JPH1175868A - 新規化合物 - Google Patents

新規化合物

Info

Publication number
JPH1175868A
JPH1175868A JP10157425A JP15742598A JPH1175868A JP H1175868 A JPH1175868 A JP H1175868A JP 10157425 A JP10157425 A JP 10157425A JP 15742598 A JP15742598 A JP 15742598A JP H1175868 A JPH1175868 A JP H1175868A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
polypeptide
hgbab90
seq
nucleotide sequence
polynucleotide
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP10157425A
Other languages
English (en)
Inventor
Christopher Donald Southan
クリストファー・ドナルド・サザン
Helen Elizabeth Clinkenbeard
ヘレン・エリザベス・クリンケンビアード
Nicola Anne Burgess
ニコラ・アン・バージェス
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
SmithKline Beecham Ltd
Original Assignee
SmithKline Beecham Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GBGB9711952.3A external-priority patent/GB9711952D0/en
Application filed by SmithKline Beecham Ltd filed Critical SmithKline Beecham Ltd
Publication of JPH1175868A publication Critical patent/JPH1175868A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
    • C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
    • C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

(57)【要約】 【課題】 ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドおよびポリヌク
レオチド、ならびに組み換え法によるかかるポリペプチ
ドの製造方法を開示する。疾病の治療のためのプロトコ
ールの設計、ならびにかかる症状の診断アッセイにおけ
るＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドおよびポリヌクレオチド
の使用方法も開示する。 【解決手段】 配列番号：２のＨＧＢＡＢ９０ポリペプ
チドをコードしているヌクレオチド配列に対してその全
長にわたり少なくとも９０％の同一性を有するヌクレオ
チド配列を含む単離ポリヌクレオチド、または該単離ポ
リヌクレオチドに対して相補的なヌクレオチド配列。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、新たに同定された
ポリヌクレオチド、それによりコードされるポリペプチ
ド、ならびにかかるポリヌクレオチドおよびポリペプチ
ドの使用、ならびにそれらの製造に関する。より詳細に
は、本発明ポリヌクレオチドおよびポリペプチドは、セ
リンプロテアーゼファミリーに関連したものであり、以
下、ＨＧＢＡＢ９０という。また本発明は、かかるポリ
ヌクレオチドおよびポリペプチドの阻害または活性化に
も関する。
【０００２】
【従来の技術】プロテアーゼはヒトの生理において種々
の重要な機能を行っている。プロテアーゼが病理に関し
て重要である疾病が増加している。これらの重要なプロ
テアーゼに関して選択的アンタゴニストまたはアゴニス
トの設計またはスクリーニングを行うことは、新たな薬
剤の開発を可能にする。セリンプロテアーゼはプロテア
ーゼの主要なファミリーであり、それに属する多数のも
のが知られている。これらはRawlings & Barrett (Meth
ods in Enzymol. 244:19-61, 1994）により論じられて
いる。セリンプロテアーゼの例はマウスのニューロプシ
ン（Chen et al.J Neurosci 15 (7 Pt 2):5088-5097 19
95）である。
【０００３】肺気腫、関節炎、多発性硬化症、歯周病、
のう胞性繊維症、呼吸障害、血栓症、癌、悪液質、アン
ギナ、緑内障、炎症性疾患、骨粗鬆症、高血圧のごとき
心臓血管系の疾患、心筋梗塞のごときアテローム硬化性
疾患、ならびに卒中、喘息、乾癬、アルツハイマー病、
パーキンソン病およびハンチントン病のごとき慢性神経
変性疾患、脱髄疾患、エイズ免疫不全、光受容体変性疾
患、ならびにレンズ白内障、器官移植拒絶反応、白内
障、再狭窄、筋ジストロフィー、腎不全、脳血管けいれ
ん、膵臓炎、ならびに糖尿病性ニューロパシー（これら
に限らない）を包含する機能不全または疾病の予防、改
善または修正において役割を果たしうるセリンプロテア
ーゼのさらなるメンバーの同定および特徴づけが、やは
り必要である。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】１の態様において、本
発明は、ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドならびにその製造
のための組み換え物質および方法に関する。本発明のも
う１つの態様は、かかるＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドお
よびポリヌクレオチドの使用方法に関する。かかる使用
は、とりわけ、肺気腫、関節炎、多発性硬化症、歯周
病、のう胞性繊維症、呼吸障害、血栓症、癌、悪液質、
アンギナ、緑内障、炎症性疾患、骨粗鬆症、高血圧のご
とき心臓血管系の疾患、心筋梗塞のごときアテローム硬
化性疾患、ならびに卒中、喘息、乾癬、アルツハイマー
病、パーキンソン病およびハンチントン病のごとき慢性
神経変性疾患、脱髄疾患、エイズ免疫不全、光受容体変
性疾患、ならびにレンズ白内障、器官移植拒絶反応、白
内障、再狭窄、筋ジストロフィー、腎不全、脳血管けい
れん、膵臓炎、ならびに糖尿病性ニューロパシーの治療
を包含する。さらにもう１つの態様において、本発明
は、本発明により提供される材料を用いるアンタゴニス
トおよびアゴニストの同定方法、ならびに同定された化
合物を用いるＨＧＢＡＢ９０のバランス不良関連症状の
治療方法に関する。さらにもう１つの態様は、不適当な
ＨＧＢＡＢ９０の活性またはレベルに関連した疾病の検
出のための診断アッセイに関する。
【０００５】
【課題を解決するための手段および発明の実施の形態】定義 下記定義は、本明細書で頻繁に使用される特定の用語の
理解を容易にするためのものである。「ＨＧＢＡＢ９
０」は、とりわけ、配列番号：２に示すアミノ酸配列を
有するポリペプチド、またはその対立遺伝子変種をい
う。「ＨＧＢＡＢ９０活性」または「ＨＧＢＡＢ９０ポ
リペプチド活性」または「ＨＧＢＡＢ９０またはＨＧＢ
ＡＢ９０ポリペプチドの生物学的活性」は、該ＨＧＢＡ
Ｂ９０の代謝的または生理学的機能をいい、類似の活性
または改善された活性または望ましくない副作用を減じ
られたこれらの活性を包含する。該ＨＧＢＡＢ９０の抗
原性活性および免疫原性活性も含まれる。「ＨＧＢＡＢ
９０遺伝子」は、配列番号：１に示すヌクレオチド配列
を含むポリヌクレオチドまたはその対立遺伝子変種およ
び／またはその相補物をいう。本明細書の用語「抗体」
は、ポリクローナルおよびモノクローナル抗体、キメ
ラ、１本鎖、ならびにヒト化抗体、さらにはＦａｂフラ
グメントを包含し、Ｆａｂまたは他の免疫グロブリン発
現ライブラリーの生成物も包含する。
【０００６】「単離」とは、「人間の手により」天然の
状態から変化させられた、すなわち、それが天然に存在
する場合、元来の環境から変化させるもしくは取り除
く、またはその両方を行ったことを意味する。例えばポ
リヌクレオチドまたはポリペプチドが、天然の状態で生
存動物に存在する場合は、「単離」されていないが、同
一のポリヌクレオチドまたはポリペプチドが、天然に共
存する物質から分離されている場合は、本明細書に用い
る用語である、「単離」がなされている。
【０００７】「ポリヌクレオチド」とは、一般的には、
修飾されていないＲＮＡもしくはＤＮＡ、または修飾さ
れたＲＮＡもしくはＤＮＡであってよい、任意のポリリ
ボヌクレオチドまたはポリデオキシリボヌクレオチドを
意味する。「ポリヌクレオチド」は、一本鎖および二本
鎖ＤＮＡ、一本鎖および二本鎖領域の混合物または一本
鎖、二本鎖および三本鎖領域の混合物であるＤＮＡ、一
本鎖および二本鎖ＲＮＡ、ならびに一本鎖および二本鎖
領域の混合物であるＲＮＡ、一本鎖もしくはより典型的
には二本鎖もしくは三本鎖、または一本鎖および二本鎖
領域の混合物でよいＤＮＡおよびＲＮＡを含むハイブリ
ッド分子を意味するが、これに限定するものではない。
さらに、本明細書で用いるポリヌクレオチドは、ＲＮＡ
もしくはＤＮＡ、またはＲＮＡおよびＤＮＡの両方を含
む三本鎖領域を意味する。さらに、「ポリヌクレオチ
ド」は、安定性またはその他の理由により、修飾された
骨格を有するＤＮＡまたはＲＮＡ、ならびに修飾された
骨格を有するＤＮＡまたはＲＮＡを包含する。「修飾さ
れた」塩基は、例えば、トリチル化塩基およびイノシン
のごとき通常的でない塩基を包含する。種々の修飾がＤ
ＮＡおよびＲＮＡについて行われており、よって、「ポ
リヌクレオチド」は、典型的に天然において見いだされ
るポリヌクレオチドの化学的、酵素的または代謝的に修
飾された形態、ならびにウイルスおよび細胞に特徴的な
ＤＮＡおよびＲＮＡの化学的形態を包含する。また、
「ポリヌクレオチド」は、しばしばオリゴヌクレオチド
と称する短いポリヌクレオチドを包含する。
【０００８】「ポリペプチド」は、ペプチド結合または
修飾されたペプチド結合により互いに結合している２個
またはそれ以上のアミノ酸を含む任意のペプチドまたは
蛋白を意味する。「ポリペプチド」は、通常、例えばペ
プチド、オリゴペプチドおよびオリゴマーとも称する短
鎖、および一般的に蛋白と称する長鎖の両方を意味す
る。ポリペプチドは２０種の遺伝子によりコードされた
アミノ酸とは異なるアミノ酸を含有できる。「ポリペプ
チド」には、プロセッシングおよびその他の翻訳後修飾
のような天然のプロセッシングにより修飾されたものが
含まれるが、当業者に周知の化学修飾技術によっても修
飾される。このような修飾は基礎的な参考書およびさら
に詳細な論文ならびに多数の研究文献にも詳しく記載さ
れており、これらは当業者に周知である。修飾は、ペプ
チド骨格、アミノ酸側鎖およびアミノ末端またはカルボ
キシル末端等のポリペプチドの任意の部位で行われう
る。同一の型の修飾は該ポリペプチドのいくつかの部位
で、同一または異なる程度で存在し得ることは理解され
よう。また、ポリペプチドは多くの型の修飾をも含み得
る。ポリペプチドは、ユビキチネーションの結果として
分枝状であってもよく、分枝を伴うまたは伴わない環状
のものであってもよい。環状、分枝状および分枝状かつ
環状のポリペプチドは翻訳後の天然プロセッシングによ
り生じるものであってもよく、あるいは合成法により製
造されるものであってもよい。修飾には、アセチル化、
アシル化、ＡＤＰ−リボシル化、アミド化、フラビンの
共有結合、ヘム部分の共有結合、ヌクレオチドまたはヌ
クレオチド誘導体の共有結合、脂質または脂質誘導体の
共有結合、ホスホチジルイノシトールの共有結合、交差
架橋、環化、ジスルフィド結合形成、脱メチル化、交差
架橋共有結合形成、シスチン形成、ピログルタメート形
成、ホルミル化、ガンマ−カルボキシル化、グリコシル
化、ＧＰＩアンカー形成、水酸化、ヨウ素化、メチル
化、ミリストイル化、酸化、蛋白加水分解プロセッシン
グ、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、グリコシル化、
脂質結合、硫酸化、グルタミン酸残基のガンマ−カルボ
キシル化、水酸化およびＡＤＰリボシル化、セレノイル
化、硫酸化、アルギニル化のようなトランスファーＲＮ
Ａ媒介の蛋白へのアミノ酸の添加、ならびにユビキチネ
ーションなどがある。例えば、Proteins-Structure and
Molecular Properties、第２版、T.E.Creighton、W.H.
Freeman and Company、ニューヨーク（1993）およびPos
t-translational Covalent Modification of Protein
s、B.C.Johnson編、アカデミックプレス、ニューヨーク
（1983）のWold,F.,Posttranslational ProteinModific
