JPS59154996A - 含フツ素フエニルアラニン誘導体の製造方法 - Google Patents
含フツ素フエニルアラニン誘導体の製造方法Info
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- JPS59154996A JPS59154996A JP2948483A JP2948483A JPS59154996A JP S59154996 A JPS59154996 A JP S59154996A JP 2948483 A JP2948483 A JP 2948483A JP 2948483 A JP2948483 A JP 2948483A JP S59154996 A JPS59154996 A JP S59154996A
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- acid
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明°は微生物による含フツ素フェニルアラニン誘導
体を製造する方法に関するものでアシ、。
体を製造する方法に関するものでアシ、。
特に特定の含フツ素化合物から微生物を使用して含フツ
素フェニルアラニン誘導体を製造する方法に関するもの
である。
素フェニルアラニン誘導体を製造する方法に関するもの
である。
フルオロフェニルアラニンは公知であシ、化学的合成法
で製造しうる化合物である。フルオロフェニルアラニン
は、医薬、農薬、抗菌剤。
で製造しうる化合物である。フルオロフェニルアラニン
は、医薬、農薬、抗菌剤。
試薬、それらの中°間原料等として有用であり、たとえ
ばフェニルアラニンのアミノ酸アナローグ（類似体）と
して生化学分野の試薬として有用であることや微生物変
異株選択用の薬剤として使用しうろことなどが知られて
いる。化学合成法によるフルオロフェニルアラニンの合
成法としてたとえば下記のように、フルオロベンズアル
デヒドからベンゾイルアミノフルオロケイ皮、酸を経て
合成する方法が知られている（ Ｂｅ１−１ｓｔθｉｎ
ｓ 、 ｌ 、 １２６Ｂ （１９７３’） 参
照）。
ばフェニルアラニンのアミノ酸アナローグ（類似体）と
して生化学分野の試薬として有用であることや微生物変
異株選択用の薬剤として使用しうろことなどが知られて
いる。化学合成法によるフルオロフェニルアラニンの合
成法としてたとえば下記のように、フルオロベンズアル
デヒドからベンゾイルアミノフルオロケイ皮、酸を経て
合成する方法が知られている（ Ｂｅ１−１ｓｔθｉｎ
ｓ 、 ｌ 、 １２６Ｂ （１９７３’） 参
照）。
しかし、化学合成で得られるフルオロフェニルアラニン
はラセミ体であって、よシ有用なＬ体のみを得るにはラ
セミ分割を必要とし、しかもとのラセミ分割は通・常容
易ではない。
はラセミ体であって、よシ有用なＬ体のみを得るにはラ
セミ分割を必要とし、しかもとのラセミ分割は通・常容
易ではない。
本発明者は、フルオロフェニルアラニンなどの含フツ素
フェニルアラニン誘導体を製造す本社方法について検討
した結果、特定の含フツ素化合物を発酵法によシ含フッ
素フェニルアラニン誘導体に変換する方法を見い出した
。本発明はこれを要旨とするものでｓｂ〜即ち、下記式
（Ｉ）で表わされる含フツ素化合物を微生物あるいは酵
素によシ下記式［１１〕で表わされる光学活性を有する
含フツ素フェニルアラニン誘導体にる含フツ素フェニル
アラニン誘導体の製造方法、である。
フェニルアラニン誘導体を製造す本社方法について検討
した結果、特定の含フツ素化合物を発酵法によシ含フッ
素フェニルアラニン誘導体に変換する方法を見い出した
