる限り多
くの油溶性ガムを除去することが、油脂精製の課題とな
っていた。
物質、ホスファチド（リン脂質）、金属塩、着色成分等
が、排水と多量の油脂を含む産業廃棄物として発生する
ことが問題となっていた。また、粗原油又は脱ガム油中
には、単なる水和によって析出分離する親水性ガムの他
に、Ｃａ、Ｍｇ、Ｆｅ等の金属塩と結合し、油溶性ガム
として油脂中に溶解し、除去することの難しいリン脂質
が存在しており、粗原油又は脱ガム油からできる限り多
くの油溶性ガムを除去することが、油脂精製の課題とな
っていた。
【０００９】これに対して、油脂中のリン脂質を動物あ
るいは微生物由来の酵素処理により除去する方法が提案
されている。例えば、粗原油をホスホリパ−ゼＡ活性を
有する酵素で処理する方法（特開平２−１５３９９７
号）、脱ガム油をホスホリパ−ゼＡ１、Ａ２、Ｂ活性を
有する酵素で処理して行う方法（ＥＰ−Ａ−０５１３７
０９号）、食用油の酵素処理法（ＵＳ５２６４３６７
号）、Unilever社のス−パ−デガミング法、Vandemoort
ele 社のト−タルデガミング法、Lurgi 社のAlcon法及
びEnzyMax Degumming 法等である。
るいは微生物由来の酵素処理により除去する方法が提案
されている。例えば、粗原油をホスホリパ−ゼＡ活性を
有する酵素で処理する方法（特開平２−１５３９９７
号）、脱ガム油をホスホリパ−ゼＡ１、Ａ２、Ｂ活性を
有する酵素で処理して行う方法（ＥＰ−Ａ−０５１３７
０９号）、食用油の酵素処理法（ＵＳ５２６４３６７
号）、Unilever社のス−パ−デガミング法、Vandemoort
ele 社のト−タルデガミング法、Lurgi 社のAlcon法及
びEnzyMax Degumming 法等である。
【００１０】しかしながら、これらの方法では、水和可
能なリン脂質の除去を目的として、従来のガム質水和除
去法を組み入れたり、又は前工程として接続したり、あ
るいは、使用する酵素の生産性が低く又は酵素化学的性
質（基質特異性、作用至適ｐＨ、温度、温度安定性、ｐ
Ｈ安定性等）が油脂精製に最適ではなかったり、各酵素
の酵素化学的性質を十分生かした精製方法ではなかった
りしたため、油脂中のリン脂質含量を十分低減させるに
は至らなかった。
能なリン脂質の除去を目的として、従来のガム質水和除
去法を組み入れたり、又は前工程として接続したり、あ
るいは、使用する酵素の生産性が低く又は酵素化学的性
質（基質特異性、作用至適ｐＨ、温度、温度安定性、ｐ
Ｈ安定性等）が油脂精製に最適ではなかったり、各酵素
の酵素化学的性質を十分生かした精製方法ではなかった
りしたため、油脂中のリン脂質含量を十分低減させるに
は至らなかった。
【００１１】また、従来、油脂の精製に用いられてきた
ホスホリパ−ゼは、ブタ膵臓ホスホリパ−ゼＡ２又は蜜
蜂毒ホスホリパ−ゼＡ２であり、それらの作用至適ｐＨ
はそれぞれｐＨ８、ｐＨ８．９前後である。またその他
の市販ホスホリパ−ゼＡ２又はＢについても、シグマ社
試薬カタログによれば、それらの作用至適ｐＨは、ウシ
膵臓ホスホリパ−ゼＡ２: ｐＨ８．０、Streptomyces v
iolaceoruberホスホリパ−ゼＡ２: ｐＨ８．０、ビブリ
オ種ホスホリパ−ゼＢ: ｐＨ８等とされており、何れの
至適ｐＨも中性乃至弱アルカリ性領域にある。
ホスホリパ−ゼは、ブタ膵臓ホスホリパ−ゼＡ２又は蜜
蜂毒ホスホリパ−ゼＡ２であり、それらの作用至適ｐＨ
はそれぞれｐＨ８、ｐＨ８．９前後である。またその他
の市販ホスホリパ−ゼＡ２又はＢについても、シグマ社
試薬カタログによれば、それらの作用至適ｐＨは、ウシ
膵臓ホスホリパ−ゼＡ２: ｐＨ８．０、Streptomyces v
iolaceoruberホスホリパ−ゼＡ２: ｐＨ８．０、ビブリ
オ種ホスホリパ−ゼＢ: ｐＨ８等とされており、何れの
至適ｐＨも中性乃至弱アルカリ性領域にある。
【００１２】その一方で、ホスホリパ−ゼＡ１、Ａ２又
はＢが作用する際には、遊離する脂肪酸により反応系の
ｐＨが低下して中性乃至アルカリ性領域から外れること
から、従来の酵素を用いて効率的な油脂の精製を行うた
めには、酵素処理時の反応系ｐＨの酸性側への移行に常
に注意し、至適ｐＨ前後で酵素反応を進めさせることが
必要であった。更に、食用油の酵素処理法（ＵＳ５２６
４３６７号）、酵素触媒による植物油からのホスファチ
ドの除去（Fat Sci.Technol.,95.Jahrgang Nr.8 1993)
では、酵素反応にとって最適なｐＨは、ｐＨ５前後とさ
れている。
はＢが作用する際には、遊離する脂肪酸により反応系の
ｐＨが低下して中性乃至アルカリ性領域から外れること
から、従来の酵素を用いて効率的な油脂の精製を行うた
めには、酵素処理時の反応系ｐＨの酸性側への移行に常
に注意し、至適ｐＨ前後で酵素反応を進めさせることが
必要であった。更に、食用油の酵素処理法（ＵＳ５２６
４３６７号）、酵素触媒による植物油からのホスファチ
ドの除去（Fat Sci.Technol.,95.Jahrgang Nr.8 1993)
では、酵素反応にとって最適なｐＨは、ｐＨ５前後とさ
れている。
【００１３】
【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、粗原油
又は脱ガム油中のリン脂質を穏和な条件で効率良く分解
除去することにより前述の問題を解決し、更に経済性、
品質が優れた油脂の精製方法を開発すべく鋭意研究を行
った結果、酸性ホスホリパ−ゼＡ１を、粗原油又は脱ガ
ム油を精製する段階において用いることにより、穏健な
条件のもと、少ない装置コストで、酵素作用時のｐＨの
変化に労力を費やすことなく、しかも少量の酵素添加に
よって、効率的に油脂を精製しうることを見いだした。
又は脱ガム油中のリン脂質を穏和な条件で効率良く分解
除去することにより前述の問題を解決し、更に経済性、
品質が優れた油脂の精製方法を開発すべく鋭意研究を行
った結果、酸性ホスホリパ−ゼＡ１を、粗原油又は脱ガ
ム油を精製する段階において用いることにより、穏健な
条件のもと、少ない装置コストで、酵素作用時のｐＨの
変化に労力を費やすことなく、しかも少量の酵素添加に
よって、効率的に油脂を精製しうることを見いだした。
【００１４】また固定化方法を用いた場合は、酸性ホス
ホリパ−ゼＡ１を無機及び有機担体に固定化後、多官能
試薬で架橋補強をした固定化担体を用い、リゾ化反応を
行うことにより、酵素を繰り返し使用することができ
る。また、リゾ化反応終了後、固定化担体を濾別するこ
とにより、製品への酵素混入を阻止できる。このことに
より、本発明を完成するに至った。
ホリパ−ゼＡ１を無機及び有機担体に固定化後、多官能
試薬で架橋補強をした固定化担体を用い、リゾ化反応を
