JPS594120B2 - 抗生物質セフアマイシンｃの製造法 - Google Patents
抗生物質セフアマイシンｃの製造法Info
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- JPS594120B2 JPS594120B2 JP54075830A JP7583079A JPS594120B2 JP S594120 B2 JPS594120 B2 JP S594120B2 JP 54075830 A JP54075830 A JP 54075830A JP 7583079 A JP7583079 A JP 7583079A JP S594120 B2 JPS594120 B2 JP S594120B2
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- cefamycin
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- strain
- medium
- streptomyces
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P35/00—Preparation of compounds having a 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring system, e.g. cephalosporin
- C12P35/08—Preparation of compounds having a 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring system, e.g. cephalosporin disubstituted in the 7 position
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は抗生物質セフアマイシンＣの製造法に関する
。
。
セフアマイシンＣは〔７−（５−アミノー５ーカルボキ
シバレルアミド）−３−カルバモイロキシメチルー７−
メトキシー３−セフエムー４−カルボン酸と命名され、
下記の平面構造式を有する公知の抗生物質である。
シバレルアミド）−３−カルバモイロキシメチルー７−
メトキシー３−セフエムー４−カルボン酸と命名され、
下記の平面構造式を有する公知の抗生物質である。
セフアマイシンＣ生産能を有し、またその至適培養温度
が公知菌に比し高い所から、何ら冷却操作等を必要とす
ることなく、簡便な操作及び装置で容易にしかも極めて
多量のセフアマイシンＣを工業的規模で、安価に収率よ
く製造することができる。
が公知菌に比し高い所から、何ら冷却操作等を必要とす
ることなく、簡便な操作及び装置で容易にしかも極めて
多量のセフアマイシンＣを工業的規模で、安価に収率よ
く製造することができる。
従つて本発明はセフアマイシンＣの新しい工業的製造法
を提供する極めて有効なものである。本発明に利用する
上記ストレプトミセス エスピー ＯＦＲ１０２２株の
菌学的性質を次に示す。Ｉ）形態学的特徴 ２８℃で３週間培養後に観察すると、気菌糸は主軸が長
く伸長し、その主軸から側枝が単純分枝し、その側枝は
しばしば密生して塊状をなす。
を提供する極めて有効なものである。本発明に利用する
上記ストレプトミセス エスピー ＯＦＲ１０２２株の
菌学的性質を次に示す。Ｉ）形態学的特徴 ２８℃で３週間培養後に観察すると、気菌糸は主軸が長
く伸長し、その主軸から側枝が単純分枝し、その側枝は
しばしば密生して塊状をなす。
胞子形成がなされる培地上では、側枝の形態は稀にルー
プ状をなす場合もあるが、数巻の密接した完全な螺旋状
をなす。胞子の表面はとげ状であり、胞子の形状は球形
乃至楕円形で、その大きさは０．７〜１．０Ｘ１．１〜
１．３μである。又１０個以上の連鎖をなして胞子が形
成される。６各種培地に於ける生育状態 ２８℃で３週間培養後の観察結果を下記第１表に示す。
プ状をなす場合もあるが、数巻の密接した完全な螺旋状
をなす。胞子の表面はとげ状であり、胞子の形状は球形
乃至楕円形で、その大きさは０．７〜１．０Ｘ１．１〜
１．３μである。又１０個以上の連鎖をなして胞子が形
成される。６各種培地に於ける生育状態 ２８℃で３週間培養後の観察結果を下記第１表に示す。
向表中色調の記載はカラー ハーモニーマニユアル（Ｃ
ＯｌＯｒＨａｒｍＯｎｙＭａｎｕａｌ）〔コンテイナ一
コーポレーシヨン オブ アメリカ、シカゴ（ＣＯｎ
ｔａｉｎｅｒＣＯｒｐＯｒａｔｉ一０ｎ０ｆＡｍｅｒｉ
ｃａ．Ｃｈｉｃａｇ０）〕 を参照した。（自）生理的
性質 １生育温度範囲 １５〜４６℃（至適生育温度約３ｒＣ
）２生育ＰＨ範囲 ＰＨ４．５〜８．５（至適生育ＰＨ
約６．５）３ゼラチンの液化 （グルコース・ペプトン
・ゼラチン培地上、２０℃）陰性 ４スターチの加水分解 （スターチ・無機塩寒天培地上