ations ：Perspective and Prospects、1〜12頁；Seift
erら、Meth.Enzymol.182:626-646（1990）およびRattan
ら、Protein Synthesis：Post-translational Modifica
tions and Aging，Ann.N.Y.Acad.Sci.663:48-62（199
2）参照。
【０００９】本明細書で用いる「変種」なる用語は、対
照ポリヌクレオチドまたはポリペプチドとは各々異なる
ポリヌクレオチドまたはポリペプチドであるが、本質的
な特性は保持しているものをいう。典型的なポリヌクレ
オチドの変種は、別の対照ポリヌクレオチドとはヌクレ
オチド配列が異なる。変種のヌクレオチド配列の差異
は、対照ポリヌクレオチドによりコードされるポリペプ
チドのアミノ酸配列を変化させるものであってもよく、
変化させないものであってもよい。ヌクレオチドの変化
は結果的に、以下に論じるように、対照配列によりコー
ドされるポリペプチドにおけるアミノ酸置換、付加、欠
損、融合および末端切断を招く。典型的なポリペプチド
の変種は、別の対照ポリペプチドとはアミノ酸配列が異
なる。一般的には、差異は、対照ポリペプチドおよび変
種の配列が全体的に非常に類似しており、多くの領域で
同一であるように限定される。変種および対照ポリペプ
チドは、１またはそれ以上の置換、付加、欠損が任意の
組み合わせで起こることにより、アミノ酸配列が変化し
得る。置換または挿入されたアミノ酸残基は、遺伝学的
コードによりコードされたものであってもなくてもよ
い。ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの変種は、例
えば対立遺伝子変種のような天然発生のものでよいか、
または天然に発生することが知られていない変種でよ
い。ポリヌクレオチドおよびポリペプチドの非天然発生
変種は、突然変異技術、直接的合成、および当業者に既
知のその他の組換え技術により製造できる。
【００１０】「同一性」とは、ヌクレオチド配列または
アミノ酸配列の同一性の尺度である。一般的には、最高
の合致が得られるように配列を並置する。「同一性」は
それ固体当該分野において認識された意味を有し、公表
された方法を用いて算出できる。例えば、Computationa
l Molecular Biology，Lesk,A.M.編、オックスフォード
・ユニバーシティー・プレス、ニューヨーク、1988年；
Biocomputing：Informatics and Genome Projects，Smi
th,D.W.編、アカデミック・プレス、ニューヨーク、199
3年；Computer Analysis of Sequence Data，パート
Ｉ，Griffin,A.M.およびGriffin,H.G.編、ヒューマン・
プレス、ニュージャージー、1994年；Sequence Analysi
s in Molecular Biology，von Heinje,G.、アカデミッ
ク・プレス、1987年；およびSequence Analysis Prime
r，Gribskov,M.およびDevereux,J.編、エム・ストック
トン・プレス、ニューヨーク、1991年）。二つの配列の
同一性を測定する方法は多くあるが、用語「同一性」は
当業者によく知られている（Sequence Analysis in Mol
ecular Biology，von Heinje,G.、アカデミック・プレ
ス、1987年；Sequence Analysis Primer，Gribskov,M.
およびDevereux,J.編、エム・ストックトン・プレス、
ニューヨーク、1991年；ならびにCarillo,H.およびLipm
an,D.，SIAM J.Applied Math.，48:1073（1988））。配
列間の同一性または類似性を測定するために通常用いら
れる方法はCarillo,H.およびLipman,D.，SIAM J.Applie
d Math.，48:1073（1988）等に開示されているが、これ
らに限定するものではない。同一性および類似性を決定
する方法は、公に入手できるコンピュータープログラム
に集成されている。二つの配列間の同一性および類似性
を測定する好ましいコンピュータープログラム法には、
ＧＣＧプログラムパッケージ（Devereux,J.ら、Nucleic
Acids Research 12(1):387(1984）、BLASTP、BLASTN、
およびFASTA（Atschul,S.F.ら、J.Molec.Biol.215:403
（1990）））等があるが、これらに限定するものではな
い。
【００１１】一例として、配列番号：１の対照ヌクレオ
チド配列に対して、例えば少なくとも９５％の同一性を
有するヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチドを挙
げると、そのポリヌクレオチド配列が配列番号：１の対
照ヌクレオチド配列のヌクレオチド１００個ごとに５個
までのヌクレオチドの変化を含みうることを除き、その
ポリヌクレオチドのヌクレオチド配列は対照配列と同一
である。言い換えると、対照ヌクレオチド配列に対して
少なくとも９５％同一であるヌクレオチド配列を有する
ポリヌクレオチドを得るためには、対照配列中の全ヌク
レオチドのうち５％までの数のヌクレオチドが対照配列
に挿入されたものであってもよい。対照配列のこれらの
変異は、対照ヌクレオチド配列の５’または３’末端位
置に存在していてもよく、あるいはそれらの末端位置の
間のいずれかの位置に存在していてもく、対照配列のヌ
クレオチドに散在していてもよく、あるいは対照配列内
の１個またはそれ以上の一連の群となっていてもよい。
【００１２】同様に、配列番号：２の対照アミノ酸配列
に対して少なくとも例えば９５％の同一性を有するアミ
ノ酸配列を有するポリペプチドを例に挙げると、そのポ
リペプチド配列が配列番号：２の対照アミノ酸配列のア
ミノ酸１００個ごとに５個までのアミノ酸の変化を含み
うることを除き、そのポリペプチドのアミノ酸配列は対
照配列と同一である。言い換えると、対照アミノ酸配列
に対して少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を有
するポリペプチドを得るためには、対照配列中のアミノ
酸の５％までが置換または他のアミノ酸と置換していて
もよく、あるいは対照配列中の全アミノ酸のうち５％ま
での数のアミノ酸が対照配列中に挿入されたものであっ
てもよい。対照配列におけるこれらの変化は、対照アミ
ノ酸配列のアミノまたはカルボキシ末端位置に存在して
もよく、あるいはそれらの末端間のいずれかの位置に存
在してもよく、対照配列中に散在していてもよく、ある
いは対照配列内で１個またはそれ以上の一連の群をなし
ていてもよい。
【００１３】本発明のポリペプチド １の態様において、本発明はＨＧＢＡＢ９０ポリペプチ
ドに関する。ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドは、配列番
号：２のポリペプチド；ならびに配列番号：２のアミノ
酸配列を含むポリペプチド；および配列番号：２に対し
て全長にわたり少なくとも７５％の同一性、より好まし
くは少なくとも８０％の同一性、さらにより好ましくは
少なくとも９０％の同一性、ずっと好ましくは少なくと
も９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプ
チドを包含する。そのうえ、少なくとも９７〜９９％の
同一性のものが非常に好ましい。また、配列番号：２の
アミノ酸配列を有するポリペプチドに対して全長にわた
り少なくとも７５％の同一性、より好ましくは８０％の
同一性、さらにより好ましくは少なくとも９０％の同一
性、ずっと好ましくは少なくとも９５％の同一性を有す
るアミノ酸配列を有するポリペプチドもＨＧＢＡＢ９０
ポリペプチドに含まれる。そのうえ、少なくとも９７〜
９９％の同一性のものが非常に好ましい。好ましくは、
ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドは、ＨＧＢＡＢ９０の生物
学的活性のうちの少なくとも１つを示す。
【００１４】ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドは「成熟」蛋
白の形態であってもよく、あるいは融合蛋白のごとき大
型の蛋白の一部であってもよい。分泌またはリーダー配
列、プロ配列、複数のヒスチジン残基のごとき精製を促
進する配列、または組み換え生産を行っている間の安定
性のためのさらなる配列を含むさらなるアミノ酸配列を
含んでいることがしばしば有利である。
【００１５】ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドの生物学的に
活性のあるフラグメントも本発明に包含される。フラグ
メントは、前述のＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドのアミノ
酸配列のすべてではなく一部に対して全く同一であるア
ミノ酸配列を有するポリペプチドである。ＨＧＢＡＢ９
０ポリペプチドについては、フラグメントは「独立して
存在するもの（free standing）」であるか、あるいは
より大きなポリペプチド内に含まれていてもよく、その
中でフラグメントは一部分もしくは領域を形成してい
る。最も好ましくは、単一の連続した領域として、より
大きなポリペプチドに含まれる。本発明ポリペプチドフ
ラグメントの典型例は、例えば、ＨＧＢＡＢ９０ポリペ
プチドのアミノ酸番号約１〜２０、２１〜４０、４１〜
６０、６１〜８０、８１〜１００および１０１から末端
までからなるフラグメントを包含する。この意味におい
て、「約」とは、片方の端または両端において、示され
た数よりも数個、５個、４個、３個、２個または１個多
いかまたは少ない範囲を含む。
【００１６】好ましいフラグメントは、例えば、アミノ
末端を含む一連の残基が欠失、またはカルボキシ末端を
含む一連の残基が欠失、あるいは一方がアミノ末端でも
う一方がカルボキシ末端を含む２種の一連の残基が欠失
していること以外はＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドのアミ
ノ酸配列を有する末端切断ポリペプチドを包含する。ま
た、構造的または機能的属性により特徴づけられるフラ
グメント、例えばアルファーヘリックスおよびアルファ
ーヘリックス形成領域、ベータシートおよびベータシー
ト形成領域、ターンおよびターン形成領域、コイルおよ
びコイル形成領域、親水性領域、疎水性領域、アルファ
ー両親媒性領域、ベータ両親媒性領域、可変領域、表面
形成領域、基質結合領域、および高抗原性指標領域を含
むフラグメントなども好ましい。ＨＧＢＡＢ９０活性を
媒介する、生物学的に活性な領域も好ましく、類似の活
性もしくは改善された活性のある、または望ましくない
活性を減じたフラグメント等がある。動物、とりわけヒ
トにおいて抗原的または免疫原的なフラグメントもまた
含まれる。
【００１７】好ましくは、これらのポリペプチドのすべ
ては、抗原的活性を包含する、ＨＧＢＡＢ９０の生物学
的活性を保持している。上記配列およびフラグメントの
変種もこのグループに含まれる。好ましい変種は、保存
的アミノ酸置換により変化したものであり、すなわち、
同様の特徴を有するアミノ酸により置換されているもの
である。典型的なかかる置換は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅ
ｕおよびＩｌｅ間：ＳｅｒおよびＴｈｒ間；Ａｓｐおよ
びＧｌｕ間；ＡｓｎおよびＧｌｎ間；ならびに塩基性残
基ＬｙｓおよびＡｒｇ間；あるいは芳香族残基Ｐｈｅお
よびＴｙｒ間におけるものである。数個、５ないし１０
個、１ないし５個、または１ないし２個のアミノ酸がい
ずれかの組み合わせで置換、欠失または付加されている
変種が特に好ましい。
【００１８】いずれかの適当な方法で本発明ＨＧＢＡＢ
９０ポリペプチドを製造することができる。かかるポリ
ペプチドは、単離された天然ポリペプチド、組み換え法
によるポリペプチド、合成法によるポリペプチド、また
はこれらの方法の組み合わせによるポリペプチドを包含
する。かかるポリペプチドの製造手段は当該分野におい
てよく理解されている。
【００１９】本発明のポリヌクレオチド 本発明のもう１つの態様は、ＨＧＢＡＢ９０ポリヌクレ
オチドに関する。ＨＧＢＡＢ９０ポリヌクレオチドは、
ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドおよびフラグメントをコー
ドしている単離ポリヌクレオチド、ならびにそれらに密
接に関連しているポリヌクレオチドを包含する。より詳
細には、本発明ＨＧＢＡＢ９０ポリヌクレオチドは、配
列番号：２のＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドをコードして
いる配列番号：１に示すヌクレオチド配列を含むポリヌ
クレオチド、ならびに配列番号：１の特定の配列を有す
るポリヌクレオチドを包含する。さらにＨＧＢＡＢ９０
ポリヌクレオチドは、配列番号：２のＨＧＢＡＢ９０ポ
リペプチドをコードしているポリヌクレオチドに対して
全長にわたり少なくとも８０％の同一性を有するヌクレ