行うことにより、酵素を繰り返し使用することができ
る。また、リゾ化反応終了後、固定化担体を濾別するこ
とにより、製品への酵素混入を阻止できる。このことに
より、本発明を完成するに至った。
【００１５】
【課題を解決するための手段】本発明は油脂を脱ガム、
脱酸する際、油脂のｐＨをｐＨ３乃至６に調節した後、
水又は適当な水溶液で分散溶解させた酸性ホスホリパ−
ゼＡ１を含む酵素液を除去すべきリン脂質を主体とする
不純物を含有する油脂に分散させ、温度３０乃至８０℃
で攪拌しながら作用させるものである。
脱酸する際、油脂のｐＨをｐＨ３乃至６に調節した後、
水又は適当な水溶液で分散溶解させた酸性ホスホリパ−
ゼＡ１を含む酵素液を除去すべきリン脂質を主体とする
不純物を含有する油脂に分散させ、温度３０乃至８０℃
で攪拌しながら作用させるものである。
【００１６】本発明の精製方法の対象となる油脂は、通
常、リン脂質を１００乃至１０，０００ｐｐｍ程度含有
する粗原油又は脱ガム油等の未精製油であり、その起源
は、大豆、ナタネ、ヒマワリの種子、亜麻の種子、綿
実、落花生の種子、トウモロコシ等であり、その種類を
問わない。
常、リン脂質を１００乃至１０，０００ｐｐｍ程度含有
する粗原油又は脱ガム油等の未精製油であり、その起源
は、大豆、ナタネ、ヒマワリの種子、亜麻の種子、綿
実、落花生の種子、トウモロコシ等であり、その種類を
問わない。
【００１７】酵素は、精製のどの段階の油脂に添加して
も良いが、粗原油又は脱ガム油に添加し、反応させるこ
とが好ましい。更に、対象となる油脂が、リン脂質含量
の高い大豆油、ナタネ油等の場合には、酵素処理の前に
通常の方法で脱ガム処理することがより好ましい。
も良いが、粗原油又は脱ガム油に添加し、反応させるこ
とが好ましい。更に、対象となる油脂が、リン脂質含量
の高い大豆油、ナタネ油等の場合には、酵素処理の前に
通常の方法で脱ガム処理することがより好ましい。
【００１８】酵素反応は、油相と水相との接触効率を高
めるため、高速攪拌機、ホモミキサ−、コロイドミル、
パイプラインミキサ−、超音波分散装置、高圧ホモジナ
イザ−、バイブレ−タ−、膜乳化装置等の適宜の乳化機
を用いて乳化状態で行ってもよい。
めるため、高速攪拌機、ホモミキサ−、コロイドミル、
パイプラインミキサ−、超音波分散装置、高圧ホモジナ
イザ−、バイブレ−タ−、膜乳化装置等の適宜の乳化機
を用いて乳化状態で行ってもよい。
【００１９】固定化法を用いる場合は、具体的には酸性
ホスホリパ−ゼＡ１を含む溶液に不溶性担体を添加し、
該担体上に架橋補強をするためにエチレングリコ−ル
ジグリシジルエ−テルを添加し、架橋固定化させること
により、安定した反応速度が見られる。
ホスホリパ−ゼＡ１を含む溶液に不溶性担体を添加し、
該担体上に架橋補強をするためにエチレングリコ−ル
ジグリシジルエ−テルを添加し、架橋固定化させること
により、安定した反応速度が見られる。
【００２０】本発明の方法の好ましい点は、第一に、酸
性ホスホリパ−ゼＡ１を固定化する事により、繰り返し
使用が可能となり、原価寄与率のダウンが見込まれる。
性ホスホリパ−ゼＡ１を固定化する事により、繰り返し
使用が可能となり、原価寄与率のダウンが見込まれる。
【００２１】第二に、反応終了時に固定化酵素と反応液
の分離が容易で、製品への酵素混入がなくなり、品質の
向上が見込まれる。
の分離が容易で、製品への酵素混入がなくなり、品質の
向上が見込まれる。
【００２２】酵素を固定化する方法は、水不溶性の担体
に粉末酸性ホスホリパ−ゼＡ１を水中で接触させること
により、該担体上に吸着処理し、担体濾過洗浄後１〜１
０％の架橋剤を含む水溶液中で２〜５時間架橋補強を行
い、担体を濾過、洗浄し、更に架橋剤が洗浄液中の吸光
度（２８０ｎｍ）が０．０１以下になるまで続行するこ
とによって得られる。
に粉末酸性ホスホリパ−ゼＡ１を水中で接触させること
により、該担体上に吸着処理し、担体濾過洗浄後１〜１
０％の架橋剤を含む水溶液中で２〜５時間架橋補強を行
い、担体を濾過、洗浄し、更に架橋剤が洗浄液中の吸光
度（２８０ｎｍ）が０．０１以下になるまで続行するこ
とによって得られる。
【００２３】担体としては、ホスホリパ−ゼＡ１活性に
影響を与えず、操作上から物理的、化学的に安定なもの
であれば、何れも使用できる。
影響を与えず、操作上から物理的、化学的に安定なもの
であれば、何れも使用できる。
【００２４】固定化担体としては、不溶性担体としてキ
トパ−ルＢＣＷ−２６１０（商標名；富士紡績（株）社
製）または、キトパ−ルＢＣＷ−２６２０、イオン交換
樹脂およびセライトからなる群より選択されるものであ
ることを特徴とする。
トパ−ルＢＣＷ−２６１０（商標名；富士紡績（株）社
製）または、キトパ−ルＢＣＷ−２６２０、イオン交換
樹脂およびセライトからなる群より選択されるものであ
ることを特徴とする。
【００２５】また担体の形状としては、粉末状、顆粒状
等、種々あるが、その何れでも使用できる。特に工程、
操作上の面からは、３００〜２５００μｍの粒径を有
し、比表面積２０〜２００ｍ2 ／ｇの多孔性の担体を用
いるものが好適である。
等、種々あるが、その何れでも使用できる。特に工程、
操作上の面からは、３００〜２５００μｍの粒径を有
し、比表面積２０〜２００ｍ2 ／ｇの多孔性の担体を用
いるものが好適である。
【００２６】特に好ましい担体としては、市販入手可能
な富士紡績社のＢＣＷ−２６１０およびＢＣＷ−２６２
０等の細孔径０．１〜０．２μｍの多孔性樹脂が挙げら
れる。
な富士紡績社のＢＣＷ−２６１０およびＢＣＷ−２６２
０等の細孔径０．１〜０．２μｍの多孔性樹脂が挙げら
れる。
【００２７】固定化を行う温度としては、失活の起きな
い温度であれば良く、０〜７０℃、好ましくは２０〜４
５℃が良い。
い温度であれば良く、０〜７０℃、好ましくは２０〜４
５℃が良い。
【００２８】通常の酵素処理又は固定化法かにかかわら
ず、酵素の種類によっては活性発現に必須の因子又は活
性を増強する因子、例えば、カルシウム等を必要に応じ
て添加する。また、反応後の油系と水系の分離を促進す
るため、食塩等の塩類を洗浄水の5 ％重量程度以下添加
してもよい。
ず、酵素の種類によっては活性発現に必須の因子又は活
性を増強する因子、例えば、カルシウム等を必要に応じ
て添加する。また、反応後の油系と水系の分離を促進す
るため、食塩等の塩類を洗浄水の5 ％重量程度以下添加
してもよい。
【００２９】ｐＨ調整が必要な場合には、酸（例えば、
リン酸、酢酸、クエン酸、シュウ酸、マレイン酸、タン
ニン酸、酒石酸等）、アルカリ（例えば、苛性ソ−ダ
等）又は緩衝液（例えば、酢酸塩緩衝液等）を用いるこ
とが出来る。
