JPH11506443A

JPH11506443A - リポ酸の製造法

Info

Publication number: JPH11506443A
Application number: JP8536289A
Authority: JP
Inventors: マイケルアードガーブライアン; マッケイグレイモンド; マイケルロバーツスタンリー
Original assignee: アスタメディカアクチエンゲゼルシャフト
Priority date: 1995-05-30
Filing date: 1996-05-30
Publication date: 1999-06-08
Anticipated expiration: 2016-05-30
Also published as: DE69606411T2; GR3033198T3; WO1996038437A1; EP0835251A1; DE69606411D1; US6140512A; AU5828896A; PT835251E; ES2143206T3; ATE189219T1; DK0835251T3; GB9510858D0; EP0835251B1; JP3856830B2

Abstract

(57)【要約】リポ酸（チオクト酸）またはその誘導体の製造法は、２−置換シクロヘキサノンを、酸化反応中で、式（Ｉ）

Description

【発明の詳細な説明】リポ酸の製造法発明の属する分野本発明は、ラセミ体または単独エナンチオマーの形でのリポ酸（チオクト酸）の新規製造法およびこの方法における中間生成物に関する。発明の背景リポ酸（チオクト酸）には、肝臓疾患および中毒（ドイツ連邦共和国特許出願公開第４３３８５０８号明細書を見よ）、高血圧（ドイツ連邦共和国特許出願公開第４３４３６４７号明細書を見よ）、疼痛および感染症、殊にＨＩＶのようなレトロウイルス性感染症（欧州特許出願公開第０４２７２４７号明細書を見よ）を含めた治療的使用の広い範囲に対する有用性があることが報告されている。（Ｒ）−リポ酸が、多発性神経障害および腎障害のような糖尿病に付随する症状（ドイツ連邦共和国特許出願公開第４３４３５９３号明細書を見よ）および中枢神経系（ＣＮＳ）の慢性変性疾患の治療（ドイツ連邦共和国特許出願公開第４３４３５９２号明細書を見よ）にとって有利であることが報告されている。これに対して、欧州特許出願公開第０５７２９２２号明細書中には、天然でない（Ｓ）− エナンチオマーおよびビタミンＥの組合せにより、有効な無痛症を得られることが報告されている。従って、単独エナンチオマーを得るための合成経路が求められていた。例えばＹ．Ｓ．Ｙａｄａｖ他、Ｊ．Ｓｃｉ．Ｉｎｄ．Ｒｅｖ．、（１９９０）４９：４００〜４０９；Ｐ．Ｃ．ＢｕｌｌｍａｎＰａｇｅ他、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．ＰｅｒｋｉｎＴｒａｎｓ．１、（１９９０）、１６１５〜１６１８）；Ｂ．Ｒ．Ｍｅｎｏｎ他、ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．、（１９８７）２８：２１８３〜２１８６；Ｓ．Ａ．ＧｏｐａｌａｎおよびＪ．Ｈ．Ｊａｃｏｂｓ、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．ＰｅｒｋｉｎＴｒａｎｓ．１、（１９９０）、１８９７〜１９００；Ｊ．Ｄ．Ｅｌｌｉｏｔ他、ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．、（１９８５）２６：２５３５〜２５３８；Ｍ．Ｈ．Ｂｒｏｏｋｅｓ他、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．、（１９８３）、１０５１〜１０５３；およびＬ．Ｇ．Ｃｈｅｂｏｔａｒｅｖａ、Ｚｈｉｍ．−Ｆａｒｍ．Ｚｈ．