JPH11193264A

JPH11193264A - 新規アミノ酸誘導体

Info

Publication number: JPH11193264A
Application number: JP9368042A
Authority: JP
Inventors: Shigeru Suzuki; 鈴木　　茂; Kunitaka Hirose; 国孝広瀬; Mikiro Yanaka; 幹郎谷中; Hiroshi Maruoka; 博丸岡; Mitsunori Hakozaki; 充徳箱崎; Toru Yamazaki; 徹山崎; Toshikazu Dewa; 俊和出羽; Yoshiyuki Takemura; 好之竹村; Eiji Inoguchi; 英司井野口; Takeo Edamatsu; 剛生枝松
Original assignee: Kureha Corp
Current assignee: Kureha Corp
Priority date: 1997-12-26
Filing date: 1997-12-26
Publication date: 1999-07-21

Abstract

(57)【要約】【課題】新規なアミノ酸誘導体及びケモカイン受容体
拮抗剤の提供。【解決手段】次の式で示されるアミノ酸誘導体 R¹-X¹-ph-X²-A-Y-R² 式中 Aは Arg, Lys, Orn 残基を示し、X¹及びX²は-(C=
O)-,または-(C=O)-NH-等を、Y は-NH-等を、R¹及びR²は
アルキル残基等を示す。CXC及びCCケモカイン受容体拮
抗作用を有し、エイズ、アレルギー性疾患、炎症性疾患
などの治療あるいは予防に優れた効果を示す。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、新規なアミノ酸誘
導体及びその塩に関する。さらに本発明は、この化合物
を有効成分とするケモカイン受容体拮抗剤に関する。本
発明の化合物は、ケモカイン受容体拮抗剤としてエイ
ズ、アレルギー性疾患、炎症性疾患などの治療あるいは
予防に用いられる。

【０００２】

【従来の技術】ケモカイン(Chemokine, chemotactic cy
tokineの略) は、白血病に対する遊走活性を有する４個
のシステインをこの分子内に含有する一群のタンパク質
であり、１番目と２番目のシステインの間に１個のアミ
ノ酸の挿入された CXCケモカイン（αケモカイン) サブ
ファミリーと１番目と２番目のシステインが隣接した C
C ケモカイン (βケモカイン) サブファミリーとがある
CXC ケモカインはT-Cellline-tropic HIV(T-HIV)のCD4
陽性細胞への侵入を可能にしている。そして、CCケモカ
インファミリーには RANTES, MIP-1β, MCP-1, MCP-2,
MCP-3, I-309などが含まれている。CCケモカイン中でma
crophage-tropic HIV(M-HIV)のセカンドレセプターであ
るCCR5が存在している。CCケモカインは単独、リンパ
球、好酸球、好塩基球、肥満細胞に作用してこれらの細
胞を遊走させ、また脱顆粒や種々の炎症性メディエータ
ーの放出などの作用をしている。またインターロイキン
8(1L-8) もケモカインの 1種として知られている。

【０００３】また、最近の總説（内科80(2)218〜224(19
97))によると、Bergerらは、G タンパク結合性レセプタ
ーCXCR4 が T cell line-tropic HIV(T-HIV)のCD4 陰性
細胞への侵入を可能にすることを見出したことが記載さ
れている。そしてこのCXCR4の生理的リガントがSDF-1
という CXCケモカイン（αケモカイン) に属する分子で
あることも判明してきている。なお、CXCR4 は金沢大学
(現東京大学) の松島グループによって、またSDF-1は
京都大学の本庶グループと大阪大学の岸本グループによ
りすでに見いだされてクローニングされていた。さらに
CXCR4 発見の直前に米国の他のグループによって発見さ
れたCCケモカイン(RANTES, MIP-1α, β等のβケモカイ
ン) はHIV-1 の感染を抑制するという報告もなされた。
結局、マクロファージにはCCR5が、また正常T 細胞には
CD4 とともにCXCR4 が存在することがわかった。そして
上記ケモカインの受容体拮抗剤としては、Arg Arg Trp
Trp Cys Xaa の６〜14個のアミノ酸よりなるペプチドを
インターロイキン8 拮抗剤とすること(wo95/16702)、イ
ンドール誘導体を有効成分とする非ペプチド型インター
ロイキン8 拮抗剤 (特開平9-169729号公報) あるいはピ
ペリジン誘導体を含有するケモカイン受容体拮抗剤 (特
開平9-249566号公報) 等が知られている。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、このよ
うなインターロイキン8 、RANTES, MIP-1 α、SDF-1 な
どのケモカインによって惹起される疾患を阻害する薬剤
を開発するために鋭意研究したところ、新規なアミノ酸
誘導体が、1L-8、RANTES、MIP-1 α、SDF-1 等の受容体
に対する拮抗作用を有するという知見を得た。そして、
さらにこの知見に基づいて検討を重ねた結果、本発明を
完成するに至った。すなわち、本発明の課題は、新規な
アミノ酸誘導体及びそのアミノ酸誘導体を有効成分とす
るケモカイン受容体拮抗剤を提供することにある。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明は、次の一般式
(1) で示されるアミノ酸誘導体またはその塩に関する。 R¹-X¹-ph-X²-A-Y-R² ・・・・・ (1) 式中、Ａは DまたはL のArg, Lys, Orn から選択される
アミノ酸残基を示す。本発明において、アミノ酸はL,D,
ラセミ体のいずれでもよいが、L-アミノ酸が好ましい。
X¹は存在しないか、または-(C=O)-, -(C=O)-NH-, -(C=
O)-O-, -(C=O)-S-, -NH-(C=O)-,-NH-(C=S)-,-NH-(C=O)-
NH-,-NH-(C=S)-NH-,-(S=O)-,-SO₂-,-NH-,-O- 及び-S-
よりなる群から選択される基を示す。X²は、存在しない
か、または-(C=O)-,-(S=O)-,-SO₂-,-NH-(C=O)-または-N
H-(C=S)-を示す。Y は、存在しないか、または-O-,-S-,
-NH-または-NR³を示す。R¹R²はそれぞれ独立に、、炭素
数12-30 の直鎖アルキル基、分岐アルキル基、環状アル
キル基、コレステリル基、二重結合を1-5 含む直鎖アル
ケニル基または分岐アルケニル基を示すか、あるいはR¹
R²のいずれか一方が水素原子、炭素数1-8 の直鎖アルキ
ル基、分岐アルキル基、直鎖アルケニル基、分岐アルケ
ニル基または環状アルキル基を示す。R³は水素原子、
炭素数1-8 の直鎖アルキル基、分岐アルキル基、直鎖ア
ルケニル基、分岐アルケニル基または環状アルキル基を
示す。また、ph基に対する置換位置は、オルト、メタ、
パラのいずれでもよい。