オチド配列を含むポリヌクレオチド、および配列番号：
１の配列を有するポリヌクレオチドに対して全長にわた
り少なくとも８０％の同一性を有するポリヌクレオチド
を包含する。この点において、少なくとも９０％同一で
あるポリヌクレオチドが好ましいく、少なくとも９５％
同一であるものが特に好ましい。さらにそのうえ、少な
くとも９７％同一のものが非常に好ましく、少なくとも
９８〜９９％同一のものが最も非常に好ましく、９９％
同一のものが最高に好ましい。配列番号：１に含まれる
ヌクレオチド配列に対して十分な同一性を有し、増幅に
使用可能であるかまたはプローブもしくはマーカーとし
て使用される条件下でハイブリダイゼーションするヌク
レオチド配列もＨＧＢＡＢ９０ポリヌクレオチドに包含
される。また本発明は、かかるＨＧＢＡＢ９０ポリヌク
レオチドに対して相補的なポリヌクレオチドも提供す
る。
【００２０】ヒトＨＧＢＡＢ９０をコードしているｃＤ
ＮＡの配列決定結果により示されるように、本発明ＨＧ
ＢＡＢ９０は他のセリンプロテアーゼファミリーの蛋白
に構造的に関連性がある。配列番号：１のｃＤＮＡ配列
は配列番号：２の２６０個のアミノ酸からなるポリペプ
チドをコードしている読み枠（ヌクレオチド番号１０５
から８８８まで）を含む。配列番号：２のアミノ酸配列
は、マウスのニューロプシン（Chen et al. J. Neurosc
i. 15 (7 Pt 2):5088-5097, 1995）に対して２５４個の
アミノ酸残基において約７３％の同一性を有する（BLAS
TXを用いた場合）。配列番号：１のヌクレオチド配列
は、マウスのニューロプシン（Chenet al. J. Neurosc
i. 15 (7 Pt 2):5088-5097, 1995）のｍＲＮＡに対して
７９９個のヌクレオチド残基において約７６％の同一性
を有する（BLASTを用いた場合）。よって、本発明ＨＧ
ＢＡＢ９０ポリペプチドおよびポリヌクレオチドは、と
りわけ、その相同的ポリペプチドおよびポリヌクレオチ
ドと類似の生物学的機能／特性を有していると期待さ
れ、その有用性は当業者に明らかである。
【００２１】また本発明は、配列番号：１および配列番
号：２の対応全長配列の決定に先立って最初に同定され
た部分的または他のポリヌクレオチドまたはポリペプチ
ド配列にも関する。したがって、さらなる態様におい
て、本発明は、 （ａ）配列番号：３の全長にわたり配列番号：３に対し
て少なくとも８５％の同一性、好ましくは少なくとも８
０％の同一性、より好ましくは少なくとも９５％の同一
性、最も好ましくは少なくとも９７〜９９％の同一性を
有するヌクレオチド配列； （ｂ）配列番号：３の全長にわたり配列番号：３に対し
て少なくとも８５％の同一性、好ましくは少なくとも８
０％の同一性、より好ましくは少なくとも９５％の同一
性、さらにより好ましくは少なくとも９７〜９９％の同
一性を有するヌクレオチド配列； （ｃ）配列番号：３のポリヌクレオチド；または （ｄ）配列番号：４の全長にわたり配列番号：４のアミ
ノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性、好ましく
は少なくとも９０％の同一性、より好ましくは少なくと
も９５％の同一性、さらにより好ましくは少なくとも９
７〜９９％の同一性を有するポリペプチドをコードして
いるヌクレオチド配列 を含む単離ポリヌクレオチドを提供する。
【００２２】さらに本発明は、 （ａ）配列番号：４の全長にわたり配列番号：４のアミ
ノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性、好ましく
は少なくとも９０％の同一性、より好ましくは少なくと
も９５％の同一性、最も好ましくは少なくとも９７〜９
９％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチ
ド； （ｂ）配列番号：４の全長にわたり配列番号：４のアミ
ノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性、好ましく
は少なくとも９０％の同一性、より好ましくは少なくと
も９５％の同一性、最も好ましくは少なくとも９７〜９
９％の同一性を有するアミノ酸配列を有するポリペプチ
ド； （ｃ）配列番号：４のアミノ酸配列を含むポリペプチ
ド；および （ｄ）配列番号：４のポリペプチド；ならびに配列番
号：３中に含まれる配列を含むポリヌクレオチドにより
コードされているポリペプチドを提供する。
【００２３】配列番号：３のヌクレオチド配列およびそ
れによりコードされるペプチド配列はＥＳＴ（発現配列
タグ）配列由来のものである。ＥＳＴ配列においていく
つかの配列読み取りエラーの存在が不可避であることが
当業者により認識されている（Adams, M. D. et al., N
ature 377 (supp) 3, 1995参照）。したがって、配列番
号：３のヌクレオチド配列およびそれによりコードされ
るペプチド配列には、配列の正確さにおける本質的な限
界がある。さらにそのうえ、配列番号：３によりコード
されるペプチド配列は、最も相同性が高く構造的に類似
した蛋白に対して同一性または高い相同性および／また
は高い構造類似性（例えば、保存的アミノ酸の差異）を
有する領域を含んでいる。
【００２４】配列番号：３のｃＤＮＡ配列は、配列番
号：４のポリペプチドをコードしている。この配列をＨ
ＧＢＡＢ９０と比較したところ、その最も近似した相同
蛋白はヒトのプロテアーゼＭ（Anisowicz et al. Mol.
Med. 2 (5):624-636, 1996）である。配列番号：１のヌ
クレオチド配列は、マウスのニューロプシン（Chen eta
l. J. Neurosci. 15 (7 Pt 2):5088-5097, 1995）に対
して１４８個のヌクレオチド残基において約７７％の同
一性を有する（BLASTNを用いた場合）。
【００２５】さらに本発明は、上記配列にハイブリダイ
ゼーションするポリヌクレオチドにも関する。この点に
おいて、特に本発明は、厳密な条件下で上記ポリヌクレ
オチドにハイブリダイゼーションするポリヌクレオチド
に関連する。本明細書の用語「厳密な条件」とは、配列
間に少なくとも９５％、好ましくは少なくとも９７％の
同一性がある場合にのみハイブリダイゼーションが起こ
ることを意味する。
【００２６】配列番号：１に含まれるヌクレオチド配列
またはそのフラグメント（配列番号：３のフラグメント
を包含）に対して同一または十分に同一である本発明ポ
リヌクレオチドをｃＤＮＡおよびゲノムＤＮＡ用のハイ
ブリダイゼーションプローブとして用いて、全長のｃＤ
ＮＡおよびＨＧＢＡＢ９０をコードしているゲノムクロ
ーンを単離し、またＨＧＢＡＢ９０遺伝子に対して高い
類似性のある配列を有する他の遺伝子のｃＤＮＡおよび
ゲノムクローン（ヒト以外の種由来のホモログまたはオ
ーソログをコードしている遺伝子を包含）を単離しても
よい。かかるハイブリダイゼーション法は当業者に知ら
れている。典型的には、これらのヌクレオチド配列は、
対照に対して８０％、好ましくは９０％、より好ましく
は９５％の同一性を有する。一般的には、プローブは少
なくとも１５個のヌクレオチドを含むであろう。好まし
くは、かかるプローブは少なくとも３０個のヌクレオチ
ドを有し、少なくとも５０個のヌクレオチドを有してい
てもよい。特に好ましいプローブは３０ないし５０個の
範囲のヌクレオチドを含む。
【００２７】１の具体例において、ＨＧＢＡＢ９０ポリ
ペプチドをコードしているポリヌクレオチドを得ること
は、配列番号：１の配列またはそのフラグメント（配列
番号：３のフラグメントを包含）の配列を有する標識プ
ローブを用いて厳密なハイブリダイゼーション条件下で
適当なライブラリーをスクリーニングし、次いで、該ポ
リヌクレオチド配列を含有する全長のｃＤＮＡおよびゲ
ノムクローンを単離する工程を含む。よって、もう１つ
の態様において、本発明ＨＧＢＡＢ９０ポリヌクレオチ
ドはさらに、厳密な条件下で配列番号：１の配列または
そのフラグメント（配列番号：３のフラグメントを包
含）にハイブリダイゼーションするヌクレオチド配列を
含むヌクレオチド配列を包含する。また、上記ハイブリ
ダイゼーション条件により得られるヌクレオチド配列に
よってコードされているアミノ酸配列を含むポリペプチ
ドもＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドに包含される。かかる
ハイブリダイゼーション法は当業者によく知られてい
る。厳密なハイブリダイゼーション条件は上で定義した
ものであるか、または５０％ホルムアミド、５ｘＳＳＣ
（１５０ｍＭ ＮａＣｌ、１５ｍＭ クエン酸三ナトリウ
ム）、５０ｍＭ リン酸ナトリウム（ｐＨ７．６）、５
ｘデンハーツ溶液、１０％デキストラン硫酸、および２
０マイクログラム／ｍｌの変性剪断サケ・精子ＤＮＡを
含む溶液中、４２℃で一晩、次いで、約６５℃において
０．１ｘＳＳＣ中での洗浄といった条件であってもよ
い。
【００２８】本発明ポリヌクレオチドおよびポリペプチ
ドを、動物およびヒトの疾病の治療および診断のための
研究試薬および材料として用いてもよい。
【００２９】ベクター、宿主細胞、発現 本発明はまた、ポリヌクレオチドまたは本発明のポリヌ
クレオチドを含むベクター、本発明のベクターで遺伝子
操作される宿主細胞ならびに組換え法による本発明のポ
リペプチドの製造にも関する。本発明ＤＮＡ構築物由来
のＲＮＡを用いて、無細胞翻訳系を用いてかかる蛋白を
製造することもできる。組換え体を製造するために、宿
主細胞を遺伝子操作して、発現系もしくはそれらの一
部、または本発明のポリヌクレオチドを組み込むことが
できる。ポリヌクレオチドの宿主細胞への導入は、例え
ば、Davisら、Basic Methods in Molecular Biology（1
986）；Sambrookら、Molecular Cloning；A Laboratory
Manual、第２版；コールド・スプリング・ハーバー・
ラボラトリー・プレス、コールド・スプリング・ハーバ
ー、ニューヨーク（1989）のごとき多くの標準的な実験
マニュアルに記載される方法により行うことができ、例
えばリン酸カルシウムトランスフェクション、ＤＥＡＥ
−デキストラン媒介トランスフェクション、トランスベ
クション、マイクロインジェクション、陽イオン脂質媒
介トランスフェクション、エレクトロポレーション、形
質導入、スクレープ負荷（scrape loading）、バリステ
ィック導入（ballistic introduction）および感染等が
ある。
【００３０】適当な宿主の代表的なものには、細菌細
胞、例えば連鎖球菌属（streptococci）、ブドウ球菌属
（staphylococci）、大腸菌（E.coli）、ストレプトミ
セス（Streptomyces）および枯草菌（Bacillus subtii
s）細胞；真菌細胞、例えば酵母細胞およびアスペルギ
ルス属（Aspergillus）細胞；昆虫細胞、例えばドロソ
フィラＳ２（Drosophila S2）およびスポドプテラＳｆ
９（Spodoptera Sf9）細胞；動物細胞例えばＣＨＯ、Ｃ
ＯＳ、ＨｅＬａ、Ｃ１２７、３Ｔ３、ＢＨＫ、２９３お
よびボウズ（Bows）メラノーマ細胞；ならびに植物細胞
等がある。
【００３１】非常に多種の発現系を使用できる。このよ
うなベクターには、染色体、エピソームおよびウイルス
由来のベクター、例えば細菌プラスミド由来、バクテリ
オファージ由来、トランスポゾン由来、酵母エピソーム
由来、挿入エレメント由来、酵母染色体エレメント由
来、例えばバキュロウイルス、パポバウイルス、例えば
ＳＶ４０、ワクシニアウイルス、アデノウイルス、鶏痘
ウイルス、仮性狂犬病ウイルスおよびレトロウイルス等
のウイルス由来のベクター、ならびにそれらを組み合わ
せたものに由来するベクター、例えばプラスミドおよび
バクテリオファージの遺伝学的エレメント由来のベクタ
ー、例えばコスミドおよびファージミド等がある。発現
系の構築物には発現を制御および引き起こす調節領域を
含有できる。一般的には、宿主中にポリヌクレオチドを
保持、伸長または発現するのに、および／またはポリペ
プチドを発現するのに適した任意の系またはベクター
を、この点に関する発現に使用できる。周知のおよび通
常的な種々の任意の技術により、適当なＤＮＡ配列を発
現系に挿入でき、例えばSambrookら、MolecularClonin
g，A Laboratory Manual（上記）に記載されている。
【００３２】翻訳蛋白を、小胞体内腔、ペリプラスミッ
クスペースまたは細胞外環境へ分泌させるために、適当
な分泌シグナルを発現するポリペプチドに組み込むこと
ができる。これらのシグナルはポリペプチドに本来的な
ものであってもく、あるいは異種性のシグナルであって
もよい。
【００３３】ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドをスクリーニ
ングアッセイに用いるために発現させる場合、一般的に
は、細胞表面にポリペプチドを生産させるのが好まし
い。この場合、スクリーニングアッセイに使用する前に
細胞を集めてもよい。ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドが培
