JPH11147892A - 生理活性物質、その製造法及び剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】ヘリコバクター属菌に対して極めて特異的に強
い抗菌性を示す抗ヘリコバクター・ピロリ剤を提供す
る。 【解決手段】 【化１】 〔式中、ＲＣＯはアシル基を示す〕で表される化合物ま
たはその塩、その製造方法および医薬組成物。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は胃、十二指腸潰瘍な
どの治療剤として有用な生理活性作用を有するＨＣ−６
２関連化合物及びその塩、およびこれらを含んでなる抗
ヘリコバクター・ピロリ（Helicobacter pylori）剤に
関する。

【０００２】

【従来の技術】消化管内で有害な作用を及ぼす菌、例え
ばヘリコバクター・ピロリは、ヘリコバクター（Helico
bacter）属に属するグラム陰性の微好気性細菌であり、
胃炎、十二指腸潰瘍、胃潰瘍等の再発の大きな原因とな
る可能性が示唆されている。このヘリコバクター・ピロ
リの感染に起因する各種疾患の治療には、現在、ビスマ
ス製剤と抗生物質の二剤併用や、ビスマス製剤、メトロ
ニダゾール（米国特許第2,944,061号）及びテトラサイ
クリン（例えば米国特許第2,712,517号）もしくはアモ
キシシリン（米国特許第3,192,198号）の三剤併用等に
よる化学療法が行われている。プロトンポンプ阻害薬、
アモキシシリン及びクラリスロマイシンの三剤を併用す
ることが有効であることが見出されている（Gut 1995,
３７巻（supplment １）：A365）（Gastroenterology 1
996, １１０巻：A171）。これらビスマス製剤、抗生物
質及びメトロニダゾール等は、内服の形で投与されてい
る。また、リン酸アミド類としては、ユーロピアン・ジ
ャーナル・オブ・バイオケミストリー（European Journ
al of Biochemistry, 1981, 115, 539）には

【化３】 およびヌクレオサイズ・ヌクレオタイズ（Nucleosides
Nucleotides, 1995, 14,825）には

【化４】 が開示されておられるが、ヘリコバクター・ピロリ
（（Helicobacter pylori）に有効であると記載されて
いない。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】今後、より優れた抗ヘ
リコバクター・ピロリ剤（特に単剤として有効な医薬
品）の開発が待たれている。そこで本発明は、単剤で優
れた抗菌活性、特にヘリコバクター・ピロリなどのヘリ
コバクター属菌に対する強い抗菌活性を有し、副作用が
少なく臨床上優れた予防治療効果を発揮する新しい医薬
を提供するものである。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記問題
点に鑑み鋭意研究を重ねた結果、微生物培養液より単離
された化合物ＨＣ−６２がヘリコバクター・ピロリに代
表されるヘリコバクター属細菌に対して極めて特異的
に、且つ優れた抗菌作用を有することを見い出し、さら
に鋭意研究を重ねた結果、窒素原子に特定の基：

【化５】 が直接結合していることに化学構造上の特異性を有する
一般式

【化６】 〔式中、ＲＣＯはアシル基を示す〕で表される新規なリ
ン酸アミド類を始めて合成し、この化合物がその特異な
化学構造上に基づいて予想外にも消化管内で有害な作用
を及ぼす菌に対して優れた医薬効果特に強い抗ヘリコバ
クター属菌作用を有していること、さらに副作用が少な
い等の臨床上の医薬として優れた性質を有していること
を見い出し、これらに基づいて本発明を完成するに至っ
た。すなわち、本発明は（１）一般式

【化７】 〔式中、ＲＣＯはアシル基を示す〕で表される化合物ま
たはその塩、（２）ＲＣＯが１個ないし複数個連結した
アミノ酸残基である前記（１）記載の化合物、（３）ア
ミノ酸残基が蛋白質構成アミノ酸残基である前記（２）
記載の化合物、（４）ＲＣＯがセリル基である前記
（１）記載の化合物、（５）ＲＣＯがグルタミニルグル
タミニルセリル、グルタミニルグルタミニルグルタミニ
ルセリルまたはグルタミニル−α−グルタミルセリル基
である前記（１）記載の化合物、（６）前記（１）記載
の化合物またはその塩を含有してなる医薬、（７）前記
（１）記載の化合物またはその塩を含有することを特徴
とする抗ヘリコバクター・ピロリ剤、（８）ヘリコバク
ター・ピロリ感染疾患予防治療剤である前記（７）記載
の抗ヘリコバクター・ピロリ剤、（９）ヘリコバクター
・ピロリ感染疾患が胃もしくは十二指腸潰瘍、胃炎また
は胃癌である前記（８）記載の抗ヘリコバクター・ピロ
リ剤、（１０）前記（１）記載の化合物またはその塩と
それ以外の抗菌剤とを組み合わせてなる抗ヘリコバクタ
ー・ピロリ剤、（１１）それ以外の抗菌剤がアモキシシ
リン、クラリスロマイシンおよびメトロニダゾールから
選ばれた１種以上である前記（１０）記載の抗ヘリコバ
クター・ピロリ剤、（１２）前記（１）記載の化合物ま
たはその塩と潰瘍治療剤とを組み合わせてなる抗ヘリコ
バクター・ピロリ剤、（１３）潰瘍治療剤がプロトンポ
ンプインヒビターである前記（１２）記載の抗ヘリコバ
クター・ピロリ剤、（１４）プロトンポンプインヒビタ
ーがランソプラゾールである前記（１３）記載の抗ヘリ
コバクター・ピロリ剤、（１５）バチルス属に属し前記
（５）記載の化合物を生産する能力を有する微生物を培
地に培養し、培養液中に該化合物を生成蓄積せしめ、こ
れを採取することを特徴とする前記（５）記載の化合物
の製造法、（１６）微生物がバチルス・メガテリウムで
ある前記（１５）記載の製造法、（１７）微生物がバチ
ルス・エスピーＨＣ−６２株である前記（１５）記載の
製造法、（１８）前記（５）記載の化合物の生産能を有
するバチルス・メガテリウム、（１９）前記（５）記載
の化合物の生産能を有するバチルス・エスピーＨＣ−６
２、（２０）式

【化８】 で表される化合物またはその塩、 （２１）次の物理化学的性状を有する化合物ＨＣ−６
２； （１）分子式：Ｃ₂₄Ｈ₃₉Ｎ₁₀Ｏ₁₃Ｐ （２）ＵＶスペクトル：水中のλmax（ε）、223±3 nm
(8,900±1,500), 277±3 nm (13,300±2,000) （３）ＩＲスペクトル：ＫＢｒ錠剤中、主な吸収を示す
（波数、cm^-1）、3350, 1660, 1570, 1470, 1300, 123
0, 1080 （４）¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトル：重水中、以下のシグナ
ルが認められる（125MHz、δppm）、180.5, 179.7, 17
5.6, 175.5, 172.2, 170.2, 158.3, 154.3, 139.0,100.
3, 89.0, 88.3, 88.2, 74.0, 68.1, 68.1, 63.9, 59.3,
59.2, 56.2,55.2, 41.7, 33.8, 32.8, 32.5, 29.8, 2
9.3 またはその塩に関する。

【０００５】ＲＣＯの「アシル基」としては、例えば１
個ないし複数個連結したアミノ酸残基、置換されていて
もよいアルカノイル基、置換されていてもよいアロイル
基、置換されていてもよい複素環カルボニル基、置換さ
れていてもよいカルバモイル基、置換されていてもよい
チオカルバモイル基、置換されていてもよいアルコキシ
カルボニル基、置換されていてもよいアリールオキシカ
ルボニル基などが挙げられる。これらの中では、例えば
１個ないし複数個連結したアミノ酸残基などが好まし
い。１個ないし複数個連結したアミノ酸残基としては、
例えば下記のアミノ酸から任意に選ばれる１個ないし２
０個（好ましくは８ないし１２個、特に好ましくは１０
個）連結したものが挙げられる。

【０００６】アミノ酸残基におけるアミノ酸とは、カル
ボン酸の母体構造の水素原子の少なくとも１つがアミノ
基に置換された基を総称するものであり、炭素数２ない
し２０の母体構造を有するα−、β−、γ−またはδ−
アミノ酸等が挙げられる。このようなアミノ酸の例とし
ては、α−アミノ酸が好ましく、例えばアラニン、アル
ギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、
グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、ロ
イシン、イソロイシン、リジン、メチオニン、フェニル
アラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトフ
ァン、チロシン、バリン等のアミノ酸やその他、ノルバ
リン、ノルロイシン、２−アミノアジピン酸、２−アミ
ノ酪酸、２−アミノイソ酪酸、１−アミノシクロプロパ
ンカルボン酸、１−アミノシクロペンタンカルボン酸、
１−アミノシクロヘキサンカルボン酸、チロニン、オル
ニチン、ヒドロキシプロリン、ヒドロキシリジン、（２
−ナフチル）アラニン、アザグリシン等のアミノ酸等が
例示される。１個ないし複数個連結したアミノ酸残基の
具体例としては例えば、グルタミニルグルタミニルセリ
ル、グルタミニルグルタミニルグルタミニルセリル、グ
ルタミニル−α−グルタミルセリル、グルタミニルセリ
ル、セリル等が挙げられ、グルタミニルグルタミニルセ
リルが好ましい。

【０００７】該「置換されていてもよいアルカノイル
基」の「アルカノイル基」としては、例えばＣ_1-20アル
カノイル基（例えば、ホルミル、アセチル、プロピオニ
ル、イソプロピオニル、ブチリル、ペンタノイル、ヘキ
サノイル、ヘプタノイル、オクタノイル、ノナノイル、
ラウロイル、ウンデカノイル、ミリストイル、パルミト
イル、ステアロイルなど）などが挙げられ、特にＣ_1-6
アルカノイル基（例えば、ホルミル、アセチル、プロピ
オニル、イソプロピオニル、ブチリル、ペンタノイル、
ヘキサノイルなど）などが好ましい。該「置換されてい
てもよいアロイル基」の「アロイル基」としては、例え
ばＣ_7-16アロイル基（例えば、ベンゾイル、１−ナフト
イル、２−ナフトイルなど)などが挙げられる。該「置
換されていてもよい複素環カルボニル基」の「複素環カ
ルボニル基」としては、炭素原子以外にヘテロ原子(例
えば、窒素、酸素、硫黄など)を１ないし４個含む５ま
たは６員複素環カルボニル基（例えば、３−ピロリルカ
ルボニル、２−イミダゾリルカルボニル、１−ピラゾリ
ルカルボニル、３−イソチアゾリルカルボニル、３−イ
ソオキサゾリルカルボニル、ピラジニルカルボニル、２
−ピリミジニルカルボニル、３−ピラジニルカルボニ
ル、２−インドリジニルカルボニル、２−イソインドリ
ルカルボニル、１−インドリルカルボニル、２−フロイ
ル、２−テノイル、ニコチニル、イソニコチニル、モル
ホリノカルボニル、ピペリジノカルボニル、ピペラジノ
カルボニルなど)などが挙げられる。

【０００８】該「置換されていてもよいカルバモイル
基」は、カルバモイル基、モノ置換カルバモイル基、ジ
置換カルバモイル基を含み、その置換基としては、例え
ばＣ_1-6アルキル基（例えば、メチル、エチル、プロピ
ル、イソプロピル、ブチル、イソブチルなど）、Ｃ_6-14
アリール基（例えば、フェニル、１−ナフチル、２−ナ
フチルなど）、Ｃ_7-16アラルキル基（例えば、ベンジル
など）、Ｃ_1-6アルカノイル基（例えば、アセチル、プ
ロピオニル、イソプロピオニル、ブチリルなど）、Ｃ
_7-16アロイル基（例えば、ベンゾイル、１−ナフトイ
ル、２−ナフトイルなど)、５または６員の複素環カル
ボニル基（例えば、３−ピロリルカルボニル、２−イミ
ダゾリルカルボニル、１−ピラゾリルカルボニル、３−
イソチアゾリルカルボニル、３−イソオキサゾリルカル
ボニル、ピラジニルカルボニル、２−ピリミジニルカル
ボニル、３−ピラジニルカルボニル、２−インドリジニ
ルカルボニル、２−イソインドリルカルボニル、１−イ
ンドリルカルボニル、２−フロイル、２−テノイル、ニ
コチニル、イソニコチニル、モルホリノカルボニル、ピ
ペリジノカルボニル、ピペラジノカルボニルなど)など
が挙げられる。該「置換されていてもよいカルバモイル
基」の好ましい例としては、例えばモノ−またはジ−Ｃ
_1-6アルカノイル−カルバモイル基（例えば、アセチル
カルバモイルなど）などが挙げられる。