【０００６】また、本発明においては、上記一般式の化
合物において、R¹は炭素数4-8 の直鎖アルキル基、分岐
アルキル基、環状アルキル基、直鎖アルケニル基または
分岐アルケニル基を示す。R²は炭素数12-30 の直鎖アル
キル基、分岐アルキル基、環状アルキル基、コレステリ
ル基、二重結合を1-5 含む直鎖アルケニル基または分岐
アルケニル基を示す化合物であってもよい。X¹,X²,A 及
びY は上記と同じ意味をもつ。本発明においては上記化
合物のうちX¹が-O-,-NH-(C=O)-, X²が -(C=O)-, Y が-O
- または-NH-を示す化合物が望ましい。また、これらの
塩のうち、好ましい塩として、トリフルオロ酢酸塩、塩
酸塩、酢酸塩、硫酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタン
スルホン酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、
フマル酸塩、プロピオン酸塩、酪酸塩などを例示するこ
とができる。

【０００７】本発明の化合物は、公知の方法によって製
造することができる。例えば、1)所定のアミノ酸のＮ末
端を保護したアミノ酸と、R²-Y-Hとを縮合させ (工程
1)、2)アミノ酸Ｎ末端保護基を除去し (工程2)、3) R¹-
X¹-ZとX¹- ph-X²-OR⁴とを縮合させ (工程3) (但し R⁴
はメチル基などの保護基を示す) 、4)R⁴を脱保護し必要
があれば活性化し (工程4)、5) R¹X¹-ph-X²-Z とA'-Y-R
² とを縮合させ (工程5)(ただし、Z はハロゲン原子ま
たは水酸基を、A'は側鎖が保護されているアミノ酸を示
す) 、6)アミノ酸側鎖保護基を除去する (工程6)ことに
よって製造することができる。

【０００８】本発明のアミノ酸誘導体としては次の化合
物を例示することができる。 2-(イソプロピルカルバモイル)-ベンゾイル-L- アルギ
ニン-n- ヘキサデシルアミド(I) 3-(イソプロピルカルバモイル)-ベンゾイル-L- アルギ
ニン-n- ヘキサデシルアミド(II) 4-(イソプロピルカルバモイル)-ベンゾイル-L- アルギ
ニン-n- ヘキサデシルアミド(III) 3-(イソプロピルカルバモイル)-ベンゾイル-L- リシン-
n- ヘキサデシルアミド(IV) 2-(イソプロピルカルバモイル)-ベンゾイル-L- リシン-
n- ヘキサデシルアミド(V) ベンゾイル-L- アルギニン-n- ヘキサデシルアミド(VI)

【０００９】本発明は、前記アミノ酸誘導体またはその
塩を有効成分とするケモカイン受容体拮抗剤に関する。
本発明におけるアミノ酸誘導体またはその塩は、IL-8、
RANTES, MIP- 1α、SDF-1 などのケモカインによって惹
起される疾患、例えばエイズ、アレルギー性疾患、炎症
性疾患などの治療あるいは予防に用いられる。本発明の
アミノ酸誘導体またはその塩は、これをICR 系マウスに
単回経口投与(投与量500mg/kg) し、６日後の死亡例を
みたところ全くなく、このことからみて、急性毒性はな
いものと判断される。そして投与量は、一日体重１kg当
り、 0.1〜150mg 、好ましくは 1〜100 mgを１回または
数回に分けて投与することがてきる。投与形態は経口投
与が望ましいが、これに限るものではない。非経口的
に、例えば注射や経皮、腸内投与等適宜選択することが
てきる。また、前記投与量は患者の症状によって適宜変
更するこができる。

