JPH11269134A

JPH11269134A - アミノ酸誘導体

Info

Publication number: JPH11269134A
Application number: JP10092307A
Authority: JP
Inventors: Hiroshi Maruoka; 博丸岡; Kunitaka Hirose; 国孝広瀬; Mikiro Yanaka; 幹郎谷中; Mitsunori Hakozaki; 充徳箱崎; Toru Yamazaki; 徹山崎; Toshikazu Dewa; 俊和出羽; Yoshiyuki Takemura; 好之竹村; Shigeru Suzuki; 鈴木　　茂; Eiji Inoguchi; 英司井野口; Takeo Edamatsu; 剛生枝松
Original assignee: Kureha Corp
Current assignee: Kureha Corp
Priority date: 1998-03-20
Filing date: 1998-03-20
Publication date: 1999-10-05

Abstract

(57)【要約】【課題】新規なアミノ酸誘導体ケモカイン受容体拮抗
剤の提供。【課題】次の式で示されるアミノ酸誘導体 R¹-X-A-Y-R²・・・・・ (1) 式中、A はアルギニン、リシンまたはオルニチンを示
し、X は存在しないか、-(C=O)-, -(S=O)-, -SO₂-, -NH
-(C=O)-, -NH-(C=S)- を示す、Y は、存在しないか、-O
-, -S-または-NR³- を示す。R¹, R²は、それぞれ独立に
アルキル残基、アルケニル残基あるいはいずれか一方は
水素原子を示す。CXC およびCCケモカイン受容体拮抗作
用を有し、エイズ、アレルギー性疾患、炎症性疾患など
の治療あるいは予防に優れた効果を示す。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、新規なアミノ酸誘
導体及びその塩に関する。さらに本発明は、この化合物
を有効成分とするケモカイン受容体拮抗剤に関する。本
発明の化合物は、ケモカイン受容体拮抗剤としてエイ
ズ、アレルギー性疾患、炎症性疾患などの治療あるいは
予防に用いられる。

【０００２】

【従来の技術】ケモカイン(Chemokine, chemotactic cy
tokineの略) は、白血病に対する遊走活性を有する４個
のシステインをこの分子内に含有する一群のタンパク質
であり、１番目と２番目のシステインの間に１個のアミ
ノ酸の挿入された CXCケモカイン（αケモカイン) サブ
ファミリーと１番目と２番目のシステインが隣接した C
C ケモカイン (βケモカイン) サブファミリーとがあ
る。 CXCケモカインはT-Cellline-tropic HIV(T-HIV)の
CD₄陽性細胞への侵入を可能にしている。そして、CCケ
モカインファミリーには RANTES, MIP-1β, MCP-1, MCP
-2, MCP-3, I-309などが含まれている。CCケモカイン中
でmacrophage-tropic HIV(M-HIV)のセカンドレセプター
であるCCR5が存在している。CCケモカインは単独、リン
パ球、好酸球、好塩基球、肥満細胞に作用してこれらの
細胞を遊走させ、また脱顆粒や種々の炎症性メディエー
ターの放出などの作用をしている。またインターロイキ
ン8(IL-8) もケモカインの 1種として知られている。

【０００３】また、最近の總説（内科80(2)218〜224(19
97））によると、Bergerらは、G タンパク結合性レセプ
ターCXCR4 が T cell line-tropic HIV(T-HIV)のCD4 陰
性細胞への侵入を可能にすることを見出したことが記載
されている。そしてこのCXCR4 の生理的リガントがSDF-
1 という CXCケモカイン（αケモカイン) に属する分子
であることも判明してきている。なお、CXCR4 は金沢大
学 (現東京大学) の松島グループによって、またSDF-1
は京都大学の本庶グループと大阪大学の岸本グループに
よりすでに見いだされてクローニングされていた。さら
にCXCR4 発見の直前に米国の他のグループによって発見
されたCCケモカイン(RANTES, MIP-1α, β等のβケモカ
イン) はHIV-1 の感染を抑制するという報告をもなされ
た。結局、マクロファージにはCCR5が、また正常T 細胞
にはCD4 とともにCXCR4 が存在することがわかった。そ
して上記ケモカインの受容体拮抗剤としては、Arg Arg
Trp Trp Cys Xaa の６〜14個のアミノ酸よりなるペプチ
ドをインターロイキン8 拮抗剤とすること(WO95/1670
2)、インドール誘導体を有効成分とする非ペプチド型イ
ンターロイキン8 拮抗剤 (特開平9-169729号公報) ある
いはピペリジン誘導体を含有するケモカイン受容体拮抗
剤 (特開平9-249566号公報) 等が知られている。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、このよ
うなインターロイキン8 、RANTES, MIP-1 α、SDF-1 な
どのケモカインによって惹起される疾患を阻害する薬剤
を開発するために鋭意研究したところ、新規なアミノ酸
誘導体が、IL-8、RANTES、MIP-1 α、SDF 等の受容体に
対する拮抗作用を有するという知見を得た。そして、さ
らにこの知見に基づいて検討を重ねた結果本発明を完成
するに至った。すなわち、本発明の課題は、新規なアミ
ノ酸誘導体及びそのアミノ酸誘導体を有効成分とするケ
モカイン受容体拮抗剤を提供することにある。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明は次の一般式(1)
で示されるアミノ酸誘導体またはその塩に関する。 R¹-X-A-Y-R²・・・・・ (1) 式中、A は、アルギニン、リシンおよびオルニチンから
なる群から選ばれるアミノ酸残基を示す、X は、存在し
ないか、-(C=O)-, -(S=O)-, -SO₂-, -NH-(C=O)-, -NH-
(C=S)- を示す、Y は、存在しないか、-O-, -S-または-
NR³- を示す。R¹, R²は、それぞれ独立に、炭素数12〜3
0の直鎖アルキル基、分岐アルキル基、環状アルキル
基、コレステリル基、二重結合を１〜５含む直鎖アルケ
ニル基または分岐アルケニル基を示すか、あるいはR¹,
R²のいずれか一方が水素原子、炭素数１〜８の直鎖アル
キル基、分岐アルキル基、環状アルキル基、直鎖アルケ
ニル基または分岐アルケニル基を示す。またR²は末端に
アシルオキシ基を有することがある。R³は、水素原子、
炭素数１〜８の直鎖アルキル基、分岐アルキル基、環状
アルキル基、直鎖アルケニル基、分岐アルケニル基を示
す。