リン酸、酢酸、クエン酸、シュウ酸、マレイン酸、タン
ニン酸、酒石酸等）、アルカリ（例えば、苛性ソ−ダ
等）又は緩衝液（例えば、酢酸塩緩衝液等）を用いるこ
とが出来る。
【００３０】酵素処理条件は、当該酵素の至適温度にも
よるが、通常３０乃至８０℃の条件、望ましくは４０乃
至７０℃の条件下で３０分間乃至７日程度行ことが望ま
しく、固定化法を用いた場合も同様である。本発明で使
用する酸性ホスホリパ−ゼＡ１は、通常の酵素処理又は
固定化法かにかかわらず、リパ−ゼ活性の低いものが望
ましい。酵素の起源は、動物、植物、微生物由来の何れ
でも良く、これらの酵素純度は問わない。
よるが、通常３０乃至８０℃の条件、望ましくは４０乃
至７０℃の条件下で３０分間乃至７日程度行ことが望ま
しく、固定化法を用いた場合も同様である。本発明で使
用する酸性ホスホリパ−ゼＡ１は、通常の酵素処理又は
固定化法かにかかわらず、リパ−ゼ活性の低いものが望
ましい。酵素の起源は、動物、植物、微生物由来の何れ
でも良く、これらの酵素純度は問わない。
【００３１】また、通常の酵素処理又は固定化法かにか
かわらず、本発明で使用する酸性ホスホリパ−ゼＡ１の
作用至適ｐＨは、通常の活性測定系（トライトンＸ−１
００の存在下、３７℃で１０分間反応）ではｐＨ３乃至
６．５であり、より最適にはｐＨ３．２乃至５．０であ
る。
かわらず、本発明で使用する酸性ホスホリパ−ゼＡ１の
作用至適ｐＨは、通常の活性測定系（トライトンＸ−１
００の存在下、３７℃で１０分間反応）ではｐＨ３乃至
６．５であり、より最適にはｐＨ３．２乃至５．０であ
る。
【００３２】例えば油脂の精製方法では、Aspergillus
oryzae 又は Aspergillus niger由来の酸性ホスホリパ
−ゼＡ１等が工業的に利用可能であり、これらの酵素に
ついての詳細は、ホスホリパ−ゼＡ１とその利用（特開
平７−３１４７２号）等に記載されている。
oryzae 又は Aspergillus niger由来の酸性ホスホリパ
−ゼＡ１等が工業的に利用可能であり、これらの酵素に
ついての詳細は、ホスホリパ−ゼＡ１とその利用（特開
平７−３１４７２号）等に記載されている。
【００３３】酸性ホスホリパ−ゼＡ１がリン脂質に作用
した際には２−アシルリゾリン脂質が生成し、ホスホリ
パ−ゼＡ２の生成物である１−アシルリゾリン脂質と
は、脂肪酸の結合部位、構成脂肪酸組成及びリゾ化され
たリン脂質の組成が異なり、これらの違いに基づく酵素
反応生成物の物性の差が、油脂からのリン脂質及び金属
塩の除去に関して、良い影響を及ぼしている。
した際には２−アシルリゾリン脂質が生成し、ホスホリ
パ−ゼＡ２の生成物である１−アシルリゾリン脂質と
は、脂肪酸の結合部位、構成脂肪酸組成及びリゾ化され
たリン脂質の組成が異なり、これらの違いに基づく酵素
反応生成物の物性の差が、油脂からのリン脂質及び金属
塩の除去に関して、良い影響を及ぼしている。
【００３４】特に、Aspergillus oryzae又は Aspergill
us niger由来の酸性ホスホリパ−ゼＡ１は、ホスファチ
ジルコリン、ホスファチジルエタノ−ルアミン、ホスフ
ァチジルイノシト−ル、及びホスファチジン酸の１位の
脂肪酸を効率良く遊離せしめるものであり、それらの基
質特異性、作用至適ｐＨ・温度、温度安定性、ｐＨ安定
性及び酵素製剤の生産性等は、ＵＳ５２６４３６７号記
載のRhizopus arrhizus 由来のホスホリパ−ゼＡ１と比
較しても油脂の精製に適したものである。
us niger由来の酸性ホスホリパ−ゼＡ１は、ホスファチ
ジルコリン、ホスファチジルエタノ−ルアミン、ホスフ
ァチジルイノシト−ル、及びホスファチジン酸の１位の
脂肪酸を効率良く遊離せしめるものであり、それらの基
質特異性、作用至適ｐＨ・温度、温度安定性、ｐＨ安定
性及び酵素製剤の生産性等は、ＵＳ５２６４３６７号記
載のRhizopus arrhizus 由来のホスホリパ−ゼＡ１と比
較しても油脂の精製に適したものである。
【００３５】具体的に、粗原油又は脱ガム油を酵素処理
する場合には、使用する酸性ホスホリパ−ゼＡ１の活性
については特段の限定がない。
する場合には、使用する酸性ホスホリパ−ゼＡ１の活性
については特段の限定がない。
【００３６】例えば少量の添加水によって処理する場合
には、粗原油又は脱ガム油１ｌ又は１ｋｇあたり、通常
の酵素処理の場合は、ほぼ１．５乃至３０，０００単位
でよく、又、固定化法の場合は、粗原油又は脱ガム油１
ｌ又は１ｋｇあたり、ほぼ３，０００乃至３０万単位
を、固定化したものを繰り返し使用することが出来る。
には、粗原油又は脱ガム油１ｌ又は１ｋｇあたり、通常
の酵素処理の場合は、ほぼ１．５乃至３０，０００単位
でよく、又、固定化法の場合は、粗原油又は脱ガム油１
ｌ又は１ｋｇあたり、ほぼ３，０００乃至３０万単位
を、固定化したものを繰り返し使用することが出来る。
【００３７】高活性の酸性ホスホリパ−ゼＡ１を使用
し、添加水量を多くして、油相と水相との接触効率を高
めた乳化状態で酵素処理する場合には、３０分間乃至５
時間程度で処理を終えることもできる。
し、添加水量を多くして、油相と水相との接触効率を高
めた乳化状態で酵素処理する場合には、３０分間乃至５
時間程度で処理を終えることもできる。
【００３８】カラム法にてカラムを使用して反応を行う
場合には、逆流法（アップフロー式）にて油脂、粗原油
又は脱ガム油に添加水を含む処理液を循環させることに
より、カラム内に繰り返し送液する方法が好適である。
流速は、１分間あたり総処理液の３倍量以下に調節す
る。
場合には、逆流法（アップフロー式）にて油脂、粗原油
又は脱ガム油に添加水を含む処理液を循環させることに
より、カラム内に繰り返し送液する方法が好適である。
流速は、１分間あたり総処理液の３倍量以下に調節す
る。
【００３９】また、固定化法にてレシチン１０％および
２０％含有のリゾ化反応を行うには、レシチン１ｌまた
は１ｋｇあたり、ほぼ３，０００乃至４５０万単位固定
化したものを繰り返し使用することができる。
２０％含有のリゾ化反応を行うには、レシチン１ｌまた
は１ｋｇあたり、ほぼ３，０００乃至４５０万単位固定
化したものを繰り返し使用することができる。
【００４０】本発明の方法において、通常の酵素処理お
よび固定化法に使用する水分量は、処理水量を抑える場
合には、粗原油１００重量部に対して、ほぼ０．０５乃
至２０重量部、より最適には粗原油１００重量部に対し
て、１０重量部で良い。また、高活性の酸性ホスホリパ
−ゼＡ１を用い、処理水を増やして乳化状態で迅速な通
常の酵素処理および固定化法を行う場合には、粗原油１
００重量部に対して、ほぼ５０乃至２，０００重量部、