【００１０】経口投与する場合の剤型は、本発明のアミ
ノ酸誘導体あるいはその塩に薬学的に許容される添加剤
１種又はそれ以上を加えて、例えば、散剤、錠剤、顆粒
剤、カプセル剤、坐剤、注射剤、又は経口用液剤等にす
ることができる。添加剤としては、例えば、ステアリン
酸マグネシウム、タルク、乳糖、デキストリン、デンプ
ン類、メチルセルロース、脂肪酸グリセリド類、水、プ
ロピレングリコール、マクロゴール類、アルコール、結
晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、低置換
度ヒドロキシプロピルセルロース、カルメロース類、ポ
ビドン、ポリビニルアルコール、ステアリン酸カルシウ
ム等を挙げることができる。更に、必要に応じて、着色
剤、安定化剤、抗酸化剤、防腐剤、ｐＨ調節剤、等張化
剤、溶解補助剤及び／または無痛化剤等を添加すること
ができる。顆粒剤、錠剤又はカプセル剤はコーティング
基剤、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒ
ドロキシプロピルメチルセルロースフタレート等によっ
てコーティングすることもできる。そして、単独投与量
中に本発明のアミノ酸誘導体を 0.1〜500mg 、好ましく
は 1〜100mg 含有させることが望ましい。

【００１１】次に本発明のアミノ酸誘導体の製造法につ
いて実施例をあげて具体的に説明する。なお、以下の説
明において下記の略語を用いることがある。 WSCI; 1- エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)-カル
ボジイミド HOBt; 1- ヒドロキシベンゾトリアゾール Pmc; 2,2,5,7,8-ペンタメチルクロマン-6- スルホニル DMF; N,N-ジメチルホルムアミド Fmoc; 9- フルオレンメトキシカルボニル Boc; tert- ブトキシカルボニル DMAP; 4- ジメチルアミノピリジン Bz;ベンゾイル

【００１２】

【実施例１】(1) 2-(イソプロピルカルバモイル)-安息
香酸 (式4)の製法 (工程1)モノメチルフタレート 562.6mgをDMF 11.25 ml
に溶解させ、室温攪拌下WSCl塩酸塩 1.197g 、HOBt 0.8
44g 、2-アミノプロパン 0.321mlを順次加え、同温度に
てさらに３時間攪拌した。反応液に１規定塩酸水を加え
トルエン: 酢酸エチル＝1:2 溶液にて分液抽出し、有機
層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮して得た粗生
成物をシリカゲルクロマトグラフィー(n- ヘキサン: 酢
酸エチル＝1:1)にて精製し、メチル-2-(イソプロピルカ
ルバモイル)-ベンゾエート742.2 mgを無色透明粘性固体
として得た。¹ HNMR(500MHz,CDCl₃) δ:7.84(1H,d,J=7.5Hz),7.48(1H,d,J=7.5Hz),7.43(1H,
t,J=7.5Hz), 7.41(1H,t,J=7.5Hz), 5.77(1H,br.s), 4.2
6(1H,sept,J=6.5Hz), 3.87(3H,s), 1.26 (6H,d,J=6,5H
z) MS m/z(FAB);222(MH⁺)

【００１３】(工程2)工程１で得たメチル-2-(イソプロ
ピルカルバモイル)-ベンゾエート690.9mg をテトラヒド
ロフラン 6.91 ml、メタノール 6.91ml に溶解させ、室
温攪拌下１規定水酸化ナトリウム水溶液 6.91 mlを加え
1 時間攪拌した。反応液に1 規定塩酸水を加え酢酸エチ
ルにて分液抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥
後減圧濃縮して得た粗生成物をシリカゲルクロマトグラ
フィー( クロロホルム; メタノール＝1:1 ) にて精製
し、標記化合物 (式4) 317.3mgを無色透明粘性固体とし
て得た。¹ HNMR(500MHz,DMSO-d₆) δ:8.38(1H,br,s),7.77(1H,d,J
=7.5Hz),7.49(1H,t,J=7.5Hz), 7.48(1H,t,J=7.5Hz), 7.
44(1H,d,J=7.5Hz), 5.77(1H,br,s) 3.99(1H,sept,J=6.5
Hz), 1.12(6H,d,J= 6.5Hz) MS m/z(FAB);208(MH⁺)

【００１４】

【化１】

【００１５】

【外１】

【００１６】¹HNMR(500MHz,DMSO-d₆) δ:7.88(2H,d,J=7.5Hz), 7.79(1H,br,t), 7.74-7.70(2
H,m) ，7,457.40(3H,m),7.31(2H,t,J=7.5Hz), 7.00-6.3
0(3H,m), 4.29-4.18(3H,m), 3.95-3.89(1H,m), 3.07-3.
00(4H,m), 2.56(2H,t,J=6.5Hz), 2.47(6H,Sx2),2.02(3
H, s), 1.75(2H,t,J=6.5Hz), 1.67-1.15(38H,m), 0.85
(3H,t,J=7.0Hz) MS m/z(FAB);886(MH⁺)

【００１７】

【化２】

【００１８】(3) 2- (イソプロピルカルバモイル)-L-ア
ルギニン-n- ヘキサデシルアミド(I)(式6)の製法

【００１９】

【化３】

【００２０】（工程１）前記(2) で得られたN-9-フルオ
レニルメトキシカルボニル-N^G-2,2,5,7,8- ペンタメチ
ルクロマン-6- スルホニル-L- アルギニン-n- ヘキサデ
シルアミド[Fmoc-Arg (N^GPmc)-NH-n-C₁₆H₃₃]421.1mgを
DMF8.422mlに溶解させ、室温撹拌下ジエチルアミン0.84
2ml を加え同温度にて0.25時間撹拌した。反応液を減圧
濃縮し蒸留水を加え酢酸エチルにて分液抽出し有機層を
無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮してN^G-2,2,5,7,8
- ペンタメチルクロマン-6- スルホニル-L- アルギニン
-n- ヘキサデシルアミド[Arg(N^GPmc)-NH-n-C₁₆H₃₃] の
粗生成物を薄黄色粘性固体として得た。

