JPS5886087A - 新抗生物質sf−2132およびその製造法 - Google Patents
新抗生物質sf−2132およびその製造法Info
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- JPS5886087A JPS5886087A JP56184643A JP18464381A JPS5886087A JP S5886087 A JPS5886087 A JP S5886087A JP 56184643 A JP56184643 A JP 56184643A JP 18464381 A JP18464381 A JP 18464381A JP S5886087 A JPS5886087 A JP S5886087A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- water
- antibiotic
- substance
- manufactured
- acetic acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
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-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は新抗生物質及びその製造法に関するものであり
、さらに詳しくは抗生物質5F−2132及びノカルデ
ィオプシス(Nocar−diopsis)属に属する
5F−2132物質生産菌を培地に培養し、得られた培
養物から抗生物質5F−2132を採取することを特徴
とする新抗生物質5F−2132の製造法に関するもの
である。
、さらに詳しくは抗生物質5F−2132及びノカルデ
ィオプシス(Nocar−diopsis)属に属する
5F−2132物質生産菌を培地に培養し、得られた培
養物から抗生物質5F−2132を採取することを特徴
とする新抗生物質5F−2132の製造法に関するもの
である。
本発明者らは、ある種の菌株の培養物中に細菌に対して
抗菌作用を示す物質が生産されていることを見出し、そ
の有効物質を培養物から純粋に単離し、その性状を調べ
た結果、既知の物質とは興なる新抗生物質であることを
確認し、この有効物質を抗生物質5F−2132と命名
した。
抗菌作用を示す物質が生産されていることを見出し、そ
の有効物質を培養物から純粋に単離し、その性状を調べ
た結果、既知の物質とは興なる新抗生物質であることを
確認し、この有効物質を抗生物質5F−2132と命名
した。
本発明の抗生物質5F−2132生産菌としては、その
培養物中に、採取するに充分な量の抗生物質5F−21
32を生産する能力を有するものであれば、いかなるも
のであってもよいが、このような菌株の一例としては、
本発明者らにより、奈良県橿原市の土壌より新たに分離
された5F−2132株がある。該菌株の菌学的性状は
下記の通りである。
培養物中に、採取するに充分な量の抗生物質5F−21
32を生産する能力を有するものであれば、いかなるも
のであってもよいが、このような菌株の一例としては、
本発明者らにより、奈良県橿原市の土壌より新たに分離
された5F−2132株がある。該菌株の菌学的性状は
下記の通りである。
なお、観察は主に5HIRLING、E、B。
とGOTTLIEB、D、により
International Journalof
SystmatLc BacLeriol。
SystmatLc BacLeriol。
16、 313−340 (1966)に記載されてい
る方法に従って、行った。
る方法に従って、行った。
■ 形態
基体菌糸は直径0.4〜0.6ミクロンで寒天培地にお
いては単純分枝して波状に伸長するが、液体培地におい
ては培養に従って不規則に分断する。
いては単純分枝して波状に伸長するが、液体培地におい
ては培養に従って不規則に分断する。
気菌糸は直径0.4〜0.6ミクロンで豊富に形成され
、単純分枝し菌糸全体が胞子の連鎖となる。胞子は通常
10胞子以上連鎖する。胞子は卵型〜円筒型で大きさは
1.0〜1.5X0.4〜0.6ミクロン、表面は平滑
で運動性は認められなかった。その他胞子のう、鞭毛胞
子、菌核等の特殊構造は認められなかった。
、単純分枝し菌糸全体が胞子の連鎖となる。胞子は通常
10胞子以上連鎖する。胞子は卵型〜円筒型で大きさは
1.0〜1.5X0.4〜0.6ミクロン、表面は平滑
で運動性は認められなかった。その他胞子のう、鞭毛胞
子、菌核等の特殊構造は認められなかった。
■ 各種培地上の生育状態
5F1132株の各種培地上の生育状態は次表に示す通
りである。色の記載について〔〕内に示す標準はコンテ
