JPH0631285B2 - 高純度オリゴグルコシルフラクトシドの製造方法 - Google Patents
高純度オリゴグルコシルフラクトシドの製造方法Info
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- JPH0631285B2 JPH0631285B2 JP59022614A JP2261484A JPH0631285B2 JP H0631285 B2 JPH0631285 B2 JP H0631285B2 JP 59022614 A JP59022614 A JP 59022614A JP 2261484 A JP2261484 A JP 2261484A JP H0631285 B2 JPH0631285 B2 JP H0631285B2
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- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H3/00—Compounds containing only hydrogen atoms and saccharide radicals having only carbon, hydrogen, and oxygen atoms
- C07H3/06—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C13—SUGAR INDUSTRY
- C13K—SACCHARIDES OBTAINED FROM NATURAL SOURCES OR BY HYDROLYSIS OF NATURALLY OCCURRING DISACCHARIDES, OLIGOSACCHARIDES OR POLYSACCHARIDES
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Description
【発明の詳細な説明】 本発明は、グルコース重合度が２および３から選ばれる
オリゴグルコシル基にフラクトースがフラクトシド結合
したオリゴグルコシルフラクトシド（以下、特にことわ
らない限り、単にオリゴグルコシルフラクトシドとい
う。）の製法、とりわけ、高純度オリゴグルコシルフラ
クトシドの製造方法に関する。
オリゴグルコシル基にフラクトースがフラクトシド結合
したオリゴグルコシルフラクトシド（以下、特にことわ
らない限り、単にオリゴグルコシルフラクトシドとい
う。）の製法、とりわけ、高純度オリゴグルコシルフラ
クトシドの製造方法に関する。
近年、グルコース重合度が２乃至４またはそれ以上の重
合度を有するグリコシル基にフラクトースがフラクトシ
ド結合したグルコシルシュクロース、マントシルシュク
ロース、マルトトリオシルシュクロースなどのグルコシ
ルフラクトシドを含有する甘味料が商品名カップリング
シュガー（登録商標 林原株式会社製）として市販され
ている。
合度を有するグリコシル基にフラクトースがフラクトシ
ド結合したグルコシルシュクロース、マントシルシュク
ロース、マルトトリオシルシュクロースなどのグルコシ
ルフラクトシドを含有する甘味料が商品名カップリング
シュガー（登録商標 林原株式会社製）として市販され
ている。
本甘味料は、上品な甘味を有し、飲食物に甘味、適度な
粘性、保湿性、照りを付与するだけでなく、砂糖の晶出
を防止するなどの目的で広範に利用されている。
粘性、保湿性、照りを付与するだけでなく、砂糖の晶出
を防止するなどの目的で広範に利用されている。
また、本甘味料の特徴は、砂糖と同様に、飲食物にボデ
ィが付与できるとともに、摂取されると消化、吸収、代
謝されてカロリーになる甘味料でありながら、虫歯原因
菌により、砂糖とは違って、水不溶性グルカン、乳酸の
生成が少ないことより、低う蝕性甘味料とし使用される
点にある。
ィが付与できるとともに、摂取されると消化、吸収、代
謝されてカロリーになる甘味料でありながら、虫歯原因
菌により、砂糖とは違って、水不溶性グルカン、乳酸の
生成が少ないことより、低う蝕性甘味料とし使用される
点にある。
グルコシルフラクトシド甘味料の製造方法としては、例
えば、特公昭49−40949号公報、特公昭53−17660号公
報、特公昭56−22520号公報、特開昭52−47929号公報な
どにも記載されているように、澱粉若しくは澱粉部分加
水分解物をシュクロースとを含有する水溶液にシクロデ
キストリングルカノトランスフェラーゼ（EC 2.4.1.1
9）若しくはα−アミラーゼ（EC 3.2.1.1）を作用させ
るか、または、特公昭57−58905号公報に記載されてい
るように、シュクロース若しくはラフィノースと、マル
トース、イソマルトース、コージビオース、ラミナリビ
オース、イソマルトトリオース、パノース、イソパノー
スなどのアルドオリゴ糖とを含有する水溶液にレバンシ
ュクラーゼ（EC 2.4.1.10）を作用させるか、更に、マ
ルトース、マルトトリオース、マルトテトラオースなど
のマルトオリガ糖若しくはDE約10乃至70の澱粉部分加水
分解物とシュクロースとを含有する水溶液にα−グルコ
シダーゼ（EC 3.2.1.20）を作用させるなどの糖転移酵
素を利用する方法が知られている。
えば、特公昭49−40949号公報、特公昭53−17660号公
報、特公昭56−22520号公報、特開昭52−47929号公報な
どにも記載されているように、澱粉若しくは澱粉部分加
水分解物をシュクロースとを含有する水溶液にシクロデ
キストリングルカノトランスフェラーゼ（EC 2.4.1.1
9）若しくはα−アミラーゼ（EC 3.2.1.1）を作用させ
るか、または、特公昭57−58905号公報に記載されてい
るように、シュクロース若しくはラフィノースと、マル
トース、イソマルトース、コージビオース、ラミナリビ
オース、イソマルトトリオース、パノース、イソパノー
スなどのアルドオリゴ糖とを含有する水溶液にレバンシ
ュクラーゼ（EC 2.4.1.10）を作用させるか、更に、マ
ルトース、マルトトリオース、マルトテトラオースなど
のマルトオリガ糖若しくはDE約10乃至70の澱粉部分加水
分解物とシュクロースとを含有する水溶液にα−グルコ
シダーゼ（EC 3.2.1.20）を作用させるなどの糖転移酵
素を利用する方法が知られている。
このようにして製造されるグルコシルフラクトシド含有
甘味料の成分について、更に研究を進めたところ、グル
コシルフラクトシドのうち、グルコース重合度が２およ
び３から選ばれるオリゴグルコシルフラクトシドは、グ
ルコース重合度が、４またはそれ以上のポリグルコシル
フラクトシドと比較して、良質な高甘味を有しており、
また、砂糖と比較して虫歯原因菌による水不溶性グルカ
ンの生成量、乳酸の生成量がきわめて少なく、低う蝕性
若しくは抗う蝕性甘味料として好適であることが判明し
た。
甘味料の成分について、更に研究を進めたところ、グル