【００２１】次に前記(1) で得られた 2-(イソプロピル
カルバモイル) 安息香酸98.8mgをDMF1.976mlに溶解させ
室温撹拌下WSCI塩酸塩182.2mg, HOBt128.4mgを加え10分
撹拌し、先に得たArg (N^GPmc)-NH-n-C₁₆H₃₃の粗生成物
をDMF0.316mlに溶解させたものを加え、同温度にて20時
間撹拌した。反応液に蒸留水及び１規定塩酸水を加えク
ロロホルムにて分液抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウ
ムで乾燥後減圧濃縮して得た粗生成物をシリカゲルクロ
マトグラフィー (クロロホルム- クロロホルム：メタノ
ール＝15:1) にて精製し、2- (イソプロピルカルバモイ
ル)-ベンゾイル-N^G-2,2,5,7,8- ペンタメチルクロマン
-6- スルホニル-L- アルギニン-n- ヘキサデシルアミド
(式7) 341.9mgを白色固体として得た。

【００２２】

【化４】

【００２３】（工程２）工程１で得られた 2-(イソプロ
ピルカルバモイル)-ベンゾイル-N^G-2,2,5,7,8- ペンタ
メチルクロマン-6- スルホニル-L- アルギニン-n- ヘキ
サデシルアミド341.9mg をクロロホルム3.419ml に溶解
させ室温撹拌下、チオアニソール93.9μl 、トリフルオ
ロ酢酸3.419ml を加え１時間撹拌した。反応液を減圧濃
縮して得られた粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィ
ー（クロロホルム：メタノール＝10:1〜5:1)にて精製し
標記化合物 (式6)119.4mg を白色固体として得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ:8.50(1H,d,8.0Hz), 8.40(1H,d,8.0Hz), 8.05(1H,t,J
=5.5Hz), 7.57(1H,d,J=6.0Hz), 7.52-7.48(2H,m), 7.40
(1H,d,J=6.0Hz), 4.40-4.28(1H,m), 4.03(1H,sept,J=7.
0Hz), 3.15-3.05(4H,m), 1.82-1.29(36H,d,J=7.0Hz),
1.11(6H,d,J=6.5Hz), 0.85(3H,t,J=7.0Hz) MS m/z (FAB);587 (MH⁺)

【００２４】

【実施例２】(1) 3- (イソプロピルカルバモイル)-安息
香酸の製法（工程１）モノメチルイソフタレート566.4mg をDMF11.
33mlに溶解させ、室温撹拌下WSCI塩酸塩1.205g,HOBt 0.
850g, 2-アミノプロパン 0.323mlを順次加え、同温度に
てさらに３時間撹拌した。反応液に１規定塩酸水を加え
トルエン：酢酸エチル＝1:2 溶液にて分液抽出し、有機
層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮して得た粗生
成物をシリカゲルクロマトグラフィー (n-ヘキサン：酢
酸エチル＝1:1)にて精製し、メチル-3-(イソプロピルカ
ルバモイル)-ベンゾエート 615.6mgを白色固体として得
た。¹ H NMR (500MHz,CDCl₃) δ:8.33(1H,s), 8.15(1H,d,J=7.5Hz), 8.04(1H,d,J=7.5
Hz), 7.53(1H,t,J=7.5Hz), 6.00(1H,br,s), 4.30(1H,se
pt,J=6.5Hz), 3.95(3H,s), 1.29(6H,d,J=6.5Hz) MS m/z (FAB);222 (MH⁺)

【００２５】（工程２）工程１で得られたメチル-3-(イ
ソプロピルカルバモイル)-ベンゾエート 615.6mgをテト
ラヒドロフラン6.16ml、メタノール6.16mlに溶解させ、
室温撹拌下１規定水酸化ナトリウム水溶液6.91mlを加え
１時間撹拌した。反応液に１規定塩酸水を加え酢酸エチ
ルにて分液抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥
後減圧濃縮して得た粗生成物をシリカゲルクロマトグラ
フィー（クロロホルム：メタノール＝4:1)にて精製し、
標記化合物 (式7) 562.9mgを白色固体として得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ:8.42(1H,s), 8.07(1H,d,J=8.0Hz), 8.06(1H,d,J=8.0
Hz), 7.58(1H,t,J=8.0Hz), 4.11(1H,sept,J=6.5Hz), 1.
18(6H,d, J=6.5Hz) MS m/z (FAB);208 (MH⁺)

【００２６】

【化５】

【００２７】(2) 3-(イソプロピルカルバモイル)-ベン
ゾイル-L- アルギニン-n- ヘキサデシルアミド (II)(式
8)の製法

【００２８】

【化６】

【００２９】（工程１）

【外２】

【００３０】前記(1) で得られた 3-(イソプロピルカル
バモイル)-安息香酸19.1mgをDMF0.382mlに溶解させ、室
温撹拌下WSCI塩酸塩35.2mg, HOBt24.9mgを加え30分撹拌
し、先に得られたArg (N^GPmc)-NH-n-C₁₆H₃₃の粗生成物
をDMF0.122mlに溶解させたものを加え、同温度にて 1.5
時間撹拌した。反応液に蒸留水及び１規定塩酸水を加え
トルエン：酢酸エチル＝1:2 溶液にて分液抽出し、有機
層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮して得られた
粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー (クロロホル
ム〜クロロホルム：メタノール＝15:1-10:1)にて精製
し、3- (イソプロピルカルバモイル)-ベンゾイル-N^G-
2,2,5,7,8- ペンタメチルクロマン-6- スルホニル-L-
アルギニン-n- ヘキサデシルアミド35.2mgを白色固体と
して得た。