乃至それ以上の処理水を使用することができる。
よび固定化法に使用する水分量は、処理水量を抑える場
合には、粗原油１００重量部に対して、ほぼ０．０５乃
至２０重量部、より最適には粗原油１００重量部に対し
て、１０重量部で良い。また、高活性の酸性ホスホリパ
−ゼＡ１を用い、処理水を増やして乳化状態で迅速な通
常の酵素処理および固定化法を行う場合には、粗原油１
００重量部に対して、ほぼ５０乃至２，０００重量部、
乃至それ以上の処理水を使用することができる。
【００４１】例えば、大豆油等のようにリン脂質含量の
高い油脂を酸性ホスホリパ−ゼＡ１を使用して脱ガムす
る際、ガム質を除去するためには、これらの油脂を、ま
ず水で予備脱ガムするのが得策である。上記油脂中のリ
ン含量を、例えば水で予備脱ガムして５０乃至５００ｐ
ｐｍの範囲に低減させておくことが好ましい。この場
合、脱ガム工程そのものは従来技術によるものであって
も良い。
高い油脂を酸性ホスホリパ−ゼＡ１を使用して脱ガムす
る際、ガム質を除去するためには、これらの油脂を、ま
ず水で予備脱ガムするのが得策である。上記油脂中のリ
ン含量を、例えば水で予備脱ガムして５０乃至５００ｐ
ｐｍの範囲に低減させておくことが好ましい。この場
合、脱ガム工程そのものは従来技術によるものであって
も良い。
【００４２】本発明の方法によれば、粗原油又は脱ガム
油中のリン脂質を効率よく分解除去することが可能とな
る。
油中のリン脂質を効率よく分解除去することが可能とな
る。
【００４３】本発明の方法は、化学的精製を物理的精製
に代えることもでき、それによって、脱酸工程および廃
棄物処理の各工程を省略して油脂を精製することも可能
となる。
に代えることもでき、それによって、脱酸工程および廃
棄物処理の各工程を省略して油脂を精製することも可能
となる。
【００４４】即ち、粗原油又は脱ガム油中のリン脂質
は、酸性ホスホリパ−ゼＡ１の作用によってリゾリン脂
質に変換され、親水性が高まって水相に移行し易くな
り、また、活性白土等の吸着剤に吸着され易い状態に変
化する為、酵素処理後に、あるいは、更に必要に応じて
行う遠心分離機等による脱水処理の後に、常法による脱
色、脱臭工程を経ることによって、油脂の品質に悪影響
を与えない微量にまでリン脂質含量を低下させることが
できる。
は、酸性ホスホリパ−ゼＡ１の作用によってリゾリン脂
質に変換され、親水性が高まって水相に移行し易くな
り、また、活性白土等の吸着剤に吸着され易い状態に変
化する為、酵素処理後に、あるいは、更に必要に応じて
行う遠心分離機等による脱水処理の後に、常法による脱
色、脱臭工程を経ることによって、油脂の品質に悪影響
を与えない微量にまでリン脂質含量を低下させることが
できる。
【００４５】更に詳しく言えば、酸性ホスホリパ−ゼＡ
１を用いた際の反応生成物２−アシルリゾリン脂質は、
ホスホリパ−ゼＡ２の反応生成物である１−アシルリゾ
リン脂質とは、脂肪酸の結合部位、構成脂肪酸組成及び
リゾ化したリン脂質の組成が異なる為、予想以上に効率
的にリン脂質を油脂から除去することが可能となるとと
もに、油脂中のＣａ、Ｍｇ、Ｆｅ等の金属塩含量をも低
下させることができる。
１を用いた際の反応生成物２−アシルリゾリン脂質は、
ホスホリパ−ゼＡ２の反応生成物である１−アシルリゾ
リン脂質とは、脂肪酸の結合部位、構成脂肪酸組成及び
リゾ化したリン脂質の組成が異なる為、予想以上に効率
的にリン脂質を油脂から除去することが可能となるとと
もに、油脂中のＣａ、Ｍｇ、Ｆｅ等の金属塩含量をも低
下させることができる。
【００４６】固定化酵素を使用して１０％および２０％
レシチンをリゾ化反応する場合は、固定化した酸性ホス
ホリパ−ゼＡ１の作用により、リゾレシチンに変換され
る。リゾ化反応は原料レシチン１重量部に対して界面活
性剤ＴｒｉｔｏｎＸ−１００を０．１〜０．５重量部添
加すると反応速度がすみやかに進行する。望ましくは
０．２〜０．３重量部が良好である。残の重量部は精製
水とする。
レシチンをリゾ化反応する場合は、固定化した酸性ホス
ホリパ−ゼＡ１の作用により、リゾレシチンに変換され
る。リゾ化反応は原料レシチン１重量部に対して界面活
性剤ＴｒｉｔｏｎＸ−１００を０．１〜０．５重量部添
加すると反応速度がすみやかに進行する。望ましくは
０．２〜０．３重量部が良好である。残の重量部は精製
水とする。
【００４７】固定化酵素処理後に固定化担体は３２メッ
シュ金網にて濾別し次の反応に使用する。濾過液は常法
により工程を経て、リゾレシチンを得ることができる。
シュ金網にて濾別し次の反応に使用する。濾過液は常法
により工程を経て、リゾレシチンを得ることができる。
【００４８】
【実施例】本発明を実施例及び比較例により説明する。
【００４９】なお、以下の酸性ホスホリパーゼＡ１活性
又はホスホリパーゼＡ２活性は、それぞれｐＨ４、ｐＨ
８における活性で示した。リン脂質の分析は、日本基準
油脂分析法２．２２．８．１ー７１に従って行なった。
又はホスホリパーゼＡ２活性は、それぞれｐＨ４、ｐＨ
８における活性で示した。リン脂質の分析は、日本基準
油脂分析法２．２２．８．１ー７１に従って行なった。
【００５０】［実施例１］リン脂質含量３，０００ｐｐ
ｍの大豆由来の粗原油１００ｇにAspergillus oryzae
（ＦＥＲＭ ＢＰ−３８８７）由来の酸性ホスホリパー
ゼＡ１溶液［０．２単位／ｍｌ（ｐＨ５）、５ｍＭ塩化
カルシウム、１０ｍＭクエン酸及び０．０７３ｇＮａＯ
Ｈを含む］１００ｍｌを加え、攪拌子で攪拌しながら、
６０℃で２４時間反応させた。反応終了後、遠心分離
（１，５００Ｇ、１０分）を行って酵素液を除去し、リ
ン脂質含量１００ｐｐｍの脱ガム油を得た。
ｍの大豆由来の粗原油１００ｇにAspergillus oryzae
（ＦＥＲＭ ＢＰ−３８８７）由来の酸性ホスホリパー
ゼＡ１溶液［０．２単位／ｍｌ（ｐＨ５）、５ｍＭ塩化
カルシウム、１０ｍＭクエン酸及び０．０７３ｇＮａＯ
Ｈを含む］１００ｍｌを加え、攪拌子で攪拌しながら、
６０℃で２４時間反応させた。反応終了後、遠心分離
（１，５００Ｇ、１０分）を行って酵素液を除去し、リ
ン脂質含量１００ｐｐｍの脱ガム油を得た。
【００５１】［比較例１］酵素液にホスホリパーゼＡ２
溶液［ノボ社製、商品名レシターゼ、０．２単位／ｍｌ
（ｐＨ６）、５ｍＭ塩化カルシウム、１０ｍＭクエン酸
及び０．０８７ｇＮａＯＨを含む］を使用した他は実施
例１と同様に処理した。脱ガム油中には、３００ｐｐｍ
のリン脂質が残存していた。 ［実施例２］リン脂質含量１３０ｐｐｍの大豆由来の脱
ガム油１００ｇにAspergillus niger （ＡＴＣＣ９６４
２）由来の酸性ホスホリパーゼＡ１活性５０単位を有す
る酵素液０．５ｍｌ［ｐＨ５、１０ｍＭクエン酸及び