、（１９８０）１４：９２〜９９中には、既に種々の合成経路が報告されており、この場合、古典的な分解；中間生成物の非対称エポキシド化；キラル中心によるエナンチオマー制御；または入手可能なキラリティープール材料からの誘導が含まれている。既存の方法は、一般に、多くの工程を含むか、高価な試薬または出発材料を用いるかまたはラセミ体の分解に続いて所望の材料の半分を喪失することになるので理想的でない。結果として、更に経済的な合成経路が必要とされ続けている。発明の概要本発明の第一の実施態様によれば、リポ酸（チオクト酸）またはその誘導体の製造のための方法は、２置換シクロヘキサノンを、酸化反応により、Ｘがヘテロ原子置換基である以下の式（２）を有するラクトンに変換し、このラクトンをリポ酸に変換する方法である。本発明の第二の実施態様によれば、新規ラクトンは、Ｘがヘテロ原子置換基である式（２）を有し、本質的に単独エナンチオマー形である。本質的に単独エナンチオマーとは、典型的には少なくともｅｅ５０％、有利に少なくともｅｅ８０％、更に有利に少なくともｅｅ９０％以上を意味する。前記のタイプのラクトンは、単独エナンチオマーのリポ酸の製造の場合の中間生成物として特に有用である。発明の説明本発明によって具体化された単独エナンチオマーのリポ酸（またはそのラセミ体）にするための１つの合成経路は、きわめて容易に入手可能な出発材料のシクロヘキサノンを用いて出発し、以下の反応式１中に略示されている。これは、２置換シクロヘキサノンのバイヤー・ビリガー酸化によって特徴付けられている。反応式１中では、Ｘは、通常、ヘテロ原子置換基、例えば酸素を有する置換基、例えば−ＯＨ、−Ｏアシル、−ＯＣＯＲ（式中、Ｒは、通常、Ｃ₁〜Ｃ₂₀−アルキルであるが、しかし、別の基であってもよい）またはハロゲン原子である。前記の方法の利点は、（ｉ）シクロヘキサノンの２位で置換を達成するための種々の方法が存在するので、出発材料が高価でなく；（ｉｉ）２置換シクロヘキサンが分解により単独エナンチオマー形で得られる場合には、不適切なエナンチオマーを（立体中心でのプロトンの酸性度の値によって）ラセミ体にすることができ、かつ分解に再利用できる。分解は、種々の方法、例えばＯ−アシル誘導体を提供するようにＸを選択してあるエステラーゼ生物分解およびモノオキシゲナーゼを用いる以下に記載された場合のように非対称バイヤー・ビリガー反応を用いる動的分解によってかまたはＸが結晶性エステルを形成するキラル酸を有するエステル（−Ｏ−ＣＯＲ）である場合に分別晶出によって行うことができる。ラクトンにするためのバイヤー・ビリガー酸化工程は、生物触媒的にかまたは過酸を用いて化学的に行うことができる。２置換シクロヘキサノンの分解に代わるのは、非対称合成、例えばキラルアミンを用いるシクロヘキサノンのエナミンの形成および酸化エチレンを用いる該エナミンのアルキル化によってプロキラル物質から製造すること（Ｗ．Ｅ．ＨａｒｖｅｙおよびＤ．Ｓ．Ｔａｒｂｅｌｌ、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、（１９６７）３２：１６７９〜８１；Ａ．Ｚ．Ｂｒｉｔｔｅｎ他、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、（１９６９）２５：３１５７〜６０；Ｓ．Ｂ．Ｚｅｉｎａｌｏｖ、Ｄｏｋｌ．Ａｋａｄ．ＮａｕｋＡｚ．ＳＳＲ、（１９８５）４１：４５〜７）または２−ヨードエチルアセテートのようなその相応物である。得られると直ちに、ラクトンの前記のエナンチオマー（２）は、以下の反応式２中に記載されいるような最終リポ酸生成物のエナンチオマーの双方に変換することができる。反応式２は、前記の特定の順序でヒドロキシ転位がある反応式１とは異なる選択的合成経路を示している。これは、ミツノブ転位の必要性を回避し、この場合、反応式１と比べてリポ酸にするための全行程を２工程削減している。