【００３１】（工程２）工程１で得られた3- (イソプロ
ピルカルバモイル)-ベンゾイル-N^G-2,2,5,7,8- ペンタ
メチルクロマン-6- スルホニル-L- アルギニン-n- ヘキ
サデシルアミド35.2mgをクロロホルム 0.352mlに溶解さ
せ室温撹拌下、トリフルオロ酢酸0.352ml を加え３時間
撹拌した。反応液を減圧濃縮して得られた粗生成物をシ
リカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノー
ル＝10:1-5:1) にて精製し標記化合物 (式8)10.0mgを白
色固体として得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ:8.53(1H,d,J=8.0Hz), 8.34(1H,dr,s), 8.32(1H,s),
7.99(2H,d,J=9.5Hz), 7.96(1H,br,t), 7.54(1H,t,J=7.5
Hz), 7.52(1H,br,t), 7.30-6.80(3H,m), 4.48-4.40(1H,
m), 4.12(1H,sept,J=7.0Hz), 3.12-3.05(4H,m), 1.82-
1.29(32H,d,J=7.0Hz), 1.18(6H,d,J=6.0Hz), 0.85(3H,
t,J=7.0Hz) MS m/z (FAB);587 (MH⁺)

【００３２】

【実施例３】(1) 4-(イソプロピルカルバモイル)-安息
香酸の製法（工程１）モノメチルテレフタレート 571.1mgをDMF 1
1.42ml に溶解させ、室温撹拌下WSCI塩酸塩1.125g, HOB
t0.857g, 2-アミノプロパン 0.326mlを順次加え、同温
度にてさらに３時間撹拌する。反応液に１規定塩酸水を
加えトルエン：酢酸エチル＝1:2 溶液にて分液抽出し、
有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮して得ら
れた粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー (n-ヘキ
サン：酢酸エチル＝1.5:1)にて精製し、メチル-(4-イソ
プロピルカルバモイル) ベンゾエート 592.4mgを白色固
体として得た。¹ H NMR (500MHz,CDCl₃) δ:8.08(2H,d,J=8.0Hz), 7.80(2H,d,J=8.0Hz), 5.99(1
H,br,s), 4.29(1H,sept,J=7.0Hz), 3.94(3H,s), 1.29(6
H,d,J=7.0Hz) MS m/z (FAB);222 (MH⁺)

【００３３】（工程２）工程１で得られたメチル-4-(イ
ソプロピルカルバモイル)-ベンゾエート 592.4mgをテト
ラヒドロフラン5.92ml、メタノール5.92mlに溶解させ、
室温撹拌下１規定水酸化ナトリウム水溶液5.92mlを加え
１時間撹拌した。反応液に１規定塩酸水を加え酢酸エチ
ルにて分液抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥
後減圧濃縮して得られた粗生成物をシリカゲルクロマト
グラフィー（クロロホルム：メタノール＝4:1)にて精製
し、標記化合物 (式9) 534.0mgを白色固体として得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ:8.35(1H,d,J=8.0Hz), 7.99(2H,d,J=8.2Hz), 7.90(2
H,d,J=8.2Hz), 4.14-4.07(1H,m), 1.17(6H,d,J=7.0Hz) MS m/z (FAB);208 (MH⁺)

【００３４】

【化７】

【００３５】(2) 4-(イソプロピルカルバモイル)-ベン
ゾイル-L- アルギニン-n- ヘキサデシルアミド(III)(式
10) の製法

【００３６】

【化８】

【００３７】（工程１）実施例１(2）で得られたフルオ
レニルメトキシカルボニル-N^G-2,2,5,7,8- ペンタメチ
ルクロマン-6- スルホニル-L- アルギニン-n- ヘキサデ
シルアミド[Fmoc-Arg (N^GPmc)-NH-n-C₁₆H₃₃] 57.2mgを
DMF1.145mlに溶解させ室温撹拌下ジエチルアミン 0.115
mlを加え同温度にて0.25時間撹拌した。反応液を減圧濃
縮し蒸留水を加え酢酸エチルにて分液抽出し有機層を無
水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮してN^G-2,2,5,7,8-
ペンタメチルクロマン-6- スルホニル-L- アルギニン-n
- ヘキサデシルアミド[Arg(N^GPmc)-NH-n-C₁₆H₃₃] の粗
生成物を薄黄色粘性固体として得た。

【００３８】前記（1)で得られた 4-(イソプロピルカル
バモイル)-安息香酸13.4mgをDMF0.536mlに溶解させ、室
温撹拌下WSCI塩酸塩24.8mg, HOBt17.5mgを加え１時間撹
拌し、先に得たArg(N^GPmc)-NH-n-C₁₆H₃₃の粗生成物をDM
F0.086mlに溶解させたものを加え、同温度にて２時間撹
拌した。反応液に蒸留水及び１規定塩酸水を加えトルエ
ン：酢酸エチル＝1:2 溶液にて分液抽出し、有機層を無
水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮して得た粗生成物を
シリカゲルクロマトグラフィー (クロロホルム〜クロロ
ホルム：メタノール＝10:1) にて精製し、4- (イソプロ
ピルカルバモイル)-ベンゾイル-N^G-2,2,5,7,8- ペンタ
メチルクロマン-6- スルホニル-L- アルギニン-n- ヘキ
サデシルアミド (式11)40.1mg を白色固体として得た。