コシルフラクトシドのうち、グルコース重合度が２およ
び３から選ばれるオリゴグルコシルフラクトシドは、グ
ルコース重合度が、４またはそれ以上のポリグルコシル
フラクトシドと比較して、良質な高甘味を有しており、
また、砂糖と比較して虫歯原因菌による水不溶性グルカ
ンの生成量、乳酸の生成量がきわめて少なく、低う蝕性
若しくは抗う蝕性甘味料として好適であることが判明し
た。
しかしながら、前記製造方法によって得られる従来のグ
ルコシルフラクトシド含有甘味料には、オリゴグルコシ
ドの含量は固形物当り10乃至50w/w％（以下、特にこと
わらない限り、糖含量％は、固形物当りw/w％を意味す
る。）程度であることが判明した。
ルコシルフラクトシド含有甘味料には、オリゴグルコシ
ドの含量は固形物当り10乃至50w/w％（以下、特にこと
わらない限り、糖含量％は、固形物当りw/w％を意味す
る。）程度であることが判明した。
このような糖混合物から、更に高純度のオリゴグルコシ
ルフラクトシドを採取する方法としては、例えば、ペー
パークロマトグラフィーによる分画法、活性炭カラムに
よる選択的吸脱着法などの精製方法が知られている。し
かしながら、これらの方法で高純度オリゴグルコシルフ
ラクトシドを工業的に製造することは極めて困難であ
る。
ルフラクトシドを採取する方法としては、例えば、ペー
パークロマトグラフィーによる分画法、活性炭カラムに
よる選択的吸脱着法などの精製方法が知られている。し
かしながら、これらの方法で高純度オリゴグルコシルフ
ラクトシドを工業的に製造することは極めて困難であ
る。
本発明者等は、オリゴグルコシルフラクトシドの含量を
更に高めた、即ち、60％以上望ましくは70％以上の高純
度オリゴグルコシルフラクトシドを工業的に大量製造す
る方法について鋭意研究した。
更に高めた、即ち、60％以上望ましくは70％以上の高純
度オリゴグルコシルフラクトシドを工業的に大量製造す
る方法について鋭意研究した。
その結果、意外にも、特開昭52−47929号公報で転化糖
が生ずる傾向にあり、使用が好ましくないとされている
強イオン交換樹脂、とりわけ、アルカリ土類金属型強酸
性カチオン交換樹脂を使用することにより、オリゴグル
コシルフラクトシドの転化を懸念することなく、容易に
高純度オリゴグルコシルフラクトシドを製造しうること
を見いだし、本発明を完成した。
が生ずる傾向にあり、使用が好ましくないとされている
強イオン交換樹脂、とりわけ、アルカリ土類金属型強酸
性カチオン交換樹脂を使用することにより、オリゴグル
コシルフラクトシドの転化を懸念することなく、容易に
高純度オリゴグルコシルフラクトシドを製造しうること
を見いだし、本発明を完成した。
即ち、目的のオリゴグルコシルフラクトシドとともにオ
リゴグルコシルフラクトシドより重合度が１以上大きい
糖類（以下、Ｌ糖という）とオリゴグルコシルフラクト
シドより重合度が１以上小さい糖類（以下、Ｓ糖とい
う）とを含有する糖混合液をアルカリ土類金属型強酸性
カチオン交換樹脂を充填したカラムに流し、次いで、水
で溶出し、Ｌ糖高含有画分、Ｌ糖・オリゴグルコシルフ
ラクトシド高含有画分、オリゴグルコシルフラクトシド
高含有画分、オリゴグルコシルフラクトシド・Ｓ糖高含
有画分、Ｓ糖高含有画分の順に分画し、オリゴグルコシ
ルフラクトシド高含有画分を採取することにより、容易
に高純度のオリゴグルコシルフラクトシドが製造でき、
工業的製法として好適であることを見いだし、本発明を
完成した。
リゴグルコシルフラクトシドより重合度が１以上大きい
糖類（以下、Ｌ糖という）とオリゴグルコシルフラクト
シドより重合度が１以上小さい糖類（以下、Ｓ糖とい
う）とを含有する糖混合液をアルカリ土類金属型強酸性
カチオン交換樹脂を充填したカラムに流し、次いで、水
で溶出し、Ｌ糖高含有画分、Ｌ糖・オリゴグルコシルフ
ラクトシド高含有画分、オリゴグルコシルフラクトシド
高含有画分、オリゴグルコシルフラクトシド・Ｓ糖高含
有画分、Ｓ糖高含有画分の順に分画し、オリゴグルコシ
ルフラクトシド高含有画分を採取することにより、容易
に高純度のオリゴグルコシルフラクトシドが製造でき、
工業的製法として好適であることを見いだし、本発明を
完成した。
また、使用する強酸性カチオン交換樹脂としては、架橋
度６％以下のものが好適であることを見いだした。
度６％以下のものが好適であることを見いだした。
また、目的のオリゴグルコシルフラクトシドを含有する
糖混合液をカラムに流すに際し、既に得られているＬ糖
・オリゴグルコシルフラクトシド高含有画分及びオリゴ
グルコシルフラクトシド・Ｓ糖高含有画分をともに流す
ことにより高純度のオリゴグルコシルフラクトシドを高
濃度、高収率で安定して製造しうることを見いだした。
糖混合液をカラムに流すに際し、既に得られているＬ糖
・オリゴグルコシルフラクトシド高含有画分及びオリゴ
グルコシルフラクトシド・Ｓ糖高含有画分をともに流す
ことにより高純度のオリゴグルコシルフラクトシドを高
濃度、高収率で安定して製造しうることを見いだした。
本発明のオリゴグルコシルフラクトシドとは、グルコー
ス重合度が２および３から選ばれるオリゴグルコシルフ
ラクトシド、換言すれば、グルコース重合度が２および
／または３のオリゴグルコシル残基にフラクトースがフ
ラクトシド結合したオリゴグルコシルフラクトシドを意
味する。
ス重合度が２および３から選ばれるオリゴグルコシルフ
ラクトシド、換言すれば、グルコース重合度が２および
／または３のオリゴグルコシル残基にフラクトースがフ
ラクトシド結合したオリゴグルコシルフラクトシドを意
味する。
本発明に用いる目的のオリゴグルコシルフラクトシドを
含有する糖混合液（以下、原糖液という）は、オリゴグ
ルコシルフラクトシドが約10乃至50％の範囲にあって、
本発明によりオリゴグルコシルフラクトシドが実質的に
転化を起すことなく、高純度オリゴグルコシルフラクト
シドが高収率で採取できるものであればよい。
含有する糖混合液（以下、原糖液という）は、オリゴグ
ルコシルフラクトシドが約10乃至50％の範囲にあって、
本発明によりオリゴグルコシルフラクトシドが実質的に
転化を起すことなく、高純度オリゴグルコシルフラクト
シドが高収率で採取できるものであればよい。
また、本発明で使用されるアルカリ土類金属型強酸性カ
チオン交換樹脂には、スルホン基を結合したスチレン−
ジビニルベンゼン架橋共重合体樹脂のCa 型、Mg 型な
どのアルカリ土類金属塩型の１種または２種以上が適宜
使用され、なかでも、架橋度６％以下のものが好適であ
ることが判明した。本発明でいう加橋度とは、スチレン
−ジビニルベンゼン架橋共重合体を製造するに際し、全
仕込モノマーに対するジビニルベンゼンの重量百分率
（％）をいう。
チオン交換樹脂には、スルホン基を結合したスチレン−
ジビニルベンゼン架橋共重合体樹脂のCa 型、Mg 型な
どのアルカリ土類金属塩型の１種または２種以上が適宜
使用され、なかでも、架橋度６％以下のものが好適であ