０．０００２３ｇＮａＯＨを含む］を加え、攪拌子で攪
拌しながら、６０℃で２４時間反応させた。この油に活
性白土［水沢化学工業社製、商品名ＮＶ］を１．０％添
加し、１０５℃、３０Ｔｏｒｒ、２０分間の条件で脱色
処理した。油脂中のリン脂質含量は２５ｐｐｍに減少し
た。
溶液［ノボ社製、商品名レシターゼ、０．２単位／ｍｌ
（ｐＨ６）、５ｍＭ塩化カルシウム、１０ｍＭクエン酸
及び０．０８７ｇＮａＯＨを含む］を使用した他は実施
例１と同様に処理した。脱ガム油中には、３００ｐｐｍ
のリン脂質が残存していた。 ［実施例２］リン脂質含量１３０ｐｐｍの大豆由来の脱
ガム油１００ｇにAspergillus niger （ＡＴＣＣ９６４
２）由来の酸性ホスホリパーゼＡ１活性５０単位を有す
る酵素液０．５ｍｌ［ｐＨ５、１０ｍＭクエン酸及び
０．０００２３ｇＮａＯＨを含む］を加え、攪拌子で攪
拌しながら、６０℃で２４時間反応させた。この油に活
性白土［水沢化学工業社製、商品名ＮＶ］を１．０％添
加し、１０５℃、３０Ｔｏｒｒ、２０分間の条件で脱色
処理した。油脂中のリン脂質含量は２５ｐｐｍに減少し
た。
【００５２】［比較例２］酵素液にホスホリパーゼＡ２
活性５０単位を有する酵素液［ノボ社製、商品名レシタ
ーゼ、ｐＨ６、１０ｍＭクエン酸及び０．０００２８ｇ
ＮａＯＨを含む］を使用した他は実施例２と同様に処理
した。油脂中には４５ｐｐｍのリン脂質が残存してい
た。
活性５０単位を有する酵素液［ノボ社製、商品名レシタ
ーゼ、ｐＨ６、１０ｍＭクエン酸及び０．０００２８ｇ
ＮａＯＨを含む］を使用した他は実施例２と同様に処理
した。油脂中には４５ｐｐｍのリン脂質が残存してい
た。
【００５３】実施例１及び比較例１並びに実施例２及び
比較例２の結果をまとめる。比較例１及び比較例２で用
いたホスホリパーゼＡ２の作用至適ｐＨは８乃至９であ
るが、この反応系の場合、ｐＨ８を超えると強いエマル
ジョンを形成するため反応系はやや酸性のｐＨ５．５乃
至６．５で行うのが実用的である。
比較例２の結果をまとめる。比較例１及び比較例２で用
いたホスホリパーゼＡ２の作用至適ｐＨは８乃至９であ
るが、この反応系の場合、ｐＨ８を超えると強いエマル
ジョンを形成するため反応系はやや酸性のｐＨ５．５乃
至６．５で行うのが実用的である。
【００５４】通常の未精製油と接触した水のｐＨは５．
５乃至６．５であるが、ｐＨ調整を行わなければ、酵素
反応による遊離脂肪酸の増加に従って、反応系のｐＨは
酸性側に移行する。
５乃至６．５であるが、ｐＨ調整を行わなければ、酵素
反応による遊離脂肪酸の増加に従って、反応系のｐＨは
酸性側に移行する。
【００５５】また、酸性ホスホリパーゼＡ１の反応生成
物は、ホスホリパーゼＡ２の反応生成物とは脂肪酸の結
合部位、構成脂肪酸及びリゾ化したリン脂質の組成物が
異なるため、より効率的にリン脂質を油脂から除去する
ことが可能である。
物は、ホスホリパーゼＡ２の反応生成物とは脂肪酸の結
合部位、構成脂肪酸及びリゾ化したリン脂質の組成物が
異なるため、より効率的にリン脂質を油脂から除去する
ことが可能である。
【００５６】実施例１及び実施例２における油脂中のリ
ン脂質残存量は、それぞれ比較例１及び比較例２の残存
量に比較して少量となっており、本発明の精製方法によ
る製品油は、加熱による着色、異臭の発生等の問題が低
減する。
ン脂質残存量は、それぞれ比較例１及び比較例２の残存
量に比較して少量となっており、本発明の精製方法によ
る製品油は、加熱による着色、異臭の発生等の問題が低
減する。
【００５７】［実施例３］市販のキトサン樹脂（キトパ
−ルＢＣＷ−２６２０；富士紡績（株）社製）３ｇを５
０ｍｌのイオン交換水にて、濾過洗浄を３回行い、付着
水を除去した。Aspergillus oryzae (FERM BP-3887) 由
来の酸性ホスホリパ−ゼＡ１（１９，０００単位／ｇ）
１５０ｍｇをイオン交換水５０ｍｌに加え、室温にて２
０分間攪拌した。この溶液にキトサン樹脂を全量加え、
ロ−タリ−振盪機を用いて１５０ｒｐｍで攪拌しなが
ら、３０℃で３時間保温した。
−ルＢＣＷ−２６２０；富士紡績（株）社製）３ｇを５
０ｍｌのイオン交換水にて、濾過洗浄を３回行い、付着
水を除去した。Aspergillus oryzae (FERM BP-3887) 由
来の酸性ホスホリパ−ゼＡ１（１９，０００単位／ｇ）
１５０ｍｇをイオン交換水５０ｍｌに加え、室温にて２
０分間攪拌した。この溶液にキトサン樹脂を全量加え、
ロ−タリ−振盪機を用いて１５０ｒｐｍで攪拌しなが
ら、３０℃で３時間保温した。
【００５８】次に該懸濁液よりキトサン樹脂を濾別し、
水で洗浄した。次いでエチレングリコ−ル ジグリシジ
ルエ−テルの２．８％水溶液５０ｍｌに酸性ホスホリパ
−ゼＡ１吸着樹脂を全量加え、ロ−タリ−振盪機を用い
て１５０ｒｐｍで攪拌しながら３０℃で２．５時間保温
した。その後、樹脂を水で洗浄して濾別する操作を濾液
の吸光度（２８０ｎｍ）が０．０１以下になるまで繰り
返し、酸性ホスホリパ−ゼＡ１固定化キトサン樹脂を得
た。
水で洗浄した。次いでエチレングリコ−ル ジグリシジ
ルエ−テルの２．８％水溶液５０ｍｌに酸性ホスホリパ
−ゼＡ１吸着樹脂を全量加え、ロ−タリ−振盪機を用い
て１５０ｒｐｍで攪拌しながら３０℃で２．５時間保温
した。その後、樹脂を水で洗浄して濾別する操作を濾液
の吸光度（２８０ｎｍ）が０．０１以下になるまで繰り
返し、酸性ホスホリパ−ゼＡ１固定化キトサン樹脂を得
た。
【００５９】レシチンのリゾ化反応の場合は、レシチン
（１０％）２ｇ、ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ ０．６ｇ、
水１７．４ｍｌを５０℃にて１５分間混合したのち、酢
酸にてｐＨを３．８〜５に調整した。その後５０℃にて
２０分間攪拌した後、４０℃に冷却し、酸性ホスホリパ
−ゼＡ１固定化樹脂３ｇを添加する。リゾ化反応は、ロ
−タリ−振盪機を用いて２００〜４００ｒｐｍ、４０℃
にて１〜７日、反応を行った。反応終了後、酸性ホスホ
リパ−ゼＡ１固定化樹脂を３２メッシュ（タイラ−標準
ふるい）の金網にて濾別、回収し、新たにレシチンおよ
びｐＨ調整液を加えて、上記の条件で反応を行った。以
上の操作を２５回繰り返した。
（１０％）２ｇ、ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ ０．６ｇ、
水１７．４ｍｌを５０℃にて１５分間混合したのち、酢
酸にてｐＨを３．８〜５に調整した。その後５０℃にて
２０分間攪拌した後、４０℃に冷却し、酸性ホスホリパ
−ゼＡ１固定化樹脂３ｇを添加する。リゾ化反応は、ロ
−タリ−振盪機を用いて２００〜４００ｒｐｍ、４０℃