地中に分泌される場合、培地を回収し、ポリペプチドを
回収し精製することができる。細胞内に生成される場
合、まず細胞を溶解し、次いで、ポリペプチドを回収し
なければならない。ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドは周知
の方法により、組換え細胞培養物から回収および精製で
き、その方法には例えば硫酸アンモニウムまたはエタノ
ール沈殿、酸抽出、陰イオンまたは陽イオン交換クロマ
トグラフィー、ホスホセルロースクロマトグラフィー、
疎水性相互作用クロマトグラフィー、親和性クロマトグ
ラフィー、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー
およびレクチンクロマトグラフィー等がある。高速液体
クロマトグラフィーを精製に用いるのが最も好ましい。
ポリペプチドが単離および／または精製中に変性した場
合、再び活性な立体配座にするために、蛋白再生のため
の周知の技法を用いることができる。
【００３４】診断アッセイ 本発明は、診断試薬としての本発明ＨＧＢＡＢ９０ポリ
ヌクレオチドの使用にも関する。機能不全に関連した変
異形態のＨＧＢＡＢ９０遺伝子の検出は、ＨＧＢＡＢ９
０の発現不足、過剰発現または変化した発現から生じる
疾病またはかかる疾病に対する感受性を決定するための
診断的手段を提供するであろう。ＨＧＢＡＢ９０遺伝子
における変異を有する個体を、種々の方法によりＤＮＡ
レベルで検出してもよい。
【００３５】診断用の核酸は、感染個体の細胞、例えば
血液、尿、唾液、組織生検または剖検材料から得てもよ
い。ゲノムＤＮＡを検出に直接使用してもよく、あるい
は分析前にＰＣＲもしくはその他の増幅法を用いること
により酵素的に増幅してもよい。ＲＮＡまたはｃＤＮＡ
を同様に用いてもよい。正常遺伝子型との比較におい
て、増幅生成物のサイズ変化により欠失および挿入を検
出することができる。増幅ＤＮＡを標識ＨＧＢＡＢ９０
ヌクレオチド配列にハイブリダイゼーションさせること
により点突然変異を同定することができる。ＲＮアーゼ
消化により、または融解温度の差により、完全に対合し
た配列を誤対合二重らせんから区別することができる。
ＤＮＡ配列の相違はまた、変性物質含有または不含のゲ
ル中のＤＮＡフラグメントの電気泳動の移動度の変化を
検出することにより、または直接的なＤＮＡ配列決定に
より検出できる。例えばMeyers et.al.Science，230:12
42（1985）参照。特異的な位置での配列の変化はまた、
ヌクレアーゼ保護アッセイ、例えばＲＮアーゼおよびＳ
１保護または化学的切断法によっても明らかにすること
ができる。例えばCotton et al.Proc.Natl.Acad.Sci.,U
SA，85:4397-4401（1985）参照。もう１つの具体例にお
いて、ＨＧＢＡＢ９０ヌクレオチドまたはそのフラグメ
ントを含むオリゴヌクレオチドプローブのアレイ（arra
y）を構築して、例えば遺伝学的変異の効果的なスクリ
ーニングを行うことができる。アレイ法はよく知られて
おり、広い適用範囲を有し、遺伝子発現、遺伝学的連
関、および遺伝学的変異可能性を包含する分子遺伝学に
おける種々の問題を調べるために用いられうる（例え
ば、M.Chee et al.,Science.Vol 274,pp 610-613 (199
6)参照）。
【００３６】診断アッセイは、本明細書記載の方法によ
りＨＧＢＡＢ９０遺伝子の変異を検出することにより、
肺気腫、関節炎、多発性硬化症、歯周病、のう胞性繊維
症、呼吸障害、血栓症、癌、悪液質、アンギナ、緑内
障、炎症性疾患、骨粗鬆症、高血圧のごとき心臓血管系
の疾患、心筋梗塞のごときアテローム硬化性疾患、なら
びに卒中、喘息、乾癬、アルツハイマー病、パーキンソ
ン病およびハンチントン病のごとき慢性神経変性疾患、
脱髄疾患、エイズ免疫不全、光受容体変性疾患、ならび
にレンズ白内障、器官移植拒絶反応、白内障、再狭窄、
筋ジストロフィー、腎不全、脳血管けいれん、膵臓炎、
ならびに糖尿病性ニューロパシーの診断方法またはかか
る疾病に対する感受性の診断方法を提供する。
【００３７】さらに、対象由来の試料の異常に上昇また
は低下したＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドまたはＨＧＢＡ
Ｂ９０のｍＲＮＡレベルを調べることを特徴とする方法
によって、肺気腫、関節炎、多発性硬化症、歯周病、の
う胞性繊維症、呼吸障害、血栓症、癌、悪液質、アンギ
ナ、緑内障、炎症性疾患、骨粗鬆症、高血圧のごとき心
臓血管系の疾患、心筋梗塞のごときアテローム硬化性疾
患、ならびに卒中、喘息、乾癬、アルツハイマー病、パ
ーキンソン病およびハンチントン病のごとき慢性神経変
性疾患、脱髄疾患、エイズ免疫不全、光受容体変性疾
患、ならびにレンズ白内障、器官移植拒絶反応、白内
障、再狭窄、筋ジストロフィー、腎不全、脳血管けいれ
ん、膵臓炎、ならびに糖尿病性ニューロパシーを診断す
ることができる。ＨＧＢＡＢ９０ポリヌクレオチドの発
現の増加または低下を、ポリヌクレオチドの定量法とし
て当該分野で周知の方法の任意の方法、例えば増幅、Ｐ
ＣＲ、ＲＴＰＣＲ、ＲＮアーゼ保護、ノーザンブロッテ
ィングおよびその他のハイブリダイゼーション法を用い
てＲＮＡレベルで測定することができる。宿主由来の試
料中のＨＧＢＡＢ９０蛋白レベルを決定するために用い
ることができるアッセイ法は当業者に周知である。この
ようなアッセイ法には、ラジオイムノアッセイ、競争結
合アッセイ、ウェスタンブロット分析およびＥＬＩＳＡ
アッセイ等がある。
【００３８】よって、もう１つの態様において本発明
は、疾病、詳細には肺気腫、関節炎、多発性硬化症、歯
周病、のう胞性繊維症、呼吸障害、血栓症、癌、悪液
質、アンギナ、緑内障、炎症性疾患、骨粗鬆症、高血圧
のごとき心臓血管系の疾患、心筋梗塞のごときアテロー
ム硬化性疾患、ならびに卒中、喘息、乾癬、アルツハイ
マー病、パーキンソン病およびハンチントン病のごとき
慢性神経変性疾患、脱髄疾患、エイズ免疫不全、光受容
体変性疾患、ならびにレンズ白内障、器官移植拒絶反
応、白内障、再狭窄、筋ジストロフィー、腎不全、脳血
管けいれん、膵臓炎、ならびに糖尿病性ニューロパシー
についての診断キットまたはそれらに対する感受性につ
いての診断キットであって、 （ａ）ＨＧＢＡＢ９０ポリヌクレオチド、好ましくは配
列番号：１のヌクレオチド配列、またはそのフラグメン
ト； （ｂ）（ａ）のヌクレオチド配列に相捕的なヌクレオチ
ド配列； （ｃ）ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチド、好ましくは配列番
号：２のポリペプチド、またはそのフラグメント；ある
いは （ｄ）ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチド、好ましくは配列番
号：２のポリペプチドに対する抗体を含んでなるキット
に関する。かかるキットにおいて（ａ）、（ｂ）、
（ｃ）または（ｄ）が重要な成分を含んでいてもよいこ
とが理解されるであろう。
【００３９】染色体アッセイ 本発明ヌクレオチド配列は染色体の同定にも価値があ
る。該配列は、個々のヒト・染色体上の特定の位置を標
的とし、これにハイブリダイゼーションしうる。本発明
による重要な配列の染色体へのマッピングは、それらの
配列を遺伝子関連疾病と関連づける重要な第１工程であ
る。配列を正確な染色体位置にマッピングしたならば、
染色体上の配列の物理的位置を遺伝学的地図のデータと
関連づけることができる。かかるデータは、例えば、V.
McKusick,Mendelian Inheritancein Man（Johns Hopkin
s University Welch Medical Libraryからオンラインで
利用できる）に見いだされる。次いで、連関（物理的に
近接した遺伝子の同時遺伝）の分析により、同じ染色体
領域にマッピングされた遺伝子と疾病との関係を同定す
る。罹病個体と未罹病個体との間のｃＤＮＡまたはゲノ
ム配列の相違も調べることができる。罹病個体のいくつ
かまたは全部において変異が観察されるが正常個体にお
いては観察されない場合、その変異は疾病の原因である
可能性がある。ＨＧＢＡＢ９０遺伝子は，ＮＩＢ１８０
５の染色体１９，３．８７ ｃＲにマッピングされてい
る。
【００４０】抗体 本発明のポリペプチドもしくはそれらの変種、またはそ
れらを発現する細胞を免疫原として用いて、ＨＧＢＡＢ
９０ポリペプチドに対して免疫特異的な抗体を製造する
こともできる。用語「免疫特異的」は、先行技術の他の
関連ポリペプチドに対するアフィニティーよりも、本発
明ポリペプチドに対するアフィニティーが実質的に大き
いことを意味する。ポリペプチドまたはエピトープが付
いたフラグメント、アナログまたは細胞を、好ましくは
ヒトはでない動物に通常の実験法を用いて投与すること
により、ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドに対して生じる抗
体を得ることができる。連続的細胞系培養により産生さ
れる抗体を提供する、当業者周知の技術を用いて、モノ
クローナル抗体を調製することができる。実例として
は、ハイブリドーマ法（Kohler,G. and Milstein,C.，N
ature，256:495-497（1975））；トリオーマ法（Kozbor
et al.Immunology Today，4:72（1983））；およびＥＢ
Ｖ−ハイブリドーマ法（Cole et al.Monoclonal Antibo
dies and Cancer Therapy,Alan R Liss,Inc.,77-96頁
（1985））に記載されるような種々の技法がある。
【００４１】一本鎖抗体の産生のために記載された技術
（米国特許第４９４６７７８号）は、本発明のポリペプ
チドに対する一本鎖抗体を産生するのに適用できる。ま
た、トランスジェニックマウス、または他の哺乳動物を
包含する他の生物を用いてヒト化抗体を発現させてもよ
い。上記抗体を用いて、ポリペプチドを発現するクロー
ンを単離または同定してもよく、あるいはアフィニティ
ークロマトグラフィーによりポリペプチドを精製しても
よい。
【００４２】ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドに対する抗体
を用いて、とりわけ、肺気腫、関節炎、多発性硬化症、
歯周病、のう胞性繊維症、呼吸障害、血栓症、癌、悪液
質、アンギナ、緑内障、炎症性疾患、骨粗鬆症、高血圧
のごとき心臓血管系の疾患、心筋梗塞のごときアテロー
ム硬化性疾患、ならびに卒中、喘息、乾癬、アルツハイ
マー病、パーキンソン病およびハンチントン病のごとき
慢性神経変性疾患、脱髄疾患、エイズ免疫不全、光受容
体変性疾患、ならびにレンズ白内障、器官移植拒絶反
応、白内障、再狭窄、筋ジストロフィー、腎不全、脳血
管けいれん、膵臓炎、ならびに糖尿病性ニューロパシー
を治療してもよい。
【００４３】ワクチン 本発明のもう１つの態様は、哺乳動物における免疫学的
反応を誘起する方法に関し、該方法は、抗体および／ま
たはＴ細胞を産生させるに十分なＨＧＢＡＢ９０ポリペ
プチドまたはそのフラグメントを哺乳動物に接種して、
とりわけ、肺気腫、関節炎、多発性硬化症、歯周病、の
う胞性繊維症、呼吸障害、血栓症、癌、悪液質、アンギ
ナ、緑内障、炎症性疾患、骨粗鬆症、高血圧のごとき心
臓血管系の疾患、心筋梗塞のごときアテローム硬化性疾
患、ならびに卒中、喘息、乾癬、アルツハイマー病、パ
ーキンソン病およびハンチントン病のごとき慢性神経変
性疾患、脱髄疾患、エイズ免疫不全、光受容体変性疾
患、ならびにレンズ白内障、器官移植拒絶反応、白内
障、再狭窄、筋ジストロフィー、腎不全、脳血管けいれ
ん、膵臓炎、ならびに糖尿病性ニューロパシーから該動
物を防御することを特徴とする。本発明のさらにもう１
つの態様は、哺乳動物における免疫学的応答を誘導する
方法に関し、該方法は、ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドを
インビボで発現させるための核酸ベクターを送達して、
かかる免疫学的応答を誘導し、該動物を疾患から保護す
る抗体を生じさせることを特徴とする。
【００４４】本発明のさらなる態様は免疫学的ワクチン
処方（組成物）に関し、それは、哺乳動物宿主中に導入
された場合、ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドに対する哺乳
動物の免疫学的応答を誘導する。該組成物はＨＧＢＡＢ
９０ポリペプチドまたはＨＧＢＡＢ９０遺伝子を含んで
なる。ワクチン処方は、さらに適当な担体を含んでいて
もよい。ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドは胃で分解される
可能性があるので、好ましくは非経口投与する（皮下、
筋肉内、静脈、皮内等への注射を包含）。非経口投与に
適した処方は、抗酸化剤、バッファー、静細菌剤および
処方をレシピエントの血液と等張にする溶質を含んでい
てもよい水性または非水性滅菌注射用溶液；ならびに懸
濁剤または増粘剤を含んでいてもよい水性または非水性
滅菌懸濁液を包含する。処方を１回量または複数回量と
して容器に入れて提供してもよく、例えば、密封アンプ
