JPS5858078B2 - セルロ−スの糖化法 - Google Patents
セルロ−スの糖化法Info
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- JPS5858078B2 JPS5858078B2 JP19986281A JP19986281A JPS5858078B2 JP S5858078 B2 JPS5858078 B2 JP S5858078B2 JP 19986281 A JP19986281 A JP 19986281A JP 19986281 A JP19986281 A JP 19986281A JP S5858078 B2 JPS5858078 B2 JP S5858078B2
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明はセルラーゼによるセルロース含有物eの糖化方
法に関するものである。
法に関するものである。
代替燃料としてのアルコールの生産と食糧資源の確保の
ために、セルロースを糖化してブドウ糖を製造しようと
する研究が、近年、盛んにおこなわれるようになった。
ために、セルロースを糖化してブドウ糖を製造しようと
する研究が、近年、盛んにおこなわれるようになった。
セルロースは天然では、リグニン、ヘミセルロースと強
固に結合して存在しているために、そのまSではセルラ
ーゼによる分解を受けにくい。
固に結合して存在しているために、そのまSではセルラ
ーゼによる分解を受けにくい。
このため、セルラーゼによる分解を受けやすくするため
、リグニンやヘミセルロースの除去、セルロースの結晶
構造を破壊する種種の方法が考案されてきた。
、リグニンやヘミセルロースの除去、セルロースの結晶
構造を破壊する種種の方法が考案されてきた。
例えば、セルロース含有物を酸またはアルカリで加熱し
てリグニンを除去すると共にセルロースの結晶構造を破
壊する化学的方法や、セルラーゼによる分解ができるよ
うになるまで微粉砕する物理的方法などがある。
てリグニンを除去すると共にセルロースの結晶構造を破
壊する化学的方法や、セルラーゼによる分解ができるよ
うになるまで微粉砕する物理的方法などがある。
しかし、現在までに知られたセルロース含有物質の前処
理法は、いずれもコストが高くつき、セルロース資源か
ら糖質原料を製造する技術はまだ確立されていないと云
っても過言ではない。
理法は、いずれもコストが高くつき、セルロース資源か
ら糖質原料を製造する技術はまだ確立されていないと云
っても過言ではない。
本発明者らは、セルロース資源からの糖質の回収を目的
としてセルラーゼによるセルロース含有物の糖化方法に
ついて研究を行ってきた。
としてセルラーゼによるセルロース含有物の糖化方法に
ついて研究を行ってきた。
そしてセルロース含有物をセルラーゼで糖化するに際し
ポリエチレングリコール又はその誘導体の存在下で反応
を行うと、セルロース含有物質から効率よく糖を回収で
きることを認め、本発明を完成するに至った。
ポリエチレングリコール又はその誘導体の存在下で反応
を行うと、セルロース含有物質から効率よく糖を回収で
きることを認め、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、セルロース含有物質をセルラーゼ
で糖化するに際し、ポリエチレングリコール又はその誘
導体の存在下で反応を行うことを巷徴とするセルロース
含有物から糖質の製造方法に関するものである。
で糖化するに際し、ポリエチレングリコール又はその誘
導体の存在下で反応を行うことを巷徴とするセルロース
含有物から糖質の製造方法に関するものである。
以下に本発明を更に具体的に説明する。
本発明を適用できるセルロース含有物とは、木質系又は
非木質系の植物体又はその派生物であって、例えば、稲
ワラ、麦ワラ、モミガラ、バガスなどの農産廃棄物、そ
して、ナピャ、コゴンなどの雑草類、木材、パルプ、古
紙、センイ性廃棄物などが挙けられるが、これらは、必
ずしも完全に脱リグニンあるいは脱ヘミセルロースされ
たものである必要はなく、セルロース含有物の種類によ
っては軽度の化学的処理されたもの、あるいは機械的に
微粉化されたものに対して、本発明は好適に適用するこ
とができる。
非木質系の植物体又はその派生物であって、例えば、稲
ワラ、麦ワラ、モミガラ、バガスなどの農産廃棄物、そ
して、ナピャ、コゴンなどの雑草類、木材、パルプ、古
紙、センイ性廃棄物などが挙けられるが、これらは、必
ずしも完全に脱リグニンあるいは脱ヘミセルロースされ
たものである必要はなく、セルロース含有物の種類によ
っては軽度の化学的処理されたもの、あるいは機械的に
微粉化されたものに対して、本発明は好適に適用するこ
とができる。
すなわち、リグニンやヘミセルロースが存在しているセ