。本発明はこれを要旨とするものでｓｂ〜即ち、下記式
（Ｉ）で表わされる含フツ素化合物を微生物あるいは酵
素によシ下記式［１１〕で表わされる光学活性を有する
含フツ素フェニルアラニン誘導体にる含フツ素フェニル
アラニン誘導体の製造方法、である。
フェニルピルビン酸、ｐ−ヒドロキシフェニルピルビン
酸、４４−ジヒドロキシフェニルピルビン酸から、微生
物あるいはトランスアミナーゼ等の酵素の作用によシそ
れぞれフェニルアラニン、チＰシン、 ３．４−ジヒ
ドロキシフ、工二ルアラニンが合成されることは周知で
あシ、との場合グルタミン酸やアスパラギン酸などのア
ミノ酸が主としてアミン基供与体となっている。
酸、４４−ジヒドロキシフェニルピルビン酸から、微生
物あるいはトランスアミナーゼ等の酵素の作用によシそ
れぞれフェニルアラニン、チＰシン、 ３．４−ジヒ
ドロキシフ、工二ルアラニンが合成されることは周知で
あシ、との場合グルタミン酸やアスパラギン酸などのア
ミノ酸が主としてアミン基供与体となっている。
フルオロフェニルｐピルビン酸などの上記式（１）で表
わされる含フツ素化合物が、対応する７ツ素原子を含ま
な−い化合物と同等の生化学的作用を受けるか否かは従
来検討されたことはなかった。本発明は、上記式ＣＩ〕
で表わされる含フツ素化合物は、対応するフッ素原子を
含まない化金物とほぼ同等の生化学的作用を受けること
を見い出し、これを利用して上記式［１１）で表わされ
る光学活性を有する含フツ素フェニルアラニン誘導体を
製造しうろことを確認し７た。
わされる含フツ素化合物が、対応する７ツ素原子を含ま
な−い化合物と同等の生化学的作用を受けるか否かは従
来検討されたことはなかった。本発明は、上記式ＣＩ〕
で表わされる含フツ素化合物は、対応するフッ素原子を
含まない化金物とほぼ同等の生化学的作用を受けること
を見い出し、これを利用して上記式［１１）で表わされ
る光学活性を有する含フツ素フェニルアラニン誘導体を
製造しうろことを確認し７た。
式〔■〕で表わされる含フツ素化合物として好１
ましいものは、Ｙが−Ｃ−でかつｍ−０，ｎ−１〜３の
化合物、およびＹが−６−、ＲがＨでかっｍ−１〜２．
ｎ−１の化合物であ夛；特に。。
化合物、およびＹが−６−、ＲがＨでかっｍ−１〜２．
ｎ−１の化合物であ夛；特に。。
ｍ、ｈるいはｐ−フルオロフェニルピルビン酸が好まし
い。式［１〕で表わされる化合物は式（１）の対応化合
物であシ、特に。２ｍ、あるいＢ ｐ −、ｙルオロフ
ェニルアラニンが好マシい。
い。式［１〕で表わされる化合物は式（１）の対応化合
物であシ、特に。２ｍ、あるいＢ ｐ −、ｙルオロフ
ェニルアラニンが好マシい。
この式（ＩＩ）で表わされる化合物は通常り体である。
式（１）で表わされる含フツ素化合物は化学的合成法で
製造しうる。
製造しうる。
本発明において使用しうる微生物としては、式［１）で
表わされる含フツ素化合物に対応するフッ素原子を含ま
ない化合物よシ式［１１３で表わされる含フツ素フェニ
ルアラニン誘導体に対応するフッ素原子を含まない化合
物を生成する能力のある各種微生物を使用しうる。特に
フェニルピルビン酸からフェニルアラニンを、あるいは
ヒドロキシフェニルピルビン酸からチロシンを生成する
能力のある公知の微生物を使用しうる。具体的には、た
とえば、コリネバクテリウム属、ブレビバクテリウム属
、アルカリ土類金属、シュードモナス属、ノカルディア
属、ペニシリウム属、ムコール属、ミクロコツカス属。
表わされる含フツ素化合物に対応するフッ素原子を含ま
ない化合物よシ式［１１３で表わされる含フツ素フェニ
ルアラニン誘導体に対応するフッ素原子を含まない化合
