JPS5933353B2 - クロレラの培養法 - Google Patents
クロレラの培養法Info
- Publication number
- JPS5933353B2 JPS5933353B2 JP53039759A JP3975978A JPS5933353B2 JP S5933353 B2 JPS5933353 B2 JP S5933353B2 JP 53039759 A JP53039759 A JP 53039759A JP 3975978 A JP3975978 A JP 3975978A JP S5933353 B2 JPS5933353 B2 JP S5933353B2
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- Japan
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- chlorella
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- cultured
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明はクロレラの有効な培養法に関する。
普通、クロレラは大きな培養槽で栄養源を添加した培地
によって、太陽光線を受けながら培養されているが、ク
ロレラの増殖はきわめて遅く、その生産性は低い。
によって、太陽光線を受けながら培養されているが、ク
ロレラの増殖はきわめて遅く、その生産性は低い。
しかしながら、クロレラは近時、自然の栄養剤としての
需要がきわめて旺盛であって、クロレラの効率のよい生
産が望まれているのである。
需要がきわめて旺盛であって、クロレラの効率のよい生
産が望まれているのである。
本発明者らは、クロレラの効果的な増殖方法を求めて研
究したところ、グレイン・シロップを添加することによ
って著しるしく増殖効率が上昇することが分った。
究したところ、グレイン・シロップを添加することによ
って著しるしく増殖効率が上昇することが分った。
グレイン・シロップを培地に添加してクロレラを培養す
ると、クロレラを添加しないで培養した場合に比較して
２０％〜１００％の菌体重量増加を得ることが可能とな
る。
ると、クロレラを添加しないで培養した場合に比較して
２０％〜１００％の菌体重量増加を得ることが可能とな
る。
本発明において用いられたクロレラはＣｈｌｏｒ−ｅｌ
ｌａ ｅｌｌｉｐｓｏｉｄｅａ Ｇｅｒｎｅｃｋ ＩＡ
Ｍ ０−２７、Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ ｅｌｌｉｐｓｏｉ
ｄｅａ Ｇｅｒｎｅｃｋ ＩＡＭ（１！−１０２、Ｃｈ
ｌｏｒｅｌｌａ ｅｌｌｉｐｓｏｉｄｅａ （）ｅ
ｒｎｅｃｋＴ、１． （徳用研究所一般頒布株）の各種
である。
ｌａ ｅｌｌｉｐｓｏｉｄｅａ Ｇｅｒｎｅｃｋ ＩＡ
Ｍ ０−２７、Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ ｅｌｌｉｐｓｏｉ
ｄｅａ Ｇｅｒｎｅｃｋ ＩＡＭ（１！−１０２、Ｃｈ
ｌｏｒｅｌｌａ ｅｌｌｉｐｓｏｉｄｅａ （）ｅ
ｒｎｅｃｋＴ、１． （徳用研究所一般頒布株）の各種
である。
クロレラ培養の基本培地としては各種のものがあるが実
験用培地としては次に示すＭｙ ｅ ｒ ５−４ＮＡ５
培地（以下Ｎ４Ｎという）が適している。
験用培地としては次に示すＭｙ ｅ ｒ ５−４ＮＡ５
培地（以下Ｎ４Ｎという）が適している。
Ｍｙ ｅ ｒ ｓ −４ＮＡ ５培地組成（培養液ｌｔ
中）ＫＮＯ３・・・・・・０．０５Ｍ・・・・・・１．
２５．！ｌｉ！Ｍｇ５ｏ、・７Ｈ２０・・・・・・０．
ＯＩＭ・・・・・・１．２５．！ｉ’ＫＩ（２ＰＯ４・
・・・・・０．００９Ｍ・・・・・・１．２５ｇＦｅＳ
Ｏ４・７Ｈ２０・・・・・・１０−６Ｍ・・・・・・０
．０２ｇＢ ・−・−０，５ｐｐＩｎ−・−−−−Ｈ８
ＢＯ３−・・・−２，８５７ｎｆＩＭｎ ・・・・・・
０．５ ｐｐＴｎ”・・Ｍｎ０１． ・４）Ｌ、 ０−
