JPS5936638A - （１２Ｚ）−ラブダ−１２，１４−ジエン−１７α−オイツクアツシド及び該化合物からなるたばこ用香喫味改良剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はアビエノールの微生物転換により得られる（１
２Ｚ）−ラブダ−１２，１４−ジエン−１７α−オイッ
ク　アラシド及び該化合物からなるたばこ用香喫味改良
剤に関するものである。

近年、たばこの嗜好は喫味が軽く香気の豊かな製品へと
移りつつあるが、これに伴なって製品たばこに配合され
る原料葉たばこは、喫味が軽くニコチン含１゛が少ない
ものが多く使用されるようになってきた。しかしながら
、このような原料葉たばこは一般に香気に乏しく、うま
みに欠けるため、種々の香味料を添加して製品の香喫味
の向上をはかることが必要とされる。

一方、かかる目的に適する香味料をある種の化合物の微
生物転換によって製造する研究が行なわれており、例え
ば、イオノン系化合物の微生物転換によるたばこ用香料
としては、特開昭５３−１２４９８号、同５３−１０７
４８２号、同５３−１０７４９８号などにその記載がみ
られる。

本発明者らヲ］、かかる観点からアビエノールを微生物
転換することによって有用なたばこ用有刺を得ることを
目的として研究を行なったところ、アビエノールに一定
の条件下である種の微生物を働かせることにより、転換
物としてアビエノールに比してたばこの香喫味改善及び
刺激抑制にきわめて有〃１な新規化合物を見い出し、本
発明をなすに至った。

すなわち、本発明は次式（１）で示される化合物および
、上記の（１）式で表わされる化合物からなるたはこ用
香喫昧改良剤である。

（１）式で表わされる化合物は（１２Ｚ）−ラブダ−１
２目−ジエン−１７−α−オイックアッシド（（１２Ｚ
）−１ａｂｄａ−１２，１４−ｄｉｅｎ　−１？　−ａ
　−ｏｉｃ　ａｃｉｄ）である（以下化合物（１）と称
する）。

本発明において微生物転換の基質として用いるアビエノ
ールは式（Ｉｔ）で示される公知化合物であり、トルコ
葉たばこ等の精油成分として知られているがアビエノー
ルだけでは望ましく次ニアヒエノールの微生物転換によ
る本発明の化合物の製造法の一例を説明する。まず、ア
ビエノールを含む培地に微生物ＪＴＳ−１６２株（微工
研菌寄第５７０２号）を接種し、２８℃で好気的に培養
し、約１２時間後、α、αＩ−ジピリジルなどのキレー
ト阻害剤を加え更に２８℃で約３６〜６０時間好気的に
培養を行なう。約４５〜５ｏ峙間の培養により最も好ま
しい転換効果が得られる。転換の終了した培養液を、酢
際エチル、エチルエーテル等の有機溶蝉で抽出した彼、
溶媒を減ｒＥ下で留失し、転換生成物を得る。この転換
生成物をシリカゲルカラムを用いて、ヘキサン−酢酸エ
チル混液などの溶媒により溶出し、分］（ｖすること＆
；−Ｊ：　ッ７　Ｗｉ　製り、　７化合物（１）をる。

１、形態的性質 （１）　　桿菌であり、細胞の形態は培養の経過に伴な
い変化する。＠養の初期には細胞は伸長し、分校を生ず
る。培養１２〜１４時間で細胞目子規則な４）断を生じ
、その後短桿状となる。大きさ４：Ｊ　＃ｆ　養の初期
には（０，６〜０．８）×（５〜１５）＃、分断後は（
０，６〜ｏ、８）　ｘ　（ｏ、Ｂ〜１．８）μとなる。

（２）　　グラム染色性Ｓ陽性 （３）抗　酸　性：陽性 　５− （４）胞子彰成能：なし く５）運　動　性：なし ２、化学的組成分析 （１１！ｆｆ胞壁０構成主要アミノ酸４：ｔ　ｍｅｓｏ
−ジアミノピメリン酸である。

（２）ＤＮＡ中のグアニン＋シトシンの金柑は６２．５
モル％である。

３、培養所見 （１）肉汁寒天平板培養（２８℃、６日間培養）：生育
はやや瀝くコｏニーの形は円形、直径は１．５〜２關、
川辺は波状９表面は平滑。

色調は白色で培養の経過に伴いかっ色になる。培地の色
は変化しない。

（２）肉汁寒天斜面培養（２８℃、４日間培養）：生育
はやや遅い。形状９色調は肉汁寒天平板培養に同じ。

（３）肉汁液体培養（２８℃、６日間培養）棺地はあま
り沖らない。表面にゆっくりと菌Ｍ％’が形成され、そ
の後沈陪して沈査となる。捗とうして培養すると均一な
生育を示す。