ナー・コーポレーシ霞ン・オプ・アメリカ (Cont
ainer Corporationgy、of
America)社製の[カラー・ハーモニー・?二、
フル(Color HarmonyManual)J
に記載のものを用いな。観察は28℃で、14〜21日
培養後に行った。
りである。色の記載について〔〕内に示す標準はコンテ
ナー・コーポレーシ霞ン・オプ・アメリカ (Cont
ainer Corporationgy、of
America)社製の[カラー・ハーモニー・?二、
フル(Color HarmonyManual)J
に記載のものを用いな。観察は28℃で、14〜21日
培養後に行った。
■ 生理的性質
il+ 生育温度範囲:スターチ寒天において15〜
40℃の温度範囲で生育し、25〜37℃で良好に生育
する。
40℃の温度範囲で生育し、25〜37℃で良好に生育
する。
(2)ゼラチンの液化:陽性
(3) スターチの加水分解:陰性
(4) 硝酸塩の還元:陰性
(5) 脱脂乳の凝固:陽性
脱脂乳のペプトン化:陽性
(6) メラニン様色素の生成:陽性(7)耐塩性ニ
ア、0%ではわずかに生育するが1080%以上では生
育しない。
ア、0%ではわずかに生育するが1080%以上では生
育しない。
■ 炭素源の利用性
炭素源 生育
D−グルコース ++
D−キシロース ++
D−フラクトース ++
D−マンニトール +
L−アラビノース ++
L−ラムノース +
i−イノシトール +
シュクロース ++
ラフィノース +
無添加 士
十十 良好1こ生育(利用性二十)
十 弱い生育(利用性ニー)
用いた基本培地
酵母エキス(Difco社製)5g
炭酸カルシウム 1g
寒天(Difco社製)15g
蒸留水 10100O!■ 細胞壁
組成 全細胞加水分解物中のジアミノピメリン酸は主にメン型
で、キシロース、マジニロース、アラビノースは認めら
れなかった。
組成 全細胞加水分解物中のジアミノピメリン酸は主にメン型
で、キシロース、マジニロース、アラビノースは認めら
れなかった。
以上の諸性状を総合し、基体菌糸が分断し、気菌糸全体
が胞子の連鎖を形成する形態的な特徴を有し、かつ全細
胞加水分解物中にメン型のジアミノヒメリン酸を持ち、
キシロース、マジ二ロース。
が胞子の連鎖を形成する形態的な特徴を有し、かつ全細
胞加水分解物中にメン型のジアミノヒメリン酸を持ち、
キシロース、マジ二ロース。
アラビノースを持たないものは放線菌の中でノカルディ
オプシス(Nocardiopsis)属に属する。(
InternationalJournal of
SystematicBac ter i o Io
gy、 26. 487〜493.1976)従って、
本発明者等は5F−2132株をノカルディオプシス・
エスピー・5F−2132(Nocardiopsis
sp、5F−2132)と命名した。5F−213
2株は、微生物工業技術研究所に機工研菌寄第6131
号として受託されている。
オプシス(Nocardiopsis)属に属する。(
InternationalJournal of
SystematicBac ter i o Io
gy、 26. 487〜493.1976)従って、
本発明者等は5F−2132株をノカルディオプシス・
エスピー・5F−2132(Nocardiopsis
sp、5F−2132)と命名した。5F−213
2株は、微生物工業技術研究所に機工研菌寄第6131
号として受託されている。
本発明は、上記の知見に基いて完成されたもので、ノカ
ルディオプシス属に属する抗生物質SF−2132生産
菌を培養し、その培養物より抗生物質5F−2132を
採取することを特徴とする抗生物質5F−2132の製
造法並びに耐抗生物質5F−2132である。
ルディオプシス属に属する抗生物質SF−2132生産
菌を培養し、その培養物より抗生物質5F−2132を
採取することを特徴とする抗生物質5F−2132の製
造法並びに耐抗生物質5F−2132である。
ノカルディオプシス・エスピー・5F2132Nは他の
放線菌の場合にみられるように、その性状が変化しやす
く、例えば、紫外線、エックス線、放射線、薬品等を用
いる人工的変興牟段で変興しうるものであり、このよう
な変異株であっても抗生物質5F−2132の生産能を
有するノカルディオプシス属の菌はすべて本発明の方法
に使用することができる。
放線菌の場合にみられるように、その性状が変化しやす
く、例えば、紫外線、エックス線、放射線、薬品等を用
いる人工的変興牟段で変興しうるものであり、このよう
な変異株であっても抗生物質5F−2132の生産能を
有するノカルディオプシス属の菌はすべて本発明の方法
に使用することができる。
本発明の方法では、5F−2132株を通常、微生物が
利用しうる栄養物を含有する培地で培養する。