【００３９】

【化９】

【００４０】（工程２）前記工程１で得られた4- (イソ
プロピルカルバモイル)-ベンゾイル-N^G-2,2,5,7,8- ペ
ンタメチルクロマン-6- スルホニル-L- アルギニン-n-
ヘキサデシルアミド40.1mgをクロロホルム 0.401mlに溶
解させ室温撹拌した、トリフルオロ酢酸0.401ml を加え
3.5時間撹拌した。反応液を減圧濃縮して得られた粗生
成物をシリカゲルクロマトグラフィー (クロロホルム：
メタノール＝10:1〜5:1)にて精製し標記化合物 (式10)
36.4mgを薄黄色固体として得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ:8.53(1H,d,J=8.0Hz), 8.32(1H,d,J=7.0Hz), 7.96(2
H,d,J=8.0Hz), 7.92(2H,d,J=8.5Hz), 7.50(1H,br,t),
7.30-6.80(3H,m), 4.48-4.40(1H,m), 4.12(1H,sept,J=
7.0Hz), 3.12-3.05(4H,m), 1.82-1.29(33H,d,J=7.0Hz),
1.22(6H,d,J=6.0Hz), 0.85(3H,t,J=7.0Hz) MS m/z (FAB);587 (MH⁺)

【００４１】

【実施例４】3-(イソプロピルカルバモイル)-ベンゾイ
ル-L- リシン-n- ヘキサデシルアミド(式12) の製法

【００４２】

【化１０】

【００４３】

【外３】

【００４４】Fmoc-Lys(Boc)-OH 585mgをDMF 12mlに溶解
し、WSCI塩酸塩 720mg、HOBt 510mg、n-ヘキサデシルア
ミン450mg を加え、室温で15時間撹拌した。反応液に1N
塩酸を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫
酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮して得られた粗生成物
をシリカゲルクロマトグラフィー (クロロホルム：メタ
ノール＝20:1) にて精製し、標記化合物 792mgを白色固
体として得た。

【００４５】(2) 3-(イソプロピルカルバモイル)-ベン
ゾイル-ε-tert-ブトキシカルボニル-L-リシン-n-ヘキ
サデシルアミドの製法 Fmoc-Lys(Boc)-NH-n-C₁₆H₃₃45.5mgをDMF1mlに溶解し、
ジエチルアミン 0.1mlを加え、室温で15分撹拌した。反
応液を減圧濃縮して得られた粗生成物をDMF0.6mlに溶解
し、WSCI塩酸塩25mg、DMAP16mg、実施例２の(1) で得ら
れた 3- イソプロピルカルバモイル- 安息香酸15mgを加
え、室温で２日間撹拌した。反応液に1N塩酸を加え、酢
酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾
燥後、減圧濃縮して得られた粗生成物をシリカゲルカラ
ムクロマトグラフィー (ヘキサン：酢酸エチル＝1:2)に
て精製し、標記化合物31.1mgを白色固体として得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ:8.44(1H,d,J=7.5Hz), 8.32(1H,d,J=8.0Hz), 8.30(1
H,s), 7.99(1H,d,J=8.0Hz), 7.96(1H,d,J=8.0Hz), 7.92
(1H,brt), 7.53(1H,dd,J=8.0Hz), 6.73(1H,brt),4.43-
4.37(1H,m), 4.15-4.08(1H,m), 3.11-2.98(2H,m), 2.93
-2.87(2H,m), 1.75-1.68(2H,m), 1.42-1.16(38H,m), 0.
85(3H,t,J=7.0Hz) MS m/z (FAB);659 (MH⁺)

【００４６】(3) 3-(イソプロピルカルバモイル)-ベン
ゾイル-L-リシン-n-ヘキサデシルアミド (式12) の製法 3-(イソプロピルカルバモイル) ベンゾイル-ε-tert-ブ
トキシカルボニル-L-リシン-n- ヘキサデシルアミド26.
4mgをクロロホルム 0.3mlに溶解し、トリフルオロ酢酸
0.3mlを加え、室温で45分撹拌した。反応液を減圧濃縮
して得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラ
フィー (クロロホルム：メタノール＝5:1)にて精製し、
標記化合物28.1mg (式12) を白色固体として得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ:8.50(1H,d,J=8.5Hz), 8.33(1H,d,J=6.5Hz), 8.32(1
H,s), 8.00(1H,d,J=8.0Hz), 7.97(1H,d,J=8.0Hz), 7.93
(1H,t), 7.63(2H,brs), 4.47-4.39(1H,m), 4.16-4.08(1
H,m), 3.09-3.03(2H,m), 2.82-2.73(2H,m), 1.81-1.70
(2H,m), 1.45-1.16(36H,m), 0.85(3H,t,J=7.5Hz) MS m/z (FAB);559 (MH⁺)