　６− （４）肉汁ゼラチン穿刺培養（２８℃、６週間培養）ズ
液化七ず、１表面に菌体が生育。

（５）　　リドマス−ミルク（２８℃、６週間培養）：
ゆっくりと酸を生成する。

４　生理的性情 （１）生育条イ１１：　：　２０〜３０℃が生育の適温
、　ｐＨは６６〜８５が適値、婚気的条件下では生育で
きない。

（２）　　栄養要求性：なし く３）　　６１′Ｉ醜塩の還元：陽性 （４）デンプンの加水分解：なし く５）　　クエン酎′の利用：陽性 （６）　ウレアーゼ：陽性 （カ　オキジダーセ：１傷性 （８）　　カタラーゼ：陽性 （９）色素の生成；なし くＩｆυ　Ｏ−）゛テスト：醗酵的 ０１）　　メチルレアトチスト：陰性 （１２１Ｖ−Ｐテスト：陰性 ０３）インドールの生成；なし ０４）以下の糖類からの！ｔＪひガスの生成酸　　ガス １、　　Ｌ−アラビノース　　　　十　　−２、Ｄ−キ
シロース　　　　　＋ ３、　　Ｄ−グルコース　　　　　　＋　　−４、Ｄ−
マンノース　　　　　十　　−５、Ｄ−フラクトース　
　　　＋ ６　Ｄ−ガラクトース　　　　十　　−７、麦　　芽　
　糖　　　　　　　　　　　十８　ショ糖　　　　　　
　　＋　　− ９、乳　　糖　　　　　　　　　　　　　　−１０、ト
レハロース　　　　　　　＋ １１　　Ｄ−ソルビット　　　　　＋ １２　　Ｄ−マンニット　　　　　＋ １３　イノジット　　　　　　　＋ １４　グリセリン　　　　　　＋ １５　デンプン　　　　　　　　　− ＋　・・・生成　　−・−生成せず ａ９　以下の化合物を炭素源として生育する。

Ｄ、Ｌ−アラニン、パラフィン、ピルビン酸、プロピオ
ン酸。

（ト）　エスクリンの分ｗｒ　：陽性 αの　ツウィーン６０の分解：陽性 （坤　チロンンの分解：陰性 （ロ）アビエノール、スクラレオール、及びマヌールの
資化：陽性 以上の結果から、パージエイズ・マニュアル・オブＱデ
ターミネーティブ・バクテリオロジー（Ｂ＠ｒｇ＠ｙｓ
’Ｍａｎｕａｌ　ｏｆ　Ｄｅｔｅｒｍｌｎａｔｌｖ＊　
Ｂａｃｔｓｒｉｏｌｏｇｙ　）　、第８版（１９７４年
）に基づき、本菌株ＪＴＳ−１６２をノカルディアφレ
ストリクタ（Ｎｏｃａｒｄｌａ　ｒｅｉｔｒｉｃｔａ）
と同定した。

次に製造例を掲げてさらに具体的に説明する。

（製造例）バクトートリプトン（米国Ｄｉｆｃｏ社製）
１％、イーストエキストラクト０５％、塩化ナトリウム
０．５％、グルコースｏ、Ｉ　Ｓ　１　寒天１．５チか
ら成る公知のＬ−斜面培地（ＰＨ７，２）奢試験管内に
作り、これにＪＴ８−１６２株を約１０金耳接種して、
２８℃で３日間静置培養し、これをｓ繭として用いた。

９− １ついで、（ＮＨ，）、８０４２　ｔ　、　Ｋ、）ＩＰ
０４２　ｔ　。

Ｍｆｓｏ４−７Ｈ，００，２ｆ　、　ＣａＣｌ２−２Ｈ
，００，２ｆ　、　Ｐｅ５ｏ４＊７Ｈ，ＯＯ，０１ｆ　
、　Ｈ，０１ｔから成る液イ＋ｋｆｇ地１（メｒ７．ｏ
）を３を容土角フラスコに入れ、１２１℃で１５分間滅
菌を行なう。この滅菌済液体培地に粉末状のアビエノー
ル１ｆと、１％Ｔｗｅｅｎ　６０水溶液（界面活性剤、
関東化学株式会社製）１（ｊｍｔを加えた。前記のＬ−
斜面培地１本分のＪＴ８−１６２株の種菌体を、５ｍｌ
の滅菌法０．８％生理食塩水にけんだくし、前述の液体
培地に接種した。ついで回転振とり機を用いて、２１０
ｒｐｍ、２８℃で１２時間培養を行なったのち、キレー
ト阻害剤としてα、α′−ジピリジルをｌ　Ｑ　ｇ（ｍ
ｏ　ｌ　ｅ／ｍｌ添加し、さらに４８時間培養をＷ続し
た。この培養によってアビエノールの転換生成物を含む
培養物を得、この培養物から次の操作を行ない化合物（
１）を分取した。