シュードモナスプチダ（Pseudomonas putida）ＮＣＩＭＢ１０００７から誘導されたＮＡＤＰＨに依存するモノオキシゲナーゼは、“ＭＯ−２”と呼称され（Ｒ．Ｇａｇｎｏｎ他、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．ＰｅｒｋｉｎＴｒａｎｓ．１、（１９９４）、２５３７）、２−置換シクロヘキサノンのエナンチオマーの１つをラクトン（２ａ）に変換し、かつケトンの他のエナンチオマーを変換しないままにしておくことによって、２ −置換シクロヘキサノン（３ａ）の動的分解を生じることが見出された。初期生物触媒変換により、ｅｅ８３％および収率３４％でラクトン（２ａ）を生じ、他方、残留出発材料（３ａ）は、ｅｅ７５％および収率１３％で得られた。（次の実験によりｅｅ７５％および収率４３％でラクトンを生じた）。ラクトン（２ａ）は、エステル交換して、収率８０％で（Ｒ）−メチル６，８−ジヒドロキシヘキサン酸塩になった。ミツノブ反応による転位および加水分解により、相応する（Ｓ）−エステルを生じ、これは、標準的工程によって、［α］_D１０７°（ｃ＝０．８８、ベンゼン）の文献の値（Ｐ．Ｃ．Ｂ．Ｐａｇｅ他、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ．Ｔｒａｎｓ．１、（１９９０）、１６１５）に匹敵する［α］_D１０４°（ｃ＝１、ベンゼン）を有する（Ｒ）−（＋）−リポ酸に変換された。また、反応式２中の反応順序からヒドロキシル転位工程を省略することによって、（Ｓ）−リポ酸を合成することができる。本発明は、以下の実施例によって更に説明される。実施例例１ＭＯ２生体内変換およびミツノブ転位による（Ｒ）−リポ酸の合成（±）−６−（エトキシカルボニルメチル）−１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカンアルゴン雰囲気下で、エチレングリコール（７．６ｍｌ、１３５．８７ミリモル）およびパラトルエンスルホン酸（５１６ｍｇ、２．７２ミリモル）を、トルエン（１３６ｍｌ）中の（±）−２−（エトキシカルボニルメチル）シクロヘキサノン（５．００ｇ、２７．１７ミリモル）の溶液に添加した。この混合物を、ディーン・スターク装置（Dean Stark Apparatus）中で加熱して４時間還流させ、次に、冷却して室温にし、かつ重炭酸ナトリウム（５ｇ）および飽和重炭酸ナトリウム溶液（１５０ｍｌ）を用いて急冷した。有機相を水相から分離し、酢酸エチル（３×１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機相を飽和中炭酸ナトリウム溶液（１００ｍｌ）およびブライン（１００ｍｌ）で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムにより乾燥させ、溶媒を減圧下に蒸発させて粗製生成物を生じさせ、ヘキサン−酢酸エチル（９：１）を用いるフラッシュカラムクロマトグラフィー処理を用いて精製して、無色の油状物としての（±）−６−（エトキシカルボニルメチル）−１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカン（４．５９ｇ、収率７４％）を生じさせた。Ｒ_f０．１８（ヘキサン酢酸エチル、９：１）。（±）−６−（２′−ヒドロキシエチル）−１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカンアルゴン雰囲気下で、ジエチルエーテル（２２ｍｌ）中の（±）−６−（エトキシカルボニルメチル）−１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカン（１．００ｇ、４．３９ミリモル）の溶液を冷却して０℃にした。水素化アルミニウムリチウム（３３３ｍｇ、８．