・１．８１ ’１１９Ｚｏ・・・・・・０．Ｏ５ｐｐｍ
・・・・・・４口Ｓ０，７Ｈ２０・・・・・・０．２２
７ＩｌｆＩＯｕ・・・・・・０．０２ｐｐＩＩｌ・・・
・・・Ｃ！ ｕ Ｓｏ ４・５Ｈ２０・・・・・・０．
０７８２η Ｍｏ−−−−・・０．０１ｐｐＩｎ・−−−−・３ （
ＮＨ４）２０−７ＭＯ０３−４Ｈ２０・・・・・・０．
１７１■ 勿論、本発明のクロレラ培養に際しては従来用いられて
いる無機、有機のすべての培養液が用いられるものであ
る。
中）ＫＮＯ３・・・・・・０．０５Ｍ・・・・・・１．
２５．！ｌｉ！Ｍｇ５ｏ、・７Ｈ２０・・・・・・０．
ＯＩＭ・・・・・・１．２５．！ｉ’ＫＩ（２ＰＯ４・
・・・・・０．００９Ｍ・・・・・・１．２５ｇＦｅＳ
Ｏ４・７Ｈ２０・・・・・・１０−６Ｍ・・・・・・０
．０２ｇＢ ・−・−０，５ｐｐＩｎ−・−−−−Ｈ８
ＢＯ３−・・・−２，８５７ｎｆＩＭｎ ・・・・・・
０．５ ｐｐＴｎ”・・Ｍｎ０１． ・４）Ｌ、 ０−
・１．８１ ’１１９Ｚｏ・・・・・・０．Ｏ５ｐｐｍ
・・・・・・４口Ｓ０，７Ｈ２０・・・・・・０．２２
７ＩｌｆＩＯｕ・・・・・・０．０２ｐｐＩＩｌ・・・
・・・Ｃ！ ｕ Ｓｏ ４・５Ｈ２０・・・・・・０．
０７８２η Ｍｏ−−−−・・０．０１ｐｐＩｎ・−−−−・３ （
ＮＨ４）２０−７ＭＯ０３−４Ｈ２０・・・・・・０．
１７１■ 勿論、本発明のクロレラ培養に際しては従来用いられて
いる無機、有機のすべての培養液が用いられるものであ
る。
本発明においては、グレイン・シロップだけを水に添加
して培地にするか、又はグレイン・シロップを従来用い
られている培地に添加することにより培地が調整される
。
して培地にするか、又はグレイン・シロップを従来用い
られている培地に添加することにより培地が調整される
。
ここに用いられるグレイン・シロップとは一般にデイス
テイラーズ・ソルブルスとも呼ばれているもので、ウィ
スキーの蒸留廃液である。
テイラーズ・ソルブルスとも呼ばれているもので、ウィ
スキーの蒸留廃液である。
グレイン・シロップの添加量は培養液当り１〜１０％程
度で十分である。
度で十分である。
添加の最適量はグレイン・シロップのみの添加の場合と
各種培地における添加の場合とそれぞれ異なるので、そ
れぞれにおいて最大増殖量を測定して添加量を決定する
必要がある。
各種培地における添加の場合とそれぞれ異なるので、そ
れぞれにおいて最大増殖量を測定して添加量を決定する
必要がある。
本培養に先だって、種培養が行なわれる。
種培養はＭ４Ｎなどの基本培地にクロレラ１白金耳を接
種して光照射のもと、炭酸ガス１％程度含有する空気を
連続通気して２５°Ｃｔｔ’ｃで培養し、５日間程度で
、種培養液が得られる。
種して光照射のもと、炭酸ガス１％程度含有する空気を
連続通気して２５°Ｃｔｔ’ｃで培養し、５日間程度で
、種培養液が得られる。
種培養液は大容量のグレイン・シロップ添加培養液に加
えられ、太陽光線のもとで培養される。
えられ、太陽光線のもとで培養される。
培養は、静置、通気攪拌培養いずれでもよい。
培養は４〜８日間行なわれ、培養液を濾過することによ
って、クロレラが得られる。
って、クロレラが得られる。
本発明のグレイン・シロップ添加のクロレラ培養はクロ
レラの収率を２０〜１００％増大させることができる。
レラの収率を２０〜１００％増大させることができる。
次に本発明の試験例及び実施例を示す。
試験例 Ｉ
Ｍ４Ｎ５０７ｒＬｌを小型扁平フラスコに入れ、これに
０ｈｌｏｒｅｌｌａ ｅｌｌｉｐｓｏｉｄｅａ Ｇｅｒ
ｎｅｃｋ ＩＡＭｏ−２７、ＩＡＭ Ｏ−１０２及びＴ
、Ｉをそれぞれ１白金耳づつ接種し、９〜ＩＯＫ ｌ
ｕｘの光照射下に一炭酸ガス１％を含む空気を連続通気
し、２５°Ｃで５日間培養した。
０ｈｌｏｒｅｌｌａ ｅｌｌｉｐｓｏｉｄｅａ Ｇｅｒ
ｎｅｃｋ ＩＡＭｏ−２７、ＩＡＭ Ｏ−１０２及びＴ
、Ｉをそれぞれ１白金耳づつ接種し、９〜ＩＯＫ ｌ
ｕｘの光照射下に一炭酸ガス１％を含む空気を連続通気
し、２５°Ｃで５日間培養した。
得られた種培養液から藻液５ｍｌづつ採取し、これを４