【００４７】

【実施例５】2-(イソプロピルカルバモイル) ベンゾイ
ル-L- リシン-n- ヘキサデシルアミド(式13) の製法

【００４８】

【化１１】

【００４９】2-(イソプロピルカルバモイル) ベンゾイ
ル-L-リシン-n-ヘキサデシルアミドの製法実施例４の(1) で得られたFmoc-Lys(Boc)-NH-n-C₁₆H₃₃
41mgをDMF0.8mlに溶解し、ジエチルアミン0.08mlを加
え、室温で25分撹拌した。反応液を減圧濃縮して得た粗
生成物をDMF0.3mlに溶解し、WSCI塩酸塩23mg、DMAP15m
g、実施例１の(1)で得られた2-イソプロピルカルバモイ
ル安息香酸14mgを加え、室温で20時間撹拌した。反応液
に1N塩酸を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水
硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮して得られた粗生成
物をクロロホルム 0.5mlに溶解し、トリフルオロ酢酸
0.5mlを加え、室温で３時間撹拌した。反応液を減圧濃
縮して得た粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー
（クロロホルム：メタノール＝5:1)にて精製し、標記化
合物 (式13) 33.1mgを白色固体として得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ:8.47(1H,d,J=7.5Hz), 8.40(1H,d,J=7.5Hz), 8.04(1
H,t,J=5.5Hz), 7.71(2H,brs), 7.58-7.40(4H,m), 4.26-
4.21(1H,m), 4.07-4.00(1H,m), 3.14-3.07(2H,m),2.87-
2.78(2H,m), 1.96-1.88(1H,m), 1.65-1.35(4H,m), 1.28
(28H,brs), 1.15(3H,d,J=6.5Hz), 1.14(3H,d,J=6.5Hz),
0.86(3H,t,J=7.5Hz) MS m/z (FAB);559 (MH⁺)

【００５０】

【実施例６】ベンゾイル-L- アルギニン-n- ヘキサデシ
ルアミド(VI)の製法

【００５１】

【化１２】

【００５２】

【外４】

【００５３】実施例１の(3) 工程1 で得られた Arg(N^G
Pmc)- NH-n-C₁₆H₃₃15.7mg をピリジン0.3 mlに溶解し、
ベンゾイルクロリド3.3 μl を加え、室温で１時間攪拌
した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機
層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮して得た粗
生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロ
ホルム：メタノール＝20:1) にて精製し、標記化合物1
2.5mgを無色シロップとして得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ:8.34(1H,d,J=7.5Hz), 7.89(2H,d,J=7.0Hz), 7.61(2
H,t,J=7.0Hz),7.58-7.45(3H,m),6.80-6.30(3H,br),4.42
-4.35(1H,m),3,10-3.00(4H,m),2.56(2H,t,J=7.0Hz),2.4
6(6H,2s),2.01(3H,s),1.76(2H,t,J=7.0Hz),1.73-1.13(3
8H,m),0.85(3H,t,J=7.0Hz) MS m/z (FAB);767 (MH⁺)

【００５４】Bz-Arg(N^G Pmc)- NH-n-C₁₆H₃₃10.0mgをク
ロロホルム0.1 mlに溶解し、トリフルオロ酢酸0.1 mlを
加え、室温で２時間攪拌した。反応液を減圧濃縮して得
た粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ク
ロロホルム：メタノール＝5:1)にて精製し、標記化合物
7.6 mgを無色シロップとして得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ:8.40(1H,d,J=8.0Hz), 7.97-7.89(3H,m),7.60(1H,br
t),7.54(1H,t,J=7.5Hz),7.46(2H,t,J=7.5Hz),7.40-6.80
(3H,br),4.45-4.37(1H,m),3.17-3.04(4H,m),1,88-1.20
(32H,m),0.85(3H,t,J=7.0Hz) MS m/z (FAB); 502(MH⁺)

【００５５】次に、本発明のアミノ酸誘導体のIL-8，SD
F-1 及びRANTES拮抗活性の測定結果について試験例を示
す。

【試験例１】(1) IL-8拮抗活性の測定ヒトTHP- 1 (単球由来細胞株) 細胞を(¹²⁵I)IL-8を用い
た結合試験により本発明のIL-8アミノ酸誘導体の受容体
に対する親和性を次の方法により検討した。THP-1細胞
を10％FCS(FBS)を含む RPMI-1640培地にて継代し、その
対数増殖期細胞 5×10⁶cell/400 μl を0.1 ％ウシ血清
アルブミンを含む RPMI-1640培地に懸濁した。この懸濁
液に(¹²⁵I)IL-8 (最終濃度 0.06 mM 比活性2200ci/mmo
l)と、本発明のアミノ酸誘導体のD'-PBSあるいはDMSO溶
液 4μl(最終濃度 100μM)とを混合した。氷中２時間反
応させ遠心後 1mlのD-PBS で５回洗浄した。最終的にD'
-PBS 1mlに懸濁し、細胞の総放射活性を測定した。THP-
1細胞に対する(¹²⁵I)IL-8の非特異的結合量(THP-1細胞
のIL-8受容体以外に結合した(¹²⁵I)IL-8) は上記操作の
本発明のアミノ酸誘導体の代りに 1mg/ml IL-8 2μl を
THP-1 細胞懸濁液に加え求めた。THP-1 細胞に対する(
¹²⁵I)IL-8の特異的結合量は、全結合量から非特異的結
合量を差し引いて求めた。すなわち、次式にて本発明の
アミノ酸誘導体の 100μM 用量でのTHP-1 細胞とIL-8の
特異的結合に対する阻害率 (％) を求めた。阻害率 (％) ＝〔 (全結合量−非特異的結合量) −（本
発明のアミノ酸誘導体添加時結合量−非特異的結合
量）〕÷ (全結合量−非特異的結合量) ×100