【０００９】該「置換されていてもよいチオカルバモイ
ル基」は、チオカルバモイル基、モノ置換チオカルバモ
イル基、ジ置換チオカルバモイル基を含み、その置換基
としては、例えばＣ_1-6アルキル基（例えば、メチル、
エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル
など）、Ｃ_6-14アリール基（例えば、フェニル、１−ナ
フチル、２−ナフチルなど）、Ｃ_7-16アラルキル基（例
えば、ベンジルなど）、Ｃ_1-6アルカノイル基（例え
ば、アセチル、プロピオニル、イソプロピオニル、ブチ
リルなど）、Ｃ_7-16アロイル基（例えば、ベンゾイル、
１−ナフトイル、２−ナフトイルなど)、５または６員
の複素環カルボニル基（例えば、３−ピロリルカルボニ
ル、２−イミダゾリルカルボニル、１−ピラゾリルカル
ボニル、３−イソチアゾリルカルボニル、３−イソオキ
サゾリルカルボニル、ピラジニルカルボニル、２−ピリ
ミジニルカルボニル、３−ピラジニルカルボニル、２−
インドリジニルカルボニル、２−イソインドリルカルボ
ニル、１−インドリルカルボニル、２−フロイル、２−
テノイル、ニコチニル、イソニコチニル、モルホリノカ
ルボニル、ピペリジノカルボニル、ピペラジノカルボニ
ルなど)などが挙げられる。該「置換されていてもよい
チオカルバモイル基」の好ましい例としては、例えばモ
ノ−またはジ−Ｃ_1-6アルカノイル−チオカルバモイル
基（例えば、アセチルチオカルバモイルなど）などが挙
げられる。

【００１０】該「置換されていてもよいアルコキシカル
ボニル基」の「アルコキシカルボニル基」としては、例
えばＣ_1-20アルコキシ−カルボニル基（例えば、メトキ
シカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボ
ニル、イソプロポキシカルボニル、ブトキシカルボニ
ル、イソブトキシカルボニルなど）などが挙げられ、例
えばＣ_1-6アルコキシ−カルボニル基（例えば、メトキ
シカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボ
ニルなど）などが挙げられる。該「置換されていてもよ
いアリールオキシカルボニル基」の「アリールオキシカ
ルボニル基」とは、Ｃ_6-14アリールオキシ−カルボニル
基（例えば、フェノキシカルボニル、１−ナフチルオキ
シカルボニル、２−ナフチルオキシカルボニルなど)な
どを示す。

【００１１】「アシル基」において「アルカノイル基、
アロイル基、複素環カルボニル基、アルコキシカルボニ
ル基、アリールオキシカルボニル基」が有していてもよ
い置換基としては、本発明の目的が達成される限り、特
に限定されないが、例えばアミノ基、モノ−またはジ−
Ｃ_1-6アルキルアミノ基（例えば、メチルアミノ、エチ
ルアミノ、プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ジメ
チルアミノ、ジエチルアミノなど）、モノ−またはジ−
Ｃ_6-10アリールアミノ基（例えば、フェニルアミノ、ジ
フェニルアミノなど）、モノ−またはジ−Ｃ_7-11アラル
キルアミノ基（例えば、ベンジルアミノ、ジベンジルア
ミノなど）、アジド基、ニトロ基、ハロゲン（例えば、
フッ素、塩素、臭素、ヨウ素など）、ヒドロキシル基、
Ｃ_1-6アルコキシ基（例えば、メトキシ、エトキシ、プ
ロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシなど）、Ｃ_6-10ア
リールオキシ基（例えば、フェノキシ、１−ナフチルオ
キシ、２−ナフチルオキシなど）、Ｃ_7-11アラルキルオ
キシ基（例えば、ベンジルオキシなど）、ホルミルオキ
シ基、Ｃ_1-6アルキル−カルボニルオキシ基（例えば、
アセトキシ、プロピオニルオキシなど）、Ｃ_6-10アリー
ル−カルボニルオキシ基（例えば、ベンゾイルオキシな
ど）、Ｃ_7-11アラルキル−カルボニルオキシ基（例え
ば、ベンジルカルボニルオキシなど）、スルホニルオキ
シ基、Ｃ_1-6アルキルスルホニルオキシ基（例えば、メ
チルスルホニルオキシなど）、メルカプト基、Ｃ_1-6ア
ルキルチオ基（例えば、メチルチオ、エチルチオ、プロ
ピルチオ、イソプロピルチオなど）、Ｃ_6-10アリールチ
オ基（例えば、フェニルチオ、１−ナフチルチオ、２−
ナフチルチオなど）、Ｃ_7-11アラルキルチオ基（例え
ば、ベンジルチオなど）、ホスホノオキシ基、シアノ
基、カルバモイル基、モノ−またはジ−Ｃ_1-6アルキル
カルバモイル基（例えば、メチルカルバモイル、エチル
カルバモイル、ジメチルカルバモイル、ジエチルカルバ
モイルなど）、モノ−またはジ−Ｃ_6-10アリールカルバ
モイル基（例えば、フェニルカルバモイル、ジフェニル
カルバモイルなど）、モノ−またはジ−Ｃ_7-11アラルキ
ルカルバモイル基（例えば、ベンジルカルバモイル、ジ
ベンジルカルバモイルなど）、カルボキシル基、Ｃ_1-6
アルコキシ−カルボニル基（例えば、メトキシカルボニ
ル、エトキシカルボニルなど）、Ｃ_6-10アリールオキシ
−カルボニル基（例えば、フェノキシカルボニル、１−
ナフチルオキシカルボニル、２−ナフチルオキシカルボ
ニルなど)、Ｃ_7-11アラルキルオキシ−カルボニル基
（例えば、ベンジルオキシカルボニルなど）、ホルミル
基、Ｃ_1-6アルキル−カルボニル基（例えば、アセチ
ル、プロピオニル、イソプロピオニル、ブチリル、ペン
タノイル、ヘキサノイルなど）、Ｃ_6-10アリール−カル
ボニル基（例えば、ベンゾイル、１−ナフトイル、２−
ナフトイルなど）、Ｃ_7-11アラルキル−カルボニル基
（例えば、ベンジルカルボニルなど）、スルホ基、Ｃ
_1-6アルキルスルフィニル基（例えば、メチルスルフィ
ニル、エチルスルフィニルなど）、Ｃ_6-10アリールスル
フィニル基（例えば、ベンゼンスルフィニル、１−ナフ
チルスルフィニル、２−ナフチルスルフィニルなど）、
Ｃ_1-6アルキルスルホニル基（例えば、メチルスルホニ
ル、エチルスルホニルなど）、Ｃ_6-10アリールスルホニ
ル基（例えば、ベンゼンスルホニル、１−ナフチルスル
ホニル、２−ナフチルスルホニルなど)、Ｃ_1-6アルキル
基（例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピ
ル、ブチル、イソブチル、sec−ブチルなど)、Ｃ_2-6ア
ルケニル基（例えば、ビニル、アリル、２−ブテニルな
ど)、Ｃ_2-6アルキニル基（例えば、エチニル、プロパル
ギルなど）、Ｃ_3-6シクロアルキル基（例えば、シクロ
プロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキ
シルなど）、Ｃ_3-6シクロアルケニル基（例えば、シク
ロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シ
クロヘキサジエニルなど）、Ｃ_6-10アリール基（例え
ば、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチルなど)、１
ないし３環式複素環基（例えば、窒素、酸素、硫黄から
選ばれたヘテロ原子を１ないし４個含む５または６員環
１ないし３個から形成される複素環基：ピリジル、ピラ
ジル、ピリミジル、キノリル、イソキノリル、インドリ
ル、イソインドリル、インダゾリル、ピリダジニル、イ
ミダゾリル、ピラゾリル、ピロリル、フリル、ベンゾフ
ラニル、チエニル、ベンゾチエニル、ベンズイミダゾリ
ル、キナゾリル、ピロリジニル、ピロリニル、イミダゾ
リジニル、イミダゾリニル、ピラゾリジニル、ピラゾリ
ニル、ピペリジル、ピペラジニル、インドリジル、イソ
インドリジル、モルホリニルなど）、１ないし３環式複
素環チオ基（例えば、前記の複素環基にチオ基が結合し
た基、具体的には、４−ピリジルチオ、２−ピリミジル
チオ、１,3,４−チアジアゾール−２−イルチオ、５−
テトラゾリルチオ、２−ベンゾチアゾリルチオ、８−キ
ノリルチオなど）などが用いられる。これらの置換基
は、前記「アルカノイル基、アロイル基、複素環カルボ
ニル基、アルコキシカルボニル基、アリールオキシカル
ボニル基」上に化学的に許容される範囲において置換さ
れ、この置換基の数は１ないし５、好ましくは１ないし
３個である。ただし、置換基の数が２個以上の場合は同
一または異なっていてもよい。これらの置換基は、化学
的に許されるならば、さらに、アミノ基、モノ−または
ジ−Ｃ_1-6アルキルアミノ基、ニトロ基、ハロゲン、ヒ
ドロキシル基、Ｃ_1-6アルコキシ基、Ｃ_1-6アルキル−カ
ルボニルオキシ基、スルホニルオキシ基、Ｃ_1-6アルキ
ルスルホニルオキシ基、メルカプト基、Ｃ_1-6アルキル
チオ基、ホスホノオキシ基、シアノ基、カルバモイル
基、モノ−またはジ−Ｃ_1-6アルキルカルバモイル基、
カルボキシル基、Ｃ_1-6アルコキシ−カルボニル基、ホ
ルミル基、Ｃ_1-6アルキル−カルボニル基、スルホ基、
Ｃ_1-6アルキルスルフィニル基などから選ばれる１ない
し３個の置換基で置換されていてもよい。

【００１２】ＲＣＯは、式Ｒ^a−Ｒ^b−Ｒ^C−〔Ｒ^aは水素
原子または置換されていてもよいアミノ酸残基を、Ｒ^b
およびＲ^cは同一または異なって結合手、置換されてい
てもよいアミノ酸残基またはＹ−Ｒ^d−（Ｒ^dは置換され
ていてもよいアミノ酸残基からイミノ基を除いた基を、
Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−または−ＮＲ^e−（Ｒ^eは水素原子ま
たは低級アルキル基を示す）を示す）〕で表わされる基
で例示することもできる。ここで、Ｒ^a、Ｒ^bおよびＲ^c
で示される「アミノ酸残基」およびＲ^dで示される「ア
ミノ酸残基からイミノ基を除いた基」におけるアミノ酸
とは、カルボン酸の母体構造の水素原子の少なくとも１
つがアミノ基に置換された基を総称するものであり、炭
素数２ないし２０の母体構造を有するα−、β−、γ−
またはδ−アミノ酸等が挙げられる。このようなアミノ
酸の例としては、α−アミノ酸が好ましく、例えばアラ
ニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、シ
ステイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒス
チジン、ロイシン、イソロイシン、リジン、メチオニ
ン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニ
ン、トリプトファン、チロシン、バリン等のアミノ酸や
その他、ノルバリン、ノルロイシン、２−アミノアジピ
ン酸、２−アミノ酪酸、２−アミノイソ酪酸、１−アミ
ノシクロプロパンカルボン酸、１−アミノシクロペンタ
ンカルボン酸、１−アミノシクロヘキサンカルボン酸、
チロニン、オルニチン、ヒドロキシプロリン、ヒドロキ
シリジン、（２−ナフチル）アラニン、アザグリシン等
のアミノ酸等が例示される。

【００１３】また、ここにおけるアミノ酸としては環状
イミノ酸も含まれる。「環状イミノ酸」としては、シク
ロアルカンカルボン酸またはシクロアルケンカルボン酸
のメチレン基の少なくとも１つがイミノ基に置換された
ものが挙げられ、具体的にはプロリン、ヒドロキシプロ
リン、３,４−デヒドロプロリン、ピペコリン酸、

【化９】 アジリジンカルボン酸、２−アゼチジンカルボン酸

【化１０】 等が挙げられ、例えばプロリン、ヒドロキシプロリンま
たはピペコリン酸等が好ましい。そして、本明細書にお
けるアミノ酸残基は、一般にペプチド化学で用いられて
いるアミノ酸残基であってもよく、前記アミノ酸から導
かれるもの等が用いられる。

【００１４】Ｒ^dで示される「アミノ酸残基からイミノ
基（−ＮＨ−）を除いた基」としては、前記したアミノ
酸残基よりイミノ基を除いたアシル基等が用いられ、例
えば直鎖状または分岐鎖状のＣ_1-10アルキル基（例えば
メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イ
ソブチル、sec−ブチル、tert−ブチル、ペンチル、イ
ソペンチル、ネオペンチル、tert−ペンチル、１−エチ
ルプロピル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、オク
チル、デシル等）、Ｃ_2-10アルケニル基（例えばビニ
ル、アリル、イソプロペニル、１−プロペニル、２−メ
チル−１−プロペニル、１−、２−または３−ブテニ
ル、２−エチル−１−ブテニル、３−メチル−２−ブテ
ニル、１−、２−、３−または４−ペンテニル、４−メ
チル−３−ペンテニル、１−、２−、３−、４−または
５−ヘキセニル、その他特定の位置に二重結合を有する
ヘプテニル、オクテニル、デセニル等）、Ｃ_7-20アラル
キル基（例えばベンジル、フェネチル、３−フェニルプ
ロピル、１−ナフチルメチル、２−ナフチルメチル、９
−フルオレニルメチル等）、Ｃ_3-7シクロアルキル（例
えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、
シクロヘキシル、シクロヘプチル等）、Ｃ_3-7シクロア
ルケニル（例えば２−シクロペンテン−１−イル、３−
シクロペンテン−１−イル、２−シクロヘキセン−１−
イル、３−シクロヘキセン−１−イル等）、Ｃ_6-15アリ
ール（例えばフェニル、ナフチル、アントリル、フェナ
ントリル、アセナフチレニル、フルオレニル等）、Ｃ
_3-20単環式もしくは縮合多環式複素環アラルキル基（例
えば４−イミダゾリルメチル、３−ピリジルメチル、４
−チアゾリルメチル、３−インドリルメチル、３−キノ
リルメチル等）等を母体構造として有するカルボン酸よ
り導かれるアシル基等が挙げられる。

