JPS5936640A - １３β−ハイドロキシラブダ−８（１７），１４−ジエン−１８−オイツクアツシドメチルエステルおよび該化合物からなるたばこ用香喫味改良剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はマヌールの微生物転換によって得られる１３β
−ハイドロキシラブダ−８（１７）、１４−ジエン−１
８−オイック　アラシドメチルエステルおよび該化合物
からなるたばこ用香喫味改良剤番こ関するものである。

近年、たばこの賂好は喫味が軽く香気の豊かな製品へと
移りつつあるが、これに伴なって製品たばこに配合され
る原料葉たばこは、喫味が軽くニコチン金側が少ないも
のが多く使用されるようになってきた。しかしながら、
このような原料葉たばこは一般に香気に乏しく、うまみ
に欠けるため、種々の香味料を添加して製品の香喫味の
向上をはかることが必要とされる。

一方、かかる目的に適する香味料をある種の化合物のい
わゆる微生物転換によって製造するω１究が行なわれて
おり、例えは、イオノン系化合物の微生物転換によるた
ばこ用１１判としては、特開昭５３−１２４９８号、特
公昭５６−４２９０９号、同５６−４２８９８号、同５
６−５４２９９号などに　２− その記載がみられる。

本発明者ら（Ｊｌかかる観点からマヌールを微生物転換
することによって不用なたばこ香料を得ることを目的と
して研究を行なったところ、マヌールに一定の条件下で
ある釉定の緒生物を作用させることにより、転換物質と
してマヌールに比してたばこの％１１３１１味改善及び
刺激抑制にきわめて有効な新規化合物をｙいａｔ　Ｌ、
本発明をなすに至った。

すなわち、本発明はたばこの香喫味改善に有効な新蜆、
化合物を提供することを目的としたもので、次式（１）
で示される化合物及び、下記の式（１）で表わされる化
合物からなるたばこ用香嗅味改良剤である。

式（Ｔ）で表わされる化合物け１３β−ハイドロキシラ
ブダ−８（１７）、１４−ジエン−１８−オイック　ア
ラシド　メチルエステル（１３β−ｈｙｄｒｏｘｙｌａ
ｂｄａ　−８（１７）、　１４−　ｄｉｅｎ　−１８−
ｏｉｃａｃｉｄｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ　）　（以下化
合物（１）と称する）である。

本発明において微生物転換の基質として用いるマヌール
は式（ｎ）で示される公知化合物であり、イエローパイ
ン（ダクリジウム　ビホルメ）　（ｙｅｌｌｏｗｐｉｎ
ｅ　（Ｄａｃｒｙｄｉｕｍ　ｂｉｆｏｒｍｅ　）　Ｅ等
の材油成分として知られており、香料の合成原料として
知られているが、マヌールだけでは望ましくない結平か
得られている。

次に本発明の化合物のマヌールの際生物転換による’Ｊ
（ｊ　Ｂ法の−・例を説明する。まず、マヌールを含む
培地に静止物ＪＴ８−１３１株（做工研菌寄第６３０３
号）を核油し、２８℃で好気的に′ｋｇ養し、約１２詩
間拶、エチレンジアミン四酢＃（ＥＤＴＡ　）などのキ
レート阻害剤を加え、更に２８℃で約３６〜６０詩囲好
気的に培養を行なう。約４５〜５０時間の培養によって
最も好ましい転換効果が得られる。転換の終了した培養
液を、酢酸エチル、エチルエーテル等の有機溶媒で抽出
したのち、溶＃、′ＩＬ沖、［１：、下で留去し、転換
生成物を得る。この転換生成物をシリカゲルカラムを用
いて、ヘキサン−酢酸エチル混液などの溶媒により溶出
し、分稍することによって精製しである。

１、　形態的何角 （１）桿菌であり、細胞の形態は培養の経過に　５− 伴い変化する。培養の初期には細Ｈ’ｔＪ、　？；］伸
長し、分秒を生ずる。培養１２〜１４時間で細ｆｆｆｉ
ｌ　ｔｅｌ不規則な分断を生じ、その後細形１は短稈状
となる。大きさは培養の初期には（ｏ、６〜ｏ、５）ｘ
（ｓ〜１５〕μ９分断後は（０３６〜ｏ、５）Ｘ（１，
２〜１．８）μとなる。

（２）　　ダラム染色性：陽性 （３）抗　酸　性：陽性 （４）胞子形成能：なし く５）運　動　性：なし ２、化学的組成分析 （１）細胞壁の構成主要アミノ酸はｍｅｓｏ−ジアミノ
ピメリン酸である。

（２）　　ＤＮＡ中のグアニン士シトシンの含量は６３
．０モル％である。

３、　培養所見 （１）肉汁寒天平板培養（２８℃、４日間培養）：生育
はやや遅くコロニーの形は円形で直径は１〜２鰭、ムコ
イド状を示し、色調は黄かっ色である。培地の色は変化
しない。