にて１〜７日、反応を行った。反応終了後、酸性ホスホ
リパ−ゼＡ１固定化樹脂を３２メッシュ（タイラ−標準
ふるい）の金網にて濾別、回収し、新たにレシチンおよ
びｐＨ調整液を加えて、上記の条件で反応を行った。以
上の操作を２５回繰り返した。
【００６０】反応液の試験は、検体からBligh-Dyer法に
より、油を抽出し、得られた抽出油のアセトン不溶物を
薄層クロマトグラフィ−に供し、各リン脂質のリン組成
比を比色法にて求めた。次に、検体中のリン脂質を比色
法にて定量し、計算によって各リン脂質量を算出した。
特に代表的にホスファチジルコリンおよびリゾホスファ
チジルコリンの定量により、リゾ化率を判定した。その
結果、１０回目のリゾ化率 ９７．５２％、１５回目の
リゾ化率１００％、および２５回目のリゾ化率 ９４．
３１％／４８ｈであった。
より、油を抽出し、得られた抽出油のアセトン不溶物を
薄層クロマトグラフィ−に供し、各リン脂質のリン組成
比を比色法にて求めた。次に、検体中のリン脂質を比色
法にて定量し、計算によって各リン脂質量を算出した。
特に代表的にホスファチジルコリンおよびリゾホスファ
チジルコリンの定量により、リゾ化率を判定した。その
結果、１０回目のリゾ化率 ９７．５２％、１５回目の
リゾ化率１００％、および２５回目のリゾ化率 ９４．
３１％／４８ｈであった。
【００６１】また、作用至適ｐＨが３乃至６である酸性
ホスホリパーゼＡ１の利用は、この酵素処理工程でｐＨ
調整が必要でないことを意味し、作業性が大幅に改善さ
れることとなる。 ［実施例４］実施例３と同様の方法で調製した、酸性ホ
スホリパ−ゼＡ１固定化樹脂（ＢＣＷ -２６２０) ３ｇ
を、粗原油１０ｇ、苛性ソ−ダ４．３ｍｇ、クエン酸１
０ｍｇ、水１ｍｌでｐＨ３．２〜６．５に調整した反応
液に添加し、ロ−タリ−振盪機を用いて２００ｒｐｍで
攪拌しながら５０℃にて２〜６日反応を行った。
ホスホリパーゼＡ１の利用は、この酵素処理工程でｐＨ
調整が必要でないことを意味し、作業性が大幅に改善さ
れることとなる。 ［実施例４］実施例３と同様の方法で調製した、酸性ホ
スホリパ−ゼＡ１固定化樹脂（ＢＣＷ -２６２０) ３ｇ
を、粗原油１０ｇ、苛性ソ−ダ４．３ｍｇ、クエン酸１
０ｍｇ、水１ｍｌでｐＨ３．２〜６．５に調整した反応
液に添加し、ロ−タリ−振盪機を用いて２００ｒｐｍで
攪拌しながら５０℃にて２〜６日反応を行った。
【００６２】粗原油中のリン脂質（ホスファチジルコリ
ン）は３６０ｐｐｍであった。反応終了後の酸性ホスホ
リパ−ゼＡ１固定化樹脂は、実施例３と同様の方法で回
収し、繰り返し使用した。以上の操作を２１回繰り返し
た。
ン）は３６０ｐｐｍであった。反応終了後の酸性ホスホ
リパ−ゼＡ１固定化樹脂は、実施例３と同様の方法で回
収し、繰り返し使用した。以上の操作を２１回繰り返し
た。
【００６３】実施例３と同様に、反応液中のリン脂質の
定量を行い、リゾ化率を算出した結果、１５回目のリゾ
化率１００％、２０回目のリゾ化率１００％であった。
定量を行い、リゾ化率を算出した結果、１５回目のリゾ
化率１００％、２０回目のリゾ化率１００％であった。
【００６４】このことにより、油脂中のリン脂質含量は
零（検出せず）に減少した。
零（検出せず）に減少した。
【００６５】［ホスホリパーゼＡ１活性試験］実施例で
用いた酸性ホスホリパーゼＡ１の活性は以下の方法によ
り測定した。２．０（ｗ／ｖ）％大豆レシチン（リン脂
質）（ツルーレシチン工業社製：商品名ＳＬＰ−ホワイ
ト）及び４（ｖ／ｖ）％トライトン（Ｔｒｉｔｏｎ）Ｘ
−１００水溶液０．５ｍｌに、０．１Ｍ塩化カルシウム
０．０５ｍ、１０．２Ｍ酢酸塩緩衝液（ｐＨ４．０）
０．２５ｍｌを加えた。次いで、酵素液０．１ｍｌを加
えて均一にして、３７℃で静置し、１０分間酵素反応を
行った。その後、１Ｎ塩酸０．１ｍｌを加えて酵素反応
を停止させた。反応液０．０２ｍｌを採り、遊離脂肪酸
定量試薬（協和メディクス社製：商品名デタミナーＮＥ
ＦＡ）を用いて、遊離脂肪酸を定量した。酵素反応１分
あたり脂肪酸１μモルを生成させる酵素活性を１単位と
定義した。
用いた酸性ホスホリパーゼＡ１の活性は以下の方法によ
り測定した。２．０（ｗ／ｖ）％大豆レシチン（リン脂
質）（ツルーレシチン工業社製：商品名ＳＬＰ−ホワイ
ト）及び４（ｖ／ｖ）％トライトン（Ｔｒｉｔｏｎ）Ｘ
−１００水溶液０．５ｍｌに、０．１Ｍ塩化カルシウム
０．０５ｍ、１０．２Ｍ酢酸塩緩衝液（ｐＨ４．０）
０．２５ｍｌを加えた。次いで、酵素液０．１ｍｌを加
えて均一にして、３７℃で静置し、１０分間酵素反応を
行った。その後、１Ｎ塩酸０．１ｍｌを加えて酵素反応
を停止させた。反応液０．０２ｍｌを採り、遊離脂肪酸
定量試薬（協和メディクス社製：商品名デタミナーＮＥ
ＦＡ）を用いて、遊離脂肪酸を定量した。酵素反応１分
あたり脂肪酸１μモルを生成させる酵素活性を１単位と
定義した。
【００６６】
【発明の効果】本発明は、酸性ホスホリパーゼＡ１の作
用により、粗原油又は脱ガム油中のリン脂質を効率的に
油不溶性のリゾリン脂質に変換させ、リン脂質の油脂か
らの除去を容易にさせる優れた精製方法である。
用により、粗原油又は脱ガム油中のリン脂質を効率的に
油不溶性のリゾリン脂質に変換させ、リン脂質の油脂か
らの除去を容易にさせる優れた精製方法である。
Claims (6)
- 【請求項１】油脂を酸性ホスホリパ−ゼＡ１で処理する
ことを特徴とする油脂の精製方法。 - 【請求項２】粗原油を酸性ホスホリパ−ゼＡ１で処理す
ることを特徴とする油脂の精製方法。 - 【請求項３】脱ガム油を酸性ホスホリパ−ゼＡ１で処理
することを特徴とする油脂の精製方法。 - 【請求項４】酸性ホスホリパ−ゼＡ１を担体に固定化
後、油脂あるいは粗原油又は脱ガム油を処理することを
特徴とする油脂の精製方法。 - 【請求項５】酸性ホスホリパ−ゼＡ１が、アスペルギル
ス・オリゼ(Aspergillus oryzae)が生産するホスホリパ
−ゼＡ１である請求項１、請求項２、請求項３又は請求
項４の油脂の精製方法。 - 【請求項６】酸性ホスホリパ−ゼＡ１が、アスペルギル
ス・ニガ−(Aspergillus niger) が生産するホスホリパ
−ゼＡ１である請求項１、請求項２、請求項３又は請求
項４の油脂の精製方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9357281A JPH11131089A (ja) | 1996-12-26 | 1997-12-25 | 油脂の精製方法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8-347110 | 1996-12-26 | ||