ルロース含有物に対しても、本発明は顕著な効果を示す
ので、本発明を適用するならば、セルロース含有物の前
処理は軽度の処理ですむため、前処理コストを大巾に低
減することができることになる。
ルロース含有物に対しても、本発明は顕著な効果を示す
ので、本発明を適用するならば、セルロース含有物の前
処理は軽度の処理ですむため、前処理コストを大巾に低
減することができることになる。
たとえは、非木質系(草木類)のセルロース含有物の処
理は水酸化ナトリウムを使用する場合0.1〜0.2%
の濃度で100〜120℃で1〜30分程度の処理、ま
た、重炭酸ナトリウムを使用する場合0.5〜1%程度
の濃度でioo〜12o℃で5〜10分程度の軽度の処
理をされたもので十分である。
理は水酸化ナトリウムを使用する場合0.1〜0.2%
の濃度で100〜120℃で1〜30分程度の処理、ま
た、重炭酸ナトリウムを使用する場合0.5〜1%程度
の濃度でioo〜12o℃で5〜10分程度の軽度の処
理をされたもので十分である。
ポリエチレングリコール又はその誘導体は、セルロース
含有物の化学処理に際して、あらかじめ添加しておくと
、セルロース含有物に対して処理液の浸透性がよくなる
ため処理を容易に行うことができ、また、セルラーゼに
よる糖化時の効果も大きい。
含有物の化学処理に際して、あらかじめ添加しておくと
、セルロース含有物に対して処理液の浸透性がよくなる
ため処理を容易に行うことができ、また、セルラーゼに
よる糖化時の効果も大きい。
本発明でいうポリエチレングリコールトハ、例えば、市
販されているポリエチレングリコール4001ポリエチ
レングリコール10001ポリエチレングリコール20
00.ポリエチレングリ]−/L/4000. ホIJ
エチレングリコール6000ポリエチレングリコール2
0000(以上、いずれも和光純薬工業株式会出など、
(0CR2CH2)nの構造を単位とする種々の重合度
のものを印、含するが、特にポリエチレングリコール1
000〜6000のものが効果が大きい。
販されているポリエチレングリコール4001ポリエチ
レングリコール10001ポリエチレングリコール20
00.ポリエチレングリ]−/L/4000. ホIJ
エチレングリコール6000ポリエチレングリコール2
0000(以上、いずれも和光純薬工業株式会出など、
(0CR2CH2)nの構造を単位とする種々の重合度
のものを印、含するが、特にポリエチレングリコール1
000〜6000のものが効果が大きい。
そしてポリエチレングリコールの誘導体としては、ツイ
ーン20゜ツイーン40、ツイーン60、ツイーン80
.ツイーン85(以上、いずれもアメリカ アトラスパ
ーウダー カンパニー製)あるいはトリトンX100や
トリトンX−405(以上いずれもアメリカ ローム
アンド バース カンパニー製造)、ブリッジ35(
花王アトラス株式会社製造)など、(−〇CH2CH2
−)nを骨格とする誘導体をυ、含し、これらは、表面
活性剤、乳化剤、分散剤として使用されているものであ
る。
ーン20゜ツイーン40、ツイーン60、ツイーン80
.ツイーン85(以上、いずれもアメリカ アトラスパ
ーウダー カンパニー製)あるいはトリトンX100や
トリトンX−405(以上いずれもアメリカ ローム
アンド バース カンパニー製造)、ブリッジ35(
花王アトラス株式会社製造)など、(−〇CH2CH2
−)nを骨格とする誘導体をυ、含し、これらは、表面
活性剤、乳化剤、分散剤として使用されているものであ
る。
これらの物質は、通常、反応液に対して0.01〜10
%程度添加されるが、0.05〜0.2%程度の添加が
最も望ましい濃度である。
%程度添加されるが、0.05〜0.2%程度の添加が
最も望ましい濃度である。
セルロース含有物質の酸素糖化に際して、ポリエチレン
グリコール又はその誘導体が効果を示す理由については
、今のところ明らかではないが、これら物質の存在によ
り、セルロース含有物へのセルラーゼの浸透及び接触性
がよくなるため、セルロースの糖化が促進されるものと
考えられる。
グリコール又はその誘導体が効果を示す理由については
、今のところ明らかではないが、これら物質の存在によ
り、セルロース含有物へのセルラーゼの浸透及び接触性
がよくなるため、セルロースの糖化が促進されるものと
考えられる。
セルラーゼ酵素剤としては、例えば、トリコデルマ属、
アスづルギルス属、スポロトリウム属、イルペックス属
や細菌セルラーゼ、放線菌セルラーゼなど種々の微生物
起源のセルラーゼが使用できる。
アスづルギルス属、スポロトリウム属、イルペックス属
や細菌セルラーゼ、放線菌セルラーゼなど種々の微生物
起源のセルラーゼが使用できる。
次に、実施例により本発明を具体的に説明する。
実施例 1
バガス(約0.5 m/m ) 50m9を、水、0.