物を生成する能力のある各種微生物を使用しうる。特に
フェニルピルビン酸からフェニルアラニンを、あるいは
ヒドロキシフェニルピルビン酸からチロシンを生成する
能力のある公知の微生物を使用しうる。具体的には、た
とえば、コリネバクテリウム属、ブレビバクテリウム属
、アルカリ土類金属、シュードモナス属、ノカルディア
属、ペニシリウム属、ムコール属、ミクロコツカス属。
ミクロバクテリウム属、アルスロバクｐ−属。
アグロバクテリウム属、エッシェリヒア属、バチルス属
、セラチア属、エルビアーなどに属する微生物があシ、
特に実施例に使用したように上記前７者に属するフェニ
ルアラニン生産菌が好ましい。これら微生物の培地には
通常、炭素源、窒素源、および無機塩を必要とする。た
とえば、糖類、デン粉、酢酸、エタノール、その他の炭
素源、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アン
モニウム、尿素、アンチニア。
、セラチア属、エルビアーなどに属する微生物があシ、
特に実施例に使用したように上記前７者に属するフェニ
ルアラニン生産菌が好ましい。これら微生物の培地には
通常、炭素源、窒素源、および無機塩を必要とする。た
とえば、糖類、デン粉、酢酸、エタノール、その他の炭
素源、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アン
モニウム、尿素、アンチニア。
アミノ酸、その他の窒素源、リン酸塩、カリウム塩、マ
グネシウム塩、鉄塩、その他の無機塩などがある。また
これらに替えて、あるいはこれらの一部として、またに
生長促進剤等として、肉エキス、酵母エキス、麦芽エキ
ス、ビタミン類、その他の有機物を使用することもでき
る。
グネシウム塩、鉄塩、その他の無機塩などがある。また
これらに替えて、あるいはこれらの一部として、またに
生長促進剤等として、肉エキス、酵母エキス、麦芽エキ
ス、ビタミン類、その他の有機物を使用することもでき
る。
培養温度は約２０〜４０℃、培地のｐＨは約５〜９が適
当である。
当である。
本発明の実施において、式［ＩＤで表わされる含フツ素
フェニルアラニン誘導体の製造には、微生物の培養の際
に培地に式（１）で表わされる含フツ素化合物を存在さ
せる方法、培養した微生物を分離し、分離した微生物を
式〔ＩＤで表わされる含フツ素化合物に作用式せる方法
、トランスアミテーゼなどの酵素を分離しこの酵素を式
〔ＩＤで表わされる含フツ素化合物に作用させる方法な
どを採用しうる。これらの方法において、式［１）で表
わされる含フツ素化合物とともにアミノ基供与体を共存
させることが好ましい。
フェニルアラニン誘導体の製造には、微生物の培養の際
に培地に式（１）で表わされる含フツ素化合物を存在さ
せる方法、培養した微生物を分離し、分離した微生物を
式〔ＩＤで表わされる含フツ素化合物に作用式せる方法
、トランスアミテーゼなどの酵素を分離しこの酵素を式
〔ＩＤで表わされる含フツ素化合物に作用させる方法な
どを採用しうる。これらの方法において、式［１）で表
わされる含フツ素化合物とともにアミノ基供与体を共存
させることが好ましい。
前２者の方法において、微生物自身が有するアミン基供
与体を利用できるが、その量は極めて限られた量であシ
、従って生成する含フツ素フェニルアラニン誘導体の量
が限られるからである。第３の方法においては、このア
ミノ基供与体の共存は必須である。アミノ基供与体とし
ては、グルタミン酸、アスパラギン酸、アラニン。
与体を利用できるが、その量は極めて限られた量であシ
、従って生成する含フツ素フェニルアラニン誘導体の量
が限られるからである。第３の方法においては、このア