）陽性 ５脱脂牛乳の凝固、ペプトン化 ペプトン化する ６メラニノ様色素の生成 陽 性（チロシン寒天培地、 ペブトン・イースト・鉄寒天 上及びトリブトンイーストエ キス培地中） ７硝酸塩還元作用 陰性 ８セルロース分解能 陰性 Ｃ耐塩性 ３％で生育、５％で生育しな い （代）炭素源の利用性（プリドハム・ゴドリーブ寒天培
地上）Ｌ−アラピノース ± Ｄ−キシロース ＋ Ｄ−グルコース ＋＋ Ｄ−フラグドーズ ＋ シユクロース ＋＋ イノシトール ＋＋ Ｌ−ラムノース ラフイノース 土 Ｄ−マンニツト ＋＋ （注 ＋＋：よく利用する。
ＯｌＯｒＨａｒｍＯｎｙＭａｎｕａｌ）〔コンテイナ一
コーポレーシヨン オブ アメリカ、シカゴ（ＣＯｎ
ｔａｉｎｅｒＣＯｒｐＯｒａｔｉ一０ｎ０ｆＡｍｅｒｉ
ｃａ．Ｃｈｉｃａｇ０）〕 を参照した。（自）生理的
性質 １生育温度範囲 １５〜４６℃（至適生育温度約３ｒＣ
）２生育ＰＨ範囲 ＰＨ４．５〜８．５（至適生育ＰＨ
約６．５）３ゼラチンの液化 （グルコース・ペプトン
・ゼラチン培地上、２０℃）陰性 ４スターチの加水分解 （スターチ・無機塩寒天培地上
）陽性 ５脱脂牛乳の凝固、ペプトン化 ペプトン化する ６メラニノ様色素の生成 陽 性（チロシン寒天培地、 ペブトン・イースト・鉄寒天 上及びトリブトンイーストエ キス培地中） ７硝酸塩還元作用 陰性 ８セルロース分解能 陰性 Ｃ耐塩性 ３％で生育、５％で生育しな い （代）炭素源の利用性（プリドハム・ゴドリーブ寒天培
地上）Ｌ−アラピノース ± Ｄ−キシロース ＋ Ｄ−グルコース ＋＋ Ｄ−フラグドーズ ＋ シユクロース ＋＋ イノシトール ＋＋ Ｌ−ラムノース ラフイノース 土 Ｄ−マンニツト ＋＋ （注 ＋＋：よく利用する。
＋：利用する。±：わずかに利用する。 −は利用し
ない） （Ｖ）細胞壁中のジアミノピメリン酸 ＬＬ−ジアミノピメリン酸 以上を要約すると、本菌株 ０ＦＲ１０２２はストレブ
トミセス属に属する菌株であり、インターナシヨナル・
ストレプトミセス・プロジエクト（略称 １ＳＰ）の方
法によれば、胞子形成菌糸の形態はセクシヨンＳｐｉｒ
ａｉｅｓに属し、胞子表面はとげ状で、成熟した気菌糸
の色は灰色系統（ＧｒａｙｃＯｌＯｒｓｅｒｉｅ８）、
メラニン様色素は産生するが、他の可溶性色素はほとん
ど産出しない。
ない） （Ｖ）細胞壁中のジアミノピメリン酸 ＬＬ−ジアミノピメリン酸 以上を要約すると、本菌株 ０ＦＲ１０２２はストレブ
トミセス属に属する菌株であり、インターナシヨナル・
ストレプトミセス・プロジエクト（略称 １ＳＰ）の方
法によれば、胞子形成菌糸の形態はセクシヨンＳｐｉｒ
ａｉｅｓに属し、胞子表面はとげ状で、成熟した気菌糸
の色は灰色系統（ＧｒａｙｃＯｌＯｒｓｅｒｉｅ８）、
メラニン様色素は産生するが、他の可溶性色素はほとん
ど産出しない。
その他、基生菌糸及び裏面の色が淡黄色〜黄褐色もしく
は明るい褐色を呈すること及び生理的性質、炭素源の利
用能などの諸性質を、「バージーズ・マニユアル・オプ
・デイターミネイテイブ・バクテリオロジ一（Ｂｅｒｇ
ｅｙ８ＭａｎｕａｌＯｆＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｕｃＢ
ａｃｔｅ−ＲｌＯｌＯｇｙ）」第８版（１９７４年）、
ワツクスマン（Ｓ．Ａ．Ｗａｋｓｍａｎ）著「ジ゜アク
チノミセーデス（ＴｈｅＡｃｔｉｎＯｍｙｃｅｔｅｓ）
」第２巻（１９６１年）並びにシヤーリング（Ｅ．Ｂ．
Ｓｈｉｒｌｌｎｇ）及びゴツドリープ（Ｄ．ＧＯｔｔ−
１１ｅｂ）による「インターナシヨナル・ジヤーナル゜
オブ・システマテイツク・バクテリォロジ一（Ｉｎｔｅ
ｒｎａｔｉＯｎａｌＪＯｕｒｎａｔＯｆＳｙｓｔｅｍａ
ｔｉｃＢａｃｔｅｒｉＯｌＯｇｙ）」第１８巻第６９〜
１８９頁（１９６８年）、同第１８巻第２７９〜３９２
頁（１９６８年）、同第１９巻第３９１〜５１２頁（１
９６９年）及び同第２２巻第２６５〜３９４頁（１９７
２年）に検索したところ、ストレプトミセス・フイリピ
ネンシス（ＳｔｒｅｐｔＯｍｙｃｅｓｆｉｌｉｐｆｎｅ
ｎｓｉｓ）とストレプトミセス・ガンミシクス（Ｓｔｒ
ｅｐｔＯ一Ｍｙｃｅｓｇａｎｎｍｙｃｉｃｎｓ）とが最
も類似する菌種として挙げられた。従つて之等類似菌種
の標準株と、本薗株とを同一条件下に培養し、比較検討
した所下記第２表の結果を得た。１ストレブトミセス
フイリビネンシスＩＳＰ５ｌｌ２株は、気菌糸が小房を
形成しその先端がタイト スパイラル及びループ状或い
はフツク状であり、又グルコース・アスパラギン寒天培
地上で゛の基生菌糸の色は、マスタード・ブラウン（Ｍ
ｕｌａｒｄｂｒＯｗｎ９２ｐｌ）で裏面の色はベージユ
０ブラウン（ＢｅｉｇｅｂｒＯｗｎｌ３ｌｇ）を呈し、
更に硝酸塩還元能を有し、Ｌーアラピノース、ラフイノ
ースをよく利用する事等が本菌株 ０ＦＲ１０２２株と
異なつている。
は明るい褐色を呈すること及び生理的性質、炭素源の利
用能などの諸性質を、「バージーズ・マニユアル・オプ
・デイターミネイテイブ・バクテリオロジ一（Ｂｅｒｇ
ｅｙ８ＭａｎｕａｌＯｆＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｕｃＢ
ａｃｔｅ−ＲｌＯｌＯｇｙ）」第８版（１９７４年）、
ワツクスマン（Ｓ．Ａ．Ｗａｋｓｍａｎ）著「ジ゜アク
チノミセーデス（ＴｈｅＡｃｔｉｎＯｍｙｃｅｔｅｓ）
」第２巻（１９６１年）並びにシヤーリング（Ｅ．Ｂ．
Ｓｈｉｒｌｌｎｇ）及びゴツドリープ（Ｄ．ＧＯｔｔ−
１１ｅｂ）による「インターナシヨナル・ジヤーナル゜
オブ・システマテイツク・バクテリォロジ一（Ｉｎｔｅ
ｒｎａｔｉＯｎａｌＪＯｕｒｎａｔＯｆＳｙｓｔｅｍａ
ｔｉｃＢａｃｔｅｒｉＯｌＯｇｙ）」第１８巻第６９〜
１８９頁（１９６８年）、同第１８巻第２７９〜３９２
頁（１９６８年）、同第１９巻第３９１〜５１２頁（１
９６９年）及び同第２２巻第２６５〜３９４頁（１９７
２年）に検索したところ、ストレプトミセス・フイリピ
ネンシス（ＳｔｒｅｐｔＯｍｙｃｅｓｆｉｌｉｐｆｎｅ
ｎｓｉｓ）とストレプトミセス・ガンミシクス（Ｓｔｒ
ｅｐｔＯ一Ｍｙｃｅｓｇａｎｎｍｙｃｉｃｎｓ）とが最
も類似する菌種として挙げられた。従つて之等類似菌種
の標準株と、本薗株とを同一条件下に培養し、比較検討
した所下記第２表の結果を得た。１ストレブトミセス
フイリビネンシスＩＳＰ５ｌｌ２株は、気菌糸が小房を
形成しその先端がタイト スパイラル及びループ状或い
はフツク状であり、又グルコース・アスパラギン寒天培
地上で゛の基生菌糸の色は、マスタード・ブラウン（Ｍ
ｕｌａｒｄｂｒＯｗｎ９２ｐｌ）で裏面の色はベージユ
０ブラウン（ＢｅｉｇｅｂｒＯｗｎｌ３ｌｇ）を呈し、
更に硝酸塩還元能を有し、Ｌーアラピノース、ラフイノ
ースをよく利用する事等が本菌株 ０ＦＲ１０２２株と
異なつている。
２ストレプトミセス ガンミシクス ＩＳＰ５５７２株
は気菌糸の形態の大部分がセクシヨンＲＦ（Ｒｅｃｔｉ
ｆｌｅｘｉｂｉｌｅ８）に属し稀にややオープン状のス
パイラルやタイト スバイラルが存在し、シユクロース
・硝酸塩寒天培地上での生育は貧弱で、気菌糸の着生態
は認められず、一方、栄養寒天及びペプトン・イースト
゜鉄寒天培地上では、気菌糸の形成が認められ、その他
４６℃では生育できないこと、ゼラチンを液化すること
、炭素源の利用能、特にシユクロースを利用せず、Ｌ−
アラピノース、Ｌ−ラムノース、ラフイノースをよく利
用する事等が、本菌株０ＦＲ１０２２株とは異なつてい
る。
は気菌糸の形態の大部分がセクシヨンＲＦ（Ｒｅｃｔｉ
ｆｌｅｘｉｂｉｌｅ８）に属し稀にややオープン状のス
パイラルやタイト スバイラルが存在し、シユクロース
・硝酸塩寒天培地上での生育は貧弱で、気菌糸の着生態
は認められず、一方、栄養寒天及びペプトン・イースト
゜鉄寒天培地上では、気菌糸の形成が認められ、その他
４６℃では生育できないこと、ゼラチンを液化すること
、炭素源の利用能、特にシユクロースを利用せず、Ｌ−
アラピノース、Ｌ−ラムノース、ラフイノースをよく利
用する事等が、本菌株０ＦＲ１０２２株とは異なつてい
る。
以上のことから本菌株０ＦＲ１０２２株は、最も類似す
るストレプトミセス・フイリピネンシス及びストレプト
ミセス・ガンミシクスとは明らかに異なる新菌種である
と認められる。
るストレプトミセス・フイリピネンシス及びストレプト
ミセス・ガンミシクスとは明らかに異なる新菌種である
と認められる。
従つて本菌株０ＦＲ１０２２株を、ストレプトミセス・
エスピ一０ＦＲ１０２２（ＳｔｒｅｐｔＯｍｙｃｅ８ｓ
ｐ・０ＦＲ１０２２）株と命名した。該株は工業技術院
微生物工業技術研究所に、微生物受託番号微工研菌寄第
４９８５号（ＦＥＲＭ−Ｐ▲４９８５）として保管され
ている。本発明は上記ストレブトミセス エスピ一０Ｆ
Ｒ１σ２２株或はその自然変異株もしくは人工変異株を
利用することを必須とする。
エスピ一０ＦＲ１０２２（ＳｔｒｅｐｔＯｍｙｃｅ８ｓ
ｐ・０ＦＲ１０２２）株と命名した。該株は工業技術院
微生物工業技術研究所に、微生物受託番号微工研菌寄第
４９８５号（ＦＥＲＭ−Ｐ▲４９８５）として保管され
ている。本発明は上記ストレブトミセス エスピ一０Ｆ
Ｒ１σ２２株或はその自然変異株もしくは人工変異株を
利用することを必須とする。
之等の培養は、通常の培養方法に従い実施でき、好まし
くは液体培地中での振とう培養又は通気攪拌培養により
行なわれる。培地成分としては、放線菌の栄養源として
公知の各種の栄養源を広く使用できる。
くは液体培地中での振とう培養又は通気攪拌培養により
行なわれる。培地成分としては、放線菌の栄養源として
公知の各種の栄養源を広く使用できる。
例えば炭素源としてはブドウ糖、シェークロース、グリ
セリンマルトース、デキストリン・デンプン、大豆油、
綿実油等を、窒素源としては大豆粉、落花生粉、綿実粉
、酵母、魚粉、コーンスチープリカ一、ペプトン、酵母
工キズ、肉工キズ、オートミール、カゼイン加水分解物
、硝酸ソーダ、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム等