利用しうる栄養物を含有する培地で培養する。
例えば、炭素源としてグルコース、シュクロース、デキ
ストリン、殿粉、水あめ、糖みっ、大豆油等を使用しう
み。
ストリン、殿粉、水あめ、糖みっ、大豆油等を使用しう
み。
又窒素源として大豆粉、小麦胚芽、ペプトン。
肉エキス、酵母エキス、コーンステイープリカー。
硝酸ソーダ、硫酸アンモニウム等を使用しうる。
ソノ他、必要に応じて炭酸カルシウム、塩化カリウム、
燐酸塩等の無機塩類を添加するほか菌の発育を助け、抗
生物質5F−2132(以後、5F−2132物質と称
する)の生産を促進するごとき有機物及び無機物を適当
に添加することができる。
燐酸塩等の無機塩類を添加するほか菌の発育を助け、抗
生物質5F−2132(以後、5F−2132物質と称
する)の生産を促進するごとき有機物及び無機物を適当
に添加することができる。
培養法としては、一般抗生物質生産の方法と同じく、好
気的条件下での培養法であれば、いがなる方法を適用し
てもよいが、P4部培養法が量も適している。培養に適
した温度は20〜35℃であるが、多くの場合部〜羽℃
付近で培養を行うのが好ましい。5F−2132物質の
生産は振盪培養法、タンク培養法共に2〜7日で蓄積が
最高に達する。
気的条件下での培養法であれば、いがなる方法を適用し
てもよいが、P4部培養法が量も適している。培養に適
した温度は20〜35℃であるが、多くの場合部〜羽℃
付近で培養を行うのが好ましい。5F−2132物質の
生産は振盪培養法、タンク培養法共に2〜7日で蓄積が
最高に達する。
5F−2132物質の検定に当っては、スタヒロコソカ
ス・アウレウス(Staphylococcusaur
eus)209pを検定菌とするペーノマーディスク・
平板法を用いる。この検定法では、5F−2132物質
が500mc g/m1〜62.5mc g/mlの濃
度範囲ではその対数と阻止円径との間は直線関係を示し
、それぞれ21鶴〜12鶴の阻止円を与える。
ス・アウレウス(Staphylococcusaur
eus)209pを検定菌とするペーノマーディスク・
平板法を用いる。この検定法では、5F−2132物質
が500mc g/m1〜62.5mc g/mlの濃
度範囲ではその対数と阻止円径との間は直線関係を示し
、それぞれ21鶴〜12鶴の阻止円を与える。
5F−2132物質は、後記する理化学性状を有するの
で、その性状に従って抽出、精製することが可能である
が、以下の方法により効率的に抽出、精製できる。すな
わち、有効成分は主として培養濾液に含まれており、こ
れをダイヤイオンHP−20(三菱化成製)等の多孔性
吸着樹脂に吸着させ、アセトン、メタノール等の水に可
溶性である溶剤と水との混合溶剤で有効成分を溶出する
。この溶出液を減圧濃縮し、これをさらにCM−セファ
デックス(ファルマシア製)、ダイヤイオンHP−20
のカラムクロマトグラフィー等を適宜組み合わせること
によって5F−2132物質を白色無定形粉末として単
離することができる。5F−2132物質は塩基性物質
であるので、遊離塩基あるいは酸付加塩として単離でき
る。5F−2132物質の酸付加塩の例としては、塩酸
、硫酸、硝酸、リン酸、臭化水素酸等のごとき無機酸と
の塩、並びに酢酸。
で、その性状に従って抽出、精製することが可能である
が、以下の方法により効率的に抽出、精製できる。すな
わち、有効成分は主として培養濾液に含まれており、こ
れをダイヤイオンHP−20(三菱化成製)等の多孔性
吸着樹脂に吸着させ、アセトン、メタノール等の水に可
溶性である溶剤と水との混合溶剤で有効成分を溶出する
。この溶出液を減圧濃縮し、これをさらにCM−セファ
デックス(ファルマシア製)、ダイヤイオンHP−20
のカラムクロマトグラフィー等を適宜組み合わせること
によって5F−2132物質を白色無定形粉末として単
離することができる。5F−2132物質は塩基性物質
であるので、遊離塩基あるいは酸付加塩として単離でき
る。5F−2132物質の酸付加塩の例としては、塩酸
、硫酸、硝酸、リン酸、臭化水素酸等のごとき無機酸と
の塩、並びに酢酸。
クエン酸、酒石酸、安息香酸、アスコルビン酸等のごと
き有機酸との塩が可能であるが、実用として容認される
塩が好ましい。
き有機酸との塩が可能であるが、実用として容認される
塩が好ましい。
このようにして得られる抗生物質5F−2132の理化
学性状は次の通りである。
学性状は次の通りである。
(11物質の色と形状:白色粉末
(2)融点:180℃から発泡分解が始まる(3)比旋
光度: 〔α〕グ =−44° (C1,水)(4)分
子量: 400以上1000以下(ゲル濾過法による) (5) 元素分析: 実測値(%) i C49,
00,H7,21゜N21.09 塩酸塩としての実
測値(%)C42,96,H6,93,N20.1.
