JPS5815905A - 可溶化シルクペプチド含有皮膚化粧料 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、絹繊維を処理して、分子量分布が一定（１５
００〜５０００又は、５０００〜５ｏ　ｏ　ｏ　ｏ）で
ある、可溶化されたシルクペプチドを、化粧料に応用す
ることに関するものである。

本発明の特徴は、まずその処理法（製造法）は、従来技
術をもとに、これを改良して、その結果、化粧料への配
合性を一段と向上し、さらにチロシナーゼ活性抑制作用
及び保湿作用を有した有利なものである。すなわち、本
発明は、可溶化されたシルクペプチドであって、その分
子量分布状態が１５００〜５ｏｏＯ又は５０００〜５０
０００に限定されたものを得て、これを化粧料に用いる
ことにあり、その結果、保湿性作用が向上し、皮膚の乾
燥防止効果を高めて、外傷などに対する皮膚表皮組織の
再生が促進される効果が期待できる。又、本発明による
シルクペプチドの可溶化物は、チロシナーゼ活性抑制作
用により、皮膚の黒色メラニン色素の生成を抑制し、こ
れによって、肌を色白に保つなどの美容的効果が期待で
きる。

又、化粧料への配合性は、従来のシルク分解物を用いる
ときは、その処方中に分散剤などの添加が必要であった
が、可溶化されているため、その添加が不用となり、こ
れがため、シルク自体の有する特有の肌ざわりが得られ
る。つまり、肌に対する感触が、従来のシルクからの処
理（製造）物に比べ、一段と有利である。

従来の公知なシルクから得られるペプチドにっいてみれ
ば、わが国では古くから、その応用がなされていて、た
とえば「特公昭２５−３７３３」、「特公昭２６−４９
４７Ｊ、［特公昭２７−２．９９Ｊ、［特公昭４０−２
４９０」、「特公昭４２−１７０３０Ｊなどがある。最
近では、本発明者らによる「特開昭５４−１３８１３２
」がある。上記した内、［特開昭５４−１３　ｓ　１３
．２　Ｊ以外では、いず、れも濃い酸液や石灰などを用
いて苛酷な条件を採用し、これによって絹繊維蛋白質を
分解溶解させる方法が利用されている。いずれにしても
、これまでのシルクペプチドの製造においては、得られ
たペプチドは完全に溶解された状態になく、さらにペプ
チドの分子量分布について、検討されたものも見当らな
い。又、分子量を制御して得る方法もなかった。

つまり、本発明者らは、絹繊維の可溶化されたシルクペ
プチドを得るに当って、まず上記した公知技術をもとに
検討を加えてみたが、公知技術を大別すれば、（１）強
酸又は強アルカリによる処理法。（２）銅・エチレンジ
アミン又は銅・アンモニアによる溶解法があり、そこで
本発明者らは（１）及び（２）の方法をもとに検討を加
えてみたわけである。そして、実験の結果、（１）の方
法では、強酸又は強アルカリにて処理後、中和工程で、
大量の沈殿物が発生し、不溶性ペプチドが多く、可溶部
（上層）に移行する量は、ごく微量であった。これに対
して、（２）の処理方法を応用すれば、必要に応じた分
子量分布状態の可溶化シルクペプチドが得られやすいこ
とが推定された。つまり、銅・エチレンジアミン又は銅
・アンモニアを絹繊維の処理（溶解）剤として用いるこ
との方が、分子量分布の状態を制御して、広範囲なペプ
チドの内から一定にコントロールして、製造できること
が示された。