ルおよびバイアルに入れて提供してもよく、また使用直
前に滅菌液体担体の添加のみを必要とする凍結乾燥状態
として保存してもよい。またワクチン処方は、水中油系
および当該分野で知られた他の系のごとき処方の免疫原
性を高めるためのアジュバント系を含んでいてもよい。
用量は、個々のワクチンの活性に左右され、通常の実験
により容易に決定することができる。
【００４５】スクリーニングアッセイ 本発明ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドに結合してこれを活
性化（アゴニスト）または阻害（アンタゴニスト）する
化合物についてのスクリーニングプロセスにおいて本発
明ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドを用いてもよい。よっ
て、本発明ポリペプチドを用いて、例えば細胞、無細胞
調製物、化学ライブラリーおよび天然産物混合物中にお
いて、小型分子基質およびリガンドの結合を評価しても
よい。これらの基質およびリガンドは天然の基質および
リガンドであってもよく、あるいは構造または機能を模
倣したものであってもよい。Coligan et al.,CurrentPr
otocols in Immunology 1(2):Chapter5(1991)参照。
【００４６】ＨＧＢＡＢ９０蛋白は哺乳動物宿主に広く
存在し、多くの生物学的機能に関与しており、多くの病
気にもかかわっている。したがって、ＨＧＢＡＢ９０を
刺激する化合物および薬剤、あるいはまたＨＧＢＡＢ９
０を阻害しうる化合物または薬剤を見いだすことが望ま
れる。一般的には、肺気腫、関節炎、多発性硬化症、歯
周病、のう胞性繊維症、呼吸障害、血栓症、癌、悪液
質、アンギナ、緑内障、炎症性疾患、骨粗鬆症、高血圧
のごとき心臓血管系の疾患、心筋梗塞のごときアテロー
ム硬化性疾患、ならびに卒中、喘息、乾癬、アルツハイ
マー病、パーキンソン病およびハンチントン病のごとき
慢性神経変性疾患、脱髄疾患、エイズ免疫不全、光受容
体変性疾患、ならびにレンズ白内障、器官移植拒絶反
応、白内障、再狭窄、筋ジストロフィー、腎不全、脳血
管けいれん、膵臓炎、ならびに糖尿病性ニューロパシー
のごとき症状を治療または予防するためにアゴニストが
用いられる。肺気腫、関節炎、多発性硬化症、歯周病、
のう胞性繊維症、呼吸障害、血栓症、癌、悪液質、アン
ギナ、緑内障、炎症性疾患、骨粗鬆症、高血圧のごとき
心臓血管系の疾患、心筋梗塞のごときアテローム硬化性
疾患、ならびに卒中、喘息、乾癬、アルツハイマー病、
パーキンソン病およびハンチントン病のごとき慢性神経
変性疾患、脱髄疾患、エイズ免疫不全、光受容体変性疾
患、ならびにレンズ白内障、器官移植拒絶反応、白内
障、再狭窄、筋ジストロフィー、腎不全、脳血管けいれ
ん、膵臓炎、ならびに糖尿病性ニューロパシーのごとき
症状の種々の治療または予防のためにアンタゴニストを
用いてもよい。
【００４７】一般的には、かかるスクリーニング手順
は、本発明ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドを発現あるいは
ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドに応答する適当な細胞を使
用することを含む。かかる細胞は、哺乳動物由来の細
胞、酵母、DrosophilaまたはE.coliを包含する。次い
で、ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドを発現する細胞（また
は発現されたポリペプチドを含む細胞膜）またはＨＧＢ
ＡＢ９０ポリペプチドに応答する細胞を試験化合物と接
触させて、結合または機能的応答の刺激もしくは阻害を
観察する。候補化合物と接触した細胞のＨＧＢＡＢ９０
活性に関する能力を、接触しなかった同種の細胞と比較
する。
【００４８】アッセイは候補化合物の結合を試験するだ
けでよく、候補化合物に直接的または間接的に結合した
標識を用いることにより、あるいは標識競争物質との競
争を用いるアッセイにより、ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチ
ドを有する細胞への付着を検出する。さらに、これらの
アッセイにおいて、ＨＧＢＡＢ９０を表面に有する細胞
に適する検出系を用いて、ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチド
活性化により発生するシグナルを候補化合物が生じるか
どうかを試験してもよい。一般的には、活性化に対する
阻害剤を、既知アゴニスト存在下においてアッセイし
て、アゴニストによる活性化に対する候補化合物の存在
の影響を観察する。
【００４９】さらに、アッセイは、候補化合物をＨＧＢ
ＡＢ９０ポリペプチド含有溶液と混合して混合物を作成
し、混合物中のＨＧＢＡＢ９０活性を測定し、次いで、
混合物のＨＧＢＡＢ９０活性を標準と比較する工程を含
むだけのものであってもよい。
【００５０】ＨＧＢＡＢ９０のｃＤＮＡ、蛋白および該
蛋白に対する抗体を用いて、細胞におけるＨＧＢＡＢ９
０のｍＲＮＡおよび蛋白の産生に対する添加化合物の影
響を調べるためのアッセイを行ってもよい。例えば、当
該分野で知られた標準的方法により、モノクローナルお
よびポリクローナル抗体を用いて、ＨＧＢＡＢ９０の分
泌または細胞結合レベルを測定するためのＥＬＩＳＡを
構築してもよく、また、これを用いてＨＧＢＡＢ９０の
産生を阻害または促進しうる作用剤（それぞれ、アゴニ
ストまたはアンタゴニストと呼ばれる）を適当に処理さ
れた細胞または組織から見いだすこともできる。
【００５１】存在する場合には、当該分野において知ら
れた標準的な受容体結合法により、ＨＧＢＡＢ９０蛋白
を用いて膜結合または可溶性受容体を同定してもよい。
これらの方法はリガンド結合および架橋アッセイを包含
するが、これに限らない。そのアッセイにおいて、ＨＧ
ＢＡＢ９０を放射性同位元素（例えば125Ｉ）で標識、
または化学修飾（例えばビオチン化）、または検出また
は精製に適したペプチド配列に融合し、次いで、推定上
の受容体の源（細胞、細胞膜、細胞上清、組織抽出物、
体液）とともにインキュベーションする。他の方法
は、、表面プラズモン共鳴および分光学的測定のごとき
生物物理学的方法を包含する。受容体の精製およびクロ
ーニングに使用する以外に、これらの結合アッセイを用
いて、ＨＧＢＡＢ９０のその受容体への結合と競争する
ＨＧＢＡＢ９０のアゴニストおよびアンタゴニストを同
定することができる（存在する場合に）。スクリーニン
グアッセイを行うための標準的方法は当該分野において
よく理解されている。
【００５２】潜在的なＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドアン
タゴニストの例は抗体を包含し、あるいはいくつかの場
合には、リガンド、基質、酵素、受容体等に密接に関連
したオリゴヌクレオチドまたは蛋白、例えばリガンド、
基質、酵素、受容体等のフラグメント；あるいは本発明
ポリペプチドに結合するが応答を誘導せず、その結果ポ
リペプチド活性を妨害する小型分子を包含する。
【００５３】よって、もう１つの態様において、本発明
は、ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドのアゴニスト、アンタ
ゴニスト、リガンド、受容体、基質、酵素等、またはＨ
ＧＢＡＢ９０ポリペプチドの産生を減少もしくは促進す
る化合物を同定するためのスクリーニングキットであっ
て、 （ａ）ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチド、好ましくは配列番
号：２のＨＧＢＡＢ９０ポリペプチド； （ｂ）ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチド、好ましくは配列番
号：２のＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドを発現する組み換
え細胞； （ｃ）ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチド、好ましくは配列番
号：２のＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドを発現する細胞
膜；または （ｄ）ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチド、好ましくは配列番
号：２のＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドに対する抗体を含
んでなるキットに関する。 かかるキットにおいて（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または
（ｄ）が重要成分を含んでいてもよいことが理解される
であろう。
【００５４】予防および治療方法 本発明は、過剰または不十分な量のＨＧＢＡＢ９０ポリ
ペプチド活性に関連した、肺気腫、関節炎、多発性硬化
症、歯周病、のう胞性繊維症、呼吸障害、血栓症、癌、
悪液質、アンギナ、緑内障、炎症性疾患、骨粗鬆症、高
血圧のごとき心臓血管系の疾患、心筋梗塞のごときアテ
ローム硬化性疾患、ならびに卒中、喘息、乾癬、アルツ
ハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病のご
とき慢性神経変性疾患、脱髄疾患、エイズ免疫不全、光
受容体変性疾患、ならびにレンズ白内障、器官移植拒絶
反応、白内障、再狭窄、筋ジストロフィー、腎不全、脳
血管けいれん、膵臓炎、ならびに糖尿病性ニューロパシ
ーのごとき異常な状態の治療方法を提供する。
【００５５】ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチド活性が過剰な
場合、いくつかの方法を用いることができる。１の方法
は、有効量の上記阻害剤化合物（アンタゴニスト）を医
薬上許容される担体とともに対象に投与して、例えば、
リガンド、基質、酵素、受容体等の結合を遮断すること
により、あるいは第２のシグナルを阻害することにより
ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドの機能を阻害し、そのこと
により異常な状態を改善することを特徴とする。もう１
つのアプローチにおいて、内在ＨＧＢＡＢ９０と競争し
てリガンドに結合する能力をやはり有している可溶性形
態のＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドを投与してもよい。か
かる競争物質の典型的な具体例はＨＧＢＡＢ９０ポリペ
プチドのフラグメントを含む。
【００５６】もう１つのアプローチにおいて、やはり内
在ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドと競争してリガンドに結
合しうる可溶性形態のＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドを投
与してもよい。かかる競争物質の典型的な具体例はＨＧ
ＢＡＢ９０ポリペプチドのフラグメントを含む。
【００５７】さらにもう１つの方法において、発現ブロ
ッキング法を用いて内在ＨＧＢＡＢ９０をコードしてい
る遺伝子の発現を阻害してもよい。細胞内で生成した、
あるいは別個に投与されたアンチセンス配列を、かかる
知られた方法に使用する。例えば、Oligodeoxynucleoti
des as Antisense Inhibitors of Gene Expression,CRC
Press,Boca Raton, FL(1988)中、O'Coccor,J.Neuroche
m(1991)56:560参照。別法として、遺伝子とともに三重
らせんを形成するオリゴヌクレオチドを用いてもよい。
例えば、Lee et al.,Nucleic Acids Res(1979)6:3073;C
ooney et al.,Science(1988)241:456;Dervan et al.,Sc
ience(1991)251:1360参照。これらのオリゴヌクレオチ
ドはそれ自体投与することができ、あるいは関連オリゴ
マーをインビボで発現させることもできる。
【００５８】ＨＧＢＡＢ９０およびその活性の発現不足
に関連する異常な状態の治療には、いくつかの方法が用
いられる。１の方法は、ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドを
活性化する治療上有効量の化合物（すなわち上記アゴニ
スト）を医薬上許容される担体とともに投与し、そのこ
とにより異常な状態を改善することを特徴とする。別法
として、遺伝子治療を用いて、対象中の細胞によるＨＧ
ＢＡＢ９０の細胞内での生成を有効ならしめてもよい。
例えば、上記のごとく本発明ポリヌクレオチドを処理加
工して複製欠損レトロウイルスベクターに入れて発現す
るようにしてもよい。次いで、レトロウイルス発現構築
物を単離し、本発明ポリペプチドをコードしているＲＮ
Ａを含むレトロウイルスプラスミドベクターで形質導入
したパッケージング細胞中に導入して、今度はパッケー
ジング細胞が目的遺伝子を含む感染性ウイルス粒子を生
成するようにしてもよい。インビボでの細胞の処理加工
