JPS5915401A - 固定化生理活性物質及びその製造法並びにその製造法に用いる担体 - Google Patents
固定化生理活性物質及びその製造法並びにその製造法に用いる担体Info
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- JPS5915401A JPS5915401A JP12283582A JP12283582A JPS5915401A JP S5915401 A JPS5915401 A JP S5915401A JP 12283582 A JP12283582 A JP 12283582A JP 12283582 A JP12283582 A JP 12283582A JP S5915401 A JPS5915401 A JP S5915401A
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- Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、固定化生理活性物質及び七の製造法並びにそ
の製造法に用いる担体に関し、更に詳しくは、高いリガ
ンド濃度を有し゛、かつ、安定であ石固定化生理活性物
質及びその製造法並びにその製造法に用いる担体に関す
る。
の製造法に用いる担体に関し、更に詳しくは、高いリガ
ンド濃度を有し゛、かつ、安定であ石固定化生理活性物
質及びその製造法並びにその製造法に用いる担体に関す
る。
生理活性物質を固定化して工業的に用いる際の固定化法
には種々の方法があるが、固定化物質の安定性、固定化
物質と反応物との非特異的反応性等を考慮すると、リガ
ンド（生理活性物質）を共有結合により不溶性担体に固
定化する方゛法が望ましい。
には種々の方法があるが、固定化物質の安定性、固定化
物質と反応物との非特異的反応性等を考慮すると、リガ
ンド（生理活性物質）を共有結合により不溶性担体に固
定化する方゛法が望ましい。
このような方法としては、臭化シアン法及び工ボキシ活
性化法〔有機合成化学、第３８巻、１２８〜１３８頁（
１９８０年〕〕があるが、前者は非特異的吸着が起こる
場合が多く、また、一度固定化されたりガントの結合が
不安定なために、リガンド。
性化法〔有機合成化学、第３８巻、１２８〜１３８頁（
１９８０年〕〕があるが、前者は非特異的吸着が起こる
場合が多く、また、一度固定化されたりガントの結合が
不安定なために、リガンド。
が漏出することが多いといり欠点があり、リガンドの結
合量も満足とはいえない。一方、後者の方法によシ調製
された特異的吸着体（固定化生理活性物質）は、優れた
安定性を有し、かつ、非特異的吸着が少ないという利点
があるが、リガンドを結合させる際に、高温の強アルカ
リ性条件下において処理しなくてはならないため、不安
定な生理し、アミノ銹導体に変換した抜、種々のりガン
トを結合させる方法も発明されているが、多く （Ａ
ＩＪガント、特に糖等の反応性の低いカルボニル基を有
する化合物との反応に長時間を要するという欠点がある
。
合量も満足とはいえない。一方、後者の方法によシ調製
された特異的吸着体（固定化生理活性物質）は、優れた
安定性を有し、かつ、非特異的吸着が少ないという利点
があるが、リガンドを結合させる際に、高温の強アルカ
リ性条件下において処理しなくてはならないため、不安
定な生理し、アミノ銹導体に変換した抜、種々のりガン
トを結合させる方法も発明されているが、多く （Ａ
ＩＪガント、特に糖等の反応性の低いカルボニル基を有
する化合物との反応に長時間を要するという欠点がある
。
！！、た、カルボジイミドを用いるアミン基とカルボキ
シル基とのカップリング反応を利用する方法もあるが、
この方法では、イソ尿素誘導体の形成やチャツプマン転
位等の副反応の起こる可能性があシ、また、最適酸度で
あるー１４．５においても、さらに高い水素イオン濃度
の条件下ではなおさら、リガンドが重合する副反応が起
こり易く、固定化物の収率は満足なものとけいえず、よ
り反応性の高い官能基を有する担体が望まれている。
シル基とのカップリング反応を利用する方法もあるが、
この方法では、イソ尿素誘導体の形成やチャツプマン転
位等の副反応の起こる可能性があシ、また、最適酸度で
あるー１４．５においても、さらに高い水素イオン濃度
の条件下ではなおさら、リガンドが重合する副反応が起
こり易く、固定化物の収率は満足なものとけいえず、よ
り反応性の高い官能基を有する担体が望まれている。
本発明者らは、前述の問題点を解消するため鋭意研究を
重ねた結果、エポキシ基を有する不溶性高分子又はエポ
キシ活性化不溶性高分子を、ヒドラジン及び／又はジヒ
ドラジド化合物と反応させて得たヒドラジン誘導体及び
／又はジヒドラジド肋導体を固定化用担体として用いる
ことによシ、糖醇の反応性の低い生理活性物質も穏和外
条件下゛で固定化することができ、かつ、得られ石固定
化物質が高いリガンド濃度を有するとともに安定である
ことを見出し、本発明を完成するに至った。
重ねた結果、エポキシ基を有する不溶性高分子又はエポ
キシ活性化不溶性高分子を、ヒドラジン及び／又はジヒ
ドラジド化合物と反応させて得たヒドラジン誘導体及び
／又はジヒドラジド肋導体を固定化用担体として用いる
ことによシ、糖醇の反応性の低い生理活性物質も穏和外
条件下゛で固定化することができ、かつ、得られ石固定
化物質が高いリガンド濃度を有するとともに安定である
ことを見出し、本発明を完成するに至った。
即ち、本発明の固定化生理活性物質及び不溶性高分子（
固定化用担体）は、 次式（１）！ １Ｏａｔ 合゛している不溶性高分子、残基又は工ｉ１？ ＝＊シ
？古性化不溶性高分子残基を；１１、Ｒ２及びｔはそｈ
ぞれ水素原子又は炭素数１〜５のアルキル基をＳｘは水
素原子、そのカルボニル基若しくはカルボキシル基を介