ミノ基供与体の共存は必須である。アミノ基供与体とし
ては、グルタミン酸、アスパラギン酸、アラニン。
フェニルアラニン、その他のアミノ酸が好ましいが、ア
ミノ酸に限られるものではなく、タンパク質加水分解物
、ポリアミドオリゴマーやポリアミド加水分解物などの
化学合成物などもアミノ基供与体となシうることも知ら
れている。
ミノ酸に限られるものではなく、タンパク質加水分解物
、ポリアミドオリゴマーやポリアミド加水分解物などの
化学合成物などもアミノ基供与体となシうることも知ら
れている。
特に好ましいアミノ基供与体はグルタミン酸および／ま
たはアスパラギン酸である。
たはアスパラギン酸である。
後述する実施例においては、上記方法の内生として第２
の方法を採用した。第２の方法は実験室規模の実験では
取シ扱いや正確な分析の面で有利であるが、工業的規模
の実施では第１の方法がより好ましいことが少くない。
の方法を採用した。第２の方法は実験室規模の実験では
取シ扱いや正確な分析の面で有利であるが、工業的規模
の実施では第１の方法がより好ましいことが少くない。
従って、本発明においては、特にこれら２つの方法が採
用されることが好ましい。即ち、式〔ＩＤで表わされる
含フツ素化合物とアミノ基供与体とを含む培地で微生物
を培養するか、または式［１，）で表わされる含フツ素
化合物とアミノ基供与体を含む系（微生物が増殖し得な
い系であってもよい）に微生物を存在させ、該培地ある
いは系内に式［１１）で表わされる含フツ素フェニルア
ラニン誘導体を生成蓄積せしめ、次いでこの含フツ素フ
ェニルアラニン誘導体を採取する方法の採用が好ましい
。
用されることが好ましい。即ち、式〔ＩＤで表わされる
含フツ素化合物とアミノ基供与体とを含む培地で微生物
を培養するか、または式［１，）で表わされる含フツ素
化合物とアミノ基供与体を含む系（微生物が増殖し得な
い系であってもよい）に微生物を存在させ、該培地ある
いは系内に式［１１）で表わされる含フツ素フェニルア
ラニン誘導体を生成蓄積せしめ、次いでこの含フツ素フ
ェニルアラニン誘導体を採取する方法の採用が好ましい
。
後述する実施例に示すように、フルオロフェニルピルビ
ン酸からフルオロフェニルアラニンを製造する場合を例
にとると、フェニルピルビン酸からフェニルアラニンを
製造する場合に比較して、生成速度、最終蓄積濃度、お
よび変換率は以下の順となる。
ン酸からフルオロフェニルアラニンを製造する場合を例
にとると、フェニルピルビン酸からフェニルアラニンを
製造する場合に比較して、生成速度、最終蓄積濃度、お
よび変換率は以下の順となる。
生成速度’：ｍ−Ｆ−ＰｈｅキＰｈｅ ＞ ｐ−Ｆ−Ｐ
ｈｅ ＞ ｏ−Ｆ−Ｐｈｅ最終蓄積濃度＋ ｍ−Ｆ−
Ｐｈｅ ＞ ｐ−Ｆ−Ｐｈｅキｏ−ＩＰ−Ｐｈｅ ＞Ｐ
ｈｅ変換率： ｍ−Ｐ−Ｐｈｅ＞ｐ−Ｆ−Ｐｈｅキｏ
−Ｆ−Ｐｈｅ ＞ Ｐｈｅこのように、フルオロフェニ
ルアラニンの生成はフェニルアラニンと同等あるいはそ
れ以上の効率を有し、高い収率でフルオロフェニルアラ
ニンの製造が可能である。
ｈｅ ＞ ｏ−Ｆ−Ｐｈｅ最終蓄積濃度＋ ｍ−Ｆ−
Ｐｈｅ ＞ ｐ−Ｆ−Ｐｈｅキｏ−ＩＰ−Ｐｈｅ ＞Ｐ
ｈｅ変換率： ｍ−Ｐ−Ｐｈｅ＞ｐ−Ｆ−Ｐｈｅキｏ
−Ｆ−Ｐｈｅ ＞ Ｐｈｅこのように、フルオロフェニ
ルアラニンの生成はフェニルアラニンと同等あるいはそ
れ以上の効率を有し、高い収率でフルオロフェニルアラ
ニンの製造が可能である。
なお、出発物質である式（１）で表わされる化合物は種
々の化学的合成方法で製造しうるものである。たとえば
、置換フェニルピルビン酸は置換ベンズアルデヒドよル
合成しうる。具体的にフルオＩ：ｒフェニルピルビン酸