【００１５】これらのアミノ酸残基およびアミノ酸残基
がイミノ基を除いた基は、それぞれ適当な位置に置換基
を１個以上好ましくは１ないし３個有していてもよく、
それらの置換基としては例えば、アミノ基、アシル置換
アミノ基、グアニジノ基、アシルグアニジノ基、アシル
アミジノ基、アミジノ基、アシル基、カルバモイル基、
Ｎ−モノ−またはジ−低級アルキルカルバモイル基、カ
ルボキシル基、低級アルコキシカルボニルオキシ基、ヒ
ドロキシル基、アシルヒドロキシル基、低級アルコキシ
基、フェノキシ基、メルカプト基、アシルメルカプト
基、低級アルキルチオ基、フェニルチオ基、スルホ基、
シアノ基、アジド基、ニトロ基、ニトロソ基、ハロゲン
原子等が挙げられる。ここにおいてアシル置換アミノ
基、アシルグアニジノ基、アシルアミジノ基、アシルヒ
ドロキシル基およびアシルメルカプト基における置換基
としての「アシル基」としては、前記したＲＣＯの「ア
シル基」と同様なものが挙げられる。

【００１６】「低級アルキルカルバモイル基」の低級ア
ルキル基としては、例えばメチル、エチル、プロピル、
イソプロピル、ブチル、イソブチルなどのＣ_1-6アルキ
ル基が挙げられる。「低級アルコキシカルボニルオキシ
基」としては、例えば、メトキシカルボニルオキシ、エ
トキシカルボニルオキシ、プロポキシカルボニルオキ
シ、イソプロポキシカルボニルオキシ、ブトキシカルボ
ニルオキシ、イソブトキシカルボニルオキシ等のＣ_1-6
アルコキシ−カルボニルオキシ基等が挙げられる。「低
級アルコキシ基」としては、例えばメトキシ、エトキ
シ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブト
キシ等のＣ_1-6アルコキシ基等が挙げられる。「低級ア
ルキルチオ基」としては例えば、メチルチオ、エチルチ
オ、プロピルチオ、イソプロピルチオ等のＣ_1-6アルキ
ルチオ基等が挙げられる。Ｒ^eで示される低級アルキル
基としては、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプ
ロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシルなどのＣ_1-6アル
キル基などが挙げられる。

【００１７】一般式（I）、（II）、（III）、（IV）及
び（V）で表される化合物又はその塩は、それぞれ以下
化合物（I）、（II）、（III)、（IV）及び（V）と称す
ることもある。本発明の化合物（I）は、以下に示す反
応式の略図（略図中の化合物の i-Prはイソプロピル基
を、Ｒは前記と同意義を示す）に示すとおり例えば化合
物（II）と化合物（III）とを縮合させて得られる化合
物（IV）を酸化反応に付し、化合物（V）に誘導後、脱
保護反応に付すことにより製造することが可能である。
原料化合物及び合成中間体は、遊離体のほか化合物
（I）と同様の塩として用いてもよく、また反応混合液
のままあるいは公知の手段に従って単離した後に反応に
供してもよい。

【化１１】 まず、化合物（II）を化合物（III）との縮合反応に付
すことにより化合物（IV）を合成することができる。こ
の反応は自体公知の手段、例えばヌクレオサイズ・ヌク
レオタイズ（Nucleosides Nucleotides）., １９９５,
１４（３−５），８２５などに記載の手段またはこれら
に準じた手段によって行うことができる。式（II）で表
される化合物は、例えば（Bioorganicheskaya Khimiya
１９７７, ３（５），６３３）に記載された方法に準じ
て合成できるし、下記の参考例１で述べる微生物を利用
する方法で製造することもできる。化合物（III）は、
例えばヌクレオサイズ・ヌクレオタイズ（Nucleosides
nucleotides）., １９９５, １４（３−５），８２５に
記載された方法に準じて合成できる。ついで、化合物
（IV）を酸化反応に付すことにより、化合物（V）に誘
導後、塩基性条件下で脱保護反応に付すことにより化合
物（I）を合成することができる。この酸化反応及び脱
保護反応は自体公知の方法、例えばヌクレオサイズ・ヌ
クレオタイズ（Nucleosides Nucleotides）., １９９
５, １４（３−５）, ８２５などに記載の方法またはこ
れらに準じた方法によって行うことができる。酸化剤と
しては、反応が進行する限り特に限定されないが、例え
ば tert−ブチルヒドロペルオキシドが用いられる。脱
保護反応における塩基としては、反応が進行する限り特
に限定されないが、例えばアンモニア等が用いられる。

【００１８】式Ｒ^a−Ｒ^b−Ｒ^c−においてＲ^a、Ｒ^b、Ｒ^c
の各ユニット間の結合がアミド結合あるいはエステル結
合のいずれの場合においても、他の官能基が適当な保護
基により保護されていてもよいＲ^dのカルボン酸を活性
化し、これともう一方の適当な保護基により保護されて
いてもよいアミンあるいはアルコール化合物とを縮合す
る事ができる。上記反応におけるカルボン酸の反応性誘
導体は、例えば 酸ハロゲン化物法、アジド法、混合酸
無水物法（“他の酸”として塩化イソブチルオキシカル
ボニルや塩化ピバル酸等が用いられる）、対称酸無水物
法、さらには縮合剤としてＮ,Ｎ'−カルボジイミダゾー
ル、Ｎ,Ｎ'−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ,Ｎ'
−ジイソプロピルカルボジイミド、１−エチル−３−
（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、Ｎ−
エトキシカルボニル−２−エトキシ−１,２−ジヒドロ
キノリン、ジエチル ホスホロシアニダート、ジフェニ
ル ホスホリルアジド、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾー
ル−１−イル）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウ
ム・テトラフルオロボレイト、２−（１Ｈ−ベンゾトリ
アゾール−１−イル）−１,１,３,３−テトラメチルウ
ロニウム・ヘキサフルオロホスフェート、ベンゾトリア
ゾール−１−イル−オキシ−トリス（ジメチルアミノ）
ホスホニウム・ヘキサフルオロホスフェート、ベンゾト
リアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−
ホスホニウム・ヘキサフルオロホスフェート、ブロモ−
トリス−ピロリジノ−ホスホニウム・ヘキサフルオロホ
スフェート、２−（５−ノルボルネン−２,３−ジカル
ボキシイミド）−テトラメチルウロニウム テトラフル
オロボレイト等を用いる方法、また４−ジメチルアミノ
ピリジン、３−ヒドロキシ−３,４−ジヒドロ−４−オ
キソ−１,２,３−ベンゾトリアゾール、Ｎ−ヒドロキシ
こはく酸イミド、Ｎ−ヒドロキシ−５−ノルボルネン−
２,３−ジカルボキシイミド、１−ヒドロキシベンゾト
リアゾール等の存在下に上記縮合剤を作用させる方法、
もしくはこれらを用いた活性エステル法等を用いること
により、製造することができる。

【００１９】上記反応は、通常、溶媒中で、カルボン酸
の反応性誘導体に対してアミンあるいはアルコール化合
物を０.５ないし１０モル当量用いて行われる。溶媒と
しては、例えばベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香
族炭化水素類、例えばジクロロメタン、クロロホルム等
のハロゲン化炭化水素類、例えばヘキサン、ヘプタン、
シクロヘキサン等の飽和炭化水素類、例えばジエチルエ
ーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエーテル
類、例えばアセトニトリル等のニトリル類、例えばジメ
チルスルホキシド等のスルホキシド類、例えばＮ,Ｎ−
ジメチルホルムアミド等の酸アミド類、例えば酢酸エチ
ル等のエステル類等または水が用いられる。これらの溶
媒は単独で用いることもできるし、また必要に応じて二
種またはそれ以上の多種類を適当な割合、例えば１：１
ないし１：１０の割合で混合して用いてもよい。反応温
度は、通常−８０ないし１００℃、好ましくは−５０な
いし５０℃程度である。反応時間は、１ないし９６時
間、好ましくは１ないし７２時間程度である。縮合反応
の後は必要ならば精製操作を経て部分的に保護基を除去
し、次の同様の縮合反応に付すこともできるし、得られ
た縮合生成物が保護された最終目的物の場合は全保護基
を除去し、必要な場合は精製して純粋な目的物を得る事
ができる。上記の一連の合成反応で用いられる種々のア
ミノ基、カルボキシル基、ヒドロキシル基、カルボニル
基等の保護基としては下記のようなものを用いることが
できる。

【００２０】アミノ基の保護基としては、例えばホルミ
ル、アセチル、クロロアセチル、ジクロロアセチル、ト
リクロロアセチル、トリフルオロアセチル、アセトアセ
チル、ｏ−ニトロフェニルアセチル等のアミドを形成す
るタイプの保護基；例えばtert−ブトキシカルボニル、
ベンジルオキシカルボニル、ｐ−メトキシベンジルオキ
シカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル、
２−クロロベンジルオキシカルボニル、２,４−ジクロ
ロベンジルオキシカルボニル、ベンズヒドリルオキシカ
ルボニル、２,２,２−トリクロロエトキシカルボニル、
２−トリメチルシリルエトキシカルボニル、１−メチル
−１−（４−ビフェニリル）エトキシカルボニル、９−
フルオレニルメトキシカルボニル、９−アントリルメト
キシカルボニル、イソニコチニルオキシカルボニル、１
−アダマンチルオキシカルボニル等のカルバメートを形
成するタイプの保護基；ならびにトリチル、フタロイル
等が挙げられる。

【００２１】水酸基の保護基としては、例えばメトキシ
メチル、ベンジルオキシメチル、tert−ブトキシメチ
ル、２−メトキシエトキシメチル、２−（トリメチルシ
リル）エトキシメチル、メチルチオメチル、２−テトラ
ヒドロピラニル、４−メトキシ−４−テトラヒドロピラ
ニル、２−テトラヒドロピラニル、ベンジル、ｐ−メト
キシベンジル、ｐ−ニトロベンジル、ｏ−ニトロベンジ
ル、２,６−ジクロルベンジル、トリチル等のエーテル
を形成するタイプの保護基；例えばトリメチルシリル、
トリエチルシリル、トリイソプロピルシリル、イソプロ
ピルジメチルシリル、ジエチルイソプロピルシリル、te
rt−ブチルジメチルシリル、tert−ブチルジフェニルシ
リル、トリベンジルシリル、トリフェニルシリル、メチ
ルジフェニルシリル等のシリルエーテルを形成するタイ
プの保護基；例えばホルミル、アセチル、クロロアセチ
ル、ジクロロアセチル、トリクロロアセチル、ピバロイ
ル、ベンゾイル、ベンジルオキシカルボニル、２−ブロ
モベンジルオキシカルボニル等のエステルを形成するタ
イプの保護基等が挙げられる。カルボキシル基の保護基
の好適な例としては、例えばメチル、エチル、メトキシ
メチル、メトキシエトキシメチル、ベンジルオキシメチ
ル、tert−ブチル、ベンジル、ｐ−メトキシベンジル、
ｐ−ニトロベンジル、ｏ−ニトロベンジル、ベンズヒド
リル、トリチル、２,２,２−トリクロロエチル、２−ト
リメチルシリルエチル、アリル、シクロヘキシル、シク
ロペンチル、フェナシル等のエステルを形成するタイプ
の保護基；例えばトリメチルシリル、トリエチルシリ
ル、tert−ブチルジメチルシリル、イソプロピルジメチ
ルシリル、ジメチルフェニルシリル等のシリルエステル
を形成するタイプの保護基等が挙げられる。

【００２２】カルボニル基の保護基としては、例えばジ
メチル、ジエチル、ジベンジル、ジアセチル等のアセタ
ールやケタール、もしくはジチオアセタールやジチオケ
タールを形成するタイプの保護基；置換されていてもよ
い１,３−ジオキサン、１,３−ジオキソラン類を形成す
るタイプや１,３−ジチアンや１,３−ジチオランを形成
するタイプ、さらには、Ｎ,Ｎ−ジメチル、２,４−ジニ
トロフェニル等の置換ヒドラゾンを形成するタイプの保
護基等が挙げられる。これらのアミノ基の保護基、水酸
基の保護基、カルボニル基の保護基およびカルボキシル
基の保護基を除去する方法としては、例えば酸による方
法、塩基による方法、還元による方法、紫外線による方
法、ヒドラジンによる方法、フェニルヒドラジンによる
方法、Ｎ−メチルジチオカルバミン酸ナトリウムにる方
法、テトラブチルアンモニウムフルオリドによる方法、
酢酸パラジウムによる方法、塩化水銀による方法、ルイ
ス酸による方法等が挙げられ、これら一般的な方法ある
いはその他の公知の手段を適宜選択して用いることがで
きる。ここで、酸による方法は、アミド、エステル、シ
リルエステル、シリルエーテル等を加水分解する一般的
な方法の一つであり、対応する保護基の脱離に適用され
る。例えばtert−ブトキシカルボニル、ｐ−メトキシベ
ンジルオキシカルボニル、ベンズヒドリルオキシカルボ
ニル、９−アントリルメトキシカルボニル、１−メチル
−１−（４−ビフェニル）エトキシカルボニル、ダマン
チルオキシカルボニル、トリチル等で保護されたアミノ
基；例えばメトキシメチル、tert−ブトキシメチル、２
−テトラヒドロピラニル、４−メトキシ−４−テトラヒ
ドロピラニル、２−テトラヒドロフラニル、トリチル等
で保護されたヒドロキシル基等の脱保護にも繁用され
る。使用される酸の好適な例としては、例えばギ酸、ト
リフルオロ酢酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンス
ルホン酸等の有機酸；例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸等
の無機酸等が挙げられる。