７７ミリモル）を添加し、かつこの混合物を室温で３時間撹拌した。この混合物を冷却して０℃にし、酢酸エチル（１０ｍｌ）および２Ｍの水酸化ナトリウム（５０ｍｌ）を用いて急冷した。この混合物をクロロホルム（３×５０ｍｌ）で抽出し、かつ合わせた有機抽出物を硫酸マグネシウムにより乾燥させた。溶媒を減圧下に蒸発させてヘキサン−酢酸エチル（３：７）を用いるフラッシュカラムクロマトグラフィー処理を用いて精製して、無色の油状物としての（±）−６−（２′ヒドロキシエチル）−１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカン（７６７ｍｇ、収率９４％）を生じさせた。Ｒ_f０．３０（ヘキサン−酢酸エチル、３：７）。（±）−２−（２′−アセトキシエチル）シクロヘキサノンアルゴン雰囲気下で、ＤＭＡＰ（２５９ｍｇ、２．１２ミリモル）および無水酢酸（３ｍｌ、３１．７５ミリモル）を、ピリジン（１０６ｍｌ）中の（±）−６−（２′−ヒドロキシエチル）−１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカン（３．９４ｇ、２１．１７ミリモル）の溶液に添加した。この混合物を室温で１時間撹拌した。ピリジンを減圧下に蒸発させ、残分をメタノール（１００ｍｌ）で希釈した。この混合物を冷却して０℃にし、かつ２Ｍの塩酸（２５０ｍｌ）を添加した。この混合物を室温で１時間撹拌し、次に、クロロホルム（３×２００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物を２Ｍの塩酸（２００ｍｌ）およびブライン（３００ｍｌ）で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムにより乾燥させ、かつ溶媒を減圧下に蒸発させて粗製生成物を生じさせ、ヘキサン−酢酸エチル（３：１）を用いるフラッシュカラムクロマトグラフィー処理を用いて精製して、無色の油状物としての（±）− ２−（２′−アセトキシエチル）シクロヘキサノン（３．４５ｇ、収率８８％）を生じさせた。Ｒ_f０．３４（ヘキサン−酢酸エチル、７：３）。（１Ｒ）−（＋）−樟脳の成長シュードモナス・プチダ（Pseudomonas putida） NCIMB 10007から単離されたＭＯ−２を用いる（±）−２−（２′−アセトキシエチル）シクロヘキサノンの生体内変換エタノール（３ｍｌ）中の（±）−２−（２′−アセトキシエチル）シクロヘキサノン（６６０ｍｇ、３．５９ミリモル）の溶液を、ＮＡＤＰＨテトラナトリウム塩（０．３ミリモル）、グルコース−６−燐酸塩モノナトリウム塩（２８２ｍｇ、３ミリモル）およびグルコース−６−燐酸塩デヒドロゲナーゼ（６００ＩＵ、ロイコノストーク・メセンテロイデス（Leuconostoc mesenteroides）からのもの）を含有するＴＲＩＺＭＡ緩衝液（３３０ｍｌ）中の（透析によって部分的に精製された）ＭＯ−２の溶液に添加した。３０℃で３時間の培養後に、この混合物を酢酸エチル（３× ２００ｍｌ）で抽出し、合わせた有機抽出物をブライン（２００ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムにより乾燥させ、かつ減圧下に濃縮した。残分を、ヘキサン −酢酸エチル（酢酸エチルの勾配２５〜６０−１００％）を用いるフラッシュカラムクロマトグラフィー処理によって精製し、直ちに、生成物を以下の順序で単離した：（２Ｓ）−（＋）−２−（２′−アセトキシエチル）シクロヘキサノンを、無色の油状物として単離した（１９％（ＧＣ）、８８ｍｇ、収率１３％）。Ｒ_f０．３４（ヘキサン−酢酸エチル、７：３）。（７Ｒ）−（−）−７−（２′−アセトキシエチル）−２−オキセパノンを、無色の油状物として単離した（３６％（ＧＣ）、２４１ｍｇ、収率３４％）。