を、無機塩としては硫酸マグネシウム、食塩、燐酸塩、
炭酸カルシウム等を例示できる。また培地には必要に応
じて微量の金属塩やα−アミノアジピン酸、チオ硫酸ナ
トリウム、ソジウムジチオナイト、グリシン、Ｌ一フエ
ニルアラニン、アルギニン、オルニチン等のアミノ酸や
、１．３−ジアミノプロバン、１．３一ジアミノ一２−
ヒドロキシプロバン、スペルミジン等のポリアミン等を
適量添加することができる。更に液体培養に際しては培
地中にシリコーン、植物油、界面活性剤等を消泡剤とし
て添加することができる。培養条件としては培地ＰＨが
約４．０〜８．０好ましくは６．０程度、培養温度が約
１５〜４５℃好ましくは３７℃前後とするのがよく、通
常培養７２〜９６時間で目的とするセフアマイシンＣの
生産量が最大となる。
セリンマルトース、デキストリン・デンプン、大豆油、
綿実油等を、窒素源としては大豆粉、落花生粉、綿実粉
、酵母、魚粉、コーンスチープリカ一、ペプトン、酵母
工キズ、肉工キズ、オートミール、カゼイン加水分解物
、硝酸ソーダ、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム等
を、無機塩としては硫酸マグネシウム、食塩、燐酸塩、
炭酸カルシウム等を例示できる。また培地には必要に応
じて微量の金属塩やα−アミノアジピン酸、チオ硫酸ナ
トリウム、ソジウムジチオナイト、グリシン、Ｌ一フエ
ニルアラニン、アルギニン、オルニチン等のアミノ酸や
、１．３−ジアミノプロバン、１．３一ジアミノ一２−
ヒドロキシプロバン、スペルミジン等のポリアミン等を
適量添加することができる。更に液体培養に際しては培
地中にシリコーン、植物油、界面活性剤等を消泡剤とし
て添加することができる。培養条件としては培地ＰＨが
約４．０〜８．０好ましくは６．０程度、培養温度が約
１５〜４５℃好ましくは３７℃前後とするのがよく、通
常培養７２〜９６時間で目的とするセフアマイシンＣの
生産量が最大となる。
例えば５１容のミニジヤーフアーメンタ一での培養にお
いてセフアマイシンＣの蓄積量は約２１ｆ！Ｆｉ／７！
Ｌｔに及ぶ。該セフアマイシンＣは水によく溶けるため
主として培養液中の液体部分に存在する。培養終了後は
菌体その他の固形部分を遠心分離又は沢過等により除去
し、ｆ液中に存在するセフアマイシンＣを、その物理化
学的性状を利用した通常の操作により容易に単離精製で
きる。
いてセフアマイシンＣの蓄積量は約２１ｆ！Ｆｉ／７！
Ｌｔに及ぶ。該セフアマイシンＣは水によく溶けるため
主として培養液中の液体部分に存在する。培養終了後は
菌体その他の固形部分を遠心分離又は沢過等により除去
し、ｆ液中に存在するセフアマイシンＣを、その物理化
学的性状を利用した通常の操作により容易に単離精製で
きる。
該精製操作としては例えば代表的にはイオン交換樹脂、
シリカゲル、活性炭末等の各種吸着剤を用いる方法を有
効に利用できる。イオン交換樹脂としては各種の酸性陽
イオン、塩基性陰イオン交換樹脂好ましくは強塩基性陰
イオン交換樹脂を使用できる。具体的樹脂としては、例
えば「ダイヤイオンＰＡ４Ｏ６」（三菱化成社製）、「
ダウエツクス５０ｗ×４」（タウケミカル社製）、「ダ
ウエツクス１Ｘ２」（タウケミカル社製）、等を例示で
きる。吸着剤に吸着されたセフアマイシンＣは、例えば
水、食塩水、メタノール一水混液、ｎ−ブタノール−水
混液、アセトン一水混液等を用いて溶出採取される。更
にセフアマイシンＣの精製には、シリカゲルや「アビセ
ル」（旭化成社製）等を用いたクロマトグラフ法をも適
用することができ、上記各種の精製操作を適宜組み合せ
、反復することによつても、単一状態のセフアマイシン
Ｃを収得できる。
シリカゲル、活性炭末等の各種吸着剤を用いる方法を有
効に利用できる。イオン交換樹脂としては各種の酸性陽
イオン、塩基性陰イオン交換樹脂好ましくは強塩基性陰
イオン交換樹脂を使用できる。具体的樹脂としては、例
えば「ダイヤイオンＰＡ４Ｏ６」（三菱化成社製）、「
ダウエツクス５０ｗ×４」（タウケミカル社製）、「ダ
ウエツクス１Ｘ２」（タウケミカル社製）、等を例示で
きる。吸着剤に吸着されたセフアマイシンＣは、例えば
水、食塩水、メタノール一水混液、ｎ−ブタノール−水
混液、アセトン一水混液等を用いて溶出採取される。更
にセフアマイシンＣの精製には、シリカゲルや「アビセ
ル」（旭化成社製）等を用いたクロマトグラフ法をも適
用することができ、上記各種の精製操作を適宜組み合せ
、反復することによつても、単一状態のセフアマイシン
Ｃを収得できる。
かくして本発明により得られるセフアマイシンＣの理化
学的性状を示せば次の通りである。（１）外観白色粉末 （２）比旋光度 〔α〕 ＝２２１℃（Ｃ＝０．４．Ｈ２０）Ｄ（３）溶
解性 水に易溶、エタノールに難溶、 ジメチルスルホキシドにおお溶ける。
学的性状を示せば次の通りである。（１）外観白色粉末 （２）比旋光度 〔α〕 ＝２２１℃（Ｃ＝０．４．Ｈ２０）Ｄ（３）溶
解性 水に易溶、エタノールに難溶、 ジメチルスルホキシドにおお溶ける。