【００２３】塩基による方法は、酸による方法と同様に
アミド、エステル等を加水分解する一般的な方法の一つ
であり、対応する保護基の脱離に適用される。例えば、
９−フルオレニルメトキシカルボニルで保護されたアミ
ノ基の脱保護には有機塩基類が有効に用いられる。使用
される塩基の好適な例としては、例えば水酸化リチウ
ム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の水酸化アル
カリ金属、水酸化マグネシウム、水酸化カルシウム等の
水酸化アルカリ土類金属、炭酸ナトリウム、炭酸カリウ
ム等の炭酸アルカリ金属、炭酸マグネシウム、炭酸カル
シウム等の炭酸アルカリ土類金属、炭酸水素ナトリウ
ム、炭酸水素カリウム等の炭酸水素アルカリ金属、酢酸
ナトリウム、酢酸カリウム等の酢酸アルカリ金属、リン
酸カルシウム、リン酸マグネシウム等のリン酸アルカリ
土類金属、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素二カリ
ウム等のリン酸水素アルカリ金属ならびにアンモニア水
等の無機塩基；例えばトリメチルアミン、トリエチルア
ミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、ピコリ
ン、Ｎ−メチルピロリジン、ピペリジン、Ｎ−メチルピ
ペリジン、Ｎ−メチルモルホリン、１,５−ジアザビシ
クロ〔４.３.０〕ノン−５−エン、１,４−ジアザビシ
クロ〔２.２.２〕オクタン、１,８−ジアザビシクロ
〔５.４.０〕−７−ウンデセン等の有機塩基等が挙げら
れる。

【００２４】還元による方法は、例えばトリクロロアセ
チル、トリフルオロアセチル、ｏ−ニトロフェニルアセ
チル、２,２,２−トリクロロエトキシカルボニル、ベン
ジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカル
ボニル、２,４−ジクロロベンジルオキシカルボニル、
イソニコチニルオキシカルボニル、トリチル等で保護さ
れたアミノ基；例えばベンジル、ｐ−ニトロベンジル等
で保護されたヒドロキシル基；例えばベンジルオキシメ
チル、ベンジル、ｐ−ニトロベンジル、フェナシル、
２,２,２−トリクロルエチル、ベンズヒドリル等で保護
されたカルボキシル基等の脱保護に適用される。使用さ
れる還元法の好適な例としては、例えば水素化ホウ素ナ
トリウムによる還元、亜鉛／酢酸による還元、接触還元
等が挙げられる。紫外線による方法は、例えばｏ−ニト
ロベンジルで保護されたヒドロキシル基ならびにカルボ
キシル基の脱保護に用いられる。ヒドラジンによる方法
は、例えばフタロイルで保護されたアミノ基（例えばフ
タルイミド基等）の脱保護に用いられる。フェニルヒド
ラジンによる方法は、例えばアセトアセチルで保護され
たアミノ基の脱保護に用いられる。

【００２５】Ｎ−メチルジチオカルバミン酸ナトリウム
による方法は、例えばクロロアセチルで保護されたアミ
ノ基ならびにヒドロキシル基の脱保護に用いられる。テ
トラブチルアンモニウムフルオリドによる方法は、例え
ば２−トリメチルシリルエチルカルバメート、シリルエ
ーテル類ならびにシリルエステル類から保護基を除去
し、それぞれアミノ基、ヒドロキシル基ならびにカルボ
キシル基を得る方法として用いられる。酢酸パラジウム
による方法は、例えばアリルエステルから保護基を除去
してカルボキシル基を得る方法として用いられる。塩化
水銀による方法は、例えばメチルチオメチルで保護され
たヒドロキシル基の脱保護に用いられる。ルイス酸によ
る方法は、例えば２−メトキシエトキシメチルで保護さ
れたヒドロキシル基の脱保護に用いられる。使用される
ルイス酸の好適な例としては、例えば臭化亜鉛、四塩化
チタン等が挙げられる。また上記した一連の反応で得ら
れる、中間体、生成物、最終生成物は、必要に応じて、
公知のあるいはそれに準ずる分離精製手段、例えば濃
縮、減圧濃縮、溶媒抽出、晶出、再結晶、転溶、クロマ
トグラフィー等により単離精製することができる。ま
た、本発明化合物（I）（以下「ＨＣ−６２類」と称す
ることもある）は例えば微生物を利用する以下の方法で
製造することもできる。

【００２６】本製造法において用いられる微生物として
は、たとえば日本国福井県の土壌から分離したバチルス
・エスピーＨＣ−６２株（Bacillus sp. ＨＣ−６２；
以下「ＨＣ−６２株」と称することもある）があげられ
る。ＨＣ−６２株の分類学的性状について、常法に従っ
て調べたところ、本菌は好気性のグラム陽性の運動性桿
菌で、細胞の大きさは１.２×４.３〜７.１μm であっ
た。内性胞子形成が認められ、胞子の形状は楕円形、形
成部位は細胞の中央で胞子嚢の膨張は認められなかっ
た。本菌の化学分類学的性状としては細胞壁ジアミノピ
メリン酸として meso-ジアミノピメリン酸（meso-ＤＡ
Ｐ）を含み、キノン系はメナキノンー７（ＭＫ−７）で
あり、ＤＮＡのＧ＋Ｃ含量は３６.５ mol％であった。B
ergey's Manual of Systematic Bacteriology Vol. ２
の分類基準から本菌は バチルス属に属する微生物（Ba
cillus sp.) と同定された。さらに、ＨＣ−６２株は絶
対好気的に増殖し、 細胞が比較的大きく、内生胞子は楕
円形で，ＤＮＡのＧ＋Ｃ含量が３６.５mol％と高く、肉
汁寒天培地で旺盛に増殖し、カゼイン、ゲラチンおよび
澱粉分解能が陽性であったことから、 本菌は（バチルス
・メガテリウム）Bacillus megaterium と同定された。
Bergey's Manual において、B. megaterium はＤＮＡの
相同性および生理・生化学的性状から４グループに分け
られている。ＨＣ−６２株は、B. megateriumの基準株
が含まれ、狭義の B. megaterium とされている Group
−Ａの性状と一致した。現在は Bacillus simplex Prie
st et al. とされている Group−ＢとはB. simplex の
細胞の幅は０.８〜１.０μm であるのに比べて大きいこ
と、チロシン培地で褐色色素を生成しないこと、および
同種のＧ＋Ｃ含量（４０−４１％）に比べて低い点にお
いて、Bacillus flexus Priest et al. とされている G
roup−Ｃとは細胞がおおきいこと、および菌体脂肪酸組
成から区別された。Group−Ｄの現在の分類学的位置は
明らかにされていないが、同グループのＧ＋Ｃ含量は３
４％と低い点から明確に区別される。従って、ＨＣ−６
２株は現在の分類基準に照らし合わせても B. megateri
um と同定された。上記バチルス・エスピーＨＣ−６２
株は財団法人発酵研究所に平成９年４月１８日から寄託
番号ＩＦＯ−１６０７７として寄託されており、又本微
生物は、日本国通商産業省工業技術院生命工学工業技術
研究所（ＮＩＢＨ，日本国茨城県つくば市谷田部町東１
丁目１番３号）に平成９年４月２４日から寄託番号ＦＥ
ＲＭＢＰ−５９２９として寄託されている。上記のとお
りバチルス・エスピーＨＣ−６２株はバチルス・メガテ
リウムと同定された。バチルス属菌は、微生物の一般的
性質として自然的または変異剤によって変異を起こし得
る。例えば、Ｘ線、ガンマー線、紫外線等の放射線の照
射、種々の薬剤による処理または薬剤を含有する培地上
での培養、その他の手段で変異させて得られる多くの変
異株、あるいは自然的に得られる突然変異株であって
も、化合物ＨＣ−６２類を生産する性質を有するものは
すべて本発明の方法に利用し得る。

【００２７】本発明方法の培養に用いられる培地は用い
られる菌株が利用し得る栄養源を含むものなら、液状で
も固状でもよいが、大量に処理するときには液体培地を
用いるのがより適当である。培地には同化し得る栄養
源、消化し得る窒素源、無機物質、微量栄養素を適宜配
合される。炭素源としては、たとえばブドウ糖、乳糖、
ショ糖、麦芽糖、デキストリン、でん粉、グリセリン、
マンニトール、ソルビトール、油脂類（例、大豆油、オ
リーブ油、ヌカ油、ゴマ油、ラード油、チキン油な
ど）、窒素源としては、たとえば肉エキス、酵母エキ
ス、乾燥酵母、大豆粉、コーン・スチープ・リカー、ペ
プトン、綿実粉、廃糖蜜、尿素、アンモニウム塩類
（例、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アン
モニウム、酢酸アンモニウムなど）その他が用いられ
る。さらにナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネ
シウムなどを含む塩類、鉄、マンガン、亜鉛、コバル
ト、ニッケルなどの金属塩、りん酸、ホウ酸などの塩類
や酢酸、プロピオン酸などの有機酸の塩類が適宜用いら
れる。その他、アミノ酸（例、グルタミン酸、アスパラ
ギン酸、アラニン、リジン、バリン、メチオニン、プロ
リン等）、ビタミン類（例、Ｂ₁、Ｂ₂、ニコチン酸、Ｂ
₁₂、Ｃ等）、核酸類（例、プリン、ピリミジンおよびそ
の誘導体）等を含有させてもよい。もちろん培地の pＨ
を調節する目的で無機または有機の酸、アルカリ類、緩
衝剤等を加え、あるいは消泡の目的で油脂類、表面活性
剤等の適量を添加される。

【００２８】培養の手段は静置培養も、振盪培養あるい
は通気撹拌培養等の適宜の手段を選択し得る。大量の処
理には、いわゆる深部通気撹拌培養によるのが望ましい
ことはいうまでもない。培養の条件は培地の状態、組
成、菌株の種類、培養の手段によって一定しないのは当
然であるが、それらは通常１５℃〜３７℃の温度で、初
発 pＨ約５〜９付近に選択するのがよい。とりわけ、培
養中期の温度は２０℃〜３０℃、また初発pＨは約６〜
８の条件が望ましい。培養時期も前記の諸条件により一
定しないが、該目的化合物濃度が最大となるまで培養す
るのがよい。これに要する時間は液体培地を用いる振盪
培養または通気撹拌培養の場合は通常約１〜１０日間程
度である。生成した化合物ＨＣ−６２類は、その化学的
性質に従って培養物から抽出、精製することが可能であ
る。培養物から目的とする化合物ＨＣ−６２類を採取す
るには、微生物の生産する代謝物をその微生物培養物か
ら採取するのに通常使用される分離手段が適宜利用され
る。例えばＨＣ−６２類は水溶性両性物質の性質を示
し、主として培養上清中に含まれるので、まず培養液か
らろ過あるいは遠心分離によって菌体を除去する。

【００２９】得られた培養上清液をさらに精製し、純粋
なＨＣ−６２類を得るには周知の種々のクロマトグラフ
ィー法が有利に用いられる。クロマトグラフィーの担体
としては活性炭〔例、クロマト用活性炭または粒状白鷺
炭（武田薬品工業社製）等〕、吸着性樹脂〔例、ダイヤ
イオンＨＰ−２０またはＳＰ−２０７（三菱化学社
製）、アンバーライトＸＡＤ−ＩまたはII（ローム・ア
ンド・ハース社製、米国）等〕、微結晶セルロース
〔例、アビセル（旭化成社製）、フナセル（フナコシ株
式会社製）等〕、シリカゲル〔例、キーゼルゲル６０
（メルク社製、ドイツ）等〕など化合物の吸着性の差を
利用するもの、または陽イオン交換樹脂〔例、アンバー
ライトＩＲ−１２０、ＩＲＣ−５０またはＣＧ−５０
（ローム・アンド・ハース社製、米国）、ダウエックス
５０Ｗ（ダウ・ケミカル社製，米国）、ダイヤイオンＳ
Ｋ１Ａ（三菱化学社製）等〕、陰イオン交換樹脂〔例、
アンバーライトＩＲＡ−４０２、ＩＲＡ−６７またはＩ
ＲＡ−６８（ローム・アンド・ハース社製，米国）、ダ
ウエックス１（ダウ・ケミカル社製、米国）、ダイヤイ
オンＳＡ１０Ｂ、ＰＡ−４０４またはＷＡ−３０（三菱
化学社製）等〕、イオン交換セルロース〔 ＣＭ−セル
ロース（ファルマシア社製、スウェーデン）等〕、イオ
ン交換セファデックス〔例、ＱＡＥまたはＣＭ−セファ
デックス（ファルマシア社製、スウェーデン）等〕など
化合物の官能基の差を利用するもの、あるいは分子ふる
い性担体〔例、セファデックスＧ−１０またはＬＨ−２
０（ファルマシア社製、スウェーデン）等〕など化合物
の分子量の差を利用するもの等が有利に用いられる。ク
ロマトグラフィーに用いる溶媒としては、担体の種類、
性質によって組み合わせが異なるが、例えば水、アルカ
リ（例、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸水素
ナトリウム、アンモニア等）含有水溶液、酸（例、塩
酸、硫酸、酢酸、ギ酸、リン酸等）含有水溶液、塩類含
有水溶液（例、食塩水、酢酸緩衝液、リン酸緩衝液等）
および水と混和し得る有機溶媒（例、メタノール、エタ
ノール、イソプロピルアルコール、アセトン、アセトニ
トリル等）などの単独あるいは適宜の割合の混合溶媒が
用いられる。