【０００６】さらに、本発明は上記一般式において、R¹
が炭素数４〜８の直鎖アルキル基、分岐アルキル基、環
状アルキル基、直鎖アルケニル基または分岐アルケニル
基であり、R²が炭素数１２〜３０の直鎖アルキル基、分
岐アルキル基、環状アルキル基、コレステリル基、二重
結合を１〜５含む直鎖アルケニル基、分岐アルケニル基
であるアミノ酸誘導体またはその塩であることが望まし
く、あるいはX が存在しないか、-(C=O)- を示し、Y は
-O- または-NH-であるアミノ酸誘導体またはその塩であ
ることが望ましい。また、これらの塩としては、例え
ば、トリフルオロ酢酸塩、塩酸塩、酢酸塩、硫酸塩、乳
酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、シュウ酸
塩、マロン酸塩、コハク酸塩、フマル酸塩、プロピオン
酸塩、酪酸塩などを挙げることができる。

【０００７】本発明の化合物は、公知のペプチドの合成
方法によって製造することができる。例えば、1)所定の
アミノ酸のＮ末端を保護した保護アミノ酸と、R²-Y-Hと
を縮合させ (工程1)、2)アミノ酸Ｎ末端保護基を除去し
(工程2)、3) R¹-X-Z と縮合し (工程3)、 (ただし、Z
はハロゲン原子、水素原子または水酸基を示す) 、4)ア
ミノ酸側鎖保護基を除去する (工程4)ことによって製造
することができる。

【０００８】本発明のアミノ酸誘導体としては次の化合
物を例示することができる。 4-メチルペンタノイル-L- アルギニン-n- オクタデシル
エステルアセチル-L- アルギニン-n- オクタデシルエステルアセチル-L- アルギニン-n- ヘキサデシルアミド n-ヘキサデカノイル-L- アルギニン-n- オクタデシルエ
ステル n-ヘキサデカノイル-L- アルギニン-n- ヘキサデシルア
ミドアセチル-L- リシン-n- オクタデシルエステル

【０００９】本発明は、前記アミノ酸誘導体またはその
塩を有効成分とするケモカイン受容体拮抗剤に関する。
本発明におけるアミノ酸誘導体またはその塩は、IL-8、
RANTES, MIP- 1α、SDF-1 などのケモカインによって惹
起される疾患、例えばエイズ、アレルギー性疾患、炎症
性疾患などの治療あるいは予防に用いられる。本発明の
アミノ酸誘導体またはその塩は、これをICR 系マウスに
単回経口投与(投与量500mg/kg) し、６日後の死亡例を
みたところ全くなく、このことからみて、急性毒性はな
いものと判断される。そして投与量は、一日体重１kg当
り、 0.1〜150mg 、好ましくは 1〜100 mgを１回または
数回に分けて投与することがてきる。投与形態は経口投
与が望ましいが、これに限るものではない。非経口的
に、例えば注射や経皮、腸内投与等適宜選択することが
てきる。また、前記投与量は患者の症状によって適宜変
更するこができる。

