JPS59148794A - 高純度グルコオリゴ糖の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、グルコース重合度が３乃至１０の範囲から選
ばれる高純度グルコオリゴ糖の製造方法に関する。

近年、グルコース重合度３乃至１０の範囲から選ばれる
グルコオリゴ糖は、試薬、診断薬、医薬などとして注目
され、その需要も急速に高まっている。

グルコオリゴ糖は、澱粉、プルラン、エルシナンなどの
部分加水分解物中に含まれているけれども、これら部分
加水分解物は、通常、重合度３乃至１０の範囲から選ば
れる目的のグルコオリゴ糖だけでなく、他のオリゴ糖を
も多量に含有した糖混合物でちる。従って、目的のグル
コオーリボ糖の純度は低く、このままで、試薬、診断薬
、医薬などの用途に向けることは極めて困難である。

一方、このような糖混合物から、高純度に目的のグルコ
オリゴ糖を採取する方法としては、例えば、有機沈澱剤
による分別沈澱法、活性炭カラムによる選択的吸脱着法
などの精製方法が知られて。

いる。しかしながら、これらの方法で高純度に目的のグ
ルコオリゴ糖を工業的に大量に製造することは極めて困
難である。

本発明者等は、グルコース重合度３乃至１０の範囲から
選ばれる高純度のグルコオリゴ糖を工業的に大量製造す
る方法について鋭意研究した。

その結果、グルコース重合度３乃至１０の範囲から選ば
れる目的のグルコオリゴ糖（以下、目的オリゴ糖という
）の製造に際し、目的オリゴ糖とともにとれよシグルコ
ース重合度が１以上大きい糖類（以下、Ｌ糖という）と
グルコース重合度が１以上率さい糖類（以下、Ｓ糖とい
う））−を含有する糖混合液を、アルカリ金属型または
アルカリ土類金属型強酸性カチオン交換樹脂を充填しだ
カラムに流し、次いで水で溶出し、Ｌ穂高含有画分、Ｌ
糖・目的オリゴ糖高含有画分、目的オリゴ糖高含有画分
、目的オリゴ糖・Ｓ穂高含有画分、Ｓ　＆ｉ高含有画分
の順に分画し、目的オリゴ糖高含有画分を採取すること
により、容易に高純度の目的オリゴ糖が製造でき、工業
的製法として好適であることを見いだし、本発明を完成
した。

また、使用するカチオン交換樹脂としては、目的オリゴ
糖がグルコース重合度３乃至５の範囲から選ばれる場合
には架橋度６％以下のものが、グルコース重合度６乃至
１０の範囲から選ばれる場合には架橋度４％以下のもの
が好適であることを見いだした。

また、目的オリゴ糖を含有する糖混合液をカラムに流す
に際し、既に得られているＬ糖・目的オリゴ糖高含有画
分及び目的オリゴ糖・Ｓ穂高含有画分をともに流すこと
により高純度の目的オリゴ糖を高濃度、高収率で安定し
て製造し得ることを見いたし、本発明を完成した。

本発明に用いる目的オリゴ糖を含有する糖混合液（以下
、原糖液という）は、目的オリゴ糖含量が固形物当り約
１０〜８０ＷイＷ％（以下、特にことわらない限り、含
量％は、固形物当９　ｗ／ｗ％を意味する。）の範囲に
あって、実質的にケトースを含有しない糖液であり、本
発明によって目的オリゴ糖含量９０％以上の高純度の目
的オリゴ糖が高収率で採取できるものであればよい。