(ff19.76上記の元素の他酸素元素(測定せず)
は含まれるが、その他の元素はない。
光度: 〔α〕グ =−44° (C1,水)(4)分
子量: 400以上1000以下(ゲル濾過法による) (5) 元素分析: 実測値(%) i C49,
00,H7,21゜N21.09 塩酸塩としての実
測値(%)C42,96,H6,93,N20.1.
(ff19.76上記の元素の他酸素元素(測定せず)
は含まれるが、その他の元素はない。
(6) 紫外部吸収スペクトル:第1図に示す通りで
ある。2g (E :F、) = 227 n m (
232) 。
ある。2g (E :F、) = 227 n m (
232) 。
λ’By”(E :F、) = 227 n m (2
44) 。
44) 。
LINNmllN
λttrx (E:五) = 230Im □l)
(198)。
(198)。
(7)赤外部吸収スペクトル:第2図に示す通り335
0、1700 (肩) 、 1640.1530.14
60.1410. 1340゜1240、11?0.1
050.1010. 960. 900.及び860
cm−1に吸収を示す。
0、1700 (肩) 、 1640.1530.14
60.1410. 1340゜1240、11?0.1
050.1010. 960. 900.及び860
cm−1に吸収を示す。
(8)核磁気共鳴スペクトル:第3図に示す通りである
。
。
(9) 薄層クロマトグラフィー:下記に示す通りη
ある。
ある。
シリカゲル60F−254(メルク社製)n−ブタノー
ル−酢酸−水(2: 1 : 1) Rf O,14
n−プロパノ−ルーピリジン−酢酸−水(15:10:
3 :12) Rf O,59クロロホルム−メタ
ノール−4%アンモニア(2:111 上層)Rfo
、35 セルローズF254(メルク社製) n−ブタノール−酢酸−水(2: 1 : 1) Rf
O,64n−プロパノ−ルーピリジン−酢酸−水(
15:10: 3 :12) Rf O,710I
高圧濾紙電気泳動:高圧濾紙電気泳動装置(サーパン
ト・インスッルメント社製、高圧電源HV5000A、
泳動槽−r−デルLT48A)を用い、東洋濾紙Na5
1(東洋濾紙社製)上で下記の緩衝液を用い、定電圧3
500Vで15分泳動を実施するとき、本物質は陰極に
移動し、アラニンの移動度を1とするとき本物質の移動
度は2.5である。
ル−酢酸−水(2: 1 : 1) Rf O,14
n−プロパノ−ルーピリジン−酢酸−水(15:10:
3 :12) Rf O,59クロロホルム−メタ
ノール−4%アンモニア(2:111 上層)Rfo
、35 セルローズF254(メルク社製) n−ブタノール−酢酸−水(2: 1 : 1) Rf
O,64n−プロパノ−ルーピリジン−酢酸−水(
15:10: 3 :12) Rf O,710I
高圧濾紙電気泳動:高圧濾紙電気泳動装置(サーパン
ト・インスッルメント社製、高圧電源HV5000A、
泳動槽−r−デルLT48A)を用い、東洋濾紙Na5
1(東洋濾紙社製)上で下記の緩衝液を用い、定電圧3
500Vで15分泳動を実施するとき、本物質は陰極に
移動し、アラニンの移動度を1とするとき本物質の移動
度は2.5である。