【００１０】経口投与する場合の剤型は、本発明のアミ
ノ酸誘導体あるいはその塩に薬学的に許容される添加剤
１種又はそれ以上を加えて、例えば、散剤、錠剤、顆粒
剤、カプセル剤、坐剤、注射剤、又は経口用液剤等にす
ることができる。添加剤としては、例えば、ステアリン
酸マグネシウム、タルク、乳糖、デキストリン、デンプ
ン類、メチルセルロース、脂肪酸グリセリド類、水、プ
ロピレングリコール、マクロゴール類、アルコール、結
晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、低置換
度ヒドロキシプロピルセルロース、カルメロース類、ポ
ビドン、ポリビニルアルコール、ステアリン酸カルシウ
ム等を挙げることができる。更に、必要に応じて、着色
剤、安定化剤、抗酸化剤、防腐剤、ｐＨ調節剤、等張化
剤、溶解補助剤及び／または無痛化剤等を添加すること
ができる。顆粒剤、錠剤又はカプセル剤はコーティング
基剤、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒ
ドロキシプロピルメチルセルロースフタレート等によっ
てコーティングすることもできる。そして、単独投与量
中に本発明のアミノ酸誘導体を 0.1〜150mg 、好ましく
は 1〜100mg 含有させることが望ましい。

【００１１】次に実施例１を示して本発明のアミノ酸誘
導体の製法について具体的に説明する。

【実施例１】4-メチルペンタノイル-L- アルギニン-n-
オクタデシルエステル（化合物番号１）の製法 (1) N ^G-2,2,5,7,8- ペンタメチルクロマン-6- スルホ
ニル-L- アルギニン-n-オクタデシルエステル(Arg(Pmc)
-OC₁₈H₃₇)の合成 Fmoc-Arg(Pmc) 500mg をメタノール10mlおよび水 1mlに
溶解し、20％炭酸セシウム水溶液でpH8 に調整し、減圧
濃縮した。DMF により共沸し、減圧濃縮して得た残渣を
DMF10ml に溶解し、MsO-C₁₈H₃₇ 789mgを加え、室温で24
時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液
を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水
で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮して
得た粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー
（クロロホルム／メタノール／水＝7/3/0.5)にて精製
し、標記化合物136mg をクリーム色固体として得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ: 6.75-6.30(3H,br), 4.02-3.94(2H,m), 3.26-3.21(1H,
m), 3.07-3.00(2H,m), 2.58(2H,t,J=6.5Hz), 2.50(9H,3
s), 2.48(3H,s), 2.03(3H,s), 1.77(2H,t,J=6.5Hz), 1.
59-1.20(36H,m), 0.85(3H,t,J=7.0Hz) MS m/z (FAB);693 (MH⁺)

【００１２】(2) 4-メチルペンタノイル-L- アルギニン
-n- オクタデシルエステルの合成 Arg(Pmc)-OC₁₈H₃₇18.5mgをピリジン0.37mlに溶解し、W
SCI塩酸塩10.2mgと4-メチルペンタン酸 5μl を加え、
室温で3.5 時間攪拌した。反応液に1N塩酸を加え、ベン
ゼン/ 酢酸エチル=1/2の混合液で抽出した。有機層を無
水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮して得た粗生成物
をクロロホルム0.2ml に溶解し、トリフルオロ酢酸0.2m
l を加え、室温で1.5 時間攪拌した。反応液を減圧濃縮
して得た粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ー( クロロホルム/ メタノール=5/1) にて精製し、標記
化合物10.4mgを無色シロップとして得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ: 8.17(1H,d,J=7.5Hz), 7.57(1H,brs), 7.50-6.70(2H,b
r), 4.26-4.18(1H,m), 4.07-3.99(2H,m), 3.16-3.07(2
H,m), 2.12(2H,t,J=7.5), 1.80-1.70(1H,m), 1.65-1.18
(38H,m), 0.90-0.83(9H,m) MS m/z (FAB);525 (MH⁺)

【００１３】

【実施例２】アセチル-L- アルギニン-n- オクタデシル
エステル（化合物番号２）の製法 (1) アセチル-N^G-2,2,5,7,8- ペンタメチルクロマン-6
- スルホニル-L- アルギニン-n- オクタデシルエステル
(Ac-Arg(Pmc)-OC₁₈H₃₇) の合成実施例１の方法で合成したArg(Pmc)-OC₁₈H₃₇ 17.1mg を
ピリジン１mgに溶解し、無水酢酸5 μl を加え、室温で
2 時間攪拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出
した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮
して得た粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ー( クロロホルム/ メタノール=15/1)にて精製し、標記
化合物16.7mgを白色固体として得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ: 8.19(1H,d,J=7.5Hz), 6.80-6.30(3H,br), 4.20-4.11(1
H,m), 4.05-3.96(2H,m),3.08-2.98(2H,m), 2.58(2H,t,J
=6.5Hz), 2.50(9H,3s), 2.47(3H,s), 2.03(3H,s), 1.78
(2H,t,J=6.5Hz), 1.70-1.17(36H,m), 0.85(3H,t,J=7.0H
z) MS m/z (FAB);735 (MH⁺)

【００１４】(2) アセチル-L- アルギニン-n- オクタデ
シルエステル(Ac-Arg-OC₁₈H₃₇)の合成 Ac-Arg(Pmc)-OC₁₈H₃₇15.70mg をクロロホルム 0.16ml
に溶解し、トリフルオロ酢酸 0.16ml を加え、室温で2
時間攪拌した。反応液を減圧濃縮して得た粗生成物をシ
リカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/ メ
タノール/ 水＝7/3/0.5)にて精製し、標記化合物8.2mg
を白色固体として得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ: 8.24(1H,d,J=7.5Hz), 7.52(1H,brt), 7.47-6.50(3H,b
r), 4.25-4.18(1H,m), 4.06-3.97(2H,m), 3.14-3.04(2
H,m), 1.85(3H,s), 1.75-1.65(1H,m), 1.62-1.45(5H,
m), 1.31-1.15(30H,m), 0.86(3H,t,J=7.0Hz) MS m/z (FAB);469 (MH⁺)