は以下の方法で製造される。フルオロベンズアルデヒド
ドアセチルグリシンの混合物に酢酸と酢酸ナトリウムを
加えて１．５時間直流を行なってフルオロフェニルアゾ
ラクトンを得、次いでアセトン−水系で４時間環流を行
なけ２−アセチルアミノ−３−フルオロフェニル−２−
プロペン酸を得る。
々の化学的合成方法で製造しうるものである。たとえば
、置換フェニルピルビン酸は置換ベンズアルデヒドよル
合成しうる。具体的にフルオＩ：ｒフェニルピルビン酸
は以下の方法で製造される。フルオロベンズアルデヒド
ドアセチルグリシンの混合物に酢酸と酢酸ナトリウムを
加えて１．５時間直流を行なってフルオロフェニルアゾ
ラクトンを得、次いでアセトン−水系で４時間環流を行
なけ２−アセチルアミノ−３−フルオロフェニル−２−
プロペン酸を得る。
次に、アセトンを除去してこの化合物を塩酸で加水分解
すると、フルオロフェニルピルビン酸が得られる。
すると、フルオロフェニルピルビン酸が得られる。
品３
以下、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発
明はこれら実施例に限定されるものではない。
明はこれら実施例に限定されるものではない。
実施例１
前記方法で合成した、０１ｍ、ｐ−フルオロフェニルピ
ルビン酸から下記第１表記載の各種微生物をν用して対
応するフルオロフェニルアラニンを製造した。比較とし
て、フェニルピルビン酸からフェニルアラニンの製造を
同じ方法で行った。細菌の培養にはブイヨン培地（肉エ
キスＱ、３％、ペプトン１係、ＮａＯ’１０．５ ％、
ｐＨ７，０）を用い、酵母とカビの培養にはＭＹ培地（
ペプトン１１．５％、酵母エキス０．３’ｌｙ、麦芽エ
キス０．３％、クルコース１チ）を用いた。
ルビン酸から下記第１表記載の各種微生物をν用して対
応するフルオロフェニルアラニンを製造した。比較とし
て、フェニルピルビン酸からフェニルアラニンの製造を
同じ方法で行った。細菌の培養にはブイヨン培地（肉エ
キスＱ、３％、ペプトン１係、ＮａＯ’１０．５ ％、
ｐＨ７，０）を用い、酵母とカビの培養にはＭＹ培地（
ペプトン１１．５％、酵母エキス０．３’ｌｙ、麦芽エ
キス０．３％、クルコース１チ）を用いた。
ｉｆ、５００−のエルレンマイヤーフラスコに１００ｍ
１！！の上記培地を分注し、１２０℃１５分間殺菌した
後、第１表記載の菌株を一白金耳植菌し、３０℃で４０
時間振盪培養を行った。
１！！の上記培地を分注し、１２０℃１５分間殺菌した
後、第１表記載の菌株を一白金耳植菌し、３０℃で４０
時間振盪培養を行った。
この培養液から遠心分離によシ菌体を集め、滅菌水で遠
心洗浄を行ない供試菌体とした。
心洗浄を行ない供試菌体とした。
３種のフルオロフェニルピルビン酸ｎｏｓモル（９１０
■）およびフェニルピルビン酸Ｑ、（１５モル（８２０
１１ｖ）のいずれか１種、グルタミン酸０．０５モル（
６６５ｗｑ）、およびアスパラギン酸Ｑ、０５モル（７
３５ｗｇ ）を含み、１Ｎａ（’ｌ でｐａａｏとし
た水溶液１００−を反応液として用意した。これら４種
の反応液を直径１８ｍの試験管に４ｄづつ分注し、１２
０℃で１０分間殺菌した後、上記供試の生菌体（乾燥重
量換算で４１１ｖ）を懸濁させ、３０℃で２０時間振盪
させながら反応を行わせた。次に、反応液を遠心分離し
て菌体を除き、得られた上澄液をサンプルとしてシリカ
ゲル薄層クロマトグラフィーで展開溶媒ｎ−ブタノール
−酢酢−水（容量比３：１：１）を用いて展開し、ニン
ヒドリンで発色させてフルオロフェニルアラニンおよび
フェニルアラニンの同定と定量を行った。その結果を第
１表に示す。
■）およびフェニルピルビン酸Ｑ、（１５モル（８２０