して結合しているη三理活性物質残基又は 次式： Ｘ、 −ＮＩＥＩ −（ＣＨ，）、−（式中
、Ｘ、−Ｎｕはそのアミノ基を介して結合している生理
活性物質残基をＳｙは２〜１０の整数を；それぞれ表わ
す。） で示される残基を： −Ｎ）ＩＮＨ−Ｃ−ｙ−ｃ−ＮＩ
ｎａｘ−は八 凸 その二つのヒドラジノ基を介して結合しているジヒドラ
ジド化合物残基を；Ｘは０又はｌを；それぞれ表わす。
固定化用担体）は、 次式（１）！ １Ｏａｔ 合゛している不溶性高分子、残基又は工ｉ１？ ＝＊シ
？古性化不溶性高分子残基を；１１、Ｒ２及びｔはそｈ
ぞれ水素原子又は炭素数１〜５のアルキル基をＳｘは水
素原子、そのカルボニル基若しくはカルボキシル基を介
して結合しているη三理活性物質残基又は 次式： Ｘ、 −ＮＩＥＩ −（ＣＨ，）、−（式中
、Ｘ、−Ｎｕはそのアミノ基を介して結合している生理
活性物質残基をＳｙは２〜１０の整数を；それぞれ表わ
す。） で示される残基を： −Ｎ）ＩＮＨ−Ｃ−ｙ−ｃ−ＮＩ
ｎａｘ−は八 凸 その二つのヒドラジノ基を介して結合しているジヒドラ
ジド化合物残基を；Ｘは０又はｌを；それぞれ表わす。
〕
で示されるものである。
前記式（１）で示されるもののうちＸが水素原子である
本発明の不溶性高分子（固定化用担体）は以下めように
して得ることができる。
本発明の不溶性高分子（固定化用担体）は以下めように
して得ることができる。
即ち、末端にエポキシ基が存在する側鎖を有する不溶性
高分子又はエポキシ活性化不溶性高分子を、ヒドラジン
類及び／又はジヒドラジド化合物と反応させることによ
り、 次式（ｎ） ！ ノ基を介して結合しているジヒドラジド化合物前記と同
義である。） で示される固定化用担体を得ることができる。
高分子又はエポキシ活性化不溶性高分子を、ヒドラジン
類及び／又はジヒドラジド化合物と反応させることによ
り、 次式（ｎ） ！ ノ基を介して結合しているジヒドラジド化合物前記と同
義である。） で示される固定化用担体を得ることができる。
末端にエポキシ基が存在する側鎖を有する、不溶性高分
子及びエポキシ活性化不溶性高分子は、アガロース、セ
ルロース、キチン、マンナン、ポリアクリルアミド系樹
脂、ポリビニルアルコール系樹脂等の水酸基を有する不
溶性高分子を、既知の方法〔有機合成化学、第３８巻、
１２８〜１３８頁（１９’ｉｏ年））に従い、エピクロ
ルヒドリン、エビブロムヒドリン等のエビハロヒドリン
；又は、エチレングリコールジグリシジルエーテル、１
．３−プロパンジオールジグリシジルエーテル、１，４
−ブタンジオールジグリシジルエーテル、１．５−ベン
タンジオールジグリシジルエーテル、１．６−ヘキザン
ジオールジグリシジルエーテル等のビスオキシラン化合
物客で処理することによシ得ることができる。
子及びエポキシ活性化不溶性高分子は、アガロース、セ
ルロース、キチン、マンナン、ポリアクリルアミド系樹
脂、ポリビニルアルコール系樹脂等の水酸基を有する不
溶性高分子を、既知の方法〔有機合成化学、第３８巻、
１２８〜１３８頁（１９’ｉｏ年））に従い、エピクロ
ルヒドリン、エビブロムヒドリン等のエビハロヒドリン
；又は、エチレングリコールジグリシジルエーテル、１
．３−プロパンジオールジグリシジルエーテル、１，４
−ブタンジオールジグリシジルエーテル、１．５−ベン
タンジオールジグリシジルエーテル、１．６−ヘキザン
ジオールジグリシジルエーテル等のビスオキシラン化合
物客で処理することによシ得ることができる。
担体として用いる不溶性高分子は、目的に応じて穏々の
形態で用いられる。例えば、アフィニティー吸着剤又は
固定化酵素に用いる場合には、吸着容置を高めたシ、接
触面積を大きくするため、多孔質の粒状のものが好まし
く、希薄な生理活性物質溶液の処理に用いる場合には、
多孔質の膜状ヒドラジン類としては、ヒドラジン水化物
、ヒドラジン水化物塩、ヒドラジン硫酸塩等のｆｆ１ｔ
ｈの形態のものが用いられる。
形態で用いられる。例えば、アフィニティー吸着剤又は
固定化酵素に用いる場合には、吸着容置を高めたシ、接
触面積を大きくするため、多孔質の粒状のものが好まし
く、希薄な生理活性物質溶液の処理に用いる場合には、
多孔質の膜状ヒドラジン類としては、ヒドラジン水化物
、ヒドラジン水化物塩、ヒドラジン硫酸塩等のｆｆ１ｔ
ｈの形態のものが用いられる。
ジヒドラジド化合物としては、シュウ酸ジヒドラジド、
マロン酸ジヒドラジド、コハク酸ジヒド９シト、グルタ
ル酸ジヒドラジド、アジピン酸ジヒドラジド、ピメリン
酸ジヒドラジド、スペリン酸ジヒドラジ゛ド、アゼライ
ン酸ジヒドラジド、七ノ（シン酸ジヒドラジド等の炭素
数２〜１２の直鎖状飽和ジカルボン酸ジヒドラジド喜マ
レイン酸ジヒドラジド、７マル酸ジヒドラジド等の不飽
和ジカルボン酸ジヒドラジド寥及びフタ′ル酸ジヒドラ
ジド、テレフタル酸ジヒドラジド等の芳香族ジカルボン
酸ジヒドラジド等が挙げられる。
マロン酸ジヒドラジド、コハク酸ジヒド９シト、グルタ
ル酸ジヒドラジド、アジピン酸ジヒドラジド、ピメリン
酸ジヒドラジド、スペリン酸ジヒドラジ゛ド、アゼライ
ン酸ジヒドラジド、七ノ（シン酸ジヒドラジド等の炭素
数２〜１２の直鎖状飽和ジカルボン酸ジヒドラジド喜マ
レイン酸ジヒドラジド、７マル酸ジヒドラジド等の不飽
和ジカルボン酸ジヒドラジド寥及びフタ′ル酸ジヒドラ
ジド、テレフタル酸ジヒドラジド等の芳香族ジカルボン
酸ジヒドラジド等が挙げられる。
これらのヒドラジン類及びジヒドラジド化合物は、単独
で又は二種以上の混合物として用いられる。
で又は二種以上の混合物として用いられる。
用いるヒト２ジＺ類及びジヒドラジド化合物のｍは、前
記エポキシ基を有する不溶性高分子又はエポキシ活性化
不溶性高分子１り（乾燥型■）当たシ、ヒドラ・ジン類
では０．００１〜０．５Ｆ、 ジヒドラジド化合物で