【００３０】さらに、本発明においては目的化合物を精
製する場合に分取用高速液体クロマトグラフィー（ＨＰ
ＬＣ）法も有利に用いられる。この方法を適用する場
合、担体としてはオクタデシルシラン（ＯＤＳ）系、ポ
リマー系およびシリカゲル系のものが有利に用いられ
る。例えばＯＤＳ系の場合、ＹＭＣゲル（ワイエムシイ
社製）あるいはＴＳＫゲル（東ソー社製）などが、ポリ
マー系の場合、ポリマーにオクタデシル基を導入したＯ
ＤＰ（旭化成社製）あるいはポリマーにポリアミンを導
入したＮＨ２Ｐ（旭化成社製）などが用いられる。移動
相としては水、酸含有水溶液、塩類含有水溶液、メタノ
ール、アセトニトリルなどの単独あるいは適宜の割合の
混合溶液が有利に用いられる。後述する実施例２で得ら
れた化合物１（ＨＣ−６２）の物理化学的性質を以下に
示す。

【００３１】１）外観：白色粉末 ２）比旋光度：−２．６゜（ｃ＝０．６５、水、２１
℃) ３）分子量：ＦＡＢ−マススペクトル；m/z 707 (M ＋
H)⁺ ４）元素分析値：（％）(水分２モルとして計算） 実測値；C, 38.97; H, 5.56; N, 18.89; P, 3.94 計算値；Ｃ， ３８．８２； Ｈ， ５．８４； Ｎ，
１８．８６； Ｐ， ４．１７ ５）分子式：Ｃ_２４Ｈ₃₉Ｎ₁₀Ｏ₁₃Ｐ ６）ＵＶスペクトル：λmax（ε） 水中；223 nm (8,900), 277 nm (13,300) 0.1N塩酸中；235 nm (9,100), 303 nm (17,200) 0.1N水酸化ナトリウム水中；278 nm (13,300) ７）ＩＲスペクトル：ＫＢｒ錠剤中、主な吸収を示す
（波数、cm^-1、図１）。 3350, 1660, 1570, 1470, 1300, 1230, 1080 ８）¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトル：重水中、以下のシグナル
が認められる。 （125 MHz、δppm 図２） 180.5, 179.7, 175.6, 175.5, 172.2, 170.2, 158.3, 1
54.3, 139.0, 100.3, 89.0, 88.3, 88.2, 74.0, 68.1,
68.1, 63.9, 59.3, 59.2, 56.2, 55.2,41.7, 33.8, 32.
8, 32.5, 29.8, 29.3 ９）アミノ酸分析：６Ｎ塩酸（４％チオグリコール酸含
有）中、１１０℃で２４時間加水分解後、分析。 グルタミン酸（２モル）、セリン（１モル） １０）呈色反応： 陽性；ニンヒドリン、リンモリブデン酸反応 陰性；エールリッヒ、坂口反応 １１）溶解性： 可溶；水、ジメチルスルホキシド 難溶；ジエチルエーテル、アセトン １２）高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）： カラム；YMC-Pack ODS-A, A-312, 150 x 6.0 mm（ワイ
エムシイ社製） 移動相；４％(v/v)アセトニトリル／０.０５Ｍリン酸緩
衝液（pＨ３) 流 速；１.０ml／分 検出法； ＵＶ吸収、２１４nm 保持時間；５．０分 １３）薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）： 担 体；シリカゲル６０Ｆ₂₅₄、0.25 mm （メルク社
製、ドイツ） 展開溶媒；アセトニトリル／水（３：２） Ｒｆ値；０．３７

【００３２】化合物１（ＨＣ−６２）の構造式は下記の
通りである。

【化１２】 一般式（I）においてＲＣＯがセリル基である化合物ま
たはその塩は、一般式（I）においてＲＣＯがグルタミ
ニルグルタミニルセリル、グルタミニルグルタミニルグ
ルタミニルセリル基、グルタミニル−α−グルタミルセ
リル基である化合物またはその塩を酵素と反応させるこ
とにより製造することができる。用いられる酵素として
は、例えばエキソペプチダーゼ（例、ロイシンアミノペ
プチダーゼ等）、蛋白分解酵素〔例、アクチナーゼＥ
（科研製薬社製）等〕などが挙げられる。反応は、通常
水溶液中で行われ、ｐＨを調整する目的で無機または有
機の酸またはアルカリ類、緩衝剤などを加えても差し支
えない。反応温度は、酵素反応が進行する限り特に限定
されないが、通常約１０℃ないし５０℃、好ましくは２
０℃ないし４０℃で行われる。反応時間は、用いられる
酵素の種類および量、反応温度、溶液のｐＨなどにより
異なるが，通常数分から数十時間反応させる。一般式
（Ｉ）において、ＲＣＯがグルタミニルセリン基である
化合物またはその塩は、一般式（Ｉ）においてＲＣＯが
グルタミニルグルタミニルセリン、グルタミニルグルタ
ミニルグルタミニルセリン基である化合物またはその塩
を酵素と反応させることにより製造することができる。
用いられる酵素および反応条件は、上述の酵素反応と同
様である。

【００３３】後述する実施例で得られる化合物の構造式
は下記の通りである。

【化１３】

【００３４】本発明の化合物（I）の塩としては薬理学
的に許容しうる塩基付加塩または酸付加塩があげられ
る。塩基付加塩としては、例えばアルカリ金属（例、ナ
トリウム、カリウム等）との塩あるいはアルカリ土類金
属（例、カルシウム、マグネシウム等）との塩などが挙
げられる。酸付加塩としては、例えば無機酸（例、塩
酸、臭化水素、ヨウ化水素、硫酸、リン酸等）との塩あ
るいは有機酸（例、酢酸、プロピオン酸、乳酸、コハク
酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、グルコン酸、アス
コルビン酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエ
ンスルホン酸、ケイ皮酸、フマル酸、リンゴ酸、シュウ
酸等）との塩などが挙げられる。また、一般式（I）で
表される化合物またはその水和物および非水和物も本発
明の範囲に包含されるものである。

【００３５】本発明の化合物（I）は、自体公知の手
段、例えば、溶媒抽出、液性変換、転溶、晶出、再結
晶、クロマトグラフィーなどによって単離、精製するこ
とができる。また、本発明の化合物（I）の原料化合物
またはその塩は、前記と同様の公知の手段などによって
単離、精製することができるが、単離することなくその
まま反応混合物として次の工程の原料として供されても
よい。本発明の化合物（I）が、光学異性体、立体異性
体、位置異性体または回転異性体を含有する場合には、
これらも本発明の化合物に包含されるとともに、自体公
知の合成手法、分離手法によりそれぞれ単品として得る
ことができる。例えば、本発明の化合物に光学異性体が
存在する場合には、該化合物から分割された光学異性体
も本発明に包含される。光学異性体は自体公知の方法に
より製造することができる。具体的には、光学活性な合
成中間体を用いるかもしくは最終物のラセミ体の混合物
を常法に従って光学分割することにより光学異性体を得
る。光学分割法としては、自体公知の方法、例えば、下
記の分別再結晶法、キラルカラム法、ジアステレオマー
法などが用いられる。

【００３６】（１）分別再結晶法 ラセミ体と光学活性な化合物とで塩を形成させ、これを
分別再結晶法によって分離し、所望により、中和工程を
経てフリーの光学異性体を得る方法。 （２）キラルカラム法 ラセミ体またはその塩を光学異性体分離用カラム（キラ
ルカラム）にかけて分離する方法。例えば、液体クロマ
トグラフィーの場合、ENANTIO-OVM（トーソー社製）な
どのキラルカラムに光学異性体の混合物を添加し、水、
種々の緩衝液（例、リン酸緩衝液など）、有機溶媒
（例、エタノール、メタノール、アセトニトリルなど）
を単独あるいは混合した溶液として展開させることによ
り、光学異性体を分離する。また、例えば、ガスクロマ
トグラフィーの場合、CP-Chirasil-DeXCB（ジーエルサ
イエンス社製）などのキラルカラムを使用して分離す
る。 （３）ジアステレオマー法 ラセミ体の混合物を光学活性な試薬と化学反応によって
ジアステレオマーの混合物とし、これを通常の分離手段
（例えば、分別再結晶、クロマトグラフィー法など）な
どを経て単一物質とした後、加水分解反応などの化学的
な処理により光学活性な試薬部位を切り離すことにより
光学異性体を得る方法。例えば、本発明の化合物が分子
内に水酸基または１ないし２級アミノ基を有する場合、
該化合物と光学活性な有機酸（例えば、ＭＴＰＡ［α−
メトキシ−α−（トリフルオロメチル）フェニル酢
酸］、（−）−メントキシ酢酸など）などとを縮合反応
に付すことにより、それぞれエステル体またはアミド体
のジアステレオマーが得られる。一方、本発明の化合物
がカルボン酸を有する場合、該化合物と光学活性アミン
またはアルコール試薬とを縮合反応に付すことにより、
それぞれアミド体またはエステル体のジアステレオマー
が得られる。分離されたジアステレオマーは、酸加水分
解あるいは塩基性加水分解反応に付すことにより、もと
の化合物の光学異性体に変換される。

【００３７】本発明の化合物（I）は、新規物質であ
り、その用途は抗ヘリコバクター・ピロリ薬に限定され
るものでないことは当然であるが、抗菌作用、特にヘリ
コバクター・ピロリに代表されるヘリコバクター属菌に
対する強い抗菌活性を有するために、抗菌剤として、上
記のようなヘリコバクター・ピロリの感染に起因する
「十二指腸潰瘍、胃潰瘍、胃炎（慢性胃炎を含む）、胃
癌など」の予防又は治療に有効である。化合物（I）又
はその薬理学的に許容される塩を含有する本発明製剤
は、抗菌剤及び抗潰瘍剤として、ヒト等の哺乳動物（例
えば、人、犬、猫、サル、ラット、マウス、馬、牛等）
に経口的又は非経口的に投与することができ、一般に、
経口的な投与が好ましい。経口投与する場合の剤形の例
としては、例えば錠剤（糖衣錠、フィルムコーティング
錠を含む）、丸剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤（ソフト
カプセル剤を含む）、シロップ剤、乳剤、懸濁剤等があ
げられる。また、非経口投与する場合の剤形としては、
例えば注射剤、注入剤、点滴剤、坐剤等があげられる。

【００３８】本発明製剤中の化合物（I）またはその塩
の含有量は、通常２〜８５重量％、好ましくは５〜７０
重量％である。化合物（I）又はその塩を上記の剤形に
製造する方法としては、当該分野で一般的に用いられて
いる公知の製造方法を適用することができる。また、上
記の剤形に製造する場合には、必要に応じて、その剤形
に製する際に製剤分野において通常用いられる賦形剤、
結合剤、崩壊剤、滑沢剤、甘味剤、界面活性剤、懸濁化
剤、乳化剤等を適宜、適量含有させて製造することがで
きる。例えば、化合物（I）又はその塩を錠剤に製する
場合には、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等を含有さ
せて製造することができ、丸剤及び顆粒剤に製する場合
には、賦形剤、結合剤、崩壊剤等を含有させて製造する
ことができる。また、散剤及びカプセル剤に製する場合
には、賦形剤等を、シロップ剤に製する場合には、甘味
剤等を、乳剤及び懸濁剤に製する場合には、懸濁化剤、
界面活性剤、乳化剤等を含有させて製造することができ
る。賦形剤の例としては、乳糖、白糖、ブドウ糖、でん
ぷん、蔗糖、微結晶セルロース、カンゾウ末、マンニト
ール、炭酸水素ナトリウム、リン酸カルシウム、硫酸カ
ルシウム等があげられる。結合剤の例としては、５〜１
０重量％デンプンのり液、１０〜２０重量％アラビアゴ
ム液又はゼラチン液、１〜５重量％トラガント液、カル
ボキシメチルセルロース液、アルギン酸ナトリウム液、
グリセリン等があげられる。崩壊剤の例としては、でん
ぷん、炭酸カルシウム等があげられる。滑沢剤の例とし
ては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ステ
アリン酸カルシウム、精製タルク等があげられる。甘味
剤の例としては、ブドウ糖、果糖、転化糖、ソルビトー
ル、キシリトール、グリセリン、単シロップ等があげら
れる。界面活性剤の例としては、ラウリル硫酸ナトリウ
ム、ポリソルベート８０、ソルビタンモノ脂肪酸エステ
ル、ステアリン酸ポリオキシル４０等があげられる。懸
濁化剤の例としては、アラビアゴム、アルギン酸ナトリ
ウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチル
セルロース、ベントナイト等があげられる。乳化剤の例
としては、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、ポリ
ソルベート８０等があげられる。更に、化合物（I）又
はその塩を上記の剤形に製造する場合には、所望によ
り、製剤分野において通常用いられる着色剤、保存剤、
芳香剤、矯味剤、安定剤、粘稠剤等を適宜、適量添加す
ることができる。化合物（I）又はその医薬的に許容さ
れる塩を含有する本発明製剤は、安定かつ低毒性で安全
に使用することができる。その１日の投与量は患者の状
態や体重、化合物の種類、投与経路等によって異なる
が、ヘリコバクター・ピロリ感染に起因する胃潰瘍の患
者に対して経口投与する場合には、成人（体重約６０k
g）１日当たりの投与量は有効成分（化合物（I）または
その塩）として１〜５００mgであり、約１０〜２００mg
が好ましい。