１１ｖ）のいずれか１種、グルタミン酸０．０５モル（
６６５ｗｑ）、およびアスパラギン酸Ｑ、０５モル（７
３５ｗｇ ）を含み、１Ｎａ（’ｌ でｐａａｏとし
た水溶液１００−を反応液として用意した。これら４種
の反応液を直径１８ｍの試験管に４ｄづつ分注し、１２
０℃で１０分間殺菌した後、上記供試の生菌体（乾燥重
量換算で４１１ｖ）を懸濁させ、３０℃で２０時間振盪
させながら反応を行わせた。次に、反応液を遠心分離し
て菌体を除き、得られた上澄液をサンプルとしてシリカ
ゲル薄層クロマトグラフィーで展開溶媒ｎ−ブタノール
−酢酢−水（容量比３：１：１）を用いて展開し、ニン
ヒドリンで発色させてフルオロフェニルアラニンおよび
フェニルアラニンの同定と定量を行った。その結果を第
１表に示す。
第１表
ａ Ｐｓ、 ｄａｃｕｎｈａｅ工ＡＭ １０４８→→
＋ ÷ ＋実施例２ 実施例１と同様にブイヨン培地を用い、第１表第１番目
記載の菌株（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ ｆａｅｃａｌｉ
ｓ工ＡＭ １０１５ ） を培養し、同様に供試菌体
を採取した。また、実施例１と同様に４種の反応液１０
０ｔｎｔを製造した。
＋ ÷ ＋実施例２ 実施例１と同様にブイヨン培地を用い、第１表第１番目
記載の菌株（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ ｆａｅｃａｌｉ
ｓ工ＡＭ １０１５ ） を培養し、同様に供試菌体
を採取した。また、実施例１と同様に４種の反応液１０
０ｔｎｔを製造した。
５００７！のエルレンマイヤーフラスコにツレぞれ反応
液１００ｄを入れ、１２０℃で１０分間殺菌した後、上
記の生菌体（乾燥重量換算１ｏ ｏ ｍｙ ）をそれぞ
れの反応液に懸濁させ、３０で振盪しながら反応を行な
わせた。実施例１と同じ方法で定量を行い、１２時間目
までの反応の経過を測定した。その結果、初期生産速度
は第１図に示すものであった。
液１００ｄを入れ、１２０℃で１０分間殺菌した後、上
記の生菌体（乾燥重量換算１ｏ ｏ ｍｙ ）をそれぞ
れの反応液に懸濁させ、３０で振盪しながら反応を行な
わせた。実施例１と同じ方法で定量を行い、１２時間目
までの反応の経過を測定した。その結果、初期生産速度
は第１図に示すものであった。
引き続き反応を行なわせて最初から４６５時間経過後に
反応液を遠心分離し、上澄液のフルオロフェニルアラニ
ンおよびフェニルアラニンを定量した。その結果、濃度
と変換率は第２図に示すものであった。次に、これら４
種の反応液９７ｄからイオン交換樹脂を用いて生成物の
分離を行った。即ち、それぞれの反応液にＺ（０１を添
加してｐＨ２，０とし、凝集沈澱物を濾過によって除去
し、Ｆ液をＨ＋型の強酸性カチオン交換樹脂に通じ、水
で残存するケト酸の溶出を行った。続いて吸着されてい
るアミノ酸類を５チのアンモニア水で溶出し、との溶離
液を減圧濃縮後酢酸型にした強塩基アニオン交換樹脂に
通じ、水で溶用してフルオロフェニルアラニンまたはフ
ェニルアラニンを含む溶出液を得た。
反応液を遠心分離し、上澄液のフルオロフェニルアラニ
ンおよびフェニルアラニンを定量した。その結果、濃度
と変換率は第２図に示すものであった。次に、これら４
種の反応液９７ｄからイオン交換樹脂を用いて生成物の
分離を行った。即ち、それぞれの反応液にＺ（０１を添
加してｐＨ２，０とし、凝集沈澱物を濾過によって除去
し、Ｆ液をＨ＋型の強酸性カチオン交換樹脂に通じ、水
で残存するケト酸の溶出を行った。続いて吸着されてい
るアミノ酸類を５チのアンモニア水で溶出し、との溶離
液を減圧濃縮後酢酸型にした強塩基アニオン交換樹脂に