ることが判明した。本発明でいう加橋度とは、スチレン
−ジビニルベンゼン架橋共重合体を製造するに際し、全
仕込モノマーに対するジビニルベンゼンの重量百分率
（％）をいう。
市販品としては、例えば、ダウケミカル社製造の商品名
ダウエックス50Ｗ×１、ダウエックス50Ｗ×２、ダウエ
ックス50Ｗ×４、東京有機化学工業株式会社製造の商品
名ＸＴ−1022Ｅ、ＸＴ−1007、三菱化成工業株式会社製
造の商品名ダイヤイオンＳＫ102、ダイヤイオンＳＫ104
などがある。これらの樹脂は、オリゴグルコシルフラク
トシド高含有画分の分画に優れているだけなく、耐熱
性、耐摩耗性にも優れ、高純度の目的オリゴグルコシル
フラクトシドの大量生産に極めて有利である。
ダウエックス50Ｗ×１、ダウエックス50Ｗ×２、ダウエ
ックス50Ｗ×４、東京有機化学工業株式会社製造の商品
名ＸＴ−1022Ｅ、ＸＴ−1007、三菱化成工業株式会社製
造の商品名ダイヤイオンＳＫ102、ダイヤイオンＳＫ104
などがある。これらの樹脂は、オリゴグルコシルフラク
トシド高含有画分の分画に優れているだけなく、耐熱
性、耐摩耗性にも優れ、高純度の目的オリゴグルコシル
フラクトシドの大量生産に極めて有利である。
本発明では、通常0.01〜0.5mm程度の粒径の樹脂をカラ
ムに充填して使用すればよい。カラム内に充填する樹脂
層の長さは、全長で４ｍ以上が望ましく、この際１本の
カラムで４ｍ以上にしても、また２本以上のカラムを直
列に連結して４ｍ以上にしてもよい。カラムの材質、形
状は、本発明の目的が達成できる限り自由に選択でき
る。即ち、その材質は、例えば、ガラス、プラスチッ
ク、ステンレスなどが利用でき、その形状は充填した樹
脂層内を通す液ができるだけ層流になる例えば、円筒
状、角筒状などが適宜利用できる。また、分画方式は、
固定床方式、移動床方式、擬似移動床方式であってもよ
い。
ムに充填して使用すればよい。カラム内に充填する樹脂
層の長さは、全長で４ｍ以上が望ましく、この際１本の
カラムで４ｍ以上にしても、また２本以上のカラムを直
列に連結して４ｍ以上にしてもよい。カラムの材質、形
状は、本発明の目的が達成できる限り自由に選択でき
る。即ち、その材質は、例えば、ガラス、プラスチッ
ク、ステンレスなどが利用でき、その形状は充填した樹
脂層内を通す液ができるだけ層流になる例えば、円筒
状、角筒状などが適宜利用できる。また、分画方式は、
固定床方式、移動床方式、擬似移動床方式であってもよ
い。
更に、本発明の実施方法をより具体的に述べる。
アルカリ土類金属型強酸性カチオン交換樹脂を水に懸濁
してカラムに充填し、樹脂層の全長が通常４ｍ以上にな
るようにする。このカラム内の温度を45〜85℃、望まし
くは45〜70℃に維持しつつ、これに濃度約40〜70の原糖
液を樹脂に対して約１〜50v/v％加え、これに水をＳＶ
約0.1〜2.0の流速で上昇法または下降法により流して溶
出し、原糖液をＬ糖高含有画分、Ｌ糖・オリゴグルコシ
ルフラクトシド高含有画分、オリゴグルコシルフラクト
シド高含有画分、オリゴグルコシルフラクトシド・Ｓ糖
高含有画分、Ｓ糖高含有画分の順に分画し、そのオリゴ
グルコシルフラクトシド高含有画分を採取すればよい。
してカラムに充填し、樹脂層の全長が通常４ｍ以上にな
るようにする。このカラム内の温度を45〜85℃、望まし
くは45〜70℃に維持しつつ、これに濃度約40〜70の原糖
液を樹脂に対して約１〜50v/v％加え、これに水をＳＶ
約0.1〜2.0の流速で上昇法または下降法により流して溶
出し、原糖液をＬ糖高含有画分、Ｌ糖・オリゴグルコシ
ルフラクトシド高含有画分、オリゴグルコシルフラクト
シド高含有画分、オリゴグルコシルフラクトシド・Ｓ糖
高含有画分、Ｓ糖高含有画分の順に分画し、そのオリゴ
グルコシルフラクトシド高含有画分を採取すればよい。
この際、溶出液の採取は、通常、使用樹脂に対して約１
〜20v/v％毎に行なわれるが、これを自動化し、前記画
分に振り分けるようにしてもよい。
〜20v/v％毎に行なわれるが、これを自動化し、前記画
分に振り分けるようにしてもよい。
また、原糖液をカラムに流して分画するに際し、既に得
られているＬ糖・オリゴグルコシルフラクトシド高含有
画分及びオリゴグルコシルフラクトシド・Ｓ糖高含有画
分を原糖液の前後に、または原糖液とともに流すことに
より、分画に要する使用水量を減少させ、原糖液中のオ
リゴグルコシルフラクトシドを高純度、高濃度、高収率
で採取できるので好都合である。
られているＬ糖・オリゴグルコシルフラクトシド高含有
画分及びオリゴグルコシルフラクトシド・Ｓ糖高含有画
分を原糖液の前後に、または原糖液とともに流すことに
より、分画に要する使用水量を減少させ、原糖液中のオ
リゴグルコシルフラクトシドを高純度、高濃度、高収率
で採取できるので好都合である。
一般的には、既に得られているＬ糖・オリゴグルコシル
フラクトシド高含有画分を流した後に原糖液を流し、次
いで既に得られているオリゴグルコシルフラクトシド・
Ｓ糖高含有画分を流すという順序を採用するのが好まし
い。
フラクトシド高含有画分を流した後に原糖液を流し、次
いで既に得られているオリゴグルコシルフラクトシド・
Ｓ糖高含有画分を流すという順序を採用するのが好まし
い。
このようにして分画し、採取されたオリゴグルコシルフ
ラクトシド高含有画分を、そのままで用いることもでき
るが、必要ならば、常法に従い脱色、脱塩して精製し、
更には、例えば濃縮してシラップとするか、または乾
燥、粉末化して粉末を採取することも自由にできる。
ラクトシド高含有画分を、そのままで用いることもでき
るが、必要ならば、常法に従い脱色、脱塩して精製し、
更には、例えば濃縮してシラップとするか、または乾
燥、粉末化して粉末を採取することも自由にできる。
このようにして製造された高純度のオリゴグルコシルフ
ラクトシドは、甘味料とりわけ低う蝕性甘味料として各
種飲食品の甘味付は勿論のこと、化粧品などの配合剤、
化学品原料などとしても有利に利用することができる。
ラクトシドは、甘味料とりわけ低う蝕性甘味料として各
種飲食品の甘味付は勿論のこと、化粧品などの配合剤、
化学品原料などとしても有利に利用することができる。
次に、本発明を実験により詳細に説明する。
実験１． 原糖液の調製 １−Ａ マルトシルフラクトシド調製用原糖液 (i) シクロデキストリングルカノトランスフェラーゼ
の調製 バチルス ステアロサーモフイラス（Bacillus stearo
thermophilus）FERM−Ｐ NO. 2222をソリュブルスタ
ーチ ２w/v％、硝酸アンモニウム １w/v％、リン酸２
カリウム 0.1w/v％、硫酸マグネシウム・７水塩 0.05
w/v％、コーンステイーブリカー 0.5w/v％、炭酸カル
シウム １w/v％からなる殺菌した液体培地10に植菌
して、50℃で３日間通気撹拌培養した。得られた培養液
を遠心分離して、その上清を硫安0.7飽和で塩析しシク
ロデキストリングルカノトランスフェラーゼ（EC 2.4.