は、その種Ｍによって異なるが、一般には、０．００５
〜１ｆである。溶媒としては、一般にはＡ水が用いられ
、その量は前記不溶性高分子１ｆ（乾燥型ｉ）嶺たシ、
５〜ｌＯ−であシ、溶媒中には、必要に応じて、炭酸す
゛トリウム、塩酸等を適宜添加してもよい。以上の条件
で、０〜１００℃、好ましくは・４〜５０℃において、
０．５〜７２時間、好ましくは１〜４８時間反応させる
ことによυ、前記式（Ｉｆ）で示される固定化用担体を
得ることができる。
記エポキシ基を有する不溶性高分子又はエポキシ活性化
不溶性高分子１り（乾燥型■）当たシ、ヒドラ・ジン類
では０．００１〜０．５Ｆ、 ジヒドラジド化合物で
は、その種Ｍによって異なるが、一般には、０．００５
〜１ｆである。溶媒としては、一般にはＡ水が用いられ
、その量は前記不溶性高分子１ｆ（乾燥型ｉ）嶺たシ、
５〜ｌＯ−であシ、溶媒中には、必要に応じて、炭酸す
゛トリウム、塩酸等を適宜添加してもよい。以上の条件
で、０〜１００℃、好ましくは・４〜５０℃において、
０．５〜７２時間、好ましくは１〜４８時間反応させる
ことによυ、前記式（Ｉｆ）で示される固定化用担体を
得ることができる。
このようにして得た固定化用神体に生理活性物質を固定
化する方法は、生理活性物質のｉｆｆ類によシ、適宜選
択される。
化する方法は、生理活性物質のｉｆｆ類によシ、適宜選
択される。
生理活性物質が、乳糖、デキストラン硫酸、ヘパリン、
Ｎ−アセチルゲルコサオン、Ｎ−アセチルムラミン酸、
トリーＮ−アセチルキトトリオース、キチン、ブドウ糖
、麦芽糖、等の糖類；ムチン、酸性へ一糖タンパク質、
プロトロンビン、ノ・ブトグロビン、ゴナドトロピン等
の糖タンパク質；７レノシｙ１ケラシン、ネルボン、オ
キシネルボン、ガングリオシド等の糖脂質８グルコシド
、ガラクトシド、マンノシド、フルクトシト等の各創配
糖体；の他、カルボニル基、アルデヒド基、カルボキシ
ル基、アルコキシカルボニル基、アミンカルボニル基、
ハロホルミル基等の広義のカルボニル基を有する化合物
である場合には、以下のようにして固定化することがで
きる。
Ｎ−アセチルゲルコサオン、Ｎ−アセチルムラミン酸、
トリーＮ−アセチルキトトリオース、キチン、ブドウ糖
、麦芽糖、等の糖類；ムチン、酸性へ一糖タンパク質、
プロトロンビン、ノ・ブトグロビン、ゴナドトロピン等
の糖タンパク質；７レノシｙ１ケラシン、ネルボン、オ
キシネルボン、ガングリオシド等の糖脂質８グルコシド
、ガラクトシド、マンノシド、フルクトシト等の各創配
糖体；の他、カルボニル基、アルデヒド基、カルボキシ
ル基、アルコキシカルボニル基、アミンカルボニル基、
ハロホルミル基等の広義のカルボニル基を有する化合物
である場合には、以下のようにして固定化することがで
きる。
即ち、前記生理活性物質を、水素化シアノホウ素ナトリ
ウムの存在下において、前記式（Ｉｔ）で示される固定
化用担体と反応させることにより、目的とする固定化生
理活性物質を得ることができる。
ウムの存在下において、前記式（Ｉｔ）で示される固定
化用担体と反応させることにより、目的とする固定化生
理活性物質を得ることができる。
用いる水素化シアノホウ素ナトリウムの邦°は、前記固
定化用担体ｘｒ（乾燥重量）当たり、１０叩以上であれ
ばよいが、特に１００〜５００叩であることが好ましい
。生理活性物質の量は、そのｆ１類によって異なるが、
一般には、前記固定化用担体１Ｆ（乾燥′Ｍ′Ｒ）当た
シ、５０〜！１０（Ｉｆ７である。
定化用担体ｘｒ（乾燥重量）当たり、１０叩以上であれ
ばよいが、特に１００〜５００叩であることが好ましい
。生理活性物質の量は、そのｆ１類によって異なるが、
一般には、前記固定化用担体１Ｆ（乾燥′Ｍ′Ｒ）当た
シ、５０〜！１０（Ｉｆ７である。
溶媒としては、一般には、リン酸水素二カリ１ウノ、水
溶液、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、炭酸
緩衝液、重炭酸緩衝液等が用いられ、その田は８〜１ｏ
であることが好ましく、その量は前記固定化用担体ＩＦ
（乾燥重量）尚たυ、３〜２０ ｍｌであることが好ま
しい。以上の条件で、０〜１００℃、好ましくは４〜８
０℃において１〜７２時間、好ましくは２〜４８時間反
応させることＫＪ：υ、目的とする固定化生理活性物質
を得ることができる。このようにして得た固定化生理活
性物質は、必要に応じて、無水酢酸で処理して、未反応
部位をアセチル化してもよい。
溶液、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、炭酸
緩衝液、重炭酸緩衝液等が用いられ、その田は８〜１ｏ
であることが好ましく、その量は前記固定化用担体ＩＦ
（乾燥重量）尚たυ、３〜２０ ｍｌであることが好ま
しい。以上の条件で、０〜１００℃、好ましくは４〜８
０℃において１〜７２時間、好ましくは２〜４８時間反
応させることＫＪ：υ、目的とする固定化生理活性物質
を得ることができる。このようにして得た固定化生理活
性物質は、必要に応じて、無水酢酸で処理して、未反応
部位をアセチル化してもよい。
次に、生理活性物質が、コンカナバリンＡ（以下、［ｃ
ｏｎＡ、ｊという。）、ウシＪｆｉ＋清アルブミン（以
下、［Ｂ８ＡＪという。）、γ〜グロブリン（抗体）、
酵素、植物性血球凝集素（ＰＨＡ） 、フィブロネクチ
ン、プロティンＡ等の蛋白質；キニン、副腎皮質刺激ホ
ルモン放出因子（Ｃ几Ｆ）、カルシトニン、グルカゴン
等のペプチド；核タンパク質、色素タンパク質、糖タン
パク質、リンタンパク質性の複合タンパク質：種々のア
ミノ酸；ヒスタミン、ドパミン、グル：ｆｔＭン、トリ
ブタミン等の／ｌＬｙ ミンｉ等のアミノ基を有する化
合物である場合ＶＣＩｒｉ、以下のよりにして固定化す
ることができる。
ｏｎＡ、ｊという。）、ウシＪｆｉ＋清アルブミン（以