以下に、銅・エチレンジアミンを用いた実験結果につい
て、実験例により詳記する。

「実験例　１」 絹繊維（たとえば平巻系本線りサラシ）を用いて、これ
を銅・エチレンジアミン溶液に溶かし、希酢酸で中和し
、濾過を行ってから、流水中で三昼夜透析を行い、過剰
の銅・エチレンジアミンを流出させてから、次いで濾過
して得た濾液に陽イオン交換樹脂（たとえばＤｏｗｅｘ
　５０ｗｘ−２）を加えて、３０分間攪拌を行い、これ
によって残留する銅・エチレンジアミンを除去する。イ
オン交換樹脂による操作（攪拌）によって、不溶性とな
った物質を除去するために、濾過を行う。この濾過した
濾液は、そのままでは、−夜装置すれば凝固してしまう
ので、直ちに１ＯＮ水酸化ナトリウム液を加えて、濾液
が０゜１〜０．２Ｎ水酸化ナトリウム液になるように調
整する。次いで８０〜９０℃で５〜３０分間攪拌しなが
ら、加熱処理したのち、希鉱酸（たとえば希硫酸）又は
無水コハク酸を加えて、ｐＨ６，０〜７．０へ戻し、濾
過して、可溶化シルクペプチドを得る。この方法を用い
る際の要部としては、加熱温度として９０℃前後での処
理時間がポイントであり、これによって、次の表「表１
」に示すごとく、１５００〜５０００の分子量分布をも
った状態の可溶化シルクペプチドが得られることがわか
った。

「実験例　２」 絹繊維（たとえば平巻系本線りサラシ）を銅−エチレン
ジアミン溶液に溶かし、４０〜８０℃で１〜４時間加温
処理し、希酢酸で中和し、濾過したのち、流水中で約３
昼夜の透析を行い、過剰の銅・エチレンジアミンを流出
してがら、、濾過後、その得られた濾液に、陽イオン交
換樹脂（たとえば、Ｄｏｗｅｘ　５０ｗｘ　−２）を加
えて、１５〜３０分間程度攪拌させて、残留する銅・エ
チレンジアミンを除去するが、イオン交換樹脂を加える
こと及び、攪拌操作による物理的な影響を受けて、不溶
性となった物質を除去するために、イオン交換樹脂処理
後に、さらに濾過を行う。濾過後の液は、４０℃、又は
５０”Ｃで１時間で加温処理したものは、これにＩＯＮ
水酸化ナトリウム液を加えて、ｐＨ９〜１１にしてから
、次に無水フハク酸を加えて、３０分〜１時間攪拌溶解
し、ｐＨ６〜７とする。ｐＨが６〜７に至らないときは
、希酢酸でｐＨを６〜７に調整する。上述した温度以外
での高温下処理では、イオン交換樹脂処理後、直にＩＯ
Ｎ水酸化す）　ＩＪウム液を加えて、即ｐＨを６〜７に
調整しても良い。つまり、４０〜５０℃の１時間の加温
処理によって得られるシルクペプチドは、その分子量が
大きいことから、これにともなって、経時的に凝固され
るので、上述した二段階ｐＨ操作を用いるとよいことが
わかった。

このようにして得られたシルクペプチドの分子量分布状
態をみると、次表「表２」に示すごとくであった。

「表１」　（実験例１による加熱及び処理時間との関係
からみた、可溶化シルクぜプチドの分子量分布状態） （表１の注解） 表１中、検体＆１〜４は、銅・エチレンジアミン溶解後
、透析し、０．ＩＮ水酸化す）　ＩＪウム液にしてから
、９０℃で５〜３０分間加熱処理して得られた、可溶化
シルクペプチドの分子量分布状態を示す。

表１中、検体点５〜８は、銅・エチレンジアミン溶解後
、透析し、０．２Ｎ水酸化す）　ＩＪウム液にしてから
、９０℃で５〜３０分間加熱処理して得られた、可溶化
シルクペプチドの分子量分布状態を示す。

「表２」　（実験例２による加温及び処理時間との関係
がらみた、可溶化シルクペプチドの分子量分布状態） した分子量状態についての測定は、セファデックスＧ−
２５、同一５０又は同一７５を用い、ゲル濾過法により
実施した。又、その際に用いた標準物質としては、ブル
ーデキストリン（ＴＯＰ：分子量２００万）、ブラジキ
ニン三酢酸塩（ＢＫ：分子量１２４０）、グルタチオン
（ＧＬＵＴ　：分子量３０７）、グリシルグリシン（Ｇ
ＧＧ：分子量１８９）を用い行った。測定条件としては
、たとえば分子量１００〜５０００の範囲では、セファ
デックスＧ　−２５ｆｉｎｅを用い、カラムロ径：２，
３ｃｍｚ長さ７８Ｃｍ０セファデックスＧ−２５の容積
２５０ｄ、流速は約３０　ｍｌ　／　ｈｒ、　３　ｍｌ
　／　Ｆｒ　　で実施した。