（６Ｒ）−（＋）−メチル６，８−ジヒドロキシオクタン酸塩アルゴン雰囲気下で、ナトリウムメトキシド（１２ｍｇ、０．２４ミリモル）を、室温で、メタノール（１２ｍｌ）中の（７Ｒ）−（−）−７−（２′−アセトキシエチル）−２−オキセパノン（２４１ｍｇ、１．２１ミリモル）の溶液に添加した。この混合物を、室温で３時間撹拌し、飽和塩化アンモニウム溶液（４０ｍｌ）を用いて急冷し、かつクロロホルム（３×４０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物をブライン（４０ｍｌ）で洗浄し、かつ硫酸マグネシウムにより乾燥させた。溶媒を減圧下に蒸発させて粗製生成物を生じさせ、溶離剤としての酢酸エチルを用いるフラッシュカラムクロマトグラフィー処理によって精製して、無色の油状物としての（６Ｒ）−（−）−メチル６，８−ジヒドロキシオクタン酸塩（１８４ｍｇ、収率８０％）を生じさせた。Ｒ_f０．３０（酢酸エチル、１００％）。（６Ｓ）−（＋）−メチル６，８−ビス（４−ニトロベンゾキシ）オクタン酸塩アルゴン雰囲気下で、トリフェニルホスフィン（１．０１６ｇ、３．８７ミリモル）およびニトロ安息香酸（６４７ｍｇ、３．８７ミリモル）を、ＴＨＦ（９．７ｍｌ）中の（６Ｒ）−（＋）−メチル６．８−ジヒドロキシオクタン酸塩（１８４ｍｇ、０．９７ミリモル）の溶液に添加した。ＤＥＡＤ（０．６ｍｌ、３．８７ミリモル）を室温で撹拌混合物に１５分間で滴加した。この混合物を、室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧下に蒸発させ、かつ残分をヘキサン−酢酸エチル（３：１）を用いるフラッシュカラムクロマトグラフィー処理を用いて精製して、清澄な黄色の油状物としての（６Ｓ）−（＋）−メチル６，８−ビス（４−ニトロベンゼンオキシ）オクタン酸塩（４６１２ｍｇ、収率９７％）を生じさせた。Ｒ_f０．２４（ヘキサン−酢酸エチル、７：３）。（６Ｓ）−（−）−メチル６，８−ジヒドロキシオクタン酸塩アルゴン雰囲気下で、無水炭酸カリウム（１３０ｍｇ、０．９４ミリモル）を、メタノール（９．４ｍｌ）中の（６Ｓ）−（＋）−メチル６，８−ビス（４ −ニトロベンゼンオキシ）オクタン酸塩（４６１ｍｇ、０．９４ミリモル）の溶液に添加した。この混合物を室温で１時間撹拌し、かつ飽和塩化アンモニウム溶液（５０ｍｌ）を用いて急冷した。この混合物をクロロホルム（３×５０ｍｌ）で抽出し、かつ合わせた有機抽出物をブライン（５０ｍｌ）で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムにより乾燥させ、かつ溶媒を減圧下に蒸発させて粗製生成物を生じさせ、酢酸エチルを用いるフラッシュカラムクロマトグラフィー処理を用いて精製して、無色の油状物としての（６Ｓ）−（−）−メチル６，８−ジヒドロキシオクタン酸塩（１４７ｍｇ、収率８２％）を生じさせた。Ｒ_f０．３０（酢酸エチル、１００％）。（６Ｓ）−（＋）−メチル６，８−ビス（メチルスルホニルオキシ）オクタン酸塩アルゴン雰囲気下で、トリエチルアミン（３２４ｍｌ、２．３２ミリモル）および塩化メタンスルホニル（１３２ｍｌ、１．７０ミリモル）を、０℃でジクロロメタン（３．９ｍｌ）中の（６Ｓ）−（−）−メチル６，８−ジヒドロキシオクタン酸塩（１４７ｍｇ、０．７７ミリモル）の溶液に添加した。この混合物を０℃で３０分間撹拌し、次に、氷水（１０ｍｌ）を用いて急冷し、かつジクロロメタン（１０ｍｌ）で抽出した。抽出物を、２Ｍの塩酸（１０ｍｌ）、飽和重炭酸ナトリウム（１０ｍｌ）およびブライン（１０ｍｌ）で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムにより乾燥させ、かつ溶媒を減圧下に蒸発させて粗製生成物を生じさせ、ヘキサン−酢酸エチル（２：３）を用いるフラッシュカラムクロマトグラフィー処理を用いて精製して、清澄な黄色の油状物としての（６Ｓ）−（＋）−メチル６，８−ビス（メチルスルホニルオキシ）オクタン酸塩（２４７ｍｇ、収率９２％）を生じさせた。