【００３９】上記の投与量の範囲では、毒性は見られな
い。また、本発明製剤において化合物（I）又はその塩
は、他の抗菌剤及び抗潰瘍剤と併用して投与することも
できる。上記、化合物（I）またはその塩と併用するこ
とができる他の抗菌剤としては、例えば、ニトロイミダ
ゾール抗生物質（例えば、チニダゾール及びメトロニダ
ゾール）、テトラサイクリン類（例えば、テトラサイク
リン、ドキシサイクリン及びミノサイクリン）、ペニシ
リン類（例えば、アモキシシリン、アンピシリン及びメ
ズロシリン）、セファロスポリン類（例えば、セファク
ロル、セファドロキシル、セファドリン、セフロキシ
ム、セフロキシムアクセチル、セファレキシン、セフポ
ドキシムプロキセチル、セフタジジム及びセフトリアク
ソン）、カルバペネム類（例えば、イミペネム及びメロ
ペネム）、アミノグリコシド類（例えば、パロモマイシ
ン）、マクロリド抗生物質（例えば、エリスロマイシ
ン、クラリスロマイシン及びアジスロマイシン）、リン
コサミド抗生物質（例えば、クリンダマイシン）、リフ
ァマイシン類（例えば、リファンピシン）並びにニトロ
フラントインを挙げることができる。また、化合物
（I）またはその塩と併用することができる抗潰瘍剤と
しては、例えばプロトンポンプ阻害剤（例えば、オメプ
ラゾール，ランソプラゾール）またはＨ2 アンタゴニス
ト（例えば、ラニチジン、シメチジン及びファモチジ
ン）などが挙げられる。上記他の抗菌剤および抗潰瘍剤
は二種以上組合せて用いることができる。この場合上記
他の抗菌剤の投与量は経口投与の場合成人１日当り１〜
５００mg、好ましくは１０〜２００mgであり、上記抗潰
瘍剤の投与量は経口投与の場合成人１日当り０.５〜１
０００mg、好ましくは２５〜５００mgである。

【００４０】

【発明の実施の形態】以下に参考例、実施例、実験例、
製剤例をあげて本発明を更に詳しく説明するが、これに
よって本発明が限定されるものではない。なお、パーセ
ント（％）は、特に断りの無い限り、重量／容量パーセ
ントを示す。また、溶媒の混合比率は、特に断りの無い
限り、容量比を示す。¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトルは、ＪＥＯＬ ＪＮＭ−Ａ５０
０（１２５ＭＨｚ）、ブルカーＤＭＸ６００（１５０Ｍ
Ｈｚ）、ブルカーＡＣ−３００（７５ＭＨｚ） スペクトルメーターを用いて測定した。

【００４１】

【実施例】参考例１ ３−メチル−４−Ｎ−カルバモイ
ル−２'−デオキシシチジンの製造 実施例４で得られた培養液（３７００リットル）をｐＨ
７に調整し、オリバーろ過を行った。ろ液（３８５０リ
ットル）をｐＨ７に補正後、ＨＰ−２０（１５０リット
ル）、粒状白鷺炭（３５０リットル）のカラムを順次通
過させ、水（１０５０リットル）で洗浄した。粒状白鷺
炭のカラムを０．２Ｎ水酸化ナトリウム水（７００リッ
トル）、水（１７５０リットル）で順次洗浄後、３０％
（V/V）イソプロピルアルコール水（１０５０リット
ル）で溶出した。溶出液をＩＲＣ−５０（Ｈ型、７５リ
ットル）、ＩＲＡ−６７（ＡｃＯ型、６０リットル）、
ＩＲ−１２０（Ｈ型、１００リットル）のカラムを順次
通過させ、３０％（V/V）イソプロピルアルコール水
（２００リットル）で洗浄した。ＩＲ−１２０のカラム
を水（３００リットル）、２Ｎアンモニア水（１８２リ
ットル）で順次洗浄後、２Ｎアンモニア水（１１８リッ
トル）で溶出した。溶出液を６０リットルまで濃縮し、
ＨＰ−２０（６リットル）、ＩＲＡ−４０２（ＡｃＯ
型、２リットル）、粒状白鷺炭（１０リットル）のカラ
ムを順次通過させ、水（３０リットル）で洗浄した。粒
状白鷺炭のカラムを５％（V/V）イソプロピルアルコー
ル水（７０リットル）で洗浄後、３０％（V/V）イソプ
ロピルアルコール水（４０リットル）で溶出した。溶出
液を減圧下１０リットルまで濃縮し、ＩＲ−１２０（Ｈ
型、３リットル）のカラムを通過させた。通過液を減圧
下５００ｍｌまで濃縮し、ＨＰ−２０（５０−１００メ
ッシュ、２リットル）のカラムクロマトグラフィーに付
し、水（４リットル）で洗浄後、３％（V/V）イソプロ
ピルアルコール水（３．６リットル）で溶出した。溶出
液を２００ｍｌまで濃縮後、２回に分けてSephadex Ｇ
−１０（２．４リットル）のカラムクロマトグラフィー
に付し、水で溶出分画した。目的化合物を含む画分を濃
縮後、析出した結晶をろ過して目的化合物（２.４７
ｇ）を得た。¹³ Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ中、７５ＭＨｚ、δppm） 170.1,
158.4, 154.3, 138.9,100.0, 89.4, 89.0, 73.3, 64.1,
41.5, 32.4 元素分析値 Ｃ₁₁Ｈ₁₆Ｎ₄Ｏ₅として 実測値；C, 46.72; H, 5.48; N,19.43 計算値；C, 46.48; H, 5.67; N,19.71 ＵＶスペクトル：λmax（ε） 水中；226 nm (8,000), 277 nm (12,600) 0.1N塩酸中；236 nm (8,500), 303 nm (15,900) 0.1N水酸化ナトリウム水中；278 nm (12,800)

【００４２】実施例１ グルコース０.１％，トリプトン０.５％，酵母エキス
０.２５％，寒天１.５％からなる斜面培地上に予め十分
に生育したバチルス・エスピーＨＣ−６２株の一白金耳
を、グルコース２.０％，可溶性澱粉３.０％，コーン・
スチープ・リカー０.３％，生大豆粉１.０％，ポペプト
ン０.５％，酵母エキス０.１％，オート・ミール・アガ
ー０.２％，塩化ナトリウム０.３％および沈降性炭酸カ
ルシウム０.５％からなる pＨ７.０の種培養培地５００
mlを分注滅菌した２L 容坂口フラスコに接種して、往復
振盪機上で２４℃で２日間培養した。この培養液５００
mlをグルコース２.０％，可溶性澱粉３.０％，生大豆粉
１.０％，コーン・スチープ・リカー０.３％，酵母エキ
ス０.１％，ポリペプトン０.５％，塩化ナトリウム０.
３％，沈降性炭酸カルシウム０.５％，アクトコール０.
０５％及びシリコーン０.０５％からなる pＨ７.０の種
培養培地１２０L を含む２００Ｌ容発酵槽に移植し、温
度２４℃、内圧１.０kg／cm², 通気１２０L／min, 撹拌
１２０rpm の条件下で２４時間培養を行なった。この培
養液１０Ｌをグルコース０.５％，デキストリン５.０
％，脱脂大豆粉３.５％，酵母エキス０.５％，沈降性炭
酸カルシウム０.７％，アクトコール０.０５％及びシリ
コーン０.０５％からなる pＨ６.５の主培養培地１２０
０L を含む２０００Ｌ容発酵槽に移植し、温度２４℃、
内圧１.０kg／cm², 通気８６０L／min, 撹拌１２０rpm
の条件下で２４時間培養を行なった。

【００４３】実施例２ 実施例１で得られた培養液（１２００リットル）をｐＨ
７に調整し、オリバーろ過を行った。ろ液（１３８０リ
ットル）をｐＨ７に補正後、活性炭（２３０リットル）
のカラムクロマトグラフィーに付した。水（４６０リッ
トル）、０.１Ｎ水酸化ナトリウム水（４６０リット
ル）、水（１２００リットル）で順次洗浄後、３０％
（V/V）イソプロピルアルコール水（６９０リットル）
で溶出した。溶出液をＩＲＣ−５０（Ｈ型、３０リット
ル）、ＩＲＡ−６７（ＡｃＯ型、３０リットル）のカラ
ムを順次通過させ、３０％（V/V）イソプロピルアルコ
ール水（１２０リットル）で洗浄した。通過液と洗浄液
を合わせ、減圧下２０リットルまで濃縮し、ＩＲ−１２
０（Ｈ型、１００リットル）のカラムクロマトグラフィ
ーに付した。水洗（３００リットル）後、２Ｎアンモニ
ア水（３００リットル）で溶出分画した。ＨＣ−６２を
含む画分を２０リットルまで濃縮し、ｐＨ７に調整後、
ＨＰ−２０（４リットル）、ＳＰ−２０７（９リット
ル）のカラムを順次通過させ、水（２７リットル）で洗
浄した。ＳＰ−２０７のカラムから１０％（V/V）イソ
プロピルアルコール水（２７リットル）で溶出し、減圧
下７００mlまで濃縮した。濃縮液を５℃で１日放置して
生じた析出物をろ過により除去し、得られたろ液（１リ
ットル）を水（１リットル）で希釈後、ｐＨ７に調整
し、粒状白鷺炭（１リットル）のカラムクロマトグラフ
ィーに付した。水（５リットル）、５％（V/V）イソプ
ロピルアルコール水（３リットル）で順次洗浄後、３０
％（V/V）イソプロピルアルコール水（３リットル）で
溶出した。溶出液を１９０mlまで濃縮後、ＨＰ−２０
（５０−１００メッシュ、２.５リットル）のカラムク
ロマトグラフィーに付し、水（７.５リットル）、２％
（V/V）イソプロピルアルコール水（５リットル）で溶
出分画した。ＨＣ−６２を含む画分を８０mlまで濃縮
後、Sephadex Ｇ−１０（２.４リットル）のカラムク
ロマトグラフィーに付し、水で溶出分画した。 ＨＣ−
６２を含む画分を５０mlまで濃縮後、ＣＧ−５０（Ｈ
型、１リットル）のカラムクロマトグラフィーに付し、
水で溶出分画した。 ＨＣ−６２を含む画分を濃縮乾固
し、粗粉末（４.３ｇ）を得た。得られた粗粉末を４回
に分けて分取ＨＰＬＣ〔カラム；YMC-Pack SH-363-15,O
DS（ワイエムシイ社製）、移動相；２％（V/V）アセト
ニトリル／０.０２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６.３）、流
速；１２ml／分〕に付し、溶出容量３８０−６００mlの
画分を集め、減圧下３００mlまで濃縮した。濃縮液をｐ
Ｈ７に調整後、粒状白鷺炭（５０ml）のカラムクロマト
グラフィーに付し、水洗（１５０ml）後、３０％（V/
V）イソプロピルアルコール水（１５０ml）で溶出し
た。溶出液を１０mlまで濃縮後、ＣＧ−５０（Ｈ型、２
００ml）のカラムクロマトグラフィーに付し、水で溶出
分画した。 化合物１（ＨＣ−６２）を含む画分を濃縮
後、凍結乾燥して化合物１（１.６４ｇ）を白色粉末と
して得た。