目的オリゴ糖がマルトトリオースの場合には、例えば、
澱粉、プルラン、エルシナンなどに酸まだは酵素を作用
させて得られるマルトトリオースを含有する部分加水分
解物が、マルトテトラオースの場合には、例えば、澱粉
にエキノマルトテトラオヒトｏラーセ（ＥＣ３，２，１
，６０）を作用サセて得られるマルトテトラオースを含
有する部分加水分解物が、マルトペンタオースの場合に
は、例えば、澱粉にバチルス属に属する細菌由来のｆＸ
　−アミラーゼ（ｇＣ３，２，１，１’）を作用させて
得られるマルトペンタオースを含有する部分ａＯ水分解
物が、マルトヘキサオースの場合には、例えば、澱粉、
α−シクロデキストリンに酸または酵素を作用させて得
られるマルトヘキサオースを含有する部分加水分解物が
、マルトヘプタオースの場合には、例えば、澱粉、β−
シクロデキストリンに酸まだは酵素を作用させて得られ
るマルトヘプタオースを含有する部分加水分解物が、ま
ン”Ａはα−シクロデキストリンとグルコースとの混合
物にシクロデキストリングルカノトランスフェラーゼ（
ＥＣ２，，４，１，１９）を作用させて得られるマルト
ヘプタオースを含有する糖混合物が、マルトオクタオー
スの場合には、例えば、澱粉、γ−ツクロデキスｌ−’
Ｊンに酸または酵素を作用させて得られるマルトオクタ
オースを含有する部分加水分解物が、またはα−シクロ
デキストリンとマルトースとの混合物若しくはβ−シク
ロデキストリンとグルコースとの混合物にンクロデキス
トリングルカノトランスフェラーゼを作用させて得られ
るマルトオクタオースを含有する糖混合物が、マルトノ
ナオースの場合には、例えば、β−シクロデキストリン
とマルトースとの混合物若し七はｒ−・／クロデキスト
リフとグルコースとの混合物にシクロデキストリングル
カノトランスフェラーゼを作用させて得られるマルトノ
ナオースを含有する糖混合物が、マルトデカオースの場
合には、例えば、β−シクロテキストリンとマルトトリ
オースとの混合物若しくはγ−ンクロデキストリンとマ
ルトースとの混合物に７クロデキスト、リングルカノト
ランスフェラーゼを作用させて得られるマルトデカオー
スを含有する糖混合物が用いられる。

また、目的オリゴ糖が・分校糖、例えば、３−０−α−
マルトトリオシルマルトトリオースの場合には、プルラ
ンにプルラナーゼ（ｇｃ　　３．２．１．４１）を作用
させて得られる３−０−α−マルトトリオシルマルトト
リオースを含有する糖混合物が用いられる。

また、本発明で使用される。アルカリ金属型またはアル
カリ土類金属型強酸性カチオン交換樹脂には、スルホン
基をＡＩしたスチレン−ジビニルベンゼン架橋共重合体
樹脂のＮａ＋型、Ｋ＋型などのアルカリ金属塩型、また
はＣａ　　型、Ｍｇ　　型などのアルカリ土類金属塩型
の１種または２種以上が適宜使用され、なかでも、架橋
度６％以下のものが好適であることが判明した。本発明
でいう加橋度とは、スチレン−ジビニルベンゼン架橋共
重合体を製造するに際し、全仕込モノマーに対するジビ
ニルベンゼンの重量百分率（％）をいうつ市販品として
は、例えば、ダウケミカル社製造の商品名ダウエックス
５０Ｗ×１、ダウエックス５０ＷＸ２、ダウエッス５０
ＷＸ４、ローム＆ハース社製造の商品名アンバーライ）
　Ｃ（）−１２０、東京有機化学工業株式会社製造の商
品名ＸＴ　−１０２２Ｅ、　ＸＴ−’１００７、三菱化
成工業株式会社製造の商品名ダイヤイオンＳＫ　ＩＢ１
ダイヤイオンＳＫ　　１０２、ダイヤイオンＳＫ　　１
０４などがある。これらの樹脂は、目的オリゴ糖高含有
画分の分画に優れているだけでなく、耐熱性、耐磨耗性
にも優れ、高純度の目的オリゴ糖の大量生産に極めて有
利である。

本発明では、通常０．０１〜０６５龍程度の粒径の樹脂
をカラムに充填して使用すればよい。カラム内に充填す
る樹脂層の永さは、全長で９ｍ以上が望ましく、この際
１本のカラムで９　ｍ以上にしても、また２本以上のカ
ラムを直列に連結して９ｍ以上にしてもよい。カラムの
材質、形状は、本発明の目的が達成できる限り自由に選
択できる。即ち、その材質ｊ−ま、例えば、ガラス、プ
ラスチック、ステンレスなどがオリ用でき、その形状は
充填した樹脂層内を通す液ができるだけ層流になる例え
ば、円筒状、角筒状などが適宜利用できる。