Ｒ_f０．３０（ヘキサン−酢酸エチル、３：２）。（Ｒ）−（＋）−メチルリポ酸塩アルゴン雰囲気下で、微粉砕された七水和硫化ナトリウム（１８９ｍｇ、０．７９ミリモル）および硫黄（２５ｍｇ、０．７９ミリモル）を、ＤＭＦ（１４ｍｌ）中に溶解した。この混合物を、暗室で１時間加熱して８０℃にした。ＤＭＦ（２ｍｌ）中の（６Ｓ）−（＋）−メチル６．８−ビス（メチルスルホニルオキシ）オクタン酸塩（２４７ｍｇ、０．７１ミリモル）の溶液を、８０℃で２５分間で前記混合物に滴加した。この混合物を暗室で８０℃で２時間撹拌し、冷却して室温にし、水（７０ｍｌ）で希釈した。この混合物をヘキサン（２×１００ｍｌ）および酢酸エチル（２×１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物をブライン（１５０ｍｌ）で洗浄し、かつ硫酸マグネシウムにより乾燥させた。溶媒を蒸発させて粗製生成物を生じさせ、ヘキサン−酢酸エチル（４：１）を用いるフラッシュカラムクロマトグラフィー処理を用いて精製して、清澄な黄色の油状物としての（Ｒ）−（＋）−メチルリポ酸（１３０ｍｇ、収率８３％）を生じさせた。Ｒ_f０．３０（ヘキサン−酢酸エチル、４：１）。（Ｒ）−（＋）−リポ酸水酸化カリウム（９９ｍｇ、１．７７ミリモル）を水（１７．７ｍｌ）中に溶解し、かつメタノール（１７．７ｍｌ）中の（Ｒ）−（＋）−メチルリポ酸塩（１３０ｍｇ、０．５９ミリモル）の溶液に添加した。この混合物を室温で３時間撹拌し、次に、有機不純物の除去のためにクロロホルム（２０ｍｌ）で洗浄した。水相を２Ｍの塩酸（５０ｍｌ）を用いて酸性化し、かつジエチルエーテル（３×５０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物をブライン（５０ｍｌ）で洗浄し、かつ硫酸マグネシウムにより乾燥させた。溶媒を減圧下に蒸発させて粗製生成物を生じさせ、ヘキサンから再結晶させて、黄色の針状物としての（Ｒ）−（＋）−リポ酸（８５ｍｇ、収率７０％）を生じさせた。例２非酵素的バイヤー・ビリガー酸化によるラセミ体のリポ酸の合成（±）−７−（２′−アセトキシエチル）−２−オキセパノンアルゴン雰囲気下で、重炭酸ナトリウム（１．７８ｇ，２１．２０ミリモル）および８０〜９０％ｗ／ｗのＭＣＰＢＡ（４．９５ｇ、２８．２６ミリモル）を、室温でジクロロメタン（７０ｍｌ）中の（±）−２−（２′−アセトキシエチル）シクロヘキサノン（２．６０ｇ、１４．１３ミリモル）（０．５０ミリモル）の溶液に添加した。この混合物を室温で３時間撹拌し、ジクロロメタン（８０ｍｌ）で希釈し、かつ引き続き飽和亜硫酸ナトリウム溶液（３×１００ｍｌ）で洗浄し、水（１００ｍｌ）およびブライン（１００ｍｌ）により蒸留した。有機相を、硫酸マグネシウムにより乾燥させた。濾過後に、溶媒を減圧下に蒸発させて粗製生成物を生じさせ、溶離剤としてのヘキサン−酢酸エチル（２：３）を用いるフラッシュカラムクロマトグラフィー処理によって精製して、無色の油状物としての（±）−７−（２ ′−アセトキシエチル）−２−オキセパノン（２．７６ｇ、収率９８％）を生じさせた。Ｒ_f０．４０（ヘキサン−酢酸エチル、７：３）。（±）−メチル６，８−ジヒドロキシオクタン酸塩エステル交換のための一般的方法（例１を見よ）の後に、（±）−７−（２′ −アセトキシエチル）−２−オキセパノン（２．７６ｇ、１３．８０ミリモル）を（±）−メチル６，８−ジヒドロキシオクタン酸塩に変換し、後処理および酢酸エチルを用いるフラッシュカラムクロマトグラフィー処理後に、無色の油状物（２．５７ｇ、収率９８％）として単離した。Ｒ_f０．３０（酢酸エチル、１００％）。（±）−メチル６，８−ビス（メチルスルホニルオキシ）オクタン酸塩アルゴン雰囲気下で、トリエチルアミン（０．