【００１５】

【実施例３】アセチル-L- アルギニン-n- ヘキサデシル
アミド（化合物番号３）の製法 (1) N-9-フルオレニルメトキシカルボニル-N^G-2,2,5,
7,8- ペンタメチルクロマン-6- スルホニル-L- アルギ
ニン-n- ヘキサデシルアミド(Fmoc-Arg(Pmc)NHC₁₆H₃₃)
の合成 Fmoc-Arg(Pmc)OH 500mg をDMF10ml に溶解し、WSCI塩酸
塩10.2mg、HOBt203.9mg 、n-ヘキサデシルアミン364mg
を加え、室温で5 時間攪拌した。反応液に1N塩酸を加
え、ベンゼン/ 酢酸エチル=1/2の混合液で抽出した。有
機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮して得た
粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー( 酢酸エチ
ル) にて精製し、標記化合物455mg を白色固体として得
た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ: 7.88(2H,d,J=7.5Hz), 7.79(1H,brt), 7.74-7.70(2H,m),
7.45-7.40(3H,m), 7.31(2H,t,J=7.5Hz), 7.00-6.30(3
H,m), 4.29-4.18(3H,m), 3.95-3.89(1H,m), 3.07-3.00
(4H,m), 2.57(2H,t,J=6.5Hz), 2.50(9H,3s), 2.47(3H,
s), 2.02(3H,s), 1.75(2H,t,J=6.5Hz), 1.67-1.15(32H,
t,J=7.0Hz), 0.85(3H,t,J=7.0) MS m/z (FAB);886 (MH⁺)

【００１６】(2) アセチル-N^G-2,2,5,7,8- ペンタメチ
ルクロマン-6- スルホニル-L- アルギニン-n- ヘキサデ
シルアミド(Ac-Arg(Pmc)NHC₁₆H₃₃) の合成 Fmoc-Arg(Pmc)NHC₁₆H₃₃40.7mg をDMF 0.16mlに溶解し、
ジエチルアミン16μlを加え、室温で15分攪拌した。反
応液を減圧濃縮して得た粗生成物をピリジン0.9ml に加
え、無水酢酸9 μl を加え、室温で1.5 時間攪拌した。
反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無
水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮して得た粗生成物
をシリカゲルカラムクロマトグラフィー( クロロホルム
/ メタノール=15/1)にて精製し、標記化合物13.4mgを白
色シロップとして得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ: 7.91(1H,d,J=8.0Hz), 7.84(1H,t,J=5.5Hz), 6.72-6.30
(3H,br), 4.20-4.14(1H,m), 3.07-2.98(4H,m), 2.59(2
H,t,J=6.5Hz), 2.50(9H,3s), 2.47(3H,s), 2.03(3H,s),
1.82(3H,s), 1.78(2H,t,J=6.5Hz), 1.62-1.54(1H,m),
1.49-1.18(31H,m) 0.85(3H,t,J=7.0) MS m/z (FAB);706 (MH⁺) (3) アセチル-L- アルギニン-n- ヘキサデシルアミド(A
c-ArgNHC₁₆H₃₃)の合成 Ac-Arg(Pmc)-NHC₁₆H₃₃ 11mg をクロロホルム 0.11ml に
溶解し、トリフルオロ酢酸 0.11ml を加え、室温で2 時
間攪拌した。反応液を減圧濃縮して得た粗生成物をシリ
カゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/ メタ
ノール/ 水＝7/3/0.5)にて精製し、標記化合物 7.0mgを
白色固体として得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ: 8.07(1H,br), 7.94(1H,br), 7.86-7.69(2H,br), 7.37-
6.80(4H,br), 4.23-4.16(1H,m), 3.14-3.00(4H,m), 1.7
0-1.60(1H,m), 1.57-1.19(31H,m), 0.85(3H,t,J=7.0Hz) MS m/z (FAB);440 (MH⁺)