【００５６】(2) SDF-1 及びRANTES拮抗活性の測定前記(1) の(¹²⁵I)IL-8に代えて (¹²⁵I)SDF-1及び(¹²⁵I)
RANTES を同じ濃度で用いてこれらに対する拮抗活性を
測定した。その結果を表１に示した。

【００５７】

【表１】

【００５８】この表に示されるように本発明の実施例の
アミノ酸誘導体は1L-8, SDF-1 あるいは RANTES に対し
て拮抗活性を示し、これらのケモカインによって惹起さ
れる疾患を防止することができることが判明した。

【００５９】

【試験例２】前記実施例のアミノ酸誘導体の急性毒性に
ついて検討した。すなわち、５週齢のICR 系マウス
(雄) を各群５匹に分け、１週間馴化飼育後、0.5 ％メ
チルセルロース水溶液に実施例のアミノ酸誘導体を溶解
又は分散して単回経口投与( 投与量 500mg/kg)し、６日
後の死亡数を調べた。結果を表２に示した。表２に示さ
れるようにいずれのアミノ酸誘導体を投与しても死亡せ
ず、急性毒性がないことが確認された。

【００６０】

【表２】 ──────────────────────────── 実施例番号化合物番号死亡数／生存数 ──────────────────────────── １ I 0/5 ２ II 0/5 ４ IV 0/5 ────────────────────────────

【００６１】

【製剤例】化合物（Ｉ）(10mg)、ラクトース(36mg)、コ
ーンスターチ(150mg) 、微結晶セルロース(29mg)、及び
ステアリン酸マグネシウム(5mg) を混合し、これを打錠
して錠剤(230mg／錠) にした。

【００６２】

【発明の効果】本発明により新規なアミノ酸誘導体又は
その塩を提供することができる。本発明の新規なアミノ
酸誘導体又はその塩は CXC及びCCケモカイン受容体拮抗
作用を有し、エイズ、アレルギー性疾患、炎症性疾患な
どの治療あるいは予防剤として優れた効果を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＣ０７Ｃ 317/32 Ｃ０７Ｃ 317/32 335/16 335/16 (72)発明者箱崎充徳埼玉県川口市芝中田１−30−３メゾン高柳102 (72)発明者山崎徹東京都葛飾区奥戸９−22−11 (72)発明者出羽俊和東京都江戸区南葛西１−１−１−402 (72)発明者竹村好之東京都練馬区西大泉２−18−37 (72)発明者井野口英司群馬県館林市北成島町734−２ (72)発明者枝松剛生神奈川県相模原市東橋本２−７−25

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】次の式(1) で示されるアミノ酸誘導体ま
たはその塩。 R¹-X¹-ph-X²-A-Y-R² ・・・・・ (1) 式中、Ａは DまたはL のArg, Lys及びOrn から選択され
るアミノ酸残基を示す。X¹は存在しないか、または-(C=
O)-, -(C=O)-NH-, -(C=O)-O-, -(C=O)-S-, -NH-(C=O)-,
-NH-(C=S)-,-NH-(C=O)-NH-,-NH-(C=S)-NH-,-(S=O)-,-SO
₂-,-NH-,-O- 及び-S- よりなる群から選択される基を示
す。X²は、存在しないか、または-(C=O)-,-(S=O)-,-SO₂
-,-NH-(C=O)-または-NH-(C=S)-を示す。Y は、存在しな
いか、または-O-,-S-,-NH-または-NR³を示す。R¹R²はそ
れぞれ独立に、炭素数12-30 の直鎖アルキル基、分岐ア
ルキル基、環状アルキル基、コレステリル基、二重結合
を1-5 含む直鎖アルケニル基または分岐アルケニル基を
示すか、あるいはR¹R²のいずれか一方が水素原子、炭素
数1-8の直鎖アルキル基、分岐アルキル基、直鎖アルケ
ニル基、分岐アルケニル基または環状アルキル基を示
す。R³は水素原子、炭素数1-8 の直鎖アルキル基、分
岐アルキル基、直鎖アルケニル基、分岐アルケニル基ま
たは環状アルキル基を示す。また、ph基に対する置換位
置は、オルト、メタ、パラのいずれでもよい。
【請求項２】次の式(2) で示されるアミノ酸誘導体ま
たはその塩。 R¹-X¹-ph-X²-A-Y-R² ・・・・・ (2) 式中、X¹, X², A 及びY は請求項１と同じ意味で用いら
れ、R¹は炭素数4-8 の直鎖アルキル基、分岐アルキル
基、環状アルキル基、直鎖アルケニル基または分岐アル
ケニル基を示す。R²は炭素数12-30 の直鎖アルキル基、
分岐アルキル基、環状アルキル基、コレステリル基、二
重結合を1-5 含む直鎖アルケニル基または分岐アルケニ
ル基を示す。
【請求項３】次の式(3) で示される請求項２記載のア
ミノ酸誘導体またはその塩。 R¹-X¹-ph-X²-A-Y-R² ・・・・・ (3) 式中、R¹, R², A 及びY は請求項２と同じ意味で用いら
れ、X¹は、-O-,-NH-(C=O)-, を示す。X²は、-(C=O)- を
示す。Y は-O- または-NH-を示す。
【請求項４】請求項１〜３のいずれかに記載のアミノ
酸誘導体またはその塩を有効成分とするケモカイン受容
体拮抗剤。