７ｍｌ、５．０５ミリモル）および塩化メタンスルホニル（０．３ｍｌ、３．７１ミリモル）を、０℃でジクロロメタン（８．４ｍｌ９中の（±）−メチル６，８−ジヒドロキシオクタン酸塩（３２０ｍｇ、１．６８ミリモル）の溶液に添加した。この混合物を０℃で３０分間撹拌し、次に、氷水（２０ｍｌ）を用いて急冷し、かつジクロロメタン（２０ｍｌ）で抽出した。有機抽出物を２Ｍの塩酸（２０ｍｌ）、飽和重炭酸ナトリウム溶液（２０ｍｌ）およびブライン（２０ｍｌ）で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムにより乾燥させ、かつ溶媒を減圧下に蒸発させて粗製生成物を生じさせ、ヘキサン−酢酸エチル（２：３）を用いるフラッシュカラムクロマトグラフィー処理を用いて精製して、清澄な黄色の油状物としての（±）−メチル６，８−ビス（メチルスルホニルオキシ）オクタン酸塩（５８１ｍｇ、収率９９％）を生じさせた。Ｒ_f０．３０（ヘキサン−酢酸エチル、３：２）。（±）−メチルリポ酸塩アルゴン雰囲気下で、微粉砕された七水和硫化ナトリウム（１７ｍｇ、０．５４ミリモル）および硫黄（１０ｍｇ、０．５４ミリモル）を、ＤＭＦ（８ｍｌ）中に溶解した。この混合物を、暗室中で１時間加熱して８０℃にした。ＤＭＦ（２ｍｌ）中の（±）−メチル６，８−ビス（メチルスルホニルオキシ）オクタン酸塩（１７１ｍｇ、０．４９ミリモル）の溶液を、８０℃で１５分で前記混合物に滴加した。この混合物を、暗室中で８０℃で２時間撹拌した。次に、冷却して室温にし、かつ水（１５０ｍｌ）を用いて急冷した。この混合物をヘキサン（３×１５０ｍｌ）で抽出し、かつ合わせた有機抽出物をブライン（１５０ｍｌ）で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムにより乾燥させ、かつ溶媒を蒸発させて粗製生成物を生じさせ、ヘキサン−酢酸エチル（４：１）を用いるフラッシュカラムクロマトグラフィー処理を用いて精製して、清澄な黄色の油状物として（± ）−メチルリポ酸塩（５９ｍｇ、収率５４％）を生じさせた。Ｒ_f０．３０（ヘキサン−酢酸エチル、４：１）。（±）−リポ酸水酸化カリウム（２４ｍｇ、０．４２ミリモル）を水（４．２ｍｌ）中に溶解し、かつメタノール（１０ｍｌ）中の（±）−メチルリポ酸塩（２８ｍｇ、０．１３ミリモル）の溶液に添加した。この混合物を室温で３時間撹拌し、次に、有機不純物の除去のためにクロロホルム（１０ｍｌ）で洗浄した。水相を２Ｍの塩酸（１５ｍｌ）を用いて酸性化し、かつジエチルエーテル（３×２０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物をブライン（２０ｍｌ）で洗浄し、かつ硫酸マグネシウムにより乾燥させた。溶媒を減圧下に蒸発させて、黄色の針状物としての粗製（±）−リポ酸（２６ｍｇ、収率９８％）を生じさせた。例３（Ｓ）−ラクトンを生じる、（±）−２−（２′−アセトキシエチル）シクロヘキサノンの選択的生体内変換：シクロペンタノールの成長（シュードモナス（Pseudomonas）ＳＰ．ＮＣＩＭＢ９８７２から単離されたシクロペンタノンモノオキシゲナーゼ（ＳＰＭＯ）を使用する（±）−２−（２′−アセトキシエチル）シクロヘキサノンの準備規模での生体内変換ＮＡＤＰＨ（９１ｍｇ、０．１１ミリモル）および（±）−２−（２′−アセトキシエチル）シクロヘキサノン（２０ｍｇ、０．１１ミリモル）を、トリスマ緩衝液（Trisma buffer）（２０ｍｌ、５０ｍＭ、ｐＨ７．５）中のシクロペンタノンモノオキシゲナーゼ（３．１２ＩＵ）の溶液に添加した。この混合物を、４５分間、軌道培養器（２００ｒｐｍ、３０℃）中で撹拌し、次に、酢酸エチル（３×２０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物をブライン（２０ｍｌ）で洗浄し、かつ硫酸マグネシウムにより乾燥させた。