「実験例　３」 前述した、それぞれの方法で得られた、可溶化シルクペ
プチドを、その分子量分布状態で区分して、まとめてみ
ると、「表３」のごとくであった。さらに、これについ
て分子量分布状態からみたメラニン色素の生成抑制作用
に関して実験した成績結果は、下表「表４」のごとくで
あった。実験法は、チロシン又はドーパに、チロジナー
ゼを作用させて、これによって生成される有色（黒色）
メラニンを−６４０ｎｍ　　で、その吸光度から測定す
る方法を採用した。

（反応系組成） Ｌ−チロシン・・・・・・・・・・・・・・・・・・・
　０．５ｄリン酸緩衝液・・・・・・・・・・・・・・
・・・・・　２．〇−蒸留水又は検体ｓｅ、ｓｅｓ、ａ
＊＊ｓ＊＊＊＊＊＊　　２，０−銅イオン（１％溶液）
＠・−・・・・・・・・０．０５ｆｒＬｌチロシナーゼ
（ｉＴｎ９／ｓ／） 「表３」　（処理条件からみた可溶化シルクペプチドの
分子「表４」　（可溶化シルクペプチドの処理条件又は
分子量分布状上表「表４」に示すごとく、可溶化シルク
ペプチドには、すべてにメラニン色素の生成抑制作用が
認められ、その内、とくに作用が強く示されるものは、
分子量分布状態からみて、比較的低分子化されたペプチ
ドが有利であることが判明した。

次に、可溶化シルクペプチドの保水性効果をみるために
、前記した実施例１〜２で得られた検体のなかから２〜
３を選び出し、恒質恒温機を用いて、その効果について
測定した。実験方法は次に示す方法で行った。

（実験法） 実験例１〜２で得た可溶化シルクペプチドのなかから、
検体Ａ２．４．６．８．１４を用いて、それぞれ約３り
を秤量瓶に精秤し、恒温恒る。残留物中に水分が、どの
程度とり込まれるかを測定し、各種の検体の濃度で割、
吸収率（％）を求める方法を採用した。

その結果は、第１図に示すごとく、吸湿率がいずれも相
当高いことがわかった。又、とくにンを用いた方法で、
透析後に０．１〜０．２　Ｎ水酸化ナトリウム溶液にな
るように調整し、８０〜９０℃の加熱処理して得られる
、可溶化シルクペプチドの方が良いことがわかった。つ
まり、銅、エチレンジアミンを用いる方法でも、実験例
２で示す処理法よりも、実験例１における処理法で得ら
れたところの可溶化シルクペプチドで、分子量分布状態
からは、’１５００〜５０００程度にあるものが有利で
あることがわかった以上の実験結果か゛ら、これを基礎
に最良の製法を検討した結果、メラニン色素生成抑制作
用と共に吸湿性の高い可溶化シルクペプチドを得ること
で、しかも分子量の分布状態が、高分子から低分子まで
、の間で、一定の範囲でコントロールして得る方法とし
ては、次の実施例１〜２が良いことがわかった。