５ｍ１の各試験培地に接種した。
５ｍ１の各試験培地に接種した。
培地は、１，０．５７７１１のグレイン・シロップの１
０％水懸濁液と４５ｗＬｌのＭ４Ｈの混合液（Ｇ。
０％水懸濁液と４５ｗＬｌのＭ４Ｈの混合液（Ｇ。
Ｓ、０．１％添加区）、２，５ｍｌのグレイン・シロッ
プの１０％水懸濁液と４０ｍ１のＭ４Ｎの混合液（Ｇ、
８．１％添加区）、３，４５ｍ１のＭ４Ｎ（対照区）の
３つを用意した。
プの１０％水懸濁液と４０ｍ１のＭ４Ｎの混合液（Ｇ、
８．１％添加区）、３，４５ｍ１のＭ４Ｎ（対照区）の
３つを用意した。
これら培地に藻液５ｍｌづつを接種し、小型扁平フラス
コ中で、９〜１０Ｋｌｕｘの光照射下に炭酸ガス１％を
含む空気を連続通気し、２５°Ｃで２日間培養した。
コ中で、９〜１０Ｋｌｕｘの光照射下に炭酸ガス１％を
含む空気を連続通気し、２５°Ｃで２日間培養した。
グレイン・シロップの添加効果は、培養開始時と培養４
８時間目の藻液の細胞数及び総細胞容積（ｐａｃｋｅｄ
ｃｅｌｌ ｖｏｌｕｍｅ）を測定して比較した。
８時間目の藻液の細胞数及び総細胞容積（ｐａｃｋｅｄ
ｃｅｌｌ ｖｏｌｕｍｅ）を測定して比較した。
その結果は表１に示される。
表１の結果、Ｇ、 Ｓ、はＩＡＭ Ｃ−１０２及びＴ、
１．に対して増殖促進効果があることが明らかにな
った。
１．に対して増殖促進効果があることが明らかにな
った。
即ち、２日間の培養中の細胞容積増加率は対照よりもＧ
、８．１％添加区が２倍以上であり、細胞数の増加率も
２倍近かった。
、８．１％添加区が２倍以上であり、細胞数の増加率も
２倍近かった。
試験例 ２
０ｈｌｏｒｅｌｌａ ｅｌｌｉｐｓｏｉｄｅａ Ｇｅ
ｒｎｅ−ｃｋ Ｔ−Ｉ−を用いて試験例１と同様に前
培養し、グレイン・シロップ（Ｇ、Ｓ、）１０％懸濁液
２％、５％添加について同様に本培養した。
ｒｎｅ−ｃｋ Ｔ−Ｉ−を用いて試験例１と同様に前
培養し、グレイン・シロップ（Ｇ、Ｓ、）１０％懸濁液
２％、５％添加について同様に本培養した。
その条件は次の表２に示される。
表２において、特に、Ｇ、８．５％添加区については、
Ｇ、Ｓ、がエネルギー源として利用されるか否かを検討
するため、遮光下でも培養した。
Ｇ、Ｓ、がエネルギー源として利用されるか否かを検討
するため、遮光下でも培養した。
その際に、試験例１と同様、細胞数及び総細胞容積を測
定した。
定した。
培養結果は次の表３に示される。
表３において、Ｇ、Ｓ、を水だけに稀釈した場合の増殖
を比較すると、２日間の培養で、水だけの対照（試験区
１）は細胞容積が開始時の３．３倍、細胞数が４．７倍
になるのに対し、Ｇ、８．２％添加区（試験区３）は細
胞容積が１６．８倍、細胞数が７．１倍で明らかにＧ、
Ｓ、によって増殖が促進された。
を比較すると、２日間の培養で、水だけの対照（試験区
１）は細胞容積が開始時の３．３倍、細胞数が４．７倍
になるのに対し、Ｇ、８．２％添加区（試験区３）は細
胞容積が１６．８倍、細胞数が７．１倍で明らかにＧ、
Ｓ、によって増殖が促進された。
Ｇ、 ８．２％添加（水に稀釈）区（試験区３）を対照
（試験区２）の培地区と比較すると、２日間の培養中の
細胞数の増力口は小さよったが、細胞容積の増加は約１
．７倍で培地よりも増殖の促進が大きい結果を得た。
（試験区２）の培地区と比較すると、２日間の培養中の
細胞数の増力口は小さよったが、細胞容積の増加は約１
．７倍で培地よりも増殖の促進が大きい結果を得た。
これまでの実験からＭ４Ｎ”’Ｎ養した場合、遮光下で
は細胞容積が全く増大しないことが認められている。
は細胞容積が全く増大しないことが認められている。
表３においては、Ｇ。Ｓ、を添加して遮光下（試験区７
及び８）で培養すると細胞容積が約２倍に増加する結果
を得たおで、Ｇ、Ｓ、はエネルギー源としてもいくらを
利用されると考えられる。
及び８）で培養すると細胞容積が約２倍に増加する結果
を得たおで、Ｇ、Ｓ、はエネルギー源としてもいくらを
利用されると考えられる。
しかし、その増加は光照射下（試験区５〜８を比較）の
方がかなり大きかったので、Ｇ、 Ｓ、はエネルギー源