（４）呈色反応
ニンヒドリン及びヨード反応に陽性。
塩化第二鉄反応は陰性。
（５）薄層クロマトグラフイ一（ＴＬＣ）「シリカゲル
ＣＦ２５４」（タルク社製）薄層クロマト板を用い、ｎ
−ブタノール：酢酸：水＝２：１：１（Ｖ／Ｖ）で展開
した結果、Ｒｆ値＝０．２を示した。
ＣＦ２５４」（タルク社製）薄層クロマト板を用い、ｎ
−ブタノール：酢酸：水＝２：１：１（Ｖ／Ｖ）で展開
した結果、Ｒｆ値＝０．２を示した。
（６）紫外線吸収スペクトル（ＵＶ）
第１図に曲線イ（溶媒Ｈ２Ｏ）及び曲線口（溶媒０．１
Ｎ−ＨＣ２）として示す通りである。
Ｎ−ＨＣ２）として示す通りである。
各溶１％媒中における極大吸収位置及びＥ の値を下
記１ＣＩ！Ｌ第３表に示す。
記１ＣＩ！Ｌ第３表に示す。
（７）赤外線吸収スペクトル（ＩＲ）
ＫＢｒ錠としてのＩＲスペクトルを第２図に示す。
（８）プロトン核磁気共鳴スペクトル（ＮＭＲ）重水を
溶媒とし、内部標準試薬としてＤＳＳを用いた６０ＭＨ
ｚｆ）ＮＭＲスペクトルを第３図に示す。
溶媒とし、内部標準試薬としてＤＳＳを用いた６０ＭＨ
ｚｆ）ＮＭＲスペクトルを第３図に示す。
（９）アミノ酸分析
４Ｎ−ＨＣＩで１１０℃、４時間加水分解後の分析の結
果、α−アミノアジピン酸及びグリシンが認められた〇
本発明方法に従い製造されたセフアマイシンＣの各種微
生物に対する抗菌スペクトルを最小発育阻止濃度（ＭＩ
Ｃ）にて下記第４表に示す。
果、α−アミノアジピン酸及びグリシンが認められた〇
本発明方法に従い製造されたセフアマイシンＣの各種微
生物に対する抗菌スペクトルを最小発育阻止濃度（ＭＩ
Ｃ）にて下記第４表に示す。
上記各種の理化学的性質及び抗菌スペクトルは、例えば
特開昭４６−３２８６号記載の公知のセフアマイシンＣ
のそれらとよく一致している。以下本発明を更に詳しく
説明するため実施例を挙げるが、本発明はこれに限定さ
れるものではない。肯例中％は重量基準による。実施例
１ オートミール寒天培地に培養したストレプトミセス エ
スピ一 ０ＦＲ１０２２を、デンプン３％、シェークロ
ース０．５％、大豆粉１％及び乾燥酵母０．３％を含有
するＰＨ７の液体培地に接種し、３７℃で４８時間振と
う培養して種培養液とする。
特開昭４６−３２８６号記載の公知のセフアマイシンＣ
のそれらとよく一致している。以下本発明を更に詳しく
説明するため実施例を挙げるが、本発明はこれに限定さ
れるものではない。肯例中％は重量基準による。実施例
１ オートミール寒天培地に培養したストレプトミセス エ
スピ一 ０ＦＲ１０２２を、デンプン３％、シェークロ
ース０．５％、大豆粉１％及び乾燥酵母０．３％を含有
するＰＨ７の液体培地に接種し、３７℃で４８時間振と
う培養して種培養液とする。
次に３０２容シャー、フアーメンタ一内にデンブン３％
、シェークロース１％、綿実粉２％、乾燥酵母１％、硫
酸マグネシウム０．０５％、リン酸２水素カリウム０．
０２％、リン酸１水素２ナトリウム０．０５％及び消泡
剤としてシリコーン（信越化学社製）０．５％を含む培
地（滅菌後、ＰＨ＝６．０）２０１を入れ、該培地上に
上記種培養液を１％の割合で接種し、３７℃で通気攪拌
培養する。
、シェークロース１％、綿実粉２％、乾燥酵母１％、硫
酸マグネシウム０．０５％、リン酸２水素カリウム０．
０２％、リン酸１水素２ナトリウム０．０５％及び消泡
剤としてシリコーン（信越化学社製）０．５％を含む培
地（滅菌後、ＰＨ＝６．０）２０１を入れ、該培地上に
上記種培養液を１％の割合で接種し、３７℃で通気攪拌
培養する。
通気量は２０１／分空気、ペラ回転数は３００回転／分
とする。９０時間培養後、セフアマイシンＣの生産量は
２Ｔｆ１９／ｄに達した。
とする。９０時間培養後、セフアマイシンＣの生産量は
２Ｔｆ１９／ｄに達した。
向この生産量は以下の測定条件下での高速液体クロマト
グラフイ一による測定で求められたものである。測定条
件 ポンプ （日本ウオータ一？＜ ６０００Ａ型）インジ
土ク，一 （ 〃 Ｕ６Ｋ型）デイテ ２２− （島津製作所 ＳＰＤｌ）カラム （日
本ウオーターズリマイクロポンダパツクＣ−１８、４ｔ
１ｉｄＸ３０ｃ）移動相 ：０．０１Ｍ一酢酸 流速：２ａ／― 検出：ＵＶ２５４πＭＯ．ｌ６ＡＵＦＳ ザ４トート ：０．５ｃ１！Ｌ／７！１ｊｔ 速度゜゜ 上記培養終了後、培養液を遠心分離して菌体を除去した
のち、Ｐ液１８１をＰＨ＝７〜８に調製し、 「ダイヤ
イオンＰＡ４Ｏ６」の３２に吸着させる。
グラフイ一による測定で求められたものである。測定条
件 ポンプ （日本ウオータ一？＜ ６０００Ａ型）インジ
土ク，一 （ 〃 Ｕ６Ｋ型）デイテ ２２− （島津製作所 ＳＰＤｌ）カラム （日
本ウオーターズリマイクロポンダパツクＣ−１８、４ｔ
１ｉｄＸ３０ｃ）移動相 ：０．０１Ｍ一酢酸 流速：２ａ／― 検出：ＵＶ２５４πＭＯ．ｌ６ＡＵＦＳ ザ４トート ：０．５ｃ１！Ｌ／７！１ｊｔ 速度゜゜ 上記培養終了後、培養液を遠心分離して菌体を除去した
のち、Ｐ液１８１をＰＨ＝７〜８に調製し、 「ダイヤ