更に、本発明の実施方法をより具体的に述べる。

アルカリ金属型またはアルカリ土類金属型強酸性カチオ
ン交換樹脂を水に一濁してカラムに充填し、樹脂層の全
長が通常９ｍ以上になるようにする。このカラム内の温
度を４５〜８５℃に維持しつつ、これに濃度約４０〜７
０％の原糖液を樹脂に対して約１〜５０ｖ／ｖ％加え、
これに水をＳＶＶＯ２１〜２０の流速で上昇法または下
降法により流して溶出し、原糖液をＬ穂高含有画分、Ｌ
糖・目的オリゴ糖高含有画分、目的オリゴ糖高含有画分
、目的オリゴ塩・Ｓ穂高含有画分、Ｓ穂高含有画分の順
に分画し、その目的、］−１＋）ゴ糖高含有画分を採取
すればよい。

この際、溶出液の採取は、通常、使用樹脂に対して約１
〜２０ｖ／ｖ％毎に行なわれるが、これを自動化し、前
記画分に振り分けるようにしてもよい。

また、原糖液をカラムに流して分画するに際し、既に得
られているＬ糖・目的オリゴ糖高含有画分及び目的オリ
ゴ塩・Ｓ穂高含有画分を原糖液の前後に、または原糖液
とともに流すことにより、分画に要する使用水量を減少
させ、原糖液中の目的オリゴ塩を高純度、高濃度、高回
収率で採取できるので好都合である。

一般的には、既に得られているＬ糖・目的オリゴ糖高含
有画分を流した後に原糖液を流し、次いで既に得られて
いる目的オリゴ塩・Ｓ穂高含有画分を流すという順序を
採用するのが好ましい。

このようにして分画し、採取された目的オリゴ糖高含有
画分を、そのままで用いることもできるが、必要ならば
、常法に従い脱色、脱塩して精製し、更には、例えば濃
縮してシラツブとするが、または乾燥、粉末化して粉末
を採取することも自由にできる。

このようにして製造された高純度の目的オリゴ塩は、試
薬、診断薬、医薬などとしては勿論のこと、各種飲食品
、化粧品などの配合剤、化学品原料などとしても有利に
利用することができる。

次に、本発明を実験により詳細に説明する。

実、験１　　原糖液の調製 １−Ａ　　マルトトリオース調製川原糖液プルラン（林
原商事株式会社販売、ＰＦ　　ｇｒａｄｅ）を１０％水
溶液とし、ＰＨ６０、温度５０℃にてプルラナーゼ（株
式会社林原生物化学研究所販売）をプルラングラム轟り
　５．０００単位の割合になるように加／１％　２４時
間反応させた。その反応液を９５℃で１０分間保った後
、冷却し、沢過して得られるＰ液を、常法に従って活性
炭で脱色し、Ｈ型及びＯＨ型イオン交換樹脂によシ脱塩
して精製し、更に製部して濃度６０％の糖液を収率的８
３％で得た。

この糖液の糖組成は、グルコース重合度が２以下の糖類
３．９％、マルトトリオース７１７％およびグルコース
重合度が４以上の糖類２４４％であった。

１−Ｂ　　マルトペンタオース調製用Ｗ、糖液６％馬鈴
薯澱粉乳を加熱糊化させた後、ＰＨ４５、温度５０℃に
調整し、これにイソアミラーゼ（株式会社林原生物化学
研究所製造）を澱粉ダラム当り２、５００単位の割合に
なるように加え、２００時間反応せた。その反応液をＰ
Ｈ６，０に調整し、オートクレーブ（１２０℃）を１０
分間行ない、次いで４５′Ｃに冷却し１．これにα−ア
ミラーゼ（ノボ社製造、商品名ターマミール６０Ｌ）を
１殿粉グラム当り１５０単位の割合になるように加え、
２４時面反応させた。その反応液をオートクレーブ（１
２０℃）Ｋ：、２０分間行なった後、冷却し、以後実験
１−Ａと同様に精製、濃縮して濃度５５％の糖液を収率
的９１％で得た。