02%水酸化ナトリウム溶液又は1%重炭酸ナトリウム
溶液各1 mlに懸濁させたものに、第1表に記載の通
り、ポリエチレングリコール6000を0.05%と0
.1%又はトリトンX −405を0.05%と0.1
%をそれぞれ添加し、120℃で30分間加熱処理した
のち、0.2 M酢酸緩衝液0.5ml!を加えてpH
5,0に調整し、トリコデルマビリデのセルラーゼ酵素
剤(ヤクルト生化学株式会社製造販売、セルラーゼ、オ
ノズカR−10)38単位を添加し、全量を水で2ml
とし、45℃で2日間反応させた。
02%水酸化ナトリウム溶液又は1%重炭酸ナトリウム
溶液各1 mlに懸濁させたものに、第1表に記載の通
り、ポリエチレングリコール6000を0.05%と0
.1%又はトリトンX −405を0.05%と0.1
%をそれぞれ添加し、120℃で30分間加熱処理した
のち、0.2 M酢酸緩衝液0.5ml!を加えてpH
5,0に調整し、トリコデルマビリデのセルラーゼ酵素
剤(ヤクルト生化学株式会社製造販売、セルラーゼ、オ
ノズカR−10)38単位を添加し、全量を水で2ml
とし、45℃で2日間反応させた。
反応後、濾過した上澄液について、還元糖量をソモギー
ネルソン法により、そして全可溶性糖量をアンスロン法
により、それぞれグルコースとして定量した。
ネルソン法により、そして全可溶性糖量をアンスロン法
により、それぞれグルコースとして定量した。
得られた結果を第1表に示す。
表から明らかなように、トリトンX −405又はポリ
エチレングリコール6000を0.05〜0.1%存在
させて反応させることにより、数%〜約30%の糖の増
収が達成された。
エチレングリコール6000を0.05〜0.1%存在
させて反応させることにより、数%〜約30%の糖の増
収が達成された。
本実施例においては、セルロース含有物の前処理法とし
て、水酸化ナトリウムあるいは重炭酸ナトリウム溶液を
使用したが、水酸化す) IJウムを使用する前処理法
ではセルロース及びヘミセルロースのいずれもセルラー
ゼにより可溶性糖として回収できるが、重炭酸ナトリウ
ムを使用する方法では主としてグリコースからなる可溶
性糖が回収できる。
て、水酸化ナトリウムあるいは重炭酸ナトリウム溶液を
使用したが、水酸化す) IJウムを使用する前処理法
ではセルロース及びヘミセルロースのいずれもセルラー
ゼにより可溶性糖として回収できるが、重炭酸ナトリウ
ムを使用する方法では主としてグリコースからなる可溶
性糖が回収できる。
なお、セルラーゼ活性は、下記の通り測定しtも0.0
5M酢酸緩衝液(pH5,0)に溶解させた0、5%量
MC(カルボキシメチルセルロース)溶液0.5m1.
にセルラーゼ酵素液を加え、蒸溜水で全量1mlとし、
50℃で10分間反応させた。
5M酢酸緩衝液(pH5,0)に溶解させた0、5%量
MC(カルボキシメチルセルロース)溶液0.5m1.