【００１７】

【実施例４】n-ヘキサデカノイル-L- アルギニン-n- オ
クタデシルエステル（化合物番号４）の製法 (1) n-ヘキサデカノイル-N^G-2,2,5,7,8- ペンタメチル
クロマン- 6-スルホニル-L- アルギニン-n- オクタデシ
ルエステル(C₁₅H₃₁-(C=O)-Arg(Pmc)OC₁₈H₃₇)の合成実施例１の方法で合成したArg(Pmc)OC₁₈H₃₇17.3mg を塩
化メチレン0.35mlに溶解し、トリエチルアミン7 μl と
n-ヘキサデカノイルクロリド15μl を加え、室温で1.5
時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液
を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナ
トリウムで乾燥後、減圧濃縮して得た粗生成物をシリカ
ゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム/ メタノ
ール＝15:1) にて精製し、標記化合物 24.1mg を白色固
体として得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ: 8.10(1H,d,J=7.5Hz), 6.80-6.30(3H,br), 4.19-4.12(1
H,m), 3.98(2H,t,J=6.5Hz), 3.98(2H,t,J=6.5Hz), 3.09
-3.00(2H,m), 2.58(2H,t,J=6.5Hz), 2.50(9H,3s),2.47
(3H,s), 2.11-2.05(2H,m), 2.03(3H,s), 1.77(2H,t,J=
6.5Hz), 1.70-1.17(56H,m), 0.85(6H,t,J=7.0Hz) MS m/z (FAB);930 (MH⁺)

【００１８】(2) n-ヘキサデカノイル-L- アルギニン-n
- オクタデシルエステル(C₁₅H₃₁-(C=O)-ArgOC₁₈H₃₇) の
合成 C₁₅H₃₁-(C=O)-Arg(Pmc)OC₁₈H₃₇ 20.5mg をクロロホルム
0.2mlに溶解し、トリフルオロ酢酸 0.2mlを加え、室温
で4 時間攪拌した。反応液を減圧濃縮して得た粗生成物
をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホル
ム：メタノール＝5/1)にて精製し、標記化合物 4.7mgを
無色シロップとして得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ: 8.16(1H,d,J=7.0Hz), 7.49(1H,brt), 7.35-6.60(3H,b
r), 4.26-4.18(1H,m), 4.01(2H,t,J=6.0Hz), 3.13-3.06
(2H,m), 2.16-2.10(2H,m), 1.79-1.70(1H,m), 1.65-1.4
6(7H,m), 1.35-1.20(48H,m), 0.85(6H,2t,J=7.0Hz) MS m/z (FAB);665 (MH⁺)

【００１９】

【実施例５】n-ヘキサデカノイル-L- アルギニン-n- ヘ
キサデシルアミド（化合物番号５）の製法 (1) n-ヘキサデカノイル-N^G-2,2,5,7,8- ペンタメチル
クロマン-6- スルホニル-L- アルギニン-n- ヘキサデシ
ルアミド(C₁₅H₃₁-(C=O)-Arg(Pmc)NHC₁₆H₃₃) の合成実施例１の方法で合成したFmoc-Arg(Pmc)NHC₁₆H₃₃38.2m
g をDMF0.16ml に溶解し、ジエチルアミン16μl を加
え、室温で15分攪拌した。反応液を減圧濃縮して得た粗
生成物を塩化メチレン0.6ml に溶解し、トリエチルアミ
ン12μl とヘキサデカノイルクロリド26μl を加え、室
温で1.5 時間攪拌した。反応液に水を加え、クロロホル
ムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、
減圧濃縮して得た粗生成物をシリカゲルカラムクロマト
グラフィー（クロロホルム/ メタノール＝20:1) にて精
製し、標記化合物 29.7mg を白色固体として得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ: 7.82(1H,d,J=8.0Hz), 7.58(1H,t), 6.90-6.30(3H,br),
4.22-4.14(1H,m), 3.07-2.98(4H,m), 2.58(2H,t,J=6.0H
z), 2.50(9H,3s), 2.47(3H,s), 2.12-2.07(2H,m), 2.03
(3H,s), 1.77(2H,t,J=6.5Hz), 1.70-1.18(56H,m), 0.85
(3H,t,J=7.5Hz) MS m/z (FAB);902 (MH⁺)

【００２０】(2) n-ヘキサデカノイル-L- アルギニン-n
- ヘキサデシルアミド(C₁₅H₃₁-(C=O)-ArgNHC₁₆H₃₃)の合
成 C₁₅H₃₁-(C=O)-Arg(Pmc)NHC₁₆H₃₃22.8mg をクロロホルム
0.23ml に溶解し、トリフルオロ酢酸 0.23ml を加え、
室温で２時間攪拌した。反応液を減圧濃縮して得た粗生
成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホ
ルム：メタノール＝5:1)にて精製し、標記化合物9.0mg
を白色固体として得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ: 7.90(1H,d,J=7.0Hz), 7.81(1H,t,J=6.0Hz), 7.44(1H,br
t), 7.35-6.60(3H,br),4.26-4.19(1H,m), 3 11-2.97(4
H,m), 2.16-2.09(2H,m), 1.70-1.60(1H,m), 1.52-1.18
(53H,m), 0.85(6H,2t,J=7.0Hz) MS m/z (FAB);636 (MH⁺)