およびインビボでのポリペプチドの発現のために、これ
らのプロデューサー細胞を対象に投与してもよい。遺伝
子治療の概説としては、Human Molecular Genetics,T.S
trachan and A.P.Read,BIOS Scientific Publishers Lt
d(1986)中、第２０章、Gene Therapy and other Molecu
lar Genetic-based Therapeutic Approaches（およびそ
の中の引用文献）参照。もう１つの方法は、適当な医薬
担体と混合して治療量のＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドを
投与することである。
【００５９】処方および投与 可溶性形態のＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドのごときペプ
チド、ならびにアゴニストおよびアンタゴニストペプチ
ドまたは小型分子を、適当な医薬担体と組み合わせて処
方してもよい。かかる処方は、治療上有効量のポリペプ
チドまたは化合物、および医薬上許容される担体または
賦形剤を含んでなる。かかる担体としては、セイライ
ン、緩衝化セイライン、デキストロース、水、グリセロ
ール、エタノール、およびそれらの混合物が挙げられる
が、これらに限らない。処方は投与経路に適したものと
すべきであり、当業者によく知られている。さらに本発
明は、上記本発明成分の１種またはそれ以上を充填し
た、１個またはそれ以上の容器を含んでなる医薬パック
およびキットにも関する。
【００６０】本発明ポリペプチドおよび他の化合物を単
独で使用してもよく、あるいは治療化合物のごとき他の
化合物と一緒に使用してもよい。医薬組成物の全身投与
の好ましい形態は、注射、典型的には静脈注射を包含す
る。皮下、筋肉内または腹腔内のごとき他の注射経路を
用いることもできる。全身投与のための別の手段は、胆
汁酸塩またはフシジン酸または他の界面活性剤のごとき
浸透剤を用いる経粘膜または経皮投与を包含する。さら
に、腸溶処方またはカプセル処方がうまく処方されるな
らば、経口投与も可能である。これらの化合物の投与は
局所的なものであってもよく、膏薬、パスタ、ゲル等の
形態であってもよい。
【００６１】必要な用量範囲は、ペプチド、投与経路、
処方の性質、対象の症状の性質、および担当医師の判断
による。しかしながら、適当な用量は対象の体重１ｋｇ
あたり０．１ないし１００μｇの範囲である。しかしな
がら、種々の使用化合物および種々の投与経路のさまざ
まな有効性を考慮すれば、必要な用量は広範囲なものと
思われる。例えば、経口投与には静脈注射よりも多い用
量が必要であると考えられる。当該分野においてよく知
られた最適化のための標準的な常套的実験を用いてこれ
らの用量の変更を行うことができる。
【００６２】しばしば「遺伝子治療」と称される上記治
療方法において、治療に使用するポリペプチドを対象中
において生成させることもできる。よって、例えば、ポ
リペプチドをコードしているＤＮＡまたはＲＮＡのごと
きポリヌクレオチドを用いて、例えばレトロウイルスプ
ラスミドベクターを用いることによりエクスビボにおい
て対象由来の細胞を処理加工してもよい。次いで、細胞
を対象に導入する。
【００６３】本明細書に引用された、特許および特許出
願（これらに限らない）を包含するすべての刊行物を、
参照によりそれぞれが十分に本明細書に記載されている
ものとみなす。
【００６４】配列番号：１a
【表１】 a ヒトＨＧＢＡＢ９０のヌクレオチド配列
【００６５】配列番号：２b
【表２】 b ヒトＨＧＢＡＢ９０のアミノ酸配列
【００６６】配列番号：３ｃ
【表３】 ｃ ヒトＨＧＢＡＢ９０の部分ヌクレオチド配列
【００６７】配列番号：４d 遺伝子名（Ｕ６２８０１）プロテアーゼＭ［ヒト］＞ｇ
ｉ｜１８０５４９３（Ｄ７８２０３）ニューロシン 配列の相対位置：
【表４】 d ヒトＨＧＢＡＢ９０の部分アミノ酸配列
【００６８】
【配列表】
【００６９】（１）一般的情報： （ｉ）出願人：ＳＢ ｐｌｃ （ｉｉ）発明の名称：新規化合物 （ｉｉｉ）配列の数：４ （ｖｉ）連絡先： （Ａ）宛て名：スミスクライン・ビーチャム・パブリッ
ク・リミテッド・カンパニー （Ｂ）通り名： （Ｃ）都市名： （Ｄ）州名： （Ｅ）国名： （Ｆ）ＺＩＰ： （ｖ）コンピューター・リーダブル・フォーム： （Ａ）媒体タイプ：ディスケット （Ｂ）コンピューター：ＩＢＭコンパチブル （Ｃ）作動システム：ＤＯＳ （Ｄ）ソフトウェア：Windowsバージョン２.０用FastSE
Q （ｖｉ）現出願データ： （Ａ）出願番号： （Ｂ）出願日： （Ｃ）分類： （ｖｉｉ）先の出願データ： （Ａ）出願番号： （Ｂ）出願日： （ｖｉｉｉ）代理人等の情報： （Ａ）氏名： （Ｂ）登録番号： （Ｃ）代理人等における処理番号：ＧＨ３０３５３ （ｘｉ）テレコミュニケーションの情報： （Ａ）電話番号： （Ｂ）ファックス番号： （Ｃ）テレックス：
【００７０】 （２）配列番号：１ AATTCGCCCT TACTCACTAT AGGGCTCGAG CGGCCGCCCG GGCAGGTCTC CACTGGGTCC 60 GAATCAGTAG GTGACCCCGC CCCTGGATTC TGGAAGACCT CACCATGGGA CGCCCCCGAC 120 CTCGTGCGGC CAAGACGTGG ATGTTCCTGC TCTTGCTGGG GGGAGCCTGG GCAGGACACT 180 CCAGGGCACA GGAGGACAAG GTGCTGGGGG GTCATGAGTG CCAACCCCAT TCGCAGCCTT 240 GGCAGGCGGC CTTGTTCCAG GGCCAGCAAY TACTCTGTGG CGGTGTCCTT GTAGGTGGCA 300 ACTGGGTCCT TACAGCTGCC CACTGTAAAA AACCGAAATA CACAGTACGC CTGGGAGACC 360 ACAGCCTACA GAATAAAGAT GGCCCAGAGC AAGAAATACC TGTGGTTCAG TCCATCCCAC 420 ACCCCTGCTA TAACAGCAGC GATGTGGAGG ACCACAACCA TGATCTGATG CTTCTTCAAC 480 TGCGTGACCA GGCATCCCTG GGGTCCAAAG TGAAGCCCAT CAGCCTGGCA GATCATTGCA 540 CCCAGCCTGG CCAGAAGTGC ACCGTCTCAG GCTGGGGCAC TGTCACCAGT CCCCGAGAGA 600 ATTTTCCTGA CACTCTCAAC TGTGCAGAAG TAAAAATCTT TCCCCAGAAG AAGTGTGAGG 660 ATGCTTACCC GGGGCAGATC ACAGATGGCA TGGTCTGTGC AGGCAGCAGC AAAGGGGCTG 720 ACACGTGCCA GGGCGATTCT GGAGGCCCCC TGGTGTGTGA TGGTGCACTC CAGGGCATCA 780 CATCCTGGGG CTCAGACCCC TGTGGGAGGT CCGACAAACC TGGCGTCTAT ACCAACATCT 840 GCCGCTACCT GGACTGGATC AAGAAGGGCG AAGGCAGCAA GGGCTGATTC TAGGATAAGC 900 ACTAGATCTC CCTTAATAAA CTCACAACTT TCTGAAAAAA AAAA 944
【００７１】 配列番号：２ Met Gly Arg Pro Arg Pro Arg Ala Ala Lys Thr Trp Met Phe Leu Leu 1 5 10 15 Leu Leu Gly Gly Ala Trp Ala Gly His Ser Arg Ala Gln Glu Asp Lys 20 25 30 Val Leu Gly Gly His Glu Cys Gln Pro His Ser Gln Pro Trp Gln Ala 35 40 45 Ala Leu Phe Gln Gly Gln Gln Leu Leu Cys Gly Gly Val Leu Val Gly 50 55 60 Gly Asn Trp Val Leu Thr Ala Ala His Cys Lys Lys Pro Lys Tyr Thr 65 70 75 80 Val Arg Leu Gly Asp His Ser Leu Gln Asn Lys Asp Gly Pro Glu Gln 85 90 95 Glu Ile Pro Val Val Gln Ser Ile Pro His Pro Cys Tyr Asn Ser Ser 100 105 110 Asp Val Glu Asp His Asn His Asp Leu Met Leu Leu Gln Leu Arg Asp 115 120 125 Gln Ala Ser Leu Gly Ser Lys Val Lys Pro Ile Ser Leu Ala Asp His 130 135 140 Cys Thr Gln Pro Gly Gln Lys Cys Thr Val Ser Gly Trp Gly Thr Val 145 150 155 160 Thr Ser Pro Arg Glu Asn Phe Pro Asp Thr Leu Asn Cys Ala Glu Val 165 170 175 Lys Ile Phe Pro Gln Lys Lys Cys Glu Asp Ala Tyr Pro Gly Gln Ile 180 185 190 Thr Asp Gly Met Val Cys Ala Gly Ser Ser Lys Gly Ala Asp Thr Cys 195 200 205 Gln Gly Asp Ser Gly Gly Pro Leu Val Cys Asp Gly Ala Leu Gln Gly 210 215 220 Ile Thr Ser Trp Gly Ser Asp Pro Cys Gly Arg Ser Asp Lys Pro Gly 225 230 235 240 Val Tyr Thr Asn Ile Cys Arg Tyr Leu Asp Trp Ile Lys Lys Gly Glu 245 250 255 Gly Ser Lys Gly 260
【００７２】 配列番号：３ CAGAGAGTTG TGAGTTTATT AAGGGAGATC TAGTGCTTAT CCTAGAATCA GCCCTTGCTG 60 CCTATGATCT TCTTGATCCA GTCCAGGTAG CGGCAGATGT TGGTAGAGAC GCCAGGTTTG 120 TCGGACCTCC CACAGGGGTC TGAGCCCCAG GATGTGATGC CCTGGAAGTG CACCATGCAC 180 ACACCAGGGG GCCTCCAGAA TCGCCCTAGA CAGGGAGAAT GAGAACAGCC TTGCATCTGA 240 GATGTCCACA ACGTCCCTTT TCCTGCTGTC CCAGCGTTTT ACCAGTTCTT TGGCATGATT 300 GGTCCCCTGT AGCCAATGGG GGTAAAAGCA TTGTCCCCTG AGACCA 346
【００７３】 配列番号：４ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｖａｌ Ｃｙｓ Ｍｅｔ Ｖａｌ Ｈｉｓ Ｐｈｅ Ｇｌｎ
Ｇｌｙ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ｔｒｐ Ｇｌｙ Ｓｅｒ １ ５
１０ １５ Ａｓｐ Ｐｒｏ Ｃｙｓ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ｌｙｓ Ｐｒｏ
Ｇｌｙ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ａｓｎ Ｉｌｅ Ｃｙｓ ２０ ２５
３０ Ａｒｇ Ｔｙｒ Ｌｅｕ Ａｓｐ Ｔｒｐ Ｉｌｅ Ｌｙｓ Ｌｙｓ Ｉｌｅ
Ｉｌｅ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｌｙｓ ３５ ４０
４５
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ｃ０７Ｋ 16/40 Ｇ０１Ｎ 33/15 Ｚ Ｇ０１Ｎ 33/15 Ａ６１Ｋ 37/02 (72)発明者 クリストファー・ドナルド・サザン イギリス、シーエム19・５エイダブリュ ー、エセックス、ハーロウ、サード・アベ ニュー、ニュー・フロンティアーズ・サイ エンス・パーク・サウス、スミスクライ ン・ビーチャム・ファーマシューティカル ズ (72)発明者 ヘレン・エリザベス・クリンケンビアード イギリス、シーエム19・５エイダブリュ ー、エセックス、ハーロウ、サード・アベ ニュー、ニュー・フロンティアーズ・サイ エンス・パーク・サウス、スミスクライ ン・ビーチャム・ファーマシューティカル ズ (72)発明者 ニコラ・アン・バージェス イギリス、シーエム19・５エイダブリュ ー、エセックス、ハーロウ、サード・アベ ニュー、ニュー・フロンティアーズ・サイ エンス・パーク・サウス、スミスクライ ン・ビーチャム・ファーマシューティカル ズ