通じ、水で溶用してフルオロフェニルアラニンまたはフ
ェニルアラニンを含む溶出液を得た。
これらの溶出液を濃縮してフルオロフェニルアラニンま
たはフェニルアラニンの結晶を析出させた。収率を第２
表に示す。また、得られた。
たはフェニルアラニンの結晶を析出させた。収率を第２
表に示す。また、得られた。
−フルオロフェニルアラニン、ｍ−フルオロフェニルア
ラニン、ｐ−フルオロフェニルアラニン、およびフェニ
ルアラニンの比旋光度を測定した結果を第３表に示す。
ラニン、ｐ−フルオロフェニルアラニン、およびフェニ
ルアラニンの比旋光度を測定した結果を第３表に示す。
第２表
反応液中の量（＃Ｖ）分離量（■） 回収収率（％）Ｐ
ｈｅ ３２７ ３００
９２ｏ−Ｆ−Ｐｈｅ ４７２ ４５５
９２ｍ−Ｆ−Ｐｈｅ ６１１
５８０ ９５ｐ−Ｆ−Ｐｈｅ ４
６５ ４４０ ’ ９５第３表 実施例３ 実施例１に示したブイヨン培地を用い、第１表第１番目
記載の菌株（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ ｆａｅｃａｌｉ
ｅ■ＡＭ １ｏ１ｓ ） を培養し、その一部をフル
オロフェニルピルビン酸含有増殖培地（グルコースα５
％、肉エキス０．３％、ペプトンａ３％、フルオロフェ
ニルピルビン酸０．９％、クルタミン酸０．７％、１）
Ｈ７，５’）に添加し、菌体の増殖とトモにフルオロフ
ェニルアラニンの生産を行なわせた。即ち、’５０’Ｏ
ｄのエルレンマイヤーフラスコにフルオロフェニルピル
ビン酸含有増Ｗｉ培地１００ｆｎｌを入れ、１２０℃１
０分間殺菌したのち、ブイヨン培地で培養した上記菌株
の培養液１０−を添加して３０℃で４８時間培養を行っ
た。フルオロフェニルアラニンの生産様式は増殖連動型
であるが、ブイヨン培地での増殖に比べ、フルオロフェ
ニルピルビン酸含有培地では増殖誘導期の延長と比増殖
速度の低下がみられた。４８時間目の培養液に生産され
たフルオロフェニルアラニンは下記第４表に示す通シで
あった。
ｈｅ ３２７ ３００
９２ｏ−Ｆ−Ｐｈｅ ４７２ ４５５
９２ｍ−Ｆ−Ｐｈｅ ６１１
５８０ ９５ｐ−Ｆ−Ｐｈｅ ４
６５ ４４０ ’ ９５第３表 実施例３ 実施例１に示したブイヨン培地を用い、第１表第１番目
記載の菌株（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ ｆａｅｃａｌｉ
ｅ■ＡＭ １ｏ１ｓ ） を培養し、その一部をフル
オロフェニルピルビン酸含有増殖培地（グルコースα５
％、肉エキス０．３％、ペプトンａ３％、フルオロフェ
ニルピルビン酸０．９％、クルタミン酸０．７％、１）
Ｈ７，５’）に添加し、菌体の増殖とトモにフルオロフ
ェニルアラニンの生産を行なわせた。即ち、’５０’Ｏ
ｄのエルレンマイヤーフラスコにフルオロフェニルピル
ビン酸含有増Ｗｉ培地１００ｆｎｌを入れ、１２０℃１
０分間殺菌したのち、ブイヨン培地で培養した上記菌株
の培養液１０−を添加して３０℃で４８時間培養を行っ
た。フルオロフェニルアラニンの生産様式は増殖連動型
であるが、ブイヨン培地での増殖に比べ、フルオロフェ
ニルピルビン酸含有培地では増殖誘導期の延長と比増殖
速度の低下がみられた。４８時間目の培養液に生産され
たフルオロフェニルアラニンは下記第４表に示す通シで
あった。
第４表
ｏ −Ｆ−Ｐｈｅ ３．０１１１７７ｍ１ｍ−Ｆ−
Ｐｈｅ ５．１ ｍｙ／ｍ１ｐ−Ｆ−Ｐｈｅ
３．１ ｍｆ／ｍ１
Ｐｈｅ ５．１ ｍｙ／ｍ１ｐ−Ｆ−Ｐｈｅ
３．１ ｍｆ／ｍ１
第１図は実施例２における初期生産速度を示すグラフで
ｓｂ、第２図は同様に生成物の濃度と変換率を示すグラ
フである。