この糖液の糖組成は、グルコース重合度が４以下の糖類
４７．５％、マルトペンタオース４０．３％、グルコー
ス重合度が６以上の糖類２２％であった。

１−Ｃマルトヘキサオース調製川原糖液０、ＩＮ−硫酸
にα−シクロテキストリンを１０％になるように溶解し
、１００℃に６０分間保って部分加水分解した後、水酸
化ナトリウム溶液で中和した。

この液を約１／３容になるように濃縮し、これに５ｖ／
ｖ％のテトラクロロエタンを加え、攪拌しながら一夜冷
室に放置した後、濾過して得ら八るＰｔ７゜を、実験１
−Ａと同様に精製、濃縮して濃度５５％の糖液を収率的
８７％で得た。

この糖液の糖組成（ｄ１クノノコース重合度が５以下の
＠類３１．７％、マルトヘキサオース６０．１％、グル
コース重合度が７以上の糖類８２％であった。

１−Ｄ　　マルトテヵオース調峙用原料糖（１）　　シ
クロテキストリングルヵノ「ランセフェラーゼの調製 バチルス　ステアロサーモフィラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉ　ｌｕｓ　）　Ｆ　Ｅ
Ｉ（、Ｍ　−Ｐ　Ｎｎ　２２２２をソリュブルスターチ
　２　Ｗ／Ｖ％、硝酸ア７　％　、＝−ウＡ　　ｌ　ｗ
／Ｖ　Ｘ　−、リフ１＃ｚカリウムＱ、　ｌ　ｗ／ｖ％
、硫酸マグネシウム・７水＋Ｋ　　Ｏ，０５ｗ／ｖ％、
コーンステイープリカー　〇、５Ｗ／Ｖ％、炭酸カルシ
ウム　ＩＷ／ｖ％からなる殺菌した液体培地　１０ｔに
植菌して、５０℃で３日間通気攪拌電養した。

得られた培養液を遠心分離して、その上清を硫安０７飽
和で塩析１しシフロブキスｌ−ＩＪングルカノトランス
フェラーゼ（Ｐｃ　　２．４．１．１９）の活性約ｓｏ
、ｏｏｏ単位を有する粗酵素標品を得た。ここでいう活
性１単位とはＰＨ５，５、’　０．０２Ｍの酢酸緩衝液
及び２　Ｘ　１０−”　Ｍの塩化カルシウムを含む０．
３　Ｗ／Ｗ％のノリュプルスターチ溶、液　５ｍｌに適
当に希釈した酵素液ＯＪ２ｍｌを加え４０℃で１０分間
反応した後、その反応９０．５ｍｌをとり、０．０２Ｎ
−硫酸水溶液１５ｍＪに混合して反応を停止させ、さら
にこの反応停止液に０．ＩＮヨウ素ヨウ化カリウム溶Ｑ
０．２ｒｎｌを加えて発色させ、ついで６６］ｎｍにお
ける吸光度を測定して、４０℃で１０分間反応させるこ
とによシソリュブルスターチ１５　ｍｇのヨウ素の呈色
を完全に消失させる酵素量をいう。

（１１）原糖液の調製 β−シクロデキストリン１０％およびマルトトリオース
加％を含む水溶液に、前記（１）の方法で調製したンク
ロデキストリングルカノトランスフェラーゼをシクロデ
キストリノダラム当り５単位の割合で加え、ＰＨ５５、
温度７０℃で６時間反応させた後、９５℃に１５分間保
ち、次いで冷却し、濾過した。

得られたＰｅ、に５　ｖ／ｖ％のブロモベンゼンヲ加え
、攪拌しながら一夜冷室に放置し、次いで濾過して得ら
れるＰ液を、実、験１−Ａと同様に精製、濃縮して濃度
４５％の糖液を収率７５％で得た。

この糖液の糖組成（は、グルコース重合度が９以下の糖
類７１９％、マルトデカオース１５３％、グルコース重
合度が１１以上の糖類１２８％であった。

実験２　　原糖液の分画に及ぼす強酸性カチオン交換樹
脂の影響 実験１で調製した原糖液を用いて、それの分画に及ぼす
強酸性カチオン交換樹脂の架橋度の影響を調べた。

強酸性カチオン交換樹脂は、市販品（Ｎａ　型）を平均
粒径０．１〜０．３ｍｍに調整して使用し、その種類は
第１表に示した。

ｌ第１表　　架橋度と使用樹脂 カラムは、内径２．２Ｌｙｎのジャケット付ステンレス
製で、これに樹脂を樹脂層長がｌｏｍになるように充填
した。カラム内温度を７０℃に維持しつつ、これに濃度
４０％とした原糖液を樹脂に対してＩＯＶ／Ｖ％加え、
更に７０℃の温水をＳｖｏ、４の流速で流し、溶出され
る糖液を溶出順に分画採取した。