すなわち、該培養物へ溶媒として酢酸エチルを１回当り
５０Ｏｍｔずつ加えて、２回攪拌抽出を行なった。抽出
液を合して、溶媒を減圧下で留−１〇− 失し、０．８Ｏｆの転換生成物を得た。次いで５０Ｖの
シリカゲル（和光純薬工業株式会社製、ワコーゲルＣ−
２００）をハ■いてカラムを作り、転換／ｆ：成物を−
・今サン：酢酸エチル（５２５，マ／ｖ　）で溶出し、
フラクションコレクターで各５ｍｔずつ３．）　ｆｌｕ
　Ｌだ。化合物（夏）を含むフラクションを１１１び上
述のカラム処３３１１を行ない、溶媒を留去しでｆＩ！
Ｊ　ＦＪすることにより化合物（１）　０．３０１ｆヲ
行だ。

次に本発明の化合ｑＩＡ（１）のスペクトルデータを示
す。

分子式”　Ｃｔｏ”ａｔへ。

１”ｃ　−ＮＭＲ（ＣＤＣ１，、ＴＭ８　）δ（ｐｐｍ
）：ｉｓ、９（ｑ）。

１６．３（Ｑ）、ｔ７．ａ（ｔ）、１９．９（Ｑ）、２
３１（ｔ）。

２４、ｏ（ｔ）、ａ６．ｏ（ａ）、４７．２（ｄ）、ｓ
ｏ、２（ｔ）。

６２．２（ｄ）、７４．７（！ｌ）、１１３．５（ｔ）
、１Ｂ０．７（ｓ　）　＊　１３　：’ｌ−９（’　）
　ｓ　１３３１９　（ｓ　）　ｔ　１８３−７　（ｓ　
）。

ＩＲ□Ｉ−’　：　３４００　ｔ　２９３０　ｓ　１６
８５　、１３８５５１２４５．９００゜ λｉｓ　ｍ／ｚ　：　３２０　（Ｍ’−）　、　ａ　０
２　、２　ｇ　７　、２７４　。

２３６．２２１．１７９，１６１．１４８，１３４，１
１９．８４，４３゜ 以上のスペクトルデータから化合物（１）は前記の（１
）式で表わされる化学構浩を有する事が確認された。

本発明の化合物（１）はたばこに添加した場合、たばこ
本来の香りとよく調和し、刺激を抑え、香りをまろやか
にし、さらに効果に持続性があり、たばこの製造工程中
における進数が少ないなど多くのすぐれた効果を有する
ことが判明した。

本発明の化合物をたばこの香喫味改良剤として使用する
には、エタノール、エチレングリコール等の溶媒で適当
な濃度に希釈し、製品たばこ原料に対し、０．０１〜３
０　ｐｐｍ　（ｗ／ｗ　）　、好ましくは０．１〜ｌｐ
ｐｍを添加することによりその効果を発揮する。本発明
の化合物を有効に適用しうるたばこの種類は特に限定さ
れるものではなく、栽培により得られるたばこのみなら
ず、屑たばこを原料として製造される再生たばこ及びパ
イプたばこにも有ｍｔである。

以下、実施例により本発明の効果を具体的に説明する。

実施例１゜ 巻上ＮｆＪ前の１１本専売公社商品名「チェリー」川た
ばこ刻み１００ｔに対して前述の製造例で示した方法で
ルリ造した化合物（１）を３ｍｔのエタノールに溶解し
て、０．５ｐｐｍになるように噴膠嗜添加した移紙巻し
、化合物（１）無添加の上記たばこ刻みの巻上品を対照
として、これらを喫煙したときのにおい及び味について
二点識別法により比較した。官能検査専門パネル２０人
の評価は第１表に示すとおりであった。

第１表 ？、Ｅ　）　　数字は濃いとした人数。中部は危険率１
％で試料間に有意差σ１．あることを示す。

１３− 実施例２ 屑たばこを１００℃の熱水で抽出し、水溶性部と不溶性
部に分けた後、水不溶性部を叩解し、これに乾物重の１
５％のクラフトパルプを加えた混合物を薄紙吠に成型し
、この薄紙に上記の水溶性部をもどして作ったシート吠
再生たばこ１００ｆに対して、実施例１．と同様の化合
物（１）を３ｍｔのエタノールに溶解して１．０ｐｐｍ
になるように噴霧・添加したのち９１刻して紙巻し、化
合物（１）無添加の上記シートの１刻９巻上品を対照と
して、におい、味、および刺激について二点識別法によ
り香喫味を比較した。官能検査専門パネル２０人の評価
は第２表に示すとおりであった。

第２麦 １４− 注）Ｐ字は白いとした人数。中部は危険率１％で試判間
番と有意差のあることを示す。

ｑｔ！「ｍ出願人　日本専売公社 １５− ２２３−

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １　式（１）で示される化合物。 ２、　式（１）で示される化合物からなるたばこ用香喫
   味改良剤。