【００２１】

【実施例６】アセチル-L- リシン- オクタデシルエステ
ル（化合物番号６）の製法(T-273) の製造 (1) N-9-フルオレニルメトキシカルボニル- ε-tert-ブ
トキシカルボニル-L- リシン-n- オクタデシルエステル
(Fmoc-Lys(Boc)OC₁₈H₃₇)の合成 Fmoc-Lys(Boc) 100mg をDMF2mlに溶解し、WSCI塩酸塩12
3mg 、HOBt87mg、C₁₈H ₃₇OH173mg を加え、室温で8 時間
攪拌した。反応液に1N塩酸を加え、ベンゼン/酢酸エチ
ル=1/2の混合液で抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウ
ムで乾燥後、減圧濃縮して得た粗生成物をシリカゲルク
ロマトグラフィー( クロロホルム/ メタノール) にて精
製し、標記化合物182.5mg を白色固体として得た。

【００２２】¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ: 7.89(2H,d,J=7.0Hz), 7.78-7.69(3H,m), 7.41(2H,t,J=
7.0Hz), 7.33(2H,t,J=7.0Hz),6.75(1H,brt), 4.40-4.20
(3H,m), 4.11-3.96(2H,m), 2.93-2.88(2H,m), 1.70-1.1
0(39H,m), 0.85(3H,t,J=7.5Hz) MS m/z (FAB);721 (MH⁺)

【００２３】(2) アセチル-L- リシン-n- オクタデシル
エステル(Ac-Lys-OC₁₈H₃₇)の合成 Fmoc-Lys(Boc)OC₁₈H₃₇39.4mgをDMF0.8mlに溶解し、ジエ
チルアミン0.08mlを加え、室温で１時間撹拌した。反応
液を減圧濃縮して得た粗生成物をピリジン0.55mlに溶解
し、無水酢酸10μl を加え、室温で15時間撹拌した。反
応液を減圧濃縮して得た粗生成物にトリフルオロ酢酸0.
28mlを加え、室温で20分攪拌した。反応液を減圧濃縮し
て得た粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー
（クロロホルム/ メタノール＝5/1)にて精製し、標記化
合物3.3mg を無色シロップとして得た。¹ H NMR (500MHz,DMSO-d₆) δ: 8.20(1H,d,J=7.5Hz), 7.53(2H,brs), 4.22-4.17(1H,m),
4.08-3.98(2H,m), 2.75(2H,t,J=7.5Hz), 1.84(3H,S),
1.72-1.15(38H,m), 0.86(3H,t,J=7.0Hz) MS m/z (FAB);441 (MH⁺)

【００２４】

【実施例７】4-メチルペンタノイル-L- リシン-n- ヘキ
サデシルアミド（化合物番号７）の製法 (1) N-9-フルオレニルメトキシカルボニル -ε-tert-ブ
トキシカルボニル-L- リシン-n- ヘキサデシルアミド(F
moc-Lys(Boc)-NHC₁₆H₃₃)の合成 Fmoc-Lys(Boc)585mgをDMF 11.7mlに溶解し、WSCI塩酸塩
718mg、HOBt 506mg、C₁₆H₃₃NH₂452mgを加え、室温で15
時間攪拌した。反応液に1N塩酸を加え、クロロホルムで
抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧
濃縮して得た粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラ
フィー (クロロホルム/ メタノール＝20/1) にて精製
し、標記化合物 792mgを白色固体として得た。¹ H NMR(500MHz,DMSO-d₆) δ: 7.89(2H,d,J=7.3Hz),7.81(1H,brt),7.74-7.70(2H,m),7.
44-7.40(3H,m),7.32(2H,t,J=7.3Hz),6.77(1H,brt), 4.2
6-4,18(3H,m), 3,91-3.86(1H,m), 3.09-2.84(4H,m), 1.
60-1.10(43H,m), 0.85(3H,t,J=6.8Hz) MS m/z(FAB);692(MH⁺)

【００２５】(2) 4-メチルペンタノイル -ε-tert-ブト
キシカルボニル-L- リシン-n- ヘキサデシルアミドの合
成 Fmoc-Lys(Boc)-NHC₁₆H₃₃50mgをDMF1.0mlに溶解し、ジエ
チルアミン0.1 mlを加え、室温で２時間攪拌した。反応
液を減圧濃縮して得た粗生成物をDMF1.0mlに溶解し、4-
メチルペンタン酸14μl 、WSCI塩酸塩21mg、ジメチルア
ミノピリジン13mgを加え、室温で15時間攪拌した。反応
液に1N塩酸を加え、クロロホルムで抽出し、減圧濃縮し
て得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフ
ィー (クロロホルム/ メタノール＝30/1) にて精製し、
標記化合物34.7mgを白色固体として得た。¹ H NMR(500MHz,DMSO-d₆) δ: 7.80(1H,d,J=8.0Hz),7.78-7.73(1H,brt),6.72-6.68(1H,
brt),4.19-4.11(1H,m),3.09-2.93(2H,m),2.90-2.83(2H,
m),2.16-2.07(2H,m),1.60-1.17(37H,m), 0.90-0.83(9H,
m) MS m/z(FAB);568(MH⁺)

