JPS5942655B2 - 油含有高純度ホスフアチジルコリンの製造方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は必須脂肪酸含有量の高い油含有高純度ホスファ
チジルコリンの製造方法に関するものである。

ドイツ国特許第１６１７６７９号によれば、酸化アルミ
ニウムヘのホスファチドの吸着とアルコールを用いる抽
出とにより、槌物註レシチンから必須脂肪酸含有量の高
い高純度ホスファチジルコリンを製造するにあたり、油
含有粗ホスファチドを酢酸又はＣ１〜Ｃ２の二塩素化炭
化水素又はこれ等の溶媒の混合液中に溶解し（その場合
溶媒は６容積％までのアルコールを含有するものであつ
て良く）、次いで溶液をかき混ぜながら粗ホスファチド
含有量に対し少くとも５倍以上の量の酸化アルミニウム
を用いて処理し、次いで分離した酸化アルミニウムから
アルコールを用いて高純度のホスファチジルコリンを溶
出することを特徴とする方法は既知である。

ドイツ国特許第１６１７６８０号の方法によれば、油含
有粗ホスファチドの溶液を酸化アルミニウムカラムに装
入し、アルコールを用いて吸着剤から化学的に純粋なホ
スファチジルコリンを溶出する。本発明者は今や驚くべ
きことには、油含有粗ホスファチドを酢酸又は二塩素化
水素で処理することは必要ではなく、油含有粗ホスファ
チドをＣ１〜Ｃ３低級アルコールを用いても抽出するこ
とができ、然る後この抽出物を直接酸化アルミニウムを
用いて処理し、次いで吸着したホスファチドを前述の両
特許方法等によリアルコールを用いて再び酸化アルミニ
ウムから溶出できることを見出した。スイ図ヨ特許第３
６１０８８号と米国特許第２９４５８６９号に依り、静
脈に投与すべき脂肪乳濁液調製用の乳化剤として利用さ
れる大豆ホスファチド分の製造用の精製方法は既知であ
る。

この方法の場合には、予め脱脂した粗ホスファチドをＡ
ｌ２Ｏ３、ＭｇＯ又は活性炭を用いて処理し、これによ
りこの溶液のケファリン含有量を小とし特にさらにイノ
シツト含有ホスファチドを除去する。これ等の物質は猫
の静脈に投与すると血圧降下作用を生ずるものである。
然しこの方法は常に、工業用粗ホスファチドを予め脱脂
しなければならず、次いで漸くアルコール溶液を製造す
るが、このアルコール溶液を全く同様に吸着剤を用いて
処理するもので、単にケフアリンを減少できるに過ぎず
、ケフアリンの一そうの又は完全な除去は達成できない
。

さごに、本出願人の所有に係るドイツ国特許第１０５３
２９９号に依れば、吸着剤として特に酸化アルミニウム
を用い、カラムクロマトグラフイによりコラミン燐酸ジ
グリセリドエステルを含有しない天然コリン燐酸ジグリ
セリドエステルの製造方法が既知である。

この方法においても、予め脱油した粗ホスフアチドのア
ルコール抽出物を用い、この場合この予めの脱油はアセ
トンを用いる反復抽出により達成される。ドイツ国特許
第１６１７６７９号及び同第１６１７６８０号の方法に
依れば、予め脱油してない油含有粗ホスフアチド混合物
を酢酸エステル又は塩素化炭化水素に溶解し、この溶液
を酸化アルミニウムを用いて処理する。

これにより先ず粗ホスフアチドが脱油される一方、全粗
ホスフアチドは吸着剤上に残留する。続いて、酸化アル
ミニウムをアルコールで処理することにより、ホスフア
チジルコリンを選択的に溶出することができる。この方
法によつても高純度の油非含有ホスフアチジルコリンが
得られる。これに対し本発明方法に依れば、分子内の必
須脂肪酸含有量が高く、出発物質ホスフアチド中に存在
していた稙物油を一緒に含有するホスフアチジルコリン
が得られる。