Claims (19)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 配列番号：２のＨＧＢＡＢ９０ポリペプ
    チドをコードしているヌクレオチド配列に対してその全
    長にわたり少なくとも８０％の同一性を有するヌクレオ
    チド配列を含む単離ポリヌクレオチド、または該単離ポ
    リヌクレオチドに対して相補的なヌクレオチド配列。
  2. 【請求項２】 配列番号：２のＨＧＢＡＢ９０ポリペプ
    チドをコードしている、配列番号：１中に含まれるヌク
    レオチド配列を含む請求項１のポリヌクレオチド。
  3. 【請求項３】 配列番号：１のヌクレオチド配列に対し
    て少なくとも８０％の同一性を有するヌクレオチド配列
    を含む単離ポリヌクレオチド。
  4. 【請求項４】 配列番号：１のポリヌクレオチドである
    請求項３のポリヌクレオチド。
  5. 【請求項５】 適合する宿主細胞中に存在する場合に、
    配列番号：２のポリペプチドに対して少なくとも７５％
    の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＧＢＡＢ９０ポ
    リペプチドを生成する能力のある発現系を含む、ＤＮＡ
    またはＲＮＡ分子。
  6. 【請求項６】 請求項５の発現系を含む宿主細胞。
  7. 【請求項７】 ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドの生成に十
    分な条件下で請求項６の宿主を培養し、次いで、培地か
    ら該ポリペプチドを回収することを特徴とする、ＨＧＢ
    ＡＢ９０ポリペプチドの製造方法。
  8. 【請求項８】 請求項５の発現系で宿主細胞を形質転換
    またはトランスフェクションして、適当な培養条件下で
    宿主細胞がＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドを生成するよう
    にすることを特徴とする、ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチド
    を生成する細胞の製造方法。
  9. 【請求項９】 配列番号：２のアミノ酸配列に対してそ
    の全長にわたり少なくとも７５％同一であるアミノ酸配
    列を含むＨＧＢＡＢ９０ポリペプチド。
  10. 【請求項１０】 配列番号：２のアミノ酸配列を含む請
    求項９のポリペプチド。
  11. 【請求項１１】 請求項９のＨＧＢＡＢ９０ポリペプチ
    ドに対して免疫特異的な抗体。
  12. 【請求項１２】 請求項９のＨＧＢＡＢ９０ポリペプチ
    ドの活性または発現の増強を必要とする対象の治療方法
    であって、 （ａ）該ポリペプチドに対する治療上有効量のアゴニス
    トを対象に投与すること；および／または（ｂ）配列番
    号：２のＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドをコードしている
    ヌクレオチド配列に対してその全長にわたり少なくとも
    ８０％の同一性を有するヌクレオチド配列を含む単離ポ
    リヌクレオチド；またはインビボにおいて該ポリペプチ
    ド活性を生じさせる形態の、該ヌクレオチド配列に対し
    て相捕的なヌクレオチド配列を対象に投与することを特
    徴とする方法。
  13. 【請求項１３】 請求項９のＨＧＢＡＢ９０ポリペプチ
    ドの活性または発現の阻害を必要とする対象の治療方法
    であって、 （ａ）該ポリペプチドに対する治療上有効量のアンタゴ
    ニストを対象に投与すること；および／または（ｂ）該
    ポリペプチドをコードしているヌクレオチド配列の発現
    を阻害する核酸分子を対象に投与すること；および／ま
    たは（ｃ）リガンド、基質、または受容体を求めて該ポ
    リペプチドと競争する治療上有効量のポリペプチドを対
    象に投与することを特徴とする方法。
  14. 【請求項１４】 対象中の請求項９のＨＧＢＡＢ９０ポ
    リペプチドの発現または活性に関連した、対象における
    疾病または疾病に対する感受性の診断方法であって、 （ａ）該対象のゲノム中の該ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチ
    ドをコードしているヌクレオチド配列中の変異の存在ま
    たは不存在を決定すること；および／または（ｂ）該対
    象由来の試料中のＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドの発現の
    存在または量を分析することを特徴とする方法。
  15. 【請求項１５】 請求項９のＨＧＢＡＢ９０ポリペプチ
    ドを阻害（アンタゴナイズ）またはアゴナイズする化合
    物の同定方法であって、 （ａ）ＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドを発現する細胞（ま
    たはＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドを発現する細胞膜）あ
    るいはＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドに応答する細胞に、
    候補化合物を接触させること、次いで、 （ｂ）結合、または機能的応答の刺激もしくは阻害を観
    察すること、あるいは候補化合物と接触した細胞（また
    は細胞膜）のＨＧＢＡＢ９０ポリペプチド活性に関する
    能力を、接触しなかった同種の細胞と比較することを特
    徴とする方法。
  16. 【請求項１６】 請求項１５の方法により同定されるア
    ゴニストまたはアンタゴニスト。
  17. 【請求項１７】 請求項８の方法により製造される組み
    換え宿主細胞、またはＨＧＢＡＢ９０ポリペプチドを発
    現するその膜。
  18. 【請求項１８】 （ａ）配列番号：３の全長にわたり配
    列番号：３に対して少なくとも８０％の同一性を有する
    ヌクレオチド配列を含む単離ポリヌクレオチド； （ｂ）配列番号：３のポリヌクレオチドを含む単離ポリ
    ヌクレオチド； （ｃ）配列番号：３のポリヌクレオチド；または （ｄ）配列番号：４の全長にわたり配列番号：４のアミ
    ノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するポ
    リペプチドをコードしているヌクレオチド配列を含む単
    離ポリヌクレオチドからなる群より選択される単離ポリ
    ヌクレオチド。
  19. 【請求項１９】 （ａ）配列番号：４の全長にわたり配
    列番号：４のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の
    同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチド； （ｂ）配列番号：４の全長にわたり配列番号：４のアミ
    ノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するア
    ミノ酸配列を有するポリペプチド； （ｃ）配列番号：４のアミノ酸を含むポリペプチド； （ｄ）配列番号：４のポリペプチド；および （ｅ）配列番号：３中に含まれる配列を含むポリヌクレ
    オチドによりコードされているポリペプチドからなる群
    より選択されるポリペプチド。
JP10157425A 1997-06-09 1998-06-05 新規化合物 Pending JPH1175868A (ja)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB9711952.3A GB9711952D0 (en) 1997-06-09 1997-06-09 Novel compounds
GB9711952 1997-12-01
EP97309646 1997-12-01
GB97309646-4 1997-12-01