1.19）の活性約80,000単位を有する粗酵素標品を得た。
ここでいう活性１単位とはpH5.5、0.02Ｍの酢酸緩衝液
及び２×10-3Ｍの塩化カルシウムを含む0.3w/v％のソリ
ュブルスターチ溶液５mlに適当に希釈した酵素液0.2ml
を加え40℃で10分間反応した後、その反応液0.5mlをと
り、0.02Ｎ−硫酸水溶液15mlに混合して反応を停止さ
せ、さらにこの反応停止液に0.1Ｎヨウ素ヨウ化カリウ
ム溶液0.2mlを加え発色させ、ついで660ｎｍにおける吸
光度を測定して、40℃で10分間反応させることによりソ
リュブルスターチ15mgのヨウ素の呈色を完全に消失させ
る酵素量をいう。
の調製 バチルス ステアロサーモフイラス（Bacillus stearo
thermophilus）FERM−Ｐ NO. 2222をソリュブルスタ
ーチ ２w/v％、硝酸アンモニウム １w/v％、リン酸２
カリウム 0.1w/v％、硫酸マグネシウム・７水塩 0.05
w/v％、コーンステイーブリカー 0.5w/v％、炭酸カル
シウム １w/v％からなる殺菌した液体培地10に植菌
して、50℃で３日間通気撹拌培養した。得られた培養液
を遠心分離して、その上清を硫安0.7飽和で塩析しシク
ロデキストリングルカノトランスフェラーゼ（EC 2.4.
1.19）の活性約80,000単位を有する粗酵素標品を得た。
ここでいう活性１単位とはpH5.5、0.02Ｍの酢酸緩衝液
及び２×10-3Ｍの塩化カルシウムを含む0.3w/v％のソリ
ュブルスターチ溶液５mlに適当に希釈した酵素液0.2ml
を加え40℃で10分間反応した後、その反応液0.5mlをと
り、0.02Ｎ−硫酸水溶液15mlに混合して反応を停止さ
せ、さらにこの反応停止液に0.1Ｎヨウ素ヨウ化カリウ
ム溶液0.2mlを加え発色させ、ついで660ｎｍにおける吸
光度を測定して、40℃で10分間反応させることによりソ
リュブルスターチ15mgのヨウ素の呈色を完全に消失させ
る酵素量をいう。
(ii)原糖液の調製 濃度30％、pH6.5の澱粉（コーンスターチ）懸濁液に、
澱粉液化酵素剤（ノボ・インダストリー製造、商品名
ターマミール）を、澱粉固形物に対し0.1％加え、撹拌
しつつ95〜100℃で液化し、約30分間保った後、130℃で
20分間オートクレーブして、DE約4.0の澱粉液化液を得
た。
澱粉液化酵素剤（ノボ・インダストリー製造、商品名
ターマミール）を、澱粉固形物に対し0.1％加え、撹拌
しつつ95〜100℃で液化し、約30分間保った後、130℃で
20分間オートクレーブして、DE約4.0の澱粉液化液を得
た。
次いで、この液化液に、これと同容量のシュクロース60
％水溶液を混合し、更に、前記(i)の方法で調製したシ
クロデキストリングカノトランスフェラーゼを澱粉固形
物グラム当り10単位の割合で加え、pH5.5、温度65℃で2
0時間反応させた。この反応液を加熱し、100℃に15分間
保った後、冷却し、過して得られる液を、常法に従
って、活性炭で脱色し、Ｈ型及びＯＨ型イオン交換樹脂
により脱塩して精製し、更に濃縮して、濃度50％の糖液
を収率約93％で得た。この糖液は、マルトシルフラクト
シドを約29％含有し、他に、重合度がマルトシルフラク
トシドより大きい糖類約23％と、重合度がマルトシルフ
ラクトシドより小さい糖類約48％とを含有していた。な
お、本液はマルトトリオースをこん跡量しか含んでいな
かった。
％水溶液を混合し、更に、前記(i)の方法で調製したシ
クロデキストリングカノトランスフェラーゼを澱粉固形
物グラム当り10単位の割合で加え、pH5.5、温度65℃で2
0時間反応させた。この反応液を加熱し、100℃に15分間
保った後、冷却し、過して得られる液を、常法に従
って、活性炭で脱色し、Ｈ型及びＯＨ型イオン交換樹脂
により脱塩して精製し、更に濃縮して、濃度50％の糖液
を収率約93％で得た。この糖液は、マルトシルフラクト
シドを約29％含有し、他に、重合度がマルトシルフラク
トシドより大きい糖類約23％と、重合度がマルトシルフ
ラクトシドより小さい糖類約48％とを含有していた。な
お、本液はマルトトリオースをこん跡量しか含んでいな
かった。
１−Ｂ マルトトリオシルフラクトシド調製用原糖液 β−シクロデキストリンとシュクロースとをそれぞれ15
％ずつ含有する水溶液に、前記実験１−Ａ(i)の方法で
調製したシクロデキストリングルカノトランスフェラー
ゼをシクロデキストリン グラム当り15単位の割合で加
え、pH5.5、温度60℃で16時間反応させ、次いで、アス
ペルギルス属微生物由来のα−アミラーゼ剤（新日本化
学工業株式会社製造、商品名 スミチームＬ）をシクロ
デキストリン グラム当り３単位の割合で加え、更に４
時間反応させた。この反応液を、実験１−Ａの場合と同
様に、精製、濃縮して、濃度60の糖液を収率約90％で得
た。この糖液は、マルトトリオシルフラクトシドを約18