イオンＰＡ４Ｏ６」の３２に吸着させる。
次いで０．５Ｍ食塩水で溶出し、抗菌活性区分２２を得
る。これを約３０℃で減圧濃縮する。濃縮液２００Ｎを
「シリカゲル０ＤＳ」（ウオーターズ社製）４００ｄに
通し、通過液を再び濃縮し、「シリカゲル０ＤＳ」〔５
．３６ｃｔＬ直径Ｘｌ２Ｏｃ長さ〕カラムを用い、０．
０１Ｍ酢酸で逆相クロマトグラフイ一を行なう。活性画
分を集め、凍結乾燥して、白色粉末状のセフアマイシン
Ｃｌ８ｒを得る。
る。これを約３０℃で減圧濃縮する。濃縮液２００Ｎを
「シリカゲル０ＤＳ」（ウオーターズ社製）４００ｄに
通し、通過液を再び濃縮し、「シリカゲル０ＤＳ」〔５
．３６ｃｔＬ直径Ｘｌ２Ｏｃ長さ〕カラムを用い、０．
０１Ｍ酢酸で逆相クロマトグラフイ一を行なう。活性画
分を集め、凍結乾燥して、白色粉末状のセフアマイシン
Ｃｌ８ｒを得る。
得られた化合物の物理化学的性質を調べた結果は前述し
た通りである。実施例 ２ 実施例１と同様にしてストレプトミセス ェスピ一 ０
ＦＲ１０２２を培養し、培養終了後、培養液を遠心分離
して菌体を除去したのち、ｆ液２０１を「ダイヤイオン
ＰＡ４Ｏ６」（Ｃ２タイプ）の１．５１に吸着させる。
た通りである。実施例 ２ 実施例１と同様にしてストレプトミセス ェスピ一 ０
ＦＲ１０２２を培養し、培養終了後、培養液を遠心分離
して菌体を除去したのち、ｆ液２０１を「ダイヤイオン
ＰＡ４Ｏ６」（Ｃ２タイプ）の１．５１に吸着させる。
次いでカラムポリユームの４倍の脱イオン水で水洗し、
１Ｍ食塩水で溶出し、抗菌活性区分２．５１を得る。こ
れを４Ｎ一塩酸水溶液でＰＨ＝１とし、更に食塩の最終
濃度が４Ｍとなるように食塩を加え、次に「ダイヤイオ
ンＨＰ２Ｏ」（三菱化成社製）２１に吸着させた後水で
溶出させる。溶出後のＰＨが４となる頃から目的のセフ
アマイシンＣが溶出し、そこから１．５１までの溶出液
を集めて凍結乾燥して、白色粉末状のセフアマイシンＣ
２４ｆを得る。得られた化合物の物理化学的性質は、実
施例１で得られた化合物のそれらとよく一致した。
１Ｍ食塩水で溶出し、抗菌活性区分２．５１を得る。こ
れを４Ｎ一塩酸水溶液でＰＨ＝１とし、更に食塩の最終
濃度が４Ｍとなるように食塩を加え、次に「ダイヤイオ
ンＨＰ２Ｏ」（三菱化成社製）２１に吸着させた後水で
溶出させる。溶出後のＰＨが４となる頃から目的のセフ
アマイシンＣが溶出し、そこから１．５１までの溶出液
を集めて凍結乾燥して、白色粉末状のセフアマイシンＣ
２４ｆを得る。得られた化合物の物理化学的性質は、実
施例１で得られた化合物のそれらとよく一致した。
第１図は本発明方法により得られるセフアマイシンＣの
紫外線吸収スベクトル図、第２図は同じ化合物の赤外線
吸収スペクトル図及び第３図は同化合物のプロトン核磁
気共鳴スペクトル図を夫々示すものである。
紫外線吸収スベクトル図、第２図は同じ化合物の赤外線
吸収スペクトル図及び第３図は同化合物のプロトン核磁
気共鳴スペクトル図を夫々示すものである。
Claims (1)
- １ ストレプトミセスエスピーＯＦＲ１０２２を培養し
、培養物からセフアマイシンＣを採取することを特徴と
するセフアマイシンＣの製造法。
Priority Applications (12)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP54075830A JPS594120B2 (ja) | 1979-06-15 | 1979-06-15 | 抗生物質セフアマイシンｃの製造法 |
| NLAANVRAGE8003449,A NL183898C (nl) | 1979-06-15 | 1980-06-13 | Werkwijze voor de bereiding van cefamycine c. |
| GB8019473A GB2052502B (en) | 1979-06-15 | 1980-06-13 | Process for the production of antibiotic cephamycin c |
| CA000353998A CA1150167A (en) | 1979-06-15 | 1980-06-13 | Process for the production of antibiotic cephamycin c |
| SE8004434A SE438164B (sv) | 1979-06-15 | 1980-06-13 | Forfarande for framstellning av cefamycin c genom odling av streptomyces sp. ofr 1022(atcc nr 31666) |
| DE3022250A DE3022250C2 (de) | 1979-06-15 | 1980-06-13 | Herstellung des Antibiotikums Cephamycin C |
| ES492443A ES492443A0 (es) | 1979-06-15 | 1980-06-13 | Un procedimiento para la produccion de cefamicina c. |