緩衝液:ピリジン2QQm#と酢酸8mlを全容1I3
Itになるように精製水に溶解したもので、この時の−
は6.4であった。
Itになるように精製水に溶解したもので、この時の−
は6.4であった。
(11)アミノ酸組成二本物質を6N Hαで、10
5℃に於て18時間分解f′るとき、ロイシン、セリン
、α、β−ジアミノ酪酸及びβ−アルギニンがそれぞれ
等モル生成する。
5℃に於て18時間分解f′るとき、ロイシン、セリン
、α、β−ジアミノ酪酸及びβ−アルギニンがそれぞれ
等モル生成する。
(12)呈色反応:陽性;坂口、ニンヒドリン及びレミ
ニー。
ニー。
(13)溶解性:水に易溶、低級アルコール類に難溶、
クロロホルム、n−ヘキサンに不溶。
クロロホルム、n−ヘキサンに不溶。
5F1132物質の抗菌スペクトルは次表に示す通りで
ある。またマウスを用いた急性毒性試験の結果、200
mg/kg静脈内投与で全鋼生存した。
ある。またマウスを用いた急性毒性試験の結果、200
mg/kg静脈内投与で全鋼生存した。
表S F−2132物質の抗菌スペクトル*β−ラクタ
ム抗生物質高感受性株 (方法) a :アガーごダイリューシ日ン法すニゲロ
ス・グイリューシ日ン法 (培地)l:ハートインヒュージーン寒天培地2ニゲル
コース、どペプトン培地。
ム抗生物質高感受性株 (方法) a :アガーごダイリューシ日ン法すニゲロ
ス・グイリューシ日ン法 (培地)l:ハートインヒュージーン寒天培地2ニゲル
コース、どペプトン培地。
3:ハートインヒュージ日ンプロス培地4:グリセロー
ル・ブイヨン培地 、前記した5F−2132物質の理化学性状、および生
物学的性状と一致する既知抗生物質はなく、本発明の抗
生物質5F−2132物質は新規物質と認め″られた。
ル・ブイヨン培地 、前記した5F−2132物質の理化学性状、および生
物学的性状と一致する既知抗生物質はなく、本発明の抗
生物質5F−2132物質は新規物質と認め″られた。
5F−2132物質は抗菌活性以外に感染防御作用を有
し、以下に実験結果を示す。
し、以下に実験結果を示す。
方法
供試動物;JCL−ICR雄性マウス、4週令。
平均体重21.0 g 、 1群6匹供ge株;シェ
ードモナス・エルギノーザ(Pseudomonas
aeruginosa)E2接種菌液;上記菌株をハ
ート・インヒュージ日ン寒天(Dlf’co社製)平板
に塗抹し、37 ”c 。
ードモナス・エルギノーザ(Pseudomonas
aeruginosa)E2接種菌液;上記菌株をハ
ート・インヒュージ日ン寒天(Dlf’co社製)平板
に塗抹し、37 ”c 。
20時間培養後、該菌を集菌し生理食塩水にて所要菌濃
度に希釈し、等量の5%ムチン(Difc。
度に希釈し、等量の5%ムチン(Difc。
社製)溶液と混合し接種菌液とした。尚接種容量は0.
5mJ/マウスとした。
5mJ/マウスとした。
試験方法;実施例2で純品として得られたSF−213
2物質を滅菌蒸留水に一定濃度に溶解し、そ(7)0.
2mj!をマウス大腿部皮下に1回投与し、5日後に上
記接種菌液を腹腔内に接種し、4日間マウスの生存を観
察した。
2物質を滅菌蒸留水に一定濃度に溶解し、そ(7)0.