カラムから糖の溶出が終了に近づいた時点で、カラムへ
の温水の注入を止め、代シに、先に分画採取した糖液を
溶出順に加え、続いて同様に温水を疏した。このような
操作を５回縁シ返して（但し、マルトデカオース川原糖
液の場合は８回繰り返して）、Ｌ穂高含有画分、Ｌ糖・
目的オリゴ穂高含糖 有両分、目的オリゴ高含有画分、目的オリゴ糖・Ｓ穂高
含有画分、Ｓ穂高含有画分の順に溶出分画し、９０％以
上の高純度目的オリゴ糖を含有している山谷を採取した
。

得られた高純度画分中の目的オリゴ糖含量の使用した原
糖液中の目的オリゴ糖含量に対する百分率を目的オリゴ
糖回収率とした 結果を第２表に示した。

第２表の結果から明らかなように、強酸性カチオン交換
樹脂を用いて前記方法で原糖液を溶出分画することによ
シ、グルコース重合度３乃至１０の範囲の高純度目的オ
リゴ糖が８０％以上の高回収率で採取できることが判明
した。

なかでも、目的オリゴ糖のグルコース重合度が３乃至５
の場合には、強酸性カチオン交換樹脂が架橋度６％以下
のものの使用が好適であシ、グルコース重合度が６乃至
１０の場合には、架橋度４Ｘ以下のものの使用が好適で
あることが判明した。

以下、２〜３の実姉例を述べる。

実施例　ｌ　　マルトトリオース 実験１−Ａで調製したマルトトリオース含量７１７％の
糖液を原糖液とした。樹脂は、アルカリ金属型強酸性カ
チオン交換樹脂（東京有機化学工業株式会社製造、商品
名Ｘ　Ｔ　−１００７、Ｎａ型、架橋度６％）を使用し
、内径５．４ｃｒｎのジャケット付ステンレス製カラム
に水懸濁液で充填し、その液が直列に流れるようにカラ
ム４本を連結して樹脂層全長を２０ｍとした。

カラム内温度を５５℃に維持しつつ、原糖液を樹脂に対
して５　ｖ／ｖ％加え、これに５５℃の温水をＳＶ　Ｏ
，１３で流して分画し、マルトトリオース含量９０％以
上のマルトトリオース高含有画分を採取した。

このマルトトリオース高含有画分に回収されたマルトト
リオースは、原糖液のマルトトリオースに対して約８３
％であった。

実施例　２　　マルトトリオース まず、第１回目の分画に際し、原糖液を樹脂に対して２
０　ｖ／ｖ％使用した以外は、実施例１と同様に分画し
た。分画品の溶出パターンを図に示しだ。

図において、ＡはＬ穂高含有画分を示し、ＢはＬ糖・目
的オリゴ糖高含有画分を示し、Ｃは目的オリゴ糖高含有
画分を示し、Ｄは目的オリゴ糖・Ｓ穂高含有画分を示し
、ＥはＳ穂高含有画分を示す。

その分画品の溶出順序は、Ａ、ＢＸＣｌＤ、Ｅの順であ
った。その中、分画品Ｃ（マルトトリオース高含有画分
）を採取し、分画品Ａ及びＥは除去した。

第２回目以降の分画け、同じカラムに分画品Ｂ１樹脂に
対して約１０　ｖ／ｖ％の原糖液及び分両品Ｃの順に加
え、更に５５℃の温水を実施例１と同様に流してマルト
トリオース含量９０％以上のマルトトリオース高含有画
分を採取した。