下、［Ｂ８ＡＪという。）、γ〜グロブリン（抗体）、
酵素、植物性血球凝集素（ＰＨＡ） 、フィブロネクチ
ン、プロティンＡ等の蛋白質；キニン、副腎皮質刺激ホ
ルモン放出因子（Ｃ几Ｆ）、カルシトニン、グルカゴン
等のペプチド；核タンパク質、色素タンパク質、糖タン
パク質、リンタンパク質性の複合タンパク質：種々のア
ミノ酸；ヒスタミン、ドパミン、グル：ｆｔＭン、トリ
ブタミン等の／ｌＬｙ ミンｉ等のアミノ基を有する化
合物である場合ＶＣＩｒｉ、以下のよりにして固定化す
ることができる。
即ち、前記式（ＩＩ）で示される固定化用担体を、水素
化シアノホウ素ナトリウムの存在下において、次式（１
）１ ０ＨＣ−（ＣＨ，）、！−ＣＨ０（１）（式中、
７は２〜１ｏの整数を表わす。）で示される直鎖状ジア
ルデヒド化合物と反応させて、 次式１ で示されるアルデヒド活性化不溶性高分子とする。
化シアノホウ素ナトリウムの存在下において、次式（１
）１ ０ＨＣ−（ＣＨ，）、！−ＣＨ０（１）（式中、
７は２〜１ｏの整数を表わす。）で示される直鎖状ジア
ルデヒド化合物と反応させて、 次式１ で示されるアルデヒド活性化不溶性高分子とする。
用いる水素化シアノホウ素ナトリウムの爪は、担体の含
水ＸＫよって異なるが、前記固定化用担体ＩＰ（乾燥重
量）当たシ、５０■以上であれば一応の目的に達するが
特に８０〜１，０００岬であることが好ましい。直鎖状
ジアルデヒド化合物としては、一般には、炭素数２〜１
０のもの、例えば、グリオキサール、プロパンジアール
、ブタ、ンジアール、グルタルアルデヒド（ペンタトシ
テール）、デカンジアール等が単独で又は二種以上の混
合物として用いら、れる。溶媒としては、水が用いられ
、その量は前記固定化用担体１２（乾燥重量）当たシ、
５〜２０ｔｎｌであることが好ましい。以上の条件で、
０〜８０℃、好ましくは２０〜４０℃において、０．５
〜１０時間、好ましくは１〜４時間反応させることによ
υ、前記アルデヒド活性化不溶性高分子を得ることがで
きる。
水ＸＫよって異なるが、前記固定化用担体ＩＰ（乾燥重
量）当たシ、５０■以上であれば一応の目的に達するが
特に８０〜１，０００岬であることが好ましい。直鎖状
ジアルデヒド化合物としては、一般には、炭素数２〜１
０のもの、例えば、グリオキサール、プロパンジアール
、ブタ、ンジアール、グルタルアルデヒド（ペンタトシ
テール）、デカンジアール等が単独で又は二種以上の混
合物として用いら、れる。溶媒としては、水が用いられ
、その量は前記固定化用担体１２（乾燥重量）当たシ、
５〜２０ｔｎｌであることが好ましい。以上の条件で、
０〜８０℃、好ましくは２０〜４０℃において、０．５
〜１０時間、好ましくは１〜４時間反応させることによ
υ、前記アルデヒド活性化不溶性高分子を得ることがで
きる。
次いで、このアルデヒド活性化不溶性高分子を、水素化
シアノホウ素ナトリウムの存在下において、前記生理活
性物質と反応させることにより、目的とする固定化生理
活性物質を得ることができる。
シアノホウ素ナトリウムの存在下において、前記生理活
性物質と反応させることにより、目的とする固定化生理
活性物質を得ることができる。
この時、用いる溶媒としては、リン酸緩衝液、酢酸緩衝
液、ホウ酸緩衝液、炭酸緩衝液等が挙げられ、その−■
は５〜８であることが好“ましく、その量はアルデヒド
活性化不溶性高分子ｘｒ’（乾燥重量）当たル、５〜４
０ｍ１であることが好まし）。
液、ホウ酸緩衝液、炭酸緩衝液等が挙げられ、その−■
は５〜８であることが好“ましく、その量はアルデヒド
活性化不溶性高分子ｘｒ’（乾燥重量）当たル、５〜４
０ｍ１であることが好まし）。
用いる水素化ンアノポウ素ナトリウムの量は、アルデヒ
ド活性化不溶性高分子ｘｒ（乾燥重量）当九ル、１００
哩以上であればよいが、Ｉ待に２００〜４００哩である
ことが好ましい。生理活性物質の量は、その種類によつ
−〔異たるか１．一般には、アルデヒド活性化不溶性高
分子ｘｒ（乾燥重用）当たセ、１００〜１，０００キで
ある。以上の条件で、０〜８０℃、好ましくは４〜４０
℃において、５〜１００時間、好ましくは１２〜７２時
間反応させる仁とによシ、目的とする固定化生理活性物
質を得る仁とができる。
ド活性化不溶性高分子ｘｒ（乾燥重量）当九ル、１００
哩以上であればよいが、Ｉ待に２００〜４００哩である
ことが好ましい。生理活性物質の量は、その種類によつ
−〔異たるか１．一般には、アルデヒド活性化不溶性高
分子ｘｒ（乾燥重用）当たセ、１００〜１，０００キで
ある。以上の条件で、０〜８０℃、好ましくは４〜４０
℃において、５〜１００時間、好ましくは１２〜７２時
間反応させる仁とによシ、目的とする固定化生理活性物
質を得る仁とができる。
一方、生理活性物質が、前述した蛋白質、ペプチド、複
合タンパク質、アミノ酸、ヘパリン、Ｎ−アセチルムシ
オン酸１及びバルミチン酸、オレイン酸等の脂肪酸；ペ
ニシリン、プロスタグランジン；等のカルボキシル基を
有する化合物である場合には、以下のようにして固定化
することができる。
合タンパク質、アミノ酸、ヘパリン、Ｎ−アセチルムシ
オン酸１及びバルミチン酸、オレイン酸等の脂肪酸；ペ
ニシリン、プロスタグランジン；等のカルボキシル基を
有する化合物である場合には、以下のようにして固定化
することができる。
即ち、前記生理活性物質を、カルボジイミド化合物の存
在下において、前記式（ＩＩ）で示される固定化用担体
と反応させることによシ、目的とする固定化用担体、性
物質を得ることができる。用いるカルボジイミド化合物
としては、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロ
ピル）カルボジイミド・塩酸塩（以下、ｊｌｉ３ＤｃＪ
という。）、１−シクロへキシル−３−（２−モルホリ