| AU59293/80A AU527100B2 (en) | 1979-06-15 | 1980-06-13 | Cephamycin c process |
| IT48978/80A IT1146229B (it) | 1979-06-15 | 1980-06-16 | Procedimento per la produzione del l'antibiotico cefamicina c |
| US06/159,568 US4332891A (en) | 1979-06-15 | 1980-06-16 | Process for the production of antibiotic Cephamycin C |
| CH462880A CH646996A5 (de) | 1979-06-15 | 1980-06-16 | Verfahren zur herstellung des antibiotikums cephamycin c. |
| FR8013330A FR2459289A1 (fr) | 1979-06-15 | 1980-06-16 | Procede de preparation de l'antibiotique cephamycine c |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP54075830A JPS594120B2 (ja) | 1979-06-15 | 1979-06-15 | 抗生物質セフアマイシンｃの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS561894A JPS561894A (en) | 1981-01-10 |
| JPS594120B2 true JPS594120B2 (ja) | 1984-01-27 |
Family
ID=13587489
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP54075830A Expired JPS594120B2 (ja) | 1979-06-15 | 1979-06-15 | 抗生物質セフアマイシンｃの製造法 |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4332891A (ja) |
| JP (1) | JPS594120B2 (ja) |
| AU (1) | AU527100B2 (ja) |
| CA (1) | CA1150167A (ja) |
| CH (1) | CH646996A5 (ja) |
| DE (1) | DE3022250C2 (ja) |
| ES (1) | ES492443A0 (ja) |
| FR (1) | FR2459289A1 (ja) |
| GB (1) | GB2052502B (ja) |
| IT (1) | IT1146229B (ja) |
| NL (1) | NL183898C (ja) |
| SE (1) | SE438164B (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH03126309U (ja) * | 1990-04-04 | 1991-12-19 |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS57194791A (en) * | 1981-05-22 | 1982-11-30 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | Preparation of cephamycin c |
| JPH07121960B2 (ja) * | 1987-05-31 | 1995-12-25 | 株式会社ニチロ | 遊離プロタミンの製造法 |
| DE69211637T2 (de) * | 1991-04-17 | 1997-01-30 | Hoffmann La Roche | Neue dna-gyrase inhibitoren, verfahren zu ihrer herstellung und sie enthaltende pharmazeutische zusammensetzungen |
| US6689763B2 (en) * | 2001-04-25 | 2004-02-10 | Wyeth Holdings Corporation | Antibiotics AA-896 |
| CN101134760B (zh) * | 2006-08-31 | 2010-05-12 | 上海医药工业研究院 | 去除粉末状头霉素c中色素的方法 |
| CN101134759B (zh) * | 2006-08-31 | 2010-06-23 | 上海医药工业研究院 | 头霉素c的纯化方法 |