【００２６】(3) 4-メチルペンタノイル-L- リシン-n-
ヘキサデシルアミドの合成 4-メチルペンタノイル -ε-tert-ブトキシカルボニル-L
- リシン-n-.ヘキサデシルアミド32.5mgをクロロホルム
0.3 mlに溶解し、トリフルオロ酢酸0.3ml を加え、室温
で4.5 時間攪拌した。反応液を減圧濃縮して得た粗生成
物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホル
ム/ メタノール＝10/1) にて精製し、標記化合物13.7mg
を白色固体として得た。¹ H NMR(500MHz,DMSO-d₆) δ: 7.86(1H,d,J=9.0Hz)，7.81-7.77(1H,brt),7.53(2H,br
s),4.21-4.13(1H,m),3.06-2.98(2H,m), 2.76-2.68(2H,
m), 2,12(2H,t,J=8.0Hz), 1.63-1.17(37H,m), 0.90-0.8
2(9H,m) MS m/z(FAB);468(MH⁺)

【００２７】

【実施例８】ペンタノイル-L- リシン-n- ヘキサデシル
アミド（化合物番号８）の製法 (1) ペンタノイル -ε-tert-ブトキシカルボニル-L- リ
シン-n- ヘキサデシルアミドの合成 Fmoc-Lys(Boc)-NHC₁₆H₃₃50mgをDMF1.0mlに溶解し、ジエ
チルアミン0.1ml を加え、室温で２時間攪拌した。反応
液を減圧濃縮して得た粗生成物をピリジン0.7ml に溶解
し、ペンタノイルクロリド13μl を加え、室温で15時間
攪拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出し、
減圧濃縮して得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロ
マトグラフィー (クロロホルム/ メタノール＝30/1) に
て精製し、標記化合物19.0mgを白色固体として得た。¹ H NMR(500MHz,DMSO-d₆) δ: 7.81-7.74(2H,m),6.71(1H,brt),4.19-4.11(1H,m),3.09-
2.94(2H,m), 2.89-2.82(2H,m), 2,13-2.06(2H,m), 1.60
-1.10(38H,m), 0.88-0.82(6H,m) MS m/z(FAB);554(MH⁺) (2) ペンタノイル-L- リシン-n- ヘキサデシルアミドの
合成ペンタノイル -ε-tert-ブトキシカルボニル-L- リシン
-n- ヘキサデシルアミド14mgをクロロホルム0.2 mlに溶
解し、トリフルオロ酢酸0.2ml を加え、室温で4.5 時間
攪拌した。反応液を減圧濃縮して得た粗生成物をシリカ
ゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/ メタノ
ール＝6/1)にて精製し、標記化合物19.8mgを白色固体と
して得た。¹ H NMR(500MHz,DMSO-d₆) δ: 7.85(1H,d,J=8.5Hz),7.79(1H,t,J=6.0Hz),7.65(2H,br
s),4.23-4.15(1H,m),3.02-(2H,dd,J=7.0Hz,13.0Hz),2.7
7-2.70(2H,m), 2.12(2H,t,J=7.5Hz), 1,64-1.17(38H,
m), 0.90-0.82(6H,m) MS m/z(FAB);468(MH⁺)

【００２８】本発明は上記の方法に従って、表１に示さ
れる化合物を製造した。ただし、式中 Rは Argを、K は
Lysをそれぞれ示す。

【００２９】

【表１】

【００３０】次に、本発明のアミノ酸誘導体のIL-8，SD
F-1 及びRANTES拮抗活性の測定結果について試験例を示
す。

【試験例１】(1) IL-8拮抗活性の測定ヒトTHP- 1 (単球由来細胞株) 細胞を(¹²⁵I)IL-8を用い
た結合試験により本発明のIL-8アミノ酸誘導体の受容体
に対する親和性を次の方法により検討した。THP-1細胞
を10％FCS(FBS)を含む RPMI-1640培地にて継代し、その
対数増殖期細胞 5×10⁶cell/400 μl を0.1 ％ウシ血清
アルブミンを含む RPMI-1640培地に懸濁した。この懸濁
液に(¹²⁵I)IL-8 (最終濃度 0.06 mM 比活性2200ci/mmo
l)と、本発明のアミノ酸誘導体のD'-PBSあるいはDMSO溶
液 4μl(最終濃度 100μM)とを混合した。氷中２時間反
応させ遠心後 1mlのD-PBS で５回洗浄した。最終的にD'
-PBS 1mlに懸濁し、細胞の総放射活性を測定した。THP-
1細胞に対する(¹²⁵I)IL-8の特異的結合量(THP-1細胞のI
L-1受容体以外に結合した(¹²⁵I)IL-8) は上記操作の本
発明のアミノ酸誘導体の代りに0.12μM IL-82 μl をTH
P-1 細胞懸濁液に加え求めた。THP-1 細胞に対する(¹²⁵
I)IL-8の特異的結合量は、全結合量から非特異的結合量
を差し引いて求めた。すなわち、次式にて本発明のアミ
ノ酸誘導体の 100μM 用量でのTHP-1 細胞とIL-8の特異
的結合に対する阻害率 (％) を求めた。阻害率 (％) ＝〔 (全結合量−非特異的結合量) −（本
発明のアミノ酸誘導体添加時結合量−非特異的結合
量）〕÷ (全結合量−非特異的結合量) ×100