としてよりむしろ生長促進因子としての作用の方が太き
いと考えられる。
方がかなり大きかったので、Ｇ、 Ｓ、はエネルギー源
としてよりむしろ生長促進因子としての作用の方が太き
いと考えられる。
Ｇ、 ８．５％添加区の増殖（試験区３〜６を比較）が
２％添加区の増殖よりも小さかったのは、Ｇ、Ｓ、が着
色物質で照射光を吸収するため、生育に十分な光が供給
されなかったためであろうと考える。
２％添加区の増殖よりも小さかったのは、Ｇ、Ｓ、が着
色物質で照射光を吸収するため、生育に十分な光が供給
されなかったためであろうと考える。
通常、Ｍ４Ｎで培養すると、培養６〜７日間で藻濃度が
飽和になる。
飽和になる。
この培養６日目の細胞容積を比較した。
その結果、表から明らかなように、Ｇ。Ｓ添加区は対照
の培地区の２〜３倍の容積増加率を示した。
の培地区の２〜３倍の容積増加率を示した。
その場合に、Ｇ、 Ｓ、を水に稀釈した区はその色かや
〜黄味を増した。
〜黄味を増した。
試験例 ３
グレイン・シロップ１０％水懸濁液を遠心処理（ｉ、ｏ
ｏ ｏｘ、ｙ 、 ｔ ｏ分）した上澄液を用意し、こ
れを水に対し、５％、２％、１％、０．５％、０％（対
照）となるようにして培地を作り、また％濃度のＭ４Ｎ
に対し５％、２％、１％、０．５％、０％（対照）とな
るようにして培地を作った。
ｏ ｏｘ、ｙ 、 ｔ ｏ分）した上澄液を用意し、こ
れを水に対し、５％、２％、１％、０．５％、０％（対
照）となるようにして培地を作り、また％濃度のＭ４Ｎ
に対し５％、２％、１％、０．５％、０％（対照）とな
るようにして培地を作った。
これら培地を試験管につめ、次にＣｈｌｏｒｅｌｌａｅ
ｌｌｉｐｓｏｉｄｅａ Ｇｅｒｎｅｃｋ Ｔ、１．を試
験例１と同じ方法で種培養した原液を６６０ｎｍのＯＤ
値が約０．１となるように入れ、次いで、１分間に９０
往復の振。
ｌｌｉｐｓｏｉｄｅａ Ｇｅｒｎｅｃｋ Ｔ、１．を試
験例１と同じ方法で種培養した原液を６６０ｎｍのＯＤ
値が約０．１となるように入れ、次いで、１分間に９０
往復の振。
盪数で２Ｋｌｕｘ照射下に２５°Ｃで振盪培養した。
それぞれについて、その培養中に経時的に６６０ｎｍの
ＯＤ値（ＯＤ６６０）を測定した。
ＯＤ値（ＯＤ６６０）を測定した。
その結果は第１図及び第２図に示される。
第１図は水にＧ、 Ｓ、上澄液を添加した場合を示し、
Ａは５％、Ｂは２％、Ｃは１％、Ｄは０．５％、Ｅは０
％（対照）をそれぞれ示している。
Ａは５％、Ｂは２％、Ｃは１％、Ｄは０．５％、Ｅは０
％（対照）をそれぞれ示している。
また第２図は％濃度のＭ４ＮにＧ、 Ｓ、上澄液を添加
した場合を示し、Ｆは５％、Ｇは２％、Ｈは１％、■は
０．５％、Ｊは０％（対照）をそれぞれ示している。
した場合を示し、Ｆは５％、Ｇは２％、Ｈは１％、■は
０．５％、Ｊは０％（対照）をそれぞれ示している。
図から明らかなように、水で培養した場合も％濃度のＭ
４Ｎで培養した場合もＧ、 Ｓ、の添加濃度が濃くなる
に従って増殖促進が大きくなった。
４Ｎで培養した場合もＧ、 Ｓ、の添加濃度が濃くなる
に従って増殖促進が大きくなった。
実施例 １
１０００を容透明プラスチック円柱培養槽に水を５３０
を入れ、次に１０％グレイン・シロップ懸濁液を１７０
を入れ培養液を調整した。
を入れ、次に１０％グレイン・シロップ懸濁液を１７０
を入れ培養液を調整した。
これにＣｈｌｏｒｅｌｌａ ｅｌｌｉｐｓｏｉｄｅａ
ＧｅｒｎｅｃｋＩＡＭＯ−２７の種培養液を５を添加し
、昼間のみ日光を照射する自然条件で空気を通気しつつ
１５〜２５°Ｃ（自然条件）で７日間培養した。
ＧｅｒｎｅｃｋＩＡＭＯ−２７の種培養液を５を添加し
、昼間のみ日光を照射する自然条件で空気を通気しつつ
１５〜２５°Ｃ（自然条件）で７日間培養した。
得られた細胞数は８×１０１０ｃｅ１１ｓ／ｌであった
。
。
水のみによる培養では５．６Ｘ１０１０ｃｅｌｌｓ／ｌ
であった。
であった。
実施例 ２
実施例１と同様に、水をＭ４Ｎに置きかえて、０ｈｌｏ
ｒｅｌｌａ ｅｌｌｉｐｓｏｉｄｅａ Ｇｅｒｎｅｃｋ
ＩＡＭＣ−２７を培養した。