| CN103421024B (zh) * | 2012-05-21 | 2016-08-03 | 上海医药工业研究院 | 制备头霉素c的方法 |
| CN102964360B (zh) * | 2012-10-22 | 2015-07-22 | 成都雅途生物技术有限公司 | 头霉素c的分离纯化方法 |
| CN104672255A (zh) * | 2014-12-19 | 2015-06-03 | 成都雅途生物技术有限公司 | 头霉素c制备方法 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5318595B2 (ja) * | 1972-08-31 | 1978-06-15 | ||
| JPS54119094A (en) * | 1978-03-07 | 1979-09-14 | Shionogi & Co Ltd | Novel process for preparing antibiotic substance |
-
1979
- 1979-06-15 JP JP54075830A patent/JPS594120B2/ja not_active Expired
-
1980
- 1980-06-13 NL NLAANVRAGE8003449,A patent/NL183898C/xx not_active IP Right Cessation
- 1980-06-13 AU AU59293/80A patent/AU527100B2/en not_active Ceased
- 1980-06-13 SE SE8004434A patent/SE438164B/sv not_active IP Right Cessation
- 1980-06-13 ES ES492443A patent/ES492443A0/es active Granted
- 1980-06-13 GB GB8019473A patent/GB2052502B/en not_active Expired
- 1980-06-13 CA CA000353998A patent/CA1150167A/en not_active Expired
- 1980-06-13 DE DE3022250A patent/DE3022250C2/de not_active Expired
- 1980-06-16 IT IT48978/80A patent/IT1146229B/it active
- 1980-06-16 FR FR8013330A patent/FR2459289A1/fr active Granted
- 1980-06-16 US US06/159,568 patent/US4332891A/en not_active Expired - Lifetime
- 1980-06-16 CH CH462880A patent/CH646996A5/de not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH03126309U (ja) * | 1990-04-04 | 1991-12-19 |
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| Publication number | Publication date |
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| GB2052502B (en) | 1983-04-20 |
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| CH646996A5 (de) | 1984-12-28 |
| SE8004434L (sv) | 1980-12-16 |
| ES492443A0 (es) | 1981-04-01 |
| US4332891A (en) | 1982-06-01 |
| FR2459289A1 (fr) | 1981-01-09 |
| CA1150167A (en) | 1983-07-19 |
| NL183898B (nl) | 1988-09-16 |
| AU527100B2 (en) | 1983-02-17 |
| DE3022250A1 (de) | 1981-01-08 |
| FR2459289B1 (ja) | 1983-10-14 |
| NL183898C (nl) | 1989-02-16 |
| SE438164B (sv) | 1985-04-01 |
| IT8048978A0 (it) | 1980-06-16 |
| GB2052502A (en) | 1981-01-28 |
| DE3022250C2 (de) | 1982-07-08 |
| JPS561894A (en) | 1981-01-10 |
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