第２回目以降の分画操作を延べ２０回繰り返して１回当
９の平均結果を求めたところ、マルトトリオースの回収
率は約９４％の高収率であった。

実Ｍ　例３　　　マルトペンタオース 実験１−Ｂで調製したマルトペンタオース含量４０．３
％の糖液を原糖液とした。樹脂（は、アルカリ土類金属
型強酸性カチオン交換樹脂（ダウケミカル社製造、商品
名ダウエックス５０　Ｗ　Ｘ　４、Ｍｇ型、架橋度４％
）を使用し、実施例１と同じカラムに樹脂層全長が３０
ｍになるように充填した。

カラム内温度を７５℃に維持しつつ、原糖液を樹脂に対
して６．６　Ｖ／’Ｖ％加え、これに７５℃の温水をＳ
Ｖｏ、１３の流速で流して分画した。

得られた分画品を、溶出ｙｔに再度カラムにかけて同様
に分画し、マルトペンタオース含量９０％以上のマルト
ペンタオース高含有画分を採取した０ マルトペンタオースの回収率は約８５％であった。

実ｍ例４．　　　マルトヘキサオース 実；検１−Ｃで調製したマルトヘキサす−ス含量６０．
１％の糖液を原糖液とした。樹脂は、アルカリ金属型強
酸性カチオン交換樹脂（三菱化成工業株式会社製造、商
品名ダイヤイオンＳＫ］、０４、Ｋ＋型、架橋度４％）
を使用し、カラムは“実施例３と同様のものを使用した
。

カラム内温度を６０℃に維持しつつ、原糖液を樹脂に対
して７　ｖ／ｖ％加え、これに６０℃の温水をＳＶｏ、
１２の流速で流して分画し、マルトヘキサオース含量９
０％以上のマルトヘキサオース高含有画分を採取した。

マルトヘキサオースの回収率は、原糖液に対して約８６
％であった。

実施例　５　　マルトヘキサオース まず、第１回目の分画に際し、原糖液を樹脂に対して１
０　ｖ／ｖ％使用した以外は、実施例４と同様に分画し
た。分画品の溶出パターンは、図に示めされるものと同
様でＡ、Ｂ、Ｃ，Ｄ、、Ｅの順に分画した。その中、分
画品Ｃ（マルトヘキサオース高含有画分）を採取し、分
画品Ａ及びＥを除去した。

第２回目以降の分画け、同じカラムに分画品Ｂ１樹脂に
対して約６．６　ｖ／ｖ％の原糖液及び分画品Ｃの順に
加え、更に６０℃の温水を実施例４と同様に流してマル
トヘキサオース含量９０％以上のマルトヘキサオース高
含有画分を採取した。

第２回目以降の分画操作を延べ５０回繰り返して、１回
当りの平均結果を求めたところ、マルトヘキサオースの
回収率は約９３％であった。

実施例　６　　３−Ｏ−α−マルトトリオシルマルトト
リオース 試薬プルラン（株式会社林原生物化学研究所販売）を５
％水溶液とし、ＰＨ６，０、温度４５℃にてプルラナー
ゼ（株式会社林原生物化学研究所販売）をプルラングラ
ム当り２，５００単位の割合になるように加え、９時間
反応させた。その反応液を９５℃に１０分間保った後冷
却し、これにメタノールを８０　ｖ／ｖ％になるように
加え、二夜放置した後濾過し、得られるｒ液を減圧濃縮
して濃度５０％の３−０−α−マルトトリ芽シルマルト
トリオース調製用原原糖を得た。

この糖液の糖組成は、グルコース重合度が５以下の糖類
４４４％、３−〇−α−マルトトリオシルマルトトリオ
ース２５７％、クルコース重合度が７以上の糖類２９９
％であった。

樹脂は、アルカリ金属型強酸性カチオン交換樹脂（ダウ
クミカル社製造、商品名ダウエノ・クス５０ＷＸ２、Ｎ
ａ　型、架橋度２％）を使用し、実施例１と同じカラム
に充填した。

カラム内温度を６０℃に維持しつつ、原糖液を樹脂に対
して５ｖ／ｖ％加え、これに６０℃の温水を５Ｖ−０，
２の流速で流して分画した。

得られた分画品を溶出順に再度カラムにかけて同様に分
画し、３−０−α−マルトトリオシルマルトトリオース
含−ｔｃ＋ｏ％以上の３−０−α−マルトトリオシルマ
ルトトリオース高含有画分を採取した。