2mj!をマウス大腿部皮下に1回投与し、5日後に上
記接種菌液を腹腔内に接種し、4日間マウスの生存を観
察した。
結果を下表に示す通りであった。
表(値は1群6匹中の生存数を示す)
□
対照は5F−2132の代りに蒸留水のみを投与した。
以上の如<5F−2132物質は明らかに感染防御活性
を示した。
を示した。
本発明の抗菌性並びに感染防御性を有するSF−213
2物質は注射用蒸留水、生理食塩水等に懸濁して投与す
る。投与形態は皮下注射、静脈、筋肉内注射等の非経口
投与法、又はカプセル等の経口投与法により投与される
。投与量は、動物試験の結果及び種々の状況を勘案して
、総投与量が一定量を越えない範囲で連続的又は間けつ
的に投与する。しかし、その投与量1は、投与方法、患
者の状況、例えば年令2体重、性別、感受性、投与時間
。
2物質は注射用蒸留水、生理食塩水等に懸濁して投与す
る。投与形態は皮下注射、静脈、筋肉内注射等の非経口
投与法、又はカプセル等の経口投与法により投与される
。投与量は、動物試験の結果及び種々の状況を勘案して
、総投与量が一定量を越えない範囲で連続的又は間けつ
的に投与する。しかし、その投与量1は、投与方法、患
者の状況、例えば年令2体重、性別、感受性、投与時間
。
併用する薬剤、患者又はその病気の程度に応じて適宜に
変えて投与することは勿論であり、一定の条件の下にお
ける適量と投与回数は上記の指針を基として専門家の適
量決定試験によって決定される。
変えて投与することは勿論であり、一定の条件の下にお
ける適量と投与回数は上記の指針を基として専門家の適
量決定試験によって決定される。
しかし、一般には1日200〜3000mgの範囲、例
えば、500mgを1〜5回に分けて投与する。
えば、500mgを1〜5回に分けて投与する。
以下に5F−2132物質の製造法の実施中を示すが、
ここに例示しない多くの変形、修飾手段を用い得ること
はもちろんである。
ここに例示しない多くの変形、修飾手段を用い得ること
はもちろんである。
実施例1
(培養)
種菌用培地(グルコース1.0%、殿粉1.0%。
ポリペプトン0.5%、肉エキズ0.2%、酵母エキス
0.3%、大豆粉0.2%、炭酸カルシウム0.2%。
0.3%、大豆粉0.2%、炭酸カルシウム0.2%。
pH7,0) 20m 12を100mj?容三角フラ
スコニ分注滅劃り斜面培養から得たノカルディオプシス
・エスピー・5F−2132株(機工研菌寄第6131
号)の菌体を3〜4白金耳接種し、28℃で2日間振盪
培養する。
スコニ分注滅劃り斜面培養から得たノカルディオプシス
・エスピー・5F−2132株(機工研菌寄第6131
号)の菌体を3〜4白金耳接種し、28℃で2日間振盪
培養する。
コノ種菌5 m /を上記培地80mj!を500 m
1N容三角フラスコに分注滅菌したものに接種し、2
8℃で24時間振盪培養する。この種培養80mj!を
さらに上記培地eoomItを51容三角フラスコに分
注滅菌したもの2本に40m1ずつ接種し、2B’cで
20時間振盪培養する。
1N容三角フラスコに分注滅菌したものに接種し、2
8℃で24時間振盪培養する。この種培養80mj!を
さらに上記培地eoomItを51容三角フラスコに分
注滅菌したもの2本に40m1ずつ接種し、2B’cで
20時間振盪培養する。
得られた種培養600mJを20Jの生産培地を含む3
01容ジャーファーメンタ−に接種し、28℃において
通気攪拌(通気20J/min、攪拌350rpm)し
て65時間培養した(ジャーファーメンタ7−2基使用
)。
01容ジャーファーメンタ−に接種し、28℃において
通気攪拌(通気20J/min、攪拌350rpm)し
て65時間培養した(ジャーファーメンタ7−2基使用
)。
生産培地の組成は下記の通りである。
水あめ 4.0%炭酸カル
シウム 0.2%大豆油
0.3%シリコンKM68−2F
0.01%(消泡剤、信越化学製) 大豆粉 2.0%サングレ