にセルラーゼ酵素液を加え、蒸溜水で全量1mlとし、
50℃で10分間反応させた。
そして、この条件で1分間に1μmolのグルコースに
相当する還元力を生成する酵素量を1単位とした。
相当する還元力を生成する酵素量を1単位とした。
実施例 2
実施例1で使用したバガス50mgを、ポリエチレング
リコールのタイプ400,1000゜2000.400
0.6000と20000のもの各0.1%量あるいは
トリトンX −405を0.1%量を含む1%重炭酸ナ
トリウム液又は0.1%水酸化ナトリウム1mlに添加
し、120℃で10〜20分間加熱処理したのち、実施
例1と同様にしてセルラーゼで糖化した。
リコールのタイプ400,1000゜2000.400
0.6000と20000のもの各0.1%量あるいは
トリトンX −405を0.1%量を含む1%重炭酸ナ
トリウム液又は0.1%水酸化ナトリウム1mlに添加
し、120℃で10〜20分間加熱処理したのち、実施
例1と同様にしてセルラーゼで糖化した。
得られた結果を第2表に示す。
表から明らかなように、ポリエチレングリコールとして
は、ある程度重合度の高いものがよく、特に、ポリエチ
レングリコール1000〜6000前後のものが特に効
果が大きかった。
は、ある程度重合度の高いものがよく、特に、ポリエチ
レングリコール1000〜6000前後のものが特に効
果が大きかった。
実施例 3
実施例1で使用したと同じバガス501n9に、ブリッ
ジ35を0.1%濃度と水酸化ナトリウム0.1%濃度
になるように添加し、全量約1rILlにし、120℃
で10分間加熱処理してのち、実施例1骨骨と同様にし
て反応した(反応時間は24時間)。
ジ35を0.1%濃度と水酸化ナトリウム0.1%濃度
になるように添加し、全量約1rILlにし、120℃
で10分間加熱処理してのち、実施例1骨骨と同様にし
て反応した(反応時間は24時間)。
得られた結果を第3表に示す。
表から明らかなように、ブリッジ35の存在下で反応を
行うことにより、可溶性糖は約46%増収できた。
行うことにより、可溶性糖は約46%増収できた。
実施例 4
稲ワラ粉砕物(約0.5m/m ) 507n9を1%
重炭酸ナトリウム1rnlに懸濁させたもの、及び、こ
れに、ポリエチレングリコール6000又はトリレンX
−405各0.1%添加したものを120℃で20分
加熱処理したのち、終濃度0.05Mになるように酢酸
緩衝液を添加し、pHを5.0に調整しあこれに、トリ
コデルマ属セルラーゼ酵素剤(ヤクルト生化学株式会社
販売セルラーゼ、オノズカ、R−10)とアスペルギル
ス属セルラーゼ酵素剤(ナカセ生化学製造販売)の、そ
れぞれ5二1の混合酵素液12単位を添加し、全量2r
ulとして、45℃で反応させた。
重炭酸ナトリウム1rnlに懸濁させたもの、及び、こ
れに、ポリエチレングリコール6000又はトリレンX
−405各0.1%添加したものを120℃で20分
加熱処理したのち、終濃度0.05Mになるように酢酸
緩衝液を添加し、pHを5.0に調整しあこれに、トリ
コデルマ属セルラーゼ酵素剤(ヤクルト生化学株式会社
販売セルラーゼ、オノズカ、R−10)とアスペルギル
ス属セルラーゼ酵素剤(ナカセ生化学製造販売)の、そ
れぞれ5二1の混合酵素液12単位を添加し、全量2r
ulとして、45℃で反応させた。
糖化終了後、濾過した上澄液について還元糖、可溶性糖
(全糖)及びグルコース量(グルコースオキシダーゼ法
で定量) 督畳を定量した。
(全糖)及びグルコース量(グルコースオキシダーゼ法
で定量) 督畳を定量した。
得られた結果を第4表に示す。表から明らかなように、
ポリエチレングリコール6000又はトリトン405の
存在下で反応を行うことにより、10〜25%糖の収量
が増加した。
ポリエチレングリコール6000又はトリトン405の
存在下で反応を行うことにより、10〜25%糖の収量
が増加した。
表から明らかなように、生成した還元糖の約75はグル
コースであった。
コースであった。
実施例 5
バガス(約0.5 m/m ) 50T?を、1%重炭
酸ナトリウムg、ITILlに入れ、次いでトリトンX
−100を、第5表に示す通り、0.01 % 、 0
.025%、0.05%、0.1%と0.2%になるよ
うに加え、よく浸透させた後、120℃で1o分間加熱
処理**した後、実施例1と同様にして糖化した。
酸ナトリウムg、ITILlに入れ、次いでトリトンX
−100を、第5表に示す通り、0.01 % 、 0
.025%、0.05%、0.1%と0.2%になるよ
うに加え、よく浸透させた後、120℃で1o分間加熱
処理**した後、実施例1と同様にして糖化した。
得られた結果を第5表に示す。
トリトンX −100の最適添加濃度は0.05〜0.