３−０−α−マルトトリオツルマルトトリオースの回収
率は約８２％であった。

実施例７．　　　マルトヘプタオース α−シクロデキストリンの代りにβ−７クロデキストリ
ンを、テトラクロロエタンの代りにブロモベンゼンを用
いた以外ｉｄ、実験１−Ｃと同様に処理して濃度５５％
のマルトヘプタオース調製川原糖液を調製した。

この糖液の糖組成は、グルコース重合度が６以下の糖類
２１３％、マルトヘプタオース６７３％、グルコース重
合度が８以上の糖類１１４％であった。

樹脂は、アルカリ土類金属型強酸性カチオン交換樹脂（
三菱化成工業株式会社製造、商品名ダイヤイオンＳＫ１
’０２、Ｃａ　型、架橋度２％）を使用した。

使用カラムおよび分画操作は、実施例４と同様に行なっ
たところ、マルトヘプタオースの回収率は約８９％であ
った。

実施例８．　　　マルトヘプタオース まず、第１回目の分画に際し、原糖液を樹脂に対して１
０　ｖ／ｖ％使用した以外は、実施例７と同様に分画し
た。

分画品の溶出パターンは、図に示めされるものと同様で
Ａ、Ｂ、Ｃ，Ｄ、Ｅの順で分画した。

その中、分画品Ｃ（マルトヘプタオース高含有画分）を
採取し、分画品Ａ及びＥは除去した。

第２回目以降の分画操作は、実施例５と同様に行いマル
トヘプタオース含量９０％以上のマルトヘプタオース高
含有画分を採取した。

第２回目以降の分画操作を延ベア０回繰シ返して、１回
当シの平均結果を求めたところ、マルトヘプタオースの
回収率は約９６％であった。

実施例　９　　マルトデカオース 実験１−Ｄで調製したマルトデカオース含量１５３％の
糖液を原糖液とした。樹脂は、アルカリ金属型強酸性カ
チオン交換樹脂（ダウケミカル社製造、商品名ダウエッ
クス５０Ｗ×１、Ｋ型、架橋度１％）を使用し、内径２
．２＞のンヤケノト付カラムに水懸濁状で充填した。こ
の際、樹脂層表５ｍのカラム４本に充填し、その液が直
列に流れるようにカラム４本を連結して樹脂層全長を２
０ｍとした。