「実施例１」 （実験例１から検討した結果にもとすく製造法） 絹繊維（たとえば平巻系本線りサラシ）６０りを、あら
かじめエチレンジアミン４８９、水酸化第２銅３６０が
溶は込んでいる水溶液６００−に入れ、ガラス棒で３０
分間攪拌を行い溶解させたのち、３Ｎ酢酸にてｐＨ６〜
７に調整して、次に綿栓濾過を行い不溶物を除去させて
、得られた濾液をセルロースチューブＣ−６５（Ｖｉｓ
ｋｉｎｇ　’　Ｃｏｍｐａｎｙ社製）に入れて、流水中
にて１〜２昼夜の透析を行い、透析した溶液を吸引濾過
して、この得られた濾液に対し精製水を加えて２０００
−にメスアップしてから、強酸性陽イオン交換樹脂（た
とえば、Ｄｏｗｅｘ　５０ｗｘ−２）約８０９　（湿体
状態のもの）を加え、スターラーで、２０〜３０分間攪
拌して、吸引濾過により樹脂を除去する。次に、この濾
液に１ＯＮ水酸化ナトリウム液を加え、０．１〜０．２
Ｎ水酸化ナトリウム液になるように調整して、約９０℃
で１０分間加熱処理を行い、次に希硫酸又は無水コハク
酸を加えて、ｐＨ６，０〜７．０に戻してから、ケイソ
ウ土を敷いたブフナー濾斗を用いて濾過を行い、この濾
液を約８０℃で１時間加熱滅菌して、その収量が約６７
の可溶性シルクペプチド溶液が得られた。この溶液の分
子量分布は、１５００’〜５０００にピークｉもち、各
種の化粧料中に配合できる。

「実施例２」 （実験例２から横笛した結果にもとずく製造法） 絹繊維（たとえば、平巻系本線りサラシ）６０ｇを、あ
らかじめエチレンジアミン４８ｇ、水酸化第２銅３６ｑ
が溶は込んでいる水溶液６００−に入れ、ガラス棒で３
０分間攪拌を行い溶解させたのち、６０℃で２時間加温
処理して、次に３Ｎ酢酸でｐＨ６，０〜７．０に調整す
る０調整したのち、綿栓濾過を行い、不溶物を除去して
得られた濾液を、セルロースチューブＣ−６５（Ｖｉｓ
ｋｉｎｇ　Ｃｏｍｐａｎｙ社製）に入れて、流水中で１
〜２昼夜の透析を行う。透析した溶液を吸引濾過して、
この濾液に対し、精製水を加えて、１ｏｏｏ−にメスア
ップしてから、次に強酸性陽イオン交換樹脂、（たとえ
ば、Ｄｗｅｘ　５０ｗｘ　−２）約８０９　（湿体状態
にあるもの）を加えて、スターラーにて２０〜３０分間
攪拌して吸引濾過により、樹脂を除去する。この濾液対
して、ＩＮ水酸化ナトリウム液を加えて、ｐＨ６，０〜
７．０にｐＨを戻してから、ケイソウ土を敷いたブフナ
ー濾斗を用いて濾過して得る濾液を、約８０℃で１時間
加熱滅菌をして、その収量が約６１の可溶化シルクペプ
チド溶液が得られた。この溶液の分子量分布は、５０ｏ
Ｏ〜５ｏ　ｏ　ｏ’ｏにピークをもち、各種の化粧料中
に配合できる。

上記した実施例１又は２は、その分子量からすれば、た
とえば乳液やクリームなどの乳化を必要とするものに有
利である。

（参考処方例１−乳液） 実施例１又は２による 可溶性シルクペプチド溶液・・・・・・・　５．０％流
動パラフィン・１１＠０・・・・・・・・・・拳＊　１
２＋０　／／ラノリン・・・・・・・・・・・・・・・
・・・・・・・・　４．ｏ〃オレイン酸・・・・・・・
・・・・・・００・Φ・・　３．５〃トリエタノールア
ミン・・・・・・・拳・　　１．０〃オクチルドデシル
ミリステート・り・ 防腐剤及び香料・・・・・・・・・・・・・・・・・　
適量精製水をもって全量１００％とする。