　６− （２）肉汁寒天斜ｍｉ培養（２８℃、４日間培養）：生
育（Ｊやや遅く、ムコイド状を示す。色＃、’Ｊ目肉ｔ
１寒天平板培養と同じ。

（３）肉汁液体培養（２８℃、６日間培養）：培地はあ
まり濁らない。表面にゆっくりと菌１１１・□・が形成
きれ、その後沈閘して沈査となる。

（４）　　１）Ｒ１セ５　チンＱ）ｐｌｑ９膚：　（２
８℃、６週ＩＩＩ培％’）：＃化０ず。表面に菌体が枠
状にかつムコイド状に生育。

（５）　　リドマス・よバク（２８℃、６週間培養）＝
アルカリ。

４　生理的性穎 （１）生育条件：２５〜３５℃が生育の適温、ｐＨは６
５〜８０が適値、嫌気的条件下では生育できない。

（２）栄養要求ｆ１．：なし く３）硝酸ａ＋の還元：なし く４）　デンプンσ）加水分解：なし く５）　　タエン酪の利用：陰性 （６）　ウレアーゼ：陽性 （７）オキシダーゼ：陰性 （８）　　カタラーゼ：＠特 （９）色紮の生成：なし くＩｎ）０−Ｆテスト：醗酵的 ０１）　　メチルレッドテスト：＠性 ０渇　ｖ、ｐテスト：陰性 θ３）インドールの生成：なし ０４）下記の＃力１からの酸及びガスの生成〜・、　　
ガス Ｉ　Ｌ−アラビノース　　　十　　− ２Ｄ−キシロース　　　　− ３Ｄ−グルコース　　　　十　　− ４Ｄ−マンノース　　　　＋　　− ５Ｄ−フラクトース　　　＋ ６　Ｄ−ガラクトース　　　十　　− ７、麦芽糖　　　　　　　　＋ ８　　　シ　ョ析）十− ９乳　　糖　　　　　　　　　　　　　−１０、トレハ
ロース　　　　　　＋ １’１．　　Ｄ−ソルビット　　　　＋１２、　Ｄ−マ
ンニット　　　　士 １３、　　イノシ、ト＋ １４、　　グリセリン　　　　　　士 １５　デンプン　　　　　　　− 十　・・・生成　　−・・・生成せず。

（１５）以下の化合物を炭素源として生育する。

パラフィン、ピルビン酸、フェノール。

（Ｉｌｉ）　　エスクリンの分解：陰性ｆ１７１　　ツ
ウィーン６０の分解：陽性（ＩＱＩ　　チロシンの分解
；陰性 （１！１１　　アビエノール、スクラレオールの資化：
陽性。

取手の結％からインターナシ、ナル昏ジャーナル・オブ
惨システマチ、り争バクテリオロジ−（Ｔｎｔｅｒｎａ
ｔｌｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　８ｙａｔｅｍａ
ｔｉｃ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　）ａ５ｅｐ、ｒ　
、１９８０４１’のアブルーブト・リスク・オブ拳バク
チリアルゆネームズ（Ａｐｐｒｏｖｅｄ　Ｌｉ５ｔｓｏ
ｆ　ＢａｃｔｅｒｌａＩ　Ｎａｍｅｓ　）及びエム・グ
ツドフェロ−らの報告〔インターナシ、ナル・オブ・シ
ステマ−ｆ、りｏバクｆ’）オルジー（Ｉｎｔｅｒｎａ
ｔｉｏｎａｌ９− Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ　Ｂａｃ
ｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　）　９９頁、　１９’ｌ’１年〕
およびその他の文献に基づき、杢菌＠；　ＪＴＳ−１３
１をロドコッカス・エリスロポリス（Ｒｈｏ−ｄｏｃｏ
ｃｃｕｓ　ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｌｉｓ　）と同定した。

次に製造例を掲げてさらに具体的に説明する。

（製造例）バクトドリブトン（半田ＤｉｆＣＯ社製）１
％、イーストエキストラクト０５％、塩化ナトリウム０
．５％、グルコース０．１％、寒天１５％からなる公知
のＬ−斜面培地（ｐＨ７，２）を試験管内に作り、これ
にＪＴＳ　−１３１株を約１白金耳接種して、２８℃で
３日間培養し、これを種菌体として用いた。

ついで、（ＮＨ）　　５ｏ４２　ｆ　、に、Ｔ（Ｐｏ、
　２　ｆ　。

１１ ＭりＳｏ、４Ｈ，００，２ｔ　、　ＣａＣｌ２・２Ｈ，
００，２ｔ　、Ｆｅ８０゜拳７Ｈ２００，０１ｔ　、　
Ｈ，０１ｔから成る液体培地（ｐＨ７，２）を３を容三
角フラスコに入れ、１２１℃で１５分間滅菌を行なう。

この滅菌法液体培地にマヌールＩｆと、１％Ｔｗｅｅｎ
　６０水溶液（界面活性剤、関東化学株式会社１！Ｉり
１０ｍｔを加えた。前記のＬ−斜面培地１本分のＪＴＳ
　−１３１株の種菌体を、　ＩＯ− ５ｍｔの滅菌済０８ｔ１生理食塩水にｉ−＋んだくシ、
前述の液イ（パ椿坤に梓ｔ（１シた。ついで回転振とう
機を用いて、２１　Ｏｒｐｍ　、　２８℃で１２時間培
養を什なった後、キレ−ＦＩｓＩＩ　官剤としてエチレ
ンシアｉ＞四酢１　（ＦＩＤＴＡ　）を１０　ｍ　ｍｏ
ｌｅ／ｍｔ添加し、さらに４８時間培養を継続した。こ
の培養によってマヌールの転換生成ψ１を含む培養物を
得。