| JP34711096 | 1996-12-26 | ||
| JP9357281A JPH11131089A (ja) | 1996-12-26 | 1997-12-25 | 油脂の精製方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11131089A true JPH11131089A (ja) | 1999-05-18 |
Family
ID=26578426
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9357281A Pending JPH11131089A (ja) | 1996-12-26 | 1997-12-25 | 油脂の精製方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH11131089A (ja) |
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002075538A1 (en) * | 2001-03-19 | 2002-09-26 | Mitsubishi Denki Kabushiki Kaisha | Vehicle-mounted multimedia device |
| WO2003102118A3 (en) * | 2002-05-30 | 2004-04-08 | Council Scient Ind Res | Process for the pre-treatment of vegetable oils for physical refining |
| WO2009028175A1 (ja) * | 2007-08-29 | 2009-03-05 | J-Oil Mills, Inc. | 加熱耐性に優れた揚げ物用油脂組成物の製造方法 |
| JP2009055897A (ja) * | 2008-02-08 | 2009-03-19 | J-Oil Mills Inc | 加熱耐性に優れた揚げ物用油脂組成物の製造方法 |
| US8241876B2 (en) | 2008-01-07 | 2012-08-14 | Bunge Oils, Inc. | Generation of triacylglycerols from gums |
| US8460905B2 (en) | 2007-09-11 | 2013-06-11 | Bunge Oils, Inc. | Enzymatic degumming utilizing a mixture of PLA and PLC phospholipases with reduced reaction time |
| JP2014064571A (ja) * | 2007-04-04 | 2014-04-17 | Basf Plant Science Gmbh | Ａｈａｓ変異体 |
| US8956853B2 (en) | 2007-01-30 | 2015-02-17 | Bunge Oils, Inc. | Enzymatic degumming utilizing a mixture of PLA and PLC phospholipases |
| JP6061119B1 (ja) * | 2016-02-03 | 2017-01-18 | 不二製油株式会社 | ココアバター |
| WO2017134839A1 (ja) * | 2016-02-03 | 2017-08-10 | 不二製油グループ本社株式会社 | ココアバター |
| CN113122387A (zh) * | 2019-12-30 | 2021-07-16 | 丰益(上海)生物技术研发中心有限公司 | 油脂脱色及塑化剂脱除方法 |
| CN116694392A (zh) * | 2023-03-22 | 2023-09-05 | 鑫鑫农业科技有限公司 | 一种有机米糠油的生产方法 |
-
1997
- 1997-12-25 JP JP9357281A patent/JPH11131089A/ja active Pending
Cited By (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002075538A1 (en) * | 2001-03-19 | 2002-09-26 | Mitsubishi Denki Kabushiki Kaisha | Vehicle-mounted multimedia device |
| WO2003102118A3 (en) * | 2002-05-30 | 2004-04-08 | Council Scient Ind Res | Process for the pre-treatment of vegetable oils for physical refining |
| US7494676B2 (en) * | 2002-05-30 | 2009-02-24 | Council Of Scientific And Industrial Research | Process for the pre-treatment of vegetable oils for physical refining |
| US8956853B2 (en) | 2007-01-30 | 2015-02-17 | Bunge Oils, Inc. | Enzymatic degumming utilizing a mixture of PLA and PLC phospholipases |
| JP2014064571A (ja) * | 2007-04-04 | 2014-04-17 | Basf Plant Science Gmbh | Ａｈａｓ変異体 |
| WO2009028175A1 (ja) * | 2007-08-29 | 2009-03-05 | J-Oil Mills, Inc. | 加熱耐性に優れた揚げ物用油脂組成物の製造方法 |
| JP2009050234A (ja) * | 2007-08-29 | 2009-03-12 | J-Oil Mills Inc | 加熱耐性に優れた揚げ物用油脂組成物の製造方法 |
| US8460905B2 (en) | 2007-09-11 | 2013-06-11 | Bunge Oils, Inc. | Enzymatic degumming utilizing a mixture of PLA and PLC phospholipases with reduced reaction time |
| US8541211B2 (en) | 2008-01-07 | 2013-09-24 | Bunge Oils, Inc. | Generation of triacylglycerols |