溶媒を減圧下に蒸発させて粗製生成物を生じさせた。ヘキサン−酢酸エチル（酢酸エチルの勾配２５〜６０％）を用いるフラッシュカラムクロマトグラフィー処理を用いる精製により、以下の生成物が生じた：（２Ｒ）−（−）−２−（２′−アセトキシエチル）シクロヘキサノンが、無色の油状物として溶離され、かつ単離された第一の生成物であった（３８％（ＧＣ）、７ｍｇ、収率３７％）。Ｒ_f０．３４（ヘキサン−酢酸エチル、７：３）。（７Ｓ）−（＋）−７−（２′−アセト基ｓエチル）−２−オキセパノンは、無色の油状物として溶離され、単離された第二の生成物であった（６２％（ＧＣ）、１３ｍｇ、収率５９％）。Ｒ_f０．４０（ヘキサン−酢酸エチル、７：３）。（６Ｓ）−（−）−メチル６，８−ジヒドロキシオクタン酸塩アルゴン雰囲気下で、ナトリウムメトキシド（３ｍｇ、０．０６ミリモル）を、室温でメタノール（０．６ｍｌ）中の（７Ｓ）−（＋）−７ｐ（２′−アセトキシエチル）−２−オキセパノン（１３ｍｇ、０．０６ミリモル）の溶液に添加した。この混合物を室温で３時間撹拌し、飽和塩化アンモニウム溶液（５ｍｌ）を用いて急冷し、かつクロロホルム（３×５ｍｌ）で抽出した。合わせた抽出物をブライン（５ｍｌ）で洗浄し、かつ硫酸マグネシウムにより乾燥させた。溶媒を減圧下に蒸発させて粗製生成物を生じさせ、溶離剤としての酢酸エチルを用いるフラッシュカラムクロマトグラフィー処理によって精製して、無色の油状物としての（６Ｓ）−（−）−メチル６，８−ジヒドロキシオクタン酸塩（８ｍｇ、収率６３％）を生じさせた。Ｒ_f０．３０（酢酸エチル、１００％）。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者レイモンドマッケイグイギリス国シービー４４ダブリューイーケンブリッジミルトンロードケンブリッジサイエンスパーク（番地なし）カイロサイエンスリミテッド内 (72)発明者スタンリーマイケルロバーツイギリス国エル69 ３ビーエックスリバプール（番地なし）ロバーツロビンソンラボラトリーズユニヴァーシティオブリバプールデパートメントオブケミストリー内

Claims

【特許請求の範囲】１．本質的に単独エナンチオマーのリポ酸（チオクト酸）（ＲまたはＳ）またはその誘導体を製造するための方法において、２置換シクロヘキサノンを、酸化反応により式：〔式中、Ｘはヘテロ原子置換基である〕を有するラクトンの本質的に単独エナンチオマー形（ＲまたはＳ）に変換し、かつラクトンをリポ酸に変換することを特徴とする、リポ酸（チオクト酸）またはその誘導体の製造法。２．本質的に１個のエナンチオマーとしてのリポ酸を製造するように、本質的に単独エナンチオマー形（ＲまたはＳ）でラクトンを得る、請求項１に記載の方法。３．請求項１に定義されたラクトン。４．Ｘが酸素を有する置換基である、請求項３に記載のラクトン。５．Ｘが−ＯＨまたは−オクチルである、請求項４に記載のラクトン。６．Ｘがハロゲン原子である、請求項３に記載のラクトン。７．（Ｒ）エナンチオマーである、請求項３から６までのいずれか１項に記載のラクトン。８．（Ｓ）エナンチオマーである、請求項３から６までのいずれか１項に記載のラクトン。９．リポ酸またはその誘導体の合成のための、請求項１に定義された式を有するラクトンの使用。１０．ラクトンが請求項４から８までのいずれか１項で定義されたものである、請求項９に記載の使用。１１．糖尿病、中毒または肝臓疾患の治療で使用するための医薬品の製造のための、請求項１または２で定義された方法によって入手可能であるリポ酸またはその誘導体の使用。１２．糖尿病性高血圧、肝臓疾患および中毒、網膜症および中枢神経系の疾患の変性疾患の治療に使用するための医薬品の製造のための、請求項３から８までのいずれか１項で定義されたラクトンを介して入手可能なリポ酸またはその誘導体の使用。