％含有し、他に、マルトテトラオース約３％、重合度が
マルトトリオシルフラクトシドより大きい糖類約８％及
び重合度がマルトトリオシルフラクトシドより小さい糖
類約71％を含有していた。
％ずつ含有する水溶液に、前記実験１−Ａ(i)の方法で
調製したシクロデキストリングルカノトランスフェラー
ゼをシクロデキストリン グラム当り15単位の割合で加
え、pH5.5、温度60℃で16時間反応させ、次いで、アス
ペルギルス属微生物由来のα−アミラーゼ剤（新日本化
学工業株式会社製造、商品名 スミチームＬ）をシクロ
デキストリン グラム当り３単位の割合で加え、更に４
時間反応させた。この反応液を、実験１−Ａの場合と同
様に、精製、濃縮して、濃度60の糖液を収率約90％で得
た。この糖液は、マルトトリオシルフラクトシドを約18
％含有し、他に、マルトテトラオース約３％、重合度が
マルトトリオシルフラクトシドより大きい糖類約８％及
び重合度がマルトトリオシルフラクトシドより小さい糖
類約71％を含有していた。
１−Ｃ イソマルトシルフラクトシド調製用原糖液 (i) レバン シュクラーゼの調製 脱脂大豆 ３w/v％、グルコース ２w/v％、シュクロー
ス ４w/v％、（NH4）2HPO4 0.6w/v％、MgSO4・７H2Ｏ
0.03w/v％、KCl 0.02w/v％、酢酸カルシウム 0.02w
/v％、MnSO4・４H2O 0.001w/v％、水道水からなる液体
培地60をpH7.0に調製し、120℃に20分間保って滅菌し
た後、バチルス・ズブチリスATCC 6051を植菌し、37℃
で３日間通気撹拌培養した。
ス ４w/v％、（NH4）2HPO4 0.6w/v％、MgSO4・７H2Ｏ
0.03w/v％、KCl 0.02w/v％、酢酸カルシウム 0.02w
/v％、MnSO4・４H2O 0.001w/v％、水道水からなる液体
培地60をpH7.0に調製し、120℃に20分間保って滅菌し
た後、バチルス・ズブチリスATCC 6051を植菌し、37℃
で３日間通気撹拌培養した。
培養終了後、培養液を遠心分離して上清を採取し、これ
に冷エタノールを等容量添加し、生じた沈澱を遠心分離
して採取、次いで１mM塩化カルシウムを含有する20mM酢
酸塩緩衝液（pH5.0）に溶解し、この溶液を同じ緩衝液
で一夜透析し、遠心分離した上清をDEAE−セルロースを
充填したカラムに流し、レバン シュクラーゼを吸着さ
せ、同じ緩衝液で溶出し、この溶出液を硫安塩析90％飽
和とし、生じた沈澱物を遠心分離にて採取し、同じ酢酸
塩緩衝液500mlに溶解してレバン シュクラーゼ液とし
た。本酵素は約120単位／mlの活性を示した。
に冷エタノールを等容量添加し、生じた沈澱を遠心分離
して採取、次いで１mM塩化カルシウムを含有する20mM酢
酸塩緩衝液（pH5.0）に溶解し、この溶液を同じ緩衝液
で一夜透析し、遠心分離した上清をDEAE−セルロースを
充填したカラムに流し、レバン シュクラーゼを吸着さ
せ、同じ緩衝液で溶出し、この溶出液を硫安塩析90％飽
和とし、生じた沈澱物を遠心分離にて採取し、同じ酢酸
塩緩衝液500mlに溶解してレバン シュクラーゼ液とし
た。本酵素は約120単位／mlの活性を示した。
なお、レバン シュクラーゼの活性は、次のようにして
測定した。
測定した。
10w/v％シュクロース、50ｍＭリン酸塩緩衝液、pH7.0お
よびレバン シュクラーゼを含有する全量２mlの反応液
を30℃に保ち、30分間後に、加熱して酵素を失活させ、
生じたグルコース量をグルコースオキシダーゼ法で測定
した。レバン シュクラーゼ１単位は、この条件で１分
間当りグルコースを１μモル生じる酵素量と定めた。
よびレバン シュクラーゼを含有する全量２mlの反応液
を30℃に保ち、30分間後に、加熱して酵素を失活させ、
生じたグルコース量をグルコースオキシダーゼ法で測定
した。レバン シュクラーゼ１単位は、この条件で１分
間当りグルコースを１μモル生じる酵素量と定めた。
(ii) 原糖液の調製 シュクロースとイソマルトースとをそれぞれ10％、40％
含有する水溶液に、前記(i)の方法で調製したレバン
シュクラーゼをシュクロース グラム当り２単位の割合
で加え温度35℃、pH5.5に保って40時間反応させた。こ
の反応液を、実験１−Ａの場合と同様に、精製、濃縮し
て、濃度60％の糖液を収率95％で得た。
含有する水溶液に、前記(i)の方法で調製したレバン
シュクラーゼをシュクロース グラム当り２単位の割合
で加え温度35℃、pH5.5に保って40時間反応させた。こ
の反応液を、実験１−Ａの場合と同様に、精製、濃縮し
て、濃度60％の糖液を収率95％で得た。
この糖液は、イソマルトシルフラクトシドを約20％含有
し、他に、重合度がイソマルトシルフラクトシドより大
きい糖類を約４％と、重合度がイソマルトシルフラクト
シドより小さい糖類約76％とを含有していた。
し、他に、重合度がイソマルトシルフラクトシドより大