（参考処方例２−クリーム） 実施例１又は２による 可溶性シルクペプチド溶液・・・拳・・１１６＋Ｏ％ホ
リオキシエチレンオレイルエーテル・−・・・　　２．
０〃ラノリン０・・・・・・０・・拳・・・・・・・・
・・　６．０〃セタノール・・・・０・・・・・〕拳・
・・・・会・・　２．５％ミツロウ・・・・・・・Φ・
・・・・・・・・・・・・・・　８．０〃流動パラフイ
ン・＠１１１１＠１１・Φ・・Ｑ・・Φ・・・　８．０
〃モノステアリン酸グリセリン・・・・・・・・・・・
　　２゜ｏ〃コメ胚芽油（オリザオイル５−１）・・・
・　　３゜０〃バルミチン酸イソプロピル・・・・・・
＠１１．０〃セレシン０・・・・・・・・・・・・・・
・・・・・・１１３．０〃ホ　　ウ　　酸＊　＊　＊　
ｊＬ　＊　ａ　ｅ　＊　＊　ｍ　１１　＠　１１　ｅ　
＠　１１　＠　＠　ＩＩ　１１１１　＠　　　　１．Ｑ
　　／／防腐剤及び香料・・・・・・・・・・・・・・
・・・　適量精製水をもって、全量１００％とする。

上記した各処方例に示した化粧料は、これを゛、皮膚や
頭髪に塗布−又は塗擦して用いれば、肌や髪に対して光
沢（艶）と張りを与え、張りの状態は、肌や髪が有する
と同様な柔軟性を有していて、保湿性に富む。又、皮膚
化粧料に用いる他、皮膚外用軟膏剤や外用湿布剤などに
、添加しやすく、配合したことによって、疾患部の治療
効果を促進する。つまり、皮膚上皮層部の乾燥を防ぎ、
外傷部への主薬剤の経皮吸収性が向上し、早期回復が期
待できる。したがって、鎮痛消炎ハツプ剤やプラスター
などや、亜鉛華軟膏、豚腸軟膏、チンク油、ホウ酸軟膏
やあるいは副腎皮質ホルモンや抗生物質などを含有した
軟膏剤又は坐剤、その他、パン割前類などにも配合する
ことが出来、それらに配合した製品自体の乾燥も防ぐこ
とができる。

【図面の簡単な説明】

第１図は、絹繊維から得られた可溶化シルク〜２による
処理操作で得られるものであって、表１と表２中に示し
た、各検体瓜を示すものである。 第２図は、本発明による可溶化シルクペプチドの、セフ
ァデックスＧ−２５を用いて行った、溶出パターンで、
分子量との関係を示したものである。ａは、実施例１に
よって得られたもの。ｂは、実施例２で得られたもの。 □　特許出願人 −丸ファルコス株式会社

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、　絹繊維を、銅・エチレンジアミン溶液に溶かし、
   希酢酸にて中和したのち、１〜３昼夜透析し、吸引濾過
   して得られた濾液を、強酸性陽イオン交換樹脂（Ｄｏｗ
   ｅｘ　５０ｗｘ　−２）を加えて、よく攪拌してから、
   吸引濾過により、用いた樹脂を除去させて得られた濾液
   に対し、１ＯＮ水酸化ナトリウム液を加えて、０．１〜
   ０．２Ｎ水酸化ナトリウム、液となるように調製してが
   ら、８０〜９０℃で５〜３０分間加熱処理し、その後で
   、希硫酸又は無水コハク酸にて、中性附近へｐＨを戻し
   てから吸引濾過して得られる、分子量分布が１５００〜
   ５０００にピークをもった、可溶化シルクペプチドを含
   有する、皮膚化粧料。 ２　絹繊維を、銅拳エチレンジアミン溶液に溶かし、４
   ０〜８０℃で１〜４時間加温処理し、次いで希酢酸にて
   中和してから、１〜３昼夜透析したのち、吸引濾過して
   得た濾液に、強酸性陽イオン交換樹脂（Ｄｏｗｅｘ　５
   ０ｗｘ　−２）を加えて、よく攪拌してから、吸引濾過
   により、用いた樹脂を除去させて得られる濾液に対して
   、２Ｎ水酸化ナトリウム溶液を加えて、ｐＨ６，０〜７
   ゜０に調整してから吸引濾過して得られる、分子量分布
   が５０００〜５００００にピークをもった、可溶化シル
   クペプチドを含有する、皮膚化粧料。