これは現実には、高純度のホスフアチジルコリンの油性
溶液を製造することが屡々必要なことが示されている為
である。このことは特に、高純度のホスフアチジルコリ
ンを医薬領域に利用する為、経口投与用に例えばゼラチ
ンカプセルの形態にしようとする場合当てはまる。ラジ
オアイソトープで標識付けしたホスフアチジルコリンを
用いる最近の吸収研究は、ホスフアチジルコリンを数倍
もの多量の不飽和脂肪酸と共に油含有投与形態で経口投
与すると、吸収を水含有調剤の場合に比べて数倍も高め
得ることを示した。この場合好適な油媒質は、常にホス
フアチドと一緒に組識化している天然稙物油、例えばヒ
マシ油又は大豆油、特に同様な油から製造されるモノグ
リセリド及びジグリセリドの混合物である。

この方法によれば、他の用途例えば化粧品及び栄養食の
領域に多大の効用が有る流動性、即ち注入可能なホスフ
アチジルコリン分を直接得ることができる。今日の技術
状態では、ゼラチンカプセル内への充填に適する流動性
の高純度ホスフアチジルコリンの油性溶液の製造は、ド
イツ国特許第１６１７６７９号の方法等により得られる
油非含有ホスフアチジルコリンを、精製時に得られる天
然稙物油又は他の食用油と再混合し、所要に応じてその
場合モノグリセリド又は遊離脂肪酸を添加することによ
り行なわれている。

然しこのことは、ケフアリンとイノシツトホスフアチド
の除去の為には、先ず未だホスフアチド混合物に付着し
ている油を、Ａｌ２Ｏ３への吸着過程の前又は最中に除
去しなければならないことを意味する。前述の既知方法
並びにドイツ国特許第１０５３２９９号及び同第１６１
７６８０号（原発明）の方法は、若干コストが嵩む上に
他の欠点も有する。

その第一はアセトンを用いて業用粗ホスフアチドを脱油
中に、常に小量のタンチルオキシドが生成することであ
り、このタンチルオキシドは２モルのアセトンの集合に
より化学的に生成し、その毒性と特有の臭気の為小量で
も極めて妨げとなることである。その第２は油と燐脂質
をクロマトグラフイ一法により分別する場合、常に溶媒
混合物が生成し、これは再使用前に分別蒸留を施さなけ
ればならないことである。本発明方法の実施にあたつて
は、約２０〜４０％の油を未だ含有する業用の粗レシチ
ンを先ず５０℃までの温度でメタノール、エタノール又
はプロパノールを用いて抽出し、混合物の冷却時に生成
する二つの相をデカンテーシヨンにより相互から分離す
る。

次いでアルコールに富む上相を酸化アルミニウムとかき
混ぜるか、吸着剤を充填したクロマトグラフイカラムに
通すことにより酸化アルミニウムで処理する。アルコー
ルを用いて溶離することにより、必須脂肪酸含有量が高
くケフアリン及びイノシツトホスフアチドを含有しない
油含有ホスフアチジルコリンが生成する。現在の技術状
態とは反対に、油含有ホスフアチドのアルコール溶液が
さらに前処理しなくても酸化アルミニウムへのクロマト
グラフイ一的分離に適し、その場合溶液の高い油含有量
が酸性ホスフアチドの吸着に僅かしか影響しないという
ことは、全く予想することはできなかつた。

この知見は、アルコール中への油の僅かな溶解度を考え
、酸化アルミニウムとの接触中ホスフアチド相からの油
の分離と、これによる吸着剤の活性中心の遮蔽とが生ず
ることが予想されていたことを考えれば、全く予想され
なかつた驚くべきものである。また、アルコール溶液か
らのホスフアチジルコリンの吸着は充分な規模では生じ
ないと考えられていた。これは既知方法によればこの溶
液を用いて溶離していた為である。本発明方法の実施に
あたつて用いる油含有アルコール性抽出物は、粗ホスフ
アチドをアルコールにより溶媒の沸点までの温度で、特
に２０〜５０℃で、１回又は繰返し処理することにより
得ることができる。