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JPH1175868A true JPH1175868A (ja) 1999-03-23

Family

ID=26147713

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP10157425A Pending JPH1175868A (ja) 1997-06-09 1998-06-05 新規化合物

Country Status (4)

Country Link
US (1) US6100059A (ja)
EP (1) EP0887414A3 (ja)
JP (1) JPH1175868A (ja)
CA (1) CA2231015A1 (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2010504746A (ja) * 2006-09-28 2010-02-18 ビオメリュー カリクレイン８をコードするｋｌｋ８遺伝子の主要選択的転写産物の検出による気管支肺癌のインビトロ診断の方法および生存予測のためのその使用

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7732163B2 (en) * 1997-08-21 2010-06-08 Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Extracellular serine protease
US7157084B2 (en) * 1997-08-21 2007-01-02 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas System Extracellular serine protease
US6642013B1 (en) * 1997-08-21 2003-11-04 The University Of Arkansas For Medical Sciences Extracellular serine protease
US7067250B1 (en) * 1997-08-21 2006-06-27 The University Of Arkansas For Medical Sciences Extracellular serine protease
WO1999040183A1 (en) 1998-02-06 1999-08-12 Human Genome Sciences, Inc. Human serine protease and serpin polypeptides
JPH11225765A (ja) * 1998-02-13 1999-08-24 Suntory Ltd 新規セリンプロテアーゼ
CA2350165C (en) * 1998-11-20 2011-12-13 Fuso Pharmaceutical Industries, Ltd. Novel serine protease bssp6
US6420157B1 (en) * 1999-04-30 2002-07-16 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Zymogen activation system
CN1315555A (zh) * 2000-03-24 2001-10-03 上海博德基因开发有限公司 一种新的多肽——人丝氨酸蛋白酶9和编码这种多肽的多核苷酸
CN1315561A (zh) * 2000-03-27 2001-10-03 上海博德基因开发有限公司 一种新的多肽——人atp依赖的丝氨酸蛋白水解酶9和编码这种多肽的多核苷酸
CN1321766A (zh) * 2000-04-29 2001-11-14 上海博德基因开发有限公司 一种新的多肽——人atp依赖的丝氨酸蛋白水解酶13和编码这种多肽的多核苷酸
CN1322832A (zh) * 2000-05-09 2001-11-21 上海博德基因开发有限公司 一种新的多肽——人atp依赖的丝氨酸蛋白水解酶12.2和编码这种多肽的多核苷酸
JP2004526407A (ja) * 2000-08-07 2004-09-02 バイエル アクチェンゲゼルシャフト ヒト膜型セリンプロテアーゼの調節
GB2376234A (en) * 2001-03-14 2002-12-11 Glaxo Group Ltd Trypsin-like serine protease
RU2340324C1 (ru) * 2007-04-17 2008-12-10 Фанур Амирович Исмагилов Способ снижения повышенного артериального давления
RU2377566C1 (ru) * 2008-08-20 2009-12-27 Государственное учреждение Московский областной научно-исследовательский институт им. М.Ф. Владимирского (МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского) Способ прогнозирования течения полиорганной недостаточности при проведении экстракорпоральной терапии
GB0916576D0 (en) * 2009-09-22 2009-10-28 Malmsten Nils M Polypeptides and uses thereof

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7014993B1 (en) * 1997-08-21 2006-03-21 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Extracellular serine protease

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2010504746A (ja) * 2006-09-28 2010-02-18 ビオメリュー カリクレイン８をコードするｋｌｋ８遺伝子の主要選択的転写産物の検出による気管支肺癌のインビトロ診断の方法および生存予測のためのその使用

Also Published As

Publication number Publication date
EP0887414A2 (en) 1998-12-30
US6100059A (en) 2000-08-08
CA2231015A1 (en) 1998-12-09
EP0887414A3 (en) 2002-11-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6319688B1 (en) Polynucleotide encoding human sodium dependent phosphate transporter (IPT-1)
JPH1175868A (ja) 新規化合物
JPH1169981A (ja) Ａｓｐ１
JP2006325596A (ja) シアロアドヘシンファミリーメンバー−２（ｓａｆ−２）
JPH11151093A (ja) ショウジョウバエｋｕｚ遺伝子に関連したヒト・ディスインテグリン・メタロプロテアーゼ
JPH11183A (ja) ラット・カテプシンｋのポリヌクレオチドおよびポリペプチド配列
US20020103354A1 (en) Splicing variant of human membrane-type matrix metalloproteinase-5 (MT-MMP5-L)
JPH1156376A (ja) ヒトＩκＢ−β
US6245550B1 (en) Cytokine family member EF-7
JPH1175872A (ja) 新規化合物
JPH119288A (ja) 新規ｈａｓ２スプライシング変種ｈｏｅｆｃ１１：慢性腎不全、炎症性疾患および心筋虚血における標的
JPH11164692A (ja) ヒトｒｃｅ１
JPH10313878A (ja) 新規膜タイプマトリックス金属プロテイナーゼ−５遺伝子
JPH10304883A (ja) 新規化合物
JPH11164693A (ja) 慢性腎不全、アテローム性動脈硬化および繊維症の標的 としての新規なｓＭＡＤ３スプライス変異体
JP2004041214A (ja) シアロアドヘシンファミリー４（ＳＡＦ−４）ｃＤＮＡ
JPH1198992A (ja) 新規化合物
JPH1132781A (ja) ヒト・ペロタ相同体
US20010009905A1 (en) ACRP30R1: A homolog of ACRP30 (30 kd adipocyte complement-related protein)
JPH11186A (ja) Ｆｒｚｂファミリーのメンバー、ｆｒａｚｚｌｅｄ
JPH1132782A (ja) Ｙｎｌ０７５ｗ／ｈｔｘｆｔ１９ポリヌクレオチドおよびポリペプチド
EP0879886A2 (en) Signal transduction protein HLDAT86, the human Wnt-4 homolog
EP0892050A2 (en) Human HFIZG53
JPH1169986A (ja) 新規化合物
JPH1189586A (ja) 新規化合物