【００３１】(2) SDF-1 及びRANTES拮抗活性の測定前記(1) の(¹²⁵I)IL-8に代えて (¹²⁵I)SDF-1及び(¹²⁵I)
RANTES を同じ濃度で用いてこれらに対する拮抗活性を
測定した。その結果を表２に示した。

【００３２】

【表２】 ────────────────────────────── 阻害率（％ 100μM) 化合物番号化学式 ────────────────── IL-8 SDF-1 RANTES ────────────────────────────── １ CH₃-CH(-CH₃)-(CH₂)₂-C(=O)-R-O-(CH₂)₁₇-CH₃ 80 80 80 ２ Ac-RO-(CH₂)₁₇-CH₃ 40 50 50 ６ Ac-KO-(CH₂)₁₇-CH₃ 60 70 70 ──────────────────────────────

【００３３】この表に示されるように本発明のアミノ酸
誘導体はIL-8, SDF-1 あるいは RANTES に対して拮抗活
性を示し、これらのケモカインによって惹起される疾患
を防止することができることが判明した。

【００３４】

【試験例２】前記アミノ酸誘導体の急性毒性について検
討した。すなわち、５週齢のICR 系マウス (雄) を各群
５匹に分け、１週間馴化飼育後、0.5 ％メチルセルロー
ス水溶液に実施例のアミノ酸誘導体を溶解又は分散して
単回経口投与( 投与量 500mg/kg)し、６日後の死亡数を
調べた。結果を表３に示した。表３に示されるようにい
ずれのアミノ酸誘導体を投与しても死亡せず、急性毒性
がないことが確認された。

【００３５】

【表３】 ──────────────────── 化合物番号死亡数／生存数 ──────────────────── １ 0/5 ２ 0/5 ３ 0/5 ４ 0/5 ５ 0/5 ６ 0/5 ────────────────────

【００３６】

【製剤例】化合物番号１の化合物(10mg)、ラクトース(3
6mg)、コーンスターチ(150mg) 、微結晶セルロース(29m
g)、及びステアリン酸マグネシウム(5mg) を混合し、こ
れを打錠して錠剤(230mg／錠）にした。

【００３７】

【発明の効果】本発明により新規なアミノ酸誘導体又は
その塩を提供することができる。本発明の新規なアミノ
酸誘導体又はその塩は CXC及びCCケモカイン受容体拮抗
作用を有し、エイズ、アレルギー性疾患、炎症性疾患な
どの治療あるいは予防剤として優れた効果を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＣ０７Ｃ 237/22 Ｃ０７Ｃ 237/22 279/14 279/14 (72)発明者山崎徹東京都葛飾区奥戸９−22−11 (72)発明者出羽俊和東京都江戸川区南葛西１−１−１−402 (72)発明者竹村好之東京都練馬区西大泉２−18−37 (72)発明者鈴木茂神奈川県大和市西鶴間２−11−28 ドルミ鶴間202号 (72)発明者井野口英司群馬県館林市北成島町734−２ (72)発明者枝松剛生神奈川県相模原市東橋本２−７−25

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記一般式(1) で示されるアミノ酸誘導
体またはその塩。 R¹-X-A-Y-R²・・・・・ (1) 式中、A は、アルギニン、リシンおよびオルニチンから
なる群から選ばれるアミノ酸残基を示す、 X は、存在しないか、-(C=O)-, -(S=O)-, -SO₂-, -NH-
(C=O)-, -NH-(C=S)- を示す、 Y は、存在しないか、-O-, -S-または-NR³- を示す。
R¹, R²は、それぞれ独立に、炭素数12〜30の直鎖アルキ
ル基、分岐アルキル基、環状アルキル基、コレステリル
基、二重結合を１〜５含む直鎖アルケニル基または分岐
アルケニル基を示すか、あるいはR¹, R²のいずれか一方
が水素原子、炭素数１〜８の直鎖アルキル基、分岐アル
キル基、環状アルキル基、直鎖アルケニル基または分岐
アルケニル基を示す。またR²は末端にアシルオキシ基を
有することがある。R³は、水素原子、炭素数１〜８の直
鎖アルキル基、分岐アルキル基、環状アルキル基、直鎖
アルケニル基または分岐アルケニル基を示す。
【請求項２】 R¹は炭素数４〜８の直鎖アルキル基、分
岐アルキル基、環状アルキル基、直鎖アルケニル基また
は分岐アルケニル基を示し、R²は炭素数１２〜３０の直
鎖アルキル基、分岐アルキル基、環状アルキル基、コレ
ステリル基、二重結合を１〜５含む直鎖アルケニル基ま
たは分岐アルケニル基を示す請求項１に記載のアミノ酸
誘導体またはその塩。
【請求項３】 X は存在しないか、-(C=O)- を示し、Y
は-O- または-NH-を示す請求項１に記載のアミノ酸誘導
体またはその塩。
【請求項４】請求項１〜３のいずれかに記載のアミノ
酸誘導体またはその塩を有効成分とするケモカイン受容
体拮抗剤。