この場合生成する相混合物の分離はは、デカンテーシヨ
ン又は遠心分離器により行なうことができる。アルコー
ル性上相を酸化アルミニウムと一緒にかき混ぜた後、溶
液から分離した吸着剤をエタノールと一緒に数分間かき
混ザ、次いでデカンタ一中で分離する。小量のエタノー
ルを用いる洗浄をもう一回繰返すことができ、次いで好
ましくない同伴脂質を含有する酸化アルミニウムを廃棄
するか加工する。酸性燐脂質の分離の為タロマトグラフ
イカラムを用いる場合、油含有ホスフアチジルコリン濃
厚液は、アルコール特にエチルアルコールを用いるカラ
ムの溶離により得られる。その場合必要ならば、カラム
から流出する溶出液の分別により、ホスフアチジルコリ
ン分の油含有量をさらに減少することができる。酸化ア
ルミニウムと一緒にかき混ぜる方法とカラムクロマトグ
ラフイ一による方法の何れによる場合であつても、本発
明方法により得たアルコール性溶液を、場合によつては
淵過助剤として小量のセリツト（Ｃｅｌｉｔｅ）を用い
て淵過した後、不活性ガスの保護下で減圧中で溶媒を除
去する。これにより油を含有する高純度の天然ホスフア
チジルコリンが生成し、これはケフアリンを含有しない
かケフアリン含有量が著しく少く、必須脂肪酸の含有量
が６６％から７００１）以上にも達する。油含有粗ホス
フアチドの抽出と本発明に係るクロマトグラフイ法の実
施の為には、Ｃ，〜Ｃ３低級アルコール特にエチルアル
コールが適しているが、８５％〜９６％の含有量のアル
コールと小量の水との混合液としても好適であり、９６
％のアルコール濃度は業用として特に有利である。吸着
剤としては塩基性又は中性酸化アルミニウムを用いるこ
とができるが、活性段階が１〜３の塩基性でプロツクマ
ンにより標準化された酸化アルミニウムを用いると特に
好適である。

今や本発明方法は、クロマトグラフイカラムを用いるか
油相をケフアリン及びイノシツトホスフアチドから保持
しながらかき混ぜることによる簡単な酸化アルミニウム
処理により、油含有ホスフアチド分を解放することを可
能とし、且つ極めて簡単な程段階で必須脂肪酸含有量の
高い油含有ホスフアチジルコリン分の製造を可能とする
。

本発明方法の生成物はホスフアチジルコリン含有量が高
い為、必須脂肪酸の含有量が全脂肪酸の７０％を越える
場合、９０％以上のホスフアチド分を有し、既に２ｇ／
日の低処方量の経口投与の場合、動脈硬化、糖尿病又は
過脂血症等の如き多くの症病の治療に有用な新陳代謝活
性を有し、例えば病気により高まつた血液中脂肪値を減
少する。本発明方法により工業用粗ホスフアチドから得
た高純度の油含有ホスフアチジルコリン分は、分析によ
ると次のような代表的組成を有する。この脂肪酸をガス
クロマトグラフイにより分析したところ、次の平均値を
示した。本発明を次に実施例につきさらに詳細に説明す
る。