ノエチル）カルボジイミド・メソーＰ−トルエンスルポ
ン酸塩、ジシクロへキシルカルボジイミド等が単独で又
は二種以上のも合物として用いられ、その量は前記固定
化用担体１１（乾燥型ｊｆｉ′）ｓたり、１０〜２００
岬であることが好オしい。生理活性物質の月は、その穏
類によって異方るが、一般には、前記固定化用担体ｘｐ
（乾燥重量）尚たシ、３０〜１００岬である。溶媒とし
ては、一般には、水が用いられ、その量目、前記固定化
用担体１１ （乾燥重量）尚たυ、２〜１０−であシ、
溶媒中には、必要に応じて、塩化ナトリウム、塩化カリ
ウム等を適宜添加してもよい。以上の条件で、０〜８０
℃、好ましくけ４〜４０℃において、１０〜１００時間
、好寸しくは２４〜７２時間反応させることにより、目
的とする固定化生理活性物質を（ｌることかできる。
在下において、前記式（ＩＩ）で示される固定化用担体
と反応させることによシ、目的とする固定化用担体、性
物質を得ることができる。用いるカルボジイミド化合物
としては、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロ
ピル）カルボジイミド・塩酸塩（以下、ｊｌｉ３ＤｃＪ
という。）、１−シクロへキシル−３−（２−モルホリ
ノエチル）カルボジイミド・メソーＰ−トルエンスルポ
ン酸塩、ジシクロへキシルカルボジイミド等が単独で又
は二種以上のも合物として用いられ、その量は前記固定
化用担体１１（乾燥型ｊｆｉ′）ｓたり、１０〜２００
岬であることが好オしい。生理活性物質の月は、その穏
類によって異方るが、一般には、前記固定化用担体ｘｐ
（乾燥重量）尚たシ、３０〜１００岬である。溶媒とし
ては、一般には、水が用いられ、その量目、前記固定化
用担体１１ （乾燥重量）尚たυ、２〜１０−であシ、
溶媒中には、必要に応じて、塩化ナトリウム、塩化カリ
ウム等を適宜添加してもよい。以上の条件で、０〜８０
℃、好ましくけ４〜４０℃において、１０〜１００時間
、好寸しくは２４〜７２時間反応させることにより、目
的とする固定化生理活性物質を（ｌることかできる。
本発明の製造法如よれば、穏第１１な条件−Ｆで、かつ
、反応中の〆＋調璽章行なうことなく、シかも、従来法
に比し短い反応時間で目的とする固定化生理活性物質を
得るととができる。さらに、得られた固定化生理活性物
質は、従来のものに比し、高いリガンド濃度を有してい
る。
、反応中の〆＋調璽章行なうことなく、シかも、従来法
に比し短い反応時間で目的とする固定化生理活性物質を
得るととができる。さらに、得られた固定化生理活性物
質は、従来のものに比し、高いリガンド濃度を有してい
る。
以下、実施例により本発明を更に詳細に説明する。
実施例１
（１） ヒドラジンアガロースの調製アガロースとし
てファルマシア社製のセファロース４’ Ｂを用いた。
てファルマシア社製のセファロース４’ Ｂを用いた。
グラスフィルター上で水でよく洗浄後、吸引済過したア
ガロース２０Ｆをフラスコに入れ、水３０ ｍｌ 、
２ Ｍ Ｎａ０）１水溶液１３ｍｔ及びエピクロルヒド
リン３ ｍｌを順次加えた。懸濁液を４０℃のインキュ
ベーター中で２時間振盪後、グラスノイルクー上で水で
充分に洗浄してエポキシ活性化アガロースを得だ。この
エポキシ活性化アガロースに導入されたエポキシ基の凧
をＮａｔ Ｓｔ Ｏｓを用いる中和滴定法により測定し
たところ、乾燥重量１ｆ当たυ、約５００μｍｏｌｅの
エボギシ基が導入されていた。
ガロース２０Ｆをフラスコに入れ、水３０ ｍｌ 、
２ Ｍ Ｎａ０）１水溶液１３ｍｔ及びエピクロルヒド
リン３ ｍｌを順次加えた。懸濁液を４０℃のインキュ
ベーター中で２時間振盪後、グラスノイルクー上で水で
充分に洗浄してエポキシ活性化アガロースを得だ。この
エポキシ活性化アガロースに導入されたエポキシ基の凧
をＮａｔ Ｓｔ Ｏｓを用いる中和滴定法により測定し
たところ、乾燥重量１ｆ当たυ、約５００μｍｏｌｅの
エボギシ基が導入されていた。
このエポキシ活性化アガロース１容（２０ｒ）に８０ｃ
Ｘヒドラジン水化物水溶液１．５容（３０ｍ／りを加え
、４０℃のインキュベーター中で１時間半振盪した。反
応後、グラスフィルター上で水で充分に洗浄してヒドラ
ジンアガロースを得た。
Ｘヒドラジン水化物水溶液１．５容（３０ｍ／りを加え
、４０℃のインキュベーター中で１時間半振盪した。反
応後、グラスフィルター上で水で充分に洗浄してヒドラ
ジンアガロースを得た。
（２）固定化乳糖の調製
（１）で得たヒドラジンアガロース２Ｐ〔乾燥重量（湿
重）１ｚｏＰ）：Ｉに、乳糖５２０岬と水素化シアノホ
ウ素ナトリウム２５６■とを０．２ Ｍ Ｋ、 １（Ｐ
Ｏ。
重）１ｚｏＰ）：Ｉに、乳糖５２０岬と水素化シアノホ
ウ素ナトリウム２５６■とを０．２ Ｍ Ｋ、 １（Ｐ
Ｏ。
水溶液１５ｍｇに溶解したものを加え、室温で３日間振
盪し、た。反応後、グラスフィルター上で水１０ｒｎ！
、及びｏ、 ２ Ｍ Ｃ）Ｉ３’ＣＣ００Ｎ水溶液１０
ｍ１で順次洗浄した。次いて、無水酢酸５ ｍｌを加え
、０℃で３０分間反応さｊせ売後、更に、無水酢酸５ｍ
１！を加え、室温で３０分間処理して、未反応の（乳糖
が固定化されていない）ヒドラジン残基をアセチル化１
７た。反応後、水、０．１ Ｍ Ｎａ０）Ｉ水溶液、水
、リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＥ）で１バ次洗浄して
、乳糖結合アガロースを得た。
盪し、た。反応後、グラスフィルター上で水１０ｒｎ！
、及びｏ、 ２ Ｍ Ｃ）Ｉ３’ＣＣ００Ｎ水溶液１０
ｍ１で順次洗浄した。次いて、無水酢酸５ ｍｌを加え
、０℃で３０分間反応さｊせ売後、更に、無水酢酸５ｍ
１！を加え、室温で３０分間処理して、未反応の（乳糖
が固定化されていない）ヒドラジン残基をアセチル化１
７た。反応後、水、０．１ Ｍ Ｎａ０）Ｉ水溶液、水
、リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＥ）で１バ次洗浄して
、乳糖結合アガロースを得た。
実施例２
（１） アジピン酸ジヒドラジドアガロースの調製ア
ガロースとしてファルマシア社製のセファロースＣＬ
６Ｂ を用いた。実施例１（１）と同様に処理すること
によυ得だエポキシ活性化アガロ・−スｌｔに、アジピ
ン酸ジヒドラジド１１５２を＋１．１ ＭＮａ Ｉ Ｃ
Ｏｓ水溶液に溶解し塩酸でｒＪ＋を９に調整した溶液を
加え、４０℃で一夜振盪した。反応後、グラスフィルタ
ー上で０．２ Ｍ ＮＡＣｔ水溶液で充分に洗浄してア
ジピン酸ジヒドラジドアガロースを得た。
ガロースとしてファルマシア社製のセファロースＣＬ
６Ｂ を用いた。実施例１（１）と同様に処理すること
によυ得だエポキシ活性化アガロ・−スｌｔに、アジピ
ン酸ジヒドラジド１１５２を＋１．１ ＭＮａ Ｉ Ｃ
Ｏｓ水溶液に溶解し塩酸でｒＪ＋を９に調整した溶液を
加え、４０℃で一夜振盪した。反応後、グラスフィルタ
ー上で０．２ Ｍ ＮＡＣｔ水溶液で充分に洗浄してア
ジピン酸ジヒドラジドアガロースを得た。
（２）固定化デキストラン硫酸の調製
（１）で得たアジピン酸ジヒドラジドアガロースｘｏｏ
ｒ（乾燥重量（湿容積］ｔ）〕に、デキストラン硫酸（
ファルマシア社製）２６ｖと水素化シアノホウ素ナトリ
ウム１２．８ Ｆとを０．２ Ｍ ＩＣ７）ＬＰＯ，
水溶液７５０ｍｇに溶解したものを加え、室温で３日間
振盪した。反応後、グラスフィルター上で水、０．２
Ｍ ＣＩ、Ｃ００ＮＲ水溶液で順次洗浄した。
ｒ（乾燥重量（湿容積］ｔ）〕に、デキストラン硫酸（
ファルマシア社製）２６ｖと水素化シアノホウ素ナトリ
ウム１２．８ Ｆとを０．２ Ｍ ＩＣ７）ＬＰＯ，
水溶液７５０ｍｇに溶解したものを加え、室温で３日間
振盪した。反応後、グラスフィルター上で水、０．２
Ｍ ＣＩ、Ｃ００ＮＲ水溶液で順次洗浄した。
次弓で、無水酢酸２５０ ｍｌを加え、０℃で３０分間
振盪後、更・に、無水酢酸２５０ ｍｌを加え、室温で
３０分間振盪して、未反応の（デキストラン硫酸が固定
化されていない）アジピン酸ジヒドラジド残基をアセチ
ル化した。反応後、水、０．１ＭＮａＯＨ水溶液、水、
ＰＩ３５で順次洗浄して、デキストラン硫酸結合アガロ
ースを得た。反応前の前記デキストラン硫酸含有０．２
Ｍ Ｋ、１ＩＰＯ，水溶液及び反応後の上澄み液中の
デキストラン硫酸をフェノール硫酸法に従い測定したと
ころ、得られたデキストラン硫酸結合アガロースには、
用いたデキストラン硫酸の２５ ％が結合していること
が判明した。
振盪後、更・に、無水酢酸２５０ ｍｌを加え、室温で
３０分間振盪して、未反応の（デキストラン硫酸が固定
化されていない）アジピン酸ジヒドラジド残基をアセチ
ル化した。反応後、水、０．１ＭＮａＯＨ水溶液、水、
ＰＩ３５で順次洗浄して、デキストラン硫酸結合アガロ
ースを得た。反応前の前記デキストラン硫酸含有０．２
Ｍ Ｋ、１ＩＰＯ，水溶液及び反応後の上澄み液中の
デキストラン硫酸をフェノール硫酸法に従い測定したと
ころ、得られたデキストラン硫酸結合アガロースには、
用いたデキストラン硫酸の２５ ％が結合していること
が判明した。
実施例３
（１）アルデヒド活性化アガロースの調製実施例２（１
）と同様に処理することによシ得たアジピン酸ジヒドラ
ジドアガロースに、２５％グルタ４・アルデヒド水溶Ｗ
Ｌ１ ｍｌ及び水素化シアノポウ素ナトリウム８２岬を
加えて、４０℃のイン・ヤニベーター中で２時間振盪後
、グラスフィルター上で水で充分に洗浄してアルデヒド
活性化アガロースを得た。
）と同様に処理することによシ得たアジピン酸ジヒドラ
ジドアガロースに、２５％グルタ４・アルデヒド水溶Ｗ
Ｌ１ ｍｌ及び水素化シアノポウ素ナトリウム８２岬を
加えて、４０℃のイン・ヤニベーター中で２時間振盪後
、グラスフィルター上で水で充分に洗浄してアルデヒド
活性化アガロースを得た。
（２）固定化Ｃａｎ Ａ の調製
（１）で、得たアルデヒド活性化アガロース】７に、Ｃ
ｏｎＡ１００＋ｎＩｉ及びメチル−α−Ｄ−マンノシド
１１０ｑを溶解した０、 ２ Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７
，０）２祠を加えた後、水素化シアノホウ素ナトリウム
２４りを加えて、４℃のインキュベーター中で２目間振
盪した。反応後、上清を除き、０．２Ｍリン酸緩衝液で
充分に洗浄してＣｏｎＡ 結合アガロースを得だ。
ｏｎＡ１００＋ｎＩｉ及びメチル−α−Ｄ−マンノシド
１１０ｑを溶解した０、 ２ Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７
，０）２祠を加えた後、水素化シアノホウ素ナトリウム
２４りを加えて、４℃のインキュベーター中で２目間振
盪した。反応後、上清を除き、０．２Ｍリン酸緩衝液で
充分に洗浄してＣｏｎＡ 結合アガロースを得だ。
（３） リガンド濃度の測定
」二清及び洗浄液中の非結合残存ＣｏｎＡの足を、その
２８０皿における吸収の測定値よシ３′１出することに
よって、アガロースに結合したＣ ｏ ｎ ＡＱＬｌを
算出した。尚、対照として、ＣＮＢｒ法に、ｌ１７アガ
ロースに結合させた酵素〔千畑一部 夕１著：“アフィ
ニティークロマトグラフィー”、４０頁。
２８０皿における吸収の測定値よシ３′１出することに
よって、アガロースに結合したＣ ｏ ｎ ＡＱＬｌを
算出した。尚、対照として、ＣＮＢｒ法に、ｌ１７アガ
ロースに結合させた酵素〔千畑一部 夕１著：“アフィ
ニティークロマトグラフィー”、４０頁。
東京、講談社（１９７（１年）〕（対照１）、過ヨウｉ
酸酸化法によυ各錘多糖に結合させたＢＳＡ、（Ｉｍｍ
ｕｎｏｌｏｇｙ、 第２０巻、 １０６１〜１０６５
頁（１９７１年）〕（対照２）及びヒドラジド誘導体に