【００４４】実施例３ 実施例１で得られた培養液（１２００リットル）をｐＨ
７に調整し、オリバーろ過を行った。ろ液（１４３０リ
ットル）をｐＨ７に補正後、ＨＰ−２０（５０リット
ル）、粒状白鷺炭（２２０リットル）のカラムを順次通
過させ、水（６６０リットル）で洗浄した。粒状白鷺炭
のカラムを０.２Ｎ水酸化ナトリウム水（４４０リット
ル）、水（１１００リットル）で順次洗浄後、３０％
（V/V）イソプロピルアルコール水（６６０リットル）
で溶出した。溶出液をＩＲＣ−５０（Ｈ型、２５リット
ル）、ＩＲＡ−６７（ＡｃＯ型、３０リットル）、ＩＲ
−１２０（Ｈ型、５０リットル）のカラムを順次通過さ
せ、３０％（V/V）イソプロピルアルコール水（１２０
リットル）で洗浄した。ＩＲ−１２０のカラムを水（１
５０リットル）、２Ｎアンモニア水（７０リットル）で
順次洗浄後、２Ｎアンモニア水（８０リットル）で溶出
した。溶出液を１３リットルまで濃縮し、ＨＰ−２０
（２リットル）、粒状白鷺炭（３リットル）のカラムを
順次通過させ、水（９リットル）で洗浄した。粒状白鷺
炭のカラムを５％（V/V）イソプロピルアルコール水
（６リットル）で洗浄後、３０％(V/V)イソプロピルア
ルコール水（９リットル）で溶出した。溶出液を減圧下
２００mlまで濃縮し、生じた析出物をろ過により除去し
た。得られたろ液をＨＰ−２０（５０−１００メッシ
ュ、２リットル）のカラムクロマトグラフィーに付し、
水（６リットル）で溶出分画した。化合物１および化合
物２を含む画分を１２０mlまで濃縮後、２回に分けてSe
phadex Ｇ−１０（２.４リットル）のカラムクロマト
グラフィーに付し、水で溶出分画した。化合物１および
化合物２を含む画分を２００mlまで濃縮後、ＨＰ−２０
（５０−１００メッシュ、２リットル）のカラムクロマ
トグラフィーに付し、水（６リットル）、３％（Ｖ／
Ｖ）イソプロピルアルコール水（６リットル）で溶出分
画した。化合物１および化合物２を含む画分を濃縮後、
凍結乾燥して得られた粉末（８.２ｇ）をＣＧ−５０
（Ｈ型、５００ml）のカラムクロマトグラフィーに付
し、水（３リットル）で溶出分画した。化合物１および
化合物２を含む画分を濃縮後、凍結乾燥して粗粉末
（２.２８ｇ）を得た。得られた粗粉末を５回に分けて
分取ＨＰＬＣ〔カラム；YMC-Pack SH-363-15,ODS（ワイ
エムシイ社製）、移動相；１.５％（V/V）アセトニトリ
ル／０.０２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ３.０）、流速；１２
ml／分〕に付し、化合物１を含む画分および化合物２を
含む画分を集めた。化合物１を含む画分を減圧下３００
mlまで濃縮し、ｐＨ８に調整後、粒状白鷺炭（３０ml）
のカラムクロマトグラフィーに付し、水洗（９０ml）
後、３０％（V/V）イソプロピルアルコール水（１００
ｍｌ）で溶出した。溶出液を濃縮後、凍結乾燥して化合
物１（８１３ｍｇ）を白色粉末として得た。化合物２を
含む画分も同様に処理して化合物２（５５０mg）を白色
粉末として得た。

【００４５】化合物２ １）外観：白色粉末 ２）比旋光度：−２２゜（ｃ＝０.５６、水、２７℃) ３）分子量：ＦＡＢ−マススペクトル；m/z 835 (M ＋
H)⁺ ４）元素分析値：（％）(水分３.５モルとして計算） 実測値；C, 38.99； H, 6.16； N, 18.66； P, 3.71 計算値；C, 38.80； H, 6.06； N, 18.72； P, 3.45 ５）分子式：Ｃ₂₉Ｈ₄₇Ｎ₁₂Ｏ₁₅Ｐ ６）ＵＶスペクトル：λmax（ε） 水中；223 nm (10,200), 278 nm (13,400) 0.1N塩酸中；236 nm (8,800), 304 nm (16,700) 0.1N水酸化ナトリウム水中；278 nm (13,300) ７）ＩＲスペクトル：ＫＢｒ錠剤中、主な吸収を示す
（波数、cm^-1）。 3410, 1660, 1580, 1470, 1300, 1230, 1080 ８）¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトル（図３）：重水中、以下の
シグナルが認められる。 （150 MHz、δppm） 180.6, 180.5, 179.7, 175.8, 175.6, 172.3, 170.2, 1
58.3, 154.4, 139.0, 100.3, 89.0, 88.3, 88.2, 74.0,
68.1, 68.1, 63.9, 59.2, 59.2, 56.1,56.0, 55.2, 4
1.8, 33.8, 33.7, 32.9, 32.5, 29.8, 29.8, 29.4 ９）アミノ酸分析：６Ｎ塩酸中、１１０℃で２４時間加
水分解後、分析。 グルタミン酸（３モル）、セリン（１モル） １０）呈色反応： 陽性；ニンヒドリン、リンモリブデン酸反応 陰性；エールリッヒ、坂口反応 １１）溶解性： 可溶；水、ジメチルスルホキシド 難溶；ジエチルエーテル、アセトン １２）高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）： カラム；YMC-Pack ODS-A, A-312, 150 x 6.0 mm（ワイ
エムシイ社製） 移動相；４％（V/V）アセトニトリル／０.０５Ｍリン酸
緩衝液（pＨ３) 流 速；１.０ml／分 検出法； ＵＶ吸収、２１４nm 保持時間；５.５分

【００４６】実施例４ グルコース０.１％，トリプトン０.５％，酵母エキス
０.２５％，寒天１.５％からなる斜面培地上に予め十分
に生育したバチルス・エスピーＨＣ−６２株の一白金耳
を、グルコース２.０％，可溶性澱粉３.０％，コーン・
スチープ・リカー０.３％，生大豆粉１.０％，ポペプト
ン０.５％，酵母エキス０.１％，オート・ミール・アガ
ー０.２％，塩化ナトリウム０.３％および沈降性炭酸カ
ルシウム０.５％からなる pＨ７.０の種培養培地５００
mlを分注滅菌した２L 容坂口フラスコに接種して、往復
振盪機上で２４℃で１日間培養した。この培養液５００
mlをグルコース２.０％，可溶性澱粉３.０％，生大豆粉
１.０％，コーン・スチープ・リカー０.３％，酵母エキ
ス０.１％，ポリペプトン０.５％，塩化ナトリウム０.
３％，沈降性炭酸カルシウム０.５％，アクトコール０.
０５％及びシリコーン０.０５％からなる pＨ７.０の種
培養培地１２０L を含む２００Ｌ容発酵槽に移植し、温
度２４℃、内圧１.０kg／cm², 通気１２０L／min, 撹拌
１２０rpm の条件下で２４時間培養を行なった。この培
養液１２Ｌをグルコース０.５％，脱脂大豆粉３.５％，
酵母エキス０.２％，沈降性炭酸カルシウム０.３％，ア
クトコール０.０５％及びシリコーン０.０５％からなる
pＨ６.８の主培養培地３６００L を含む６０００Ｌ容
発酵槽に移植し、温度２４℃、内圧１.０kg／cm², 通気
２８８０L／min, 撹拌１２０rpm の条件下で２４時間培
養を行なった。

【００４７】実施例５ 実施例４で得られた培養液（３７００リットル）をｐＨ
７に調整し、オリバーろ過を行った。ろ液（３５２０リ
ットル）をｐＨ７に補正後、ＨＰ−２０（１５０リット
ル）、粒状白鷺炭（３５０リットル）のカラムを順次通
過させ、水（１０５０リットル）で洗浄した。粒状白鷺
炭のカラムを０.２Ｎ水酸化ナトリウム水（７００リッ
トル）、水（１７５０リットル）で順次洗浄後、３０％
（V/V）イソプロピルアルコール水（１０５０リット
ル）で溶出した。溶出液をＩＲＣ−５０（Ｈ型、７５リ
ットル）、ＩＲＡ−６７（ＡｃＯ型、６０リットル）、
ＩＲ−１２０（Ｈ型、１００リットル）のカラムを順次
通過させ、３０％（V/V）イソプロピルアルコール水
（２００リットル）で洗浄した。ＩＲ−１２０のカラム
を水（３００リットル）、２Ｎアンモニア水（２１４リ
ットル）で順次洗浄後、２Ｎアンモニア水（８６リット
ル）で溶出した。溶出液を４１リットルまで濃縮し、Ｈ
Ｐ−２０（６リットル）、粒状白鷺炭（１０リットル）
のカラムを順次通過させ、水（３０リットル）で洗浄し
た。粒状白鷺炭のカラムを５％（V/V）イソプロピルア
ルコール水（７０リットル）で洗浄後、３０％（V/V）
イソプロピルアルコール水（５０リットル）で溶出し
た。溶出液を減圧下５００mlまで濃縮し、ＨＰ−２０
（５０−１００メッシュ、２.５リットル）のカラムク
ロマトグラフィーに付し、水（６リットル）で溶出分画
した。化合物３を含む画分をｐＨ５に補正後、ＳＰ−２
０７（１リットル）のカラムクロマトグラフィーに付
し、水（４００ml）で洗浄後、水（１リットル）、５％
（V/V）イソプロピルアルコール水（１.２リットル）で
順次溶出した。溶出液を濃縮後、凍結乾燥して得られた
粉末（３７.４ｇ）をＩＲＡ−４０２（ＡｃＯ型、４０
０ml）のカラムクロマトグラフィーに付し、水洗（１.
２リットル）後、２Ｍ食塩水（８００ml）で溶出した。
溶出液をｐＨ５に調整後、粒状白鷺炭（１５０ml）のカ
ラムクロマトグラフィーに付し、水洗（４５０ml）後、
３０％(V/V)イソプロピルアルコール水（４５０ml）で
溶出した。溶出液を濃縮後、凍結乾燥して粗粉末（５.
６ｇ）を得た。得られた粗粉末を５回に分けて分取ＨＰ
ＬＣ〔カラム；YMC-Pack SH-363-15,ODS（ワイエムシイ
社製）、移動相；１.５％（V/V）アセトニトリル／０.
０２５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ４.５）、流速；１２ml／
分〕に付し、化合物３を含む画分を集め濃縮した。濃縮
液をｐＨ５に調整後、粒状白鷺炭（５０ml）のカラムク
ロマトグラフィーに付し、水洗（１５０ml）後、３０％
(V/V)イソプロピルアルコール水（１５０ml）で溶出し
た。溶出液を濃縮後、凍結乾燥して化合物３を含有する
粗粉末（１.３ｇ）を得た。得られた粗粉末を２回に分
けて再度、分取ＨＰＬＣ〔カラム；YMC-Pack SH-363-1
5, ODS（ワイエムシイ社製）、移動相；１.５％（V/V）
アセトニトリル／０.０２５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ３.
０）、流速；１２ml／分〕に付し、化合物３を含む画分
を集め濃縮した。濃縮液をｐＨ５に調整後、粒状白鷺炭
（２５ml）のカラムクロマトグラフィーに付し、水洗
（７５ml）後、５０％(V/V)イソプロピルアルコール水
（１００ml）で溶出した。溶出液を濃縮後、凍結乾燥し
て化合物３（５１２mg）を白色粉末として得た。

【００４８】化合物３ １）外観：白色粉末 ２）比旋光度：−２゜（ｃ＝０.５４、水、２７℃) ３）分子量：ＦＡＢ−マススペクトル；m/z 708 (M ＋
H)⁺ ４）元素分析値：（％）(水分２モルとして計算） 実測値；C, 38.62； H, 5.47； N, 16.77 計算値；C, 38.76； H, 5.69； N, 16.95 ５）分子式：Ｃ₂₄Ｈ₃₈Ｎ₉Ｏ₁₄Ｐ ６）ＵＶスペクトル：λmax（ε） 水中；222 nm (8,800), 278 nm (12,300) 0.1N塩酸中；233 nm (8,200), 304 nm (15,500) 0.1N水酸化ナトリウム水中；278 nm (12,400) ７）ＩＲスペクトル：ＫＢｒ錠剤中、主な吸収を示す
（波数、cm^-1）。 3430, 1660, 1580, 1470, 1300, 1230, 1080 ８）¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトル（図４）：重水中、以下の
シグナルが認められる。 （75 MHz、δppm） 181.2, 180.6, 175.7, 175.7, 175.5, 172.4, 169.8, 1
58.5, 154.3, 139.3, 100.3, 89.1, 88.4, 88.3, 74.0,
68.2, 68.1, 63.9, 59.4, 59.3, 56.2,55.5, 41.8, 3
3.9, 33.8, 32.6, 29.9, 29.6 ９）アミノ酸分析：６Ｎ塩酸中、１１０℃で２４時間加
水分解後、分析。 グルタミン酸（２モル）、セリン（１モル） １０）呈色反応： 陽性；ニンヒドリン、リンモリブデン酸反応 陰性；エールリッヒ、坂口反応 １１）溶解性： 可溶；水、ジメチルスルホキシド 難溶；ジエチルエーテル、アセトン １２）高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）： カラム；YMC-Pack ODS-A, A-312, 150 x 6.0 mm（ワイ
エムシイ社製） 移動相；４％（V/V）アセトニトリル／０.０５Ｍリン酸
緩衝液（pＨ３) 流 速；１.０ml／分 検出法； ＵＶ吸収、２１４nm 保持時間；５.４分