きい糖類を約４％と、重合度がイソマルトシルフラクト
シドより小さい糖類約76％とを含有していた。
実験２． 原糖液の分画に及ぼす強酸性カチオン交換樹
脂の影響 ２−Ａ 高純度オリゴグルコシルフラクトシド回収に及
ぼす強酸性カチオン交換樹脂の塩型の影響 実験１で調製した原糖液を用いて、オリゴグルコシルフ
ラクトシドの回収に及ぼす強酸性交換樹脂の塩型の影響
を調べた。強酸性カチオン交換樹脂は、市販品 ダイヤ
イオンＳＫ 102（三菱化成工業株式会社製造）を、平
均粒径0.1〜0.3mmに調製して使用し、比較した塩型は、
Li+、Na+、K+、Mg 、Ca 、Rb 、Ba である。
脂の影響 ２−Ａ 高純度オリゴグルコシルフラクトシド回収に及
ぼす強酸性カチオン交換樹脂の塩型の影響 実験１で調製した原糖液を用いて、オリゴグルコシルフ
ラクトシドの回収に及ぼす強酸性交換樹脂の塩型の影響
を調べた。強酸性カチオン交換樹脂は、市販品 ダイヤ
イオンＳＫ 102（三菱化成工業株式会社製造）を、平
均粒径0.1〜0.3mmに調製して使用し、比較した塩型は、
Li+、Na+、K+、Mg 、Ca 、Rb 、Ba である。
カラムは、内径2.2cmのジャケット付ステンレス製で、
これに樹脂層の長さが10ｍにるように充填した。カラム
内温度を60℃に維持しつつ、これに濃度45％とした原糖
液を樹脂に対して10v/v％加え、更に60℃の温水をＳＶ
0.4の流速で流し、溶出される糖液を溶出順に分画採取
した。カラムから糖の溶出が終了に近づいた時点で、カ
ラムへの温水の注入を止め、代りに、既に分画採取して
いる糖液を溶出順に加え、続いて同様に温水を流した。
このような操作を４回繰り返して、Ｌ糖高含有画分、Ｌ
糖・オリゴグルコシルフラクトシド高含有画分、オリゴ
グルコシルフラクトシド高含有画分、オリゴグルコシル
フラクトシド・Ｓ糖高含有画分、Ｓ糖高含有画分の順に
溶出分画し、目的のオリゴグルコシルフラクトシドを70
％以上含有しているオリゴグルコシルフラクトシド高含
有画分を採取した。
これに樹脂層の長さが10ｍにるように充填した。カラム
内温度を60℃に維持しつつ、これに濃度45％とした原糖
液を樹脂に対して10v/v％加え、更に60℃の温水をＳＶ
0.4の流速で流し、溶出される糖液を溶出順に分画採取
した。カラムから糖の溶出が終了に近づいた時点で、カ
ラムへの温水の注入を止め、代りに、既に分画採取して
いる糖液を溶出順に加え、続いて同様に温水を流した。
このような操作を４回繰り返して、Ｌ糖高含有画分、Ｌ
糖・オリゴグルコシルフラクトシド高含有画分、オリゴ
グルコシルフラクトシド高含有画分、オリゴグルコシル
フラクトシド・Ｓ糖高含有画分、Ｓ糖高含有画分の順に
溶出分画し、目的のオリゴグルコシルフラクトシドを70
％以上含有しているオリゴグルコシルフラクトシド高含
有画分を採取した。
得られたオリゴグルコシルフラクトシド高含有画分中の
オリゴグルコシルフラクトシド含量の使用した原糖液中
のオリゴグルコシルフラクトシド含量に対する百分率を
オリゴグルコシルフラクトシド回収率とした。
オリゴグルコシルフラクトシド含量の使用した原糖液中
のオリゴグルコシルフラクトシド含量に対する百分率を
オリゴグルコシルフラクトシド回収率とした。
結果は、第１表に示した。
第１表の結果から明らかなように、高純度オリゴグルコ
シルフラクトシドを原糖液から前記方法で分画採取する
には、オリゴグルコシルフラクトシドが80％以上の高回
収率で採取できるアルカリ土類金属型強酸性カチオン交
換樹脂の使用が好適であることが判明した。
シルフラクトシドを原糖液から前記方法で分画採取する
には、オリゴグルコシルフラクトシドが80％以上の高回
収率で採取できるアルカリ土類金属型強酸性カチオン交
換樹脂の使用が好適であることが判明した。
なお、アルカリ金属型強酸性カチオン交換樹脂の使用で
は、オリゴグルコシルフラクトシドが徐々に加水分解を
受け、高純度オリゴグルコシルフラクトシドを高回収率
で採取することは不可能であった。
は、オリゴグルコシルフラクトシドが徐々に加水分解を
受け、高純度オリゴグルコシルフラクトシドを高回収率
で採取することは不可能であった。
２−Ｂ 高純度オリゴグルコシルフラクトシドの回収に
及ぼすアルカリ土類金属型カチオン交換樹脂の架橋度の
影響 実験１で調製した原糖液を用いて、オリゴグルコシルフ
ラクトシドの回収に及ぼすアルカリ土類金属型カチオン
交換樹脂の架橋度の影響を調べた。アルカリ金属型強酸
性交換樹脂は、第２表に示す市販の樹脂を、平均粒径0.
1〜0.3mmとし、Ca 型に調整して使用した。
及ぼすアルカリ土類金属型カチオン交換樹脂の架橋度の
影響 実験１で調製した原糖液を用いて、オリゴグルコシルフ
ラクトシドの回収に及ぼすアルカリ土類金属型カチオン
交換樹脂の架橋度の影響を調べた。アルカリ金属型強酸
性交換樹脂は、第２表に示す市販の樹脂を、平均粒径0.