結合させたｎｓ人（Ｂｌｏｅ）ｔｅｍｌｔｒｙ、第８巻
、 ４０７４−４０８２頁（１９６９年）〕（対照３
）を用いた。結果を第１表に示す。
酸酸化法によυ各錘多糖に結合させたＢＳＡ、（Ｉｍｍ
ｕｎｏｌｏｇｙ、 第２０巻、 １０６１〜１０６５
頁（１９７１年）〕（対照２）及びヒドラジド誘導体に
結合させたｎｓ人（Ｂｌｏｅ）ｔｅｍｌｔｒｙ、第８巻
、 ４０７４−４０８２頁（１９６９年）〕（対照３
）を用いた。結果を第１表に示す。
第１表
表から、本発明の固定化生理活性物質は従来のものに比
し高いリガンド濃度を有するとと妙１り刀翫る。
し高いリガンド濃度を有するとと妙１り刀翫る。
実施例４
固定化１３ＳＡのに′製
実施例１（１）と同様に処理することにより得たエポキ
シ活性化アガロース１０２に８０％ヒドラジン水化物水
溶液１５−を加え、４０℃のインキューターター中で１
時間半振盪した。反応後、グラスフィルター」二で水で
充分に洗浄し、フェノールツクレインにより呈色し力く
なつたことを確認した。
シ活性化アガロース１０２に８０％ヒドラジン水化物水
溶液１５−を加え、４０℃のインキューターター中で１
時間半振盪した。反応後、グラスフィルター」二で水で
充分に洗浄し、フェノールツクレインにより呈色し力く
なつたことを確認した。
次いで、Ｂ５Ａ３０ｆｆ９を溶解した０、 ５ Ｍ Ｎ
ｎｅｔ水溶液２−を加えた後、ＥＤＣ３３グを加えた。
ｎｅｔ水溶液２−を加えた後、ＥＤＣ３３グを加えた。
−１を５に調整後、室温で一夜振盪した後、更に、Ｆ！
ＤＣ３３岬を加えて一夜振盪した。反応後、グラスフィ
ルター上で０．５ Ｍ ＮａＣ１水溶液８ ｍＰ、及び
水］００ｍＡで順次洗浄して、ＢＳＡ結合アガロースを
得だ。
ＤＣ３３岬を加えて一夜振盪した。反応後、グラスフィ
ルター上で０．５ Ｍ ＮａＣ１水溶液８ ｍＰ、及び
水］００ｍＡで順次洗浄して、ＢＳＡ結合アガロースを
得だ。
洗浄液中の非結合残存ＢＳ＆の月゛を、その２８０ｆｉ
ｆｆｌにおける吸収の測定値より算出することによって
、得られたＢｓＡ結合アガロースには、湿重量ｌｆ当た
９４７哩のｌ３ＳＡが結合ｌ〜ているととが判明した。
ｆｆｌにおける吸収の測定値より算出することによって
、得られたＢｓＡ結合アガロースには、湿重量ｌｆ当た
９４７哩のｌ３ＳＡが結合ｌ〜ているととが判明した。
実施例５
（１） アジピン酸ジヒドラジドアガｑ９−スの調製
実施例１（１）と同様に処理することにより得たエポキ
シ活性化アガロース２０１（湿重量）ＶＣ，アジピン酸
ジヒドラジド２．３２を０．１ Ｍ ＮＡ、ＣＯ，水゛
溶液に溶解し塩酸で−１を９に調整した溶液を加え、室
温で一夜振盪した。反応後、グラスフィルター上で、洗
浄７１１がトリニトロベンゼンスルポン酸（ＴＮＢＳ）
と反応を示さなくなる寸で、０．２ＭＮａＣ１水溶
液約５００ｍ１！で洗浄してアジピン酸ジヒドラジドア
ガロースを得た。
実施例１（１）と同様に処理することにより得たエポキ
シ活性化アガロース２０１（湿重量）ＶＣ，アジピン酸
ジヒドラジド２．３２を０．１ Ｍ ＮＡ、ＣＯ，水゛
溶液に溶解し塩酸で−１を９に調整した溶液を加え、室
温で一夜振盪した。反応後、グラスフィルター上で、洗
浄７１１がトリニトロベンゼンスルポン酸（ＴＮＢＳ）
と反応を示さなくなる寸で、０．２ＭＮａＣ１水溶
液約５００ｍ１！で洗浄してアジピン酸ジヒドラジドア
ガロースを得た。
（２）固定化ＢＳＡの調製
（りで得たアジピン酸ジヒドラジドアガロースＩＶに、
ＢＡＡ ５（ＩＰを溶解した（１．５ Ｍ Ｎｎｅｔ水
溶液２ｒｎｅを加えた後、１ＤＤ０３３■を加えた。−
１を５に調整後、室温で一夜振盪した後、更に、ＥＤＣ
３３ηを加えて一夜振盪した。反応後、グラスフィルタ
ー上で０．５ Ｍ ＮａＣＬ水溶液水溶液８グｌｉｏ。
ＢＡＡ ５（ＩＰを溶解した（１．５ Ｍ Ｎｎｅｔ水
溶液２ｒｎｅを加えた後、１ＤＤ０３３■を加えた。−
１を５に調整後、室温で一夜振盪した後、更に、ＥＤＣ
３３ηを加えて一夜振盪した。反応後、グラスフィルタ
ー上で０．５ Ｍ ＮａＣＬ水溶液水溶液８グｌｉｏ。
−で順次洗浄して、）３ＳＡ結合アガロースを得た。
洗浄液中の非結合残存Ｂｅへの量を、その２８０ ｎｍ
における吸収の測定値より算出することによって、得ら
れたＢＳ人結合アガロースには、湿重量１２肖たシ３８
．６■のＢＳＡが結合していることが判明した。
における吸収の測定値より算出することによって、得ら
れたＢＳ人結合アガロースには、湿重量１２肖たシ３８
．６■のＢＳＡが結合していることが判明した。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、 次式； 合している不溶性高分子残基又はエポキシ活性化不溶性
高分子残基゛を１Ｂｌ、Ｒ２及びＲ３はそれぞれ水素原
子又は炭素数１〜５のアルキル基をＯＸは水素原子、そ
のカルボニル基若しくはカルボキシル基を介して結合し
ている生理活性物質残基又は 次式ｔ−Ｘ、−平−（ｃＨｌ）、− （式中、Ｘ、−ＮＨはそのアミン基を介して結合してい
る生理活性物質残基を；ｙは２〜１０の整数を１それぞ
れ表わす。） で示される残基をｌ −ＭＮＨ−Ｃ−Ｙ−Ｃ−Ｎ）ｌＮ
Ｉト は８ その二つのヒドラジノ基を介して結合している、ジヒド
ラジド化合物残基を菖ヱはＯ又は１を；それぞれ表わす
。〕 で示される固定化生理活性物質及び不溶性高分子。 ２、末端にエポキシ基が存在する′側鎖を有する不溶性
高分子又はエポキシ活性化不溶性高分子を、ヒドラジン
類及び／又はジヒドラジド化合物と反応させて、
゛ 次式； 合−ｌ−ている不溶性高分子残基又はエポキシ活性化不
溶性高分子残基をＳ Ｒ’、１１及びＲ３目、それぞれ
水素原子又は炭素数１〜５のアルキル基を介して結合し
ているジビドラ外、ド化合物残基を；スは０又は１を；