ｒｅｌｌａ ｅｌｌｉｐｓｏｉｄｅａ Ｇｅｒｎｅｃｋ
ＩＡＭＣ−２７を培養した。
７日間の培養後、得られた細胞数はＩＩ’Ｘｌ０１０ｃ
ｅ１１ｓ／ｌであったが、容積増加率は１７倍であった
。
ｅ１１ｓ／ｌであったが、容積増加率は１７倍であった
。
一方、Ｍ４Ｎのみの場合は細胞数１２刈０１０ｃｅ ｌ
Ｉ ｓ ／ｌであったが、容積増加率は１１倍に過ぎ
なかった。
Ｉ ｓ ／ｌであったが、容積増加率は１１倍に過ぎ
なかった。
第１図は試験例３における各水培地における培養曲線を
示し、Ａは５％、Ｂは２％、Ｃは１％、Ｄは０．５％、
Ｅは０％をそれぞれ示し、第２図は試験例３における各
Ｍ４Ｎ培地における培養曲線を示し、Ｆは５％、Ｇは２
％、■は１％、■は０．５％、Ｊは０％をそれぞれ示し
ている。
示し、Ａは５％、Ｂは２％、Ｃは１％、Ｄは０．５％、
Ｅは０％をそれぞれ示し、第２図は試験例３における各
Ｍ４Ｎ培地における培養曲線を示し、Ｆは５％、Ｇは２
％、■は１％、■は０．５％、Ｊは０％をそれぞれ示し
ている。
Claims (1)
- １ クロレラを培養するに際し、培地にグレイン・シロ
ップを１〜１０％添加することを特徴とするクロレラの
培養法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP53039759A JPS5933353B2 (ja) | 1978-04-06 | 1978-04-06 | クロレラの培養法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP53039759A JPS5933353B2 (ja) | 1978-04-06 | 1978-04-06 | クロレラの培養法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS54132293A JPS54132293A (en) | 1979-10-15 |
| JPS5933353B2 true JPS5933353B2 (ja) | 1984-08-15 |
Family
ID=12561869
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP53039759A Expired JPS5933353B2 (ja) | 1978-04-06 | 1978-04-06 | クロレラの培養法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5933353B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6137649U (ja) * | 1984-08-11 | 1986-03-08 | ミツミ電機株式会社 | 光通信装置 |
| JPH0170447U (ja) * | 1987-10-27 | 1989-05-10 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5329978A (en) * | 1976-09-02 | 1978-03-20 | Tax Adm Agency | Cultivation medium |
-
1978
- 1978-04-06 JP JP53039759A patent/JPS5933353B2/ja not_active Expired
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6137649U (ja) * | 1984-08-11 | 1986-03-08 | ミツミ電機株式会社 | 光通信装置 |
| JPH0170447U (ja) * | 1987-10-27 | 1989-05-10 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS54132293A (en) | 1979-10-15 |
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