ｓｂ、第２図は同様に生成物の濃度と変換率を示すグラ
フである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、 下記（１）で表わされる含フツ素化合物を微生物
あるいは酵素によシ下記［ＩＤで表わされる光学活性を
有する含フツ素フェニルアラニン誘導体に変換せしめる
ことを特徴とする光学活性を有する含フツ素フェニルア
ラニン誘導体の製造方法。 Ｚ 微生物が、コネリバクテリウム属、ブレビバクテリ
ウム属、アルカリ土類金属、シュードモナス属、ノカル
ディア属、ペニシリウム属、あるいはムコール属に属す
る微生物であることを特徴とする特許請求の範囲第１項
の方法。 ＆ 変換を、微生物、アミン基供与体、および式〔Ｉ〕
で表わされる含フツ素化合物を含む系で行うことを特徴
とする特許請求の範囲第１項の方法。 ４、 式［１〕で表わされる含フツ素化合物がフルオロ
フェニルピルビン酸でアク、式（ＩＩ）で表わされる含
フツ素フェニルアラニン誘導体がフルオロフェニルアラ
ニンであることを特徴とする特許請求の範囲第１項の方
法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2948483A JPS59154996A (ja) | 1983-02-25 | 1983-02-25 | 含フツ素フエニルアラニン誘導体の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2948483A JPS59154996A (ja) | 1983-02-25 | 1983-02-25 | 含フツ素フエニルアラニン誘導体の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59154996A true JPS59154996A (ja) | 1984-09-04 |
| JPS6312600B2 JPS6312600B2 (ja) | 1988-03-19 |
Family
ID=12277351
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2948483A Granted JPS59154996A (ja) | 1983-02-25 | 1983-02-25 | 含フツ素フエニルアラニン誘導体の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59154996A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN120866120A (zh) * | 2025-07-14 | 2025-10-31 | 贵州大学 | 一株粪产碱杆菌x4及其应用 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0394799U (ja) * | 1990-01-16 | 1991-09-26 |
-
1983
- 1983-02-25 JP JP2948483A patent/JPS59154996A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN120866120A (zh) * | 2025-07-14 | 2025-10-31 | 贵州大学 | 一株粪产碱杆菌x4及其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6312600B2 (ja) | 1988-03-19 |
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