イン(サントリー製)0.5%ファーマメディア
1.0%(Traders Oi l
M、i l l製)塩化ニッケル
0.0001%塩化コバルト
0.000f%硫酸第1鉄 0
.001%(pH7,Q滅菌前) 培養終了後、濾過助剤を加え、6N塩酸でpH5に調整
後濾過し、濾液24I!、を得た。
シウム 0.2%大豆油
0.3%シリコンKM68−2F
0.01%(消泡剤、信越化学製) 大豆粉 2.0%サングレ
イン(サントリー製)0.5%ファーマメディア
1.0%(Traders Oi l
M、i l l製)塩化ニッケル
0.0001%塩化コバルト
0.000f%硫酸第1鉄 0
.001%(pH7,Q滅菌前) 培養終了後、濾過助剤を加え、6N塩酸でpH5に調整
後濾過し、濾液24I!、を得た。
実施例2
(抽出・精製)
実施例1で得られた培養濾液24ItをダイヤイオンH
P−20(三菱化成製)のカラム2.51に通し、有効
成分を吸着させた。このカラムを水3Itで洗った後、
団%アセトン水で有効成分を溶出した。
P−20(三菱化成製)のカラム2.51に通し、有効
成分を吸着させた。このカラムを水3Itで洗った後、
団%アセトン水で有効成分を溶出した。
活性区分を合併しく31)、減圧下で濃縮して、アセト
ンを除去し、得ちれた水溶液的21をCM−セファデッ
クスC−25(N、’型)〔ファルマシァ製〕のカラム
150m#に通し、有効成分を吸着させた。このカラム
を水750m1次いで0.05Mの塩化ナトリウム溶液
1500ml!、で洗った後、0.2Mの塩化ナトリウ
ム溶液で溶出し、100mjlずつ分取した。
ンを除去し、得ちれた水溶液的21をCM−セファデッ
クスC−25(N、’型)〔ファルマシァ製〕のカラム
150m#に通し、有効成分を吸着させた。このカラム
を水750m1次いで0.05Mの塩化ナトリウム溶液
1500ml!、で洗った後、0.2Mの塩化ナトリウ
ム溶液で溶出し、100mjlずつ分取した。
活性区分(フラクシ日ン隘3〜フラクシ剥ン磁15)を
合併しく1300mjり、これをダイヤイオンHP−2
0のカラム(250m、’)を通して、有効成分を樹脂
に吸着させた。
合併しく1300mjり、これをダイヤイオンHP−2
0のカラム(250m、’)を通して、有効成分を樹脂
に吸着させた。
カラムを水\150mJで洗った後、6%アセトン水で
溶出した。活性1区分を減圧下に濃縮乾固し、−3F−
2132物質の粗粉末、(淡褐色> 1.76g (純
度:約60%)を得た。
溶出した。活性1区分を減圧下に濃縮乾固し、−3F−
2132物質の粗粉末、(淡褐色> 1.76g (純
度:約60%)を得た。
5F−2132物質の純品を得るため、次に上記粗粉末
のうち、800mgを少量の水に溶解し、これをCM−
セラファデックスC−25(Nt型)のカラム(60m
Iりにのせる。ついで水300mJ、0.05Mの塩化
ナトリウム溶液600mA!でカラムを洗った後、0.
2Mの塩化ナトリウム溶液で溶出し、15gずつ分取し
た。フラクシ日ン磁20からフラクシ日ン磁(資)に有
効成分の大部分がまとまるので、この部分を合併し、こ
れをダイヤイオンHP −20のカラム(150m#)
に通し、有効成分を吸着させる。水600mI!、次い
で25%アセトン水] 5Q m j!で展開し15g
ずつ分取する。フラクシ日ン1kllからフラクション
階24(水展開区分)を減圧下に濃縮乾固し、5F−2
132物質の純品を塩酸塩として115mg得た。また
フラクシ日ン隘41からフラクシ日ン11h45(25
%アセトン水展開区分)を減圧下に濃縮乾固し、5F−
2132物質の純品を遊離塩基として247mg得た。
のうち、800mgを少量の水に溶解し、これをCM−
セラファデックスC−25(Nt型)のカラム(60m
Iりにのせる。ついで水300mJ、0.05Mの塩化
ナトリウム溶液600mA!でカラムを洗った後、0.