【００４９】実施例６ 化合物１（２００mg）をリン酸緩衝液（４０ｍＭ，ｐＨ
７、４０ml）に溶解し、ロイシンアミノペプチダーゼ
Ｍ（５０ユニット，シグマ社製）を添加し、３７℃で１
時間反応させた。反応液を粒状白鷺炭（１０ml）のカラ
ムクロマトグラフィーに付した。水（３０ml）で洗浄
後、５０％（V/V）イソプロピルアルコール水（４０m
l）で溶出し、溶出液を濃縮した。得られた濃縮液をＣ
Ｇ−５０（Ｈ型，５０ml）のカラムクロマトグラフィー
に付し、水で溶出分画した。７０−１１５mlの溶出区分
を濃縮後凍結乾燥し、化合物４（５７mg）を白色粉末と
して得た。 化合物４¹³ Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ中、７５ＭＨｚ、δppm）（図５）
１７２．２， １７０．２， １５８．４，１５４．
４， １３９．０， １００．２， ８９．０， ８
８．１， ８８．０， ７３．８， ６８．１， ６
８．１， ６２．９， ５８．４，５８．３， ４１．
７， ３２．４ 元素分析値 Ｃ_１４Ｈ₂₃Ｎ₆Ｏ₉Ｐ・２.５Ｈ₂Ｏとして 実測値；C, 34.16； H, 5.72； N,16.77 計算値；C, 33.94； H, 5.70； N,16.96 ＦＡＢ−マススペクトル；m/z 451 (M ＋ H)⁺

【００５０】実施例７ 化合物１（５００mg）をリン酸緩衝液（４０ｍＭ，ｐＨ
８、５０ml）に溶解し、ロイシンアミノペプチダーゼ
Ｃ（１５０ユニット，シグマ社製）を添加し、２８℃で
１時間反応させた後、エチルアルコール（５００ml）を
添加し反応を停止した。反応停止液を濃縮しエチルアル
コールを留去した後、粒状白鷺炭（２０ml）のカラムク
ロマトグラフィーに付した。水（６０ml）で洗浄後、３
０％（V/V）イソプロピルアルコール水（８０ml）で溶
出し、溶出液を濃縮した。得られた濃縮液を分取ＨＰＬ
Ｃ［カラム；YMC-Pack SH-363-15,ODS(ワイエムシイ社
製)、移動相；１％（V/V）アセトニトリル／０.０２５
Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ３、流速；１２ml／分］に付し、
溶出容量５２０−６００mlの画分を集めｐＨ７に調整
後、減圧下４０mlまで濃縮した。濃縮液を粒状白鷺炭
（１０ml）のカラムクロマトグラフィーに付し、水洗
（３０ml）後、３０％（V/V）イソプロピルアルコール
水（４０ml）で溶出した。溶出液を濃縮後、凍結乾燥し
て化合物５(１０３mg）を白色粉末として得た。 化合物５¹³ Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ、７５ＭＨｚ、δppm）（図６） 1
80.4, 175.7, 175.4,170.2, 158.3, 154.3, 139.0, 10
0.2, 89.0, 88.3, 88.2, 74.0, 68.1, 68.0,63.9, 59.
2, 59.1, 55.9, 41.7, 33.4, 32.4, 31.1 ＦＡＢ−マススペクトル；m/z 579 (M ＋ H)⁺

【００５１】実験例１ in vitro 抗菌試験： ヘリコバクター・ピロリ（Helicobacter pylori）に対
する in vitro 抗菌活性試験 被験菌として、ヘリコバクター・ピロリ（ＮＣＴＣ １
１６３７）菌を使用し、化合物１の抗菌活性は以下の方
法［寒天希釈（Agar Dilution）法］によって測定し
た。化合物１をジメチルスルホキシドに溶解し、滅菌蒸
留水で２倍ずつ段階的に希釈することによって被験サン
プルを調製した。培地として７％馬血液加Brucella aga
r を使用し、調製した被験サンプル２ミリリットルを、
各々７％馬血液加 Brucella agar １８ミリリットルと
混和することによって、測定用平板を作製した。ヘリコ
バクター・ピロリ菌は、２.５％牛胎児血清添加 Brucel
labroth 培地を使用して、CampyPak^TM（ＢＢＬ^R Beckto
n Dickinson Microbiology Systems）を挿入したガスパ
ックジャー中で、３７℃、２０時間振盪培養して、種菌
液とした。２.５％牛胎児血清添加 Brucella broth 培
地を用いて約１０⁶ＣＦＵ／mlに調整した菌液５マイク
ロリットルを、各々の測定用平板に接種し、CampyPakTM
と水を含ませた脱脂綿を挿入したガスパックジャー中
で、３７℃、４日間培養した。培養後、菌株の発育を肉
眼で観察し、菌株の発育が観察されない最低濃度を該被
験化合物のＭＩＣ値（最小発育阻止濃度）とした。化合
物１は０.０２５（μg／ml）のＭＩＣ値を示した。

【００５２】実験例２ in vivo 抗菌活性試験：マウス
(Ｃrj：ＩＣＲ、雄、５週齢)を２０時間絶食させた後、
ヘリコバクター・ピロリＴＮ２Ｆ４をマウス当たり１０
^7.79 ＣＦＵ胃内に接種した。感染１１日後から０.５％
メチルセルロース水溶液に懸濁した被験化合物の１、
３、１０、３０、５０mg／kgを１日朝夕２回、２日間経
口投与した。最終投与翌日に感染マウスの胃を摘出して
破砕し、その10倍希釈系列を活性炭添加変法 Skirrow
培地に接種して微好気条件下３７℃で４日間培養を行
い、菌の発育の有無をもとに除菌効果を求めた。結果を
〔表１〕に示す。なお、細菌数は平均±標準偏差で表
し、対照群に対して Dunnett 検定を行った。〔表１〕
において**はＰ＜０.０１を示す。

【表１】 〔表１〕に示す通り、化合物１（ＨＣ−６２）は１ｍｇ
／kg以上で用量依存性のあるマウス胃内菌数低減効果を
発現し、３０mg／kgで５０％、５０mg／kgでは１００％
の除菌率が達成された。従って、ヘリコバクター・ピロ
リ感染に起因する胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胃癌の
予防および治療に本発明製剤が有効であることが分か
る。

【００５３】製剤例 本発明の化合物１またはその塩を有効成分として含有し
てなる、ヘリコバクター・ピロリ感染症治療剤として使
用する場合、次のような処方によって製造することがで
きる。 １．カプセル剤 (1) 化合物１ １００mg (2) ラクトース ９０mg (3) 微結晶セルロース ７０mg (4) ステアリン酸マグネシウム １０mg １カプセル ２７０mg (１)、(２)と(３)の全量及び(４)の１／２を混和した
後、顆粒化する。これに残りの(４)を加えて全体をゼラ
チンカプセルに封入する。 ２．錠剤 (1) 化合物１ １００mg (2) ラクトース ３５mg (3) コーンスターチ １５０mg (4) 微結晶セルロース ３０mg (5) ステアリン酸マグネシウム ５mg １錠 ３２０mg (１)、(２)と(３)の全量及び(４)の２／３及び(５)の１
／２を混和した後、顆粒化する。これに残りの(４)及び
(５)をこの顆粒に加えて錠剤に加圧成型する。

【００５４】

【発明の効果】本発明の化合物（I）は、ヘリコバクタ
ー・ピロリに代表されるヘリコバクター属菌に対して極
めて特異的な強い抗菌活性を有する。従って、本発明の
化合物又はその塩を使用すれば、ヘリコバクター属菌
（特にヘリコバクター・ピロリ）に対する従来の抗菌剤
の有効量より非常に少ない投与量で望ましい抗ヘリコバ
クター・ピロリ剤としての効果を得ることができる。化
合物（I）は、ヘリコバクター属菌に起因する十二指腸
潰瘍、胃潰瘍、慢性胃炎、胃癌等の各種の疾患の予防又
は治療に有効であり、ヘリコバクター・ピロリは潰瘍を
再発させる大きな原因でもあるため、潰瘍の再発防止に
も有効である。また、化合物（I）は、スタフィロコッ
カス属またはバチルス属等のグラム陽性菌、及びエシェ
リヒア属、シウドモナス属、プロテウス属、クレビシエ
ラ属、セラチア属、サルモネラ属、シテロバクター属及
びアルカリゲネス属などのようなグラム陰性菌に対する
抗菌作用を示さない。従って、本発明の一般式（I）で
表される化合物又はその塩は、ヘリコバクター属細菌の
疾患の予防又は治療に選択的に有効であり、その他の細
菌及び真菌類への影響が極めて少なく、副作用のない安
全な薬剤として使用しうる。化合物（I）は、安定かつ
低毒性である。即ち、本発明は、副作用のない優れた抗
ヘリコバクター・ピロリ剤を提供するものである。

【００５５】

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は実施例２で得られた化合物１（ＨＣ−６
２）のＩＲスペクトルを示す。

【図２】図２は実施例２で得られた化合物１（ＨＣ−６
２）の ¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。

【図３】図３は実施例３で得られた化合物２の ¹³Ｃ−
ＮＭＲスペクトルを示す。

【図４】図４は実施例５で得られた化合物３の ¹³Ｃ−
ＮＭＲスペクトルを示す。

【図５】図５は実施例６で得られた化合物４の ¹³Ｃ−
ＮＭＲスペクトルを示す。

【図６】図６は実施例７で得られた化合物５の ¹³Ｃ−
ＮＭＲスペクトルを示す。

Claims (21)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】一般式 【化１】 〔式中、ＲＣＯはアシル基を示す〕で表される化合物ま
   たはその塩。
2. 【請求項２】ＲＣＯが１個ないし複数個連結したアミノ
   酸残基である請求項１記載の化合物。
3. 【請求項３】アミノ酸残基が蛋白質構成アミノ酸残基で
   ある請求項２記載の化合物。
4. 【請求項４】ＲＣＯがセリル基である請求項１記載の化
   合物。
5. 【請求項５】ＲＣＯがグルタミニルグルタミニルセリ
   ル、グルタミニルグルタミニルグルタミニルセリルまた
   はグルタミニル−α−グルタミルセリル基である請求項
   １記載の化合物。
6. 【請求項６】請求項１記載の化合物またはその塩を含有
   してなる医薬。
7. 【請求項７】請求項１記載の化合物またはその塩を含有
   することを特徴とする抗ヘリコバクター・ピロリ剤。
8. 【請求項８】ヘリコバクター・ピロリ感染疾患予防治療
   剤である請求項７記載の抗ヘリコバクター・ピロリ剤。
9. 【請求項９】ヘリコバクター・ピロリ感染疾患が胃もし
   くは十二指腸潰瘍、胃炎または胃癌である請求項８記載
   の抗ヘリコバクター・ピロリ剤。
10. 【請求項１０】請求項１記載の化合物またはその塩とそ
    れ以外の抗菌剤とを組み合わせてなる抗ヘリコバクター
    ・ピロリ剤。
11. 【請求項１１】それ以外の抗菌剤がアモキシシリン、ク
    ラリスロマイシンおよびメトロニダゾールから選ばれた
    １種以上である請求項１０記載の抗ヘリコバクター・ピ
    ロリ剤。
12. 【請求項１２】請求項１記載の化合物またはその塩と潰
    瘍治療剤とを組み合わせてなる抗ヘリコバクター・ピロ
    リ剤。
13. 【請求項１３】潰瘍治療剤がプロトンポンプインヒビタ
    ーである請求項１２記載の抗ヘリコバクター・ピロリ
    剤。
14. 【請求項１４】プロトンポンプインヒビターがランソプ
    ラゾールである請求項１３記載の抗ヘリコバクター・ピ
    ロリ剤。
15. 【請求項１５】バチルス属に属し請求項５記載の化合物
    を生産する能力を有する微生物を培地に培養し、培養液
    中に該化合物を生成蓄積せしめ、これを採取することを
    特徴とする請求項５記載の化合物の製造法。
16. 【請求項１６】微生物がバチルス・メガテリウムである
    請求項１５記載の製造法。
17. 【請求項１７】微生物がバチルス・エスピーＨＣ−６２
    株である請求項１５記載の製造法。
18. 【請求項１８】請求項５記載の化合物の生産能を有する
    バチルス・メガテリウム。
19. 【請求項１９】請求項５記載の化合物の生産能を有する
    バチルス・エスピーＨＣ−６２。
20. 【請求項２０】式 【化２】 で表される化合物またはその塩。
21. 【請求項２１】次の物理化学的性状を有する化合物ＨＣ
    −６２； （１）分子式：Ｃ₂₄Ｈ₃₉Ｎ₁₀Ｏ₁₃Ｐ （２）ＵＶスペクトル：水中のλmax（ε）、223±3 nm
    (8,900±1,500), 277±3 nm (13,300±2,000) （３）ＩＲスペクトル：ＫＢｒ錠剤中、主な吸収を示す
    （波数、cm^-1）、3350, 1660, 1570, 1470, 1300, 123
    0, 1080 （４）¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトル：重水中、以下のシグナ
    ルが認められる（125MHz、δppm）、180.5, 179.7, 17
    5.6, 175.5, 172.2, 170.2, 158.3, 154.3, 139.0,100.
    3, 89.0, 88.3, 88.2, 74.0, 68.1, 68.1, 63.9, 59.3,
    59.2, 56.2,55.2, 41.7, 33.8, 32.8, 32.5, 29.8, 2
    9.3 またはその塩。