1〜0.3mmとし、Ca 型に調整して使用した。
カラムの調整、原糖液の注入、溶出、分画は、実験２−
Ａと同様に行なった。
Ａと同様に行なった。
結果は、第３表に示した。
第３表の結果から明らかなように、高純度オリゴグルコ
シルフラクトシドを分画採取するには、オリゴグルコシ
ルフラクトシドが80％以上の高回収率で採取できる架橋
度６％以下のアルカリ土類金属型強酸性カチオン交換樹
脂の使用が好適であることが判明した。
シルフラクトシドを分画採取するには、オリゴグルコシ
ルフラクトシドが80％以上の高回収率で採取できる架橋
度６％以下のアルカリ土類金属型強酸性カチオン交換樹
脂の使用が好適であることが判明した。
以下、２〜３の実施例を述べる。
実施例１． マルトシルフラクトシドおよびマルトトリ
オシルフラクトシド 実験１−Ａと同様の方法で調製したマルトシルフラクト
シドおよびマルトトリオシルフラクトシド含量約45％の
糖液を原糖液とした。樹脂は、アルカリ土類金属型強酸
性カチオン交換樹脂（東京有機化学工業株式会社製造、
商品名ＸＴ−1007、Ca 型、架橋度６％）を使用し、内
径5.4cmのジャケット付ステンレス製カラムに水懸濁液
で充填し、その液が直列に流れるようにカラム４本を連
結して樹脂層全長を20ｍとした。カラム内温度を55℃に
維持しつつ、原糖液を樹脂に対して５v/v％加え、これ
に55℃の温水をＳＷ0.13で流して分画し、マルトシルフ
ラクトシドおよびマルトトリオシルフラクトシド含量70
％以上のオリゴグルコシルフラクトシド高含有画分を採
取した。
オシルフラクトシド 実験１−Ａと同様の方法で調製したマルトシルフラクト
シドおよびマルトトリオシルフラクトシド含量約45％の
糖液を原糖液とした。樹脂は、アルカリ土類金属型強酸
性カチオン交換樹脂（東京有機化学工業株式会社製造、
商品名ＸＴ−1007、Ca 型、架橋度６％）を使用し、内
径5.4cmのジャケット付ステンレス製カラムに水懸濁液
で充填し、その液が直列に流れるようにカラム４本を連
結して樹脂層全長を20ｍとした。カラム内温度を55℃に
維持しつつ、原糖液を樹脂に対して５v/v％加え、これ
に55℃の温水をＳＷ0.13で流して分画し、マルトシルフ
ラクトシドおよびマルトトリオシルフラクトシド含量70
％以上のオリゴグルコシルフラクトシド高含有画分を採
取した。
このオリゴグルコシルフラクトシド高含有画分に回収さ
れたマルトシルフラクトシドおよびマルトトリオシルフ
ラクトシドは、原糖液のマルトシルフラクトシドおよび
マルトトリオシルフラクトシドに対して約92％であっ
た。
れたマルトシルフラクトシドおよびマルトトリオシルフ
ラクトシドは、原糖液のマルトシルフラクトシドおよび
マルトトリオシルフラクトシドに対して約92％であっ
た。
実施例２． マルトシルフラクトシドおよびマルトトリ
オシルフラクトシド まず、第１回目の分画に際し、原糖液を樹脂に対して20
v/v％使用した以外は、実施例１と同様に分画した。分
画品の溶出パターンを図に示した。
オシルフラクトシド まず、第１回目の分画に際し、原糖液を樹脂に対して20
v/v％使用した以外は、実施例１と同様に分画した。分
画品の溶出パターンを図に示した。
図において、ＡはＬ糖高含有画分を示し、ＢはＬ糖・オ
リゴグルコシルフラクトシド高含有画分を示し、Ｃはオ
リゴグルコシルフラクトシド高含有画分を示し、Ｄはオ
リゴグルコシルフラクトシド・Ｓ糖高含有画分を示し、
ＥはＳ糖高含有画分を示す。
リゴグルコシルフラクトシド高含有画分を示し、Ｃはオ
リゴグルコシルフラクトシド高含有画分を示し、Ｄはオ
リゴグルコシルフラクトシド・Ｓ糖高含有画分を示し、
ＥはＳ糖高含有画分を示す。
その分画品の溶出順序は、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅの順であ
った。その中、分画品Ｃ（オリゴグルコシルフラクトシ
ド高含有画分）を採取し、分画品Ａ及びＥは除去した。
った。その中、分画品Ｃ（オリゴグルコシルフラクトシ
ド高含有画分）を採取し、分画品Ａ及びＥは除去した。
第２回目以降の分画は、同じカラムに分画品Ｂ、樹脂に
対して約７v/v％の原糖液及び分画品Ｄの順に加え、更
に55℃の温水を実施例１と同様に流してマルトシルフラ
クトシドおよびマルトトリオシルフラクトシド含量80％
以上のオリゴグルコシルフラクトシド高含有画分を採取
した。第２回目以降の分画操作を延べ20回繰り返して１
回当りの平均結果を求めたところ、マルトシルフラクト
シドおよびマルトトリオシルフラクトシドの回収率は約
91％の高収率であった。
対して約７v/v％の原糖液及び分画品Ｄの順に加え、更
に55℃の温水を実施例１と同様に流してマルトシルフラ
クトシドおよびマルトトリオシルフラクトシド含量80％
以上のオリゴグルコシルフラクトシド高含有画分を採取
した。第２回目以降の分画操作を延べ20回繰り返して１
回当りの平均結果を求めたところ、マルトシルフラクト
シドおよびマルトトリオシルフラクトシドの回収率は約
91％の高収率であった。
実施例３． マルトシルフラクトシドおよびマルトトリ
オシルフラクトシド 実験１−Ｂと同様の方法で調製したマルトシルフラクト
シドおよびマルトトリオシルフラクトシド含量約47％の
糖液を原糖液とした。樹脂は、アルカリ土類金属型強酸
性カチオン交換樹脂（ダウケミカル社製造、商品名 ダ
ウエックス50Ｗ×４、Mg 型、架橋度４％）を使用し、
実施例１と同じカラムに樹脂層全長が30ｍになるように
充填した。
オシルフラクトシド 実験１−Ｂと同様の方法で調製したマルトシルフラクト
シドおよびマルトトリオシルフラクトシド含量約47％の
糖液を原糖液とした。樹脂は、アルカリ土類金属型強酸
性カチオン交換樹脂（ダウケミカル社製造、商品名 ダ
ウエックス50Ｗ×４、Mg 型、架橋度４％）を使用し、
実施例１と同じカラムに樹脂層全長が30ｍになるように
充填した。
カラム内温度を65℃に維持しつつ、原糖液を樹脂に対し
て6.6v/v％加え、これに65℃の温水をＳＶ0.13の流速で
流して分画した。
て6.6v/v％加え、これに65℃の温水をＳＶ0.13の流速で
流して分画した。
得られた分画品を、溶出順に再度カラムにかけて同様に
分画し、マルトシルフラクトシドおよびマルトトリオシ
ルフラクトシド含量70％以上のオリゴグルコシルフラク
トシド高含有画分を採取した。
分画し、マルトシルフラクトシドおよびマルトトリオシ
ルフラクトシド含量70％以上のオリゴグルコシルフラク
トシド高含有画分を採取した。
マルトシルフラクトシドおよびマルトトリオシルフラク
トシドの回収率は約87％であった。
トシドの回収率は約87％であった。
実施例４． マルトシルフラクトシド 実験１−Ａで調製したマルトシルフラクトシド含量約29
％の糖液を原糖液とした。樹脂は、アルカリ土類金属型
強酸性カチオン交換樹脂（三菱化成工業株式会社製造、