この培養物から次の操作を行ない化合物（１）を勿取し
た。

ずなわち、該培＃ｖ１へ溶媒として酢酸エチルを１回当
り５００　ｍｌずつ加えて、２回攪拌抽出をｆ−ｒなっ
た。抽出液を合して、溶蝉を減圧下で留去し、０８０ｆ
の転換生成物を得た。次いで５０Ｖのシリカゲル（和光
純薬工業杵式会社製、ワコーゲルＣ−２００）を用いて
カラムを作り、転換！１．成物をヘキサン：酢酸エチル
（７：３　ｓ　ｖ／ｖ　）で溶出し、フラクションコレ
クターで各５ｍ１．ずつ分取した。化合物（１）を含む
フラクションを再ひ上述のカラム妨１理を行ない、溶媒
を留去して精製することにより化合物（１）ｏ、ｔａｆ
を得た。

次に本発明の化合物（１）のスペクトルデータを示す。

分子式：０２．Ｈ８４０８ ”Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣ１８，ＴＭ８　）δｐｐｍ：１５
．２（ｑ）　、１７．６（Ｑ）、１８．５（ｔ）、１９
．３（ｔ）、２７．５（ｔ）、２９．１（ｑ）、３８．
０（ｔ）、３８．６（ｔ）、３８．８（ｔ）、３９．８
（ｓ）、４２．５（ｔ）、４７．９（Ｓ）、ｓｏ、４（
ａ）、ｓｓ、。

（ｄ）、７３．１（１）、１０７．６←ｔ）、ｔｔｘ、
５（ｔＬ１４７．３（ｄ）、１４８．９（Ｓ）、１８１
．３（ｓ）。

ＩＲｍ　　、３４８０，２９１０，２８４０，１７２０
，１４４０．１２４０，１１２５，９１０゜ ＭＳ　ｍ／ｚ　：　３１９　（Ｍ＋−ＣＨ８）　、　３
１６　、２５８　。

２４１．１７５，１３３，１２１，７９，５５゜以上の
スペクトルデータの結果から、化合物（１）は前記の式
（１）で表わされる化学構造を有する事が確認された。

本発明の化合物（１）はたばこに添加した場合、たばこ
本来の香りとよく調和し、刺激を抑え、香りをまろやか
にし、さらに効果に持続性があり、たばこの製造工程中
における逸散が少ないなど多くのすぐれた効果を有する
ことが判明した。

本発明の化合物をたばこの香喫味改良剤として使用する
には、エタノール、エチレングリコール初の溶媒で適当
な濃度に希釈し、製品たばこ坤刺に刺し、０．０１〜３
０ｐｐｍ（ｗ／ｗ）、好ましくは０．１〜１．０ｐｐｍ
を添加することによりその効果を発揮する。本発明の化
合物を有効に適用しうるたばこの種力°１目的に］恨定
されるものではなく、叔培により１１１られるたばこの
みならず、屑たばこを原料として１’！ｉされる再生た
ばこ及びパイプたばこにも有効である。

以下実施例により本発明の効果を具体的に説明する。

実施例１゜ 巻上直前の日本専売公社商品名「チェリー」用たばこ刻
み１００Ｆに対して前述の製造例で示した方法で製造し
た化合物（１）を３ｍｌのエタノールに溶解して、　０
．５ｐｐｍになるように噴霧・添加した後１紙巻し、化
合物（１）無添加の　１３− 上記たばこ刻みの巻上品を対照として、これらを喫煙し
た時のにおい及び味について二点識別法により比較した
。専門官能検査パネル２０人の評価は第１表に示すとお
りであった。

第１表 注）　数字は良いとした人数。中部は危険率１％で試料
間に有意差のあることを示す。

実施例２ 屑たばこを１００℃の熱水で抽出し、水溶性部と不溶性
部に分けた後、水不溶性部を叩解し、これに乾物重の１
５％のクラフトパルプを加えた混合品を薄紙状に成型し
、この薄紙状に上記の水溶性部をもどして作ったシート
状再生たばこ１００ｆに対して、実施例１．と同様の化
合物（１）を３ｍｔのエタノールに溶解して１１−０ｐ
ｐになるよ１４− うに暗紅・絵加したのち、１刻して紙巻し、化合亜１（
■）無絵加の上記シートの１刻・巻上品を対照として、
におい、味、および刺激について二点識別法により香喫
味を比較した。専門官能検査パネル２０人の評価は第２
表に示すとおりであった。

＊＜２表 汗）数字は良いとした人数。中部は危険率１％で試料量
に４１意差のある事を示す。

特許出願人　　日本専売公社 　１５−

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、　次式（１）で示される化合物。 ２　次式（１）で示される化合物からなるたば　１−