実施例 １ ａ）７由を合有するヒマシ７由ホスフアチドのエタノー
ル性溶液の製造。

油含有量３５％のヒマシ油１ｋｇを５１のエタノールと
、４『Ｃの窒素雰囲気中で１時間かき混ぜた。

常温で１時間静置後、分液ロードによりエタノールに富
む軽い上相を粘性下相から分離した。ｂ）Ａｌ２Ｏ３を
用いる処理。

ａ）の段階で得た上相１．５１（物質含有量７５ｆ！．
）と３０９のヒマシ油を３００９のＡｌ２Ｏ３と、Ｎ２
保護雰囲気下で常温で２．５時間激しくかき混ぜた。

吸着剤の沈降後、エタノール溶液をデカンテーシヨンに
より分離し、Ａｌ２Ｏ３を毎回１５０ｍ１のエタノール
を用いて２回洗浄した。エタノール溶液と洗浄液とを合
し、Ｆ過助剤として１ｇのセリツトを混入した後淵過し
、溶媒を減圧窒素雰囲気下で４０゜Ｃの浴温度で留去し
た。かくて粘着流動性の油含有ホスフアチジルコリン分
４５９を得た。これは実際上ケフアリンを含有せず、次
の組成を有していた。実施例 ２ 実施例１に記した如くして大豆粗ホスフアチドからエタ
ノール抽出により製造した上相１１（物質含有量５３９
で２７％の大豆油を含有する）を２８０９のＡｌ２Ｏ３
と、不活性雰囲気中で４時間激しくかき混ぜた。

吸着剤が沈降した後、エタノール溶液を分離し、Ａｌ２
Ｏ３を毎回１５０ｍ１のエタノールを用いて２回洗浄し
、エタノール性抽出液を合し、場合に依つてはセリツト
を添加し、次いで淵過して透明とした。溶媒を減圧窒素
の保護雰囲気で蒸発後、柔い可塑性の黄色でケフアリン
を含有しないホスフアチジルコリン３３！ｌを得た。こ
のものは不飽和脂肪酸５０（：！ｔ）以上の部分的グリ
セド又は油の添加により注入可能な形態にすることがで
き、次の組成を有していた。実施例 ３ 油含有量２８％の４．１０１）大豆ホスフアチドのエタ
ノール性溶液１．３１（これは例えば油含有大豆粗ホス
フアチドの２５℃でのエタノール抽出により上相として
得られる）を、Ｎ２保護雰囲気下で、直径３１韮、高さ
４００ｍｍのクロマトグラフイーカラムに通した。

このクロマトグラフイーカラムは２８０９のＡｌ２Ｏ３
をエタノール中に懸濁した懸濁物で充填されていた。溶
液がカラムを通過した後、吸着剤をさらに３５０ｍ１の
アルコールを用いて洗浄した。エタノール抽出液を合し
、減圧不活性ガス雰囲気下で、４『Ｃの浴温度で溶媒を
除去した。かくてケフアリンを全く含有しない高純度の
ホスフアチジルコリン分３５９（６８係）を得た。この
ものの油含有量は２９％、ホスフアチジルコリン含有量
は７００１）であつた。実施例 ４ 大豆粗ホスフアチド４００９を毎回１０００ｍ１の４０
℃メタノールを用いて３０分２回抽出した。

合したメタノール抽出液は常温に冷却後、９０１）の乾
燥物含有量を示し、油含有量は１２１）、ホスフアチジ
ルコリン含有量は３３％であつた。このメタノール性溶
液１１を不活性ガスの保護下で、５００９の酸化アルミ
ニウムの懸濁物を充填したクロマトグラフイカラムに通
した。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ 有機溶媒を用いる工業用油含有粗ホスファチドから
   の抽出と、酸化アルミニウム又は酸化アルミニウムカラ
   ムへの吸着と、アルコールを用いるホスファチジルコリ
   ンの溶出とにより、必須脂肪酸含有量の高い油含有高純
   度ホスファチジルコリンを製造するにあたり、油含有粗
   ホスファチドをＣ＿１〜Ｃ＿３低級アルコールを用いて
   抽出し、かくて得た油含有ホスファチド抽出物を直接酸
   化アルミニウムを用いて処理することを特徴とする必須
   脂肪酸含有量の高い油含有高純度ホスファチジルコリン
   の製造方法。