商品名 ダイヤイオンＳＫ104、Ca 型、架橋度４％）
を使用し、カラムは実施例３と同様のものを使用した。
カラム内温度を60℃に維持しつつ、原糖液を樹脂に対し
て４v/v％加え、これに60℃の温水をＳＶ0.12の流速で
流して分画し、マルトシルフラクトシド含量70％以上の
オリゴグルコシルフラクトシド高含有画分を採取した。
％の糖液を原糖液とした。樹脂は、アルカリ土類金属型
強酸性カチオン交換樹脂（三菱化成工業株式会社製造、
商品名 ダイヤイオンＳＫ104、Ca 型、架橋度４％）
を使用し、カラムは実施例３と同様のものを使用した。
カラム内温度を60℃に維持しつつ、原糖液を樹脂に対し
て４v/v％加え、これに60℃の温水をＳＶ0.12の流速で
流して分画し、マルトシルフラクトシド含量70％以上の
オリゴグルコシルフラクトシド高含有画分を採取した。
マルトシルフラクトシドの回収率は、約85％であった。
実施例５． マルトシルフラクトシド まず、第１回目の分画に際し、原糖液を樹脂に対して10
v/v％使用した以外は、実施例４と同様に分画した。分
画品の溶出パターンは、図に示めされるものと同様で
Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅの順に分画した。その中、分画品Ｃ
（マルトシルフラクトシド高含有画分）を採取し、分画
品Ａ及びＥを除去した。
v/v％使用した以外は、実施例４と同様に分画した。分
画品の溶出パターンは、図に示めされるものと同様で
Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅの順に分画した。その中、分画品Ｃ
（マルトシルフラクトシド高含有画分）を採取し、分画
品Ａ及びＥを除去した。
第２回目以降の分画は、同じカラムに分画品Ｂ、樹脂に
対して約6.6v/v％の原糖液及び分画品Ｄの順に加え、更
に60℃の温水を実施例４と同様に流してマルトシルフラ
クトシド含量80％以上のオリゴグルコシルフラクトシド
高含有画分を採取した。
対して約6.6v/v％の原糖液及び分画品Ｄの順に加え、更
に60℃の温水を実施例４と同様に流してマルトシルフラ
クトシド含量80％以上のオリゴグルコシルフラクトシド
高含有画分を採取した。
第２回目以降の分画操作を延べ50回繰り返して、１回当
りの平均結果を求めたところ、マルトシルフラクトシド
の回収率は約84％であった。
りの平均結果を求めたところ、マルトシルフラクトシド
の回収率は約84％であった。
実施例６． イソマルトシルフラクトシド 実験１−Ｃで調製したイソマルトシルフラクトシド含量
約20％の糖液を原糖液とした。樹脂は、アルカリ土類金
属型強酸性カチオン交換樹脂（ダウケミカル社製造、商
品名 ダウエックス50Ｗ×１、Rb 型、架橋度１％）を
使用し、内径2.2cmのジャケット付カラムに水懸濁状で
充填した。この際、樹脂層長５ｍのカラム４本に充填
し、その液が直列に流れるようにカラム４本を連結して
樹脂層全長を20ｍとした。
約20％の糖液を原糖液とした。樹脂は、アルカリ土類金
属型強酸性カチオン交換樹脂（ダウケミカル社製造、商
品名 ダウエックス50Ｗ×１、Rb 型、架橋度１％）を
使用し、内径2.2cmのジャケット付カラムに水懸濁状で
充填した。この際、樹脂層長５ｍのカラム４本に充填
し、その液が直列に流れるようにカラム４本を連結して
樹脂層全長を20ｍとした。
カラム内温度を65℃に維持しつつ、原糖液を樹脂に対し
て５v/v％加え、これに65℃の温水をＳＷ0.2の流速で流
して分画した。
て５v/v％加え、これに65℃の温水をＳＷ0.2の流速で流
して分画した。
得られた分画品を溶出順に再度カラムにかけて同様に分
画し、イソマルトシルフラクトシド含量70％以上のオリ
ゴグルコシルフラクトシド高含有画分を採取した。
画し、イソマルトシルフラクトシド含量70％以上のオリ
ゴグルコシルフラクトシド高含有画分を採取した。
イソマルトシルフラクトシドの回収率は約90％であっ
た。
た。
図は、原糖液の溶出パターンの一例を示す図である。 図中の符号を説明すれば、次の通りである。 ＡはＬ糖高含有画分 ＢはＬ糖・オリゴグルコシルフラクトシド高含有画分 Ｃはオリゴグルコシルフラクトシド高含有画分 Ｄはオリゴグルコシルフラクトシド・Ｓ糖高含有画分 ＥはＳ糖高含有画分
Claims (3)
- 【請求項１】グルコース重合度が２および３から選ばれ
るオリゴグルコシル基にフラクトースがフラクトシド結
合しているオリゴグルコシルフラクトシド（以下、オリ
ゴグルコシルフラクトシドという。）の製造に際し、オ
リゴグルコシルフラクトシドとともにこれより重合度が
１以上大きい糖類（以下、Ｌ糖という。）と重合度が１
以上小さい糖類（以下、Ｓ糖という。）とを含有する糖
混合液を架橋度６％以下のアルカリ土類金属型強酸性カ
チオン交換樹脂を充填したカラムに流し、次いで水で溶
出し、Ｌ糖高含有画分、Ｌ糖・オリゴグルコシルフラク
トシド高含有画分、オリゴグルコシルフラクトシド高含
有画分、オリゴグルコシルフラクトシド・Ｓ糖高含有画
分、Ｓ糖高含有画分の順に分画し、固形物当り７０w/w
％以上のオリゴグルコシルフラクトシド高含有画分を採
取することを特徴とする高純度オリゴグルコシルフラク
シドの製造方法。 - 【請求項２】オリゴグルコシルフラクトシドを含有する
糖混合液をカラムに流すに際し、既に得られているＬ糖
・オリゴグルコシルフラクトシド高含有画分及びオリゴ
グルコシルフラクトシド・Ｓ糖高含有画分をともに流す
ことを特徴とする特許請求の範囲第（１）項記載の高純
度オリゴグルコシルフラクトシドの製造方法。 - 【請求項３】オリゴグルコシルフラクトシドを含有する
糖混合液をカラムに流すに際し、既に得られているＬ糖
・オリゴグルコシルフラクトシド高含有画分を流した後
に、オリゴグルコシルフラクトシドを含有する糖混合液
を流し、次いで既に得られているオリゴグルコシルフラ
クトシド・Ｓ糖高含有画分を流すことを特徴とする特許
請求の範囲第（１）項または第（２）項記載の高純度オ
リゴグルコシルフラクトシドの製造方法。
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|---|---|---|---|
| JP59022614A JPH0631285B2 (ja) | 1984-02-09 | 1984-02-09 | 高純度オリゴグルコシルフラクトシドの製造方法 |
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| JP59022614A JPH0631285B2 (ja) | 1984-02-09 | 1984-02-09 | 高純度オリゴグルコシルフラクトシドの製造方法 |
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