| US8241876B2 (en) | 2008-01-07 | 2012-08-14 | Bunge Oils, Inc. | Generation of triacylglycerols from gums |
| JP2009055897A (ja) * | 2008-02-08 | 2009-03-19 | J-Oil Mills Inc | 加熱耐性に優れた揚げ物用油脂組成物の製造方法 |
| JP6061119B1 (ja) * | 2016-02-03 | 2017-01-18 | 不二製油株式会社 | ココアバター |
| WO2017134839A1 (ja) * | 2016-02-03 | 2017-08-10 | 不二製油グループ本社株式会社 | ココアバター |
| CN108430227A (zh) * | 2016-02-03 | 2018-08-21 | 不二制油集团控股株式会社 | 可可脂 |
| KR20180109854A (ko) | 2016-02-03 | 2018-10-08 | 후지세유 그룹 혼샤 가부시키가이샤 | 코코아 버터 |
| CN108430227B (zh) * | 2016-02-03 | 2022-03-08 | 不二制油集团控股株式会社 | 相对于可可脂的光降解耐性赋予法 |
| CN113122387A (zh) * | 2019-12-30 | 2021-07-16 | 丰益(上海)生物技术研发中心有限公司 | 油脂脱色及塑化剂脱除方法 |
| CN116694392A (zh) * | 2023-03-22 | 2023-09-05 | 鑫鑫农业科技有限公司 | 一种有机米糠油的生产方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2937746B2 (ja) | 油脂の精製方法 | |
| CN105038978B (zh) | 使用pla和plc磷脂酶混合物进行的酶法脱胶 | |
| US8956853B2 (en) | Enzymatic degumming utilizing a mixture of PLA and PLC phospholipases | |
| EP0348004B1 (en) | Method of refining glyceride oils | |
| JP2709736B2 (ja) | 油脂の精製方法 | |
| CN104245908B (zh) | 用于酶法油脱胶的方法 | |
| HU213754B (en) | Enzymatic process for decreasing the quantity of phosphorous particles in plant and animal originated oils | |
| CZ298366B6 (cs) | Zpusob snižování fosfor obsahujících podílu v rostlinných olejích | |
| JPH07188691A (ja) | 酵素による植物油の脱ガム方法 | |
| JP2005527237A (ja) | 植物油の物理的精製を行うための前処理方法 | |
| SU841596A3 (ru) | Способ очистки триглицеридныхМАСЕл | |
| JPS63191899A (ja) | トリグリセリド油の脱ガム化方法 | |
| JPH11228986A (ja) | 固定化ホスホリパーゼによる脱ガム法 | |
| JPH06306386A (ja) | 油脂の精製方法 | |
| JP2794574B2 (ja) | リゾレシチンの製造方法 | |
| US8460905B2 (en) | Enzymatic degumming utilizing a mixture of PLA and PLC phospholipases with reduced reaction time | |
| US5286886A (en) | Method of refining glyceride oils | |
| Chen et al. | Immobilization of lecitase® ultra onto the organic modified SBA-15 for soybean oil degumming | |
| US6441209B1 (en) | Method for treating organic acid-treated phosphatides | |
| JP2000119682A (ja) | 米ぬか油の製造方法 | |
| CN120005675A (zh) | 一种风味脱胶牛油的制备方法 | |
| US11091721B2 (en) | Enzymatic degumming of unrefined triglyceride oil | |
| JPH0398590A (ja) | リン脂質の酵素改質方法 | |
| JPH0688090A (ja) | 油脂の精製方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| RD02 | Notification of acceptance of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422 Effective date: 20040108 |
|
| RD02 | Notification of acceptance of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422 Effective date: 20040304 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20040305 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20040402 |
|
| RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20050720 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20060306 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20060322 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20060801 |