1%にあり、無添加の場合に比べ、還元糖、可溶性糖共
に約40%増加した。
1%にあり、無添加の場合に比べ、還元糖、可溶性糖共
に約40%増加した。
実施例 6
バガス各50m9又は新聞紙粉末各50m9に、0、2
M酢酸緩衝液0.5111,1%トリトンX−405
またはポリエチレングリコール2000各0.2rrJ
と実施例1で使用したセルラーゼを添加し、全量2TL
lとし、45℃で2日間反応させた。
M酢酸緩衝液0.5111,1%トリトンX−405
またはポリエチレングリコール2000各0.2rrJ
と実施例1で使用したセルラーゼを添加し、全量2TL
lとし、45℃で2日間反応させた。
得られた結果を第6表に示す。
表から明らかなように、トリトンX−405、ポリエチ
レングリコールはいずれも有効であった。
レングリコールはいずれも有効であった。
Claims (1)
- 1 セルロース含有物をセルラーゼで糖化するに際し、
ポリエチレングリコール又はその誘導体の存在下で反応
することを特徴とするセルロース含有物の糖化法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19986281A JPS5858078B2 (ja) | 1981-12-11 | 1981-12-11 | セルロ−スの糖化法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19986281A JPS5858078B2 (ja) | 1981-12-11 | 1981-12-11 | セルロ−スの糖化法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58101697A JPS58101697A (ja) | 1983-06-16 |
| JPS5858078B2 true JPS5858078B2 (ja) | 1983-12-23 |
Family
ID=16414880
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP19986281A Expired JPS5858078B2 (ja) | 1981-12-11 | 1981-12-11 | セルロ−スの糖化法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5858078B2 (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6024867A (ja) * | 1983-07-22 | 1985-02-07 | 青木 隆朗 | ゲ−トボ−ル用マツト |
| JPS6185263U (ja) * | 1984-11-09 | 1986-06-04 | ||
| WO2018070478A1 (ja) | 2016-10-14 | 2018-04-19 | 日産化学工業株式会社 | 糖化反応液、糖化酵素組成物、糖の製造方法及びエタノールの製造方法 |
-
1981
- 1981-12-11 JP JP19986281A patent/JPS5858078B2/ja not_active Expired
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6024867A (ja) * | 1983-07-22 | 1985-02-07 | 青木 隆朗 | ゲ−トボ−ル用マツト |
| JPS6185263U (ja) * | 1984-11-09 | 1986-06-04 | ||
| WO2018070478A1 (ja) | 2016-10-14 | 2018-04-19 | 日産化学工業株式会社 | 糖化反応液、糖化酵素組成物、糖の製造方法及びエタノールの製造方法 |
| JPWO2018070478A1 (ja) * | 2016-10-14 | 2018-10-11 | 日産化学株式会社 | 糖化反応液、糖化酵素組成物、糖の製造方法及びエタノールの製造方法 |
| JP2020072682A (ja) * | 2016-10-14 | 2020-05-14 | 日産化学株式会社 | 糖化反応液、糖化酵素組成物、糖の製造方法及びエタノールの製造方法 |
| US11359220B2 (en) | 2016-10-14 | 2022-06-14 | Nissan Chemical Industries, Ltd. | Saccharification reaction mixture, saccharification enzyme composition, sugar production method, and ethanol production method |
| US11959115B2 (en) | 2016-10-14 | 2024-04-16 | Nissan Chemical Corporation | Saccharification reaction mixture, saccharification enzyme composition, sugar production method, and ethanol production method |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS58101697A (ja) | 1983-06-16 |
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