カラム内温度を６５−℃に維持しつつ、原糖液を樹脂に
対して５ｖ／ｖ％加え、これに６５℃の温水をＳＶｏ、
２の流速で流して分画した。

得られた分画品を溶出類に再度カラムにかけて同様に分
画し、マルトデカオース含量９０％以上のマルトデカオ
ース高含有画分を採取した。

マルトデカオースの回収率は約８８％であった。

【図面の簡単な説明】

図は、原糖液の溶出パターンの一例を示す図である。 図中の符号を説明すれば、次の通りである。 ＡはＬ穂高含有画分 ＢはＬ糖・目的オリゴ糖高含有画分 しは目的オリゴ糖高含有画分 りは目的オリゴ糖・Ｓ穂高含有画分 ＥはＳ穂高含有画分 特許出願人 株式会社林原生物化学研究所 手続補正書 昭和５９年２月２０　Ｅ 特許庁長官　若　杉　和　夫　殿 １、事件の表示 昭和５８年特許願第１９５５０号 ２　発明の名称 高純度グルコオリゴ糖の製造方法 ３　補正をする者 事件との関係　　　特許出願人 ４　補正の対象 明細書の１発明の詳細な説明」の項 ５　補正の内容 （１）明′ａ書、イ３９頁第１行〜第１０頁第２行記載
の「また、本発明で使用されるアルカリ金属型・・・大
量生産に゛極めて有利である。」を、人文の・ように袖
正します。 ［寸だ、本発明で使用されるアルカリ金属型またはアル
カリ土類金属型強酸性カチオン交換樹脂に（は、スルホ
ン基を結合したスチレン−ジビニルベンゼン架橋共重合
体樹脂のＮａ＋型、Ｋ＋〕９）などのアルカリ金属塩型
、また（ｒ；：Ｃａ”型、工＼−１ｇ４＋型などのアル
カリ土類金属塩型の１棟または２種以上が適宜［気圧さ
れ、市販品として（ハ、例えば、ダウケミカル社製造の
商品名ダウエックス５０ＷＸ１、ダウエックス５０＼■
×２、ダウェソス５０Ｗ×４、ローム＆ハース社製造の
商品名アンバーライトｃＧ−１２０、東京有機化学工業
株式会社製造の商品名Ｘ’ｌ’　−１０２２Ｅ、　ＸＴ
　−１００７、三菱化成工業株式会社裳造の商品名ダイ
ヤイオン５ＫＩＢ、ダイヤイオンＳＫ’１０２、ダイヤ
イオンＳＫ　１０４などがある。なかでも、架橋度６％
以下の樹脂が好適であることが判明した。 本発明でいう加僑度とは、スチレン−ジビニルベンゼン
架橋共重合体を製造するに際し、全仕込モノマーに対す
るジビニルベンゼンの重Ｅ＞百分率（Ｘ）をいう。 これらの樹脂は、目的オリゴ糖高含有画分の分画に優九
でいるたけでなく、耐熱性、耐磨耗住にも優れ、高純度
の目的オリゴ糖の大量生産に極めて有利である。Ｊ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）グルコース重合度が３乃至ｌＯの範囲から選ばれ
   るグルコオリゴ！（以下、目的オリゴ糖という）の製造
   に際し、目的オリゴ糖とともにこれよりグルコース重合
   度が１以上大きい糖類（以下、Ｌ糖という）とグルコー
   ス重合度が１以上小さい糖類（以下、Ｓ糖という）とを
   含有する糖混合液をアルカリ金属型またはアルカリ土類
   金属型強酸性カチオン交換樹脂を充填したカラムに流し
   、次いで水で溶出し、Ｌ穂高含有両分、Ｌ糖・目的オリ
   ゴ糖高含有画分、目的オリゴ糖高含有画分、目的オリゴ
   糖・Ｓ穂高含有画分、Ｓ穂高含有画分の順に分画し、目
   的オリゴ糖高含有画分を採取することを特徴とするグル
   コース重合度が３乃至１０の範囲から選ばれる高純度グ
   ルコオリゴ糖の製造方法。 （２）　　目的オリゴ糖がグルコース重合度３乃至５の
   範囲から選ばれる場合には、架橋度が６％以下のカチオ
   ン交換樹脂を用いることを特徴とする特許請求の範囲第
   １項記載の高純度グルコオリゴ糖、の製造方法。 （３）　　目的オリゴ壁がクルコース重合１此６乃至ｌ
   Ｏの範囲から選ばれる場合に（ｒｉ、架橋度が４％以下
   のカチオン交換切脂を用いることを特徴とする特許請求
   の範囲第１項記載の高純度グルコオリゴ糖の一壇造方法
   。 口１　目的オリゴ糖高含有両分が目的オリゴ壁を固形−
   Ｓｔ当す９０％以上含有することを特徴とする特許請求
   の範囲第１項、第２項寸だ（ｄ第３項記載の高純度グル
   コオリゴ糖の製造方法。 （５）　　目的オリゴ糖を含有する糖混合液をカラムに
   流すに際し、既に得られているＬ　Ｉｇ・目的オリゴ穂
   高′含有画分及び目的オリゴ糖・Ｓ糖高含有画分全とも
   に流すことを特徴とする特許請求の範囲第１項、第２項
   、第３項または第４項記載の高純度グルコオリゴ糖の製
   造方法。 （６）　　目的オリゴ糖を含有する糖混合液をカラムに
   流すに際し、既に得られているＬ糖・目的オリゴ糖高含
   有画分を流した後に目的オリゴ糖を含有する糖混合液を
   流し、次いで既に得られている目的オリゴ糖・Ｓ穂高含
   有画分を流すことを特徴とする特許請求の範囲第１項、
   第２項、第３項まだは第４項記載の高純度グルコオリゴ
   糖の製造方法。 （７）　目的オリゴ糖を含有する糖混合液が、目的オリ
   ゴ糖を固形物当９１０乃至８０％含有することを特徴と
   する特許請求の範囲第１項、第２項、第３項、第４項、
   第５項または第６項記載の高純度グルコオリゴ糖の製造
   方法。