それぞれ表わす。） ゛で示されるヒドラジン誘導体及
び／又はジヒドラジド誘導体を得、次いでこれを水素化
シアノホウ素す） ＩＪウムの存在下において、カルボ
ニル基を有する生理活性物質と反応させることを特徴と
する固定化生理活性物質の製造法。 ３、 末端にエポキシ基が存在する側鎖を有する不溶性
高分子又はエポキシ活性化不溶性高分子を、ヒドラジン
類及び／又はジヒ・ドーラジド化合物と反応させで、 次式客 合している不溶性高分子残基又はエポキシ活性化不溶性
高分子残基を ｋｌ、 Ｒ２及びＲ″はそれぞれ水素原
子又は炭素数１〜６のアルキル基を介して結合している
ジヒドラジド化合物残基をｇｘは０又け１を；それぞれ
表わす。）で示されるヒドラジン誘導体及び／又はジヒ
ドラジド誘導体を得、次いでこれを水素化シアノポウ素
す） ＩＪウムの存在下において、 次式！ ＯＨＣ−（ＣＨ，）、−８−ＣＨＯ（式中、
ｙは２〜ｌＯの粒数を表わす。）で示される直鎖状ジア
ルデヒド化合物と反応させて、 次式！ （式中、＝ＮＩＩＮ）１−Ｃ−１’−Ｃ−Ｎ）ＩＮＩＩ
−はその二つのヒ８ 青３五１ Ｘ及びｙは前記と同義である。） で示される′アルデヒド活性化不溶性高分子を得、次い
でこれを水素化シアノホウ素ナトリウムの存在下におい
て、アミノ基を有する生理活性物質と反応させることを
特徴とする固定化生理活性物質の製造法。 本 末端にエポキシ基が存在゛する側鎖を有する不溶性
高分子又はエポキシ活性化不溶性高分子を、ヒドラジン
、類及び／又はジヒドラジド化合物と反応させて、 次式家 合している不溶性高分子残基又はエポキシ活性化不溶性
高分子残基を； Ｒ１、−１１，及びＲ３はそれぞれ水
素原子又は炭素数゛１〜５のアルキル基をを介して結合
しているジヒドラジド化合物残基をｇｘは０又は１ｔ−
ｔそれぞれ表わす。）で示されるヒドラジン誘導体及び
／又はジヒドラジド誘導体°を得、次いでこれをカルボ
ジイミド化合物の存在下において、カルボキシル基を有
する生理活性物質と反応させることを特徴とする固定化
生理活性物質の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12283582A JPS5915401A (ja) | 1982-07-16 | 1982-07-16 | 固定化生理活性物質及びその製造法並びにその製造法に用いる担体 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12283582A JPS5915401A (ja) | 1982-07-16 | 1982-07-16 | 固定化生理活性物質及びその製造法並びにその製造法に用いる担体 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5915401A true JPS5915401A (ja) | 1984-01-26 |
| JPH0553802B2 JPH0553802B2 (ja) | 1993-08-11 |
Family
ID=14845808
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP12283582A Granted JPS5915401A (ja) | 1982-07-16 | 1982-07-16 | 固定化生理活性物質及びその製造法並びにその製造法に用いる担体 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5915401A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4714648A (en) * | 1984-08-01 | 1987-12-22 | Toho Rayon Co., Ltd. | Prepregs and method for production thereof |
| US6509104B2 (en) | 2000-12-05 | 2003-01-21 | Michigan Biotechnology Institute | Antithrombogenic polymer coating |
| US7204940B2 (en) | 2002-03-20 | 2007-04-17 | Michigan Biotechnology Institute | Conductive polymer-based material |
-
1982
- 1982-07-16 JP JP12283582A patent/JPS5915401A/ja active Granted
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4714648A (en) * | 1984-08-01 | 1987-12-22 | Toho Rayon Co., Ltd. | Prepregs and method for production thereof |
| US6509104B2 (en) | 2000-12-05 | 2003-01-21 | Michigan Biotechnology Institute | Antithrombogenic polymer coating |
| US7204940B2 (en) | 2002-03-20 | 2007-04-17 | Michigan Biotechnology Institute | Conductive polymer-based material |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0553802B2 (ja) | 1993-08-11 |
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