2Mの塩化ナトリウム溶液で溶出し、15gずつ分取し
た。フラクシ日ン磁20からフラクシ日ン磁(資)に有
効成分の大部分がまとまるので、この部分を合併し、こ
れをダイヤイオンHP −20のカラム(150m#)
に通し、有効成分を吸着させる。水600mI!、次い
で25%アセトン水] 5Q m j!で展開し15g
ずつ分取する。フラクシ日ン1kllからフラクション
階24(水展開区分)を減圧下に濃縮乾固し、5F−2
132物質の純品を塩酸塩として115mg得た。また
フラクシ日ン隘41からフラクシ日ン11h45(25
%アセトン水展開区分)を減圧下に濃縮乾固し、5F−
2132物質の純品を遊離塩基として247mg得た。
第1図は抗生物質5F−2132の水溶液(実線)。
0、IN塩酸(破線)及び0.IN水酸化ナトリウム溶
液(一点破線)中の紫外部吸収スペクトル、第2図は同
KBr錠での赤外部吸収スペクトル、第■ 3図は同D20中、TMSを外部標準としたプロトン核
磁気共鳴スペクトルを示す。
液(一点破線)中の紫外部吸収スペクトル、第2図は同
KBr錠での赤外部吸収スペクトル、第■ 3図は同D20中、TMSを外部標準としたプロトン核
磁気共鳴スペクトルを示す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1、遊離塩基として次の特性を有する水溶性塩基性新抗
生物質5F−2132およびその塩(11物質の色と形
状:白色粉末 (2)融点:180℃から発泡分解が始まる(3)比旋
光度: 〔α):’ =−44° (CI、水)(4
)分子量:400以上1000以下(ゲル濾過法による
) (5)元素分析:実測値(%) i C49,00,
H7,21N21.09 塩酸塩としての実測値(%
)C42,96,H6,93,N20.1.α9.76
上記の元素の他酸素元素(測定せず)は含まれるが、そ
の他の元素はない。 (6)紫外部吸収スペクトル:第1図に示す通りである
。λ”: (E :凡) −227n m (232)
。 λ居(Ei?、) = 227 n m (244)
。 λ’;”’(E :t’m> = 230 n m (
肩)(198)。 (7)赤外部吸収スペクトル:第2図に示す通り335
0、1700 (屑) 、 1640.1530.14
60.1410.1340゜1240、1170.10
50.1010. 960. 900.及び860ロー
1に吸収を示す。 (8)核磁気共鳴スペクトル:第3図に示す通りである
。。 (9) 薄層クロマトグラフィー:下記に示す通りで
ある。 シリカゲル60F−254(メルク社製)n−ブタノー
ル−酢酸−水(2: 1 : 1) Rf O,14
n−プロパノ−ルーピリジン−酢酸−水(15:10:
3 :12) Rf O,59クロロホルム−メタ
ノール−4%アンモニア(2: 1 : 1 上層)
RfO,35セルローズF 254 (メルク社製)n
−ブタノール−酢酸−水(2: 1 : 1) Rf
O,64n−プロパノ−ルーピリジン−酢酸−水(1
5:10: 3712) Rf O,71Ql 高
圧濾紙電気泳動:高圧濾紙電気泳動装置(サーバント・
インスッルメント社製、高圧電源HV500QA、泳動
槽モデルLT48A)を用い、東洋濾紙階51(東洋濾
紙社製)上で下記の緩衝液を用い、定電圧3500Vで
15分泳動を実施するとき、本物質は陰極に移動し、ア
ラニンの移動度を1とするとき本物質の移動度は2.5
である。 緩衝液:ピリジン200mj!と酢酸8mlを全容量3
1になるように精製水に溶解したもので、この時の−は
6.4であった。 (11)アミノ酸組成:本物質を6N Hαで、10
5℃に於て18時間分解するとき、ロイシン。 セリン、α、β−ジアミノMillびβ−アルギニンが
それぞれ等モル生成する。 (12)呈色反応:陽性;坂口、ニンヒドリン及びレミ
ュー。 (13)溶解性:水に5溶、低級アルコール類に難溶、
クロロホルム、n−ヘキサンニ不溶。 2、7カルデイオプシス属に属する抗生物質5F−21
32生産菌を培地中に培養し、培養物に抗生物質5F−
2132を生成蓄積せしめ、これを採取することを特徴
とする新抗生物質5F−2132の製造法。 3、抗生物質5F−2132生産菌がノカルディオプシ
ス・エスピー(Nocardiopsis。 sp、 ) SF 2132である特許請求の範囲第
2項記載の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56184643A JPS5886087A (ja) | 1981-11-17 | 1981-11-17 | 新抗生物質sf−2132およびその製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56184643A JPS5886087A (ja) | 1981-11-17 | 1981-11-17 | 新抗生物質sf−2132およびその製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5886087A true JPS5886087A (ja) | 1983-05-23 |
| JPS6250474B2 JPS6250474B2 (ja) | 1987-10-24 |
Family
ID=16156815
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP56184643A Granted JPS5886087A (ja) | 1981-11-17 | 1981-11-17 | 新抗生物質sf−2132およびその製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5886087A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110172415A (zh) * | 2019-04-23 | 2019-08-27 | 中国极地研究中心 | 一种北极拟诺卡氏菌及其发酵产物优化方法 |
-
1981
- 1981-11-17 JP JP56184643A patent/JPS5886087A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110172415A (zh) * | 2019-04-23 | 2019-08-27 | 中国极地研究中心 | 一种北极拟诺卡氏菌及其发酵产物优化方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6250474B2 (ja) | 1987-10-24 |
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